PRODUK SEL BIAKAN MONOLAYER
SEL KUMULUS SEBAGAI PEMACU PERTUMBUHAN
PADA SAPI BALI
IGNB.TRILAKSANA
BAGIAN REPRODUKSI VETERINER FAKULTAS KEDOKTERAN HEWAN
UNIVERSITAS UDAYANA 2015
PENDAHULUAN
Ovarium sapi bali
Sel Kumulus
Biakan Monolayer
IGF-1 dan Hormon Steroid Kelamin
MATERI DAN METODE
Pembuatan Biakan Monolayer Sel Kumulus
Koleksi ovarium, aspirasi folikel (Ѳ > 2 mm)
Cairan ditampung, sentrifus 1000 g, 10 menit
Supernatan dibuang, endapan ditambahkan
TCM 199 + 10 % FCS 3 ml, sentrifus 10 menit
Supernatan dibuang, buat suspensi dengan
menambahkan TCM 199 + 10 % dengan perbandingan 1 : 1
Encerkan dengan TCM 199 + 10 % FCS
dengan perbandingan 1 : 9
Pembiakan sel kumulus
Ambil masing masing 50 µl suspensi sel
kumulus dan tempatkan pada 5 tempat dalam petridish yang telah berisi masing
masing 50 µl media TCM 199 + 10 % FCS + antioksidan (hipotaurin 4 mM atau 8 mM)
kemudian inkubasi pada suhu 38,5 oC,
tekanan 5 % CO2
Inkubasi dilakukan selama 6 dan 9 hari
Pengamatan dilakukan setiap hari.
Pengukuran kadar IGF-1
Media yang diganti setelah diinkubasi
selama 6 dan 9 hari diukur kadar IGF-1 menggunakan metode IRMA.
Media dengan kadar IGF-1 yang paling tinggi
digunakan sebagai pemacu pertumbuhan
Produk sel sebagai pemacu pertumbuhan
Sapi bali umur 7 – 8 bulan diberi produk
sel secara IM sebanyak 10 ml, 2 kali seminggu selama 6 minggu.
Pengukuran dilakukan sebelum perlakuan,
HASIL
Konsentrasi IGF-1
Sel Inkubasi
(hari)
Konsentrasi Hipotaurin
0 mM 4 mM 8 mM
Kumulus
6 303,33 + 31,41 395,00 + 44,16 370,00 + 26,08
Peningkatan Berat Badan
Kelompok Berat Badan (Kg)
Awal Akhir Selisih
Kontrol 169, 86 + 9,36 177,36 + 9,32 7,5
PEMBAHASAN
Growth Factor : polipeptida mirip hormon dan
protein, bersifat parakrin atau autokrin dalam memacu aktivitas mitogenik pada jaringan yang sedang berproliferasi
IGF-1 berperan dalam perkembangan embrio dan
fetus
Biakan monolayer sel kumulus memproduksi IGF-1
Mc Donalds, 2003 : Cairan folikel mengandung
Produk sel biakan sel kumulus sapi dapat meningkatkan berat badan badan sapi bali
Penelitian pendahuluan produk sel
meningkatkan berat badan ayam dan mempercepat produksi telur
Thongsong et al., 2002 : injeksi IGF-1 pada
tikus bunting menyebabkan peningkatan berat fetus dan plasenta
Osgerby et al., 1999 : IGF-1 berperan pada
KESIMPULAN
Biakan monolayer sel kumulus dapat
memproduksi IGF-1
Produk sel biakan monolayer sel kumulus dapat
digunakan sebagai pemacu pertumbuhan
SARAN
Penelitian lanjut untuk purifikasi IGF-1 dari