iv
ABSTRAK
DETEKSI FcγRIIb PADA STEM CELL YANG
DIISOLASI DARI LIPOASPIRATE
Albert, 2009. Pembimbing I : Caroline Tan Sardjono, dr. PhD.
Pembimbing II : Laella Kinghua Liana, dr. SpPA. MKes.
Aplikasi Mesenchymal stem cells (MSCs) dalam terapi regeneratif telah diselidiki secara luas. Belakangan ini diketahui bahwa MSCs memiliki sifat supresi sistem imun yang memungkinkan penggunaan MSCs untuk mengobati penyakit autoimun dan Graft versus host disease (GVHD). Namun, profil imunogenisitas dari sel ini belum sepenuhnya diketahui. Tujuan penelitian ini adalah untuk mendeteksi ekspresi receptor imunoglobulin G (dalam hal ini FcγRIIb) dari MSCs yang diisolasi dari lipoaspirate. FcγRIIb merupakan reseptor inhibisi, yang berikatan dengan Imunoglobulin G dengan afinitas rendah terhadap monomer IgG namun menunjukkan aviditas yang tinggi terhadap kompleks IgG. Pada sel inflamasi, IgG telah dilaporkan memiliki peran penting dalam menghambat respon inflamasi melalui sifat inhibisinya terhadap reseptor aktivasi lainnya. Keberadaan FcγR akan mengindikasikan interaksi yang mungkin akan terjadi antara MSCs dengan kompleks imun. Penelitian ini dilakukan dengan mempergunakan MSCs yang diisolasi dari lipoaspirate yang berasal dari operasi liposuction kosmetik elektif. Untuk mendeteksi kemungkinan adanya FcγRIIb, dilakukan RT_PCR (Reverse Transcriptase Polymerase Chain Reaction) pada mRNA dari MSCs. Hasil penelitian menunjukkan bahwa tidak terdapat amplicon FcγRIIb yang mengindikasikan tidak dimilikinya reseptor ini oleh MSCs.
Kata Kunci : Mesenchymal stem cells (MSCs), lipoaspirate, imunosupresi,
v
ABSTRACT
Fc
γ
RIIb DETECTION IN STEM CELL
ISOLATED FROM LIPOASPIRATE
Albert 0510084,2009 1st Supervisor: Caroline Tan Sardjono, dr. PhD.
2nd Supervisor: Laella Kinghua Liana, dr. SpPA. MKes.
Application of Mesenchymal stem cells (MSCs) in regenerative therapy has been explored extensively. Recently, it has been discovered that MSCs have immunosuppresive properties which facilitate the utilization of MSCs to treat autoimmune diseases and Graft versus host diseases (GVHD). However imunogenicity profile of these cells has not been fully characterized. The purpose of this study is to detect the immunoglobulin G receptor (i.e. FcγRIIb) expression on MSCs isolated from lipoaspirate. FcγRIIb is an inhibitory receptor for Immunoglobulin G with low affinity to monomeric IgG but exhibits high avidity towards complexed IgG. FcγRIIb on inflammatory cells has been reported to be important in inhibiting the inflammatory response through its inhibition properties toward the other activating receptors. The presence of FcγRs will indicate the possible interaction between MSCs to immune complexes. This study was conducted using MSCs isolated from lipoaspirate following an elective cosmetic liposuction surgery. To detect the possible presence of FcγRIIb, the mRNA from MSCs were subjected to RT_PCR (Reverese Transcriptase Polymerase Chain Reaction). The results shown that there was no amplicon for FcγRIIb which indicate the absence of this receptor.
Keywords: Mesenchymal stem cells (MSCs), lipoaspirate, immunosuppression,
viii
1.2 Identifikasi Masalah ...2
1.3 Maksud dan Tujuan...2
1.4 Manfaat Penelitian ...3
1.5 Kerangka Penelitian ...3
1.6 Metode Penelitian ...4
1.7 Lokasi dan Waktu ...4
BAB II TINJAUAN PUSTAKA 2.1. Stem cell (sel punca)...5
2.2. Mesenchymal stem cell (MSC) dan potensinya ...8
2.3. Stem cell mesenchymal yang diisolasi dari lipoaspirate ... 11
2.4. Reseptor imunoglobulin G FcγRIIb ... 13
BAB III METODE PENELITIAN 3.1. Metode penelitian ... 16
3.2. Alat dan bahan ... 17
3.2.1. Bahan ... 17
3.2.2. Alat ... 27
3.3. Cara kerja... 27
3.3.1.a Thawing PLA cells ... 27
3.3.2.b Thawing peripheral blood mononuclear cells (PBMCs)... 28
3.3.2. Analisis flowcytometry dengan menggunakan fluoroscent activated cell sorting (FACS) ... 28
3.3.3. Isolasi mRNA... 29
3.3.4. RT_PCR (Reverse transcriptase polymerase chain reaction ... 30
3.3.5. Deteksi kontaminan DNA dengan Polymerase Chain Reaction.... 33
ix
4.1. Seleksi MSC dari lipoaspirate ... 35
4.2. Analisa ekspresi CD45 pada processed lipoaspirate cells ... 37
4.3. Deteksi ekspresi mRNA FcγRIIb pada PLA cells ... 41
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN 5.1. Kesimpulan ... 49
5.2. Saran... 49
DAFTAR PUSTAKA... 50
LAMPIRAN FOTO ... 55
x
DAFTAR TABEL
Tabel 3.1 Primer yang digunakan ... 18
Tabel 3.2 Master Mix one step RT-PCR β-actin dan FcγRIIb ... 31
Tabel 3.3 Program one step RT-PCR β-actin ... 31
Tabel 3.4 Program one step RT-PCR FcγRIIb ... 32
Tabel 3.5 Program one step RT-PCR CD45 ... 32
Tabel 3.6 Master Mix PCR FcγRIIa... 33
Tabel 3.7 Program PCR FcγRIIa ... 34
Tabel 4.1 Ekspresi common stem cell surface marker pada mesenchymal stem cell ... 37
xi
DAFTAR GAMBAR
Gambar 2.1 Skema sederhana diferensiasi stem cell embrional...7
Gambar 4.1 Hasil kultur PLA... 36
Gambar 4.2 Struktur molekul FITC... 39
Gambar 4.3 histogram hasil analisa flow cytometry CD34 pada kultur PLA, PBMC, dan isotype control ... 40
Gambar 4.4 Visualisasi hasil one step RT-PCR CD45 dan FcγRIIb... 42
Gambar 4.5 Visualisasi hasil one step RT-PCR sampel UCB dengan primer FcγRIIb... 42
Gambar 4.6 Visualisasi hasil one step RT-PCR β-actin pada MSC... 45
Gambar 4.7 Visualisasi hasil PCR FcγRIIb pada MSC ... 46
- 55 -
LAMPIRAN FOTO
Biological safety cabinet
Inkubator kultur sel
Plate kultur MSCs
- 56 -
Mesin elektroforesis
Mesin PCR
Mesin flowcytometry
- 57 -
RIWAYAT HIDUP
Nama Lengkap : Albert Kota kelahiran : Bandung
Tanggal lahir : 6 September 1986 Riwayat Pendidikan :
TK Kristen Yahya, Bandung (1991-1993) SD Kristen Yahya, Bandung (1993-1999) SMP Kristen Yahya, Bandung (1999-2002) SMA Kristen Yahya, Bandung (2002-2005)
- 1 -
BAB I
PENDAHULUAN
1.1Latar Belakang
Penelitian stem cell (sel punca) menawarkan kesempatan yang menjanjikan untuk mengembangkan terapi medis untuk penobatan penyakit yang belum dapat disembuhkan dan memberikan menawarkan suatu jalan baru untuk memberikan jawaban dari pertanyaan-pertanyaaan mendasar dalam bidang biologi. Stem cell adalah sel belum terspesialisasi yang dapat memperbaharui diri secara tidak terbatas dan juga dapat berdiferensiasi menjadi sel dewasa dengan fungsi yang lebih terspesialisasi (Committee on the Biological and Biomedical Applications of Stem Cell Research, 2002). Telah diketahui bahwa sumber dari stem cell tidak hanya berasal dari sel embrionik, namun juga terdapat pada
jaringan janin dan dewasa pada sumsum tulang, jaringan lemak, otak, jaringan sendi, plasenta dan darah tali pusat, darah tepi, mata, hati, kulit, pulpa gigi, dan otot skeletal (http://stemcells.nih.gov/info/basics/basics6.asp, 2008). Berdasarkan sumber dan potensi diferensiasinya stem cell dapat dibagi menjadi hematopoietic, mesenchymal, dan neural dengan kemampuan diferensiasi jaringan yang
berbeda-beda.
Mesenchymal stem cell, yang dapat diisolasi dalam jumlah banyak dari
sumsum tulang dan jaringan lemak manusia (Zuk et al., 2002). Mesenchymal stem cell memiliki kemampuan diferensiasi yang luas, dapat ditoleransi tubuh karena imunogenisitasnya yang rendah (Le Blanc & Ringden 2007) dan memiliki kemampuan regulasi sistem imun (Dazzi & Timoshanko 2007), (Le Blanc, Ringden 2007). Selain itu Mesenchymal stem cell juga relatif mudah diisolasi dan tidak bermasalah dari segi etik karena diperoleh dari limbah hasil liposuction dan aspirasi sumsum tulang.
- 2 -
bahan transplan pada regenerative medicine maupun sebagai agen supresi system imun pada pengobatan penyakit autoimun dan graft versus host disease.
Walaupun demikian, masih banyak hal tentang imunogenisitas Mesenchymal stem cell yang belum diketahui sehingga memerlukan penelitian
lebih lanjut
Receptor Immunoglobulin G FcγRII, khususnya FcγRIIa memiliki peranan dalam timbulnya penyakit autoimun spontan dan inflamasi yang disebabkan kompleks imun (Sardjono et al., 2003), (Sardjono et al., 2005), (Pieterz et al., 2008) . Dimana telah diketahui bahwa terdapat dua jenis reseptor FcγRII, yaitu FcγRIIa yang memiliki sifat aktivasi system imun dan FcγRIIb menginhibisi kerja FcγRIIa secara kompetitif.
Meninjau bahwa mungkin terdapat hubungan antara kemampuan supresi imun MSCs dengan keberadaan reseptor FcγRIIb, maka penelitian tentang keberadaan Reseptor FcγRIIb pada Mesenchymal Stem Cell, khususnya yang diisolasi dari sel lemak menjadi sangat menarik.
1.2 Identifikasi masalah
Apakah Mesenchymal Stem Cells (MSCs) yang diisolasi dari lipoaspirate mengekspresikan molekul FcγRIIB?
1.3Maksud dan Tujuan
1.3.1. Maksud
Maksud dari penelitian ini adalah untuk memperoleh informasi mengenai interaksi Mesenchymal stem cell (MSCs) terhadap imunoglobulin G melalui molekul FcγRIIb.
- 3 -
Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mendeteksi ekspresi molekul FcγRIIb pada Mesenchymal Stem Cell (MSCs) yang diisolasi dari lipoaspirate
1.4Manfaat Penelitian
Karya tulis ini diharapkan dapat dijadikan penelitian pendahuluan bagi para peneliti yang akan melakukan penelitian lebih lanjut mengenai imunogenisitas dari Mesencymal stem cell yang diisolasi dari lipoaspirate. Karya tulis ini juga diharapkan dapat memberikan informasi tambahan bagi penyusunan strategi cell based therapy yang mempergunakan mesenchymal stem cell.
1.5Kerangka Penelitian
Selain dapat dipakai untuk bahan transplan dalam terapi regeneratif karena plastisitasnya, MSC juga memiliki sifat untuk imunomodulasi berupa antiproliferasi sel limfosit B dan T, NK cell, sel dendritik (Tyndall et al., 2005), dan sifat antiinflamasi (guo et al., 2007). Hal tersebut dapat menjelaskan hasil temuan dari para peneliti mengenai potensi MSC untuk menangani penyakit autoimun, theraphy-resistant severe acute graft versus host diseases, dan pengobatan untuk rejeksi organ allograf (Le Blanc & Ringden 2007).
FcγRIIa dan FcγRIIb merupakan reseptor imunoglobulin G yang memiliki affinitas tinggi terhadap kompleks imun (Gavin, Hullet & Hogarth, 1998). Dari penelitian pada mencit transgenik-Fcγ receptor IIa, telah diketahui bahwa FcγRIIa memiliki peranan penting dalam patogenesa spontaneous multisystem autoimmune disease dan hipersensitivitas terhadap inflamasi yang diinduksi oleh
- 4 -
keberadaan FcγRIIb pada MSC mungkin dapat menjelaskan mekanisme modulasi sistem imun yang telah dijelaskan di atas.
Di Nicola (2002) mengungkapkan bahwa sifat imunosupresi MSC terhadap sel limfosit T bersifat antigen independent. Keberadaan reseptor kompleks imun IgG mungkin dapat memberikan suatu bukti yang dapat memperkuat atau menyanggah pernyataan tersebut.
Mesenchymal stem cell yang diisolasi dari lipoaspirate memiliki
keunggulan dibandingkan dengan MSC yang diisolasi dari aspirasi sumsum tulang karena selain isolasinya yang relatif mudah, MSC dari lipoaspirate memanfaatkan limbah sisa liposuction yang sudah tidak dipergunakan lagi.
Hal-hal yang dipaparkan di atas membuat peneliti tertarik untuk meneliti tentang keberadaan reseptor imunoglobulin FcγRIIb pada mesenchymal stem cell yang diisolasi dari lipoaspirate dimana informasi yang didapat kemudian mungkin berguna untuk perkembangan penelitian mengenai stem cell guna menyusun strategi terapi lebih lanjut.
1.6 Metode penelitian
Penelitian ini laboratory experimental ini merupakan suatu caara untuk mendeteksi apakah Mesenchymal Stem Cell (MSCs) yang diisolasi dari lipoaspirate mengekspresikan molekul FcγRIIb.
1.7 Lokasi dan Waktu Penelitian
- 49 -
BAB V
KESIMPULAN DAN SARAN
5.1 Kesimpulan
Belum dapat dipastikan apakah sampel PLA yang dianalisa mengekspresikan FcγRIIb dalam jumlah kecil atau tidak mengekspresikan gen tersebut sama sekali. Untuk memastikan hal tersebut perlu dilakukan pemeriksaan lanjutan dengan mempergunakan antibodi spesifik terhadap FcγRIIb ataupun dengan functional assay.
5.2 Saran
5.2.1 Untuk memenuhi syarat publikasi internasional, perlu dilakukan optimasi program PCR untuk mengindari terbentuknya multiple band pada hasil visualisasi PCR karena pengikatan primer pada tempat aspesifik.
5.2.2 Pada penelitian berikutnya sebaiknya mempergunakan jumlah sampel PLA cell yang lebih banyak untuk meningkatkan validitas penelitian.
- 50 -
DAFTAR PUSTAKA
Baddoo M., Hill K., Gaupp D., Hughes C., Kopen G., Phinney D.G., 2003, Characterization of mesenchymal stem cells isolated from murine bone marrow by negative selection. J Cell Biochem, 89: 1235-49.
Billadeau D.D. and Leibson P., 2002, ITAMs versus ITIMs: striking a balance during cell regulation. J. Clin. Invest. 109(2): 161-8.
Brittan M., Guppy N.J., Fellous T.G., and Alison M.R. 2007. The generation of pancreatic beta cells from stem cells: intra- and extrapancreatic sources in Habib N.A., Levičar N., Gordon M.Y., Long J., and Fisk N. Stem cell repair and regeneration 2nd vol. London, UK: Imperial College Press. Callanan M.B., Le Baccon P., Mossuz P., Duley S., Bastard C., Hamoudi R., et
al., 2000, The IgG Fc receptor, FcγRIIB, is a target for deregulation by chromosomal translocation in malignant lymphoma. PNAS, 1(97): 309-314
Chamberlain G., Fox J., Ashton B., and Middleton J., 2007. Mesenchymal stem cells. Their phenotype, differentiation capacity, Immunological features and potential for homing. Stem Cells.
Charbord P., 2004. Stromal support of hematopoiesis in Sell S: Stem cell handbook. Totowa, New Jersey, USA: Humana Press
Clarke E., 2004. Culture of human and mouse mesenchymal cells in Helgason C.D. and Miller C.L. Methods in molecular biologyTM vol 290: Basic cell culture protocols, 3rd Ed. Totowa, New Jersey, USA: Humana Press.
Commitee on the Biological and Biomedical Appications of Stem Cell Research. 2002. Stem cells and future of regenerative medicine. Washington, D.C.: National Academy Press.
Daëron M. and Heyman B. 1998. FcγR and IgG-mediated negative regulation of immune responses in J.G.J. van de Winkel and P.M. Hogarth: The
immunoglobulin receptors and their physiological and pathological roles in immunity. Dordrecht, The Netherlands: Kluwer Academic Publisher.
Daëron M., and Lesourne R., 2006. Negative signaling in Fc receptor complexes. Advances in immunology. 89: 39-86.
- 51 -
N. Stem cell repair and regeneration 2nd vol. London, UK: Imperial College Press.
De Bari C., Pitzalis C., and Dell’Accio F. 2007. Joint tissue engineering in Habib N.A., Levičar N., Gordon M.Y., Long J., and Fisk N. Stem cell repair and regeneration 2nd vol. London, UK: Imperial College Press.
Dennis J.E. and Caplan A.I., 2004. Bone marrow mesenchymal stem cells in Sell S: Stem cell handbook. Totowa, New Jersey, USA: Humana Press
Di Nicola M., Carlo-Stella C., Magni M., Milanesi M., Longoni P.D., Matteucci P., et al., 2002. Human bone marrow stromal cell suppress T-lymphocyte proliferation induced by cellular or nonspesific mitogenic stimuli. Blood, 10(99): 3838-43
Dicker A., Le Blanc K., Åström G., van Harmelen V., Götherström C., Blomqvist L., Arner P., et al., 2005, Functional studies of mesenchymal stem cels derived from adult human adipose tissue. Experimental Cell Research 2005, 308: 283-90.
Dominici M., Le Blanc K., Mueller I., Slaper-Cortenbach I., Marini F.C., Krause D.S. et al., 2006, Position paper, Minimal Criteria for defining multipotent mesenchymal stromal cells. The international society for cellular therapy position statement. Cytotherapy, 4(8): 315-7.
Doyonnas R., and Blau H.M., 2004. What is the future for stem cell research? in Sell S: Stem cell handbook. Totowa, New Jersey, USA: Humana Press Evans N.D. and Polak J.M. 2007. The potential of stem cells in tissue engineering
in Habib N.A., Levičar N., Gordon M.Y., Long J., and Fisk N. Stem cell repair and regeneration 2nd vol. London, UK: Imperial College Press. Fridman W.H. 1998. Introduction to the Field in J.G.J. van de Winkel and P.M.
Hogarth: The immunoglobulin receptors and their physiological and pathological roles in immunity. Dordrecht, The Netherlands: Kluwer Academic Publisher.
Gavin A., Hulett M., and Hogarth P.M. 1998. Molecular basis for the interaction of Fc receptors with immunoglobulins in J.G.J. van de Winkel and P.M. Hogarth: The immunoglobulin receptors and their physiological and pathological roles in immunity. Dordrecht, The Netherlands: Kluwer Academic Publisher.
- 52 -
Gomillion C.T., Burg K.J.L.,2006, Stem cells and adipose tissue engineering. Biomaterials 2006, 27: 6052-63.
Götherström C, Guillot P.V., and Fisk N.M. 2007. Fetal mesenchymal stem cells are more primitive than adult mesenchymal stem cells in Habib N.A., Levičar N., Gordon M.Y., Long J., and Fisk N. Stem cell repair and regeneration 2nd vol. London, UK: Imperial College Press.
Götherström C., Ringdén O., Tammik C., Zetterberg E., Westgren M., Le Blanc K., 2004, Immunologic properties of human fetal mesenchymal stem cells. Am. J. Obgyn. 2004, 190: 239-45.
Guo J., Lin G.S., Bao C.Y., Hu Z.M., and Hu M.Y., 2007, Anti-inflammation role for mesenchymal stem cells transplantation in myocardial infarction. Inflammation 2007, 30: 97-104.
Isnardi I., Lesourne R., Bruhns P., Fridman W.H., Cambier J.C., and Daëron M., 2004. Two distinct tyrosine-based motifs enable the inhibitory receptor FcγRIIb to cooperatively recruit the inositol phosphatases SHIP1/2 and the adapters Grb2/Grap. J. Biol. Chem., 50(279): 51931-8.
Kern S., Eichler H., Stoeve J., Klüter H., Bieback K., 2006, Comparative analysis of mesenchymal stem cells from bone marrow, umbilical cord blood, or adipose tissue. Stem Cells 2006, 24: 1294-31.
Le Blanc K., Rasmusson I., Sundberg B., Götherström C., Hassan M., Uzunel M., et al., 2004, Treatment of severe acute graft-versus-host disease with third party haploidentical mesenchymal stem cells. Lancet, 363: 1439-41. Le Blanc K., Ringdén O., 2002, Immunobiology of human mesenchymal stem
cells and future use in hematopoietic stem cell transplantation. Biology of Blood and Marrow Transplantation, 11:321-334.
Le Blanc K., Ringdén O., 2007, Immunomodulation by mesenchymal stem cells and clinical experience. J intern med 2007, 262: 509-525.
Le Blanc K., Samuelsson H., Remberger M., Sundberg B., Ardvidson J., Ljungman P., et al.2007, Transplantation of mesenchymal stem cell to enchance engraftment of hematopoietic stem cells, Leukemia 2007, 21: 1733-1738.
- 53 -
Le Blank K., Tammik C., Rosendahl K., Zetterberg E., and Ringdén O, 2003, HLA expression and immunologic properties of differentiated and undifferentiated mesenchymal stem cells, Exp. Hematol. 31: 890-6. McKenzie S.E., Indik Z.K., and Schreiber A.D. 1998. Phagocyte Fc receptors for
IgG in J.G.J. van de Winkel and P.M. Hogarth: The immunoglobulin receptors and their physiological and pathological roles in immunity. Dordrecht, The Netherlands: Kluwer Academic Publisher.
Meng L., and Zhong C.H. 2007. Mesenchymal stem cells: Biology and clinical potential in type 1 diabetes therapy. JCMM*. (accepted work that has been peer-reviewed and approved for publication in the Journal of Cellular and molecular Medicine, but has yet to undergo copy-editing and proof correction)
Mi H.M., Sun Y.K., Yeon J.K., Su J.K., Jae B.L., Yong C.B., et al., 2006, Human adipose tissue-derived mesenchymal stem cells improve postnatal
neovascularization in a mouse model of hindlimb ischemia. Cell Physiol Biochem 2006, 17: 279-290.
National Institutes of Health Stem Cell Information. 2002. Stem cell basics. http://stemcells.nih.gov/info/basics/-basics6.asp, 10 November 2008. Pieterz G., Mottram P.L., van de velde N., Sardjono C.T., Esparon S., Ramsland
P., et al., 2008. Inhibition of destructive autoimmune arthritis in
FcgammaRIIa transgenic mice by small chemical entities. Immunol. Cell biol 2008. 1-10
Pittenger M.F., Mackay A.M., Beck S.C., Jaiswal R.K., Douglas R., Mosca J.D., et al., 1999, Multilineage potential of adult human mesenchymal stem cells. Science 1999, 284:143-7.
Rasmusson I., Le Blanc K., Sundberg B., and Ringdén O., 2007, Mesenchymal stem cells stimulate antibody secretion in human B cells. Scandinavian Journal of Immunology 2007, 65: 336-43
Rasmusson I., Ringdén O., Sundberg B., and Le Blanc K., 2005, Mesenchymal stem cells inhibit lymphocyte proliferation by mitogens and alloantigens by different mechanisms. Experimental Cell Research 2005, 305: 33-41. Rasmusson I., Uhlin M., Le Blanc K., and Levitsky V., 2007. Mesenchymal stem
cells fail to trigger efector functions of cytotoxic T lymphocytes. J. Leucoc. Biol. 82: 887-893;
Sardjono C.T., Mottram P.L., and Hogarth P.M., 2003, The role of FcγRIIa as an inflammatory mediator in rheumatoid arthritis and systemic lupus
- 54 -
Sardjono C.T., Mottram P.L., van de Velde N.C., Powell M.S., Power D., Slocombe R.F., 2005, Development of spontaneous multisystem
autoimmune disease and hypersentivity to antibody-induced inflammation in Fcγ Receptor IIa-transgenic mice. Arthritis & Rheumatism, 10(52): 3320-9.
Sell S., 2004, Stem cells what are they? Where do they come from? Why are they here? When they go wrong? Where are they growing? in Sell S: Stem cell handbook. Totowa, New Jersey, USA: Humana Press
Sundin M., Ringdén O., Sundberg B., Nava S., Götherström C., Le Blanc K., 2007, No alloantibodies against mesenchymal stromal cells, but presence of anti-fetal calf serum antibodies, after transplantation in allogeneic hematopoietic stem cell recipients. Haematol, 92(09): 1208-15.
Takai T. And Ravetch J.V. 1998. Fc receptor genetics and the manipulation of genes in the study of FcR biology: The immunoglobulin receptors and their physiological and pathological roles in immunity. Dordrecht, The Netherlands: Kluwer Academic Publisher.
Tyndall A., Walker U.A., Cope A., Dazzi F., De Bari C., Fibbe W. Et al., 2007. Immunomodulatory properties of mesenchymal stem cells: a review based on an interdisciplinary meeting held at the Kennedy Institute of
Rheumatology Division, London, UK, 31 October 2005. Arthritis research & theraphy, 9(301):1-10
Yoder M.C., Laura E.M., Prater D., Krier T.C., Mroueh K.N., Li F., et al., 2006, Plenary paper, Re-defining endothelial progenitor cells via clonal analysis and hematopoietic stem/progenitor cell principals. Blood. 109(5): 1801–09 Zuk P.A., Zhu M., Ashjian P., De Ugarte D.A., Huang J.I., Mizuno H., et al., 2002
, Human adipose tissue is a source of multipotent stem cells. Molecular Biology of the Cell 2002, 13: 4279-95.
