Ekstrak daunnya digunakan untuk mengobati demam malaria dan radang selaput lendir hidung dan tenggorokan. Pemanfaatan obat tradisional berkaitan dengan kandungan kimia pada tumbuhan tersebut yaitu senyawa metabolit sekunder yang mengandung aktivitas biologis seperti alkaloid, avonoid, steroid, terpenoid dan lain-lain. 34;urnpr.un n-hexone etil asetat yang polaritasnya ditingkatkan secara bertahap (SGp), menghasilkan senyawa murni berupa padatan amorf berwarna kuning pucat 45 mg (0,0025 g dari sampel segar), dengan laju leleh sebesar 337.E - 338.3°C.
Berdasarkan karakterisasi menggunakan spektrum rvama, KKt-2A, UV dan IR, disimpulkan bahwa flavonoid yang terkandung dalam tanaman Sipanggie-panggie ((lhlorotlentlron squanatu,tt Vahl) adalah 5,7,4' rrihydroxy flavone (apigenin). Clerotlc squonutu, l /uhl)” dapat diselesaikan.. untuk mengisolasi senyawa flavonoid yang terdapat pada daun tanaman Sipalggre-panggre dan melakukan karakterisasi senyawa hasil isolasi tersebut. Diharapkan hasil penelitian ini dapat memberikan informasi mengenai senyawa flavonoid. yang terkandung dalam bulu lobak.Ole r Pak. dekan FMIPA dan ketua jurusan kimia Universitas Negeri Padang yang mendanai penelitian ini melalui dana $PP/DPP FMIPA U-NP, tahun anggaran 2001. Karena tanpa kandungan senyawa aktif hayati tersebut, umumnya tumbuhan tersebut tidak dapat dimanfaatkan sebagai sebuah obor (Arbain). , 1995). "Sipanggie-l)anggie" secara tradisional digunakan sebagai obat demam. Daun tanaman ini digunakan untuk mengobati demam malaria dan radang selaput lendir hidung dan tenggorokan. Tidak ada laporan mengenai kandungan kimia atau bioaktivitas tanaman ini yang ditemukan dalam penelitian Naprarer (2000) dan Agrrcora (2000). Penentuan struktur flavonoid dilakukan hanya berdasarkan KKI-2A, Spketrum UV dan IR Pertanvaan penelitian Tujuan Penelitian BAB II Senyawa flavonoid berdasarkan tingkat oksidasi rantai propana pada sistem 1,3 diarilpropana, terdiri dari beberapa jenis yaitu flavon (4), flavonol (5), antosianidin (6), kalkon (7), auron (8 ), katekin (9), flavanon (10), leucoanthocyanidin (ll), flavan (12), flavanonol (13), garam flavylium (14) dan dihydrochalcone (l5). Banyaknya spesies flavonoid disebabkan oleh modifikasi struktur:r yang terjadi pada proses biosintesis sehingga terjadi penambahan atau penghilangan gugus hidroksil, metilasi gugus hidroksil menuju inti flavonoid, metilasi guLrs. Aglikon merupakan pigmen flavonoid bebas gula dengan kerangka dasar yang terdapat di alam, antara lain flavon (4), flavonol (5), anrocyanidins (6). Meskipun gugus hidroksil pada setiap posisi dalam r.ti flavonoid dapat terglikosilasi, gugus hidroksil sebenarnya adalah hidroksil. Fravonoid yang paling banyak digunakan adalah rutin, yang digunakan untuk memperkuat struktur kapiler, mengurangi permeabilitas dan kerapuhan pembuluh darah serta mencegah terjadinya syok. Kromatografi lapis tipis (KLT) dan KLT preparatif merupakan metode penting untuk mendeteksi dan pemisahan flavonoid dari ekstrak tumbuhan. Dalam kromatografi lapis tipis, fase diamnya adalah silika gel dan fase geraknya adalah pelarut yang disebut eluen. Zat yang dilarutkan dalam pelarut yang mudah menguap dioleskan pada bagian bawah pelat yang telah dicat. Pelat kemudian dimasukkan ke dalam ruang yang berisi eluen, pelarut akan naik membasahi pelat sambil membawa komponen yang akan dipisahkan. Kecepatan pergerakan suatu komponen ditentukan oleh jenis sambungan pada komponen yang akan dipisahkan - Untuk memeriksa pemisahan sambungan. Kromatografi kolom merupakan suatu teknik yang sangat berguna untuk pemisahan awal atau pemurnian sejumlah besar flavonoid yang berasal dari ekstrak tumbuhan (Bakhtiar pada kromatografi kolom, campuran yang akan dipisahkan ditempatkan dalam bentuk pita di bagian atas kolom penyerap. Senyawa yang akan dipisahkan (larut) bergerak melalui kolom dengan kecepatan berbeda, memisahkan dan membentuk piramida yang terkumpul dalam pecahan-pecahan saat meninggalkan dasar kolom (Grinetr, l99l: 102). Spektroskopi serapan ultraviolet adalah cara yang paling berguna untuk menganalisis struktur flavonoid, karena dapat mengidentifikasi jenis flavonoid dan menentukan pola oksigenasinya – biasanya flavonoid sfrum. Selain itu, kedudukan gugus hidroksil fenolik bebas pada inti flavonoid dapat ditentukan dengan menambahkan pereaksi geser seperti natrium metoksida (NaOMe), kemudian aluminium klorida (AICI3) dalam metanol, larutan asam klorida (HCl), bubuk natrium asetat (NaOAc). ) dan bubuk asam boron. HlBOr) ke dalam larutan sampel dalam metanol dan amati pergeseran puncak serapan yang muncul. Spehrum "NaOMe" adalah spektrum flavonoid yang gugus hidroksil fenoliknya terionisasi sampai batas tertentu, oleh karena itu mereka merupakan indikator penting dalam pola hidroksilasi, karena mendeteksi gugus hidroksil yang lebih asam dan tidak tersubstitusi. Penambahan AlCh akan memecahkan kompleks tahan asid antara kumpulan hidroksil C5 dengan kumpulan keton pada C4 dan kompleks tahan asid dengan kumpulan orto-dihidroksi pada cincin B. Oleh itu, spektrofotometer ultraviolet berguna secara langsung untuk menentukan kedudukan molekul gula atau kumpulan metil yang dikaitkan dengan satu kumpulan hidroksil fenol. BAB III Waktu Dan Tempat penelitian Bahan yang digunakan adalah 2 kg daun segar tanaman Sipanggie-panggie (C/err;clenrlrun squunrutunr Vahl), asetat anhidrida, kloroform, asam sulfat pekat (H:SO1), pereaksi Mayer, serbuk magnesium (Mg), asam klorida . (HCl). ) padatan pekat natrium hidroksida (NaOH), kapas, air suling, metanol (MeOH), n-heksana, etil asetat (EtOAc), besi (lll) klorida (FeCI3), buranol, aluminium klorida (AiCh), natrium asetat (NaOAc ), asam borat (HrBOr), pelat KLT, kisi-kisi silika gel), amonia pekat (NHr). Daun segar cincang halus sebanyak 2 kg dimaserasi dengan metanol masing-masing 3 x 2 L selama kurang lebih 5 hari. Ekstrak metanol dipisahkan dengan cara filtrasi, kemudian dipekatkan menggunakan rotary evaporator hingga diperoleh ekstrak kental sebanyak 400 mL. Ekstrak kental ini ditambahkan ke dalam 300 ml air panas, kemudian diaduk dan didiamkan semalaman lalu dituang hingga diperoleh fraksi air sebanyak 400 ml. Selanjutnya fraksi air difraksinasi kembali dengan etil asetat (5X300 ml) hingga fraksi air memberikan hasil negatif dengan uji Mg-HCl. Fraksi etil asetat dipekatkan menggunakan rotary evaporator sehingga diperoleh ekstrak kental fraksi etil asetat sebanyak 23,73 g. Silika gel terlebih dahulu disuspensikan dengan tekanan kemudian dimasukkan ke dalam kolom kromatografi yang ujungnya ditutup dengan kapas sambil disadap untuk menghilangkan gelembung udara. Sampel yang telah disiapkan ditempatkan dalam kolom kromatografi dan dielusi dengan eluen: heksana, heksana+aril asetat (7:3, 1:1, 3:7, 1:9), aril asetat, etil asetat-metanol (1: 9) dan metanol masing-masing sekitar 100 ml. Masing-masing vial dipantau menggunakan KLT dengan detektor titik sinar UV dan detektor titik besi (lll) klorida menggunakan vial 5. Endapan tersebut kemudian dikristalisasi ulang untuk dijadikan mumi dari pengotor dengan cara melarutkan sebagian endapan dalam sedikit metanol. Kemudian tambahkan beberapa tetes ctyl acetate hingga menjadi keruh, kemudian tambahkan beberapa tetes melanol dan saring. Karakterisasi senyawa hasil isolasi meliputi pemeriksaan titik leleh, reaksi kimia, pemeriksaan komatografi, pemeriksaan spektrum ultraviolet dan pemeriksaan spektrum inframerah. Pengukuran titik leleh dilakukan dengan menggunakan alat titik leleh, dimana sejumlah kecil kristal dimasukkan ke dalam tabung kapiler kemudian dimasukkan ke dalam alat titik leleh. Ambil larutan sebanyak kurang lebih 1 ml, kemudian masukkan ke dalam tiga tabung reaksi yang masing-masing tabung ditambahkan beberapa tetes pereaksi NaOH (terbentuk warna kuning), pereaksi H2SOa pekat (terbentuk warna kuning) dan pereaksi Mg-HCl. memberikan warna merah bata). Spektrum flavonoid Wurruk hasil isolasi dibuat menggunakan spektrofotometer UV' vrS Secoman 2000 (pengukuran dilakukan di laboratorium kimia dasar Universitas Andalas Padang). Pertama, kadarnya distandarisasi dengan blanko (metanol p.a-). Hasil Kromatografi KLT senyawa hasil isolasi ini dengan eluen heksana:etil asetat (1:1) menunjukkan satu pewarnaan dengan Rf 0,5. Flavonoid ini memberikan warna noda ungu di bawah sinar UV dengan kromatografi kertas dua arah (KKT 24), kuning dengan uap amonia. Hasil kromatogram KIT dan kromatografi kertas dua arah dari isolasi flavonoid dapat dilihat pada lampiran 3 halaman 35. Pemeriksaan spektrum ultraviolet flavonoid tersebut pada metanol menghasilkan serapan maksimum pada panjang gelombang 268,9 nm (pita Tl) dan 333,9 nm (pita Tl) dan 333,9 nm. nm (saya pita). Dengan pereaksi geser NaOH 2N terjadi pergeseran batokromik sebesar 52,4 nm pada pita I, intensitasnya meningkat dan muncul pita baru pada 320,4 nm. Hasil penyelidikan awal kandungan flavonoid pada daun tanaman ini tergolong tinggi, sesuai dengan intensitas warna kuning yang dihasilkan dari penyelidikan tersebut. Untuk mengidentifikasi keberadaan senyawa fenotipik digunakan reagen besi (lll) klorida dan reflektor lampu UV. Flavonoid dari golongan flavon akan memberikan warna kuning dengan pereaksi NaOH, warna kuning sampai jingga dengan HISOa pekat, dan warna kuning sampai merah dengan pereaksi Mg-HCl (lihat tabel. Kromatografi kertas dua arah (KKI-2A) adalah berguna untuk menentukan apakah flavonoid yang diisolasi merupakan jenis aglikon (flavonoid bebas gula) atau jenis glikosida (flavonoid yang mengikat molekul gutta). Flavonoid jenis aglikon akan memberikan nilai Rf yang relatif lebih rendah dengan pengembangan HOAc sebesar 15%. Data spektrum ultraviolet untuk flavonoid yang diisolasi menggunakan pelarut metanol menunjukkan serapan pada 268,9 nm dan 333,8 nm. Penambahan AlCls menyebabkan pergeseran batokromik sebesar 47,3 nm pada pita I yang menunjukkan adanya OH pada Cs, dengan HCI tidak terjadi pergeseran yang menunjukkan tidak adanya ono-di OH pada cincin A atau B. Dengan penambahan NaOAc terjadi pergeseran batokromik. pergeseran 5,8 nm dan intensitas meningkat menunjukkan adanya OH di C7. Untuk mengetahui ada tidaknya gugus fungsi pada senyawa flavonoid dilakukan pengukuran spektrum infra merah, dimana setiap gugus fungsi akan memberikan karakteristik puncak serapan pada rentang 4000 crn'r - '100 cm-. Flavonoid ini menunjukkan bahwa senyawa tersebut mempunyai gugus fungsi OH pada daerah 3250 cm-r, gugus fungsi karbonil (C:O) pada daerah 1600 cm-r, regangan C=C aromatik pada daerah 1500 cm-r, sedangkan puncak 1370 cmr menunjukkan adanya ulur C-O, pembengkokan O l-l pada tahun 1250, adanya puncak 1030 menunjukkan adanya C-O-C dan 820 adanya pembengkokan Cfl di luar bidang. AlCl1-HCI dan NaOAcl NaOAc -HrBOr sangat mirip dengan spektrum UV apienirt (Mabry dan Mark ham. Lempiran 2. (Lanjutan;I'INJAUAN PTJSTAKA
Flavonoid
METODOLOGI PENELITIAN
Prosedur Penelitian
EASIL DAN PEI\IBABASAN
KESIIVIPU LAN DAN SAR,\N
DAFTAR PUSTAKA
KURVA SERAPAT\ ULTRA,VIOLET FLAVONOID
![PENDAHULUAN Isolasi Dan Identifikasi Flavonoid Dari Daun Makuto Dewo (Phaleria macrocarpa [Scheff] Boerl.).](data:image/gif;base64,R0lGODlhAQABAIAAAP///wAAACH5BAEAAAAALAAAAAABAAEAAAICRAEAOw==)