50 G A M M A , V o lu m e 6 , N o m o r 1 , S ep te m b er 2 0 1 0 : 5 0 - 5 9 IN D U K SI VA R IA SI S O M A K L O N A L JA R A K P A G A R ( J A T R O P H A C U R C A S L .) U N T U K M E N D A PA T K A N K A R A K T E R TO L E R A N C EK A M A N K EK ER IN G A N M af tu ch ah Ju ru sa nA gr ote kn olo gi, Fa ku lta s P ert an ian da n P ete rn ak an , U niv ers ita s M uh am ma diy ah M ala ng Al am at Ko res po nd en si : J l. S im pa ng Ije n B lok A / N o. 21 (P eru ma ha n G rah a P raj a) Te lpo n : 03 41 -55 13 00 , H p : 08 16 14 35 51 6, Em ail : m aft uc ha h_ um m@ ya ho o.c om A BS TR A C T Ex pe rim en tal ac tiv iti es is co nd uc t in se ve ral st ag es, th at is : s om ac lon al va ria tio n i nd uc tio n i n ca sto r o il i n v itr o c ult ure th rou gh th e u se of PE G an d s ele cte d p lan tle t is re pro du ce in vi tro . In vi tro sel ec tio n p roc ed ure is do ne by pl an tin g c oty led on ex pla nts fr om ca sto r o il s ee dli ng s a ge 10 -14 da ys in nu tri en t m ed ium M S+ BA P+ IB A. Se ed st eri liz ati on is do ne us ing Tw ee n 2 0, Be nla te, 90 % alc oh ol, 50 % ch lor oc an d s ter ile w ate r.A fte r c all us is gr ow n, ca llu s w ill be su b-c ult ure d i nto nu tri en t m ed ium M S+ BA P w ith PE G ad dit ion . S ele cte d c all us w ill be tra ns fer red in to nu tri en t m ed ium M S + po tas siu m pa nto ten at + ac tiv e c oa l u nti l i t s ho ws ro ot gro wt h. Re su lt of ex pe rim en t h as sh ow n tha t t he h igh er PE G co nc en tra tio n wi ll su pp res s t he gro wt h o f c ast or oil ca llu s. In PE G co nc en tra tio n 1 5% th e m ort ali ty rat e o f c ast or oil ca llu s ( LD ) i s 64 ,29 % an d f or PE G co nc en tra tio n 2 0% th e m ort ali ty rat e o f c ast or oil ca llu s i s 9 2,8 6% . F or the ne xt ph ase is in v it ro se lec tio n p roc ess th rou gh tr ea tm en t o f 1 5% PE G tow ard al l s ev en ac ce ssi on s. Re su lt o f t his ex pe rim en t h as rev ea led th at av era ge m ort ali ty rat e o f c all us in 15 % PE G tre atm en t is 87 ,64 %. H S-49 ha s s ho wn th e l ow est pe rce nta ge ra te of res po ns e ( 79 %) in 15 % PE G tre atm en t, wh ile th e h igh est pe rce nta ge ra te of res po ns e o cc urs fo r S P-8 ( 93 %) .C all us th at su cc ee din g g row th fro m PE G sel ec tio n m ed ium w ill be re pro du ce in re ge ne rat ion m ed ium un til bu d i s f orm ed . B ud din g co ns tru ct pe rce nta ge is ra ng e b etw ee n 2 8,5 7% (a cc ess ion H S-49 an d S P-38 ) u nti l 3 7,0 3% (a cc ess ion SM -3 5) .A ve rag e b ud din g co ns tru ct pe rce nta ge fr om se lec ted ca llu s i n reg en era tio n me diu m is 31 ,45 %. Fo r t he ne xt sta ge of ex pe rim en t ( sec on d y ea r), th os e b ud w ill be su b-c ult ure d i nto ro oti ng me diu m un til fo rm ing ro ot an d b ec om e c om ple te pla ntl et rea dy to ac cli ma tiz e. K ey W o rd s : J a tr o p h a c u rc a s L p o ly et h yl en e g ly co l, d ro u g h t to le ra n ce ka ren a m en gh asi lka n e mi si y an g j au h l eb ih ba ik ( fr ee su lp h u r , sm o ke n u m b er re nd ah ) s esu ai de ng an is u-isu gl ob al, c et a n e n u m b er le bih tin gg i (> 60 ) s eh ing ga efi sie ns i p em ba ka ran le bih b aik , m em ili ki sif at pe lum asa n t erh ad ap pi sto n m esi n, b io d eg ra d a b le , me rup ak an re n ew a b le e n er g y k are na te rbu at da ri ba ha n a lam ya ng da pa t d ipe rba rui , m en ing ka tka n ind ep en de ns i s up lai b ah an b ak ar ka ren a da pa t dip rod uk si s ec ara lo ka l (B PT P, 20 06 ). Ind on esi a m em ilik i k era ga ma n p las ma nu tfa h jar ak pa ga r y an g c uk up tin gg i, n am un va ria si t ers eb ut mu ng kin ha ny a d ise ba bk an ol eh pe rbe da an w ila ya h ya ng m ela hir ka n e ko tip e-e ko tip e t ert en tu. Ek sp lor asi pe nd ah ul ua n ya ng d ila ku ka n ol eh P us lit ba ng Pe rke bu na n d i S um ate ra Ba rat , L am pu ng , B an ten , Ja wa B ar at, Ja wa T en ga h, Ja wa T im ur , N us a PE N D A H U L U A N Ke bu tuh an te rha da p m iny ak bu mi da ri t ah un ke tah un ce nd eru ng m en ing ka t d an ha l in i m en ye ba bk an pe ma sal ah an ke lan gk aa n m iny ak bu mi . P em an faa tan su mb er en erg i te rba ruk an m eru pa ka n b ag ian pe nti ng da lam pr og ram de ve rsi fik asi en erg i s eb ag ai ak iba t sem ak in me nip isn ya ca da ng an en erg i d an se ma kin me nin gk atn ya k eb utu ha n ba ha n ba ka r. Bi od ies el me mi lik i p era na n y an g s an ga t p en tin g d ala m up ay a pe ng he ma tan at au pu n s eb ag ai su bti tus i d ari m iny ak die sel . B iod ies el y an g m eru pa ka n m iny ak na ba ti y an g dip ero leh da ri t um bu ha n m em ilik i b an ya k k eu ng gu lan di ba nd in gk an d en ga n su mb er e ne rg i l ain ny a. Ke un gg ula n da n ke leb iha n bio dis el an tar a l ain : me rup ak an b ah an b ak ar ya ng ra ma h lin gk un ga n
51 M a ft u ch a h : I n d u ks i va ri a si s o m a kl o n a l ja ra k p a g a r ( jat rop ha cu rca s l .) U n tu k m en d a p a tk a n K a ra kt er t o le ra n c ek a m a n k ek er in g a n Te ng ga ra Ba rat , N us a T en gg ara Tim ur, da n S ula we si Se lat an di tem uk an va ria si a nta ra lai n: 1) ku lit ba tan g: ke pe rak -pe rak an , h ija u k ec ok lat an , 2 ) w arn a d au n: hij au m ud a, hij au tu a, 3) pu cu k d an ta ng ka i d au n: ke me rah an , k eh ija ua n, 4) be ntu k b ua h: ag ak el ips , bu lat , 5 ) j um lah b iji pe r k ap su l: 1-4 . Ko ntr ibu si pe rbe da an m orf olo gi di ata s te rha da p p rod uk tiv ita s d an ka nd un ga n m iny ak te ntu ad a, h an ya be lum di ke tah ui be sar ny a ( Ha sn am , 2 00 6). Str ess ke ke rin ga n m eru pa ka n s ala h s atu ke nd ala da lam b ud id ay a tan am an ja ra k pa ga r k ar en a pe na na ma n j ara k p ag ar ak an le bih di ara hk an pa da lah an -la ha n k eri ng ya ng no n p rod uk tif seh ing ga tid ak me ng ga ng gu k eb era da an ta na ma n pa ng an . S tre s ke ke rin ga n ak iba t b erk ura ng ny a k ete rse dia an ai r da lam b ud ida ya ja rak p ag ar se ca ra ny ata d ap at me ny eb ab ka n p en uru na n p rod uk si. Pe rba ika n s ifa t ge ne tik d an ag ron om is tan am an d ap at dil ak uk an me lal ui pe mu lia an . S ec ara ko nv en sio na l, p erb aik an sif at dil ak uk an d en ga n pe rsi lan ga n an tar sp esi es, va rie tas , g en era at au ke rab at ya ng m em ilk i si ft y an g dii ng ink an . P ers ila ng an da pa t d ite rap ka n p ad a ta na ma n be rbu ng a, be rbu ah , b erb iji, da n b erk em ba ng un tuk me lan jut ka n k etu run an ny a. U ntu k t an am an ya ng tid ak da pa t d ipe rba iki m ela lui pe rsi lan ga n, pe rba ika n s ifa t diu pa ya ka n de ng an ca ra lai n, dia nta ran ya m uta si ind uk si y an g d ise bu t p ula m uta n b ua tan . P eru ba ha n sif at ka ren a a lam di seb ut mu tas i s po nta n, mi sal ny a pa da ap el, y an g me ng ha sil ka n mu tan ap el ya ng did esk rip si o leh Li nn ae us ta hu n 1 74 1. Be rb ag ai pe rm as ala ha n ya ng m en da sa ri dil ak sa na ka nn ya p en eli tia n ini a nta ra lai n : 1 ) dip erl uk an a da ny a klo n-klo n jar ak p ag ar lok al Ind on esi a y an g m em ilik i k ara kte r to ler an te rha da p ce ka ma n k ek eri ng an , se hin gg a d ap at dim an faa tka n seb ag ai tet ua pe rsi lan ga n d ala m pro gra m pe mu lia an tan am an , 2) b elu m ad an ya in fo rm as i m en ge na i pe ma ka ian m eto de in du ks i v ari asi so ma klo na l u ntu k me nd ap atk an ka rak ter to ler an ce ka ma n k ek eri ng an pa da ta na ma n jar ak p ag ar m ela lu i p em be ria n p o ly et h yl en e g ly co l se ca ra in v it ro , 3) d ipe rlu ka n inf orm asi pe rbe da an sid ik jar i D NA an tar a k lon -kl on jar ak pa ga r te rse lek si d ari ha sil in du ks i p o ly et h yl en e g ly co l se hin gg a d ap at dik eta hu i ti ng ka t p eru ba ha n sec ara m ole ku ler ak iba t in du ks i v ari asi so ma klo na l, 4) dip erl uk an ad an ya in for ma si h asi l p en gu jia n t ing ka t tol era ns i k lon -kl on ja rak pa ga r t ers ele ks i te rha da p cek am an ke ke rin ga n s eh ing ga da pa t d ije las ka n a da ny a pe ru ba ha n ka rak ter to ler an si ter ha da p ce ka ma n ke ke rin ga n a kib at ter jad iny a v ari asi so ma klo na l, d sb . Pe ne liti an in i d ira nc an g un tuk m en da pa tka n me tod ein du ksi va ria si s om ak lon al m ela lui pe ma ka ian p o ly e th y le n e g ly c o l (P EG ) s ec ara in v it ro p ad a tan am an jar ak pa ga r s eh ing ga di pe rol eh pl an let ja rak pa ga r y an g me mi lik i k ara kte r t ole ran c ek am an ke ke rin ga n. M ET OD EL OG I P EN EL IT IA N Pe ne liti an di lak san ak an de ng an m en gg un ak an ba ha n t uju h a ks esi ja rak pa ga r y an g m em ilik i p ote ns i pro du ks i ti ng gi (H S-49 , S P-16 , S P-38 , S P-8, SM -33 , SP -3 4, SM -3 5 (S ud ar mo , e t. a l. 2 00 7) . U nt uk pe lak san an ku ltu r in v it ro di pe rgu na ka n m ed ia s tan da r M S, Tw een 20 , B en lat e, a nti bio tic rif am pic yn , cl oro x, zat pe ng atu r tu mb h B AP , IB A, da n p oly eth ile ne gl yc ol. Pe ne liti an di lak san ak an di la bo rat ori um K ult ur In Vi tro - Pu sa t P en ge mb an ga n Bi ote kn olo gi, Un ive rsi tas M uh am ma diy ah M ala ng . P en eli tia n dil ak san ak an da lam du a ta ha p k eg iat an ya itu : I nd uk si va ria si so ma klo na l p ad a k ult ur in v it ro ja rak pa ga r ( Ja tr o p h a c u rc a s L) m ela lui pe mb eri an p o ly et h yl en e g ly co l (P EG ) d an p erb an ya ka n ka lus ja rak p ag ar ter sel ek si s ec ara in v it ro hin gg a t erb en tuk pl an let . Ta ha p 1 . In du ks i v ar ias i so ma klo na l p ad a k ult ur in v it ro ja ra k p ag ar ( J a tr o p h a c u rc a s L) m ela lui pe mb eri an p o ly et h yl en e g ly co l Pr os ed ur p ela ks an aa n se lek si dil ak sa na ka n de ng an m en gg un ak an p o ly et h yl en e g ly co l (P EG 60 00 ) m ela lui tek nik se lek si in v it ro . P erb an ya ka n b ibi t ata u p rop ag asi di lak uk an de ng an m en an am ek sp lan pa da m ed ia ya ng te rd iri a tas m ed ia da sa r M S (M ur as hig e & Sk oo g) d en ga n pe na mb ah an z at pe ng atu r t um bu h BA P da n IB A. E ks pla n ya ng dip erg un ak an ad ala h e ks pla n k oti led on ya ng be ras al da ri k ec am ba h b en ih jar ak pa ga r y an g b eru mu r 1 0-1 4 ha ri. Se be lum di ke ca mb ah ka n p ad a m ed ia ag ar-ag ar ata u p asi r s ter il, be nih ja rak pa ga r d ist eri lka n d en ga n be be rap a je nis ste rila n y ait u: tw een 20 , be nla te, alk oh ol 90 % , k lor ok s 5 0 % da n a gu ad es ste ril . O pti ma si ko ns en tra si P EG ya ng di tet ap ka n s eb ag ai ko ns en tra si da lam se lek si in vit ro jar ak pa ga r d ila ku ka n d en ga n
52 G A M M A , V o lu m e 6 , N o m o r 1 , S ep te m b er 2 0 1 0 : 5 0 - 5 9 ko nse ntr asi pe ng uji an ko nse ntr asi 0% , 5 %, 10 %, 15 %, 20 %. D ari be rba ga i k on sen tra si ter seb ut dih itu ng jum lah ka lus tu mb uh da n k alu s m ati se rta di tet ap ka n tin gk at le th a l d o ss a g e y an g ak an d ipe rg un ak an . Ko ns en tra si ya ng te lah d ite tap ka n se lan jut ny a dip erg un ak an un tuk m en ye lek si k etu juh ak ses i ja rak pa ga r y an g a ka n d iuj i. Ka lus ya ng lo los se lek si P EG se tel ah 1-2 b ula n ak an tu mb uh m en jad i tu na s k ec il-ke cil . T un as-tun as ter seb ut ke mu dia n d ipi nd ah ka n a tau di su b-k ult ur ke me dia M 2 y ait u m ed ia d asa r M S d en ga n p en am ba ha n BA P. Su b-k ult ur be rtu jua n u ntu k m em pe rol eh tu na s ind ivi du ya ng be ruk ura n a ga k b esa r a tau tin gg i. T un as ind ivi du ya ng m em ilik i u ku ran cu ku p b esa r k em ud ian dit ran sfe r k e m ed ia un tuk pe mb en tuk an ak ar ya itu me dia M S d en ga n p en am ba ha n k als ium pa nto ten at da n a ran g a kti f (m ed ia M 3). Ta ha p 2 . P erb an ya ka n p lan let te rse lek si s eca ra in v it ro Tana ma n h asi l k ult ur jar ing an ya ng tel ah be rak ar dis eb ut p la n tl et . S ela nju tny a p la n tl et da pa t d ita na m pa da m ed ia tan ah da lam po t, k em ud ian di tem pa tka n di da lam ru ma h ka ca . D ala m tah ap se lan jut ny a dil ak uk an pr ose s p em ind ah an p la n tl et jar ak pa ga r d ari da lam bo tol ku ltu r k e m ed ia t an ah hi ng ga m en jad i b ibi t ta na ma n ya ng t um bu h se ha t. M ed ia y an g dip erg un ak an da lam ta ha p a kli ma tis asi ad ala h a ran g sek am . S eju ml ah pl an let ya ng lo los se lek si d ari m ed ia PE G sel an jut ny a d i su b k ult ur ke m ed ia ba ru (M ed ia M 3) tan pa pe na mb ah an P EG . S ela nju tny a p lan let dip eli ha ra sam pa i te rbe ntu k t an am an ya ng le ng ka p (b er ak ar d an b er da un ) y an g se lan ju tn ya s iap dip ind ah ka n k e m ed ia a kli ma tis asi . HA SI L D AN PE M BA HA SA N In du ks i v ar ias i so ma klo na l p ad a k ult ur in v it ro ja ra k pa ga r ( J a tr o p h a c u r c a s L ) m ela lu i pe mb eri an p o ly et h yl en e g ly co l Pr os ed ur sel ek si in v it ro dil ak san ak an de ng an me ng gu na ka n p o ly e th y le n e g ly c o l (P EG 6 00 0) . Pe rb an ya ka n bib it ata u pr op ag as i j ara k pa ga r dil ak uk an de ng an m en an am be nih pa da m ed ia pa sir ste ril . S ela nju tny a d ila ku ka n i so las i k oti led on ya ng be ras al da ri ke ca mb ah b en ih jar ak p ag ar ya ng be rum ur 10 -14 ha ri da n d ipe rba ny ak pa da pa da m ed ia me dia da sar M ura shi ge & Sk oo g d en ga n p en am ba ha n za t p en ga tur tu mb uh BA P d an IB A ser ta p en am ba ha n PE G seb ag ai pe ny ele ks i. Ek sp lan ya ng di pe rgu na ka n d ala m pe rba ny ak an in vit ro ad ala h k oti led on ja rak pa ga r d ari tu juh ak ses i ta na ma n ja ra k pa ga r ya ng d uj i. S eb el um dik ec am ba hk an pa da m ed ia pa sir st eri l, b en ih jar ak pa ga r d ist eri lka n de ng an m en gg un ak an b eb era pa ste rila n y ait u: tw een 20 , b en lat e, a lko ho l 9 0 % , k lor ok s 50 % da n a gu ad es ste ril . Ta be l 1 me nu nj uk ka n da ta p er se nt as e pe rke ca mb ah an be nih ja rak pa ga r p ad a m ed ia pa sir ste ril . D ari ta ble te rse bu t te rli ha t b ah wa ak ses i ja rak pa ga r S P-8 m en gh asi lka n p ers en tas e p erk ec am ba ha n be nih ya ng te rti ng gi (96 %) se da ng ka n a ks esi SM -33 me ng ha sil ka n p ers en tas e p erk ec am ba ha n t ere nd ah (64 %) . Ra ta-rat a p ers en tas e p erk ec am ba ha n d ari ke tuj uh ak ses i ta na ma n j ara k p ag ar ter seb ut ad ala h 85 ,43 %. Perke ca mb ah an be nih Ja tr o p h a c u rc a s di m ed ia pa sir ste ril di pe rli ha tka n p ad a G am ba r 1 . S ed an gk an ke gia tan is ola si co tyl ed on da ri m ed ia pa sir st eri l k e me dia in du ks i k alu s M S d itu nju kk an pa da G am ba r 2 .
Ta
be
l 1
. P
ers
en
tas
e p
erk
eca
mb
ah
an
be
nih
ja
ra
k p
ag
ar
pa
da
m
ed
ia
pa
sir
ste
ril
No . KO DE JC JU M LA H BE NI H JU M LA H KE CA M BA H TU M BU H PE RS EN TA SE PE RK EC AM BA HA N 1. HS -49 50 47 94 2. SP -16 50 45 90 3. SP -38 50 38 76 4. SP -8 50 48 96 5. SM -33 50 32 64 6. SP -34 50 46 92 7. SM -35 50 43 86 RA TA -R AT A 8 5,4 353 M a ft u ch a h : I n d u ks i va ri a si s o m a kl o n a l ja ra k p a g a r ( jat rop ha cu rca s l .) U n tu k m en d a p a tk a n K a ra kt er t o le ra n c ek a m a n k ek er in g a n
Ga
mb
ar
1.
Pe
rk
eca
mb
ah
an
be
nih
J a tr o p h a c u rc a sdi
m
ed
ia
pa
sir
ste
ril
Ga
mb
ar
2.
K
eg
iat
an
iso
las
i co
tyl
ed
on
da
ri m
ed
ia
pa
sir
ste
ril
ke
m
ed
ia
ind
uk
si
ka
lus
Ta be l 2 m en un juk ka n pe rse nta se ke ca mb ah no rm al da n ke ca mb ah ab no rm al (hi po ko til ke cil , ko tile do n k ec il, seb ag ian ko tile do n b elu m me mb uk a) da ri h asi l p erk ec am ba ha n j ara k p ag ar di me dia pa sir ste ril . Da ri da ta dia tas ta mp ak ba hw a p ers en tas e ke ca mb ah no rm al ya ng te ren da h a da lah ad ala h 6 2 % (ak ses i S M -33 ) h ing ga 92 % (a ks esi SP -8) se hin gg a rat a-r ata ke cam ba h n orm al d ari ke tuj uh ak ses i te rse bu t ad ala h 8 1,1 4% .Ta
be
l 2
. P
ers
en
tas
e k
eca
mb
ah
no
rm
al
pa
da
m
ed
ia
pa
sir
st
eri
l
No KO DE JC JU M LA H BE NI H JU M LA H KE CA M BA H N0 RM AL KE TE RA NG -A N PE RS EN TA SE KE CA M BA H NO RM AL 1. HS -49 50 45 2 a bnor ma l 90 2. SP -16 50 42 3 a bnor ma l 84 3. SP -38 50 36 2 a bnor ma l 72 4. SP -8 50 46 1 a bnor ma l ; 1 be rja mur 92 5. SM -33 50 31 1 a bnor ma l 62 6. SP -34 50 43 3 a bnor ma l 86 7. SM -35 50 41 2 a bnor ma l 82 8. RA TA -R AT A 81.1 4 Ke ter an ga n: Ab no rm al = h ipo ko til ke cil , k oti led on ke cil , se ba gia n k oti led on be lum m em bu ka54 G A M M A , V o lu m e 6 , N o m o r 1 , S ep te m b er 2 0 1 0 : 5 0 - 5 9 Pa da ta ha p k eg iat an se lan jut ny a d ila ks an ak an op tim as i k on se ntr as i P EG y an g ak an d ite tap ka n seb ag ai ko ns en tra si d ala m sel ek si in v it ro ja rak pa ga r. Ko ns en tra si P EG ya ng di uji ka n a da lah 0% , 5 %, 10 %, 15 %, se rta 20 %. D ari be rba ga i k on sen tra si ter seb ut dih itu ng ju ml ah ka lus tu mb uh da n k alu s m ati se rta di tet ap ka n tin gk at le ta l d o ss a g e y an g ak an dip erg un ak an da lam ta ha p p en eli tia n s ela nju tny a. Ko ns en tra si ya ng te lah d ite tap ka n se lan jut ny a dip erg un ak an un tuk m en ye lek si k etu juh ak ses i ja rak pa ga r y an g a ka n d iuj i. Ta be l 3 m en un juk ka n h asi l p en gu jia n b eb era pa ko ns en tra si p o ly et h yl en e g ly co l (P EG ) p ad a s ele ks i ka lus ta na ma n j ara k p ag ar sec ara in v it ro um ur 30 ha ri. D ar i t ab le ter se bu t t er lih at ba hw a pa da ko ns en tra si 0% P EG p ers en tas e ka lus tu mb uh me nc ap ai 10 0% (L D= 0,0 0 % ), d an se ma kin tin gg i ko ns en tra si PE G ya ng d ibe rik an a ka n se ma kin me nu ru nk an p er se nt as e ka lu s tu mb uh d an me ni ng ka tk an le ta l d o sa g e . P ad a pe mb er ian ko ns en tra si P EG 15 % pe rse nta se ka lus tu mb uh ha ny a 35 ,71 % (L D= 64 ,29 %) , se da ng ka n p ad a k on sen tra si PE G 20 % p er se nt as e ka lu s tu mb uh 7 ,1 4% (L D= 92 ,86 ). Be rda sar ka n h asi l te rse bu t d iat as ma ka da lam p en eli tia n ini k on sen tra si PE G ya ng ak an dip erg un ak an un tuk pe ny ele ksi ke tuj uh ak ses i te rse bu t ad ala h P EG 15 %.
Ta
be
l 3
. P
en
gu
jia
n b
eb
era
pa
ko
ns
en
tra
si p
oly
eth
yle
ne
gl
yc
ol
(P
EG
) p
ad
a s
ele
ks
i k
alu
s
tan
am
an
ja
ra
k p
ag
ar
se
ca
ra
in v it rop
ad
a u
mu
r 3
0 h
ar
i
KO
NS
EN
-
TR
AS
I
PE
G
JU
M
LA
H
SA
M
PE
L
(B
oto
l)
JU
M
LA
H
KA
LU
S
TU
M
BU
H
PE
RS
EN
TA
SE
KA
LU
S
TU
M
BU
H (
%
)
LD
(%
)
0% 14 14 100,0 0 0,0 0 5% 14 11 78.57 21,4 3 10% 14 8 57,14 42,8 6 15% 14 5 35,71 64,2 9 20% 14 1 7,14 92,8 6 Ga mb ar 3 m en un juk ka n e ks pla n h idu p ( A) da n ek sp lan m ati (B ) d i m ed ia sel ek si PE G 20 %. D ari ga mb ar ter seb ut tam pa k b ah wa pa da ko nd isi m ed ia ya ng d ibe ri PE G ma ka e ks pla n ko til ed on a ka n mo ng eri ng , b erw arn a c ok lat da n t ida k a ka n t um bu h me nja di ka lus .Ga
mb
ar
3.
E
ks
pla
n h
idu
p (
A)
da
n e
ks
pla
n m
ati
(B
) d
i m
ed
ia
sel
ek
si P
EG
20
%
Pa da p ro se s se le ks i in v it ro d en ga n me ng gu na ka n P EG 15 %, ka lus ya ng lo los se lek si P EG set ela h 1 -2 bu lan ak an tu mb uh m en jad i tu na s k ec il-ke cil .T un as-tun as ke cil ter seb ut ke mu dia n d ipi nd ah ka n ata u d isu b-k ult ur ke m ed ia M 2 y ait u k om po sis i m ed ia da sar M S d en ga n p en am ba ha n h orm on B AP . S ub-55 M a ft uc hah : In duk si v ar ia si s om ak lonal j ar ak p a g ar ( ja tro ph a curc as l .) U nt uk m enda p at kan K a rak te r tol e ran c e kam an ke ke ri n g an ku ltu r b er tu ju an u nt uk m em pe ro le h tu na s i nd iv id u ya ng be ru kura n aga k be sa r. Tu na s i nd iv id u ya ng m em ili ki u ku ra n cu ku p be sa r ke m ud ia n di tra ns fe r k e m ed ia u nt uk p em be nt uk an a ka r ya it u ko m po si si m ed ia M S d en ga n pe na m ba ha n ka ls ium p an to te na t d an a ra ng ak tif (m edi a M 3). 2 m in gg u 4 M in ggu G a m b a r 4. P er tu m b u h a n k al u s jar ak p ag ar p a d a m ed ia se le k si P E G 15 % ( u m u r 2 m ig gu , 4 m in g g u , 6 m in g g u d a n 8 m in g g u ). P er b an yak a n p lan le t te rs el ek si s ec ar a in v it ro S ej um la h pl an le t j ara k pa ga r y an g lo lo s se le ks i in v itro da ri m edi a P E G s el an jut ny a di s ub k ul tur ke m edi a ba ru ta np a pe na m ba ha n P E G y an g be rt uj ua n un tuk m em ac u pe m be nt uk an a ka r. S el an ju tn ya p la nl et ja ra k pa ga r d ip el ih ara sa m pa i t er be nt uk ta na m an y an g le ngk ap (b erd aun da n be ra ka r) ya ng s el an ju tn ya s ia p di pi nda hk an k e m edi a ak lim at is as i. T an am an h as il kul tur ja rin ga n ya ng te la h m em ili ki st ru kt ur m or fo lo gi le ngk ap d is eb ut p lant le t . S el an jut ny a p lant le t ja ra k pa ga r y an g te la h di pe ro le h di ta na m p ad a m ed ia ta na h da la m p ol yb ag , k em ud ia n di te m pa tk an d i d al am ru m ah ka ca . D al am t ah ap s el an ju tny a di la kuka n pros es pe m in da ha n p la n tl et ja ra k pa ga r d ar i d al am b ot ol k ul tu r ke m edi a ta na h h in gga m en ja di b ib it ta na m an y an g tum buh s eh at . M edi a ya ng di pe rg un ak an d al am ta ha p ak lim at is as i a da la h ara ng se ka m . 6 m in ggu 8 m in gg u
56 G A M M A , V o lu m e 6 , N o m o r 1 , S ep te m b er 2 0 1 0 : 5 0 - 5 9
Ta
be
l 4
. H
asi
l se
lek
si b
eb
era
pa
ak
ses
i J
ar
ak
Pa
ga
r pada
konsentrasi
polyethylene
glycol
(P
EG
) 1
5%
se
ca
ra
in v it ro No. KO DE JC JU M LA H EK SP LA N JU M LA H KA LU S H ID UP PE RS EN TA SE EK SP LA N M AT I 1. HS -49 20 0 42 79,0 2. SP -16 20 0 23 88,5 3. SP -38 20 0 21 89,5 4. SP -8 20 0 14 93,0 5. SM -33 20 0 15 92,5 6. SP -34 20 0 31 84,5 7. SM -35 20 0 27 86,5 RA TA -R AT A 87,64 Ta be l 4 m en un juk ka n ha sil se lek si i n v it ro be be rap a ak se si Ja rak P ag ar de ng an p em be ria n ko ns en tra si p o ly et h yl en e g ly co l (P EG ) 1 5% . D ari da ta dia tas ta mp ak b ah wa p em be ria n PE G 15 % me ng ak iba tka n pe rse nta se ek sp lan m ati b erk isa r an tar a 7 9% (a ks esi H S-49 ) h ing ga 93 % (ak ses i S P-8). Ra ta-rat a p ers en tas e e ks pla n m ati da ri h asi l se lsk si ke tuj uh ak ses i te rse bu t a da lah se be sar 87 ,64 %.Ga
mb
ar
5.
R
eg
en
era
si k
alu
s ja
ra
k p
ag
ar
ta
np
a m
ela
lui
m
ed
ia
sel
ek
si P
EG
Ga
mb
ar
6.
Pe
rk
em
ba
ng
an
k
alu
s j
ar
ak
pa
ga
r l
olo
s s
ele
ks
i
in v it rode
ng
an
pe
mb
eri
an
PE
G
15
%
pa
da
m
ed
ia
reg
en
era
si
57 M a ft uc hah : In duk si v ar ia si s om ak lonal j ar ak p a g ar ( ja tro ph a curc as l .) U nt uk m enda p at kan K a rak te r tol e ran c e kam an ke ke ri n g an G am ba r 5 m en un jk ka n k al us ja ra k pa ga r y an g be re ge ne ra si ta np a m el al ui m ed ia s el eks i P E G , se da ngk an G am ba r 6 m en un juk ka n pe rk em ba nga n ka lu s ja ra k pa ga r lo los s el eks i in v it ro d eng an pe m be ri an P E G 15% p ada m edi a re ge ne ra si . T ab el 5. P er se n tas e K al u s B er tu n as h as il s el ek si b eb er ap a ak se si Jar ak P agar p ad a k on se n tr as i p ol ye th yl en e g ly col ( P E G ) 15% p ad a m ed ia re ge n er as i (30 h ar i) N o. K O D E JC JU M L A H K A L U S H ID U P JU M L A H K A L U S B E R T U N A S P E R SE N T A S E K A L U S B E R T U N A S 1. H S -49 42 12 28, 57 2. S P -16 23 8 34, 78 3. S P -38 21 6 28, 57 4. S P -8 14 5 35, 71 5. S M -33 15 3 20, 00 6. S P -34 31 11 35, 48 7. S M -35 27 10 37, 03 R A T A -R A T A 31, 45 H as il p ene li ti an m en un ju kk an b ahw a da ri se jum la h ka lus y an g hi du p tida k se luruh ny a be rh as il be rt un as di m edi a re ge ne ra si (T ab el 5). Ta be l 5 m em pe rl ih at ka n ba hw a pe rs en ta se k al us b ert un as ha si l se le ks i be be ra pa a ks es i Ja ra k P ag ar p ad a ko ns en tra si p ol ye th yl e ne g ly col (P E G ) 15% pa da m edi a re ge ne ra si be rk is ar an ta ra 20 %(a ks es i S M -33 ) hi ng ga 3 7, 03 % ( aks es i S M -3 5) . R at a-ra ta pe rs en ta se k al us b ert un as da ri k et uj uh a ks es i y an g di uj i a da la h s eb es ar 31,45% da ri jum la h ka lus y an g be rt un as . K ec iln ya n ila i p ers en ta se k al us b ert un as in i ak an se m ak in m em pe rk ec il ju m la h ka lu s y an g be rh as il te rs el ek si . H as il pe ne lit ia n ya ng di la kuk an ol eh P urw at i et .al ., (2007) m en un juk ka n ba hw a ek sp la n hi po ko til da n ko til ed on ja ra k pa ga r t el ah b erh as il di tu m bu hk an se ca ra in v itro p ada m ed ium M S + 0 ,5 m g/ lit er BA P de nga n be rb ag ai k on se nt ra si IBA . D al am p en el iti an ya ng la in , e ks pl an da un da n ta ngk ai da un juga te la h be rh as il di kul tur ka n pa da m ed ia M S + 0 ,5 m g/ l B A P de ng an b er ba ga i k on se nt ra si T dz (A di ka da rs ih et .a l. , 2008). S al ah sa tu kun ci k eb erh as ila n pa da k ul tur ja ri ng an a d al ah p ad a ko m p os is i m ed ia y an g di pe rg una ka n. Be rb ag ai k om po si si m ed ia t el ah di ke te m uk an da n di pe rgu na ka n da la m k ul tu r i n vi tr o, na m un m edi a M ura sh ige S ko og (M S ) m eru pa ka n m ed ia d as ar y an g pa lin g se rin g di pe rg un ak an (M ar go no et .al ., 20 03). M edi a m em ili ki dua fun gs i ut am a ya itu unt uk m en yu pl ai nut ri si da n unt uk m enga ra hka n pe rt um bu ha n ta na m an m el al ui p em aka ia n Z P T (K at uu k, 19 89 ). P en am ba ha n za t p en ga tur tum buh p ada m edi a sa ng at p en tin g unt uk m en ga ra hka n pe rt um buha n eks pl an. S ukm ad ja ja (2 003 ) m eny at ak an b ahw a pe na m ba ha n za t p en ga tur tum buh p ad a m edi a kul tur m er up ak an k un ci k eb er ha si la n ba ik p ad a ta ha p in du ks i m au pun e lo ng as i t un as . Z at p en ga tur tum buh y an g se ri ng di pe rgu na ka n ada la h auk si n da n si to ki ni n, b ai k da la m b en tuk tun gga l m au pun k om bi na si k edua ny a (R ah ar je ng , 2 007 ). P en el ua n ada ny a si fa t t ot ip ot en si da la m k ul tur in vi tr o m en un juk ka n da la m k en ya ta an ny a di te m uk an pe ny im pa ng an s et el ah t er ja d i re g en er as i se l. K era ga m an da pa t t er ja di k are na p em bi ak an v ege ta tif m el al ui k ul tur in vi tr o m en ggun ak an m edi a de nga n ba ha n ki m ia m ur ni , a ta u di ak ib at ka n ol eh li ngk un ga n ya ng m en ga la m i ga nggua n. K era ga m an s om ak lo na l te la h di pe rgun ak an un tuk m em pe ro le h ku lti va r y an g un ik da n be rm an fa at b agi p em ul ia an ta na m an s ec ara ko nv en si on al . P ad a um um ny a se tia p si kl us re ge ne ra si ha ny a m am pu m en gh as ilk an 1 -3 % v ar ia si so m ak lo na l. M en ur ut L ar ki n da n S co w cro ft (19 81 ), ke m un gk in an
58 G A M M A , V o lu m e 6 , N o m o r 1 , S ep te m b er 2 0 1 0 : 5 0 - 5 9 ter jad iny a s ifa t d om ina n da lam k eja dia n va ria si so ma klo na l le bih be sar di ba nd ing ka n m ela lui te kn ik mu tas i in du ks i se ca ra in v iv o . P en gg un aa n m uta ge n fis ika ata u k im ia d osi s ti ng gi ter ha da p h asi l re ge ne ras i sel se pe rti ka lus , p rot ok rom at au ek sp lan se be lum me mb en tuk pl an tle t se car a in v it ro ak an m en gh asi lka n ke rag am an ya ng le bih lu as (S oe rti ni et a l . 1 99 6). M en uru t F lic k ( 19 83 ), a pli ka si m uta si i nd uk si d en ga n mu tag en k im ia se ca ra in v it ro m en gh as ilk an ke rag am an fe no tip ik ya ng le bih lu as. Str ess ke ke rin ga n m eru pa ka n s ala h s atu ke nd ala da lam bu did ay a j ara k p ag ar ka ren a b ud ida ya ja rak pa ga r b ias an ya leb ih dia rah ka n p ad a la ha n k eri ng ya ng no n p rod uk tif . D ala m ko nd isi te rse bu t, k ete rse dia an air be rpo ten si m en jad i m asa lah da n s tre s k ek eri ng an ser ing ka li t erj ad i d ala m be rba ga i fa se pe rtu mb uh an jar ak pa ga r d an se ca ra ny ata da pa t m en ye ba bk an pe nu run an p rod uk si bij i j ara k pa ga r. S ala h sat u me ka ni sm e ad ap tas i t an am an te rh ad ap s tre ss ke ke rin ga n d ila ku ka n d en ga n m en ga tur po ten sia l os mo tik se l ta na ma nn ya (L ev itt, 19 80 ), y ait u d en ga n pe nin gk ata n d an ak um ula si sen ya wa or ga nik ya ng da pa t m en uru nk an po ten sia l ai r se l (S ha rp, 19 94 : O be r da n S ha rp, 19 94 ; M ull et d an W hil sit t, 1 99 6). Ev alu asi pe ng aru h p erl ak ua n s tre ss ke ke rin ga n s ec ara in vi tro melalui pemberian p o ly et h yl en e g ly co l di ha rap ka n ak an da pa t d igu na ka n u ntu k p en ap isa n s ifa t to ler an si ge no typ e t an am an ja rak p ag ar ter ha da p ko nd isi tek an an ak iba t k ek eri ng an . K E SI M PU L A N D A N S A R A N Ind uk si v ari asi so ma klo na l m ela lui pe mb eri an po lye thy len e g lyc ol (P EG ) s ec ara in v it ro u ntu k me nd ap atk an k ara kte r t ole ran te rha da p ce ka ma n ke ke rin ga n t ela h b erh asi l d ila ku ka n p ad a ta na ma n j ara k pa ga r ( Ja tr o p h a c u rc a s L.) ak ses i H S-49 , S P-16 , S P-38 , S P-8, SM -33 , S P-34 , S M -35 . Se ma kin tin gg i k on sen tra si P EG ya ng di be rik an ak an se ma kin m en ek an p ert um bu ha n ka lus ja rak pa ga r. P ad a k on sen tra i P EG 15 % tin gk at ke ma tia n ka lus ja rak pa ga r ( LD ) m en ca pa i 6 4,2 9% da n p ad a ko ns en tra si PE G 20 % ti ng ka t k em ati an k alu s me nc ap ai 92 ,86 %. Se lek si in v it ro p ad a ke tuj uh a ks es i y an g dit eta pk an di lak uk an m ela lui pe mb eri an 15 % PE G. Ha sil pe ne liti an m en un juk ka n r ata -ra ta k em ati an ka lus pa da pe mb eri an PE G 15 % ter seb ut me nc ap ai 8 7,6 4% . Ak se si HS -4 9 me nu nju kk an re sp on p ers en tas e ke ma tia n k alu s te ren da h ( 79 %) pa da pe mb eri an PE G 15 %, se da ng ka n p ers en tas e k em ati an ka lus te rti ng gi ad ala h p ad a a ks esi SP -8 (93 %) . Ka lus ya ng be rha sil tu mb uh da ri m ed ia sel ek si PE G sel an jut ny a d ipe rba ny ak di m ed ia reg en era si hin gg a te rbe ntu k t un as. Pe rse nta se pe mb en tuk an tu na s da ri ka lus te rse lek si di me dia re ge ne ras i b erk isa r an tar a 2 8,5 7 % (a ks esi H S-49 da n S P-38 ) h ing ga 37 ,03 % (a ks es i S M -3 5) . R ata -ra ta pe rse nt as e pe mb en tuk an tu na s d ari ka lus te rse lek si p ad a m ed ia reg en era si ter seb ut ad ala h s eb esa r 3 1,4 5 % . P ad a tah ap p en eli tia n sel an jut ny a ( tah un k ed ua ) t un as ter se bu t a ka n dis ub -k ult ur k e me dia p era ka ran seh ing ga te rbe ntu k a ka r d an m en jad i p lan let le ng ka p ya ng sia p d iak lim ati sas ika n. Sa ra n Men gin ga t p ers en tas e k em ati an ka lus sa ng at tin gg i d an pe rse nta se pe mb en tuk an tu na s d ari ka lus ter sel ek si r en da h, ma ka da lam pr os es sel ek si i n v itr o jar ak pa ga r m ela lui in du ks i P EG di pe rlu ka n j um lah sam ple ya ng cu ku p b an ya k s eh ing ga m en cu ku pi un tuk pe ng uji an di ru ma h k ac a / la pa ng . D A FT A R P U ST A K A Ad ika da rsi h, S., E. Ka rtin i, R .D . P urw ati . P en ga ruh konsentrasi thidiazurone (TDZ) dan macam ek sp lan te rha da p i nis ias i t un as jar ak pa ga r ( Ja tr o p h a c u rc a s L. ) s ec ara in vi tro . P ros idi ng Lo ka ka rya N asi on al I II I no va si t ek no log i ja rak pa ga r ( Ja tr o p h a c u rc a s L. )u ntu k m en du ku ng pro gra m de sa ma nd iri en erg y. B ay um ed ia P ub l. M ala ng . H al 19 9-2 02 . BP PT . 2 00 6. Bi od ise l. h ttp ://e c.b pp t.g o.i d/b iod ies el/ ind ex. htm Fli ck , C .E. 19 83 . Is ola tio n o f m uta nt fro m cel l cu ltu re In Ha nd Bo ok of Pl an t C ell Cu ltu re. M acm illa n, NY . P . 3 93 -44 1
59 M a ft u ch a h : I n d u ks i va ri a si s o m a kl o n a l ja ra k p a g a r ( jat rop ha cu rca s l .) U n tu k m en d a p a tk a n K a ra kt er t o le ra n c ek a m a n k ek er in g a n Ha sn am . 2 00 6. St atu s p erb aik an da n p en ye dia an ba ha n t an am an ja rak pa ga r ( Ja tr o p h a c u rc a s L.) . P ros idi ng Lo ka ka rya II: St atu sT ek no log i Ta na ma n J ara k P ag ar di Bo go r, 2 9 N op em be r 20 06 . B ad an Pe ne liti an da n P en ge mb an ga n Pe rta nia n. Pu sat Pe ne liti an da n P en ge mb an ga n Pe rke bu na n. Ka tuu k, J.R .P. 19 89 .T ek nik ku ltu r ja rin ga n d ala m mi kro pro pa ga si t an am an . Ja ka rta . D itje n D ikt i, De pd ikb ud . La rki n, P.J . an d W .R . S co wc rof t. 1 98 1. So ma clo na l va ria tio n, a n ov el s ou rce of va ria bil ity fro m cel l cu ltu re for pl an t im pro ve me nt. Th eo r.Appl. Ge ne t. 6 0: 17 9-2 74 . M arg on o, H. , B alq is d an K art ini , E . 2 00 3. K ult ur Jar ing an Tu mb uh an . D itje n P en did ika n T ing gi. Pr oy ek Pe nin gk ata n M an aje me n P en did ika n Tin gg i. D ep art em en Pe nd idi ka n N asi on al Pu rw ati , R .D ., S. Ba su ki. , S .A dik ad ars ih da n Su pri ad i. 20 07 . R eg en era si tun as tan am an jar ak p ag ar ( Ja tr o p h a c u rc a s L .) sec ara in vi tr o . P ros idi ng Lo ka ka rya II Sta tus te kn olo gi tan am an Ja rak P ag ar ( Ja tr o p h a c u rc a s L .). Pu sli tba nb un , B og or. P. 32 3-3 27 . Ra ha rdj en g, A. R. P., 20 07 . M ikr op rop ag asi da un da n t an gk ai da un ja rak pa ga r ( Ja tr o p h a c u rc a s L. ) y an g b era sal da ri b an du lan pa da m ed ium M S + BA P 5 m g/l + vit am in C 1 00 m g/l ya ng di pe rk ay a de ng an b eb era pa k on se nt ras i thi dia zu ron e. S kri psi . U NM . T Ida k d ite rbu tka n. So ert ini , S ., N . S olv ia, da n K . S us ka nd ari . 1 99 6. Ta ng ga pa n p ert um bu ha n p rot ok orm an gg rek D en d ro b iu m te rha da p do sis si na r g am ma . Ri sal ah Pe rte mu an Ilm iah Ap lik asi Is oto p d an Ra dia si, BA TA N, 9-10 Ja nu ari 19 96 . h lm . 8 3-88. Su da rm o, H. , He liy an to , B ., Su wa rso , d an Su da rm ad ji. 20 06 .A ks esi po ten sia l j ara k pa ga r ( J a tr o p h a c u rc a s L .). P ro sid in g Lo ka ka rya II: St atu sT ek no log iT an am an Ja rak Pa ga r d i B og or, 29 N op em be r 2 00 6. Ba da n Pe ne liti an da n P en ge mb an ga n P ert an ian . P usa t Pe ne liti an da n P en ge mb an ga n P erk eb un an (Pu slit ba ng bu n). Su km ad jaj a, D. 2 00 3. Ja ti. B ala i p en eli tia n bio tek no log i d an su mb erd ay a g en eti c p ert an ian . htt p:/ /w ww .ge og le. co m/ sea rch =c ac he :zF k6 u-ecx aO J:b iog en .lit ba ng .de pta n.g o.i d ( dia kse s 2 8 Ju li 2 00 7).
