EFEKTIVITAS EKSTRAK SAMBILOTO (Andrographis paniculata
(Burm.f.) Nees) TERHADAP PERTUMBUHAN BAKTERI
Aeromonas hydrophila GPl-04 SECARA IN VITRO
SKRIPSI
Diajukan Untuk Memenuhi Sebagian Syarat
Mencapai Derajat Sarjana S-1
Oleh :
LANGGENG RESTIKO
1001070018
PROGRAM STUDI PENDIDIKAN BIOLOGI
FAKULTAS KEGURUAN DAN ILMU PENDIDIKAN
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH PURWOKERTO
HALAMAN PERSETUJUAN
SKRIPSI
EFEKTIVITAS EKSTRAK SAMBILOTO (Andrographis paniculata
(Burm.f.) Nees) TERHADAP PERTUMBUHAN BAKTERI
Aeromonas hydrophila GPl-04 SECARA IN VITRO
Oleh:
LANGGENG RESTIKO 1001070018
Telah Diperiksa dan Disetujui Oleh Dosen Pembimbing
Diajukan Untuk Memenuhi Sebagian Syarat Mencapai Derajat Sarjana S-1
Mengetahui, Pembimbing I
Dini Siswani Mulia, S.Pi, M.Si NIK.2160124
Pembimbing II
Drs. Arief Husin, M.Si NIK.2160062
PERSEMBAHAN
Alhamdulillah, puji syukur kehadirat Allah SWT atas rahmat dan karunia-Nya
sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi ini dengan baik.
Skripsi ini saya persembahkan untuk :
1. Bapak dan Ibuku tercinta (Alm. H. Salimi Arif Yuwono dan Kholifah).
2. AdiKu tercinta (Khusminatun Maenuroh).
3. Keluarga besar (Bani Sumedi).
4. Rekan-rekan mahasiswa seperjuangan Pendidikan Biologi Universitas
MOTTO
“Tiada manusia yang sempurna, kesempurnaan manusia adalah
Ia yang mampu belajar menjadi lebih baik”
“AL-QUR’AN Penyuci Hati, Penyempurna Kehidupan”
“Bukan sekedar seberapa jauh melangkah,
tetapi juga seberapa banyak mengambil hikmah”
EFEKTIVITAS EKSTRAK SAMBILOTO (Andrographis paniculata
(Burm.f.) Nees) TERHADAP PERTUMBUHAN BAKTERI
Aeromonas hydrophila GPl-04 SECARA IN VITRO
Langgeng Restiko
1001070018
Abstrak
Kebutuhan terhadap protein ikan terus meningkat setiap tahunnya sehingga mendorong masyarakat untuk melakukan budidaya ikan. Namun, dalam proses budidaya ikan banyak mengalami kendala, salah satunya adalah timbulnya penyakit pada ikan. Penyakit MAS merupakan penyakit pada ikan yang disebabkan oleh bakteri Aeromonas hydrophila. Penanggulangan yang selama ini dilakukan dengan pemberian antibiotik sintetik. Pemberian antibiotik sintetik sudah efektif, tetapi menyebabkan bakteri menjadi resisten dan beresiko menimbulkan residu dalam tubuh ikan. Oleh karena itu, dibutuhkan bahan alami sebagai alternatif lain untuk mengganti antibiotik sintetik tersebut. Salah satu bahan alami yang diduga dapat digunakan yaitu tumbuhan sambiloto
(Andrographis paniculata (Burm.f.) Nees). Penelitian ini bertujuan untuk
mengetahui keefektivan ekstrak sambiloto terhadap pertumbuhan bakteri
Aeromonas hydrophila GPl-04 secara in vitro. Penelitian dilaksanakan selama bulan April sampai Juli 2014 di Laboratorium Terpadu dan Laboratorium Biologi Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Purwokerto. Metode yang digunakan adalah metode eksperimen menggunakan Rancangan Acak Lengkap dengan 4 kali ulangan pada masing-masing konsentrasi, yaitu konsentrasi 20%, 40%, 60%, 80%, 100% (v/v), dan kontrol positif (kloramfenikol). Parameter yang diamati adalah zona hambat yang dihasilkan oleh ekstrak sambiloto dan antibiotik kloramfenikol. Analisis data yang dilakukan menggunakan Analysis of Variance
(ANOVA) dengan uji F pada taraf kepercayaan 95% dilanjutkan dengan uji Beda Nyata Terkecil (BNT) pada taraf kepercayaan 95%. Hasil penelitian menunjukkan bahwa ekstrak sambiloto mempunyai kemampuan menghambat pertumbuhan bakteri A. hydrophila GPl-04, dan terdapat perbedaan yang bermakna antar perlakuan. Namun, berdasarkan tabel CLSI kemampuan penghambatan tersebut termasuk kategori resisten dan tidak efektif jika dibandingkan dengan antibiotik kloramfenikol. Hasil perbandingan kesetaraan ekstrak sambiloto dan antibiotik kloramfenikol adalah 1: 133.193 (satuan ppm).
UCAPAN TERIMA KASIH
Puji syukur penulis panjatkan kehadirat Allah SWT atas segala limpahan
rahmat dan karunia-Nya sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi dengan
judul “Efektivitas Ekstrak Sambiloto (Andrographis paniculata (Burm.f.) Nees)
Terhadap Pertumbuhan Bakteri Aeromonas hydrophila GPl-04 secara in vitro”.
Pada kesempatan ini penulis mengucapkan terima kasih setulus-tulusnya
kepada Dini Siswani Mulia S.Pi, M.Si dan Drs. Arief Husin, M.Si yang telah
berkenan membimbing dan mengarahkan penulis dalam penyelesaian skripsi ini.
Selanjutnya penulis juga mengucapkan terima kasih kepada Drs. Heri Maryanto,
M.Si, dan Teguh Julianto S.Pd., M.Si selaku penguji yang telah memberikan
sumbangan pemikiran dan saran untuk kesempurnaan skripsi ini.
Penulisan skripsi ini terwujud atas dukungan dan bantuan dari berbagai
pihak, oleh karena itu penulis mengucapkan terima kasih juga kepada :
1. Drs. Ahmad, M.Pd., Dekan Fakultas Keguruan dan Ilmu Pendidikan
Universitas Muhammadiyah Purwokerto.
2. Drs. Arief Husin, M.Si., Kaprodi Pendidikan Biologi Fakultas Keguruan dan
Ilmu Pendidikan Universitas Muhammadiyah Purwokerto.
3. Segenap Dosen Program Studi Pendidikan Biologi Universitas
Muhammadiyah Purwokerto yang telah membembing dan memberikan
4. Laboran Laboratorium Terpadu Pendidikan Biologi dan Laboran
Laboratorium Biologi Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah
Purwokerto.
5. Bapak dan Ibuku tercinta (Alm. H. Salimi Arif Yuwono dan Kholifah),
terimakasih atas doa, semangat, serta dukungan yang tiada henti sehingga saya
dapat menyelesaikan skripsi ini dengan baik.
6. AdiKu tercinta (Khusminatun Maenuroh), terimakasih doa dan semangatnya.
7. Keluarga besar Bani Sumedi, terimakasih atas doa, bantuan dan semangatnya.
8. Riris Sagita Fernandes, terimakasih telah menjadi bagian dari semangatku.
9. Sahabatku Aldina yang menghantarkanku mencapai IPK 3, Nany, Hesti, Ida,
Nengsih, Lily, Wahyudianto dan seluruh sahabatku Pendidikan Biologi
angkatan 2010 lainya yang telah memberikan bantuan, saran, dan motivasi.
10.Segenap kawan-kawan nuansa kost yang penuh kesan.
11.Semua pihak yang telah membantu terselesainya skripsi ini yang tidak dapat
disebutkan satu persatu baik secara langsung maupun tidak langsung telah
memberikan bantuan dan semangat selama penyusunan skripsi ini. Semoga
segala amal dan kebaikan yang telah diberikan senantiasa mendapat balasan
yang berlipat dari Allah SWT. Penulis berharap semoga skripsi ini dapat
memberikan pengetahuan dan kemajuan untuk bidang pendidikan.
Purwokerto, 24 Februari 2015
DAFTAR ISI
Halaman
UCAPAN TERIMA KASIH ... viii
DAFTAR ISI ... x
DAFTAR TABEL ... xiii
DAFTAR GAMBAR ... xiv
DAFTAR LAMPIRAN ... xv
BAB I PENDAHULUAN 1.1.Latar Belakang ... 1
1.2.Rumusan Masalah ... 4
1.3.Tujuan Penelitian ... 4
1.4.Batasan Ilmiah ... 4
1.5.Manfaat Penelitian ... 5
BAB II TINJAUAN PUSTAKA 1.1.Bakteri Aeromonas hydrophila ... 6
1.1.1. Klasifikasi A. hydrophila ... 6
1.1.2. Morfologi A. hydrophila ... 6
1.1.3. Habitat dan Penyebaran Bakteri A. hydrophila ... 7
1.1.4. Penyakit Motile Aeromonas Septicemia (MAS) ... 8
1.1.5. Penanggulangan Penyakit MAS ... 9
1.1.6. Antibiotik Kloramfenikol ... 10
1.2.Tumbuhan Sambiloto (Andrographis paniculata (Burm.f.) Nees) ... 11
1.2.1. Klasifikasi Tumbuhan Sambiloto ... 11
1.2.2. Deskripsi Tumbuhan Sambiloto ... 11
1.2.3. Habitat Tumbuhan Sambiloto ... 12
1.2.4. Kandungan Senyawa Sambiloto ... 12
1.2.5. Manfaat Sambiloto ... 13
1.3.Metabolisme Sekunder ... 13
1.4.Senyawa Metabolit Sekunder ... 14
1.7.Ekstraksi ... 18
1.8.Maserasi ... 19
BAB III METODE PENELITIAN 3.1.Waktu dan Tempat Penelitian ... 21
3.2.Alat dan Bahan ... 21
3.2.1. Alat.... ... 21
3.2.2. Bahan... ... 22
3.3.Metode Penelitian ... 23
3.4.Cara kerja ... 23
3.4.1. Pembuatan Simplisia Sambiloto ... 23
3.4.2. Pembuatan Ekstrak Sambiloto ... 23
3.4.3. Uji Fitokimia terhadap Simplisia Sambiloto ... 24
3.4.4. Uji Fitokimia Ekstrak Sambiloto dengan Bantuan Kromatografi Lapis Tipis (KLT) ... 25
3.4.5. Sterilisasi Peralatan dan Medium Tumbuh ... 27
3.4.6. Pembuatan Medium Pertumbuhan Bakteri A. hydrophila GPl-04 ... 27
a. Pembuatan Medium TSA ... 27
b. Pembuatan Medium TSB ... 28
c. Pembuatan Medium GSP ... 28
3.4.7. Purifikasi Isolat Bakteri A. hydrophila GPl-04 ... 28
3.4.8. Pembuatan Larutan Kloramfenikol ... 29
3.4.9. Uji Sensitivitas Antibiotik Kloramfenikol ... 29
3.4.10.Uji Daya Hambat Ekstrak Sambiloto Terhadap Bakteri A. hydrophila GPl-04 ... 30
3.5.Penentuan Jumlah Sel Bakteri A. hydrophila GPl-04... 30
3.6.Penentuan Kesetaraan Efektivitas Ekstrak Sambiloto dengan Antibiotik Pembanding Kloramfenikol ... 31
BAB IV. HASIL DAN PEMBAHASAN
4.1.Ekstraksi Sambiloto ... 33
4.2.Uji Fitokimia Simplisia Sambiloto ... 34
4.3.Uji Fitokimia Ekstrak Sambiloto dengan Bantuan Kromatografi Lapis Tipis (KLT) ... 36
4.4.Purifikasi Bakteri A. hydrophila GPl-04 ... 38
4.5.Perhitungan Jumlah Koloni Bakteri A. hydrophila GPl-04 ... 38
4.6.Uji Sensifitas Antibiotik Kloramfenikol ... 40
4.7.Uji Daya Hambat Ekstrak Sambiloto terhadap Pertumbuhan Bakteri A. hydrophila GPl-04 ... 42
4.8.Kesetaraan Efektivitas Ekstrak Sambiloto dengan Antibiotik Pembanding Kloramfenikol ... 44
BAB V SIMPULAN DAN SARAN 5.1 Simpulan ... 47
5.2 Saran ... 47
DAFTAR PUSTAKA ... 48
DAFTAR TABEL
Halaman
Tabel 4.1. Bahan Pembuatan Ekstrak Sambiloto dan Hasilnya ... 33
Tabel 4.2. Hasil Uji Fitokimia Simplisa Sambiloto ... 35
Tabel 4.3. Hasil Uji Kromatografi Lapis Tipis (KLT) Ekstrak Sambiloto .... 37
Tabel 4.5 Hasil Perhitungan Jumlah Koloni Bakteri A. hydrophila GPl-04 ... 39
Tabel 4.6 Hasil Uji Sensitifitas Antibiotik Kloramfenikol... 40
DAFTAR GAMBAR
Halaman
Gambar 2.1 Bakteri Aeromonas hydrophila ... 7
Gambar 2.2 Struktur Bangun Kloramfenikol ... 10
Gambar 2.3 Tumbuhan Sambiloto (Andrographis paniculata (Burm.f.) Nees) ... 12
Gambar 4.1 Bahan Pembuatan Ekstrak Sambiloto dan Hasilnya ... 34
Gambar 4.2 Hasil Uji Simplisia Sambiloto ... 36
Gambar 4.3 Hasil Uji KLT Ekstrak Sambiloto ... 37
Gambar 4.4 Hasil Purifikasi Isolat Bakteri A. hydrophila GPl-04 ... 38
Gambar 4.5 Hasil Perhitungan Jumlah Koloni A. hydrophila GPl-04 dengan TPC ... 39
Gambar 4.6 Hasil Uji Sensitifitas Antibiotik Kloramfenikol... 41
Gambar 4.7 Hasil Uji Daya Hambat Ekstrak Sambiloto ... 44
DAFTAR LAMPIRAN
Halaman Lampiran 1 Hasil Perhitungan Rendemen Ekstrak Sambiloto
(Andrographis paniculata (Burm.f.) Nees) ... 53
Lampiran 2 Hasil Perhitungan Jumlah Koloni Bakteri Aeromonas hydrophila GPl-04 menggunakan Metode Total Plate
Count (TPC) ... 54
Lampiran 3 Standar Zona Hambat Antibiotik Menurut CLS ... 55
Lampiran 4 Hasil Analisis Statistik Uji Daya Hambat Ekstrak Sambiloto .... 56
Lampiran 5 Hasil Analisis Regresi Linear Sederhana Antibiotik
Kloramfenikol... 59
Lampiran 6 Perhitungan Persamaan Regresi Linear Sederhana ... 61
Lampiran 7 Kategori Hubungan Regresi Menurut Gomes dan Gomez
(1995) ... 62
