# Ko re sp o n d e n si: Balai Rise t Per ikan an Bu d id aya Air Tawar d an Pe n yu lu h an Pe r ikan an . Jl. Se m p u r No . 1 , Bo g o r 1 6 1 5 4 , In d o n e sia. Te l. + (0 2 5 1 ) 8 3 1 3 2 0 0
E-m ail: l usi ast ut i _ 6 1 @ yahoo.co.i d
Tersedia online di: ht t p://ej ournal-balit bang.kkp.go.id/index.php/j ra
EFEKTIVITAS KOM BINASI PROBIOTIK M IKROENKAPSULASI M ELALUI PAKAN UNTUK PENGENDALIAN PENYAKIT M OTILE AEROM ONADS SEPTICEM IA
PADA IKAN LELE, Clarias gariepinus
Angela M ariana Lusiastuti#, Septyan Andriyanto, dan Reza Samsudin
*) Balai Rise t Pe rikanan Budidaya Air Tawar d an Penyu luhan Pe rikanan
(Naskah dit erima: 25 Juli 2016; Revisi final: 10 Juli 2017; Diset ujui publikasi: 11 Juli 2017)
ABSTRAK
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui efektivitas kombinasi probiotik mikroenkapsulasi melalui pakan dalam pengendalian penyakit pada ikan lele, Clarias gariepinus. Penelitian dilakukan mulai dari penyiapan kombinasi probiotik Bacillus cereus ND2 dan Staphylococcus lent us L1K, mikroenkapsulasi probiotik, uji probiotik mikroenkapsulasi, serta uji dosis secara in vivo. Proses mikroenkapsulasi menggunakan BUCHI mini spray dryer d en gan su hu inlet 131°C-133°C dan suhu out let 65°C-70°C. Pakan yang digun akan ad alah p akan buatan dengan kadar protein 38% yang dicampur dengan probiotik mikroenkapsulasi sesuai dengan dosis perlaku an d an d iberi pu tih telu r 2% seb agai binder. Perlaku an yang dilakukan adalah memb and ingkan secara in vivo probiotik mikroenkapsulasi (PM) dan probiotik non-mikroenkapsulasi (PNM), dan dilanjutkan pengujian dosis melalui pakan untuk memperoleh dosis terbaik dari aplikasi probiotik mikroenkapsulasi. Parameter pengamatan berupa tingkat sintasan, biomassa, kadar hematokrit, hemoglobin, respirat ory burst act ivit y, dan t ot al bact erial count. Hasil penelitian menunjukkan bahwa suplementasi kombinasi probiotik mikroenkapsulasi Bacillus cereus ND2 dan St aphylococcus lent us L1K pada pakan lebih efektif, dan dengan dosis 2% menunjukkan hasil yang lebih baik dalam meningkatkan sintasan hingga 97,33%, biomassa dan respons imun (NBT assay, hematocrit, hemoglobin) ikan lele terhadap A. hydrophila.
KATA KUNCI: mikroenkapsulasi; probiotik; pakan; in vivo; ikan lele
ABSTRACT: The effectivity combination of microencapsulated probiotic through diet to control of motile aeromonads septicemia disease in catfish, Clarias gariepinus. By: Angela M ariana Lusiastuti, Septyan Andriyanto, and Reza Samsudin
This st udy was aimed t o know t he effect ivit y of microencapsulat ed probiot ic combinat ions administ ered t hrough diet t o cont rol mot ile aeromonads sept icemia disease in cat fish (Clarias gariepinus). The research st ages consist ed of preparat ion probiot ics, microencapsulat ion of probiot ics and probiot ic microencapsulat ion t est ing in vivo. BUCHI mini spray dryer was used in t he microencapsulat ion process wit h inlet t emperat ure ranged bet ween 131°C-133°C and out let t emperat ure ranged bet ween 65°C-70°C. The diet s used in t he research were pellet ed feeds wit h a prot ein cont ent of 38% and mixed wit h different dosages of microencapsulat ed probiot ics. Egg albumen (2%) was used to bind t he mixt ure. The effect ivit y of microencapsulat ed and non-microencapsulat ed feeds was compared in order t o find an opt imum microencapsulation dosage. The observed parameters were survival rat e, biomass, hemat ocrit , hemoglobin, respirat or y burst act ivity, and t otal bact erial count . The result s showed t hat t he supplement at ion of microencapsulated probiot ic Bacillus cereus ND2 and Staphylococcus lentus L1K in t he diets was more effect ive at a dose of 2%, showing bet t er sur vival rat e (97.33%), biomass gain, and immune responses (NBT assay, hemat ocrit , hemoglobin) against A. hydrophila in cat fish Clarias gariepinus.
PENDAHULUAN
Pe n gg u n a a n p r o b io t ik m e r u p a ka n s a la h s at u m et o d e p e nge n dali p e n yakit ikan yan g am an d an r am ah lin g k u n ga n . Pe n gg u n a an p r o b io t ik d a p a t m e n g u r a n g i p e n g g u n a a n a n t i-m ik r o b a s e p e r t i ant ibio t ik, di mana pro bio t ik bert indak sebagai agen bio ko nt ro l yan g dap at me ngurangi po p ulasi suat u jenis pat ogen (Cruz et al., 2012). Penggunaan probio tik mult ispesies diket ahui memiliki efekt ivit as yang lebih t inggi dalam menghambat penyebaran beberapa jenis penyakit bakt erial (Tho mas & Chho rn, 2011). Hasibuan (2013) melapo rkan bahwa ko mbinasi bakt eri probio tik Bacillus cereus ND2 dan St aphylococcus lent us L1K dalam pakan dapat meningkat kan respo ns imun dan dapat mengurangi tingkat kematian ikan akibat infeksi Strep-t ococcus agalacStrep-t iae.
Me n u r u t Ir ib ar r e n et al. (2 0 1 2 ), p e n g g u n a a n p r o b io t ik m e n ja d i s o lu s i u n t u k m e n g h a s ilk a n pert umbuhan dan efisiensi pakan, mengurangi biaya pro duksi dan pada akhirnya dapat mengurangi beban lin gku n gan kare n a aku m u lasi lim b ah d i p e rairan . Pr o b io t ik d a la m b e n t u k k u lt u r s e l m e m ilik i ket erbat asan dalam masa penyimpanan dan mudah rusak o leh pengaruh lingkungan (Wein breck et al., 2010). Pro biot ik harus mampu bertahan selama pro ses met abo lisme o leh asam lambung, enzim, dan garam empedu yang t erdapat dalam usus. Berdasarkan hal mikro enkapsulasi (Jafari et al., 2008).
Teknik mikro enkapsulasi yang banyak digunakan secara ko mersial ant ara lain spray drying, air suspen-sion coat ing, spray cooling, dan spray chilling (ext rusion), cent rifugal ext rusion, rot at ional suspension separat ion, inclusion complexing (Vict o r & Heldman, 2001). Teknik spray drying merupakan t eknik yang sering diterapkan pada b akt e ri. Mikro e nkap su lasi m erup akan t eknik penyalutan suat u bahan sehingga bahan t ersebut dapat d ilin d u n gi d ar i p e n g ar u h lin gk u n ga n ya n g t id ak mengunt ungkan sepert i panas dan bahan kimia (Vic-t o r & He ld m an , 2 0 0 1 ). Mikr o e n kap s u lasi b a n yak d ia p lik a s ik a n p a d a p r o d u k p a n g a n u n t u k memperpanjang wakt u penyimpanan pro bio t ik dan via b ilit a s s e l p r o b io t ik d a la m s e b u a h b ea d s m ik r o k a p s u l (Kr a s a e k o o p t et al., 2 0 0 3 ), t e t a p i mikro enkapsulasi pro bio t ik dalam akuakult ur masih belum banyak dit elit i (Nimrat et al., 2012). Munaeni et al. (2014) menyat akan bahwa pemberian mikro kapsul simbio t ik Bacillus sp. NP5 dan o ligo sakarida dengan
frekuensi yang berbeda memberikan pengaruh yang nyat a t erhadap laju pert umbuhan dan respo ns imun pada udang vaname yang t erinfeksi Vibrio harveyi.
Pe n e lit ia n in i b e r t u ju a n u n t u k m e n g e t a h u i efekt ivit as ko mbinasi pro bio t ik melalui pakan dalam pengendalian penyakit ikan lele Clarias gariepinus.
BAHAN DAN M ETODE
Penelit ian ini dilaksanakan di Inst alasi Penelit ian dan Pengembangan Pengendalian Penyakit Ikan Depo k, Balai Penelit ian dan Pengembangan Budidaya Air Tawar (BPPBAT) Bo go r pada bulan Agust us-Okt o ber 2015. Ikan lele yang digunakan adalah st rain Mutiara dari Balai Penelit ian dan Pemuliaan Ikan Sukamandi. Penelit ian in i d ila k u k a n m u la i d a r i p e n yia p a n p r o b io t ik , m ik r o e n k a p s u la s i p r o b io t ik , d a n u ji p r o b io t ik t ermikro enkapsulasi secara in vivo.
Penyiapan Bakt eri Probiotik
Pakan
Pakan yang digunakan dalam penelit ian ini adalah pakan buat an dari Labo rat orium Nutrisi Balai Penelitian dan Pengembangan Budidaya Air Tawar, Bo go r dengan kadar pro t ein 38% (Tabel 1). Pencampuran pakan dan pro bio t ik menggunakan put ih t elur 2% sebagai binder, set elah it u , dikering-angin kan dan disimpan dalam lemari pendingin bersuhu 4°C.
Perlakuan dan Pemeliharaan Hewan Uji
Kegiat an ini ada dua t ahap, t ahap pert ama adalah aplikasi ko mbinasi pro bio t ik mikro enkapsulasi dan t id ak d im ik ro e n ka p s u las i. Ad a p u n ik an u ji yan g digunakan pada penelit ian ini adalah ikan lele st rain Mut iara sebanyak 30 eko r/akuarium dengan bo bot 10-20 g. Akuarium yang digunakan ukuran 60 cm x 70 cm x 40 cm dengan vo lume air 60 L. Sebelum dit erapkan p e rlaku an, ikan u ji diad ap t asikan t e rleb ih d ah u lu selama t ujuh hari. Ikan-ikan t ersebut diberi perlakuan: p e m b e ria n p aka n d e n gan p e n am b ah an p ro b io t ik mikro enkapsulasi 2% (PM), pemberian pakan dengan penambahan pro bio t ik t idak dimikro enkapsulasi 2% (PNM), pelet t anpa pro bio t ik mikro enkapsulasi (K+ ) dan pelet t anpa pro bio t ik dan mikro enkapsulasi (K-). Masing-masing perlakuan diulang t iga kali. Pemberian pakan dilakukan sebanyak t iga kali sehari pada pagi (08.00), siang (12.00), dan so re hari (16.00) secara ad sat iat ion selama 40 hari masa pemeliharaan.
Ta h a p ke d u a a d a la h o p t im a s i d o s is a p lika s i pro biot ik melalui pakan unt uk mempero leh dosis yang t ep at . Dalam p e ngujian d o sis pe rlaku an p ro b io t ik dengan K+ dan K- pemberian pakan tanpa penambahan p r o b io t ik m ik r o e n k a p s u la s i. Se m e n t a r a u n t u k
p e r la k u a n la in n ya a d a la h (A) d o s is p r o b io t ik m ik r o e n k a p s u la s i 0 ,5 %; (B) d o s is p r o b io t ik m ik r o e n k a p s u la s i 1 %; (C) d o s is p r o b io t ik m ik r o e n k a p s u las i 2 %, Ma s in g -m as in g p e rla k u a n diulang t iga kali. Lama pemeliharaan ikan lele unt uk uji o pt imasi do sis pro bio t ik mikro enkapsulasi adalah 14 hari.
Uji Tantang Bakt eri
Uji t antang dilakukan dengan menginfeksikan ikan lele pada perlakuan K+ , A, B, C, dengan bakt eri A. hydrophila 107 cfu/mL melalui injeksi secara int
raperi-t o n eal, sedangkan K- diin jeksi den gan laruraperi-t an PBS. Paramet er yang diamat i pada t ahapan penelit ian ini adalah hemat o krit , hemo glo bin, bio massa, dan t ot al bact erial count. Pengamatan sint asan pasca uji t ant ang dilaku kan dengan m engamat i ke mat ian set iap hari selama 14 hari.
Ikan lele pada perlakuan PN, PNM, dan K+ hasil pemeliharaan selama 42 hari, selanjutnya diuji t ant ang dengan bakt eri A. hydrophila dengan kepadat an 108
cfu mL-1 melalui penyunt ikan intraperit oneal sebanyak
0,2 m L per eko r me nggun akan t ub erculine syringe st eril. Sedangkan ikan lele pada perlakuan K- diinjeksi dengan PBS (pho sphat e buffer saline) dengan do sis yang sama de ngan di at as. Masing-masing 90 eko r ikan per perlakuan (30 eko r per akuarium at au t iga ulangan pe r pe rlakuan ) dipelihara dan t e t ap dibe ri pakan perlakuan selama 14 hari pasca uji t ant ang.
Paramet er yang diamat i pada uji in vivo ini adalah sint asan, sist em imun n o n-spesifik meliput i respira-t or y bursrespira-t acrespira-t ivirespira-t y (Nit ro Blue Tet razo lium, NBT assay), kad ar h e mat o krit , he m o glo bin , d an t ot al bact er ial count.
Tabel 1. Ko mpo sisi pakan uji Table1. The composit ion of t est diet s
Bahan pakan (Ingr edients) Kom posi si (Composition) (g/100 g)
Tep u ng ikan (Fish meal) 1 7 .5
Bu n g kil ked elai (Soybean meal) 2 0
Tep u ng tu lan g d an d ag in g (M eat and bone meal) 1 5
Tep u ng ud an g (Shrimp meal) 1 5
Ded ak p ad i (Rice bran) 1 0
Ded ak p ollard (Pollard) 1 0
Min yak ikan (Fish oil) 3
Min yak jag u n g (Corn oil) 3
Vitamin (Vit amin premix) 2
Min eral (M ineral premix) 1.5
Tap io ka (Tapioca) 3
Akt ivitas Respiratory Burst
Uji akt ivit as respirat ory burst menggunakan reagen Nit ro Blu e Te t razo liu m (NBT) b erdasarkan m et o d e Seco m b es (19 9 0). Darah d ari ikan samp el d iam bil
sebanyak 50 µL dimasukkan dalam m i cr op l at e,
d iin ku b asi selam a sat u jam su h u 37 °C, ke m u dian
supernatan dibuang dan dicuci PBS 50 µL diulang sebanyak tiga kali, ditambahkan 50 µL NBT 0,2%
diinkubasi selama sat u jam pada suhu 37°C. Fiksasi
metanol 100% (50 µL) 2-3 menit lalu dibilas dengan metanol 30% (50 µL) tiga kali dan dikering-udarakan, kemudian ditambah KOH 60 µL + DMSO 70 µL dan
kemudian dicek opt ical density-nya menggunakan ELISA Reader dengan panjang gelo mbang 540 nm.
menghit ung po pulasi sel pro bio t ik ND2 CefR
dan TSA
+ Tet 100 µg mL-1 unt uk menghit ung p o pulasi sel
pro bio t ik L2k TetR. Perhit ungan po pulasi sel pro bio t ik
dihit ung dengan cara Tot al Plat e Count (TPC).
Kadar Hemat okrit
He m a t o k r it m e r u p a k a n p e r s e n t a s e vo lu m e erit ro sit dalam darah ikan. Kadar hemat o krit diukur me nu rut And erso n & Siwicki (199 5), yait u de ngan menggunakan t abung mikro hemat o krit yang berupa pipa kapiler berlapis heparin. Pengukuran dilakukan dengan membandingkan bagian darah yang mengendap (a) dengan seluruh bagian darah yang ada dalam tabung mikro he mat o krit (b ). Kad ar hem at o krit din yat akan se bagai persen (%) vo lum e p adat an sel darah yang dihit ung dengan cara: He = a/b x 100%.
Kadar Hemoglobin
Kadar hemo glo binn diukur menggunakan met o de Sahli dengan Sahlino met er (Wedemeyer & Yasut ake, 1 9 7 7 ) d e n gan cara m e n gisi t ab u n g s ah lin o m e t e r d e n g a n la r u t a n HCl 0 ,1 N s a m p a i an g k a 1 0 la lu menempat kan t abung t ersebut di ant ara dua t abung d en gan warn a st and ar. Darah ikan dim asukkan ke dalam t abung sahli sebanyak 0,02 mL dengan pipet sahli. Lalu didiamkan t iga menit . Akuades kemudian dit ambahkan dengan pipet t et es sedikit demi sedikit sambil diaduk sampai warnanya t epat sama dengan warna st andar. Kadar hemo glo bin dinyat akan dalam persen (%).
Analisis Data
Da t a s in t a s a n ya n g d ip e r o le h d ia n a lis is
kepercayaan 95%, dan dat a yang berbeda nyat a diuji menggunakan uji lanjut Duncan. Dat a bio massa, NBT assay, kadar hemat o krit , hemo glo bin, dan t ot al bact e-dengan penyalut gabungan whey dan maltodekst rin dan PNM menunjukkan adanya perbedaan yang signifikan Tabel 2). Hal ini mengindikasikan bahwa pemberian pro bio tik mikro enkapsulasi lebih efekt if dibandingkan p r o b io t ik t a n p a d im ik r o e n k a p s u la s i. Pr o s e s mikro enkapsulasi menghasilkan pro bio t ik yang st abil sehingga dapat memperbaiki daya hidupnya selama pro ses processing, penyimpanan dan di dalam saluran cerna.
Mikro enkapsulasi merupakan t eknik pengemasan b a h a n d a la m b e n t u k p a r t ik e l m ik r o d a n n a n o . Mikro enkapsulasi dapat melindungi bahan sensit if dari kelembaban, panas, cahaya at au o ksidasi (Jafari et al., 2008). Zubaidah (2014) menyat akan bahwa penent uan bahan penyalut t erbaik t idak hanya didasarkan pada uji viabilit as mikro kapsul saja, t et api juga didasarkan pada t ekst u r m ikro kapsul pada akh ir pen gam at an. Bah an p e n yalu t m alt o d e kst rin sa ja t id ak m a m p u mempert ahankan t e kst ur mikro kapsul yang berupa serbuk, berbeda den gan bahan pe nyalut gabun gan ant ara whey d an m alt o dekst rin. Men urut Zu baid ah (2 0 1 4 ), b a h a n p e n ya lu t g a b u n g a n w hey d a n m alt o d e k st r in m a m p u m e m p e r t a h an k an t e ks t u r m ik ro ka p su l p ro b io t ik h in gg a ak h ir p e n g am at an selama 40 hari dan rendemen yang dihasilkan juga lebih t in ggi.
Akt ivit as p ro du ksi o ksigen rad ikal su pe ro ksid a (O
-2) pada Akt ivit as fago sit o sis dapat dilihat dengan
Tabel 2. Sint asan ikan lele Clarias gariepinus dengan pemberian pro bio t ik mikro enkapsulasi dan tanpa mikro enkapsulasi dalam pakan sebelum dan sesudah uji tantang dengan A. hydrophila
Table 2. Survival rat e of cat fish Clarias gariepinus fed wit h microencapsulat ed and non-mi-croencapsulat ed probiot ic applicat ions before and aft er challenge t est with A. Hydrophila
Has il a n alis is NBT t e r h a d ap ika n yan g d ib e r i pro b io t ik me nu njukkan su at u pe ningkat an ju mlah o ksidat if radikal jika dibandingkan dengan ko nt ro l ne gat if m aupu n ko nt ro l po sit if yan g d iuji t ant an g. Semakin tinggi nilai NBT maka kemampuan sel fagosit dalam akt ivit as respirat ory burst semakin t inggi. Hal ini juga men unjukkan bahwa kedua jen is pro bio t ik baik PM maupun PNM bersifat imuno st imulan yait u mampu mengakt ivasi neut ro fil dan sel-sel fago sit ik yang lain unt uk mempro duksi o ksigen radikal yang lebih t inggi sehingga dapat memberikan ket ahanan t erhadap penyakit .
Do s is p e m b e rian p ro b io t ik m ik ro e n ka p s u las i S. l ent us p a d a p a k a n s e b e s a r 0 , 5 %; 1 %; d a n 2 % sebelumnya pernah dilapo rkan oleh Rahmawat i (2015). Pe m b e r ian p r o b io t ik m ik ro e n k a p s u la s i S. l ent us t ersebut menunjukkan pengaruh yang nyat a t erhadap laju pert umbuhan dan efisiensi pakan pada ikan nila yan g t e rin fe ksi S. agalact iae. Pad a Tab el 4 t e rlihat b a h w a p e n g gu n a an p ro b io t ik m ik r o e n k ap s u la s i
berbagai do sis meningkat kan nilai hemat o krit darah sampai hari ke-28. Hemat o krit merupakan persent ase vo lume erit ro sit at au sel darah merah dalam darah ikan. Erit ro sit berperan dalam pro ses pengangkut an o ksigen di dalam t ubuh ikan. Perubahan hemat o krit dalam darah t erjadi karena adanya perubahan pro ses fisio lo gis t ubuh yang bereaksi t erhadap pat o gen yang masuk.
Pr o b io t ik m e m b a n t u m e n in g k a t k a n k a d a r hemat o krit pada ko ndisi ikan t erinfeksi yang biasanya akan mengganggu ko mpo sisi vo lume erit ro sit darah kare n a d ara h d ib u t u h kan u n t u k p e n an ggu la n gan pat o gen yang masuk.
Hemo glo bin merupakan met alo pro t ein yait u pro -t ein yang mengandu ng za-t besi di dalam sel darah merah yang berfungsi sebagai pengangkut o ksigen. Mo lekul hemo glo bin t erdiri at as glo bin, apo pro t ein, dan empat gugus heme, suatu molekul o rganik dengan sat u at o m besi.
Sebelum uji t ant ang Before challenge test
Sesudah uji t ant ang After challenge test
K- 9 1 .1 1 ± 3 .8 4 5a 9 3 .3 3 ± 3 ,6 7a
K+ - 7 4 .6 7 ± 4 ,3 7b
PM 9 5 .5 6 ± 7 .6 9 6a 9 7 .3 3 ± 3 ,8 5c
PNM 9 5 .5 6 ± 3 .8 5 1a 8 9 .3 3 ± 6 ,0 7a
Perl akuan Treatments
Sint asan (Survival r ate) (%)
Tabel 3. Nilai NBT assay p ada ikan le le Clar ias gar iepinus d en gan p e m b e r ia n p r o b io t ik m ik r o e n k a p s u la s i d a n t id a k dimikro enkapsulasi dalam pakan sebelum dan sesudah uji t ant ang dengan A. hydrophila
Table 3. NBT value of cat fish Clarias gariepinus wit h microencapsulat ed and non-microencapsulat ed probiot ics before and aft er challenge t est wit h A. hydrophila
H-0 H-7 H-14 H-21
K- 0.0 43 0 .0 4 1 0 .04 2 0 .0 4 2
K+ 0.0 45 0 .0 5 1 0 .06 7 0 .0 5 6
PM 0.0 46 0 .0 5 7 0 .06 9 0 .0 5 7
PNM 0.0 44 0 .0 5 3 0 .06 8 0 .0 5 6
Perl akuan Treatments
Dari paramet er hemat o lo gi, hemat o crit , dan he-m o g lo b in , m a k a p e m b e r ia n p r o b io t ik m ikro e n ka p su lasi b e r b ag ai d o sis s e lam a 2 8 h a ri set elah diuji t ant ang cenderung semakin meningkat terut ama perlakuan C yait u probiot ik mikro enkapsulasi do sis 2% (Tabel 5). Hal ini menunjukkan penggunaan pro bio t ik akan menjaga ho meo st asis t ubuh di dalam in fe ksi p at o ge n yan g m asu k, se h in gga ikan t et ap hidup dan sehat walaupun t erjadi kejadian wabah di sekit arnya. Bakt eri pro bio t ik dapat memberikan efek imuno st imulan melalui int eraksi dengan sel-sel limfoid yang ada di saluran cerna at au disebut sebagai Gut associat ed Lymphoid Tissue (GALT) seh in gga m am pu menst imulasi sist em imun ikan (El-Bo uhy et al., 2013).
Pe n g gu n aa n p ro b io t ik m ikro e n kap su la si ju ga m e n in g ka t k an b io m as sa ik an u ji s e ir in g d e n g an peningkat an do sis pemberian pro bio t ik (Tabel 6). Hal ini sesuai dengan pernyat aan Zubaidah et al. (2015) bahwa semakin t inggi do sis Bacillus sp. yang diberikan
maka laju pert umbuhan semakin meningkat . Adanya pro bio t ik membant u mem udahkan penyerapan dan pemanfaat an nut rien menjadi lebih efisien sehingga berpengaruh t erhadap bio massa ikan.
Pada Tabel 7 disajikan t o t al bakt eri pada saluran p e n ce r n a a n s e lam a m a sa p e m e lih ar a an 4 0 h a ri. Walaupun t o t al bakt eri di saluran pencernaan pada s e lu ru h p e rla ku a n p ro b io t ik d ik e t a h u i m e m ilik i ju m lah ya n g le b ih t in gg i d ib a n d in g k an k o n t r o l, perlakuan C memberikan hasil t ert inggi (Tabel 7).
Pe n in g k a t a n d o s is p e m b e r ia n p r o b io t ik mengakibat kan peningkat an t o t al bakt eri dan t o t al p r o b io t ik p a d a s a lu r a n p e n c e r n a a n ik a n u ji. Peningkat an jumlah tot al bakteri di saluran pencernaan akibat pemberian pro bio t ik Bacillus sp. melalui pakan pad a Or eochromis nilot icus (Ut ami et al., 20 15) ju ga pernah dilapo rkan sebelumnya.
Tabel 4. Nilai hemat o krit ikan lele Clarias gariepinus yang diberikan pakan dengan pro bio t ik mikro enkapsulasi pada do sis yang berbeda set elah uji t ant ang dengan A. hydrophila
Table 4. Haemat ocrit value of cat fish Clarias gariepinus microencapsu-lat ed probiot ic applicat ions at different dosages aft er challenge t est used A. hydrophila
Perlakuan
Tr eatm ents H-0 H-7 H-14 H-21 H-28
A 2 0 .9 2 2 .5 24 31 .23 32 .45
B 2 0 .9 2 3.5 2 3 3.2 7 33 33 .84
C 2 0 .9 2 0 2 2.4 3 3 2 .5 37 .69
K+ 2 0 .9 2 0.5 7 2 0.1 1 20 24 .04
K- 2 0 .9 2 0 20 22 2 6 .8
Tabel 5. Nilai hemo glo bin ikan lele Clarias gariepinus dengan pemberian pro bio t ik mikro enkapsulasi pada do sis yang berbeda set elah uji t ant ang A. hydrophila
Table 5. Hemoglobin value of cat fish Clarias gariepinus wit h microencap-sulat ed probiot ic applicat ions at different dosages aft er challenge t est used A. hydrophila
Perl akuan
Treatments H-0 H-7 H-14 H-21 H-28
A 5 .7 7 6.2 8 .1 8 .2
B 5 .7 7 7.9 8 .47 1 0.2
C 5 .7 6 7.1 8 .2 1 1.5
K+ 5 .7 6 .2 5.7 6 7 .2 5
Tabel 6. Berat bio masa ikan lele Clarias gariepinus dengan pemberian pro bio tik mikroenkapsulasi pada do sis yang berbeda setelah 40 hari pemeliharaan
Table 6. Biomass of catfish Clarias gariepinus microencapsulat ed probiotic applicat ion at different dosages aft er 40 days rearing period
Tabel 7. Tot al bact erial count (TBC) dan t ot al probiot ic count (TPC) B. cereus ND2 dan S. lent us L1 K pada saluran p ence rnaan ikan lele yang dib eri pro b io t ik mikro e nkap sulasi menggunakan do sis yang berbeda
Table 7. Tot al bact erial count (TBC) and t ot al probiot ic count (TPC) B. cereus ND2 and S. lentus
L1K in t he digest ive t ract of cat fish fed wit h different dosages of probiot ic microencapsu-lat ed feeds
KESIM PULAN
Su p le m e n t asi p ro b io t ik m ikro e n kap su lasi d ari ko mbinasi Bacillus cereus ND2 dan St aphylococcus lent us L1K pada pakan dengan do sis 2%, menunjukkan hasil ya n g le b ih b a ik d e n g a n s in t a s a n 9 7 , 3 3 %; d a n meningkat kan bio massa dan respo ns imun (NBT as-say, h e m a t o k r it , h e m o g lo b in ) ik a n le le Cl ar i as gariepinus t erhadap A. hydrophila.
UCAPAN TERIM A KASIH
Terima kasih kepada Kepala Balai Balai Penelit ian dan Pengembangan Budidaya Air Tawar,E Bo go r at as t erselenggaranya penelit ian ini dan t eknisi lit kayasa yang membant u secara teknis unt uk pengambilan dat a.
DAFTAR ACUAN
Anderso n, D.P. & Siwicki, A.K. (1995). Basic hemat o l-o gy and serl-o ll-o gy fl-o r fish healt h prl-o grams. Paper present ed in second symposium on diseases in Asian Aquacult ure “Aquat ic Animal Healt h and The Environ-ment ”. Ph uke t Th ailan d, 25 -2 9th Oct o b er 1 99 3.
17 pp.
Cru z, P.M., Ib an e z, A.I., He rm o sillo , A.M., & Saad , H.C.R. (2012). Use o f pro bio t ics in aquacult ure. [review art icle]. Int ernat io nal Scho larly research Ne t wo rk Micro b io lo gy 2 0 1 2 :1 3 . Do i:1 0 .5 4 0 2 / 2012/916845.
Bo uh y, Z.M., No bi, G.A., Hassanin, M.E., & El-Hady, M.A. (2013). Effect s o f diet ar y applicat io n o f t wo ant ago nist ic gut -iso lat ed Bacillus species o n t he immune respo nse o f Oreochromis nilot icus t o Aeromonas hydrophila Infe ct io n . Zag. Vet . J., 41(2), 31-39.
Hasibu an. (201 3). Aplikasi pro bio t ik amilo lit ik d an p ro t e o lit ik m elalu i p akan u n t uk p e nge n d alian St r e p t o co cco s is p a d a ik an n ila , Or eochr om i s nilot icus. Inst it ut Pert anian Bo go r. 54 hlm. Irib arre n , D., Daga, P., Mo reirn , M.T., & Fe ijo o , G.
(2 0 1 2 ). Po t e n t ia l e n vir o n m e n t a l e ffe ct s o f pro bio t ics used in aquacult yure. Aquacult ure Int er-nat ional, 20, 779-789.
Jafari, S.M., Assadpo o r, E., He, Y., & Bhandari, B. (2008). Encapsulat io n efficiency o f fo o d flavo urs and o ils du ring spray d r yin g, Dr yin g Te ch no lo gy, 26 (7 ), 816-835.
Perl akuan Treatments
Tot al (g)
Rat a-rat a M ean (g)
A 83 3 .8 6 2 77 .95 3 3
B 94 6 .5 8 3 15 .52 6 7
C 91 8 .8 8 3 06 .29 3 3
K+ 81 2 .9 0 2 70 .96 6 7
K- 73 3 .8 2 2 44 .60 6 7
B. cereus ND 2 S. lentus L1K
K 6 .30 ± 0 .1 5 0 0 .0 0 ± 0 .0 0 0 0 .0 0 ± 0.0 00 A 6 .82 ± 0 .5 1 8 3 .1 1 ± 0 .1 7 3 3 .1 ± 0 .0 6 6 B 6 .85 ± 0 .1 8 1 3 .8 6 ± 0 .0 7 5 3 .5 9 ± 0.1 67 C 6 .99 ± 0 .8 3 4 4 .2 6 ± 0 .0 8 6 4 .4 2 ± 0.1 82
Perl akuan Treatments
TBC
(l og CFU g-1)
Jackso n, L.S. & Lee, K. (19 91). Micro en cap sulat io n and t he fo o d indust r y. Lebensmit t el-Wissenschaft Techno lo gie, 143 pp.
Krasae ko o p t , W., Bhan dari, B., & Dee t h, H. (2003 ). Eva lu a t io n o f e n c a p s u la t io n t e h n iq u e s o f pro bio t ics fo r yo ghurt . Int ernat ional Dairy Journal, 13, 3-13.
Munaeni, W., Yuhana, M., & Widanarni. (2014). Effect o f m ic ro -m ic r o e n c a p s u la t e d s yn b io t ic a t different frequencies fo r lumino us vibrio sis co n-t ro l in whin-t e shrimp (Lit openaeus vannamei). Jurnal M ikrobiologi Indonesia, 8(2), 73-80.
Nim r a t , S., Su k s a w a t , S. , Bo o n t h a i, T., & Vu t h ip h an d ch a i, V. (2 0 1 2 ). Po t e n t ial Bacil l us p r o b io t ics e n h a n ce b act e r ial n u m b e rs, wat e r qualit y and gro wt h during early develo pment o f whit e shrimp (Lit openaeus vannamei). Vet . M icrobiol., 159, 443-450.
Rah m a wa t i, F.F. (2 0 1 5 ). Suplement asi m ikr okapsul probiotik melalui pakan sebagai pencegah infeksi St rep-t ococcosis pada ikan nila (Oreochromis niloticus). Tesis. Inst it ut Pert anian Bo go r.
Seco mbes, C.J. (1990). Iso latio n o f salmo nid macroph-ages and analysis o f t heir killing act ivit y. In St o -len, J.S., Flet cher, T.C., Anderso n, D.F., Ro berso n, B.S., vo n Muisvinkel, W.B. (Eds.). Tehniques in fish immuno lo gy Vo l 1. SOS Publicat io ns. Fair Haven, p. 137-155.
Se ka r, S., Su r ian a ra yan a n , M., Pe r in k u la m , R.D., Bhusvanesh, K.S., Phani, K., & Asit , B.M. (2012) . The m e t ab o lic ad van t age o f ch o line lact at e in gro w t h m e d ia: an e xp e rim e n t al an alysis wit h St aphylococcus lent us. App. Bio xhem. Bio t ech., 169, 380-392.
Seveline. (2005). Pengembangan produk probiot ik dari isolat klinis bakt eri asam lakt at dengan menggunakan t eknik pengeringan semprot dan pengeringan beku. Tesis. Inst it ut Pert anian Bo go r. Bo go r, 78 hlm. Tho mas, L.W. & Chho rn, L. (2011). Use o f pro bio t ics
in diet s o f t ilapia. Journal of Aqua Res. Development, 31, 2-8.
Ut ami, D.A.S., Widanarni, & Suprayudi, M.A. (2015). Ad m in is t r a t io n o f m ic r o m icr o e n c a p s u la t e d pro b io t ic at different d o ses t o co nt ro l St re pt o -co c-co sis in t ilap ia (Or eochr omis nilot icus). Jurnal M ikrobiologi Indonesia, 9(1), 17-24.
Vict o r, R.P. & Heldman, D.R. (2001). Int ro duct io n t o fo o d e n gin e e rin g. 3rd e d. Lo nd o n : Acad e mics Press. 120 pp.
Wed em e ye r, G.A. & Yasut ake , W.T. (19 77 ). Clinical m e t h o d s fo r t h e asse ss m e n t o f t h e e ffe ct o n e nviro n m en t al st ress o n fish h ealt h . Te chn ical papers o f t he US Fish and Wildlife Ser vice. US depart . o f t he Int erio r. J. Fish and W ildlife Ser vice, 89, 1-17.
Weinbreck, F., Bo dnar, I., & Marco , M.L. (2010). Can encapsulat io n lengt hen t he shelf-life o f pro bio t ic bact eria in dr y pro duct s?. Int ernat ional Journal of Food M icrobiology, 136, 364-367.
Zubaidah, A. (2014). Pemberian mikrokapsul sinbiot ik d en g a n d osi s ber b ed a m el a l u i pa k a n u n t u k p enceg ah a n vi b r i osi s p ad a ud a n g va na m e
(Litopenaeus vannamei). Tesis. Inst it ut Pert anian
Bo go r. Bo go r, 67 hlm.
