BAB III
METODE PENELITIAN
3. 1. Bahan-bahan
Bahan-bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah
- Kalium Na – tatrat (C4H4KNaO6. 4H2O) p.a. (E.merck)
- Natrium Karbonat anhidrat (Na2CO3) p.a. (E.merck)
- Natrium Sulfat anhidrat (Na2SO4) p.a. (E.merck)
- Tembaga Sulfat Pentahidrat (CuSO4.7H2O) p.a. (E.merck)
- Asam Sulfat (H2SO4) p.a. (E.merck) - Dinatrium hidroarsenat heptahidrat (Na2HASO4. 7 H2O) p.a. (E.merck)
- Glukosa anhidrat (C6H12O6)
p.a. (E.merck)
- Natrium sitrat ( C6H5O7Na3 ) p.a. (E.merck) - Bibit Rimbang
- Tunas tanaman terung belanda - Tanah humus
- Atonik (ZPT) 3. 2. Alat-alat - Beker Gelas Pyrex - Tabung reaksi Pyrex - Rak tabung - Labu ukur Pyrex - Gelas Ukur Pyrex - Hot Plate MiltonRoy - Penangas air Fisher - Neraca analitik Metler Toledo - Gelas Erlenmeyer Pyrex
- Spektrofotometer uv-vis Genesys 20 - Inkubator - Mortar - Kain kasa - Tali rafia - Polybag 3. 3. Prosedur Penelitian
3. 3. 1. Persiapan Batang Bawah dan Batang Atas
Dilaksanakan sesuai dengan metode sambung pucuk terung belanda dengan rimbang oleh Tarigan dan Pintubatu (2006).
a. Persiapan Batang Bawah
1) Tiga buah rimbang kering diambil bijinya dan disemaikan pada media persemaian yang mengandung tanah humus.
2) Setelah berumur + 2 bulan bibit dipindahkan ke polybag. (12 bibit yang akan disambung dan 4 cadangan).
3) Setelah bibit mempunyai diameter batang + 0,5 cm bibit disambung dengan pucuk/tunas terung belanda (R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7, R8, R9, R10 R11, R12).
1) Dipersiapkan 3 tanaman terung belanda diatas 1 tahun yang bertunas banyak sebagai pohon induk untuk disambung dan untuk blanko.
2) Setiap pohon (pohon 1,2,3) dipotong tunasnya sebanyak 4 tunas setiap pohon (T1.1, T1.2, T1.3, T1.4, T2.1, T2.2, T2.3, T2.4, T3.1, T3.2, T3.3, T3.4). 3) Sisa tunas pada pohon induk dijadikan sumber buah untuk blanko yang tidak
disambung (Pohon blanko/ TB1,TB2,TB3).
3. 3. 2. Penyambungan Batang Bawah Dengan Batang Atas.
a) Pertumbuhan batang bawah ditunggu sampai diameter batang berukuran + 0,5 cm .
b) Dipotong + 15 cm diatas pangkal batang bawah dan dibuat sayatan berbentuk huruf V dengan panjang + 1 – 1,5 cm (sebanyak 12 batang dan 4 cadangan).
c) Dipilih calon batang atas yang panjangnya tidak melebihi 5 cm dan diameter tunas/pucuk yang sedikit lebih kecil dari batang bawah.
d) Pangkal tunas / pucuk batang atas disayat mengikuti bentuk sayatan yang telah disediakan pada batang bawah (12 batang)
e) Batang atas diselipkan kebatang bawah, dan diikat rapat dengan tali rafia. (S1R1T1.1, S2R2T1.2, S3R3T1.3, S4R4T1.4, S5R5T2.1, S6R6T2.2, S7R7T2.3, S8R8T2.4, S9R9T3.1, S10R10T3.2, S11R11T3.3 , S12R12T3.4).
f) Jumlah daun dikurangi separuh dari jumlah daun yang ada, disisakan daun yang terdekat dengan ujung pucuk, disungkup dengan botol plastik untuk mengurangi penguapan yang berlebihan.
3. 3. 3. Pemelihraan Tanaman Baru Terung Belanda .
a) Tanaman yang baru disambung ditempatkan pada Green House
b) Dilakukan penyiraman dengan air jika kering dan tidak sampai membasahi bekas sambungan.
c) Setelah sambungan berhasil, tanaman disemprot dengan atonik dosis 1 – 2 cc / liter air .
d) Memangkas tunas – tunas yang muncul pada batang bawah serta melakukan pemupukan setelah penyambungan dan setelah terbentuk bakal buah yang pertama.
e) Setelah pertumbuhan sambungan normal, tali pengikat dan plastik di
lepaskan agar perkembangan dan pertumbuhan batang tidak terganggu. f) Persentase keberhasilan penyambungan sudah dapat dihitung dengan
membandingkan jumlah tanaman terung belanda yang berhasil disambung, dan tumbuh dengan jumlah keseluruhan tanaman yang disambung dikalikan 100 %.
3. 3. 4. Panen Buah Tanaman Baru Terung Belanda dan Buah Terung Belanda Blanko.
Pada saat tanaman terung belanda sudah berbuah (sekitar 2 bulan setelah penyambungan ) maka panen dilakukan dari tanaman baru hasil sambung pucuk dan tanaman blanko yang sudah matang dalam jangka waktu yang bersamaan terhitung semenjak terbentuknya bakal buah.
Panen dilakukan dengan mengambil satu buah terung belanda dari setiap pohon hasil penyambungan S1R1T1.1, S2R2T1.2, S3R3T1.3, S4R4T1.4, S5R5T2.1, S6R6T2.2, S7R7T2.3, S8R8T2.4, S9R9T3.1, S10R10T3.2, S11R11T3.3 , S12R12T3.4) dan satu buah dari setiap pohon tanpa penyambungan (TB1,TB2,TB3) kemudian dikelompokan menurut asal pohon induk (TS1, TS2, TS3) dan blanko (TB1,TB2,TB3).
3. 3. 5. Persiapan Analisis Karbohidrat
Analisis karbohidrat pada buah dari tanaman baru terung belanda dan buah terung belanda blanko dilaksanakan dengan mengacu pada analisis bahan makanan menurut Sudarmadji (1984).
a. Pembuatan Pereaksi Nelson Somogyi. - Larutan Nelson A
Dilarutkan 12,5 g natrium karbonat anhidrat 12,5 kalium natrium tatrat, 10 g natrium bikarbonat, dan 100 g natrium sulfat anhidrat dalam 350 ml akuadest. Kemudian diencerkan sampai 500 ml
- Larutan Nelson B
Dilarutkan 7,5 g CuSO4 5 H2O dalam 50 ml akuades dan ditambahkan 1 tetes H2SO4 (pekat).
Pereaksi Nelson dibuat dengan cara mencampurkan 25 ml bagian larutan Nelson A dan 1 ml bagian larutan Nelson B. Pencampuran dilakukan pada setiap hari akan digunakan.
b. Pembuatan Larutan Arsenomolybdat.
1) Dilarutkan 25 g Ammonium molybdat dalam 450 ml akuadest dan ditambahkan 25 ml asam sulfat pekat.
2) Dilarutkan pada tempat yang lain 3 g Na2HASO4 7 H2O dalam 25 ml akuades.
3) Larutan kedua dituangkan kedalam larutan yang pertama, dan disimpan dalam botol berwarna cokelat.
4) Selanjutnya diinkubasi pada suhu 370 C selama 24 jam (hingga larutan berwarna kuning).
c. Pembuatan Pereaksi Benedict.
1). Dicampurkan 17,3 g natrium sitrat dengan 10 g natrium karbonat anhidrat ke dlm 80 ml air, diaduk, dan disaring.
2). Ditambahkan 1,73 g tembaga sulfat yg telah dilarutkan dlm 10 ml air. 3). Volume total dibuat menjadi 100 ml dengan penambahan air.
d. Penentuan Panjang Gelombang Maksimum (650 –850 nm) Larutan Standar. 1) Ditimbang 40 mg Glukosa anhidrat dan dilarutkan dengan akuades sampai
2) Dipipet 25 ml larutan diatas dan diencerkan dengan akuades sampai 100 ml (larutan glukosa 0,05 mg / ml).
3) Dipipet 1 ml larutan glukosa 0,05 mg / ml ke dalam tabung reaksi, ditambahkam 1 ml pereaksi nelson dan ditutup tabung reaksi dengan kapas, segera dipanaskan dalam penangas air mendidih selama 30 menit.
4) Diangkat dan didinginkan sampai suhunya mencapai 25o
5) Setelah dingin ditambahkan 1 ml larutan arsenomolybdat, dikocok sampai semua endapan Cu2O larut sempurna, dan ditambahkan 7 ml akuadest, kemudian dikocok sampai homogen.
6) Diukur serapan panjang gelombang pada 650 –850 nm dengan menggunakan blanko akuades.
e. Persiapan Kurva Kalibrasi Larutan Glukosa Standar.
1) Dibuat larutan glukosa standar 0,02 ; 0,04 ; 0,06 ; 0,08 ; 0,10 ; 0,12 ; 0,14 ; 0,16 ; 0,18 dan 0,2 mg/ml dengan mengencerkan larutan glukosa 0,2 mg/ml sebanyak 2,5 ; 5 ; 7,5 ; 10 ; 12,5 ; 15 ; 17,5 ; 20 ; 22,5 dan 25 ml kedalam labu takar 25 ml.
2) Masing – masing larutan standar dipipet 1 ml dan dimasukan kedalam tabung reaksi.
3) Kedalam masing-masing tabung ditambahkan 1 ml pereaksi Nelson somogyi dan ditutup dengan kapas, segera dipanaskan dalam penangas air mendidih selama 30 menit.
5) Setelah dingin ditambahkan 1 ml larutan arsenomolybdat, dikocok sampai semua endapan larut sempurna, ditambahkan 7 ml akuadest, kemudian dikocok sampai homogen.
6) Diukur serapan panjang gelombang pada 750 nm dengan menggunakan blanko akuades.
7) Hasil pengukuran absorbansi dibuat dalam bentuk kurva kalibrasi.
3. 3. 6. Pembuatan Larutan Sampel Buah Tanaman Baru Terung Belanda dan Blanko Untuk Analisis Karbohidrat.
a) Disediakan 1 buah terung belanda dari setiap pohon hasil penyambungan (S1R1T1.1, S2R2T1.2, S3R3T1.3, S4R4T1.4, S5R5T2.1, S6R6T2.2, S7R7T2.3, S8R8T2.4, S9R9T3.1, S10R10T3.2, S11R11T3.3 , S12R12T3.4) dan masing – masing 4 buah terung belanda blanko dari 3 pohon induk (TB1,TB2,TB3).
b) Masing – masing buah hasil sambung pucuk dikelompokan menurut asal pohon induk TS1 (S1R1T1.1, S2R2T1.2, S3R3T1.3, S4R4T1.4), TS2 (S5R5T2.1, S6R6T2.2, S7R7T2.3, S8R8T2.4), dan TS3 (S9R9T3.1, S10R10T3.2, S11R11T3.3 , S12R12T3.4 ) serta buah terung belanda blanko TB1,TB2 dan TB3.
c) Masing – masing buah (TS1,TS2,TS3,TB1,TB2,TB3) dicuci bersih dan ditimbang untuk mengetahui berat sampel dalam 1 ml filtrat.
d) Buah dipotong kecil, dihaluskan dan disaring dengan kain kasa sehingga diperoleh filtrat TS1, TS2, TS3, TB1,TB2 dan TB3.
e) Masing – masing filtrat diukur volumenya, untuk mengetahui berat sampel dalam 1 ml filtrat.
f) Masing – masing filtrat diambil 1 ml dan diencerkan dengan akuades dalam labu takar 100 ml sehingga diperoleh larutan sampel (1 ml filtrat / 100 ml larutan ).
3. 3. 7. Analisis Kualitatif Larutan Sampel Buah Tanaman Baru Terung Belanda dan Blanko.
a) Dimasukan masing – masing 5 ml larutan sampel (1 ml filtrat / 100 ml larutan ) dan 15 ml pereaksi Benedict ke dalam tabung reaksi, Dicampurkan sampai homogen.
b) Dimasukkan ke dalam penangas air mendidih selama 5 menit.
c) Didinginkan perlahan-lahan, diperhatikan warna dan endapan yang terbentuk.
3. 3. 8. Analisis kuantitatif Larutan Sampel Buah Tanaman Baru Terung Belanda dan Blanko.
a) Masing – masing dipipet 1 ml larutan sampel ( 1 ml filtrat / 100 ml larutan ) dan diencerkan dalam labu takar 25 ml sehingga diperoleh larutan sampel ( 1 ml filtrat / 2500 ml larutan ).
b) Masing – masing dipipet 1 ml larutan sampel ( 1 ml filtrat / 2500 ml larutan ). Diambil 1 ml larutan filtrat, kemudian ditambahkan 1 ml
pereaksi Nelson – Somogyi. Segera dipanaskan dalam penangas air mendidih selama 30 menit.
c) Larutan didinginkan pada suhu 250C dan ditambahkan 1 ml larutan arsenomolybdat, kemudian ditambahkan 7 ml akuades.
d) Setelah itu diukur absorbansi larutan pada panjang gelombang 750 nm dengan menggunakan alat spektrofotometer uv – vis.
e) Dihitung kadar karbohidrat pada sampel sebagai kadar gula reduksi dengan mensubstitusikan absorbansi larutan sampel ke persamaan regresi linier dari kurva kalibrasi larutan glukosa standar dengan rumus sebagai berikut
Y = a + bX
KGR = X . Fp ____________ x 100% S
Dimana :
Y = nilai absorbansi larutan sampel. X = konsentrasi glukosa
a = slope b = intersep
KGR = Kadar Gula Reduksi Fp = Faktor pengenceran
3.4.Bagan Penelitian.
3.4.1. Persiapan Batang Bawah (Rimbang) dan Batang Atas (Terung Belanda).
3 pohon terung belanda yang subur diatas 1 tahun untuk persiapan batang atas 3 buah rimbang yang tua
untuk
persiapan batang bawah
diambil 4 tunas yang muda dan sedikit berkayu setiap pohon (12 tunas untuk disam bung) dan sisanya untuk blanko Disemai, ditunggu ± 2 bulan
sampai diameter batan ± 0,5 cm
bibit tanaman
Diambil 12 bibit untuk disambung
dan 4 bibit untuk cadangan. dan dipindahkan ke polybag
Bibit rimbang untuk disambung
R1 R5 R9 R2 R6 R10 R3 R7 R11 R4 R8 R12
Tunas terung belanda untuk disambung
Tunas Terung belanda tidak disambung Pohon blanko1 pohon blanko 2 Pohon1 pohon2 pohon3
T1.1 T2.1 T3.1 T1.2 T2.2 T3.2 T1.3 T2.3 T3.3
3.4.2. Penyambungan Batang Bawah (Rimbang) dengan Batang Atas (Terung Belanda). Batang berdiameter ± 0,5 cm Dipotong ± 5 cm dari ujung pucuk bentuk V terbalik dengan panjang torehan ± 1-1,5 cm Batang berdiameter ± 0,5 cm Dipotong ± 15 cm dari pangkal bentuk V dengan panjang torehan ± 1-1,5 cm bib sambu it rimbang untuk ng R1 R5 R10 R2 R6 R9 R3 R7 R11
tunas terung belanda untuk disambung T1.1 T2.1 T3.1 T1.2 T2.2 T3.2 T1.3 T2.3 T3.3 T1.4 T2.4 T3.4 bibit rimbang untuk
disambung R1 R5 R10 R2 R6 R9 R3 R7 R11 R4 R8 R12 Terung belanda tidak disambung TB1 TB2 TB3 TB1 TB2 TB3 Tanaman Terung Belanda Blanko S1R1 T1.1 S5R5 T2.1 S9R9T3.1 S2R2 T1. 2 S6R6T2. 2 S10R10T3.2 S3R3 T1. 3 S7R7 T2.3 S11R11T3.3 S4R4 T1. 4 S8R8 T2.4 S12R12 T3.4
3.4.3. Pemeliharaan Tanaman Terung Belanda Sambung Rimbang
Buah Tanaman Baru Terung Belanda Untuk Dianalisis
Buah Terung Belanda Blanko Untuk Dianalisis TB1
TB2 TB3 Disemprot dengan Zpt (Atonik
dosis 1-2cc/liter air)
S3R3 T1. 3 S7R7 T2.3 S11R11 T3.3 S4R4 T1. 4 S8R8 T2.4 S12R12 T3.4 S1R1 T1.1 S5R5 T2.1 S9R9T3.1 S2R2 T1. 2 S6R6T2. 2 S10R10T3.2
Dipupuk dan dibuang tunas yang muncul pada batang bawah Setelah normal tali pengikat dan sungkup plastik dilepas
Ditunggu berbuah ± 2 bulan Dihitung persentase keberhasilan sambungan.
Tanaman Baru Terung Belanda
S1R1 T1.1 S5R5 T2.1 S9R9T3.1 S2R2 T1. 2 S6R6T2. 2 S10R10T3.2 S3R3 T1. 3 S7R7 T2.3 S11R11T3.3 S4R4 T1. 4 S8R8 T2.4 S12R12 T3.4 Tanaman Terung Belanda Blanko TB1 TB2 TB3
3.4.4. Penentuan Panjang Gelombang Maksimum Larutan Glukosa Standar GLUKOSA ANHIDRAT Larutan Glukosa 0,2 mg/ml Larutan Glukosa 0,05 mg/ml Ditimbang 40 mg.
Dilarutkan dengan akuadest sampai 200 ml
Dipipet 25 ml Diencerkan sampai 100 ml
Ditambah 1 ml pereaksi Nelson Ditutup dengan kapas
Dipanaskan dalam penangas air mendidih 30 menit
Diangkat dan didingikan sampai 250C
Ditambah larutan
Arsenomolibdat dikocok sampai endapan larut
Ditambah 7 ml akuades dikocok sampai homogen
Diukur serapan panjang gelombang pada 650-850 nm Dilakukan hal yang sama untuk blanko akuades
3.4.5. Pengukuran Absorbansi Larutan Glukosa Standar
Larutan glukosa standar
0,02 ; 0,04 ; 0,06 ; 0,08 ; 0,10 ; 0,12 ; 0,14 ; 0,16 ; 0,18 dan 0,2 mg/ml
LARUTAN GLUKOSA 0,2 mg/ml
Diencerkan dengan memipet masing – masing
2,5 ; 5 ; 7,5 ; 10 ; 12,5 ; 15 ; 17,5 ; 20 ; 22,5 dan 25 ml larutan kedalam labu takar 25 ml.
Ditambahkan air sampai tanda batas.
Kurva kalibrasi larutan glukosa standar
Masing – masing dipipet 1 ml ke dalam tabung reaksi.
Ditambah 1 ml pereaksi Nelson, dan ditutup dengan kapas.
Dipanaskan dalam penangas air mendidih 30 menit.
Diangkat dan didinginkan pada suhu 25 0 C
Ditambah 1 ml larutan Arseno molibdat, dikocok, ditambah 7 ml akuades dan diaduk sampai homogen
Diukur serapan pada panjang gelombang 750 nm
Data absorbansi dibuat dalam bentuk kurva
3.4.6. Pembuatan Larutan Sampel Buah Tanaman Baru Terung Belanda dan Blanko Untuk Analisis Kualitatif dan Kuantitatif
Filtrat Filtrat Filtrat Filtrat Filtrat Filtrat TS1 TS2 TS3 TB1 TB2 TB3
Dikelompokan menurut asal pohon induk, dicuci, ditimbang, dipotong kecil, dihaluskan dan disaring dengan kain kasa
Masing – masing filtrat diukur volumenya dan diambil 1 ml fitrat untuk diencerkan dalam labu takar 100 ml
LARUTAN SAMPEL TS1, TS2, TS3, TB1, TB2, TB3
1 ml filtrat / 100 ml larutan Buah terung belanda hasil sambung pucuk
untuk dianalisis
Buah terung belanda blanko untuk dianalisis TB1 TB2 TB3 S3R3 T1. 3 S7R7 T2.3 S11R11 T3.3 S4R4 T1. 4 S8R8 T2.4 S12R12 T3.4 S2R2 T1. 2 S6R6T2. 2 S10R10T3.2 S1R1 T1.1 S5R5 T2.1 S9R9T3.1
3.4.7. Analisis Kualitatif Larutan Sampel Buah Tanaman Baru Terung Belanda Dan Blanko Dengan Metode Benedict
5 ml larutan sampel Masing – masing dipipet 5 ml dan dimasukan kedalam tabung reaksi Hasil Ditambah 15 ml pereaksi Benedict Dipanaskan selama 2 menit dalam penangas air mendidih. Didinginkan hingga 25oC. Diperhatikan perubahan pada larutan. LARUTAN SAMPEL TS1, TS2, TS3, TB1, TB2, TB3 1 ml filtrat / 100 ml larutan
3.4.8. Analisis Kuantitatif Larutan Sampel Buah Tanaman Baru Terung Belanda dan Blanko Dengan Metode Nelson Somogyi.
LARUTAN SAMPEL
TS1, TS2, TS3, TB1, TB2, TB3 (1 ml filtrat/100 ml larutan)
LARUTAN SAMPEL
TS1, TS2, TS3, TB1, TB2, TB3 (1 ml filtrat / 2500 ml larutan)
1 ml larutan sample (1 ml filtrat / 2500 ml larutan)
Masing – masing dipipet 1 ml dan diencerkan dalam labu takar 25 ml
Larutan Homogen
Ditambah 1 ml pereaksi Nelson Dipanaskan selama 30 menit diatas penagas air mendidih.
Didinginkan hingga 25 0 C Ditambah 1 ml larutan
Arsenomolybdat dan dikocok Ditambah 7 ml akuades
Diukur absorbansi larutan pada panjang gelombang 750 nm Dilakukan perhitungan kadar gula reduksi
Masing – masing dipipet 1 ml dan dimasukan kedalam tabung reaksi
BAB IV
HASIL DAN PEMBAHASAN
4.1. Hasil Penelitian.
4.1.1. Hasil Analisis Karbohidrat
Analisis karbohidrat pada buah dari tanaman baru terung belanda dan blanko dilaksanakan dengan memperoleh hasil sebagai berikut:
a. Hasil penentuan berat sampel buah tanaman baru terung belanda dan blanko Tabel 4.1. Berat Sampel Buah Terung Belanda Untuk Analisis I, II, III
Analisis ke/no Sampel Berat sample (gram) Volume filtrate (ml) Berat Sampel (mg/ml) I 1 2 3 4 5 6 II 1 2 3 4 5 6 III 1 2 3 4 5 6 TS1 135,2854 74 1828,181 TS2 170,7605 92 1856,092 TS3 128,7376 69 1865,762 TB1 145,8460 81 1800,568 TB2 132,2459 72 1836,749 TB3 151,7648 80 1897,060 TS1 128,5433 70 1836,333 TS2 135,7821 74 1834,893 TS3 134,8453 73 1847,196 TB1 131,4542 72 1825,753 TB2 142,3273 78 1824,709 TB3 133,4226 74 1803,008 TS1 55,5000 30 1850,000 TS2 174,4000 96 1816,667 TS3 109,2000 59 1850,847 TB1 91,9660 49 1876,857 TB2 78,5280 43 1826,233 TB3 81,3390 45 1807,533
b. Hasil analisis kualitatif larutan sampel dengan menggunakan pereaksi Benedict, menunjukan semua larutan sampel dari buah tanaman baru terung belanda dan buah terung belanda blanko (1 ml filtrat / 100 ml larutan) menghasilkan perubahan warna larutan dari biru ke hijau dan dari hijau ke hijau kekuningan serta terbentuk endapan merah bata.
c. Hasil penentuan panjang gelombang maksimum larutan glukosa standar 0,05 mg/ml dengan menggunakan spektrofotometer uv-vis pada 650 nm – 850 nm diperoleh pada 750 nm yang dapat dilihat pada tabel berikut.
Tabel 4.2. Penentuan Panjang Gelombang Maksimum Larutan Glukosa Standar No Panjang gelombang (nm) Absorbansi 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 650 0,415 660 0,441 670 0,477 680 0,515 690 0,553 700 0,584 710 0,621 720 0,652 730 0,677 740 0,692 750 0,696* 760 0,692 770 0,684 780 0,671 790 0,651 800 0,627 810 0,606 820 0,585 830 0,563 840 0,543 850 0,524
Dari table diatas diperoleh kurva panjang gelombang maksimum sebagai berikut: 0,4 0,5 0,6 0,7 650 670 690 710 730 750 770 790 810 830 850 Panjang Gelombang (nm) A b so rb an s i
Gambar 4.1. Kurva Panjang Gelombang Maksimum Larutan Glukosa Standar
d) Hasil Pengukuran Absorbansi Larutan Glukosa Standar pada 750 nm menunjukan bahwa terjadi peningkatan absorbansi larutan glukosa sesuai dengan peningkatan konsentrasi larutan glukosa standar sehingga diperoleh persamaan garis regresi dan kurva kalibrasi berikut :
Tabel 4.3. Absorbansi Larutan Glukosa Standar pada 750 nm No Konsentrasi larutan
glukosa standar (mg/ml)
Absorbansi larutan glukosa standar 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 0,02 0,481 0,04 0,623 0,06 0,768 0,08 0,911 0,10 1,054 0,12 1,199 0,14 1,344 0,16 1,487 0,18 1,632 0,20 1,775
Dari tabel diperoleh persamaan regresi dan kurva kalibrasi dengan perhitungan nilai a (slope) dan b (intersep) serta nilai r (korelasi) absorbansi dengan konsentrasi larutan glukosa standar sebagai berikut:
ccc (∑X ²) (∑Y) - (∑X ) (∑XY) a = __________________________ n (∑X²) - ( ∑X) ² 0,154 (11,274) - (1,1)(1,47762) = _________________________ 10 (0,154) - (1,1)² 1,736196 - 1,62538 = __________________ 0,33 = 0,34
n (∑XY) - (∑X ) (∑Y)
b = ___________________
n (∑X²) - ( ∑X) ²
10(1,47762) - (1,1)(11,274)
= _____________________
10 (0,154) - (1,1)²
14,7762 - 12,401
= _______________
0,33
= 7,19
r = n∑XY - ∑X .∑Y _____________________________________ _____________________________________ √ (n.∑X² - ( ∑X) ² ) x ( n ∑Y² - ( ∑Y) ² ) r = 14,7762 - 12,4014 _________________________________________ __________________________________________ √ (1,54 - 1,21) x (144,1931 - 127,103) . = 2,3748 _______ ________________ √ 0,33 x 17,08998 = 0,999998Dengan nilai koefisien korelasi ( r ) sebesar 0,999998 menunjukan bahwa konsentrasi glukosa berkorelasi positif dengan absorbansi dan korelasinya erat ( r2 = 0,999996 ) sehingga kurva mempunyai keakuratan dalam menentukan konsentrasi glukosa sebesar 99,99 %.
0,4 0,6 0,8 1 1,2 1,4 1,6 1,8 2 0,02 0,06 0,1 0,14 0,18 KONSENTRASI GLUKOSA (mg/ml) Ab s o rb an si Y = 0,34 + 7,19X r = 0,999998
Gambar 4.2. Kurva Kalibrasi Larutan Glukosa Standar
Dari hubungan absorban terhadap konsentrasi larutan glukosa standar pada kurva diatas maka diperoleh persamaan garis regresi linier.
Y = a + bX Y = 0,34 + 7,19X
Dimana: Y = nilai absorban X = konsentrasi glukosa a = slope
b = intersep
f) Hasil Pengukuran Absorbansi Larutan Sampel buah terung belanda yang disambung dan blanko pada analisis I, II, III dapat dilihat pada tabel berikut:
Tabel 4.4. Absorbansi larutan sampel buah terung belanda
Analisis Ke / no Sampel Absorbansi (y) I 1 2 3 4 5 6 II 1 2 3 4 5 6 III 1 2 3 4 5 6 TS1 1,093 TS2 1,169 TS3 1,089 TB1 0,848 TB2 0,927 TB3 0,838 TS1 1,054 TS2 1,164 TS3 0,985 TB1 0,898 TB2 0,938 TB3 0,854 TS1 1,089 TS2 1,172 TS3 1,063 TB1 0,875 TB2 0,912 TB3 0,811 Hasil pengukuran absorbansi larutan sampel digunakan untuk perhitungan kadar gula reduksi (KGR) sebagai berikut: Misalnya pada analisis I. absorbansi larutan sampel P1 = 1,093 maka ( Y ) = 1,093 Berat sampel dalam 1 ml filtrat (S) = 1828,181 mg Faktor pengenceran ( Fp) = 2500
1,093 - 0,34 X = _____________ 7,19 0,7572 = __________ 7,19 = 0,105313 KGR = X . Fp ____________ x 100% S = 0,105313 . 2500 ________________ x 100% 1828,18 26328,23 = _____________ 1828,181 = 14,40133 % = 14,40 %
Dengan perhitungan yang sama kadar gula reduksi pada analisis 1,2 dan 3 secara keseluruhan untuk buah tanaman baru terung belanda dan blanko dapat dilihat pada tabel berikut:
Tabel 4.5 . Kadar Gula Reduksi Buah Dari Tanaman Baru Terung Belanda dan Blanko
Tanaman Baru Terung Belanda Tanaman Blanko No TS1 (%) TS2 (%) TS3 (%) TB1 (%) TB2 (%) TB3 (%) 1 2 3 14,07736 15,92426 13,58247 13,51942 15,61448 12,14110 14,32145 15,52981 13,95843 9,809917 11,11219 9,127659 10,62682 11,39511 9,912348 9,91137 10,89058 9,060365 13,97274 15,68951 13,22733 10,11604 11,13263 9,366791 Rata- Rata KGR 14,29653 (%) 10,20515 (%)
Dari tabel dapat diketahui bahwa penyambungan tanaman terung belanda sebagai batang atas dengan tanaman rimbang sebagai batang bawah dapat meningkatkan kadar gula reduksi pada buah terung belanda hasil penyambungan yakni;
14,29653 -10,20515
_________________ x 100 % = 40,09 % 10,20515
Sehingga dapat dibuat kurva peningkatan kadar gula reduksi sebagai berikut 0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 TB1 TB2 TB3 TS1 TS2 TS3 % KGR ANALISIS 1 ANALISIS 2 ANALISIS 3
Gambar 4.3. Grafik peningkatan kadar gula reduksi pada buah terung belanda ( TB = buah blanko , TS = buah dari tanaman baru hasil sambung pucuk)
4.1.2. Pengamatan Terhadap Tanaman Baru Terung Belanda.
Pengamatan selama 6 bulan terhadap tanaman baru terung belanda setelah penyambungan terung belanda dengan rimbang adalah sebagai berikut :
a) Pada minggu ketiga setelah penyambungan terdapat 9 tanaman yang tumbuh subur dari 12 tanaman yang disambung pucuk.
b) Pada minggu ke 8 setelah penyambungan terjadi pembengkakan pada bekas sambungan, pertumbuhan batang atas lebih cepat daripada batang bawah
sehingga batang atas lebih besar dari batang bawah, batang yang disambung lebih pendek dan cabang lebih banyak dibandingkan batang terung belanda blanko. c) Pada minggu ke 13 setelah penyambungan tanaman mulai berbunga dan
membentuk bakal buah.
d) Pada minggu ke 21, 23 dan 25 setelah penyambungan (setelah 6 bulan), buah terung belanda yang disambung dan blanko dipanen bersamaan. Tekstur buah terung belanda hasil penyambungan lebih keras dari pada blanko. Secara umum tidak terdapat perbedaan bentuk, ukuran dan warna pada daun ataupun buah antara tanaman yang disambung dengan tanaman blanko. Tanaman terung belanda yang disambung lebih banyak menghasilkan buah dari pada tanaman terung belanda blanko yang dapat dilihat pada tabel berikut
Tabel 4.6. Hasil Pengamatan Keberhasilan Sambung Pucuk Antara Terung Belanda Dengan Rimbang
Produksi Buah No / Tanaman Keadaan Tanaman Panen I panen II panen III Rata-rata 1 S1R1T1.1 2 S2R2T1.2 3 S3R3T1.3 4 S4R4T1.4 5 S5R5T2.1 6 S6R6T2.2 7 S7R7T2.3 8 S8R8T2.4 9 S9R9T3.1 10 S10R10T3.2 11 S11R11T3.3 12 S12R12T3.4 13 TB1 14 TB2 15 TB3 Subur 15 17 20
Tidak tumbuh setelah penyambungan (gagal) Tidak tumbuh setelah penyambungan (gagal) subur 22 22 16 subur 35 39 25 subur 27 23 28 subur 23 35 24 subur 25 28 32 subur 18 25 20 subur 18 19 27 subur 25 23 16
Tidak tumbuh setelah penyambungan (gagal) Subur 13 18 10 Subur 19 17 24 Subur 18 10 15 (TS1) 56 (TS2) 86 (TS3) 67 (TB1) 41 (TB2) 70 (TB3) 43 TS 70 TB 51 Jumlah 258 276 257 Rata-rata 22 23 21 66 buah / pohon / 15 hari
Dari tabel di atas dapat di tentukan persentase keberhasilan sambung pucuk antara terung belanda dengan rimbang, yaitu :
Jumlah tanaman yang disambung % keberhasilan = _______________________________ x 100 % Jumlah tanaman yang tumbuh
= 9____ x 100 % 12
= 75 %
Selanjutnya dari perbandingan rata – rata produksi buah terung belanda blanko dengan produksi buah tanaman baru terung belanda yang diamati selama 3 kali panen atau 45 hari yaitu 51 : 70 menunjukan bahwa terjadi peningkatan produksi sebesar 70 - 51 x 100 % = 37,25 % 51 67 86 56 43 70 41 0 20 40 60 80 100 TB1 TB2 TB3 TS1 TS2 TS3 (BUAH ) T. Blanko T. Sambung
Gambar 4.4. Grafik Produksi Buah Tanaman Baru Terung Belanda Dan Blanko
4.2. Pembahasan
4.2.1. Pembahasan hasil analisis karbohidrat.
Dari hasil analisis kualitatif dan kuantitatif terhadap larutan sampel buah dari tanaman baru terung belanda dan blanko menunjukan bahwa :
a. Dengan menggunakan pereaksi benedict yang menunjukan bahwa buah dari tanaman baru terung belanda hasil penyambungan dan buah terung belanda blanko positif mengandung karbohidrat monosakarida yakni glukosa sebagai gula reduksi. Hal ini di buktikan dengan terjadinya perubahan warna larutan dari biru ke hijau dan dari hijau ke hijau kekuningan dan terbentuknya endapan merah bata. Pada pereaksi benedict natrium sitrat dan natrium karbonat membentuk senyawa kompleks berwarna biru dengan tembaga sulfat. Selanjutnya gula mencegah terbentuknya endapan CuCO3 dan mereduksi Cu2+ yang terikat pada senyawa kompleks menjadi Cu+ sehingga warna biru berubah menjadi hijau. Cu+ diendapkan dengan memanaskan dalam penangas air mendidih, sehingga banyaknya endapan dapat menunjukan kadar gula yang dapat mereduksi. Berikut reaksi yang berlangsung:
Na3C6H5O7 + Na2CO3 + 2CuSO4 + 2NaOH 2Na2SO4 + CuCO3 + Na3C6H3O7Cu + 2H2O
Komplek berwarna biru mengandung Cu2+
RCHO + 2Cu2+ + 5OH- RCOO- + Cu2O + 3H2O Gula Pereduksi Endapan Merah Bata
b). Selanjutnya dari tanaman baru terung belanda dan blanko serta analisis kuantitatif hingga diperoleh peningkatan kadar karbohidrat pada buah tanaman
baru terung belanda dapat dijelaskan dengan pendekatan fotosintesis atau biosintesis karbohidrat. Dengan keberhasilan penyambungan berarti proses
fotosintesis tetap berlangsung setelah penyambungan dengan reaksi : cahaya/ khlorofil
6H2O + 6CO2 C6H12O6 + 6O2
Pada dasarnya terjadi pada dua reaksi, yaitu reaksi terang dan reaksi gelap, yang dipengaruhi oleh intensitas cahaya, konsentrasi karbondioksida, suhu, kadar air, kadar fotosintat (hasil fotosintesis) dan tahap pertumbuhan. Faktor intensitas cahaya, konsentrasi karbon dioksida dan suhu tidak terbatas dan tidak berbeda antara terung belanda yang disambung dengan blanko. Setelah penyambungan faktor yang berpengaruh adalah kadar air, kadar fotosintat dan tahap pertumbuhan. Ketiga faktor ini dapat mempengaruhi fungsi fisiologis dan morfologis tanaman. Dimana tanaman memberikan respon terhadap pengaruh yang diberikan. Bentuk dan kedalaman serta penyebaran akar (rimbang) mempengaruhi jumlah air yang dapat diserap oleh akar tanaman, akar yang kurus dan panjang (akar rimbang ) mempunyai luas permukaan yang lebih besar dari akar yang tebal dan pendek ( akar terung belanda) sehingga penyerapan air dapat ditingkatkan untuk melakukan reaksi fotosintesis. Pada tanaman yang tumbuh terjadi translokasi air melalui xylem dari sel ke sel atau dari organ ke organ untuk membentuk karbohidrat. Produk biosintesis yang berupa karbohidrat ini dialirkan melalui phloem untuk proses pembentukan senyawa kimia lainya didalam tanaman, dan sisanya disimpan di akar, batang dan buah. Penyambungan mengakibatkan gangguan secara sementara terhadap proses
translokasi ini sehingga terjadi pembengkakan pada bekas luka sambungan. Selanjutnya akar yang sudah kuat pada batang bawah sambungan untuk sementara tidak menerima produk biosintesis karena sudah melewati masa perkecambahan, sehingga produk biosintesis lebih besar digunakan untuk pembentukan cabang atau buah. Hal inilah yang menyebabkan terjadinya perubahan pada jumlah produksi buah serta kadar gula reduksi pada buah. Meningkatnya kadar gula reduksi sebagai karbohidrat pada buah terung belanda yang disambung menyebabkan buah semakin padat atau semakin keras jika dibandingkan dengan buah terung belanda blanko.
4. 2. 2. Pembahasan Terhadap Tanaman Baru Terung Belanda.
Dari hasil pengamatan selama 6 bulan setelah penyambungan antara terung belanda dan rimbang dengan tingkat keberhasilan 75 % dapat diketahui bahwa : a) Terjadi pertautan antara batang atas dengan batang bawah. Masing-masing sel
parenkim batang atas dan batang bawah mengadakan kontak, saling menyatu dan membaur. Sel parenkim mengadakan diferensiasi membentuk kambium sebagai kelanjutan dari kambium batang atas dan batang bawah yang lama. Setelah dilakukan penyambungan sel-sel batang bawah dan sel-sel batang atas yang dilapisi oleh membran plasma yang terdiri dari senyawa fospat dan protein integral masing-masing tetap melakukan pembelahan sel dan saling berinteraksi dengan bantuan enzim difospatase. Setelah terjadi perpaduan pada akhirnya terbentuk jaringan/pembuluh dari kambium yang baru sehingga proses transportasi zat hara dan air serta produk biosintesis dalam tanaman kembali
berlangsung sebagaimana mestinya Proses pertautan terus berlanjut dimana sel atau jaringan meristem antara daerah potongan terjadi kontak dan saling menjalin secara sempurna. Semakin besar tanaman maka semakin tebal lapisan sel yang berinteraksi sehingga terjadi perpaduan yang kokoh antara batang atas dan batang bawah.
b) Terjadinya pertautan antara batang bawah dan batang atas tersebut pada dasarnya adalah disebabkan oleh kedua tanaman yang disambung masih dalam satu famili, yaitu famili solanaceae. Irisan / sayatan waktu menyambung rata. Pengikatan sambungan tidak terlalu lemah dan tidak terlalu kuat, sehingga tidak terjadi kerusakan jaringan.
c) Dari tanaman yang berhasil disambung (S1R1T1.1, S4R4T1.4, S5R5T2.1, S6R6 T2.2, S7R7T2.3, S8R8T2.4, S9R9T3.1, S10R10T3.2, S11R11T3.3 ), dapat diketahui bahwa tanaman dengan batang atas yang berasal dari pohon induk T1 hanya dua tanaman yang berhasil ( 50 % ), dari pohon induk T2 semua tanaman yang disambung berhasil ( 100 % ), dan dari pohon induk T3 ada tiga tanaman yang berhasil (75%). Hal ini menunjukan bahwa tanaman dengan batang atas dari pohon induk T2 lebih unggul dari T3 dan T1, dan T3 lebih unggul dari T1. Hal ini dapat disebabkan oleh faktor batang atas yang dipotong kasar sehingga mengalami kerusakan Tidak bersih sehingga terkontaminasi oleh penyakit dan batang atas terkena tidak terkena sinar matahari penuh sehingga memungkinkan cabang tidak memiliki mata tunas yang tumbuh sehat dan subur.
d) Terjadinya pembengkakan di bagian sambungan dan pertumbuhan batang terung belanda lebih cepat daripada batang rimbang sehingga batang atas sedikit lebih
besar dari batang bawah terjadi karena Inkompatibilitas (tidak cocok) antara batang atas dan batang bawah yang bersifat lokal, yaitu terjadi pada bagian yang disambung. Inkompatibilitas lain yaitu bersifat translokasi, yaitu dapat berupa ketidakmampuan zat-zat untuk melintasi bagian penyambungan atau adanya aliran zat yang bersifat toksin dari salah satu bagian tanaman terhadap bagian lainnya. sehingga dihasilkan tanaman baru dengan beberapa perubahan.
e) Dari waktu pembungaan yang lebih cepat, cabang lebih banyak, dan batang yang lebih pendek pada tanaman hasil sambung dibandingkan blanko dengan pembungaan lebih lama, cabang lebih sedikit dan tumbuh makin tinggi menunjukan bahwa batang bawah lebih berperan dalam membentuk kalus. Batang bawah dapat mengontrol pertumbuhan dan bentuk tajuk batang atas sehingga batang atas memiliki bentuk batang dan tunas percabangan yang sama dengan batang bawah. Selanjutnya batang bawah (rimbang) juga dapat mengontrol waktu pembungaan terung belanda dimana dengan penyambungan tanaman dapat berbunga ± 6 bulan setelah penyemaian benih rimbang sedangkan perbanyakan dengan biji harus menunggu tanaman berbuah antara 1 sampai 2 tahun.
f) Setelah diperhatikan banyaknya buah yang diproduksi pada panen pertama sampai ketiga (pada minggu ke 21, 23 dan 25 setelah penyambungan) ternyata produksi buah dari tanaman yang disambung lebih banyak dari pada blanko yakni 70 : 51 . Dari tanaman yang disambung ternyata buah yang berasal dari pohon induk T2 lebih banyak dari T1 dan T3, dan T3 lebih banyak dari T1 dengan perbandingan produksi buah T1 : T2 : T3 yaitu 56 : 86 :67. Hal ini
menunjukan bahwa batang bawah ataupun batang atas berpengaruh terhadap produksi buah. Batang bawah menjadikan tanaman yang disambung bercabang banyak sehingga buah yang dihasilkan lebih banyak. Batang atas juga berpengaruh pada penyambungan dimana produksi buah lebih banyak pada tanaman yang berasal dari pohon induk T2 , yang sebelumnya dari tingkat keberhasilan penyambungan juga lebih besar dari pada T1 dan T3. Jika dibandingkan rata- rata produksi buah antara panen I, II dan III yaitu 22 :23 : 21 dalam selisih waktu 15 hari, terjadi sedikit perbedaan, yang berkemungkinan besar disebabkan oleh faktor lingkungan dari tanaman seperti curah hujan yang mempengaruhi kadar air yang diserap oleh akar dalam proses pembentukan buah hanya dalam waktu 15 hari.
g) Bentuk buah ataupun daun yang sama antara tanaman terung belanda yang disambung dengan tanaman terung belanda induk /blanko merupakan suatu kelebihan dari perbanyakan vegetatif buatan secara sambung pucuk atau grafting di bandingkan perbanyakan secara generatif . Selain faktor lingkungan, faktor genetik juga mempengaruhi pertumbuhan dari organ penyimpan produk biosintesis seperti buah, dimana organ tersebut mempunyai batasan genetik dalam hal ukuran maksimumnya walaupun ketersediaan air berlebihan dalam melakukan fotosintesis.
h) Adanya perbedaan pada batang, cabang serta buah yang diproduksi pada setiap pohon dapat juga disebabkan oleh pemberian pupuk dan zat pengatur tumbuh yang tidak merata. Pupuk NPK yang diberikan terutama merupakan sumber pospat dalam pembentukan ATP pada reaksi terang fotosintesis, sehingga hal ini
berpengaruh terhadap karbohidrat yang disintesis pada daun yang selanjutnya tersimpan pada akar ,batang dan buah. Sedangkan zat pengatur tumbuh yang mengandung auxin merangsang pertumbuhan dinding sel setiap jaringan tanaman sehingga mempengaruhi pembentukan akar, daun , batang dan buah.
BAB V
KESIMPULAN DAN SARAN
5.1. Kesimpulan.
1) Kadar karbohidrat pada buah terung belanda dari tanaman baru hasil sambung pucuk dengan rimbang lebih tinggi dari pada blanko yaitu 14,29653 : 10,20515 dengan peningkatan kadar karbohidrat pada tanaman baru terung belanda 40,09 %.
2) Dengan tingkat keberhasilan 75 %, Sambung pucuk terung belanda dengan rimbang menghasilkan tanaman baru terung belanda yang berpengaruh terhadap perubahan sifat terung belanda yaitu:
produksi buah meningkat 37,25 %
Terjadi pembengkakan pada bekas luka sambungan Batang atas lebih besar dari batang bawah
Cabang lebih banyak dari pada pohon blanko. Pohon lebih pendek dari pada pohon blanko Buah lebih keras dari pada buah blanko
Tidak terdapat perubahan pada bentuk daun ataupun buah dibandingkan dengan blanko.
Tidak terdapat perubahan pada warna daun ataupun buah dibandingkan dengan blanko.
5.2. Saran.
Agar pembudidayaan tanaman terung belanda sesuai dengan harapan masyarakat maka setelah melihat hasil penelitian ini disarankan bagi peneliti selanjutnya untuk:
1. Melakukan analisis karbohidrat atau kandungan senyawa lainnya dengan metode yang berbeda untuk memperoleh data lebih lengkap tentang buah terung belanda hasil penyambungan.
2. Melakukan penyambungan dengan metode yang berbeda untuk memaksimalkan produksi buah terung belanda.
3. Melakukan penelitian secara tuntas terhadap tanaman terung belanda sehingga diketahui keunggulan produksinya, baik dari segi kualitas ataupun kuantitas.
