1 IDENTIFIKASI CEMARAN MIKROBA PADA SEDIAAN TETES MATA
SETELAH PENGGUNAAN DAN PENYIMPANAN
SKRIPSI
Skripsi diajukan untuk memenuhi salah satu syarat memperoleh gelar Sarjana Farmasi (S. Farm.)
Diajukan Oleh
ANGGI FAHMI LUCKYAMA 1208010118
Kepada
Fakultas Farmasi
Universitas Muhammadiyah Purwokerto
Purwokerto
2 ii
4 iv
5
ABSTRAK
Obat tetes mata saat ini banyak ditemukan kasus kesalahan penggunaan dan penyimpanan yang dilakukan oleh masyarakat. Berdasarkan penelitian sebelumnya ditemukan bahwa obat tetes mata yang digunakan oleh pasien selama kurang lebih 2 minggu dari 54 obat tetes mata sebanyak 8 yang terkontaminasi. Bakteri yang ditemukan merupakan flora normal pada mata, Isolasi bakteri kontaminasi meliputi Staphylococcus auereus, Micrococcus , Neisseria catarrhalis, Bakteri gram negatif, Candida albicans, and Staph epidermidus. Penelitian ini menggunakan metode deskriptif observasional untuk menggambarkan atau menganalisis hasil penelitian tetapi tidak digunakan untuk membuat kesimpulan yang lebih luas. Teknik pengambilan sampel menggunakan teknik accidental sampling dengan jumlah responden sebanyak 9 orang. Berdasarkan hasil karateristik pewarnaan gram serta uji biokimiawi yang telah dilakukan, kemudian diidentifikasi menggunakan Bergey’s Manual of Determinative Bacteriology Ninth Edition dan Cowan and Steel’s Manual for the Identification of Medical Bacteria Third Edition (1993), ditemukan jenis maupun genus bakteri pada empat sampel penelitian, yaitu (1) Pseudomonas aeruginosa
(2) Staphylococcus aureus, (3) Enterobacter aerogenes (4) Escherichia coli.
Bakteri yang ditemukan pada obat tetes mata disebabkan karena Penggunaan obat mata oleh masyarakat banyak yang tidak memperhatikan aturan penggunaan yang tertera pada wadah tetes mata.
Kata Kunci: Obat tetes mata, Kontaminasi, Penandaan Khusus, Uji Biokimia
6
ABSTRACT
Currenttly many cases are found in the people’s improper use and strorage of eye drops. Based on previous research that eye drop drug used by patient during 2 weeks of 54 eye drop drug as many 8 which contaminated, most bacteria identified belonged to the normal commensal flora of the eye. Isolated contaminants were Staphylococcus auereus, Micrococcus , Neisseria catarrhalis, Gram negative Rods, Candida albicans, and Staph epidermidus. This research uses observational descriptive method to describe or analyze the result but not to make broader conclusion. The sampling technique uses accidental sampling with nine respondents. Based on the results of the characteristics of Gram staining and biochemical tests that have been done, then identified using Bergey's Manual of Determinative Bacteriology Ninth Edition and Cowan and Steel's Manual for the Identification of Medical Bacteria Third Edition (1993), found the type or genus of bacteria in four samples of research, namely (1) Pseudomonas aeruginosa (2) Staphylococcus aureus, (3) Enterobacter aerogenes (4) Escherichia coli, bacteria found in eye drops caused by the use of eye medicine by many people who do not pay attention to the rules of use indicated on the container of eye drops.
Keywords: Eye drops, Contamination, Special Labeling, Biochemistry Test
vi
7
HALAMAN PERSEMBAHAN
Dengan ridho Allah AWT, Kupersembahkan Karya Kecilku ini kepada... Bapak & Ibu ( Terimakasih atas Do’a, motivasi, kasih sayang yang tiada pernah
putus )
Kedua pembimbing, bu Nunuk A.N dan pak Arif Budiman yang telah banyak memberikan masukan dan dorongan dalam penyusunan skripsi ini. Kakakku : Mba Riska Widiana (Terimakasih atas Do’a, semangat, tawa & canda
yang selalu menguatkan dan selalu menjadi pendengar setiaku) Keponakanku : Kirana Zahra Carikza terimakasih sayang atas tawa dan candanya...
Dan seluruh keluarga besar H.Moch Dahlan dan H.Muslichudin penyemangat untukku
.
8
MOTTO
“ Sesungguhnya sesudah kesulitan itu ada kemudahan”
( Q.S. Alam Nasryrah (94) : 6) “ Alloh tidak akan membebani seseorang kecuali sesuai kesanggupanya”
( Q. S. Al-Baqarah (2) : 286)
viii
9
KATA PENGANTAR
Segala puji bagi Allah SWT atas segala limpahan rahmat, taufik serta hidayah-Nya sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi yang berjudul “Identifikasi Cemaran Mikroba Pada Sediaan Tetes Mata Setelah Penggunaan dan Penyimpanan ”
Dalam penyusunan skripsi ini, penulis masih banyak kekurangan dan kesulitan, namun berkat bimbingnan dari berbagai pihak maka skripsi ini dapat terselesaikan. Ucapan terimakasih penulis sampaikan kepada :
1. Dr. H. Syamsuhadi Irsyad., SH., MH., selaku Rektor Universitas Muhammadiyah Purwokerto.
2. Bapak Dr. Agus Siswanto, M.Si.,Apt selaku Dekan Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Purwokerto.
3. Ibu Nunuk Aries Nurulita, M.Si., Apt selaku pembimbing I dan Bapak Arif Budiman,MPH.,Apt selaku pembimbing II atas semua bimbingan dan arahan. 4. Seluruh Dosen dan staf Karyawan Fakultas Farmasi Universitas
Muhammadiyah Purwokerto.
5. Bapak dan Ibu tercinta yang selalu memberikan do’a dan semangat serta dukungan moral maupun material.
6. Semua pihak yang telah membantu penyelesaian skripsi ini, semoga Allah SWT memberikan imbalan yang sesuai, Aamiin.
7. Untuk teman-temanku Yulia, Novi, Widya, Fenti dan Jupe yang sudah memotivasi saya sehingga dapat terselesaikan penyusunan skripsi ini.
8. Untuk teman-temanku Nesia, Nina, Rian, Nanjar, Khalda, Irma, Nesia, Resita, dan Melya yang telah memberikan dukungan dan kerjasama.
9. Untuk Laboratorium Terpadu Mikrobiologi yang telah memberikan ijin untuk penelitian sehingga dapat terselesaikan penyusunan skripsi ini.
10.Untuk teman-temanku Juli, Della, Lita, Nindy, dan Ardi yang telah memberikan ide dan dukungan.
10 11.Seluruh teman-teman Fakultas Farmasi angkatan 2012 atas dukungan dan
kerjasamanya selama ini.
Penulis menyadari bahwa skripsi ini masih jauh dari sempurna karena faktor keterbatasan yang ada dalam diri penulis, oleh sebab itu penulis mengharapkan kritik dan saran yang membangun dan semoga skripsi ini dapat bermanfaat bagi yang membacanya.
Purwokerto, Juli 2016
Anggi Fahmi Luckyama
x
11
RIWAYAT HIDUP
Nama : Anggi Fahmi Luckyama
NIM / Angkatan : 1208010118 / 2012
Tempat / Tanggal Lahir : Kebumen, 25 Oktober 1993
Jenis Kelamin : Laki-Laki
Agama : Islam
Alamat : Ds. Tanuharjo rt/rw, 02/03, Alian, Kebumen 54532
Riwayat Pendidikan
1. SMA / Tahun Lulus : SMA Negeri 1 Petanahan / Tahun 2012 2. SMP / Tahun Lulus : SMP Negeri 1 Kebumen/ Tahun 2009 3. SD / Tahun Lulus : SD Negeri Tanuharjo / Tahun 2006 4. TK/Tahun Lulus : TK Dharma Wanita Tanuharjo/2000
12 DAFTAR ISI
HALAMAN JUDUL ... i
HALAMAN PERSETUJUAN... ii
HALAMAN PENGESEHAN ... iii
HALAMAN PERNYATAAN ... iv
ABSTRAK ... v
ABSTRACT ... vi
HALAMAN PERSEMBAHAN... vii
HALAMAN MOTTO ... viii
KATA PENGANTAR ... ix
RIWAYAT HIDUP ... xi
DAFTAR ISI ... xii
DAFTAR TABEL... xiii
DAFTAR GAMBAR ... xiv
13
B. Obat Tetes Mata ... 6
C. Persyaratan Obat Tetes Mata ... 8
D. Penggolongan Obat Tetes Mata ... 9
E. Penggunaan dan Penyimpanan ... 10
F. Bakteri Penyebab Penyakit Mata ... 11
G. Uji Mikrobiologi ... 15
BAB III METODE PENELITIAN... 19
A. Jenis dan Rancangan Penelitian ... 19
B. Definisi Operasional... 19
C. Waktu dan Tempat Penelitian ... 19
D. Teknik Pengambilan Sampel... 20
E. Objek Penelitian ... 21
F. Bahan dan Alat ... 21
G. Prosedur Penelitian... 22
H. Analisis Hasil ... 29
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ... 30
A. Uji Validasi media dan uji Fertilitas ... 30
B. Penetapan Uji Kapang ... 31
C. Uji Sterilitas ... 33
1. Perhitungan Koloni ... 39
2. Isolasi Bakteri Penelitian Bakteri dan Pembuatan Stok Bakteri ... 40
3. Pewarnaan Gram ... 42
14
4. Uji Biokimia ... 43
a. Uji Indol ... 43
b. Uji Methyl Red ... 45
c. Uji Voges Proskauer ... 47
d. Uji Penggunaan Sitrat ... 48
e. Uji Katalase ... 50
f. Uji Oksidase ... 52
g. Uji Urease... 53
h. Uji Motilitas ... 55
i. Uji Fermentasi Karbohidrat... 56
j. Identifikasi Bakteri ... 59
D. Keterbatasan Penelitian ... 64
BAB V KESIMPULAN ... 66
DAFTAR PUSTAKA ... 67
LAMPIRAN ... 71
xiv
15 DAFTAR TABEL
Tabel 1 Pembagian Obat Tetes Mata Terhadapa Responden... 20
Tabel 2 Sampel Yang Digunakan Dalam Penelitian ... 22
Tabel 3 Hasil Uji Penetapan Kapang Pada Obat Tetes Mata ... 32
Tabel 4 Hasil Uji Sterilitas Pada Sampel Obat Tetes Mata Penyimpanan 1 bulan ... 34
Tabel 5 Hasil Uji Sterilitas Pada Sampel Obat Tetes Mata Penyimpanan 2 bulan ... 36
Tabel 6 Hasil Uji Sterilitas Pada Sampel Obat Tetes Mata Penyimpanan 3 bulan ... 37
Tabel 7 Hasil Uji Perhitungan Koloni ... 39
Tabel 8 Hasil Penelitian Karateristik Morfologi Isolat Obat Tetes Mata ... 40
Tabel 9 Hasil Pewarnaan Gram Pada Mikroba Obat Tetes Mata ... 42
Tabel I7 Hasil Uji Fermentasi Karbohidrat Glukosa ... 57
Tabel I8 Hasil Uji Fermentasi Kabohidrat Laktosa ... 58
Tabel 19 Hasil Rangkuman Uji Biokimia ... 59
16 DAFTAR GAMBAR
Gambar 1 Struktur tetrahidzoline hcl ... 6
Gambar 2 Hasil Uji Validasi Media ... 30
Gambar 3 Hasil Uji Fertilitas Media ... 31
Gambar 4 Hasiil Uji Penetapan Kapang ... 32
Gambar 5 Hasil Kontrol Negatif dan Positif ... 35
Gambar 6 Hasil Uji Sterilitas obat tetes mata Penggunaan dan Penyimpanan 1 bulan... 35
Gambar 7 Hasil Uji Sterilitas obat tetes mata Penggunaan dan Penyimpanan 2 bulan ... 37
Gambar 8 Hasil Uji Sterilitas obat tetes mata Penggunaan dan Penyimpanan 2 bulan ... 38
Gambar 9 Hasil Uji Perhitungan Koloni ... 39
Gambar 10 Hasil Isolasi Bakteri dari Obat Tetes Mata ... 41
Gambar 11 Hasil Pembuatan Stok Bakteri ... 41
Gambar 12 Hasil Pewarnaan Gram ... 43
Gambar 13 Mekansime Reaksi Uji Indol ... 44
Gambar 14 Hasil Uji Indol ... 44
Gambar 15 Mekanisme reaksi kimia Methyl Red ... 46
Gambar 16 Hasil Uji Methyl Red ... 46
Gambar 17 Mekanisme Reaksi Uji Voges Proskauer ... 47
Gambar 18 Hasil Uji Voges Proskauer ... 48
Gambar 19 Mekanisme reaksi Uji Simmon’s Sitrat ... 49
Gambar 20 Hasil Uji Sitrat ... 49
Gambar 21 Hasil Uji Katalase ... 50
Gambar 22 Hasil Uji Oksidase ... 52
Gambar 23 Mekanisme Reaksi Kimia Urease ... 54
xvi
17 Gambar 24 Hasil Uji Urease ... 54 Gambar 25 Hasil Uji Motilitas ... 57 Gambar 27 Hasil Uji Laktosa ... 57
18 DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1. Perhitungan Koloni ... 72
Lampiran 2. Hasil Uji Sterilitas ... 73
Lampiran 3. Hasil Uji Penetepan Uji Kapang ... 74
Lampiran 4. Hasil Perhitungan Koloni ... 75
Lampiran 5. Pewarnaan Gram ... 76
Lampiran 14. Hasil Uji Methyl-Red dan Voges-Proskauer ... 84
Lampiran 15. Dokumentasi wawancara responden ... 85
Lampiran 16. Dokumentasi wawancara apotek ... 86
Lampiran 17. Hasil Wawacara Responden ... 87
Lampiran 18. Hasil survei Apotek ... 90
Lampiran 19. Pernyataan Responden ... 91
xviii
