iv Universitas Kristen Maranatha
ABSTRAK
PERBANDINGAN AKTIVITAS ANTIMIKROBA INFUSA
DAUN JAMBU BIJI (Psidium guajava L.) DENGAN DAUN
SALAM (Eugenia polyantha [Wight.] Walp.) TERHADAP
Staphylococcus aureus SECARA IN VITRO
Jennie, 2014. Pembimbing I : Djaja Rusmana, dr., M. Si Pembimbing II : Lusiana Darsono, dr., M.Kes
Latar belakang: Daun jambu biji dan daun salam mengandung zat aktif yang diduga memiliki efek antimikroba terhadap Staphylococcus aureus. Bakteri ini dapat menyebabkan penyakit pioderma pada manusia.
Tujuan: Mengamati dan mengukur zona inhibisi yang terbentuk di sekeliling cakram infusa daun jambu biji dan daun salam, serta membandingkannya terhadap Staphylococcus aureus secara in vitro.
Metode: Penelitian bersifat eksperimental laboratorik sungguhan dengan metode disc diffusion. Konsentrasi infusa yang digunakan adalah 20%, 40%, 60%, 80%, dan 100%.
Hasil: Penelitian menunjukkan diameter zona inhibisi yang terbentuk di sekeliling cakram infusa daun jambu biji adalah 14 mm (100%), 13,3 mm (80%), 13 mm (60%), 10,9 mm (40%), dan 7,9 mm (20%) dan infusa daun salam adalah 15,5 mm (100%), 14,2 mm (80%), 13 mm (60%), 10,9 mm (40%), dan 10,3 mm (20%). Hasil uji t tidak berpasangan menunjukkan tidak ada perbedaan yang bermakna antara zona inhibisi yang dihasilkan oleh infusa daun jambu biji dan daun salam (60%) (p>0,05).
Simpulan: Infusa daun jambu biji dan daun salam memiliki aktivitas antimikroba terhadap Staphylococcus aureus. Efektivitas kadar infusa daun jambu biji optimal sebesar 60% dan infusa daun salam 80%. Infusa daun salam menghambat pertumbuhan Staphylococcus aureus tidak berbeda dengan infusa daun jambu biji.
v Universitas Kristen Maranatha
ABSTRACT
IN VITRO COMPARISON OF ANTIMICROBIAL ACTIVITY OF
GUAVA LEAVES (Psidium guajava L.) INFUSION WITH SALAM
LEAVES (Eugenia polyantha [WIGHT.] WALP.) INFUSION
AGAINST Staphylococcus aureus
Jennie, 2014. Tutor I : Djaja Rusmana, dr., M.Si Tutor II : Lusiana Darsono, dr., M.Kes
Backgound: Guava and salam leaves contain active substances having antimicrobial activity against Staphylococcus aureus. This bacteria can cause pyoderma in human.
Aim: The objective of this research is to observe and analyze the inhibition zone that is formed around infused guava and salam leaves’ disk towards Staphylococcus aureus, and compare both of disk’s inhibition zones.
Method: This research was a true laboratory experimental with disk diffusion method. The concentrations used were 20%, 40%, 60%, 80%, and 100%.
Result: The inhibition zones formed around the infused guava leaves were 14 mm (100%), 13,3 mm (80%), 13 mm (60%), 10,9 mm (40%), 7,9 (20%) and around infused salam leaves were 15,5 mm (100%), 14,2 mm (80%), 13 mm (60%), 10,9 mm (40%), 10,3 mm (20%). The result of independent t test showed that there’s no significant difference between inhibition zone of guava and salam leaves infusion (60%) (p>0,05).
Conclusion: Guava leaves and salam leaves had antimicrobial activity against Staphylococcus aureus. The optimum effectivity concentration of guava leaves infusion was 60% and salam leaves infusion was 80%. Salam leaves had the same antimicrobial activity as guava leaves infusion against Staphylococcus aureus.
vi Universitas Kristen Maranatha DAFTAR ISI
Halaman
LEMBAR PERSETUJUAN ... ii
SURAT PERNYATAAN ... iii
ABSTRAK ... iv
ABSTRACT ... v
KATA PENGANTAR ... vi
DAFTAR ISI ... viii
DAFTAR TABEL ... xi
DAFTAR GAMBAR ... xii
DAFTAR LAMPIRAN ... xiv
BAB I PENDAHULUAN 1.1Latar Belakang ... 1
1.2Identifikasi Masalah ... 2
1.3Maksud dan Tujuan ... 2
1.4Manfaat Penelitian ... 3
1.5Kerangka Pemikiran dan Hipotesis 1.5.1 Kerangka Pemikiran ... 3
1.5.2 Hipotesis Penelitian ... 4
1.6Metode Penelitian ... 4
BAB II TINJAUAN PUSTAKA 2.1 Pioderma ... 5
2.2 Staphylococcus aureus 2.2.1 Klasifikasi ... 7
2.2.2 Morfologi ... 8
2.2.3 Identifikasi ... 9
vii Universitas Kristen Maranatha
2.3.1 Klasifikasi Antimikroba ... 13
2.3.2 Ampicillin ... 13
2.4 Jambu Biji 2.4.1 Taksonomi ... 15
2.4.2 Morfologi Tanaman ... 15
2.4.3 Penyebaran dan Pertumbuhan ... 16
2.4.4 Kandungan Kimia Daun Jambu Biji ... 17
2.4.5 Manfaat Daun Jambu Biji ... 20
2.5 Salam 2.5.1 Taksonomi ... 21
2.5.2 Morfologi Tanaman ... 21
2.5.3 Penyebaran dan Pertumbuhan ... 22
2.5.4 Kandungan Kimia Daun Salam ... 23
2.5.5 Manfaat Daun Salam ... 23
BAB III BAHAN DAN METODE PENELITIAN 3.1 Alat dan Bahan 3.1.1 Alat-alat ... 24
3.1.2 Bahan-bahan ... 25
3.2 Tempat dan Waktu Penelitian ... 25
3.3 Metode Penelitian 3.3.1 Desain Penelitian ... 26
3.3.2 Variabel Penelitian 3.3.2.1 Definisi Konsepsional Variabel ... 26
3.3.2.2 Definisi Operasional Variabel ... 26
3.3.3 Prosedur Kerja 3.3.3.1 Sterilisasi Alat ... 27
3.3.3.2 Persiapan Mikroorganisme Uji 3.3.3.2.1 Identifikasi Mikroorganisme Uji ... 27
viii Universitas Kristen Maranatha
3.3.3.3.1 Pengumpulan Bahan Uji ... 29
3.3.3.3.2 Pembuatan Infusa Daun Jambu Biji dan Daun Salam 29 3.3.3.4 Pengujian Aktivitas Antimikroba Infusa Daun Jambu Biji dan Daun Salam terhadap Staphylococcus aureus……… 30
3.4 Hipotesis statistik ... 30
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN 4.1 Hasil ... 32
4.2 Pembahasan ... 39
4.3 Uji Hipotesis 4.3.1 Hipotesis Penelitian ... 40
4.3.2 Hal yang Mendukung ... 40
4.3.3 Hal yang Tidak Mendukung ... 41
4.3.4 Simpulan ... 41
BAB V SIMPULAN DAN SARAN 5.1 Simpulan ... 42
5.2 Saran ... 42
DAFTAR PUSTAKA ... 43
LAMPIRAN ... 46
ix Universitas Kristen Maranatha DAFTAR TABEL
Tabel Halaman
x Universitas Kristen Maranatha DAFTAR GAMBAR
Gambar Halaman
2.1 Infeksi kulit yang disebabkan oleh Staphylococcus aureus ... 5
2.2 Staphylococcus aureus ... 8
2.3 Pewarnaan Gram Staphylococcus aureus ... 9
2.4 Pertumbuhan Staphylococcus aureus pada LAD ... 9
2.5 Struktur Dinding Bakteri Gram Positif ... 10
2.6 Struktur Ampisilin ... 14
2.8 Daun Jambu Biji ... 16
2.9 Flavon, Flavonol, Flavonon ... 17
2.10 Guaijavarin, Quercetin ... 18
2.11 Tanin Terhidrolisis, Tanin Terkondensasi ... 18
2.12 Saponin Triterpenoid, Saponin Steroid ... 20
2.13 Daun Salam ... 22
L.5.1 Pinset, oase, cotton swab ... 55
L.5.2 Bunsen ... 55
L.5.3 Standard 0,5 McFarland ... 55
L.5.4 Mikropipet dan Tip Mikropipet ... 55
L.5.5 Autoclave ... 56
L.5.6 Inkubator ... 56
L.5.7 Penangas Air dan Cawan Petri ... 56
L.5.8 Panci Infusa ... 56
L.5.9 Daun Jambu biji ... 56
L.5.10 Daun Salam ... 56
L.5.11 Cakram Ampisilin ... 57
L.5.12 Cakram Kosong ... 57
L.6.1 Pewarnaan Gram ... 58
L.6.2 Pembiakan pada LAD ... 58
L.6.3 Pembiakan pada MSA ... 59
xii Universitas Kristen Maranatha
DAFTARLAMPIRAN
Halaman LAMPIRAN I` Besar Sampel ... 46 LAMPIRAN II Uji Statistik Zona Inhibisi yang Dibentuk oleh Infusa
Daun Jambu Biji terhadap Bakteri Staphylococcus aureus ... 47 LAMPRIAN III Uji Statistik Zona Inhibisi yang Dibentuk oleh Infusa Daun Salam terhadap Bakteri Staphylococcus aureus ... 52
LAMPIRAN IV Uji T Tidak Berpasangan pada Zona Inhibisi yang Dibentuk oleh Infusa Daun Jambu Biji dan Daun Salam Terhadap Bakteri
Staphylococcus aureus……... ... 54 LAMPIRAN V Gambar Alat dan Bahan ... 55 LAMPIRAN VI HasilPercobaan ... 58
1
Universitas Kristen Maranatha BAB I
PENDAHULUAN
1.1.Latar Belakang
Pioderma adalah penyakit kulit akibat infeksi bakteri piogenik berupa foliculitis, furunculosis, ecthyma, dan impetigo (Craft, et al, 2008). Survei di Sumatra didapatkan bahwa 1,4% dari 917 orang usia di atas 12 tahun dan 0,2% dari 433 orang usia di bawah 12 tahun menderita pioderma (WHO, 2005). Pada survei lain ditemukan bakteri pioderma primer antara lain: Staphylococcus aureus 65,6%, Streptococcus pyogenes 28,1%, dan 6,4% gabungan keduanya. Sedangkan pada pioderma sekunder didapatkan bakteri penyebab antara lain: Staphylococcus aureus 44,7%, Streptococcus pyogenes 15,8%, 18,4% gabungan keduanya, dan bakteri batang gram negatif 21,1% (Fatani, et al, 2002).
Pemberian antibiotik baik topikal maupun sistemik merupakan penanganan utama terhadap pioderma yang disebabkan oleh Staphylococcus aureus. Namun, resistensi Staphylococcus aureus terhadap antibiotik menjadi masalah yang sulit diatasi hingga saat ini sejak tahun 1980 (Craft, et al, 2008). Refdanita, et al, 2004, melakukan survei di sebuah rumah sakit Jakarta dan ditemukan bahwa Staphylococcus aureus telah resisten (100%) terhadap antibiotik yang diuji antara lain: ampisilin, amoksisilin, amoksiklav, penicillin G, dan sulbenisilin. Oleh karena itu, diperlukan terapi lain sebagai komplemen terhadap antibiotik yang sudah ada dan relatif memiliki sedikit efek samping.
2
Universitas Kristen Maranatha telah meneliti efek antimikroba ekstrak daun jambu biji memiliki Kadar Bunuh Minimum (KBM) terhadap Staphylococcus aureus pada konsentrasi 3%.
Daun salam memiliki kandungan kimia, yaitu minyak atsiri (sitral dan eugenol), tanin, dan flavonoid yang dapat bekerja sebagai antimikroba (Winarto, 2004). Berdasarkan penelitian yang dilakukan oleh Sudewi, 1992, Kadar Bunuh Minimum (KBM) minyak atsiri dari daun salam dapat menghambat pertumbuhan Staphylococcus aureus sekitar 5%.
Penelitian yang sudah dilakukan di atas dalam bentuk ekstrak, sedangkan di masyarakat penggunaan dalam bentuk infusa lebih praktis dan murah. Berdasarkan latar belakang di atas, maka penulis tertarik untuk melakukan penelitian mengenai aktivitas antimikroba dalam bentuk infusa daun jambu biji dan daun salam terhadap Staphylococcus aureus dan membandingkannya.
1.2.Identifikasi Masalah
1. Apakah infusa daun jambu biji (Psidium guajava L.) memiliki aktivitas antimikroba terhadap Staphylococcus aureus secara in vitro.
2. Apakah infusa daun salam (Eugenia polyantha [Wight.] Walp.) memiliki aktivitas antimikroba terhadap Staphylococcus aureus secara in vitro.
3. Apakah infusa daun salam memiliki efek antimikroba yang sama dengan infusa daun jambu biji terhadap pertumbuhan Staphylococcus aureus secara in vitro.
1.3.Maksud dan Tujuan
Maksud penelitian ini adalah untuk mengamati aktivitas antimikroba infusa daun jambu biji dan daun salam terhadap Staphylococcus aureus secara in vitro. Tujuan penelitian ini adalah untuk:
3
Universitas Kristen Maranatha 2. Mengamati dan mengukur zona inhibisi yang terbentuk di sekeliling cakram pada medium yang telah diulas dengan suspensi Staphylococcus aureus, setelah ditetesi infusa daun salam.
3. Membandingkan zona inhibisi antara infusa daun jambu biji dan daun salam terhadap pertumbuhan Staphylococcus aureus secara in vitro.
1.4.Manfaat Penelitian
Manfaat akademis: memperluas wawasan ilmu pengetahuan di bidang mikrobiologi dan farmakologi tentang efek antimikroba infusa daun jambu biji dan daun salam terhadap Staphylococcus aureus serta perbandingannya.
Manfaat praktis: sebagai dasar lebih lanjut untuk dijadikan salah satu terapi komplemen yang mudah dijangkau oleh masyarakat terhadap penyakit yang ditimbulkan oleh Staphylococcus aureus.
1.5.Kerangka pemikiran dan Hipotesis
1.5.1.Kerangka pemikiran
Antimikroba adalah suatu substansi yang dapat membunuh atau menghambat pertumbuhan mikroorganisme dengan cara penghambatan pada sintesis dinding sel, sintesis protein, metabolisme asam folat dan asam nukleat, atau dengan mengganggu fungsi membran sel bakteri (Henry, 2006).
4
Universitas Kristen Maranatha Daun salam (Eugenia polyantha [Wight.] Walp.) memiliki zat aktif berupa minyak atsiri (sitral dan eugenol), tanin, dan flavonoid (Winarto, 2004). Minyak atsiri dapat menghambat pertumbuhan atau mematikan kuman dengan mengganggu proses terbentuknya membran atau dinding sel. Tanin memiliki efek antimikroba melalui reaksi dengan membran sel, inaktivasi enzim, dan destruksi atau inaktivasi fungsi materi bakteri. Sedangkan flavonoid akan membentuk senyawa kompleks terhadap protein ekstraseluler yang akan mengganggu integritas membran sel bakteri (IndoBIC, 2005).
Dengan kerangka pemikiran di atas, diharapkan infusa daun jambu biji dan daun salam mampu menghambat pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus.
1.5.2 Hipotesis Penelitian
1. Infusa daun jambu biji dapat menghambat pertumbuhan Staphylococcus aureus secara in vitro.
2. Infusa daun salam dapat menghambat pertumbuhan Staphylococcus aureus secara in vitro.
3. Infusa daun salam menghambat pertumbuhan Staphylococcus aureus tidak berbeda dengan infusa daun jambu biji secara in vitro.
1.6Metode Penelitian
42
Universitas Kristen Maranatha BAB V
SIMPULAN DAN SARAN
5.1 Simpulan
Berdasarkan penelitian yang telah dilakukan, didapatkan simpulan sebagai berikut:
‒ Infusa daun jambu biji dapat menghambat pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus secara in vitro tapi tidak sebaik ampisilin.
‒ Infusa daun salam dapat menghambat pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus secara in vitro tapi tidak sebaik ampisilin.
‒ Infusa daun salam dapat menghambat pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus sama dengan infusa daun jambu biji secara in vitro. Simpulan tambahan:
‒ Efektivitas kadar infusa daun jambu biji optimal dalam menghambat pertumbuhan Staphylococcus aureus adalah 80%.
‒ Efektivitas kadar infusa daun salam optimal dalam menghambat pertumbuhan Staphylococcus aureus adalah 60%.
5.2 Saran
Berdasarkan penelitian yang telah dilakukan, terdapat beberapa saran sebagai berikut:
‒ Perlu dilakukan percobaan mengenai efek kombinasi antara infusa daun jambu biji dan daun salam dalam menghambat pertumbuhan Staphylococcus aureus.
62
Universitas Kristen Maranatha RIWAYAT HIDUP
Nama : Jennie
Nomor Pokok Mahasiswa : 1110018
Tempat dan Tanggal Lahir : Bandung, 4 Januari 1993
Alamat : Jl. Otista No. 6A, Sukabumi
Email : liang.jennie93@gmail.com
Riwayat Pendidikan
Tahun 1999 : TK Budi Luhur, Sukabumi
Tahun 2005 : SD Mardi Waluya, Sukabumi
Tahun 2008 : SMP Mardi Waluya, Sukabumi
Tahun 2011 : SMA Mardi Yuana, Sukabumi
PERBANDINGAN AKTIVITAS ANTIMIKROBA INFUSA DAUN JAMBU BIJI (Psidium guajava L.) DENGAN DAUN SALAM
(Eugenia polyantha [Wight.] Walp.) TERHADAP Staphylococcus aureus SECARA IN VITRO
Jennie*, Djaja Rusmana**, Lusiana Darsono***
*Fakultas Kedokteran Universitas Kristen Maranatha, Bandung
**Bagian Mikrobiologi Fakultas Kedokteran Universitas Kristen Maranatha, Bandung ***Bagian Farmakologi Fakultas Kedokteran Universitas Kristen Maranatha, Bandung
Fakultas Kedokteran Universitas Kristen Maranatha Jl. Prof. Drg. Suria Sumantri No. 65, Bandung
ABSTRAK
Latar belakang: Daun jambu biji yang mengandung tanin, saponin, flavonoid, dan daun salam yang mengandung tanin, flavonoid, dan minyak atsiri diduga memiliki efek antimikroba terhadap Staphylococcus aureus.
Tujuan: Mengamati dan mengukur zona inhibisi yang terbentuk di sekeliling cakram infusa daun jambu biji dan daun salam, serta membandingkannya terhadap Staphylococcus aureus secara in vitro.
Metode: Penelitian bersifat eksperimental laboratorik sungguhan dengan metode disc diffusion. Konsentrasi infusa yang digunakan adalah 20%, 40%, 60%, 80%, dan 100%.
Hasil: Penelitian menunjukkan diameter zona inhibisi yang terbentuk di sekeliling cakram infusa daun jambu biji adalah 14 mm (100%), 13,3 mm (80%), 13 mm (60%), 10,9 mm (40%), dan 7,9 mm (20%) dan infusa daun salam adalah 15,5 mm (100%), 14,2 mm (80%), 13 mm (60%), 10,9 mm (40%), dan 10,3 mm (20%). Hasil uji t tidak berpasangan menunjukkan tidak ada perbedaan yang bermakna antara zona inhibisi yang dihasilkan oleh infusa daun jambu biji dan daun salam (60%) (p>0,05).
Simpulan: Infusa daun jambu biji dan daun salam memiliki aktivitas antimikroba terhadap Staphylococcus aureus. Efektivitas kadar infusa daun jambu biji optimal pada penelitian sebesar 60% dan infusa daun salam 80%. Infusa daun salam menghambat pertumbuhan Staphylococcus aureus tidak berbeda dengan infusa daun jambu biji.
Kata Kunci: Staphylococcus aureus, daun jambu biji, daun salam
ABSTRACT
Backgound: Guava leaves containing tannins, saponins, flavonoids, and salam leaves containing tannins, flavonoids, and essential oils thought to have antimicrobial activity against Staphylococcus aureus.
Aim: The objective of this research is to observe and analyze the inhibition zone that is formed around infused guava and salam leaves’ disk towards Staphylococcus aureus, and compare both of disk’s inhibition zones.
Method: This research was a true laboratory experimental with disk diffusion method. The concentrations used were 20%, 40%, 60%, 80%, and 100%.
Result: The inhibition zones formed around the infused guava leaves were 14 mm (100%), 13,3 mm (80%), 13 mm (60%), 10,9 mm (40%), 7,9 (20%) and around infused salam leaves were 15,5 mm (100%), 14,2 mm (80%), 13 mm (60%), 10,9 mm (40%), 10,3 mm (20%). The result of independent t test showed that there’s no significant difference between inhibition zone of guava and salam leaves infusion (60%) (p>0,05).
Conclusion: Guava leaves and salam leaves had antimicrobial activity against Staphylococcus aureus. The optimum effectivity concentration of guava leaves infusion was 60% and salam leaves infusion was 80%. Salam leaves had the same antimicrobial activity as guava leaves infusion against Staphylococcus aureus.
PENDAHULUAN
Pioderma adalah penyakit kulit akibat
infeksi bakteri piogenik berupa foliculitis,
furunculosis, ecthyma, dan impetigo 1. Survei
di Sumatra didapatkan bahwa 1,4% dari 917
orang usia di atas 12 tahun dan 0,2% dari 433
orang usia di bawah 12 tahun menderita
pioderma 2. Pada survei lain ditemukan bakteri
pioderma primer antara lain: Staphylococcus
aureus 65,6%, Streptococcus pyogenes 28,1%,
dan 6,4% gabungan keduanya. Sedangkan
mikroba penyebab pioderma sekunder antara
lain: Staphylococcus aureus 44,7%,
Streptococcus pyogenes 15,8%, 18,4%
gabungan keduanya, dan bakteri batang gram
negatif 21,1% 3.
Pemberian antibiotik baik topikal maupun
sistemik merupakan terapi utama terhadap
pioderma yang disebabkan oleh
Staphylococcus aureus. Namun, resistensi
Staphylococcus aureus terhadap antibiotik
menjadi masalah yang sulit diatasi hingga saat
ini sejak tahun 1980 1. Survei di sebuah rumah
sakit Jakarta dan ditemukan bahwa
Staphylococcus aureus telah resisten (100%)
terhadap antibiotik yang diuji antara lain:
ampisilin, amoksisilin, amoksiklav, penicillin
G, dan sulbenisilin 4. Oleh karena itu,
diperlukan terapi lain sebagai komplemen
terhadap antibiotik yang sudah ada dan relatif
memiliki sedikit efek samping.
Daun jambu biji diduga memiliki zat aktif
yang berpotensi sebagai antimikroba, antara
lain flavonoid, tanin dan saponin. Flavonoid
membentuk senyawa kompleks terhadap
protein ekstraseluler dan terlarut sehingga
mengganggu intregritas membran sel bakteri
diikuti dengan keluarnya senyawa intraseluler
5
. Tanin bekerja dengan menginaktivasi enzim,
salah satunya yaitu DNA topoisomerase 6.
Tanin juga bereaksi dengan protein untuk
membentuk ikatan hidrogen yang akan
menyebabkan protein terdenaturasi sehingga
membran sel bakteri rusak 7. Saponin bekerja
dengan meningkatkan permeabilitas membran
sel bakteri dengan menyisipkan aglikon pada
membran lipid-bilayer sehingga menyebabkan
terbentuknya lubang pada membran sel 8.
Daun salam memiliki kandungan kimia,
yaitu minyak atsiri (sitral dan eugenol), tanin,
dan flavonoid yang dapat bekerja sebagai
antimikroba 9. Daya antibakteri minyak atsiri
disebabkan karena adanya senyawa fenol dan
turunannya yang dapat mengubah sifat protein
sel bakteri 10.
Penggunaan di masyarakat dalam bentuk
infusa terbilang lebih praktis dan murah.
Berdasarkan latar belakang di atas, maka
penulis tertarik untuk melakukan penelitian
mengenai aktivitas antimikroba dalam bentuk
infusa daun jambu biji dan daun salam
terhadap Staphylococcus aureus dan
membandingkannya.
METODE PENELITIAN
Penelitian ini dilakukan dengan
menggunakan rancangan penelitian
eksperimental murni laboratorik secara in vitro
dengan menggunakan Staphylococcus aureus.
Pembuatan infusa daun jambu biji dan daun
salam dilakukan di Laboratorium Farmakologi,
Fakultas Kedokteran Universitas Kristen
Maranatha Bandung. Sedangkan penelitian
dan daun salam dilakukan di Laboratorium
Mikrobiologi, Fakultas Kedokteran Universitas
Kristen Maranatha Bandung, pada bulan
Januari 2014 sampai dengan November 2014.
Potongan daun jambu biji dan daun salam
masing-masing ditimbang sampai 55 gram,
ditambahkan aquades 550 ml (10%) dan
dimasukkan ke dalam panci infusa. Harus
dipastikan simplisisa kering terendam
sepenuhnya. Kemudian dipanaskan di atas
penangas air selama 15 menit, terhitung mulai
suhu 900C sambil sekali-kali diaduk.
Konsentrasi 20% dibuat dengan mengambil 20
mL dari larutan infusa tersebut dan diuapkan
hingga. Konsentrasi 40% dibuat dengan
mengambil 40 mL dari larutan infusa tersebut
dan diuapkan hingga 10 mL dan seterusnya
dengan cara yang sama hingga didapatkan
konsentrasi 100%. Larutan disaring
menggunakan kain flanel dan disimpan dalam
beaker glass. Infusa daun salam yang
mengandung minyak atsiri harus diserkai
setelah dingin 11.
Sebelum melakukan percobaan, alat-alat
yang digunakan disterilisasi dengan
menggunakan autoclave. Mikroba uji yang
digunakan pada penelitian ini adalah
Staphylococcus aureus. Staphylococcus aureus
diidentifikasi dengan pewarnaan gram,
pembiakan pada Lempeng Agar Darah (LAD)
dan Mannitol Salt Agar (MSA).
Pada pengujian aktivitas antimikroba,
suspensi Staphylococcus aureus yang telah
distandarisasi dengan 0.5 McFarland
diinokulasikan pada permukaan medium
Mueller-Hinton Agar (MHA) diinokulasikan
dengan cara spread plate menggunakan cotton
swab yang telah direndam di dalam. Cakram
yang sudah diteteskan infusa daun jambu biji
dan daun salam masing-masing sebanyak 15 l
dengan konsentrasi 20%, 40%, 60%, 80% dan
100%, cakram antibiotik (ampisilin) sebagai
kontrol positif dan cakram kosong sebagai
kontrol negatif diletakkan di permukaan MHA
kemudian diinkubasi selama 24 jam pada suhu
350C. Setelah diinkubasi selama 24 jam,
dilakukan pengukuran diameter zona inhibisi
dengan menggunakan jangka sorong dalam
satuan millimeter (mm). Diameter yang diukur
adalah diameter horizontal dan vertikal,
kemudian diambil rata-ratanya 12.
HASIL DAN PEMBAHASAN
Identifikasi mikroba uji dengan
menggunakan pewarnaan gram ditemukan
bakteri kokus gram positif tersusun seperti
anggur. Pengamatan secara makroskopis
dengan menggunakan medium LAD
didapatkan koloni konveks berwarna kuning
keemasan dengan permukaan seperti porselen
dan reaksi beta hemolisis di sekitar koloni dan
pada medium MSA mikroba uji
memfermentasikan manitol dengan timbulnya
zona kuning disekitar koloni. Hasil identifikasi
di atas menunjukkan bahwa mikroba uji adalah
Tabel 1 Hasil Pengamatan Zona Inhibisi yang Dibentuk oleh Infusa Daun Jambu Biji terhadap
Staphylococcus aureus
konsentrasi Percobaan rata-rata (mm) A (mm) B (mm) C (mm) D (mm)
dapat menghambat pertumbuhan
Staphylococcus aureus tetapi tidak sebaik
ampisilin. Hasil uji aktivitas antimikroba
infusa daun salam dianalisa menggunakan
statistik. Uji normalitas menunjukkan data
normal (p>0,05), sedangkan uji homogenitas
menunjukkan bahwa sebaran data tidak
homogen
(p<0,05) sehingga analisis statistik
menggunakan uji Kruskal-Wallis.
Pada hasil uji Kruskal-Wallis diperoleh
p=0.002, hal ini menunjukkan adanya
perbedaan rerata zona inhibisi yang sangat
bermakna (p<0,01) antara kelompok
perlakuan. Untuk mengetahui kelompok mana
yang berbeda, dilakukan uji Mann Whitney. ** = Sangat Bermakna (p<0,01)
Pada hasil uji Mann Whitney daun jambu
biji, didapatkan efektivitas kadar optimal
infusa daun jambu biji pada penelitian sebesar
60%.
Romasi 13 melakukan penelitian ekstrak
etanol daun jambu biji terhadap
Staphylococcus aureus didapatkan zona
inhibisi sebesar 7,99 mm (10%), 8,58 mm
(20%), 9,52 mm (30%), 11,81 mm (40%), dan
12,95 mm (50%). Sedangkan pada penelitian
oleh Biswas 14 menunjukkan diameter zona
inhibisi yang terbentuk oleh ekstrak etanol
daun jambu biji 20% terhadap Staphylococcus
aureus sebesar 11 ± 0,52 mm. Hasil penelitian
diatas menunjukkan bahwa zona inhibisi yang
terbentuk ekstrak etanol daun jambu biji masih
lebih besar dibandingkan infusa daun jambu
ekstraksi dengan etanol, zat aktif pada daun
jambu biji lebih banyak tersari sehingga
aktivitas antimikroba yang dihasilkan lebih
baik dibandingkan dengan teknik infusa.
Tabel 3 Hasil Pengamatan Zona Inhibisi yang Dibentuk oleh Infusa Daun Salam terhadap
Staphylococcus aureus
Konsentrasi Percobaan rata-rata (mm) A (mm) B (mm) C (mm) D (mm)
semua konsentrasi infusa daun salam dapat
menghambat pertumbuhan Staphylococcus
aureus tetapi tidak sebaik ampisilin. Hasil uji
aktivitas antimikroba infusa daun salam
dianalisa menggunakan statistik. Uji
normalitas dan uji homogenitas menunjukkan
data yang digunakan normal dan homogen
sehingga analisis statistik menggunakan
ANAVA satu arah.
Pada hasil uji ANAVA diperoleh F hitung
sebesar 174.241 dan p sebesar 0.000, hal ini
menunjukkan adanya perubahan rerata zona
inhibisi yang sangat bermakna antara
kelompok perlakuan (p<0.01). Untuk
mengetahui kelompok mana yang berbeda
dilakukan uji Post hoc LSD.
Tabel 4 Uji Post Hoc LSD pada Zona Inhibisi yang Dibentuk oleh Infusa Daun Salam terhadap
Staphylococcus aureus ** = Sangat Bermakna (p<0,01)
Pada hasil uji Post Hoc LSD daun salam,
didapatkan efektivitas kadar optimal infusa
daun salam pada penelitian sebesar 80%.
Sudirman 15 pada hasil penelitiannya
menunjukkan bahwa diameter zona inhibisi
yang terbentuk terhadap Staphylococcus
aureus di sekitar cakram ekstrak etanol daun
salam, yaitu 12,5% (7,29mm), 25% (7,7mm),
50% (8,75 mm), 75% (9,34mm), dan 100%
inhibisi yang terbentuk pada infusa daun salam
lebih besar dibandingkan dengan ekstrak daun
salam. Hal ini mungkin disebabkan karena zat
aktif yang tersari lebih banyak pada infusa.
Untuk membandingkan aktivitas
antimikroba infusa daun jambu biji dan daun
salam terhadap Staphylococcus aureus
dianalisa dengan menggunakan statistik. Uji
normalitas dan homogenitas menunjukkan data
yang digunakan normal dan homogen sehingga
analisis statistik menggunakan uji t tidak
berpasangan. Pada uji t tidak berpasangan,
didapatkan nilai t hitung 0.119, nilai p 0.909,
nilai rerata 0.0750, dan standar deviasi sebesar
0.6296. Hasil uji t tidak berpasangan
menunjukkan hasil tidak berbeda bermakna
(p>0.05) yang berarti tidak ada perbedaan efek
antimikroba antara infusa daun jambu biji
dengan daun salam.
Dapat dilihat bahwa dengan meningkatnya
konsentrasi infusa, meningkat pula diameter
zona inhibisinya. Hal ini disebabkan karena
kadar zat aktif yang tersari lebih banyak
seiring dengan peningkatan konsentrasi
sehingga kemampuan dalam menghambat
pertumbuhan bakteri semakin besar.
SIMPULAN
Berdasarkan penelitian yang telah
dilakukan, didapatkan simpulan sebagai
berikut:
1.Infusa daun jambu biji dapat menghambat
pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus
secara in vitro tapi tidak sebaik ampisilin.
2.Infusa daun salam dapat menghambat
pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus
secara in vitro tapi tidak sebaik ampisilin.
3.Infusa daun salam dapat menghambat
pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus
tidak berbeda bermakna dengan infusa daun
jambu biji secara in vitro.
Simpulan tambahan:
1.Efektivitas kadar infusa daun jambu biji
optimal dalam menghambat pertumbuhan
Staphylococcus aureus adalah 80%.
2.Efektivitas kadar infusa daun salam optimal
dalam menghambat pertumbuhan
Staphylococcus aureus adalah 60%.
SARAN
1.Perlu dilakukan percobaan mengenai efek
kombinasi antara infusa daun jambu biji dan
daun salam dalam menghambat pertumbuhan
Staphylococcus aureus.
2.Infusa daun jambu biji dan daun salam dapat
digunakan sebagai terapi tambahan atau
pencegahan untuk mengobati penyakit yang
disebabkan oleh Staphylococcus aureus.
DAFTAR PUSTAKA
1. Craft, N., et al. Fitzpatrick's Dermatology in General Medicine. s.l. : McGraw-Hill; 2008. 2. WHO. Epidemiology and Management of Common Skin Diseases in Children in Developing Countries. Geneva : World Health Organization; 2005.
3. Fatani, M, et al. Pyoderma Among Hajj Pilgrims in Makah. Saudi Med J; 2002.
4. Refdanita, et al. Pola Kepekaan Kuman terhadap Antibiotik di Ruang Intensif Rumah Sakit Fatmawati Jakarta Tahun 2001-2002. Makara Kesehatan; 1999 vol 8(41-48) 5. IndoBIC. Senyawa Antimikroba Dari Tanaman.
2005. Dasar. Jakarta: PT. Gelora Aksara Pratama; 1993.
9. Winarto, W.P. Memanfaatkan Bumbu Dapur untuk Mengatasi Aneka Penyakit. Jakarta : Agromedia Pustaka; 2004.
10. Bone, K., & Mills, S.. Principles and Practice of Phytotherapy: Modern Herbal Medicine. Elsevier Health Science; 2013.
11. Kementrian Kesehatan RI, D.J. Farmakope Indonesia. Jakarta : Departemen Kesehatan; 1995.
12. Forbes, et al. Bailey & Scott's Diagnostic Microbiology. USA : Mosby, Inc.;2002. 13. Romasi, F. R. , et al. Study of Antimicrobial
Activity From Guava Leaf Extract Towards Pathogenic Microbes. Jakarta: Universitas Pelita Harapan; 2011
14. Biswas, et al. Antimicrobial Activities of Leaf Extracts of Guava on Two Gram-Negative and Gram-Positive Bacteria. USA: Fort Valley State University; 2013.
43
Universitas Kristen Maranatha DAFTAR PUSTAKA
Arima, & Danno. (2002). Isolation of Antimicrobal Compunds from Guava (Psidium guajava L.) and Their Structural Elucidation. Bioscience, Biothecnology and Biochemistry.
Biswas, et al (2013). Antimicrobial Activities of Leaf Extracts of Guava on Two Gram-Negative and Gram-Positive Bacteria. USA: Fort Valley State University.
Bone, K., & Mills, S. (2013). Principles and Practice of Phytotherapy: Modern Herbal Medicine. Elsevier Health Science.
Cappuccino, J., & Sherman, N. (1998). Microbiology: A Laboratory Manual (Vol. 5th edition). New York: Benjamin/Cummings Science Publishing.
Corwin, E. J. (2000). Buku Saku Patofisiologi Corwin. Jakarta: EGC.
Cowan, M. (1999). Clinical Microbiology Reviews. Plant Products as Antimicrobal Agents , 22.
Craft, N., Lee, K., Zipoli, M. T., Weinberg, A. N., Swartz, M., & Johnson, R. (2008). Fitzpatrick's Dermatology in General Medicine. McGraw-Hill. Dalimartha, S. (2000). Atlas Tumbuhan Obat Indonesia. Jakarta: Trubus
Agriwidya.
Depkes RI (1995). Farmakope Indonesia. Jakarta: Departemen Kesehatan.
Depkes RI (2001). Inventaris Tanaman Obat Indonesia. Badan Penelitian dan Pengembangan Kesehatan.
Djuanda, A. (2011). Ilmu Penyakit Kulit dan Kelamin. Jakarta: Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia.
Dypatra, R. (2010). Enzimologi. Retrieved 11 26, 2014, from Institut Teknologi Bandung: old.analytical.chem.itb.ac.id
Edberg, S., & Berger, S. (1983). Antibiotika dan Infeksi. Jakarta: EGC.
44
Universitas Kristen Maranatha Forbes, B.A., Sahm, & Weissfeld, D. a. (2002). Bailey & Scott's Diagnostic Microbiology (Vol. 11th edition). USA, United States of America: Mosby, Inc.
Guenther, E. (1990). Pengantar Teknologi Minyak Atsiri. Jakarta: UI-Press. Harborne, J. (1996). Metode Fitokimia: Penuntun Cara Modern Menganalisa
Tumbuhan. Bandung: ITB.
Henry, F. (2006). Goodman and Gillman The Pharmacological Basis of Therapeutics. USA: McGraw-Hill.
IndoBIC. (2005). Senyawa Antimikroba Dari Tanaman.
http://indobic.or.Id/beritadetail.php?idberita=124
Jork, H. Funk, W, & Fischer, W. Wimmer, H. (1994). Thin Layer Chromatography: Reagents and Detection Methods, Volume 1b. VCH Weinheim.
Katzung, B. (2007). Basic and Clinical Pharmacology. McGraw-Hill. Kayser, F. (2005). Medical Microbiology. Thieme.
Kenneth, J. (2004). Medical Microbiology: An Introduction to Infectious Diseases. USA: McGraw-Hill.
Lowy, F. (2008). Harrison's Principles of Internal Medicine. McGraw-Hill. Lucia, E. (2006). Farmakologi: Pendekatan Teoritis dan Praktis. Surabaya:
Fakultas Farmasi Universitas Surabaya.
Markham, K.R. (1988). Cara Mengidentifikasi Flavonoida. Bandung: ITB. Onawunmi, GO (1989). Evaluation of the Antimicrobial Activity of Citral, Lett. Appl. Microbial, Vol. 9
Refdanita, et al (1999). Pola Kepekaan Kuman terhadap Antibiotik di Ruang Intensif Rumah Sakit Fatmawati Jakarta Tahun 2001-2002. Makara Kesehatan, vol 8, hlm 41-48.
Robinson, T. (1995). Kandungan Organik Tumbuhan Tinggi. Bandung: ITB. Romasi, F. R. ,et al (2011). Study of Antimicrobial Activity From Guava Leaf
Extract Towards Pathogenic Microbes. Jakarta: Universitas Pelita Harapan. Seeman, P., Cheng, D., & Iles, G. (1973). Structure of membrane holes in osmotic
45
Universitas Kristen Maranatha Sudewi, R. (1992). Isolasi dan Uji Antibakteri Minyak Atsiri Daun Salam. FF
UGM.
Sudirman, T. A. (2014). Uji Efektivitas Ekstrak Daun Salam Terhadap Pertumbuhan Staphylococcus aureus secara in vitro. Makassar: Universitas Hasanuddin.
Sunarmo, Soemantri, B., & Ekoputro, J. W. (2011). Efek Antibakteri Ekstrak Daun Jambu Biji (Psidium guajava L.) terhadap Staphylococcus aureus secara in vitro.
Suparjo (2008). Saponin, Peran dan Pengaruhnya Bagi Ternak dan Manusia. Jambi: Fakultas Peternakan Universitas Jambi.
Todar, K. (2012). Staphylococcus aureus and Staphylococcal Disease. http//:www.textbookofbacteriology.net/staph.html
Volk, W. A., & Wheeler, M. (1993). Mikrobiologi Dasar. Jakarta: PT. Gelora Aksara Pratama.
WHO. (2005). Epidemiology and Management of Common Skin Diseases in Children in Developing Countries. Geneva: World Health Organization. Winarto, W. (2004). Memanfaatkan Bumbu Dapur untuk Mengatasi Aneka
Penyakit. Jakarta: Agromedia Pustaka.
www.farmmedica.blogspot.com/
2013/09/ternyata-daun-salam-bisa-untuk-obat.html?m=1
