HDFN: Penyakit hemolitik pada janin dan bayi baru lahir AABB: American Association of Blood Banks PMI: Palang Merah Indonesia. Dalam pemeriksaan golongan darah rutin, hanya digunakan reagen konvensional yang memungkinkan lolosnya tes antigen D lemah sehingga individu yang memiliki antigen D lemah (Weak D) dianggap sebagai individu Rh negatif. Sehingga penelitian ini diharapkan dapat memastikan apakah individu tersebut Rh negatif atau lemah D.
Latar Belakang
Berdasarkan latar belakang tersebut, penulis dapat merumuskan masalah sebagai berikut: Ketika diuji dengan reagen anti-D poliklonal dan monoklonal konvensional, hanya antigen D positif yang dapat dideteksi. Sehingga penelitian ini diharapkan dapat memastikan apakah pendonor memiliki rhesus negatif atau D lemah.
Tujuan Penelitian
Keutamaan Penelitian
Sistem Golongan Darah
Sistem Golongan Darah Rhesus
Pada tahun 1986, Tippett memberikan teori alternatif lain, yang telah divalidasi oleh penelitian genetika molekuler, yang terdiri dari dua lokus. Penggunaan imunopresipitasi yang diikuti dengan elektroforesis gel poliakrilamida natrium dodesil sulfat mengarah pada penemuan bahwa protein Rh memiliki berat molekul 30.000 hingga 32.000 kDa (AABB, 2015). Dalam sistem golongan darah rhesus, ada dua jenis penetapan antigen yang digunakan dengan sistem golongan darah ABO, yaitu A Rh post, A Rh neg, B Rh post, B Rh neg, AB Rh post, AB Rh neg, O Rh post dan O Rh neg.
Individu yang Rh positif adalah individu yang memiliki antigen Rh/antigen D pada permukaan sel darah merahnya, sedangkan Rh negatif adalah individu yang tidak memiliki antigen Rh/antigen D pada permukaan sel darah merahnya. Dengan demikian, lima antigen Rh utama D, C, c, E, dan e bertanggung jawab atas sebagian besar antibodi Rh yang relevan secara klinis di antara 61 antigen Rh yang telah dikarakterisasi (AABB, 2015).
Antigen Golongan Darah Rhesus
Namun jika individu tersebut tidak identik maka disebut heterozigot dan kedua gen tersebut akan terlihat pada permukaan sel darah merah (Engla.M, 2016).
Antibodi Golongan Darah Rhesus
Varian Golongan Darah Rhesus
Tes menggunakan reagen anti-D poliklonal dan monoklonal menunjukkan bahwa antigen D positif masing-masing membawa sekitar 10.000 dan 30.000 antigen D pada permukaan sel darah merahnya. Di sisi lain, pada D sel darah merah yang lemah, jumlah kekuatan antigen D yang diukur berkisar antara 300 hingga 9000 per sel darah merah (Peter.D, 1999). Pada tahun 1999, Wagner dan Flegel mengusulkan sebuah sistem untuk mengklasifikasikan perubahan sel darah merah berdasarkan substitusi nukleotida.
Antigen D lemah (D lemah) dihasilkan dari SNP yang mengkode perubahan asam amino tunggal yang diperkirakan terletak di daerah intraseluler atau transmembran protein, bukan di permukaan luar sel darah merah. Perubahan asam amino dapat mempengaruhi penyisipan protein ke dalam membran sehingga mencerminkan berkurangnya jumlah antigen D pada sel darah merah (AABB, 2015). Situs perubahan asam amino ditampilkan sebagai lingkaran padat pada membran plasma atau di dalam.
Tipe-D parsial dikodekan oleh perubahan asam amino tunggal yang umumnya terdapat di bagian luar sel (AABB, 2015).
Hemolytic Desease of Fetus and Newborn (HDFN)
Dalam kasus sistem rhesus, apa yang terjadi jika ibu rhesus negatif mengandung anak rhesus positif yang cocok dengan rhesus ayahnya, sehingga ibu membuat antibodi Rh dan selama kehamilan kedua, jika calon anak juga rhesus positif, dia akan membuat Resistensi 2 kali lebih tinggi daripada HDFN (Engla.M, 2016). Ini berarti perlakuan khusus yang harus diperhatikan dokter untuk ibu dengan golongan darah rhesus negatif.
Kemungkinan Rhesus Negatif memiliki Antigen D Week
Hal ini karena sistem pertahanan tubuh bagi reseptor (penerima donor) akan menganggap darah individu (Rhesus positif) sebagai "benda asing" yang harus dilawan tubuh, seperti virus atau bakteri. Selama transfusi pertama, tingkat anti-Rhesus masih belum cukup tinggi untuk relatif bebas dari masalah serius. Namun, pada transfusi kedua, jika distimulasi kembali dengan Rh positif, akibatnya bisa fatal, karena tingkat anti-Rhe mencapai cukup tinggi.
Anti rhesus ini akan menyerang dan menghancurkan sel darah merah individu, sehingga ginjal harus bekerja keras untuk mengeluarkan sisa pembelahan sel darah merah. Dasar genetik untuk golongan darah Rhesus telah dipelajari secara intensif dalam beberapa dekade terakhir, dan polimorfisme ditemukan bertanggung jawab atas sebagian besar golongan darah Rhesus yang ditemukan. Pengujian rutin dalam sistem rhesus terhambat oleh banyaknya polimorfisme rhesus, lebih dari seratus varian gen RHD dan empat puluh dua gen RHCE telah diidentifikasi.
Namun, lebih dari 275 alel RHD yang berbeda telah dilaporkan mengkodekan protein dengan perubahan asam amino. Alel ini dapat menyebabkan banyak variasi dalam ekspresi D, dan sel darah merah dengan beberapa bentuk ekspresi D. Dalam pengujian menggunakan reagen poliklonal dan monoklonal anti-D konvensional, hanya antigen D yang dapat ditunjukkan positif untuk fenotipe R1r dan R2R2. . dengan membawa antara 10.000 dan 30.000 antigen D pada permukaan sel darah merahnya.
Sebaliknya, jumlah antigen D yang diukur pada sel darah merah D yang lemah berkisar antara 300 hingga 9000 per sel darah merah (Peter.D, 1999). Sampel yang mengandung antigen Dweak berikatan dengan antibodi Dweak pada gel CAT.
Rancangan Penelitian
Populasi dan Sampel Penelitian
Sampel Penelitian
Purposive sampling adalah salah satu teknik pengambilan sampel non-acak di mana peneliti menentukan sampel dengan menentukan karakteristik khusus yang sesuai dengan tujuan penelitian. Kriteria sampel yang harus dipenuhi dalam penelitian ini adalah darah vena individu rhesus negatif, asalkan sampel memiliki volume yang cukup, sampel tidak terdaftar, sampel tidak lipemik, dan sampel tidak berbau.
Waktu Penelitian
Langkah Penelitian
Berikan identitas pada tabung reaksi dan tuangkan 8 tetes konsentrat sel darah merah ke dalam tabung. Antibodi yang terdapat dalam plasma atau serum dengan antigen spesifik yang terdapat pada permukaan sel darah merah akan membentuk ikatan aglutinasi. Untuk menentukan ada/tidaknya antibodi dalam plasma atau serum dan untuk menentukan ada/tidaknya antigen pada permukaan sel darah merah.
Alat dan bahan untuk penentuan golongan darah adalah: tabung reaksi kaca/tabung reaksi plastik 75 x 12 mm, centrifuge, dudukan tabung reaksi, gelas larutan fisiologis dan air suling, pipet plastik, parafil dan jaringan kasar atau halus. Reagen yang digunakan meliputi: reagen pengelompokan sel: anti-A, anti-B, reagen pengelompokan serum: sel-T A, sel-T B, dan sel-T O dan reagen pengelompokan rhesus: anti -D dan B.Alb 6%. Hasil negatif dari tes golongan darah Rhesus dilanjutkan dengan tes D lemah dengan metode tes aglutinin dingin.
Setelah proses inkubasi dan sentrifugasi, setiap aglutinasi yang terbentuk akan tertahan di permukaan gel hingga mencapai pusat gel, sedangkan sel darah yang tidak membentuk aglutinasi bebas bergerak ke dasar tabung mikro. Alat dan bahan untuk pengujian kelompok D lemah meliputi: kartu gel minggu D, suspensi sel darah merah 1%, kartu gel centrifuge, inkubator kartu gel pada suhu 37°C, rak tabung, gelas salin dan aquadest, pipet plastik, parafin dan anyaman kasar atau halus.
HASIL
Ditemukannya Hasil Positif D Weak Pada Komunitas Rhesus Negatif Jakarta
Persentage Dweak Antigen in Rh Neg Community
Uji Konfirmasi Dengan Melakukan Pemeriksaan Secara Duplo pada Sampel Positif D weak (D lemah)
Hasil uji D-lemah positif yang diperoleh sebelumnya diikuti dengan pemisahan sampel D-positif lemah dari sampel uji lainnya. Sampel diperiksa ulang (duplikat) sebanyak dua kali dengan menggunakan sampel yang sama dan metode inspeksi lemah D. Hasil pemeriksaan ulang (duplo) pada dua pemeriksaan yang dilakukan memberikan hasil yang sama dengan pemeriksaan awal yaitu positif D lemah pada dua pemeriksaan rangkap.
Aadanya Antibodi-D pada Sampel Perempuan Rh Negatif
Anti D yang ditemukan pada individu dengan Rh-negatif dapat menimbulkan bahaya di masa depan jika individu tersebut mengandung bayi dengan Rh-positif pada kehamilan berikutnya. Bayi rhesus positif memiliki antigen rhesus yang dapat bereaksi dengan anti-D yang dimiliki ibunya, hal ini dapat menyebabkan hemolisis sel darah merah bayi yang dikenal dengan kasus HDN (Haemolysis Disease of Newborn).
History Pregnancy
PEMBAHASAN
Ditemukannya Hasil Positif D Weak pada Individu Rhesus Negatif di Jakarta Metode yang digunakan untuk mendeteksi adanya D lemah (D weak) pada sampel
Studi lain yang dilakukan oleh Krishna et al dilakukan di Sri Venkateswara Institut Tirupati, India, yang diterbitkan pada tahun 2015 pada individu rhesus negatif, menghasilkan 1,04% (n donor = 16, n pasien = 14) dari total 2.883 sampel dari individu rhesus negatif yang terdeteksi. dengan antigen D yang lemah. Penelitian yang dilakukan oleh Xhetani et al., yang dilakukan di Albania, yang diterbitkan pada tahun 2014 pada individu rhesus-negatif, menunjukkan bahwa 1,05% (n donor 45) dari total 4.272 sampel individu rhesus-negatif terdeteksi memiliki D- lemah. antigen. Persentase hasil penelitian yang dicapai tidak berbeda jauh dengan penelitian Kresna di India dan Xhetani di Albania.
Hal ini disebabkan rendahnya kemungkinan sampel populasi D lemah diperoleh sebagai sampel penelitian yang dilakukan oleh ketiga pihak tersebut. Dalam penelitian lain yang dilakukan oleh Saqlain di Lahore Children's Hospital and Institute of Child Health, Pakistan, yang diterbitkan pada tahun 2016 pada individu Rhesus negatif, didapatkan hasil sebesar 0,2% (n=3) dari total 1.224 sampel individu rhesus. Penelitian lain juga dilakukan oleh Devi, G et al yang dilakukan di Rewa, India yang diterbitkan pada tahun 2016 pada individu rhesus negatif, didapatkan hasil sebesar 0,43% (n=1) dari total 232 sampel individu rhesus negatif yang ditemukan memiliki antigen D yang lemah.
Dalam studi lain, diperoleh persentase D dari hasil positif lemah, yang jauh lebih tinggi daripada hasil penelitian yang dilakukan. Sebuah studi oleh Okrah et al yang diterbitkan pada tahun 2008 di Khumasi, Ghana menunjukkan bahwa 7,75% (n = 2) dari total 31 sampel dari individu Rh negatif ditemukan memiliki antigen D yang lemah. Penelitian yang dilakukan oleh Wafi et al dan dipublikasikan pada tahun 2016 di Maroko menunjukkan bahwa 15,87% (n = 10) dari total 63 sampel individu negatif Rh memiliki antigen D yang lemah.
Pada penelitian ini tidak terdapat korelasi antara jenis kelamin dengan hasil persentase tes D lemah yang dilakukan. Pada penelitian ini tidak terdapat korelasi antara golongan darah dominan positif pada hasil persentase tes D lemah yang dilakukan.
Ditemukannya Hasil Positif D Lemah (D Weak) Pada Range Umur 25 – 44 Tahun Setelah dilakukannya penelitian, didapatkan hasil positif D weak pada salah satu
- SIMPULAN
Pentingnya pemeriksaan D poor dalam pemeriksaan serologi adalah agar petugas memberikan darah yang sesuai dan sesuai sehingga dapat menjadi terapi dan upaya penyelamatan bagi pasien yang membutuhkan komponen darah. Untuk lebih yakin dengan uji lemah D pada sampel individu rhesus negatif, dapat dilakukan pemeriksaan tambahan dengan melakukan uji lemah D dengan mengetikkan antiserum D lemah. Oleh karena itu, proses penelitian ini berakhir setelah investigasi lemah D dilakukan lagi secara duplikasi dengan menggunakan alat otomatis yang digunakan sebelumnya.
Temuan Hasil Positif D Lemah (D Lemah) Pada Rentang Usia 25-44 Tahun Setelah penelitian dilakukan, ditemukan hasil positif D lemah pada salah satu Pada penelitian ini didapatkan hasil positif D lemah (D weak) dalam satu dari sampel 84 sampel dari individu rhesus negatif Jakarta. Pada penelitian ini, persentase antigen D lemah pada individu rutin rhesus negatif Jakarta adalah satu (1%) dari total 84 sampel (100%).
A study on Rh incompatibility and frequency of weak D among blood donors and patients in a tertiary care referral teaching hospital in Tirupati, Andhra Pradesh. Feasibility of detecting weak D antigen and reappraisal of its clinical significance as a routine blood bank procedure.
