ﻌﺗ ﯿﯿ ﻦ ﻞﮕﻧا ﻪﻧﻮﮔ ﺎﻫ
ي ﻟ ﻞﻣﺎﻋ ﯿ
ﻧﺎﻤﺸ ﯿ زﺎ ﯾ ﺲ ﺪﻠﺟ ي ﻟﻮﮑﻟﻮﻣ شور ﺎﺑ ﯽ
،
ﺪﻬﺸﻣ نﺎﺘﺳﺮﻬﺷ رد
يزاﺮﯿﺷ نﺎﯿﻤﯾﺮﮐ ﺪﻤﺤﻣ ،1
ﯽﻣزر ﺎﺿﺮﻣﻼﻏ ﯽﺒﯿﻘﻧ ﻢﺳﺎﻘﻟاﻮﺑا ،2
3
هﺪﯿﮑﭼ
ﻪﻨﯿﻣز فﺪﻫ و ﺪﻠﺟ ﺲﯾزﺎﯿﻧﺎﻤﺸﯿﻟ: ي
، ﮑﯾ زا ﯽ يرﺎﻤﯿﺑ يﺎﻫ آ
ﯿﻤﻫا ﺪﺟاو ﮏﯿﻣﺪﻧ ﯽﺘﺷاﺪﻬﺑ ﺖ
ناﺮﯾا رد ﺖﺳا . ﻪﻧﻮﮔ ﺺﯿﺨﺸﺗ رد ﺎﯿﻧﺎﻤﺸﯿﻟ يﺎﻫ
ﻪﻘﻄﻨﻣ ﺮﻫ
، ياﺮﺑ ﺿ يرﺎﻤﯿﺑ لﺮﺘﻨﮐ ﺖﺳا يروﺮ
. ﻪﺑ ﻪﺟﻮﺗ ﺎﺑ ﮏﯾژﻮﻟﻮﻓرﻮﻣ ﻪﺑﺎﺸﺗ ﻞﮕﻧا
،ﺎﯿﻧﺎﻤﺸﯿﻟ ﻞﻣﺎﻋ يﺎﻫ شور زا ﺖﺳا مزﻻ
سﺎﺴﺣ يﺎﻫ
ﻪﻠﻤﺟ زا هﺮﯿﺠﻧز ﺶﻨﮐاو زاﺮﻤﯿﻠﭘ يا
(PCR)
، ياﺮﺑ ﻪﻧﻮﮔ ﻦﯿﯿﻌﺗ يﺎﻫ ﻞﮕﻧا ﻦﯾا ددﺮﮔ هدﺎﻔﺘﺳا .
ﺮﺿﺎﺣ ﻪﻌﻟﺎﻄﻣ
، ﻪﺑ رﻮﻈﻨﻣ ﻦﯿﯿﻌﺗ ﻪﻧﻮﮔ يﺎﻫ
ﻞﮕﻧا ﺎﯿﻧﺎﻤﺸﯿﻟ ﻪﺑ شور ﯽﻟﻮﮑﻠﻣ
، ﺮﻬﺷ رد نﺎﺘﺳ ﺪﻬﺸﻣ مﺎﺠﻧا ﺖﻓﺮﮔ .
شور ﻖﯿﻘﺤﺗ ﻪﻌﻟﺎﻄﻣ ﻦﯾا رد: ﻔﯿﺻﻮﺗ
ﯽ - ﻌﻄﻘﻣ ،ﯽ يﺪﻠﺟ تﺎﻌﯾﺎﺿ زا اﺪﺘﺑا 100
رﺎﻤﯿﺑ ﻪﺑ ﻼﺘﺒﻣ ﮏﻟﺎﺳ ﻪﻌﺟاﺮﻣ هﺪﻨﻨﮐ ﻪﺑ ﻪﺳ هﺎﮕﺸﯾﺎﻣزآ
ﯽﺒﻃ ﺺﯿﺨﺸﺗ ﺑﯿ
نﺎﺘﺳرﺎﻤ ﺑارﺎﻓ ﯽ
، راﺪﻤﻠﻋ ﺮﺘﮐد ي
ﻠﮐ و ﯿﻨ ﯿ ﮏ روﺮﺳ ﺪﻬﺸﻣ نﺎﺘﺳﺮﻬﺷ ﺰﯿﯾﺎﭘ زا
1390 ﺑﺎﺗ ﺎﺗ نﺎﺘﺴ 1392 ﯽﺠﺴﻧ شﺮﺘﺴﮔ ،
ﺪﺷ ﻪﯿﻬﺗ ﻢﺧز زا و 25 ﺎﻬﻧآ زا ﺮﻔﻧ
، ﮏﺗ ﺖﺸﮐ ﻂﯿﺤﻣ رد ﻪﺘﺧﺎﯾ ﯽﻨﻏNNN
ﺎﺑ هﺪﺷ ﺪﺷ مﺎﺠﻧاRPMI
. ﻪﻧﻮﻤﻧ ﺖﺒﺜﻣ يﺎﻫ
، ياﺮﺑ جاﺮﺨﺘﺳا
ﺶﯾﺎﻣزآ وDNA (PCR)
ﺪﻧﺪﺷ هدﺎﻔﺘﺳا .
ﻪﻠﺣﺮﻣ ود رد ﺶﯾﺎﻣزآ ،
ﺖﻓﺮﮔ مﺎﺠﻧاPCR
. لوا ﻪﻠﺣﺮﻣ رد
، شور زا ياﺮﺑ PCR
ﺺﯿﺨﺸﺗ
ﺘﺳا ﺎﯿﻧﺎﻤﺸﯿﻟ ﺲﻨﺟ شور زا ،مود ﻪﻠﺣﺮﻣ رد و ﺪﺷ هدﺎﻔ
Semi –nested PCR
ﻪﻧﻮﮔ ﻦﯿﯿﻌﺗ ياﺮﺑ هدﺎﻔﺘﺳا ﺎﯿﻧﺎﻤﺸﯿﻟ يﺎﻫ
ﺪﯾدﺮﮔ .
ﻪﺘﻓﺎﯾ ﺎﻫ لوا ﻪﻠﺣﺮﻣ رد: ﯽﮔدﻮﻟآ ،PCR
ﻪﻧﻮﻤﻧ ﯽﻣﺎﻤﺗ رد ﺎﯿﻧﺎﻤﺸﯿﻟ ﺲﻨﺟ ﻪﺑ ﺎﻫ
، ﺪﺷ هداد ﺺﯿﺨﺸﺗ ﺖﺒﺜﻣ .
،مود ﻪﻠﺣﺮﻣ رد 94
% ﻪﻧﻮﻤﻧ يﺎﻫ
ﺎﯿﻧﺎﻤﺸﯿﻟ ،ﺖﺒﺜﻣ و ﺎﮑﯿﭘوﺮﺗ
6 %
ﯿﻘﺑ ﻪﻧﻮﻤﻧ ﻪ ﺎﻫ
، ﺸﯿﻟ ﺎﯿﻧﺎﻤ ﺪﻧﺪﺷ هداد ﺺﯿﺨﺸﺗ روژﺎﻣ .
ﻪﺠﯿﺘﻧ يﺮﯿﮔ ﻞﮕﻧا: يﺎﻫ ﺎﯿﻧﺎﻤﺸﯿﻟ ﻪﻧﻮﮔ ﺎﮑﯿﭘوﺮﺗ
، ﺪﻬﺸﻣ نﺎﺘﺳﺮﻬﺷ رد رﺎﯿﺴﺑ ﯽﻧاواﺮﻓ زا
ﺖﺳا رادرﻮﺧﺮﺑ ﯽﯾﻻﺎﺑ .
هژاو يﺪﯿﻠﮐ يﺎﻫ ﺎﯿﻧﺎﻤﺸﯿﻟ:
ﺎﮑﯿﭘوﺮﺗ ﺎﯿﻧﺎﻤﺸﯿﻟ ؛ ؛روژﺎﻣ ﺎﯿﻧﺎﻤﺸﯿﻟ ؛يﺪﻠﺟ ﺲﯾز ﺶﻨﮐاو
هﺮﯿﺠﻧز
؛زاﺮﻤﯿﻠﭘ يا ﺪﻬﺸﻣ
ﺪﻨﺟﺮﯿﺑ ﯽﮑﺷﺰﭘ مﻮﻠﻋ هﺎﮕﺸﻧاد ﯽﻤﻠﻋ ﻪﻠﺠﻣ .
1393
؛ 21 ) 2 :(
237 - 245 .
ﺖﻓﺎﯾرد : 23 / 05 / 1392 شﺮﯾﺬﭘ : 29 / 07 / 1392
ﺶﻧاد1
ﻪﺘﺧﻮﻣآ ﺳﺎﻨﺷرﺎﮐ ﯽ ﻞﮕﻧا ﺪﺷرا ﺳﺎﻨﺷ ﯽ
، ﻞﮕﻧا ﺶﺨﺑ
،ﯽﺳﺎﻨﺷ ﮑﺷﺰﭙﻣاد هﺪﮑﺸﻧاد ،ﯽ
ﺳودﺮﻓ هﺎﮕﺸﻧاد
،ﺪﻬﺸﻣ ﯽ ﺪﻬﺸﻣ ناﺮﯾا ، .
ﻪﻣﺪﻘﻣ يرﺎﻤﯿﺑ ﻟﯿ
زﻮﯿﻧﺎﻤﺸ
، ﯽﮑﯾ زا ﺑ يرﺎﻤﯿ يﺎﻫ ﻢﻬﻣ ﻖﻃﺎﻨﻣ
ﺮﯿﺴﻣﺮﮔ
، ﻤﯿﻧ ﻪ ﺮﯿﺴﻣﺮﮔ و
مﺮﮔ و بﻮﻃﺮﻣ ﺖﺳا
)1 .(
ﻞﻣﺎﻋ
يرﺎﻤﯿﺑ
، ﮏﺗ ﻪﺘﺧﺎﯾ ﻞﺧاد ﯽﻟﻮﻠﺳ زا هداﻮﻧﺎﺧ هﺪﯿﺗﺎﻣوزﻮﻧﺎﭙﯾﺮﺗ و
ﺲﻨﺟ ﺎﯿﻧﺎﻤﺸﯿﻟ ﯽﻣ
ﺪﺷﺎﺑ . رﺎﻤﯿﺑ ﻦﯾا ي
، ﻢﻫ نﻮﻨﮐا رد 88 ﻮﺸﮐ ر
ﺑﻪ ترﻮﺻ ﻧآ ﮏﯿﻣﺪ دراد دﻮﺟو )
2(
ناﺮﯾا رد.
، ﻟﯿ زﻮﯿﻧﺎﻤﺸ و يﺪﻠﺟ
ﯽﯾﺎﺸﺣا
، زا يرﺎﻤﯿﺑ يﺎﻫ ﻢﻬﻣ ﯽﻠﮕﻧا نآ يﺪﻠﺟ عﻮﻧ و هدﻮﺑ ﻪﺑ
ود
عﻮﻧ يﺮﻬﺷ ) ﮏﺸﺧ ( و ﯽﯾﺎﺘﺳور )
بﻮﻃﺮﻣ ( هﺪﯾد ﯽﻣ ﻪﮐ دﻮﺷ
ﻟ ﻞﻣﺎﻋ ﯿ زﻮﯿﻧﺎﻤﺸ يﺪﻠﺟ
ﯽﯾﺎﺘﺳور رد
ناﺮﯾا
، ﺎﯿﻧﺎﻤﺸﯿﻟ روژﺎﻣ و
يﺮﻬﺷ ﻞﻣﺎﻋ ﯿﻧﺎﻤﺸﯿﻟ
ﺎ ﺎﮑﯿﭘوﺮﺗ ﯽﻣ ﺪﺷﺎﺑ ﻪﮐ ماﺪﮐﺮﻫ زا ﺎﻬﻧآ ياراد
نﻮﻧﺎﮐ يﺎﻫ
ﺪﻌﺘﻣ ﺪﻨﺘﺴﻫ يد )
3
، 4 .(
ﻟﯿ زﻮﯿﻧﺎﻤﺸ يﺪﻠﺟ
، ﻂﺳﻮﺗ
ﻪﻧﻮﮔ يﺎﻫ
ﺻﺎﺧ ﯽ زا ﻪﺸﭘ ﮐﺎﺧ ﯽ يﺎﻫ ﻪﻨﯿﻣﻮﺗﻮﺒﻠﻓ ﻞﻘﺘﻨﻣ
ﻣ ﯽ ددﺮﮔ .
نﺎﮔﺪﻧﻮﺟ و ﮓﺳ
، يرﺎﻤﯿﺑ ﻦﯾا نزﺎﺨﻣ زا ﯽﻣ
ﺪﻨﺷﺎﺑ )5 .(
ﺮﺑ ر ﺳ ــ ﯽ اﯿﭘ ــ ﻮﻟﻮﯿﻣﺪ ژ ﮏﯾ 5 ﺳ ــ ﻪﻟﺎ ) 1380 - 1384 (
ﯿﻟ ــ ﺎﯿﻧﺎﻤﺸ ز ﺲﯾ ﺪﻠﺟ ي ا رد ﺮﯾ نا
، ﺮﮕﻧﺎﯿﺑ نآ ا ﺖﺳ ﻪﮐ ﻌﺗ ـ ﺪ دا
ﻣـ ﻮ درا ﻤﯿﺑ ـﺎ ر ي رد ﺳ ـﺎ ل 1381 ﺖﺒﺴﻧ ﻪﺑ ﺎﺳ ل 1380
، ﺪﺣ دو
5 % ﺶﻫﺎﮐ اد ﻪﺘﺷ و ﭘـ ﺲ نآ زا زا ﺎﺳ ل 1381 ﺎﺗ ﺎﺳ ل 1384 ،
ﺪﻌﺗ دا ﻮﻣ درا ﺖﺒﺜﻣ ور ﻪﺑ ا ﺰﻓ ا ﺶﯾ ﻮﺑ هد ا ﺖﺳ ) 6 .(
ﺪﻬﺸﻣ ﺮﻬﺷ
، زا
نﻮﻧﺎﮐ يﺎﻫ يﺪﻠﺟ زﻮﯿﻧﺎﻤﺸﯿﻟ ﻢﻬﻣ رد
ناﺮﯾا ﯽﻣ ﺪﺷﺎﺑ و
ﻪﻤﻫ ﻪﻟﺎﺳ
، ﺚﻋﺎﺑ يرﺎﻤﯿﺑ ﻦﯾا نارﺎﻤﯿﺑ رد ﯽﺘﺳﻮﭘ تﺎﻌﯾﺎﺿ دﺎﺠﯾا
ﺮﻬﺷ ﻦﯾا ﯽﻣ
دﻮﺷ ) 7 .(
زا لﺎﺳ 1377 ﺎﺗ 1388 ، عﻮﻤﺠﻣ رد
34958 رﺎﻤﯿﺑ ﺮﻔﻧ
، زا 4 ﺪﺷ شراﺰﮔ ﺪﻬﺸﻣ ﺖﺷاﺪﻬﺑ ﺰﮐﺮﻣ ه
ﺪﻧا
و ﻦﯾﺮﺗﻻﺎﺑ ﻪﮐ ﻦﯿﯾﺎﭘ
ﻪﺑ ﯽﮔدﻮﻟآ ناﺰﯿﻣ ﻦﯾﺮﺗ ﺐﯿﺗﺮﺗ
: 9/
15 % رد
لﺎﺳ 1381 و 3/
2 % رد لﺎﺳ 1379 دﻮﺑ ﺖﺳا ه ) 8(
. ياﺮﺑ
ﺸﺗ يرﺎﻤﯿﺑ ﺺﯿﺨ
، شور ﺎﻫ ي ﻔﻠﺘﺨﻣ ﯽ درﻮﻣ هدﺎﻔﺘﺳا راﺮﻗ
ﯽﻣ دﺮﯿﮔ رد ﻪﮐ نﺎﯿﻣ ﻦﯾا
، ﮏﺗ ﺖﺸﮐ ،ﻢﯿﻘﺘﺴﻣ شﺮﺘﺴﮔ و ﻪﺘﺧﺎﯾ
شور ﯽﻟﻮﮑﻟﻮﻣ يﺎﻫ
، شور ﻦﯾﺮﺘﻤﻬﻣ زا ﺪﻨﺘﺴﻫ ﯽﺼﯿﺨﺸﺗ يﺎﻫ
)9 .(
ﻪﻧﻮﮔ ﺺﯿﺨﺸﺗ ﻞﻣﺎﻋ يﺎﻫ
يرﺎﻤﯿﺑ ﺺﯿﺨﺸﺗ سﺎﺳا ﺮﺑ
ﮑﯿﻣ ـــ و ﯽﭘﻮﮑﺳوﺮ ﺰﯿﻧ
ﺪﻫاﻮﺷ و ﮏﯾژﻮﻟﻮﻓرﻮﻣ تﺎﺼﺨﺸﻣ
ﮑﯾژﻮﻟﻮﯿﻣﺪﯿﭘا ﯽ
و ﺑ ﯽﻨﯿﻟﺎ
، رﺎﯿﺴﺑ ﻞﮑﺸﻣ ﯽﻣ ﺪﺷﺎﺑ ) 10 - 11
؛ ﻪﺑ ﻞﯿﻟد ﻦﯿﻤﻫ
، شور زا هدﺎﻔﺘﺳا ﯽﻤﯾﺰﻧآوﺰﯾا و ﯽﻟﻮﮑﻟﻮﻣ يﺎﻫ
ﻪﻧﻮﮔ ﺺﯿﺨﺸﺗ ياﺮﺑ دﺮﺑرﺎﮐ ﺰﯿﻧ و هدﻮﺑ يروﺮﺿ ﺎﯿﻧﺎﻤﺸﯿﻟ يﺎﻫ
شور ﺎﻫ ي ﻟﻮﮑﻟﻮﻣ ﻪﻠﻤﺟ زا ﯽ
،PCR
ﻮﺤﺗ ﻤﯿﻈﻋ ل ﯽ ﻦﯿﯿﻌﺗ رد
ﻪﻧﻮﮔ ﺖﺳا هدﻮﻤﻧ دﺎﺠﯾا ﻞﮕﻧا )
11 ( . ﺮﯿﺧا ﻪﻫد ود رد
، ﺎﻤﯿﺳ ي
ژﻮﻟﻮﯿﻣﺪﯿﭘا ﺘﺳﻮﭘ زﻮﯿﻧﺎﻤﺸﯿﻟ ﮏﯾ
ﯽ ناﺮﯾا رد زا ﯽﺷﺎﻧ
ﺑﺎﺟ ﻪ ﯾﺎﺟ ﯽ
ﯿﺑ ﺖﯿﻌﻤﺟ ــــ
ﺮﻬﺷ ﻖﻃﺎﻨﻣ ﻦ ي
ﯾﺎﺘﺳور و ﯽ
ﺰﯿﻧ و مﻮﺠﻫ
ﺎﻫرﻮﺸﮐ نﺎﮔﺪﻨﻫﺎﻨﭘ ي
ﺮﯿﻈﻧ ﻪﯾﺎﺴﻤﻫ :
و نﺎﺘﺴﻧﺎﻐﻓا قاﺮﻋ
ﻪﺑ
ناﺮﯾا
، و ﺮﯿﯿﻐﺗ رﺎﭼد
ﻮﺤﺗ ﺖﺳا هﺪﺷ ل )
11 ( ياﺮﺑ ﻦﯾاﺮﺑﺎﻨﺑ ؛
نآ زا يﺮﯿﮕﺸﯿﭘ و لﺮﺘﻨﮐ
، ﺖﯿﻌﺿو زا ﯽﻓﺎﮐ تﺎﻋﻼﻃا ﻦﺘﺷاد
ﻤﯿﺑ ﺮﯿﺧا يرﺎ
، ﻪﺑ ﻪﻧﻮﮔ ﻦﯿﯿﻌﺗ صﻮﺼﺧ ﺮﻫ رد ﻞﻣﺎﻋ يﺎﻫ
زا ﮏﯾ
ﯽﻣ يروﺮﺿ رﻮﺸﮐ ﻖﻃﺎﻨﻣ ﺪﺷﺎﺑ
. كﺪﻧا تﺎﻌﻟﺎﻄﻣ ﻪﺑ ﻪﺟﻮﺗ ﺎﺑ
ﯽﻟﻮﮑﻠﻣ ﯽﯾﺎﺳﺎﻨﺷ ﻪﻧﻮﮔ
رد ﺪﻬﺸﻣ نﺎﺘﺳﺮﻬﺷ رد ﺎﯿﻧﺎﻤﺸﯿﻟ يﺎﻫ
لﺎﺳ ﻦﯾا رد ،ﺮﯿﺧا يﺎﻫ ﻪﻌﻟﺎﻄﻣ
ﺪﯾدﺮﮔ شﻼﺗ ﻪﮐ
ﻪﻧﻮﮔ ﺎﻫ ي
ﻞﻣﺎﻋ ﺪﻬﺸﻣ رد ﯽﻧﺎﺴﻧا يﺪﻠﺟ زﻮﯿﻧﺎﻤﺸﯿﻟ
، ﯽﻟﻮﮑﻟﻮﻣ شور ﺎﺑ
Semi-nested PCR راﺮﻗ ﯽﺳرﺮﺑ درﻮﻣ
دﺮﯿﮔ .
شور ﻖﯿﻘﺤﺗ
ﻔﯿﺻﻮﺗ ﻪﻌﻟﺎﻄﻣ ﻦﯾا ﯽ
- ﻌﻄﻘﻣ ﯽ
، ﺰﯿﯾﺎﭘ ﯽﻃ 1390
ﺎﺗ نﺎﺘﺴﺑﺎﺗ
1392 ﺮﻬﺷ رد نﺎﺘﺳ ﺪﻬﺸﻣ مﺎﺠﻧا ﺖﻓﺮﮔ . اﺪﺘﺑا 100 زا رﺎﻤﯿﺑ
ﻦﯿﺑ هﺪﻫﺎﺸﻣ شور ﺎﺑ ﺎﻬﻧآ يﺪﻠﺟ زﻮﯿﻧﺎﻤﺸﯿﻟ ﻪﮐ ﯽﻧارﺎﻤﯿﺑ
ﮓﻧر شﺮﺘﺴﮔ رد ﻞﮕﻧا ﻢﯿﻘﺘﺴﻣ يﺰﯿﻣآ
هﺎﮕﺸﯾﺎﻣزآ ﻪﺳ رد هﺪﺷ
ﯽﺒﻃ ﺺﯿﺨﺸﺗ ﺪﻬﺸﻣ رد
) و يراﺪﻤﻠﻋ ﺮﺘﮐد ،ﯽﺑارﺎﻓ نﺎﺘﺳرﺎﻤﯿﺑ
ﮏﯿﻨﯿﻠﮐ روﺮﺳ ( ﺄﺗ ﺪﺷ ﺪﯿﯾ ه دﻮﺑ
، ﻪﺑ بﺎﺨﺘﻧا هدﺎﺳ ﯽﻓدﺎﺼﺗ شور
ﺪﻧﺪﯾدﺮﮔ . ز تﺎﺤﺷﺮﺗ زا ﻢﺧ
25 زا رﺎﻤﯿﺑ 100 بﺎﺨﺘﻧا رﺎﻤﯿﺑ هﺪﺷ
،
ﻪﺑ ر شو هدﺎﺳ ﯽﻓدﺎﺼﺗ ﮏﺗ ﺖﺸﮐ ،
ﻂﯿﺤﻣ رد ﻪﺘﺧﺎﯾ NNN
ﯽﻨﻏ ﺎﺑ هﺪﺷ RPMI ﺪﺷ مﺎﺠﻧا
. ،يرﺎﺠﺗ ﺖﯿﮐ زا هدﺎﻔﺘﺳا ﺎﺑ
ﻪﻧﻮﻤﻧ ﻪﯿﻬﺗ ﻢﯿﻘﺘﺴﻣ شﺮﺘﺴﮔ يﺎﻫ ﺪﺷ
ﻪﺑ ه ﻂﯿﺤﻣ هاﺮﻤﻫ
ﺖﺸﮐ يﺎﻫ ﺖﺒﺜﻣ داﺪﻌﺗ ﻪﺑ ﻞﮐ رد هﺪﺷ 100
درﻮﻣ ،ﻪﻧﻮﻤﻧ
جاﺮﺨﺘﺳا ﺪﻨﺘﻓﺮﮔ راﺮﻗDNA
) DNAExtraction Kit ﺰﮐﺮﻣ ،
ﺖﺴﯾز ﺪﺷر ﻓ
ﮏﯿﺘﻧژ ﯽﺳﺪﻨﻬﻣ ﯽﻠﻣ هﺎﮕﺸﻫوﮋﭘ يروﺎﻨ -
ناﺮﻬﺗ .(
لوﺪﺟ 1 - ﻪﺑ يﺎﻫﺮﻤﯾاﺮﭘ ﯽﻟاﻮﺗ رﺎﮐ
رد ﻪﺘﻓر ﺎﯿﻧﺎﻤﺸﯿﻟ ﺲﻨﺟ ﯽﺻﺎﺼﺘﺧاPCR
) -RV1
(RV2
لوﺪﺟ 2 - ﻪﺑ يﺎﻫﺮﻤﯾاﺮﭘ ﯽﻟاﻮﺗ رﺎﮐ
رد ﻪﺘﻓر
Semi –nested PCR
ﻪﻧﻮﮔ ﯽﺻﺎﺼﺘﺧا ﺎﯿﻧﺎﻤﺸﯿﻟ يﺎﻫ
)
LIN19
،
LIN17
،
LINR4
(
Primer Nucleotide sequences
PCR-product
LINR4 5'- GGGGTTGGTGTAAAATAGGG-3'
720,760 and 650bp
L infantum,L tropica.L major
5'- TTTGAACGGGATTTCTG- 3' LIN17
LIN19
5'- CAGAACGCCCCTACCCG -3'
جاﺮﺨﺘﺳا DNA ﻪﻧﻮﻤﻧ هﺪﺷ ﺎﻫ
نورد ﻪﺑ ، لﺎﻘﺘﻧا بﻮﯿﺗوﺮﮑﯿﻣ
ﺪﺷ هداد ﺪﻧ يﺎﻣد رد و 20
- ﯽﺘﻧﺎﺳ مﺎﺠﻧا نﺎﻣز ﺎﺗ رﺰﯾﺮﻓ رد داﺮﮔ
ﺶﯾﺎﻣزآ
،PCR ﺪﻧﺪﯾدﺮﮔ يراﺪﻬﮕﻧ .
ياﺮﺑ ﺗﺄ ﺲﻨﺟ ﺺﯿﺨﺸﺗ ﺪﯿﯾ
ﮏﺗ ﺎﯿﻧﺎﻤﺸﯿﻟ ﻪﺘﺧﺎﯾ
، ﻪﻧﻮﻤﻧ يﺎﻫ جاﺮﺨﺘﺳا DNA
ﺮﺑ اﺪﺘﺑا ،هﺪﺷ
رﺎﮐ شور سﺎﺳا Lachaud
ﻤﻫ و 1
نارﺎﮑ ) 12 ( زا هدﺎﻔﺘﺳا ﺎﺑ ،
ﺮﻤﯾاﺮﭘ لﺎﺳرﻮﯿﻧﻮﯾ يﺎﻫ
، ﺶﯾﺎﻣزآ درﻮﻣ ﺪﻨﺘﻓﺮﮔ راﺮﻗ PCR
) لوﺪﺟ 1 .(
ﻪﻧﻮﻤﻧ ﺜﻣ يﺎﻫ ﺖﺒ ؤر ﻞﺑﺎﻗ ﺪﻧﺎﺑ ﺪﺟاو ، ﺖﯾ
145bp
ﯽﻣ ﺪﻨﺷﺎﺑ .
ياﺮﺑ ﻪﻧﻮﮔ ﯽﻟﻮﮑﻠﻣ ﺺﯿﺨﺸﺗ ﺎﯿﻧﺎﻤﺸﯿﻟ ﻒﻠﺘﺨﻣ يﺎﻫ
، زا
ﮏﯿﻨﮑﺗ Aransay رﺎﮑﻤﻫ و 2
ا شور ﺎﺑ ن Semi-nested
ﺪﺷ هدﺎﻔﺘﺳا PCR )
13 .(
ﺶﯾﺎﻣزآ ﻦﯾا رد
، ﺮﻤﯾاﺮﭘ ﻪﺳ زا
(Forward) LINR4
، ) first-step Reverse (
LIN17 و
(second-step Reverse) LIN19
ﺘﺳا ﺪﺷ هدﺎﻔ )
لوﺪﺟ 2(
شور ﻦﯾا رد ﻞﮕﻧا ﻪﻧﻮﮔ ﻦﯿﯿﻌﺗ ياﺮﺑ ﻪﮐ
، ﻞﺻﺎﺣ ﺪﻧﺎﺑ
، ياﺮﺑ
ﺎﯿﻧﺎﻤﺸﯿﻟ ﺎﻔﻨﯾا مﻮﺘﻧ 720 ﺎﯿﻧﺎﻤﺸﯿﻟ ياﺮﺑ ،زﺎﺑ ﺖﻔﺟ ﺎﮑﯿﭘوﺮﺗ
760
ﺎﯿﻧﺎﻤﺸﯿﻟ ياﺮﺑ و زﺎﺑ ﺖﻔﺟ روژﺎﻣ
650 ﯽﻣ زﺎﺑ ﺖﻔﺟ ﺪﺷﺎﺑ
.
ﺑ تﺎﻋﻼﻃا ﻪ
ﺖﺳد ،ﻦﺳ ﻪﺑ طﻮﺑﺮﻣ هﺪﻣآ تﺎﺼﺨﺸﻣ و ﺲﻨﺟ
ﻢﺧز ﺎﻫ ﻊﻤﺟ ، زآ ﺎﺑ ﺎﻬﻧآ ﺞﯾﺎﺘﻧ و يﺪﻨﺑ يﺎﮐ نﻮﻣ
ﺮﺋﻮﮑﺳا هدﺎﻔﺘﺳا ﺎﺑ
ﺮﻧ زا م راﺰﻓا )SPSS ﺶﯾاﺮﯾو 13 ( يوﺎﺴﻣ يﺎﻔﻟآ ﺢﻄﺳ رد 05
/ 0
ﺖﻓﺮﮔ راﺮﻗ يرﺎﻣآ ﻞﯿﻠﺤﺗ و ﻪﯾﺰﺠﺗ درﻮﻣ .
ﺎﻫﻪﺘﻓﺎﯾ
) 42
% ( ﺪﻧدﻮﺑ دﺮﻣ .
ﻦﯾﺮﺘﺸﯿﺑ ﯽﻧاواﺮﻓ
يرﺎﻤﯿﺑ ﯽﻨﺳ هوﺮﮔ رد 20
- 29 لﺎﺳ
) 34
% ( و 0 - 9 لﺎﺳ ) 24
% ( ﯽﻨﺳ هوﺮﮔ رد ناﺰﯿﻣ ﻦﯾﺮﺘﻤﮐ و
زا ﺮﺘﺸﯿﺑ 50 لﺎﺳ )6
% ( ﺪﺷ هﺪﻫﺎﺸﻣ )
05 / 0 P<
( ؛ ﯽﻨﺳ هوﺮﮔ رد
10 - 19 لﺎﺳ )4
% (
، 30 - 39 لﺎﺳ ) 18
% ( و 40 - 49 لﺎﺳ
) 14
% ( ﺰﯿﻧ ﺪﺷ هﺪﯾد يرﺎﻤﯿﺑ .
6 رﺎﻤﯿﺑ
، ﺎﯿﻧﺎﻤﺸﯿﻟ ﻪﺑ هدﻮﻟآ ﻣ
و روژﺎ
94 ﺪﻧدﻮﺑ ﺎﮑﯿﭘوﺮﺗﺎﯿﻧﺎﻤﺸﯿﻟ ﻪﺑ هدﻮﻟآ ﺮﻔﻧ .
زا 6 ﻪﺑ هدﻮﻟآ رﺎﻤﯿﺑ
ﺎﯿﻧﺎﻤﺸﯿﻟ ،روژﺎﻣ 5 رد ﻢﺧز و ﺪﻧدﻮﺑ بﻮﻃﺮﻣ ﻢﺧز ياراد رﺎﻤﯿﺑ
دوﺪﺣ ﻪﮐ ﺮﮕﯾد رﺎﻤﯿﺑ 3
ﯽﻣ نآ زوﺮﺑ زا ﻪﺘﻔﻫ ﺖﺷﺬﮔ
، ﻪﻠﺣﺮﻣ ﻪﺑ
ﯿﻧ و دﻮﺑ هﺪﯿﺳﺮﻧ ﺢﺷﺮﺗ زا ﺰ
94 ﺎﯿﻧﺎﻤﺸﯿﻟ ﻪﺑ هدﻮﻟآ رﺎﻤﯿﺑ ﺎﮑﯿﭘوﺮﺗ
،
82 رﺎﻤﯿﺑ ) 2/
87 (%
و ﺪﻧدﻮﺑ ﮏﺸﺧ ﻢﺧز ياراد 12
رﺎﻤﯿﺑ
)8 / 12 (%
، دﻮﺑ ﯽﮐﺮﭼ تﺎﺤﺷﺮﺗ ياراد ﺎﻬﻧآ ﻢﺧز .
ﻤﺠﻣ رد عﻮ
،
217 رد ﻢﺧز 100 رﺎﻤﯿﺑ ﺪﯾدﺮﮔ شرﺎﻤﺷ نارﺎﻤﯿﺑ ﻪﮐ
، ﻦﯾﺮﺘﺸﯿﺑ
ﻢﺧز ار ﺎﻫ ﻪﺑ ﺐﯿﺗﺮﺗ : ﺖﺳد رد و
ترﻮﺻ ﻢﺧز ﻦﯾﺮﺘﻤﮐ و ﺎﻫ
ار رد
ﺎﭘ قﺎﺳ ي ﺪﻨﺘﺷاد دﻮﺧ .
نارﺎﻤﯿﺑ ﺮﺘﺸﯿﺑ
، ﺪﺟاو 1 ﯽﻟا 2 ﻢﺧز
)6 / 51 % ﻢﺧز ﺎﻫ ( و نﺪﺑ رد
،ﺎﻬﻧآ زا ﯽﻤﮐ داﺪﻌﺗ زا ﺮﺘﺸﯿﺑ
6 ﻢﺧز
)5 /6
% ﺎﻫ ﻢﺧز ( نﺪﺑ رد ﺪﻨﺘﺷاد
. اﺪﻧا ﻢﺧز هز ﺎﻫ رد 9 / 48
%
دراﻮﻣ
، ﻦﯿﺑ 1 - 5 ﯽﻠﯿﻣ ﺮﺘﻣ دﻮﺑ رد و 6/
92 % ﻢﺧز يﺎﻫ
هﺪﻫﺎﺸﻣ هﺪﺷ
، زا نﺎﻣز هﺎﮕﺸﯾﺎﻣزآ ﻪﺑ ﻪﻌﺟاﺮﻣ نﺎﻣز ﺎﺗ زوﺮﺑ ،
6 هﺎﻣ
دﻮﺑ ﻪﺘﺷﺬﮔ )
لوﺪﺟ 3 .(
Primer Nucleotide sequences
PCR-product
RV1 5'-CTTTTCTGGTCCCGCGGGTAGG-3'
145bp (Leishmani)
5'-CCACCTGGCCTATTTTACACCA-3' RV2
لوﺪﺟ 3 - ﻢﺧز ﻞﺤﻣ ﯽﻧاواﺮﻓ ﻊﯾزﻮﺗ ﻢﺧز زوﺮﺑ نﺎﻣز تﺪﻣ ،ﻢﺧز هزاﺪﻧا ،ﻢﺧز داﺪﻌﺗ ﺐﺴﺣﺮﺑ نارﺎﻤﯿﺑ نﺪﺑ رد ﮏﻟﺎﺳ يﺎﻫ
ﻢﺧز ﻞﺤﻣ سﺎﺳا ﺮﺑ ﺎﻫ ﻢﺧز ﯽﻧاواﺮﻓ ﺎﻫ
داﺪﻌﺗ ﻢﺧز رد ﺮﻫ رﺎﻤﯿﺑ ﻢﺧز ﯽﻧاواﺮﻓ
سﺎﺳا ﺮﺑ ﺎﻫ هزاﺪﻧا
(mm)
ﻢﺧز ﯽﻧاواﺮﻓ سﺎﺳا ﺮﺑ ﺎﻫ
نﺎﻣز تﺪﻣ ﻢﺧز زا ﻪﺘﺷﺬﮔ
هﺎﻣ) (
داﺪﻌﺗ ﻞﺤﻣ نارﺎﻤﯿﺑ داﺪﻌﺗ
ﻢﺧز ﺎﻫ ﺪﺻرد
ﻢﺧز 1 ﺎﻫ
- 2 3 - 6 6 + 1 - 5 6 - 10 10 + 0 - 2 2 - 6 6 +
ترﻮﺻ 30
* 50
* 23
% 40
10 - 32
10 8
24 20 6
ﺖﺳد 36
* 104
* 48
% 28
62 14 40
26 38 38
58 8
ﺪﻋﺎﺳ 16
28 9/
12
% 22
6 - 16
8 4 24
4 -
ﺎﭘ 8
12 5/
5
% 12
- - 2
10 -
- 12 -
ﺎﭘ قﺎﺳ 3
* 8
* 7/
3
% 2
6 - 6
- 2 6
2 -
ﺮﯾﺎﺳ 7
15 9/
6
% 8
7 - 10
1 4 8
5 2
داﺪﻌﺗ ﻞﮐ 100 217 100
% 112 91
14 106
55 56 100
101 16
ﻢﺧز ﺪﺻرد ﺎﻫ 6/
51
% 9/
41
% 5/
6
% 9/
48
% 3/
25
% 8/
25
% 1/
46
% 5/
46
% 4/
7
%
زا 25 مﺎﺠﻧا ﺖﺸﮐ هﺪﺷ
رد ، 9 ﺖﺸﮐ
، تﻮﮕﯿﺘﺳﺎﻣوﺮﭘ ﺮﯿﺜﮑﺗ
ﺪﺷ هﺪﻫﺎﺸﻣ .
ﺶﯾﺎﻣزآ رد ياﺮﺑ ،PCR
ﺲﻨﺟ ﺺﯿﺨﺸﺗ
مﺎﻤﺗ ،ﺎﯿﻧﺎﻤﺸﯿﻟ 100
بﺎﺨﺘﻧا ﻪﻧﻮﻤﻧ هﺪﺷ
)9 ﺖﺒﺜﻣ ﺖﺸﮐ هﺪﺷ
و نارﺎﻤﯿﺑ 91
ﺑ ﺮﯾﺎﺳ زا ﻢﯿﻘﺘﺴﻣ شﺮﺘﺴﮔ نارﺎﻤﯿ
( ﺮﻈﻧ زا ،
ﯽﮔدﻮﻟآ ﮏﺗ ﺲﻨﺟ ﻪﺑ ﺎﯿﻧﺎﻤﺸﯿﻟ ﻪﺘﺧﺎﯾ
، ﺖﺒﺜﻣ ﺶﻨﮐاو ﺪﻧداد نﺎﺸﻧ
) ﻞﮑﺷ 1 .(
يور 100 ﺶﯾﺎﻣزآ ،لوا ﻪﻠﺣﺮﻣ رد ﺖﺒﺜﻣ ﻪﻧﻮﻤﻧ
Semi–nested PCR ﻪﻧﻮﮔ ﻦﯿﯿﻌﺗ ياﺮﺑ
مﺎﺠﻧا ﺎﯿﻧﺎﻤﺸﯿﻟ يﺎﻫ
ﺖﻓﺮﮔ . ﺑ ﺞﯾﺎﺘﻧ ﻪ ﺖﺳد ﻪﮐ داد نﺎﺸﻧ هﺪﻣآ 94
% ﻪﻧﻮﻤﻧ ﺎﻫ
و ﺎﮑﯿﭘوﺮﺗﺎﯿﻧﺎﻤﺸﯿﻟ 6
% ﻪﻧﻮﻤﻧ ﺪﻧدﻮﺑ روژﺎﻣ ﺎﯿﻧﺎﻤﺸﯿﻟ ﺎﻫ ) .
ﻞﮑﺷ 2 (
ﻞﮑﺷ 1 - ﺞﯾﺎﺘﻧ ياﺮﺑPCR
ﺎﯿﻧﺎﻤﺸﯿﻟ ﺲﻨﺟ ﯽﯾﺎﺳﺎﻨﺷ .
ﺮﮐرﺎﻣ:M
، :C+
لﺮﺘﻨﮐ ﺖﺒﺜﻣ
، :C-
لﺮﺘﻨﮐ ﯽﻔﻨﻣ و هرﺎﻤﺷ يﺎﻫ 1
، 2
، 3
، 4
، 5
، 6
، 7
، 8
، 9
، 10
ﻪﻧﻮﻤﻧ ﺖﺒﺜﻣ يﺎﻫ )
ﺪﻧﺎﺑ 145 bp
نﺎﺸﻧ ﯽﻣ ﺎﯿﻧﺎﻤﺸﯿﻟ ﺲﻨﺟ دﻮﺟو هﺪﻨﻫد ﺪﺷﺎﺑ
(.
ﻞﮑﺷ 2 - ﺎﺘﻧ ﯾ ﺞ
seminested-PCR
ياﺮﺑ ﺎﺳﺎﻨﺷ ﯽﯾ ﻪﻧﻮﮔ ﺎﻫ ي ﻟﯿ ﻧﺎﻤﺸ ﯿﺎ . : M
ﺮﮐرﺎﻣ
، :+C
ﺖﺒﺜﻣ لﺮﺘﻨﮐ
، -C
: ﻔﻨﻣ لﺮﺘﻨﮐ ﯽ
، هرﺎﻤﺷ 5 ﻟﯿ ﻧﺎﻤﺸ ﯿﺎ و روژﺎﻣ
ﻘﺑ ﯿﻪ هرﺎﻤﺷ ﻟ ﺎﻫ ﯿ ﻧﺎﻤﺸ ﯿﺎ ﭘوﺮﺗ ﯿ ﺎﮑ ﺪﻨﺘﺴﻫ ) ﺎﻫﺪﻧﺎﺑ ي
bp760
نﺎﺸﻧ ﻟ دﻮﺟو هﺪﻨﻫد ﯿ
ﻧﺎﻤﺸ ﯿﺎ ﭘوﺮﺗ ﯿ ﺎﮑ و
bp650
ﻟﯿ ﻧﺎﻤﺸ ﯿﺎ ﻣ روژﺎﻣ ﯽ
(.ﺪﺷﺎﺑ
ﺚﺤﺑ زﻮﯿﻧﺎﻤﺸﯿﻟ يﻻﺎﺑ عﻮﯿﺷ ﻪﺑ ﻪﺟﻮﺗ ﺎﺑ و ﺪﻬﺸﻣ رد يﺪﻠﺟ
ﯿﻤﻫا ﮏﯿﺗﻮﻧﻮﺋز ﺖ ندﻮﺑ
ﯽﯾﺎﺠﻧآ زا و نآ ﻪﮐ
ﻪﻧﻮﮔ عﻮﻧ ﻪﺑ ﻪﺘﺴﺑ
ﻞﻣﺎﻋ ﮏﻟﺎﺳ
، هزرﺎﺒﻣ
ﺪﺿ ﺮﺑ يرﺎﻤﯿﺑ
توﺎﻔﺘﻣ يدوﺪﺣ ﺎﺗ
ﯽﻣ ﺪﺷﺎﺑ ، ﺮﺿﺎﺣ ﻪﻌﻟﺎﻄﻣ ﻪﺑ
رﻮﻈﻨﻣ ﻞﮕﻧا ﻪﻧﻮﮔ ﻦﯿﯿﻌﺗ ﻞﻣﺎﻋ يﺎﻫ
يﺪﻠﺟ ﺲﯾزﺎﯿﻧﺎﻤﺸﯿﻟ رد ﯽﻟﻮﮑﻟﻮﻣ شور ﺎﺑ
ﺪﻬﺸﻣ نﺎﺘﺳﺮﻬﺷ ،
رد
ﻞﮕﻧا ﺶﺨﺑ ﯽﺳودﺮﻓ هﺎﮕﺸﻧاد ﯽﮑﺷﺰﭙﻣاد هﺪﮑﺸﻧاد ﯽﺳﺎﻨﺷ
ﺖﻓﺮﮔ ترﻮﺻ ﺪﻬﺸﻣ .
رد ﺮﺿﺎﺣ ﻪﻌﻟﺎﻄﻣ ياﺮﺑ ،
جاﺮﺨﺘﺳا ،DNA
شﺮﺘﺴﮔ زا ﻪﯿﻬﺗ يﺎﻫ
ﺪﺷ هدﺎﻔﺘﺳا نارﺎﻤﯿﺑ ﻪﻤﻫ زا هﺪﺷ .
مﺎﻤﺗ
ﻪﻧﻮﻤﻧ جاﺮﺨﺘﺳا يﺎﻫ هﺪﺷ
لوا ﻪﻠﺣﺮﻣ رد
،PCR دﻮﺟو ﺮﻈﻧ زا
ﺎﯿﻧﺎﻤﺸﯿﻟ ﺲﻨﺟ
، ﺪﻧﺪﺷ هداد ﺺﯿﺨﺸﺗ ﺖﺒﺜﻣ .
ﻪﻌﻟﺎﻄﻣ ﻦﯾا رد
، زا
ﻪﻓﺮﺻ ياﺮﺑ ﯽﺠﺴﻧ شﺮﺘﺴﮔ رد ﻪﻨﯾﺰﻫ و ﺖﻗو رد ﯽﯾﻮﺟ
جاﺮﺨﺘﺳا هدﺎﻔﺘﺳا DNA
ﺪﺷ . ،ﯽﻬﺑﺎﺸﻣ ﻪﻌﻟﺎﻄﻣ رد و نﺎﯾﺪﻀﺘﻌﻣ
لﺎﺳ رد نارﺎﮑﻤﻫ 2002
، جاﺮﺨﺘﺳا ﺎﺑ زا DNA
92 شﺮﺘﺴﮔ
ﮓﻧر ﺰﯿﻣآ ي ﺲﯾزﺎﯿﻧﺎﻤﺸﯿﻟ ﻪﺑ كﻮﮑﺸﻣ داﺮﻓا زا ﺎﺴﻤﯿﮔ ﺎﺑ هﺪﺷ
ﯽﺘﺳﻮﭘ مﺎﺠﻧا و ،PCR
ﻪﮐ ﺪﻧداد نﺎﺸﻧ
ّﻠﮐ ﻪﻧﻮﻤﻧ ﻪﯿ ﺎﻫ
ي
ﻪﯿﻬﺗ ﺎﻫﺪﯾﻼﺳا زا هﺪﺷ ي
اراد ي ﻞﮕﻧا
، ﻪﺠﯿﺘﻧ ﺖﺒﺜﻣ ﺪﻧداد نﺎﺸﻧ
و رد ﯽﺘﺣ 4 ﻪﻧﻮﻤﻧ ﺰﯿﻧ ﻞﮕﻧا ﺪﻗﺎﻓ ﺶﯾﺎﻣزآ
ﺪﯾدﺮﮔ ﺖﺒﺜﻣPCR .
ﺘﻧ ﻦﯾا شﺮﺘﺴﮔ ﻪﮐ داد نﺎﺸﻧ ﺞﯾﺎ ﯽﺠﺴﻧ يﺎﻫ
ﻊﺒﻨﻣ ، رﺎﯿﺴﺑ ﯽﻟﺎﻋ
جاﺮﺨﺘﺳا ياﺮﺑ شور مﺎﺠﻧا وDNA
ﯽﻣPCR ﺪﻨﺷﺎﺑ ) 14 .(
رد
ﻪﻌﻟﺎﻄﻣ ﺮﺿﺎﺣ ﺑ ، ﻪ ﺎﯿﻧﺎﻤﺸﯿﻟ ﻪﻧﻮﮔ ﺺﯿﺨﺸﺗ رﻮﻈﻨﻣ
، ﮏﯿﻨﮑﺗ زا
ﯽﻟﻮﮑﻟﻮﻣ Aransay
نارﺎﮑﻤﻫ و
ﺪﺷ هدﺎﻔﺘﺳا )
13 (.
ناﺮﯾا رد
ﺺﯿﺨﺸﺗ ياﺮﺑ هﺪﯾدﺮﮔ هدﺎﻔﺘﺳا ﻪﻧﻮﮔ
نآ ﺞﯾﺎﺘﻧ ﻪﮐ ﺖﺳا
،
نﺎﺸﻧ هﺪﻨﻫد
ﯿﺳﺎﺴﺣ ﮔﮋﯾو و ﺖ ﯽ
ﺺﯿﺨﺸﺗ رد شور ﻦﯾا يﻻﺎﺑ
ﻪﻧﻮﮔ ﺸﯿﻟ يﺎﻫ ﺰﯿﻧ و نزﺎﺨﻣ ،نارﺎﻤﯿﺑ رد ﺎﯿﻧﺎﻤ
يرﺎﻤﯿﺑ ﻦﯿﻠﻗﺎﻧ
ﺖﺳا هدﻮﺑ .
عﻮﻤﺠﻣ زا 100
لوا ﻪﻠﺣﺮﻣ رد ﺖﺒﺜﻣ ﻪﻧﻮﻤﻧ
، رد
94 % ﺎﯿﻧﺎﻤﺸﯿﻟ ﺎﻬﻧآ و ﺎﮑﯿﭘوﺮﺗ
رد 6 %
ﯿﻘﺑ ﺎﯿﻧﺎﻤﺸﯿﻟ ﻪ ﺎﺑ روژﺎﻣ
شور Semi–nested PCR ﺪﺷ هداد ﺺﯿﺨﺸﺗ
. رد ﻌﻟﺎﻄﻣ تﺎ
ترﻮﺻ ﺮﮕﯾد ،ﺪﻬﺸﻣ ﺮﻬﺷ رد ﻪﺘﻓﺮﮔ
ﺘﻓ ﯽ و لﺎﺳ رد نارﺎﮑﻤﻫ
1382
، ﺎﺑ ﻮﻨﻣ شور ﺘﻧآ لﺎﻧﻮﻠﮐ
ﯽ دﺎﺑ ي ﯽﮔدﻮﻟآ ناﺰﯿﻣ ،
ﺠﺣ ﮑﻤﻫ و نارﺎ ــــــ
ﺳ رد نارﺎ ــــــ
لﺎ 1383
، ﺎﺑ شور
RAPD-PCR رد ،
2/
94 % و ﺎﮑﯿﭘوﺮﺗﺎﯿﻧﺎﻤﺸﯿﻟ دراﻮﻣ رد
8 /5 %
ﯿﻟ دراﻮﻣ رﺎﻤﯿﺑ داﺮﻓا رد ار روژﺎﻣﺎﯿﻧﺎﻤﺸ د
ﺪﻬﺸﻣ نﺎﺘﺳﺮﻬﺷ ر
ﺪﻧداد ﺺﯿﺨﺸﺗ )
15 .(
نارﺎﮑﻤﻫ و يدﻮﻤﺤﻣ ﺰﯿﻧ
لﺎﺳ رد 1388
رد رد دﻮﺧ ﻪﻌﻟﺎﻄﻣ ﺪﻬﺸﻣ
ﺎﺑ ، شور
،PCR ﻪﺑ ﯽﮔدﻮﻟآ ﯽﻧاواﺮﻓ
ﺎﯿﻧﺎﻤﺸﯿﻟ ﺮﺗ رد ار ﺎﮑﯿﭘو 5/
90 % ﻪﻧﻮﻤﻧ ﺎﯿﻧﺎﻤﺸﯿﻟ و ﺎﻫ رد ار روژﺎﻣ
5/
9 % ﻪﻧﻮﻤﻧ ﺪﻧدﻮﻤﻧ ﻦﯿﯿﻌﺗ ﺎﻫ )
16 (.
ﺑ ﺞﯾﺎﺘﻧ مﺎﻤﺗ ﻪ
ﺖﺳد رد هﺪﻣآ
،تﺎﻌﻟﺎﻄﻣ ﻦﯾا
ﯿﻤﻫا و دراد ﯽﻧاﻮﺨﻤﻫ ﺮﺿﺎﺣ ﻪﻌﻟﺎﻄﻣ ﺞﯾﺎﺘﻧ ﺎﺑ ﺖ
ﺎﯿﻧﺎﻤﺸﯿﻟ ﺎﺑ ﻪﺴﯾﺎﻘﻣ رد ﺎﮑﯿﭘوﺮﺗﺎﯿﻧﺎﻤﺸﯿﻟ ﻪﻧﻮﮔ دﺎﺠﯾا رد روژﺎﻣ
يﺪﻠﺟ زﻮﯿﻧﺎﻤﺸﯿﻟ ﻣ ﺮﻬﺷ رد ار نﺎﺴﻧا رد
ﯽﻣ نﺎﺸﻧ ﺪﻬﺸ ﺪﻫد
. رد
ﺮﻬﺷ ﺮﯾﺎﺳ يﻮﺿر نﺎﺳاﺮﺧ نﺎﺘﺳا يﺎﻫ
ﺰﯿﻧ ﯽﺗﺎﻌﻟﺎﻄﻣ نﻮﻨﮐﺎﺗ
ياﺮﺑ ﯾﺎﺳﺎﻨﺷ ﯽ ﻪﻧﻮﮔ ﺎﻫ ي ﺖﺳا ﻪﺘﻓﺮﮔ مﺎﺠﻧا ﺎﯿﻧﺎﻤﺸﯿﻟ .
يﺮﺟﺎﻬﻣ
لﺎﺳ رد نارﺎﮑﻤﻫ و 1387
، 57 ﻠﮕﻧا ﻪﻧﻮﻤﻧ ﯽ
داﺮﻓا زا هﺪﺷاﺪﺟ
ﻼﺘﺒﻣ رد يﺪﻠﺟ زﻮﯿﻧﺎﻤﺸﯿﻟ ﻪﺑ رﻮﺑﺎﺸﯿﻧ نﺎﺘﺳﺮﻬﺷ
ار شور ﻪﺑ
RAPD-PCR اﺮﻗ ﺶﯾﺎﻣزآ درﻮﻣ
و ﺪﻧداد ر ﻪﻧﻮﮔ
ﻞﻣﺎﻋ
ﻣﺎﻤﺗ رد زﻮﯿﻧﺎﻤﺸﯿﻟ ﻪﻧﻮﻤﻧ ﯽ
ار ﺎﻫ ﺎﯿﻧﺎﻤﺸﯿﻟ ﺎﮑﯿﭘوﺮﺗ ﺪﻧداد ﺺﯿﺨﺸﺗ
) 17 .(
ﺮﺟﺎﻬﻣ ي و نارﺎﮑﻤﻫ يﺮﮕﯾد ﻪﻌﻟﺎﻄﻣ رد
لﺎﺳ رد 1389
،
ﻪﻧﻮﻤﻧ يﺎﻫ ﻪﯿﻬﺗ ﻢﺧز زا هﺪﺷ 86
راوﺰﺒﺳ نﺎﺘﺳﺮﻬﺷ رد رﺎﻤﯿﺑ ار
ﺎﺑ شور ﺪﻧداد راﺮﻗ ﺶﯾﺎﻣزآ درﻮﻣ PCR
ﻪﮐ زا عﻮﻤﺠﻣ 86
،ﻪﻧﻮﻤﻧ 32 ﻪﻧﻮﻤﻧ ﻤﺸﯿﻟ ﺎﮑﯿﭘوﺮﺗﺎﯿﻧﺎ و
54 ﻪﻧﻮﻤﻧ روژﺎﻣﺎﯿﻧﺎﻤﺸﯿﻟ
ﺪﻧدﻮﺑ ) 18 ( . ﺮﻬﺷ ﺮﯾﺎﺳ رد رﻮﺸﮐ يﺎﻫ
ﺰﯿﻧ يدﺎﯾز تﺎﻌﻟﺎﻄﻣ ياﺮﺑ
ﯾﺎﺳﺎﻨﺷ ﯽ ﻪﻧﻮﮔ ﺎﻫ ي ﻪﺘﻓﺮﮔ مﺎﺠﻧا ﺎﯿﻧﺎﻤﺸﯿﻟ د ﻦﯾا دﻮﺟو ﺰﯿﻧ و
و
ﺄﺗ يﺪﻠﺟ زﻮﯿﻧﺎﻤﺸﯿﻟ زوﺮﺑ رد ﻪﻧﻮﮔ ﺖﺳا هﺪﯾدﺮﮔ ﺪﯿﯾ
. رد
ﻪﻌﻟﺎﻄﻣ زﺎﺠﺣ ﻪﮐ يا ي
رد نارﺎﮑﻤﻫ و لﺎﺳ
1379 ﺮﻬﺷ رد
ﺠﻧا نﺎﻬﻔﺻا ﺪﻧداد مﺎ
، 120 ﻞﮕﻧا ﻪﻟوﺰﯾا
ﻦﺗدﺎﭘ شور ﻪﺑ ﺎﻫ
ي
ﮏﺗ ﻧﺎﻣدود ﯽ ﺻﺎﺼﺘﺧا ﯽ ﺳرﺮﺑ درﻮﻣ ﯽ
ﺘﻓﺮﮔ راﺮﻗ ﺪﻨ
زا يداﺪﻌﺗ ﻪﮐ
ﻪﻧﻮﻤﻧ ﻪﺑ ﺎﻫ هداد ﺪﯿﯾﺄﺗ رﻮﻈﻨﻣ ﺎﻫ
ي قﻮﻓ شور زا ﻞﺻﺎﺣ
، شور ﺎﺑ
ﻢﯾﺰﻧآوﺰﯾا زرﻮﻓوﺮﺘﮑﻟا و PCR ﺳرﺮﺑ درﻮﻣ ﺎﻫ
ﯽ ﺘﻓﺮﮔ راﺮﻗ ﺪﻨ
. زا
عﻮﻤﺠﻣ 120 ،ﻪﻧﻮﻤﻧ 100 درﻮﻣ
، رﺎﻤﯿﺑ ﻞﻣﺎﻋ ي
ﻤﺸﯿﻟ ﺎﯿﻧﺎ و روژﺎﻣ
8 ﺎﯿﻧﺎﻤﺸﯿﻟ درﻮﻣ رد و ﺖﺳا هدﻮﺑ ﺎﮑﯿﭘوﺮﺗ
12 درﻮﻣ
، ﺞﯾﺎﺘﻧ
ﮏﯿﻨﮑﺗ PCR-RFLP ياﺮﺑ
ﯾﻮﻫ ﻦﯿﯿﻌﺗ ﺎﯿﻧﺎﻤﺸﯿﻟ ﻞﮕﻧا ﺖ
، 15
و ﯽﻧﺎﺴﻧا ﻪﻧﻮﻤﻧ ﮏﯾ
ﻮﯾﺮﻣ ﻪﻧﻮﮔ هﺪﻧﻮﺟ زا ﻪﻧﻮﻤﻧ ﺲﻧ
ﻟ ،سﻮﮑﯿﺒﯿ
ﺪﻨﺘﻓﺮﮔ راﺮﻗ ﺶﯾﺎﻣزآ درﻮﻣ ،
ﺺﺨﺸﻣ ﺪﺷ
رد دﻮﺟﻮﻣ ﻞﮕﻧا ﻪﮐ
مﻻ ﺎﯿﻧﺎﻤﺸﯿﻟ ،هﺪﻧﻮﺟ و ﯽﻧﺎﺴﻧا يﺎﻫ روژﺎﻣ
هدﻮﺑ ﺖﺳا ) 20 (.
ﻮﻨﺗ ع
ﻪﻧﻮﮔ ﯽﮔﺪﻨﮐاﺮﭘ هﻮﺤﻧ رد رد يﺪﻠﺟ ﺲﯾزﺎﯿﻧﺎﻤﺸﯿﻟ ﻞﻣﺎﻋ يﺎﻫ
ناﺮﯾا
، ﺮﻫ رد يرﺎﻤﯿﺑ ﻦﯿﻠﻗﺎﻧ و نزﺎﺨﻣ دﻮﺟو ﺎﺑ ﯽﻤﯿﻘﺘﺴﻣ طﺎﺒﺗرا
دراد ﻪﻘﻄﻨﻣ .
و ﻢﯾﺪﻧ تﺎﻌﻟﺎﻄﻣ ﯽﻣ نﺎﺸﻧ نارﺎﮑﻤﻫ
ﺪﻫد دﻮﺟو ﻪﮐ
ﻪﻧﻮﮔ ﺑ سﻮﻣﻮﺘﺒﻠﻓ ﻪﺸﭘ يﺎﻫ ﻪ
ﺎﻤﺸﯿﻟ ﻦﯿﻠﻗﺎﻧ ناﻮﻨﻋ و ﯽﯾﺎﺘﺳور زﻮﯿﻧ
شﻮﻣ ﺮﯿﺜﮑﺗ و يﺮﻬﺷ ﺑ ﻞﯿﺑرژ يﺎﻫ
ﻪ زﻮﯿﻧﺎﻤﺸﯿﻟ نزﺎﺨﻣ ناﻮﻨﻋ
ﯽﯾﺎﺘﺳور
،كﺎﺧ عﻮﻧ ﺎﺑ ﯽﻤﯿﻘﺘﺴﻣ طﺎﺒﺗرا ، ﺮﻫ رد اﻮﻫ و بآ
دراد ناﺮﯾا ﻪﻘﻄﻨﻣ )1
.(
ﻪﻌﻟﺎﻄﻣ ﻦﯾا رد
، يﺪﻠﺟ زﻮﯿﻧﺎﻤﺸﯿﻟ ناﺰﯿﻣ
نز و دﺮﻣ ﺲﻨﺟ ود رد ﯽﻨﻌﻣ فﻼﺘﺧا ﺪﺟاو ،
اد دﻮﺒﻧ ير . رد
ﻌﻟﺎﻄﻣ ﻪ يﺎﻫ مﺎﺠﻧا ﻪﺑﺎﺸﻣ رد نارﺎﮑﻤﻫ و ﯽﺘﻌﻓر ﻂﺳﻮﺗ ﻪﺘﻓﺎﯾ
رد نارﺎﮑﻤﻫ و نﺎﻘﻫد ﻦﯿﻨﭽﻤﻫ و نﺎﻐﻣاد نﺎﺘﺳﺮﻬﺷ نﺎﺘﺳﺮﻬﺷ
ﯽﻨﻌﻣ توﺎﻔﺗ ﺰﯿﻧ نﺎﺘﺳرﻻ ﯽﮔدﻮﻟآ عﻮﯿﺷ ناﺰﯿﻣ ﻦﯿﺑ يراد
ﺑ دﺮﻣ و نز رد يﺪﻠﺟ زﻮﯿﻧﺎﻤﺸﯿﻟ ﻪ
ﺪﻣﺎﯿﻧ ﺖﺳد )
21
، 22 (
؛
ﯽﻟﺎﺣرد مﺎﺠﻧا ﻪﻌﻟﺎﻄﻣ ﻪﮐ ﺒﻋ ﻂﺳﻮﺗ ﻪﺘﻓﺎﯾ
رد نارﺎﮑﻤﻫ و ﯽﺳﺎ
نﺎﺸﻧ ،نﺎﮔﺮﮔ ﺮﻬﺷ ﺖﺒﺴﻧ نادﺮﻣ رد يرﺎﻤﯿﺑ ﺮﺗﻻﺎﺑ عﻮﯿﺷ هﺪﻨﻫد
ﯽﻣ نﺎﻧز ﻪﺑ ﺪﺷﺎﺑ
) 23 .(
ﻪﻌﻟﺎﻄﻣ ﻦﯾا رد
، ﻦﯾﺮﺘﺸﯿﺑ رﺎﻤﯿﺑ ناﺰﯿﻣ
ي
رد دو ﯽﻨﺳ هوﺮﮔ 0
- 9 و لﺎﺳ 20 - 29 ﻪﺑ ﺐﯿﺗﺮﺗ : 24 % و 34 %
ﺪﺷ هﺪﯾد . ﻦﯾا ﺞﯾﺎﺘﻧ ﻧا تﺎﻌﻟﺎﻄﻣ ﺮﯾﺎﺳ ﺎﺑ ﻪﻌﻟﺎﻄﻣ
مﺎﺠ رد هﺪﺷ
دراد ﯽﻧاﻮﺨﻤﻫ ناﺮﯾا .
نارﺎﮑﻤﻫ و ﯽﺘﻌﻓر ﻪﻌﻟﺎﻄﻣ رد
، ﻦﯾﺮﺘﺸﯿﺑ
ﯽﻨﺳ هوﺮﮔ رد يرﺎﻤﯿﺑ ناﺰﯿﻣ 10
- 19 و 20 - 29 ﻪﺑ لﺎﺳ ﺐﯿﺗﺮﺗ :
9/
22 % و 4/
39 % ﺪﺷ هﺪﯾد )
21 ( و ﯽﺳﺎﺒﻋ ﻪﻌﻟﺎﻄﻣ رد و
نارﺎﮑﻤﻫ
، هوﺮﮔ رد نارﺎﻤﯿﺑ ناﺰﯿﻣ ﻦﯾﺮﺘﺸﯿﺑ يﺎﻫ
ﯽﻨﺳ 10 - 14 ،
15 - 19 و 20 - 24 ﺪﯾدﺮﮔ هﺪﻫﺎﺸﻣ لﺎﺳ )
23 ( ﻦﯿﻨﭽﻤﻫ ؛ رد
نارﺎﮑﻤﻫ و نﺎﻘﻫد ﻪﻌﻟﺎﻄﻣ
، هوﺮﮔ رد يرﺎﻤﯿﺑ ناﺰﯿﻣ ﻦﯾﺮﺘﺸﯿﺑ
ﯽﻨﺳ 0 - 9 ﻪﺑ لﺎﺳ ناﺰﯿﻣ 94 / 43 % ﺪﺷ شراﺰﮔ )
22 .(
ﻦﯾا رد
ﻪﻌﻟﺎﻄﻣ
، ﻢﺧز ﻦﯾﺮﺘﺸﯿﺑ ﯽﻧاواﺮﻓ ترﻮﺻ رد ﺲﭙﺳ و ﺖﺳد رد ﺎﻫ
ﻢﺧز ﺪﺻرد ﻦﯾﺮﺘﻤﮐ و دﻮﺑ
،ﺎﭘ رد ﺎﻫ ماﺪﻧا ﺮﯾﺎﺳ و ﻪﻨﺗ
ﺎﻫ ﻪﮐ
ًﻻﻮﻤﻌﻣ ﭘ هﺪﯿﺷﻮ ﺪﻧا
، ﺪﺷ هﺪﯾد . نارﺎﮑﻤﻫ و نﺎﻘﻫد ﻪﻌﻟﺎﻄﻣ رد ،
ﻢﺧز ﻦﯾﺮﺘﺸﯿﺑ ﺲﭙﺳ و ترﻮﺻ و ﺖﺳد ﻪﯿﺣﺎﻧ رد ﺎﻫ
رد ﺎﭘ ﻪﯿﺣﺎﻧ ﺪﯾدﺮﮔ شراﺰﮔ
) 22 ( . ﯽﻔﻘﺛ ﻢﻗ رد نارﺎﮑﻤﻫ و رﻮﭘ ﻢﺧز ﯽﻧاواﺮﻓ ،
ﻪﺑ ار ﺎﯿﻧﺎﻤﺸﯿﻟ ﺐﯿﺗﺮﺗ
: ﺖﺳد رد ﺪﻧدﻮﻤﻧ شراﺰﮔ ترﻮﺻ و ﺎﭘ ،
) 24 .(
ﺲﻧﻮﺗ رد نارﺎﮑﻤﻫ و ﯽﻓرﺎﺧ ﻪﻌﻟﺎﻄﻣ رد
، 60 % ﺎﺿ تﺎﻌﯾ
ترﻮﺻ رد
، 14 % رد و ﺖﺳد 7
% رد ﮔ ﺎﭘ ﺪﺷ شراﺰ )
25 .(
ﺎﺑ
هﺪﯿﺷﻮﭘ ﻪﺑ ﻪﺟﻮﺗ ﺎﭘ ،ﺖﺳد ﺶﺷﻮﭘ مﺪﻋ و نﺪﺑ طﺎﻘﻧ ﺮﯾﺎﺳ ندﻮﺑ
ترﻮﺻ و
، ﯾا رد ﻪﻌﯾﺎﺿ دﺎﺠﯾا و شﺰﮔ لﺎﻤﺘﺣا ﺮﺘﺸﯿﺑ ﯽﺣاﻮﻧ ﻦ
ﯽﻣ ﻪﯿﺻﻮﺗ و هدﻮﺑ
ﺪﺣ ﺎﺗ دﻮﺷ ﻞﻣﺎﮐ ﺶﺷﻮﭘ زا نﺎﮑﻣا
يﺮﺗ
ﻪﺑ ﺖﺳا ﻊﯾﺎﺷ يرﺎﻤﯿﺑ ﻪﮐ ﯽﻘﻃﺎﻨﻣ رد صﻮﺼﺧ
، ﺷ هدﺎﻔﺘﺳا دﻮ
. رد
ﺮﺿﺎﺣ ﻪﻌﻟﺎﻄﻣ
، 6 / 51 % نارﺎﻤﯿﺑ
، ﺪﺟاو 1 ﺎﺗ 2 ﻢﺧز
، 9 / 41
ﻦﯿﺑ ﺪﺟاو نارﺎﻤﯿﺑ 3
ﺎﺗ 6 ﻢﺧز ﺎﻬﻨﺗ و 5/
6 % زا ﺮﺘﺸﯿﺑ نارﺎﻤﯿﺑ 6
ﺪﻨﺘﺷاد ﻢﺧز دﺪﻋ .
ﺑ ﺞﯾﺎﺘﻧ ﺎﺑ ﺞﯾﺎﺘﻧ ﻦﯾا ﻪ
د ﺖﺳ ﯽﺑﻮﻘﻌﯾ ﻂﺳﻮﺗ هﺪﻣآ
نارﺎﮑﻤﻫ و )4
(
، نارﺎﮑﻤﻫ و نﺎﻘﻫد )
22 ( و نارﺎﮑﻤﻫ و ﯽﺘﻌﻓر
دراد ﯽﻧاﻮﺨﻤﻫ )
21 .(
ﻮﺿﻮﻣ ﻦﯾا
ًﻻﺎﻤﺘﺣا ع ﯽﻣ
داﺪﻌﺗ ﺎﺑ ﺪﻧاﻮﺗ
نﻮﺧ هﻮﯿﺷ و شﺰﮔ ﻪﺸﭘ يراﻮﺧ
ﺪﺷﺎﺑ ﻪﺘﺷاد طﺎﺒﺗرا ﺎﻫ .
رد
ﺮﺿﺎﺣ ﻪﻌﻟﺎﻄﻣ ﻢﺧز ﺮﺘﺸﯿﺑ هزاﺪﻧا ،
زا ﺮﺘﻤﮐ ﺎﻫ 5
ﯽﻠﯿﻣ هدﻮﺑ ﺮﺘﻣ
؛ﺖﺳا ا ﻢﺧز زوﺮﺑ نﺎﻣز زا ﺮﮕﯾد فﺮﻃ ز ﻪﻌﺟاﺮﻣ مﺎﮕﻨﻫ ﺎﺗ ﺎﻫ
، رد
6/
92 % ،داﺮﻓا زا ﺮﺘﻤﮐ 6
هﺎﻣ ﻪﺘﺷﺬﮔ هدﻮﺑ ﯽﻣ ﻪﮐ ﺖﺳا ﺪﻧاﻮﺗ
ﺮﺑ ﯽﻠﯿﻟد ﺪﺷﺎﺑ ﻢﺧز زوﺮﺑ تﺪﻣ و ﻢﺧز هزاﺪﻧا ﻪﻄﺑار .
ﻪﺠﯿﺘﻧ يﺮﯿﮔ
،ﻪﻌﻟﺎﻄﻣ ﻦﯾا رد جاﺮﺨﺘﺳا DNA
شﺮﺘﺴﮔ زا هﺪﺷ يﺎﻫ
ﺶﯾﺎﻣزآ ﺖﺤﺗ ﯽﺠﺴﻧ ﺐﻟﺎﻏ ﻪﻧﻮﮔ ﻪﮐ داد نﺎﺸﻧ PCR
ﺪﻬﺸﻣ ﺮﻬﺷ رد يﺪﻠﺟ زﻮﯿﻧﺎﻤﺸﯿﻟ ﯽﻣ ﺎﮑﯿﭘوﺮﺗﺎﯿﻧﺎﻤﺸﯿﻟ ،
ﺪﺷﺎﺑ . زا
ﺠﻧآ ﯽﯾﺎ ﻪﮐ ﺎﯿﻧﺎﻤﺸﯿﻟ ﻪﮐ ﺎﮑﯿﭘوﺮﺗ
، ﯽﻣ ﺪﻧاﻮﺗ ﮓﺳ ﺑ ار ﻪ ﯽﻓدﺎﺼﺗ رﻮﻃ
هدﻮﻟآ ﺪﯾﺎﻤﻧ
، ﻦﯾاﺮﺑﺎﻨﺑ ياﺮﺑ ﯽﮑﺷﺰﭙﻣاد و ﺖﺷاﺪﻬﺑ هرادا يرﺎﮑﻤﻫ
زا يرﺎﻤﯿﺑ لﺮﺘﻨﮐ ﺮﺑ يدﺎﯾز ﺖﯿﻤﻫا
ﺖﺳا رادرﻮﺧ .
ﺮﮑﺸﺗ و ﺮﯾﺪﻘﺗ
ﻦﯾﺪﺑ ﻪﻠﯿﺳو نﺎﮔﺪﻨﺴﯾﻮﻧ
، زا ﻪﻧﺎﻤﯿﻤﺻ يرﺎﮑﻤﻫ ﻢﻧﺎﺧ
هﺎﮕﺸﯾﺎﻣزآ ﻞﻨﺳﺮﭘ و يراﺪﻤﻠﻋ ﺶﺷﻮﮐ ﻢﻧﺎﺧ ،ﯽﺻﻮﺼﺧ
و ناﺮﮔ
و نﺎﯾدوﺮﻫﺎﺷ يﺎﻗآ و ﯽﺑارﺎﻓ نﺎﺘﺳرﺎﻤﯿﺑ هﺎﮕﺸﯾﺎﻣزآ ﻞﻨﺳﺮﭘ و ﺪﻬﺸﻣ رد روﺮﺳ ﮏﯿﻨﯿﻠﮐ هﺎﮕﺸﯾﺎﻣزآ ﻞﻨﺳﺮﭘ زا ﺰﯿﻧ
نﺎﺳﺎﻨﺷرﺎﮐ
ﻞﮕﻧا ﺶﺨﺑ ﯽﺳودﺮﻓ هﺎﮕﺸﻧاد ﯽﮑﺷﺰﭙﻣاد هﺪﮑﺸﻧاد ﯽﺳﺎﻨﺷ
ﺪﻬﺸﻣ - آ داﮋﻧﺪﻤﺤﻣ و يرذآ ،ﯽﺗﺮﺸﻋ نﺎﯾﺎﻗ -
ﯽﻧادرﺪﻗ و ﺮﮑﺸﺗ ﻣ
ﯽ ﺪﻨﯾﺎﻤﻧ .
ﻊﺑﺎﻨﻣ :
1- Nadim A, Javadian E, Sedirashti, Epidemiology of cutaneous leishmaniasis in Iran. In: Ardahli Rezai Nadim (Eds.).
Leishmania and leishmaniosis. 2nd ed. Iran: University press center, 1985. pp: 149-75. [Persian]
2- Davies CR, Reithinger R, Campbell-Lendrum D, Feliciangeli D, Borges R, Rodriguez N. The epidemiology and control of leishmaniasis in Andean countries. Cad Saude Publica. 2000; 16(4): 925-50.
3- Rassi Y, Javadian E, Jalali M, Motazedian MH, Vatndoost H. Investigation on Zoonotic Cutaneous Leishm- aniasis, Southern Iran. Iranian Journal of Public Health. 2004; 33(1): 31-5.
4- Yaghoobi-Ershadi MR, Akhavan AA, Zahraei-Ramazani AV, Abai MR, Ebrahimi B, Vafaei-Nezhad R, et al.
Epidemiological study in a new focus of cutaneous leishmaniasis in the Islamic republic of Iran. East Mediterr Health J.
2003; 9(4): 816-26.
5- Yaghoobi-Ershadi MR, Hanafi-Bojd AA, Javadian E, Jafari R, Zahraei-Ramazani AR, Mohebali M. A new focus of cutaneous leishmaniasis caused by Leishmania tropica. Saudi Med J. 2002; 23(3): 291-4.
6- Athari A, Jalal lu N. A five -year survey of cutaneous leishmaniasis in iran (2001-2006). Journal of Isfahan Medicine School. 2006; 24(82): 8-13. [Persian]
7- Nadim A. Leishmanioses. In: Azizi F (eds.) Epidemiology and control of prevalent diseases in Iran. 2nd ed. Iran:
Publications of Payam Noor University; 2000. pp: 524-32. [Persian]
8-Karimian Shirazi M, Razmi GR, Naghibi A (eds.) The retrospective study of the prevelance of cutaneous leishmaniosis in Mashhad area. 8th NICOPA; 2012; OCT 16-18, Kerman, IRAN. [Persian]
9- Karimian Shirazi M, Razmi GR, Naghibi A(eds.) Isolation leishmania by culturing with NNN media enriched by RPMI. 8th Iranian veterinary student congress; 2012; 4-6 Sep, Tabriz, Iran. [Persian]
10- Fata AAM,Dalimi Asl H,Jaefari MR,Mohajeri M,Khamesipour A,Valizadeh M. Clinical appearance, leishmanin test & elisa using monoclonal antibody in diagnosis of different forms of cutaneous leishmaniasis. Medical Journal of Mashhad University of Medical Sciences. 2004; 47(83): 19-27. [Persian]
11- Mohajeri M,Hatam Gh.R,Shamsian SAA,Javaheri A. Isolation of Leishmania majorby isoenzyme electrophoresis method inMashhad. Medical Journal Mashhad University of Medical Sciences. 2005; 48(88): 177-84. [Persian]
12- Lachaud L, Marchergui-Hammami S, Chabbert E, Dereure J, Dedet JP, Bastien P. Comparison of six PCR methods using peripheral blood for detection of canine visceral leishmaniasis. J Clin Microbiol. 2002; 40(1): 210-15.
13- Aransay AM, Scoulica E, Tselentis Y. Detection and Identification of Leishmania DNA within Naturally Infected Sand Flies by Seminested PCR on Minicircle Kinetoplastic DNA. Appl Environ Microbiol. 2000; 66(5): 1933-8.
14- Motazedian H, Karamian M, Noyes HA, Ardehali S. DNA extraction and amplification of Leishmania from archived, Giemsa-stained slides, for the diagnosis of cutaneous leishmaniasis by PCR. Ann Trop Med Parasit. 2002;
96(1): 31-4.
15- Hajjaran H, Mohebali M, Razavi MR, Rezaei S, Kazemi B, Edrissian GhH, et al. Identification of leishmania species isolated from human cutaneous leishmaniasis, using random amplified polymorphic DNA (RAPD-PCR).
Iranian J publ Health. 2004; 33(4): 8-15.
16- Mahmoodi MR, Mohajeri M, Tavakkoli Afshar J, Shakeri MT, Yazdan Panah MJ, Berenji F, et al. Molecular Identification of Leishmania Species Causing Cutaneous Leishmaniasis in Mashhad, Iran. Journal of Ilam University of
18- Mohajery M, Shamsian M, Rezaei A, Hasan poor K, Shakeri MT, Farnoosh GR. Evaluation of mulecular epidemiology of cutaneous leishmaniasis in Sabzevar. Medical Journal of Mashhad University of Medical Sciences.
2010; 53(3): 138-44. [Persian]
19- Hejazi SH, Nasrifar P, Jamali S, Jahangir Nezhad AA, Khamesipour A. Identification of leishmaniasis species using monoclonal antibodies in Isfahan. Iran J Dermatol. 2000; 4(1): 7-11. [Persian]
20- Saghafipour A, Rassi Y, Abai MR, Oshaghi MA, Yaghoobi Arshadi MR, Mohebali M, et al . Identification of Leishmania species in patients and reservoir rodents using PCR–RFLP in the central county of Qom province in 2010.
Arak University of Medical Sciences Journal. 2012; 15(6): 1-10. [Persian]
21- Rafati N, Shaporimoghadem A, Ghorbani R. Epidemiological study of cutaneous leishmaniasis in Damghan ( 2000- 2006). Koomesh, Journal of Semnan Univercity of Medical Science. 2007; 8(4): 247-54. [Persian]
22- Dehghan A, Ghahramani F, Hashemi B. Study on cutaneous leishmaniasis in Lorestan From 2005-2008. Journal of Jahrom Uiversity of Medical Sciences. 2009; 8(12): 7-11. [Persian]
23- Abbasi A, Ghanbary MR, Kazem Nezhad K. The epidemiology of cutaneous leishmaniasis in Gorgan(1998-2001).
Journal of Army University of Medical Sciences of The I.R. Iran (Jaums). 2004; 2(1): 275-8. [Persian]
24-Saghafipour A, Akbari A, Rasi Y, Mostafavi R . Epidemiological study of leishmaniasis in Qom. Qom University of Medical Science Journal 2012 ;1(6):27-31 [persian]
25- Kharfi M, Benmously R, El Fekih N, Daoud M, Fitouri Z, Mokhtar I, et al. Childhood leishmaniasis: Report of 106 cases. Dermatology Online Journal.2004; 10(2): 6
Abstract Original Article
Molecular identification of Leishmania species causing cutaneous leishmaniasis in Mashhad, Iran
Mohammad Karimian Shirazi1,Gholamreza Razmi2, Abolghasem Naghibi3
Background and Aim: Cutaneous leishmaniasis is an endemic disease with notorious public health effects in Iran. The clinical symptoms of the disease were identified as dry and wet forms. It is essential to distinguish leishmania species in every area in order to design a control plan of the diseases. Regarding the morphological similarity of leishmania parasites in different species, it is necessary to employ sensitive diagnostic methods including PCR to differentiate of them. In the present study, a molecular assessment was done to identify leishmania species in Mashhad between autumn 2011 and summer 2013.
Materials and Methods: Firstly, tissue smears were collected from the lesions of 100 and from the ulcers of 25 patients; and were cultured in NNN nutrified with RPMI. The positive samples (tissue smears and culture) were used for DNA extraction and PCR. PCR methods were used in two steps. First, a sensitive PCR was used to detect leishmania genus and, secondly, positive samples were examined with species specific semi- nested– PCR.
Results: In the first step of PCR, all of the samples were proved to be positive for Leishmania spp and in second step Leishmania tropica and L.major were detected in 94% and 6% in positive –PCR amplicon, respectively.
Conclusion: Based on the results, Leishmania tropica is more prevalent than L.major in Mashhad.
Key Words: Leishmania tropica; Leishmania major; Cutaneous Leishmaniasis; PCR; Mashhad
Journal of Birjand University of Medical Sciences. 2014; 21 (2): 237-245.
Received: August 14, 2013 Accepted: October 21, 2013
