دزی یقودص دیهش یکشزپ مولع هاگشناد یشهوژپ یملع هلجم

(1)

دسي يقٍدص ديْش يكشسپ مَلع ُاگشًاد يشٍّصپ يولع ِلجه

Journal of Shahid Sadoughi University of Medical Sciences

ُرٍد 24 ُراوش ، 1

، ييدرٍرف Vol. 24, No.1, Apr 2016 1315

:ِحفص 12 - Pages: 83-92 33

نارامیب رد اتلد تیتاپٌ سوریو پیاتووژ هییعت و عویش یسررب HBs Ag

ًعجارم تبثم لاس یط نامرک تثعب یصصخت کیىیلک ًب يذىىک

یاٌ

92 - 9399

ِخ یرادرَخرب تاب دوحه ،1

یدّاز داَج

ُدٌيَپ اضريلع ،2 3ىاٍر

ييلاه ديوح ، ،4

يلع ديظ برع دوحه

*ُداز

5

ِصلاخ

:ِهدقه

،اسلز ریزادّ لهاػ طغل يیگًایه ات یؾٍطیٍ

35 یسًآ ِت غودز ٍ طیثکز رْخ ِک رؾا طسهًَاً

ریزادّ ؼٍطیٍ یحغؾ ىغ

B

.رؾا ِسؿتاٍ

یه اسلز لهاػ ات رًَفػ سًاَز

نّ

ىاهظ ریزادّ ؼٍطیٍ رًَفػ ات يیا ضز .سّز خض B

زاح ریزادّ ةثؾ ًلاَوؼه ذضَص

یه

ٍ ززطگ ای لکق ِت ریزادّ ؼٍطیٍ ِت لاسثه ىاضاویت ضز ِیًَاث رًَفػ

ظٍطت B

یه حیزًَغ یاضاز اسلز ریزادّ ؼٍطیٍ .سیاوً

یاّ

ز ِک رؾا مًَغ یلاَز عیلاًآ ؼاؾا طت یفلسره ظ

یه ىاكً زَذ ظا اض یػٌَسه ییایفاطغخ ُطسؿگ ٍ یٌیلات ذاطّا ،ِؼلاغه يیا ظا فسّ .سٌّز

ىاضاویت ضز اسلز ریزادّ ؼٍطیٍ حیزًَغ ٍ عَیق يییؼز

HBsAg

رثثه رؾا .

غٍر يظررب

يیا :

ِؼلاغه یؼغمه یؾضطت عًَ ظا یفیصَز ٍ

یٍض طت ٍ ُزَت 400

ضاویت طفً

HBsAg

رثثه رفطیصخ مادًا .

يییؼز

حیازًَغ ات ؾا

ُزافس ظا فٌکاٍ

ُطیدًظ ظاطویلخ

ٍ نضّ

یویعًآ ات ـٍض

RFLP Polymorphism) Length

Fragment (Restriction

مادًا

.سق ضز طذآ عیً

يییؼز ؽًاکؾ

ًَِوً

اّ

یاطت از ئ سی حیاسً

لصاح ظا مادًاRFLP

.سق

جياتً

ظا:

يیت 400 ،سق یؾضطت كیمحز يیا ضز ِک یضاویت 67

(زضَه 75 / 16 یسًآ یاضاز )%

سضطت یزات اًْآ ىایه ظا ِک سًزَت HDV

7 (زضَه 75 / 1 )%

HDV RNA

یلاَز یؾضطت ات .سق ُزاز صیركز یهطؾ ًَِوً ضز اّ

ظؾَز نیعًآ يیا ؽًاکؾ عیلاًآ ٍ یقطت یاّ

7

ِوّ حیازًَغ ،ًَِوً

عًَ ظا .سیزطگ يییؼزI

ِجيتً

:یريگ

ِیحاً ؽًاکؾ عیلاًآ -C

ِلٍعیا ات ىآ ِؿیامه ٍ اسلز ریزادّ ؼٍطیٍ لاٌیهطز یاّ

ظا ىاكً ،اّضَكک طیاؾ ىاؿکی

ىزَت

.زضاز ىاسؿکاخ ٍ ىزضا ،طصه ،ِیکطز ىَچ یضاَدوّ یاّضَكک ات ؼٍطیٍ حیازًَغ لااوسحا

ِسفای يیا یه اّ

ىاؿکی أكٌه ظا یکاح سًاَز

ًِایهضٍاذ ِمغٌه ضز اسلز ؼٍطیٍ

سقات ِسقاز .

ُشاٍ

یاّ

یديلک

یسًآ ،اسلز ریزادّ ؼٍطیٍ:

گٌیدیازًَغ ،اسلز ریزادّ ىغ

4،4 - سبىضربک ی ذضرا

ٌيزگ ، نبمزک یکضزپ مًلع ٌبگطواد ،یکضزپ ٌذکطواد ، یسبىض سيزیي

2 - ربیطواد

ٌيزگ ، یربمیب نبتسربمیب ،یلخاد یبه یلضفا

،رًپ صخب یربمیب یبه

،یضراًگ

ٌبگطواد مًلع یکضزپ نبمزک

3 - سبىضربک ی ذضرا

ٌيزگ ، ناذمه یکضزپ مًلع ٌبگطواد ،یکضزپازیپ ٌذکطواد ،یىیلبب یمیضًیب

-5 زتکد ا

ٌيزگ ، سيزیي ٌذکطواد ،یسبىض نبمزک یکضزپ مًلع ٌبگطواد ،یکضزپ

* :هفلت ؛)لًئسم ٌذىسیًو(

19434414544 :یکیويزتکلا تسپ ،

[email protected]

:تفبیرد خیربت 44

/ 5 / 4394 :شزیذپ خیربت

7 / 8 / 4394

[ Downloaded from jssu.ssu.ac.ir on 2024-01-31 ]

(2)

84 رد اتلد تيتاپّ ضٍريٍ پياتًَش يييعت ٍ عَيش يظررب

…

ِهدقه اسلز ریزادّ ؼٍطیٍ

HDV(Hepatitis D Virus)

یؾٍطیٍ ،

یسًآ ِت ،رًَفػ ٍ غودز یاطت ِک رؾا صلاً

ؼٍطیٍ یحغؾ ىغ

ریزادّ

رؾا ِسؿتاٍ B

( 1 ) ضات يیسؿرً یاطت ؼٍطیٍ يیا .

ت

ِ یسًآ ىاٌَػ یًغ

نؾا ِت

"

یسًآ اسلز ىغ

"

(Delta Antigen)

ضز

ًَِوً

ریزادّ ِت لاسثه ىاضاویت سثک یؿخَیت یاّ

يهعه B

یسًآ يیا غثٌه .سق ییاؾاٌق لاؾ ضز اّسؼت ىغ

1980 یؾٍطیٍ ،

صلاً

ٍ ِت ِسؿتاٍ

ریزادّ ؼٍطیٍ

سق ُزاز صیركز ،B

( 2 ) .

ؼٍطیٍ

اسلز ریزادّ

ِک ؼٍطیٍ ىایه ضز طصحٌه یضًَاخ یاّ

ِت رؾا زطف

، یاضاز

RNA

کز

ِسقض ،یفٌه ؽٌؾ ات یَملح یا

ىغَزاخ ِت ِیثق یّایگ یاّ

سًٌاه یه سیئٍطیٍ

یاضاز ِک سقات

يیگًایه 35nm

زٍسح ٍ طغل 7

/ 1 رؾا مًَغ لَع ظاتَلیک (

3 ) .

ؼاؾا طتHDV

ِمثع ؼلاک ِؾ ضز اسستا ،مًَغ ؽًاکؾ عیلاًآ یسٌت

.سق

ِسؾز ركّ ِت ُظٍطها اها (

Clade

) یه نیؿمز ِؾ ِک زَق

یضاویت ٍ ییایفاطغخ ُطسؿگ یاضاز ىآ حیازًَغ یطسكیت ییاظ

رؾا ( 4 ) حیازًَغ .

،II زٍسح 77 حیازًَغ ات سصضز

ِتاكز I زضاز

ِتٍ

حیاز ٍز ٍIIa

حیازًَغ .رؾا ُسق نیؿمزIIb

زٍسحIII 65 -

60 حیازًَغ ات سصضز ٍI

II رؾا یغَلَوّ یاضاز (

5 ) حیازًَغ . I

ِلٍعیا ضز طامً یاّ

ییایفاطغخ غیظَز ٍ ُسق اسخ ایًز فلسره

ُزطسؿگ زضاز یا ( 6 ) حیازًَغ .

ِلٍعیا ِت طَتطه II ظا ُسق اسخ یاّ

رؾا )ىاَیاز ٍ يخاغ(یلطق یایؾآ یاّضَكک (

7 ) حیازًَغ ٍ III

ِت طَتطه یتٌَخ یاکیطهآ یلاوق كعاٌه

رؾا ( 8 ) حیازًَغ . یاّ

فلسره زَذ ظا اض یػٌَسه عًغَزاخ ٍ یٌیلات ذاطّاظز ، HDV

یه ىاكً

سٌّز ( 11 - 9 ) حیازًَغ .

ُزطسؿگ فیع لهاػ I ظا یا

یضاویت سیسق از نیلاه ظا ریزادّ یاّ

یه ریزادّ ِک سقات

ظٍطیؾ ةلغا ٍ زاح (

Liver Cirrhosis

ای )LC

یاهٌَیؾضاک ٍ

ضلاَلؾَزادّ

(

hepato cellular carcinoma

ای )HCC

زادیا

یه سٌک ( 11 ) حیازًَغ طگیز فطع ظا . یضاویت یاضاز II

ٍ ییاظ

ُسّاكه لتال ذاطّاظز حیازًَغ ِت رثؿً یطز

.رؾا I

ِسیضاٍ

IIa

حیازًَغ ات ِؿیامه لتال سیسق ریزادّ لهاػ یه I

سقات ( 10 ) .

ِسفای يیا یکیسًغ ضاسذاؾ ِک رؾا ىآ يیثه اّ

HDV

یه رًَفػ ضز یسثک ةیؾآ ٍ عًظَزاخ طت ییاعؿت طیثأز سًاَز

HDV

سقات ِسقاز (

12 ) . ـٍض ات اّ

ی يییؼز ٍ ىَیؾاعیزطثیّ ىَچ ی ؽًاکؾ

لَصحه عیلاًآ ات نیمسؿه

RT-PCR

ظؾَز

ـٍض

RFLP(restriction fragment length polymorphism)

،

یه فسّ .زطک يییؼز اض اسلز ریزادّ ؼٍطیٍ حیازًَغ ىاَز ظا

حیازًَغ يییؼز اؾ ٍ

ی ط یّازَک طیؿه يسفای ،یکیسًغ یاّعیلاًآ

رًَفػ ىاهضز یاطت رؾاHDV

( 12 ).

رًَفػ ىاهضز ىٍطفطسٌیا ات ِچطگا .رؾا لکكه ضایؿتHDV

یزاطییغز رؾا يکوه سًٍضضز

ظا یضؼت ضز یضاویت ىایلاسثه

غیاق رًَفػ زَػ ٍ ُزَت يییاخ یؾٍطیٍ دؾاخ یلٍ ،زَق لصاح رؾا ( 13 ) . ذامیمحز

ٍض طت ی رًَفػ یکیغَلٍطؾ یاّطکضاه

ریؼوخ ضز HDV

اسّا ىَذ ىاگسٌٌک ضز

یاّضَكک ،يخاغ

ایلاسیا ٍ ىاًَی ،ىاَیاز اسلز ریزادّ ضضاَػ فیع ِک زاز ىاكً

طیغ ٍ ُزطسؿگ ضایؿت ات رًَفػ ِتاكه طها يیا .رؾا رذاٌَکی

ؼٍطیٍ طیاؾ ریزادّ ُسق ِسذاٌق یاّ

رؾا یه ِک ظا سًٌاَز

لاػ ئ

،نیلاه یلیذ ن زاح ریزادّ از ،یکیٌیلک یفره رًَفػ

طیغ ظٍطیؾ ٍ لاؼف ذاؼلاغه .سٌٌک زادیا اض ركگطت لتال

یه ىاكً یغَلَیهسیخا ریزادّ رًَفػ عَیق ِک سّز

يیت ضزD

ریزادّ يیللاً

زٍسح B

5 ایًز طؾاطؾ ضز % رؾا

( 14 ) . یاطت

ایلاسیا ضز لاثه یؾضطت

يیللاً یلاَسه یاّ

HBs-Ag

یضاویت ات

یسثک ِک زاز ىاكً

6 / 24 لاؾ ضز % 1983

، 23 لاؾ ضز %

1987 ، 14 لاؾ ضز % 1992

ٍ ، 3 / 8 لاؾ ضز % 1997

یاضاز

anti-HD

سًزَت ( 15 )

ِؼلاغه . یا طگیز ضَكک يیا ضز عَیق

HDV

لاؾ ضز اض 2007

، 11 رؾا ُزاز ىاكً % (

14 ) ِک یلثل ذاؼلاغه .

یه ىاكً ،ِسفطگ مادًا ىاطیا ضز ِک سّز

7 / 20

% - 2 / 2 ىاضاویت ظا %

ِت لاسثه ت HBV

ِ ِت ىاهعوّ ضَع رًَفػ

لاستا HDV

ِسقاز سًا ( 16 ).

یؿکاٍ ات لطسٌک ٍ ىَیؾاٌ

رؾا يکوه ،HBV

ؼٍطیٍ یًاٍاطف ضز یزاطییغز ىاضاویت ضز HDV

HBsAg

رثثه

سقات ُسق زادیا .

ذاطّاظز ضز عٌَز طت یٌثه ُسق طکش زضاَه یهاوز ِت ِخَز ات عیً ٍ یضاویت یٌیلات ضز ذٍافز

ِت ىایلاسثه ضز ىاهضز ِت دؾاخ

ؼاؾا طتHDV

یع نیسق ىآ طت اصل ،یًَفػ لهاػ يیا حیازًَغ

یکی حغؾ ضز اض یضاویت عَیق ٍ ذسق اسستا ضز یًٌَک ِؼلاغه کیٌلک ظا ضز ىاضاویت ظا ییلاات زاسؼز ِک ىاهطک ىاسؾا نْه یاّ

(3)

ِخ یرادرَخرب تاب ىاراكوّ ٍ

85

دسي يقٍدص ديْش يًاهرد ـ يتشادْب تاهدخ ٍ يكشسپ مَلع ُاگشًاد ِلجه

ُرٍد

ٍ تعيب مراْچ

ُراوش ، نكي ، ييدرٍرف 1315

ت لاؾ آ ِ یه ِؼخاطه ادً

.نییاوً زضٍآطت سٌیاوً

ِخضز ضز یسؼت

.سق صركه عیً ىاضاویت حیازًَغ عًَ

ا ؼاؾا طت

ِسفای يی اّ

یه كٌه ىاَز ءا ُزَوً صركه اض ىاسؾا يیا ضز یگزَلآ یلاوسحا

رؾایؾ شارزا ات ٍ ات .سق یضاویت ـطسؿگ غًاه ةؾاٌه یاّ

ةلاغ حیازًَغ يییؼز یه عیً ىاسؾا يیا ضز HDV

ِت ىاَز

یًاهضز ةؾاٌه یاّضاکّاض بارسًا رْخ ضز طها يیصصرسه .زَوً یًایاق کوک

يظررب غٍر غوخ یضٍآ

ٍ یضاسْگً

ًَِوً

اّ

: عًَ ظا ُسق مادًا فٍّػخ

یؼغمه یؾضطت رؾا

. عَیق يیگًایه ِت ِخَز ات 10

یسصضز

ریزادّ

لَهطف ظا ُزافسؾا ات ًَِوً ندح ،ذاؼلاغه طیاؾ ضز D

ِثؾاحه ِعَتطه سق

ٍ زاسؼز 225 ضاویت سهآ رؾست ،

يکل رْخ

ِت اض ىآ زاسؼز ،ِؼلاغه یولػ ىاَز ىزطت لاات 400

ضاویت فیاعفا

.نیزاز ریزادّ ِت لاسثه زاطفا ِؼلاغه زضَه ىاضاویت

B

ِؼخاطه لاؾ ضز ىاهطک رثؼت یصصرز کیٌیلک ِت ُسٌٌک یاّ

91 ٍ 92 یه سٌقات سثک ٍ ـضاَگ صصرسه کقعخ ظؾَز ِک

ىاٌَؼت ِؼلاغه ضاکوّ

یًٌَک ضَکصه ىاضاویت ظا .سًسیزطگ یفطؼه ،

ِثحاصه لوػ ِت ٍ سهآ ىاٌَػ رحز ىاضاویت یاّضَسکاف کؿیض

.سق رثث ،یهطف ظا ؽخ

صذا ریاضض

ًَِوً ،ِهاً

ىَذ ظا یطیگ

غوخ .سق مادًا اًْآ یغیحه

ًَِوً یضٍآ عییاخ لٍا ظا اّ

91 از

ركْثیزضا ىایاخ 92

یهاوز .سیهادًا لَع ِت اهظآ

ی ف اّ

ضز لک

ی

ٌ ی ک ؼٍطیٍ ٍُطگ ٍ ىاهطک رثؼت یکقعخ ُسکكًاز یؾاٌق

گ مادًا سیزط . ىاعیه ِت 5

یلیه

ِلَل ضز ضاویت لهاک ىَذ طسیل یاّ

لیطسؾا

Venoject

سض ُزاه یٍاح زامؼًا

صذا EDTA

.سق

ِلَل ،اوؾلاخ یظاؾاسخ یاطت ؽدؾ ىَذ یاّ

ذسه ِت 5 ِمیلز

ضٍز ضز 3000Rpm

سیزطگ غَیفیطسًاؾ سً

ضز لصاح یاوؾلاخ .

بَیزٍطکیه یاّ

5 / 1 یلیه یاهز ضز ٍ سق ِسریض یطسیل یفٌه

یسًاؾ ِخضز زاسفّ

زاطگ .سیزطگ یضاسْگً فیاهظآ ىاهظ از

فیاهظآ ىاضاویت یاوؾلاخ ًَِوً یٍض اسستا

anti-HIV Ab

ٍ

anti-HCV Ab

اعیلا ـٍض ات رذاؾ ىغایک ریک ظا ُزافسؾا ات ٍ

طظً ظا فیاهظآ ِدیسً ىزَت یفٌه ذضَص ضز ٍ سق مادًا ىاولآ یسًآ يیا یزات یسؼت ذاكیاهظآ ،اّ

ِت لوػ .سهآ

ریزادّ ِت لاستا يییؼز ٍ B

: D

ریزادّ رًَفػ یؾضطت یاطت

ریزادّ ٍD

ت اسستا ،B

ِ اعیلا ـٍض ٍ

ات ظا ُزافسؾا ریک

رکطق

ىاضاویت یاوؾلاخ ًَِوً یٍض ىغایک اهظآ

ی ف اّ

ی

HBs Ag

،

HBe

، Ag anti-HDV Ab

مًَغ ضَضح یتایزض یاطت .سق مادًا

ریزادّ ؼٍطیٍ

ىاضاویت یاوؾلاخ ضزD anti-HDV Ab

،رثثه

اسستا ظا RNA

ًَِوً يیا .سق جاطرسؾا اّ

حیاسً ظا ىاٌیوعا یاطت

حیحص ظا لصاح رؿز ،اعیلاا فیاهظآ

Real-timePCR

یٍض طت

ًَِوً

ىآ رثثه حیاسً ٍ ُسق مادًا اعیلاا ظا لصاح رثثه یاّ

كثع لکق 1 طیؿفز .سیزطگ

لکق 1

ِسفض طزلاات ًِاسؾآ سح ظا ِک یعَغذ : ِسفطگ طظً ضز رثثه ،سًا

ُسق سًا .

(4)

…

ریک ظا ُزافسؾا ات سؼت ِلحطه ضز رکطق

ىغایک

cDNA(Complementary DNA)

ًَِوً

ُسق جاطرسؾا یاّ

یا

حیاسً ِک اًْآ

فیاهظآ ضز .سق عسٌؾ ،زَت ُسق رثثه qPCR

طویاطخ ظا ُزافسؾا ات ؽدؾ ِیحاً یاطت یصاصسذا یاّ

C

لاٌیهطز ـٍض ات ؼٍطیٍ يیا HDAg

RT-nested PCR

زضَه

.سٌسفطگ ضاطل فیاهظآ یصاصسذا یاّطویاطخ ظا اسستا ـٍض يیا ضز

ِیحاً یلاَز طیثکز یاطت لاٌیهطزC

حیاسً .سق ُزافسؾاHDAg

ظا سؼت ،لٍا ِلحطه ئاز

ی س مٍز ِلحطه یاطت ،ظضَفٍطسکلا ـٍض ات

یلذاز یاّطویاطخ ظا ،مٍز ِلحطه ضز .سًسق ُزاهآ PCR

یاطت طز

ِیحاً طیثکز لاٌیهطزC

زضَه یاّطویاطخ.سق ُزافسؾا ،HDAg

مٍز ٍ لٍا ِلحطه ضز ُزافسؾا لٍسخ حطق ِتPCR

1 رؾا .

لٍسخ 1 مٍز ٍ لٍا ضٍز ِت طَتطه یاّطویاطخ : PCR

اّ رويارپ

طًاكظ رويارپ عًَ ماً ِلحره

5'-ATGCCATGCCGACCCGAAGAGGAA-3' ؽٌؾ ^D120

PCRلٍا ِلحطه 5'-GGCCTCTCAGGGGAGGATTCAC-3' ؽٌؾ یسًآ ^DH1

5'-ATGCCATGCCGACCCGAAGAGGAA-3' ؽٌؾ ^D120

PCRمٍز ِلحطه 5'-CTCAGGGGAGGATTCACCGACA-3' ؽٌؾ یسًآ ^D118

سؼت ظا از ئ حیاسً سی مٍز ِلحطه PCR

ظؾَز ًَِوً ،ظضَفٍطسکلا

طظً ظا ِک یًاضاویت

HDV-RNA

اوؾلاخ یی

ُزَت رثثه ٍ سًا

ِلحطه ٍز ضز اًْآ یلاَز عًَ يییؼز یاطت ،سق طیثکز PCR

ریزادّ ؼٍطیٍ حیزًَغ ـٍض ظا ُزافسؾا ات D

حیزًَغ RFLP

یلاَز ـطت یاطت .سًسق

،اّ

نیعًآ ظا ـطت یاّ

ضز جضسٌه ُسٌّز

سخ ا لٍ

2 ٍ 3 .سق ُزافسؾا

لٍسخ 2 : نیعًآ ـطت یَگلا ُسٌٌک سک ِؼغل یٍضSmaI

HD Ag

ًَِوً

زادعب تاعطق ُزادًا نيسًآ اب غرب SmaI

حیزًَغ 226 I

179,

حیزًَغ 405 II

حیزًَغ 104 III

301,

ىاهطک ًَِوً

179 226,

لٍسخ 3 : نیعًآ ـطت یَگلا xhoI

ُسٌٌک سک ِؼغل یٍض HD Ag

ًَِوً

زادعب تاعطق ُزادًا نيسًآ اب غرب xhoI

حیزًَغ 59 I

382,

حیزًَغ 30 II

81, 159,

حیزًَغ 83 III

358,

ىاهطک ًَِوً

59 382,

ًَِوً

نیعًآ ات ـطت ظا ؽخ اّ

زٍسحه یاّ

لغ زضاٍ ،ُسٌٌک

ِت ِخَز ات ٍ ُسق ظضَفٍطسکلا لکق

2 .سق طیؿفز اًْآ حیاسً ،

ج

لکق 2 سًات : 441(bp) لَصحه ِت طَتطه نیعًآ ،مٍزPCR

Sma I یلاَز

ضز اض 179(bp) 226, نیعًآ ٍ Xho I ضز اض یلاَز 59(bp)

382, .زاز ـطت

از یاطت ئ ریزادّ ؼٍطیٍ حیزًَغ عًَ سی يییؼز D

ات ُسق

مٍز ِلحطه لَصحه ،RFLP

.سیزطگ یلاَز يییؼز ،PCR

ُزاز لیلحز ٍ ِیعدز اّ

: ضَظٌه يیست مطً ظا

یضاهآ ضاعفا

SPSS

مطً ظا ،یلاَز يییؼز ظا لصاح حیاسً عیلاًآ یاطت ٍ ضاعفا

یاّ

Bio Edit

ٍ

MEGA 5

.سق ُزافسؾا

(5)

87

ُرٍد

جياتً

ظا يیت 400 ضاویت باَخ ات HBV

یسثثه ز ِک ض ىاهطک

سفطگ ضاطل یؾضطت زضَه سق ِ

(ىازطه ریؼوخ ، 5

/ 60 ،سصضز

242

ِت )طفً

ضَع یصركه (ىاًظ ظا

5 / 39 ،سصضز 158 )طفً

طسكیت زَت . لاستا يؾ يیطسوک 12

يؾ يیطسكیت ٍ لاؾ 72

لاؾ ات یٌؾ يیگًایه 38

لاؾ رؾا . 67 (زضَه 75 / 16 )سصضز

یسًآ یاضاز ىاضاویت ظا سضطت یزات

ظا ِک سًزَت مطؾ ضزHDV

،زاسؼز يیا ىایه

HDV-RNA

یهطؾ ًَِوً ضز 7

ظا زضَه

ات ىاضاویت کیٌکز

Real-time PCR

ظا سؼت .سق ُزاز صیركز

،یؾضطت طّ

7 نیعًآ یاطت ـطت لحه یاضاز زضَه یاّ

Sma I

ٍ

Xho I

اًْآ حیازًَغ ِک سًزَت حیز

.سق ُزاز صیركز I

ضز

يیا ؽًاکؾ یؾضطت 7

یزاػلاعا ُاگیاخ ظا ُزافسؾا ات ،ًَِوً

Genbank-NCBI

ٍ

Ref-seq NCBI

طّ حیازًَغ ، 7

زضَه

ز ئا ٍ سی عًَ ظا .سق ُزاز صیركزI

ضَسکاف کؿیض ِؼلاغه فلسره یاّ

، یٌؼه طاثزضا کی یضاز

يیت اض ىاسًز یحاطخ ِمتاؾ

، ریزادّ ِت لاستا ِمتاؾ ضز B

،ُزاًَاذ لوػ ِمتاؾ

یحاطخ ِت لاسثه ىضاویت ات ؼاوز ٍ

رًَفػ زاز ىاكًHDV

.

ثحب ـضاعگ ؼایمه ضز ِک رؾا یزاؼلاغه زٍسؼه ظا ،طضاح

ُزطسؿگ عَیق ٍ حیازًَغ يییؼز یاطت ، ِمغٌه ضز HDV

مادًا ىاهطک

ِسفطیصخ ،ضَكک كعاٌه طیاؾ ات ىآ حیاسً ٍ

.رؾا ُسق ِؿیامه ـضاعگ

اّ

ی رًَفػ ظا یزٍافسه

ىاهعوّ

ِت ُزَلآ ىاضاویت ىایه ضز HDV

ىاطیا ضز ،HBV

.رؾا ُسق ـضاعگ ؼاؾا طت

عَیق فلاسذا ذاؼلاغه يیا

رًَفػ ظا طفص از )ىاضسًظاه(ىاطیا لاوق ضز سصضز 3

/ 17

ضز سصضز بطغ

(ىاطیا ىاسوّ

) رؾا ( 17 ).

طضاح ِؼلاغه حیاسً

ظا ِک زاز ىاكً

400 ضاویت

HBsAg

،ىاهطک طْق ضز رثثه

67 (طفً

75 / 16 یسًآ یاضاز )سصضز سض یزات

.سًزَتHDV

يیا

ِدیسً

، ضاسمه یلک عَیق ظا طزلاات ضایؿت 6

/ 6 % ،ىاطیا یاطت اض

یه ىاكً

سّز ( 18 ).

عَیق لاح يیا ات ِؼلاغه ضز ِلصاح

یًٌَک سًٌاه یمعاٌه ظا طسوک ىاسوّ

رؾا .

ًلااوسحا ىاعیه

یلاات عَیق ىاطیا لک ِت رثؿً ىاهطک ىاسؾا ضز رًَفػ يیا

یه اض ىاَز سخ ات ی

ُس ذطخاْه یاّضَكک ظا یخضاذ عاثزا

ىاسؾا يیا ِت ىاسؿکاخ ٍ ىاسؿًاغفا رؿًاز ظثزطه

. ِک ادًآ ظا

عَیق ضَكک ضز HDV

ىاسؿًاغفا ٍ ىاسؿکاخ ِیاؿوّ یاّ

ِت

زطز ی ة 37

% ٍ 6 / 28 % رؾا ( 19،20 ) ىاسؾا طگیز یَؾ ظا ٍ

ىاهطک ت

ِ زای یاّضَكک عاثزا رهالا ٍ ززطز یاطت یلحه ىاٌَػ

رؾا ُسق

، یهَت ریؼوخ ات ىاطخاْه یسیؼوخ ةیکطز اصل

اسؾا ى یه ِیخَز سًاَز یاطت یمغٌه

ِت لاستا یلاات عَیق

رًَفػ .سقات ىاسؾا يیا ضز HDV

زاؼلاغه ی ضز ِک یایؾآ

ُسق مادًا ًِایه رؾا

، سٌسؿّ ةلغه يیاطگًایت عَیق ِک

ِت لاسثه زاطفا ضز HDV

ُزاز ـضاعگ ىاعیه ظا طزلاات HBV

یه اخٍضا ِیزاحزا یاّضَكک ضز ُسق يیا لاثه یاطت .سقات

ِیکطز ضز عَیق 27

% طصه ضز ٍ 30

% سصضز رؾا یلاح ضز . ِک

ىاولآ ٍ ىاسؿلگًا ،ایًادؾا ضز عَیق

ِت زطز ی ة 9 / 4 ، 1 / 7 ،

5 / 10

% رؾا ُسق ـضاعگ (

21 .)

كلاچHDV

ی نْه یاطت رهلاؾ

ِت ىاْخ ضز یهَوػ ُػیٍ

کیهسًا كعاٌه

، ىاطیا ِلوخ ظا رؾا

عَیق يییؼز یاسؾاض ضز .

ریزادّ حیازًَغ ٍ ىاهطک ضز D

ٍ

ِت ذاؼلاغه لیوکز ضَظٌه

َص .سق مادًا طضاح ِؼلاغه ،ِسفطگ ذض یٌؾ يیگًایه

ِؼلاغه زضَه ىاضاویت 38

ِؼلاغه ضز .زَت لاؾ یًٌَک

9 / 64 %

ىاضاویت ظا رثثه HDV

اض زطه ىا ٍ 1 / 35 % اض

ًظ ىا لیکكز

یه سًزاز ضَكک ضز یؿٌخ غیظَز ات ِک اّ

یی لیثل ظا

یًاهٍض ( 22 ) قاطػ ٍ ( 23 ) .رؾا ِتاكه ِسثلا

یطگیز ِؼلاغه

یًاٍاطف ِک رؾا ُزاز ىاكً

ىاًظ ٍ ىازطه ضز رثثه HDV

رؾا ِسقاسً یزٍافز (

24 ) .

ِلصاح حیاسً ِؼلاغه يیا ضز

، عَیق

یکیغَلٍطؾ 75

/ 16 % ات ُزَلآ ىاضاویت ىایه ضز اض HDV

ِؼخاطه HBV

ىاكً ىاهطک رثؼت یصصرز کیٌیلک ِت ُسٌٌک

یه ذاؼلاغه طیاؾ ضز ىاعیه يیا .سّز

ِسفطگ مادًا ،ىاطیا ضز

ه ِت ی ىاع لهاق یْتاكه ًاثیطمز 9

/ 13 %

ٍ 7 / 9

% زطز ِت ی ة ضز

لاؾ یاّ

1989 ( 25 )

ٍ 2011 ظاطیق ضز (

26 ) ، 3 / 9

% ضز

عکطه سٌچ ِؼلاغه ت

ِ ىاهعوّ ذضَص ىاطْز ٍ عیطثز ضز

، لاؾ

2009 ( 3 ) ٍ 3 / 17

% ىاسوّ ضز

، لاؾ 2010 ( 27 ) ُسق ـضاعگ

رؾا ذاؼلاغه یضؼت ضز . حیاسً

ًاسثؿً

ذٍافسه لهاق عَیق

(6)

…

5 / 2

% ىاطْز ضز

، لاؾ 1990 ( 25 ) ، 4 / 2

% ىاسوّ ضز

، لاؾ

1993 ( 28 ) ٍ 2 لتات ضز %

، لاؾ 2002 ( 29 ) ، 15 / 6

% ضز

عیطثز

، ز لاؾ ض 2003 ( 30 ) ، 7 / 5

% ىاطْز ضز

، لاؾ 2005 ( 31 )

ٍ 8 / 5

% ىاسؿلگ ضز

، لاؾ 2007 ( 32 ) .رؾا ُسق ـضاعگ ات

یوً طیؾافز يیا ىاَز

طت عَیق ىاعیه زَخَه ذاؼلاغه كثع

ِت ىاطیا ضز اض HDV

ىایت كیلز ضَع زطک

. ظا لصاح حیاسً

ِت لاستا یاّضَسکاف کؿیض ِؼلاغه ٍ HBV

زاز ىاكً HDV

ِک 4 / 64 % اضاویت ظا ،ىاسًز یحاطخ ِمتاؾ یاضاز ى 5

/ 45 %

ِت لاستا ِمتاؾ یاضاز ،ُزاًَاذ ضز HBV

4 / 43 % ِمتاؾ یاضاز

،یحاطخ لوػ 3

/ 27 % طخ طاثزضا یاضاز ِت لاسثه ضاویت ات طغذ

،HBV

2 / 21 % ضاز اٌْز ٍ ـَگ ىزطک خاضَؾ ِمتاؾ یا 2

% ظا

اًْآ عیً

فطصه ِمتاؾ یاضاز ضسره زاَه

ضعز ی م ی

ُزَت .سًا يیا

ًاثیطمز حیاسً

ىاسؾا طیاؾ ضز طگیز ذاؼلاغه ِتاكه اّ

رؾا ٍ

حیاسً يیت فلاسذا اٌْز يیا ضز اّضَسکاف کؿیض ِؼلاغه

لاغه يییاخ ،ذاؼلاغه طیاؾ ٍ ِؼ

ِمتاؾ ات ىاضاویت سصضز ىزَت

فطصه ضسره زاَه یمیضعز

طضاح ِؼلاغه ىاضاویت يیت ضز

رؾا یه ِک ىاؾآ یؾطسؾز ِدیسً ضز سًاَز ِت طز

زاَه

غضسره ی ط ضعز ی م ی سقات ىاسؾا يیا ضز ، (

18 ).

ذاؼلاغه يیممحه طیاؾ ظؾَز ُسق مادًا

ىزَت یفٌه ،

HDV RNA

یسًآ یاضاز ىاضاویت مطؾ ضز سضطت یزات

HDAg

ِت اض

ُزاز رثؿً طیظ لیلاز :سًا

1 )

HDV IgG

يیسٌچ یاطت

زَذ رًَفػ ظا سؼت لاؾ

ُسًَق زٍسحه یلات رتاث ،

.رؾا ُسًاه

2 حغؾ )

HDV RNA

ات صیركز ًِاسؾآ سح ظا طسوک

Nested PCR

یه ِک ُزَت سًاَز

لز ِت ی ل ت ضا ضز طسوک ؼٍطیٍ

يهعه رًَفػ زضاَه ضز ؼٍطیٍ يییاخ طیثکز ىاعیه ای ٍ مطؾ سقات ( 33 ) یه لتامه ضز . ىاَز

ىسق رثثه یسًآ

سض یزات

HD

ًَِوً ضز Ag

سلاف یاّ

HDV RNA

اض لز ِت ی ل فٌکاٍ

یسًآ يیت غعامسه ىغ

یاّ

ٍ HBV

،HDV

ىزَت بشاک رثثه

کیٌکز فؼض ٍ حیاسً

ظا یکی .رؿًاز حیاض یصیركز یاّ

،طضاح ِؼلاغه ِت زضاٍ ذازاطیا ِلصاف

ًاهظ ی يیت یًلاَع

ًَِوً

یه مًَغ جاطرسؾا ٍ یطیگ يکوه .سقات سًاَز

رؾا

زاودًا یًلاَع يیاطتاٌت ٍ ِسكگ ؼٍطیٍ ةیطرز ثػات ذسه

ثػات حیاسً يیت فلاسذا

ELISA

ٍ .سقات ُسقPCR

ِجيتً

یريگ ِسفض نّ یٍض یه

ِک رفطگ ِدیسً ىاَز یلثل ذاؼلاغه

ٍ

یًٌَک

ِسفطگ ذضَص طت

ریزادّ ؼٍطیٍ گٌیدیازًَغ یٍض

D

ىاطیا ضز ، طیاؾ ضز ُسق مادًا ذاؼلاغه ات ِتاكه حیاسً

ضَكک ىاسؿًاغفا لیثل ظا ِیاؿوّ یاّ

( 19 )

ِیکطز ، ( 12 ) ،

ىاسؿکاخ ( 20 ) ىاٌثل ، ( 12 ) طصه ٍ ( 34 ) یه ىاكً اض .سّز

ییاخ

ِسؾز ةلاغ I

رؾا عَضَه يیا ٍ ىاؿکی یلاوسحا ءاكٌه

رًَفػ اضHDV

ِمغٌه ضز یه ىاكً

.زاز

راسگظاپظ ی

مَلػ ُاگكًاز یكٍّػخ مطسحه رًٍاؼه ظا ىاگسٌؿیًَ

ىاهطک یکقعخ لز ِت

ی ل ٍ ةیَصز هأز

ی ي یًٌَک ِؼلاغه یلاه

سل ٍ طیسمز ض

یًاز لوػ ِت یه .سًضٍآ

(7)

89

ُرٍد

References:

1- Hughes SA, Wedemeyer H, Harrison PM. Hepatitis delta virus. The Lancet 2011; 378(9785): 73-85.

2- Rizzetto M, Canese MG, Gerin JL, London WT, Sly DL, Purcell RH. Transmission of the hepatitis B virus- associated delta antigen to chimpanzees. J InfecDiseases 1980; 141(5): 590-602.

3- Rizzetto M. Hepatitis D: thirty years after. J hepato 2009; 50(5): 1043-50.

4- Shang D, Hughes SA, Horner M, Bruce MJ, Dong Y, Carey I, et al. Development and validation of an efficient in-house real-time reverse transcription polymerase chain reaction assay for the quantitative detection of serum hepatitis delta virus RNA in a diverse South London population. J Viro methods 2012;

184(1): 55-62.

5- Hollinger FB. Hepatitis B virus infection and transfusion medicine: science and the occult. Transfusion 2008; 48(5): 1001-26.

6- Jayan GC, Casey JL. Inhibition of hepatitis delta virus RNA editing by short inhibitory RNA-mediated knockdown of ADAR1 but not ADAR2 expression. J Viro 2002; 76(23): 12399-404.

7- Chang MF, Baker SC, Soe LH, Kamahora T, Keck JG, Makino S, et al. Human hepatitis delta antigen is a nuclear phosphoprotein with RNA-binding activity. J Virolo 1988; 62(7): 2403-10.

8- Altuğlu I, Özacar T, Sertoz RY, Erensoy S. Hepatitis delta virus (HDV) genotypes in patients with chronic hepatitis: molecular epidemiology of HDV in Turkey. Inter J Infectious Dis 2007; 11(1): 58-62.

9- Casey JL, Bergmann KF, Brown TL, Gerin JL. Structural requirements for RNA editing in hepatitis delta virus: evidence for a uridine-to-cytidine editing mechanism. Proceedings National Academy Sci 1992; 89(15): 7149-53.

10- Ivaniushina V, Radjef N, Alexeeva M, Gault E, Semenov S, Salhi M, et al. Hepatitis delta virus genotypes I and II cocirculate in an endemic area of Yakutia, Russia. J General Viro 2001; 82(11):

2709-18.

11- Wu JC, Chen TZ, Huo TI, Lee SD, Choo KB, Chen CM. Genotyping of hepatitis D virus by restriction-fragment length polymorphism and relation to outcome of hepatitis D. The Lancet 1995;

346(8980): 939-41.

12- Altuğlu I, Özacar T, Sertoz RY, Erensoy S. Hepatitis delta virus (HDV) genotypes in patients with chronic hepatitis: molecular epidemiology of HDV in Turkey. Inter J Infec Diseases 2007; 11(1): 58-62.

13- Niro GA, Gioffreda D, Fontana R. Hepatitis delta virus infection: open issues. Digestive Liver Disease 2011; 43: S19-S24.

14- Sagnelli E, Stroffolini T, Ascione A, Bonino F, Chiaramonte M, Colombo M, et al. The epidemiology of hepatitis delta infection in Italy over the last 18 years. Progress Clinic Biological Res 199; 382:

287-94.

(8)

…

15-Sagnelli E, Stroffolini T, Ascione A, Chiaramonte M, Craxì A, Giusti G, et al. Decrease in HDV endemicity in Italy. J Hepato 1997; 26(1): 20-4.

16- Bakhshipour A, Mashhadi M, Mohammadi M, Nezam SK. Seroprevalence and risk factors of hepatitis delta virus in chronic hepatitis B virus infection in Zahedan. Acta Med Iranica 2013; 51(4): 260-64.

17- SirusJedary S, MasoudSabouri G. A Study of HDV in HBsAg positive patients in Tabriz, northwestern Iran.

Hepatitis Monthly 2010; 10(2): 110-15.

18- Motamedifar M, Taheri M, Lankarani KB, Gholami M. The Prevalence and Risk Factors of Hepatitis Delta Virus in HIV/HBV Co-Infected Patients in Shiraz, Iran, 2012. Iranian JMed Sci 2015; 40(5):

448-53. [Persian]

19- Shakil AO, Hadziyannis S, Hoofnagle JH, Di Bisceglie AM, Gerin JL, Casey JL. Geographic distribution and genetic variability of hepatitis delta virus genotype I. Viro 1997; 234(1): 160-67.

20- Moatter T, Abbas Z, Shabir S, Jafri W. Clinical presentation and genotype of hepatitis delta in Karachi.

World J Gastroentero 2007; 13(18): 2604-07.

21- Niro GA, Smedile A, Ippolito AM, Ciancio A, Fontana R, Olivero A, et al. Outcome of chronic delta hepatitis in Italy: a long-term cohort study. J hepato 2010; 53(5): 834-40.

22- Gheorghe L, Iacob S, Simionov I, Vãdan R, Gheorghe C, Iacob R, et al. Natural history of compensated viral B and D cirrhosis. Rom J Gastroenterol 2005; 14(4): 329-35.

23-Yurdaydin C. Delta hepatitis in Turkey: decreasing but not vanishing and still of concern. Turk J Gastroenterol 2006; 17(1): 74-5.

24- Somi MH, Farhang S, Miri SM, Pouri AA, Mjidi G, Alavian SM. The frequency of hepatitis D virus in patients with hepatitis B in Iran: an increasing rate? Tropical doctor 2009; 39(3): 154-56. [Persian]

25- Rezvan H, Taroyan S,Forouzandeh B, Fadaiee S, Azordegan F. A study on delta virus infection and its clinical impact in Iran. Infec 1990; 18(1): 26-8. [Persian]

26- Taghavi SA, Sedighi S, Mehrabani D, Khademolhosseini F. Hepatitis D in Chronic Active Hepatitis B:

Prevalence, Liver Enzyme Levels and Histopathology-an Epidemiological Study in Shiraz, Southern Iran, 2003-2004. Hepatitis Mon 2008; 8(4): 248-51. [Persian]

27- Alizadeh AHM, Ranjbar M, Tehrani ASS, Keramat F, Mamani M, Rezazadeh M, et al. Seroprevalence of hepatitis D virus and its risk factors in the west of Iran. J Microbio Immuno Infec 2010; 43(6): 519-23. [Persian]

28- Amini S, Mahmoodi MF, Andalibi S, Solati AA. Seroepidemiology of hepatitis B, delta and human immunodeficiency virus infections in Hamadan province, Iran: a population based study. J tropic Med hygiene 1993; 96(5): 277-87. [Persian]

29- Hassanjani-Roshan MR, Taheri H. Frequency of chronic active hepatitis in asymptomatic HBV carriers in Babol, Iran. Arch Iranian Med 2002; 5(2): 90-100. [Persian]

(9)

91

ُرٍد

30- Torabi SE, Ebrahimpoor S, Maljaei SH, Naghili B. Seroepidemiological studies of Hepatitis Delta (HDV) in HBsAg positive individuals in Tabriz.J Urmia Uni Med Sci 2003. [Persian]

31- Alavian SM, Alavian SH. Hepatitis D virus infection; Iran, Middle East and Central Asia. Hepat Mon 2005; 5(4): 137-43. [Persian]

32- Roshandel G, Semnani S, Abdolahi N, Keshtkar A-A, Besharat S, Joshaghani H, et al. Prevalence of hepatitis D virus infection in HBsAg positive subjects in Iran. Pak J Biol Sci 2007; 10(10): 1751-54. [Persian]

33- Mirshafiee H, Mahmoodian-Shooshtari M, Sharifi Z, Hosseini S-M. Genotype analysis of hepatitis delta virus from hepatitis B surface antigen-positive patients using PCR-RFLP in Tehran, Iran. Archives Iranian Med 2009; 12(3): 238-43. [Persian]

34- Saudy N, Sugauchi F, Tanaka Y, Suzuki S, Aal AA, Zaid MA, et al. Genotypes and phylogenetic characterization of hepatitis B and delta viruses in Egypt. J Med Viro 2003; 70(4): 529-36.

(10)

…

Prevalence and Genotyping of Hepatitis D Virus among HBs Ag Positive Patients Referred to Besat Clinic, Kerman during 2012-2013

Khabat Barkhordari (MSc)¹, Mohammad Javad Zahedi (MD) ²

Alireza Pouyandeh Ravan (MSc)³, Hamid Molaie (MSc) ⁴, Seyed Ali Mohammad Arab-zadeh(PhD) ^*5

1,4,5

Department of Virology, School of Medicine, Kerman University of Medical Sciences, Kerman, Iran.

2 Department of Gastroenterology, Afzalipour Hospital, Kerman University of Medical Sciences, Kerman, Iran.

3 Department of Biochemistry, School of Para Medicine, Hamadan University of Medical Sciences, Hamadan, Iran.

Received: 2 Aug 2015 Accepted: 29 Oct 2015

Abstract

Introduction: Hepatitis D virus (HDV) is a 35 nm in diameter agent that depends on hepatitis B surface antigen in order to proliferate and accumulate. Infection with delta agent can occur spontaneously with hepatitis B virus infection and it cause acute hepatitis or develop as secondary infection in the patients with hepatitis B. Hepatitis D virus (HDV) has several genotypes based on genome sequence analysis, which shows a variety of clinical protests and geographical scope. The aim of this study was to determine the prevalence of hepatitis delta virus genotype in patients with positive HBs Ag.

Methods: This cross-sectional and descriptive study was performed on 400 HbsAg-positive patients. Genotype identification was performed using polymerase chain reaction and RT-nested PCR and RFLP (Restriction Fragment Length Polymorphism). Finally sample sequencing was considered to approve RFLP gained results.

Results: Among 400 patients in this study, 67 participants (16.75 %) were containing anti-HDV antibody, and it was found HDV RNA in just 7 (1.75%) serum samples. By examining the sequences using analysis of these 7 positive HDV RNA samples by restriction enzyme and MEGA4 software showed that all of them have genotype I.

Conclusion: Sequence analysis of C-terminal region of Hepatitis D virus (HDV) and its comparison with other countries showed that it was the same genotype that present in countries such as Turkey, Egypt, Jordan and Pakistan. These finding indicated that there was the same origin of Hepatitis D virus (HDV) in Middle East.

Keywords:Genotyping Technique; Hepatitis Delta Virus; Hepatitis Delta Antigens

This paper should be cited as:

Khabat Barkhordari, Mohammad Javad Zahedi, Ali Reza Pouyandeh Ravan, Hamid Molaie, Seyed Ali Mohammad Arab-zadeh.Prevalence and genotyping of hepatitis d virus among hbs ag positive patients referred to besat clinic, kerman during 2012-2013. J Shahid Sadoughi Univ Med Sci 2016; 24(1): 83-92.