Expression of Oncoprotein Gankyrin in Drug Resistant and Sensitive Cancer Ovarian and Gastric Cancer Cell Lines
Maryam Taheri1, Khadijeh Jamialahmadi2,3,
Fatemeh Kalalinia4
1 MSc in Biochemistry, Faculty of Science, Payam Noor University of Mashhad, Mashhad, Iran
2 Assistant Professor, Department of Medical Biotechnology, Faculty of Medicine, Mashhad University of Medical Sciences, Mashhad, Iran
3 Biotechnology Research Center, Institute of Pharmaceutical Technology, Mashhad University of Medical Sciences, Mashhad, Iran
4 Associate Professor, Biotechnology Research Center, Institute of Pharmaceutical Technology, Mashhad University of Medical Sciences, Mashhad, Iran
(Received June 8, 2017 ; Accepted November 26, 2017)
Abstract
Background and purpose: Multidrug resistance (MDR) phenotype is a major complication in cancer chemotherapy. Gankyrin is a key point molecule in cell cycle regulation and may contribute to drug-resistance phenotype of tumor cells. The aim of this study was to compare the basal Gankyrin expression level in ovarian and gastric drug-resistant cells with their parental drug-sensitive cells.
Materials and methods: In this experimental study, the Gankyrin expression at mRNA and protein levels in drug resistance cell lines was compared with their parental drug sensitive cell lines by real time RT-PCR and Western blotting.
Results: Gankyrin mRNA expression in A2780/RCIS cells was statistically lower than A2780 cells (p= 0.00) but their difference was not statistically significant at protein level (p= 0.240). In addition, Gankyrin expression in EPG85-257/RDB was lower than its parental drug sensitive cell line at mRNA and protein level.
Conclusion: This study found an opposite relationship between Gankyrin expression and MDR phenotype related to the overexpression of MDR transportes. This suggestes for the first time that the incidence of MDR phenotype could inhibit tumorgenisity.
Keywords: gankyrin, multidrug resistance, ovarian cancer, gastric cancer
J Mazandaran Univ Med Sci 2018; 28 (161): 12-23 (Persian).
هرود هرامش متشه و تسيب 161
دادرخ لاس 1931 ( 39 - 13 )
نايب نازيم يسررب نيئتورپوکنوا
يلولس ياه هدر رد نيريکناگ
هدعم و نادمخت ناطرس مواقم
ساسح و ناطرس دض ياهوراد هب
یرهاط میرم 1
یدمحلاا یماج هجیدخ
2 و
3
این یللاک همطاف
4
هدیكچ
هقباس :فده و مهم زا ييوراد دنچ تمواقم پیتونف زورب رت
ميژر ندوب دمآراکان ليلاد ني تی.ا ينایمرد يیییش یاه
یاه نیئتورپ دودعم زا نيریكناگ نژوكنا
میظنت ناونع هب هک ت.ا ي مهم یاهریسم يفنم هدننک
روموت رگبوکر.
يییهم یقن
ار رد دربشیپ دنور يناطر.
لول. ندش اه
يم افيا دياین ییم هیسياقم هیب هییلوا یرگلابرغ کي رد ،هعلاطم نيا رد هیياپ ناییب نا
یوراد هب مواقم یاه لول. رد نيریكناگ ناطر.
لول. اب يناسنا هدعم و نادیخت دش هتخادرپ ،وراد هب ساسح دلاو یاه
شور و داوم ،يبرجت هعلاطم نيا رد:اه
طی. رد نيریكنایگ نیئتورپوكنا نایب نا یم هدر رد نیئتوریپ وmRNA
يلولی. یایه
در رد نآ نایب اب وراد هب مواقم ه
کینكت زا هدافت.ا اب بیترت هب وراد هب ساسح دلاو يلول. یاه یاه
Real Time RT-PCR
و
Western Blotting
دش هسياقم
هتفای :اه ناشن هدمآ ت.د هب جياتن هاک هدنهد
ينعم راد لول. رد نيریكناگ نایب وراد هیب موایقم نادییخت ناطر. یاه
(
A2780/RCIS
نایب هدننک اقم یاهرتروپسنارت ييوراد تمو
MRP2
) ( 00 / 0 )p=
رد وراد هیب سایسح دیلاو يلول. هدر لباقم رد
ط.
دوبmRNA
( 040 / 0 )p=
مه نینچ نایب نيریكناگ هدر رد
( مواقم هدعم ناطر. لول. یاه
EPG85-257/RDB
ناییب هدیننک
ييوراد تمواقم یاهرتروپسنارت ط. رد )MDR1
مک نیئتورپ وmRNA
زا رت اد هب ساسح دلاو لول.
دوب نآ یور
:جاتنتسا ناشن قیقحت نيا جياتن عویجم رد تیمواقم پییتونف زوریب ایب نيریكنایگ ناییب نا یم نیب سوكعم طابترا هدنهد
پیییپ نایییب يا ییفا قییيرط زا يییيوراد دوییب يییيوراد رتروپییسنارت یاییه
يییم داهنییشیپ هیییپرف نییيا ،ا،ییل دوییش
ي ییفا هییک
نایب يم ييوراد یاهرتروپسنارت دننکراهم دناوت
لول. رد ازروموت مجاهم صاوخ ه دشاب يناطر. یاه
:یدیلک یاه هژاو هدعم ناطر. ،نادیخت ناطر. ،ييوراد دنچ تمواقم ،نيریكناگ
همدقم
هار نيرتراوییم زا يییكي يناییمرد يییییش ناییمرد یاییه
ردایق اهوراد يهاگ دوجو نيا اب ،ت.ا میخدب یاهروموت لولی. نتشک هب يیین یرویموت یایه
دنیشاب
(
،،0
زا يیكي )
ناطر. ينامرد يییش رد يلصا تلاكشم تیمواقم زوریب ،اه
( يیيوراد دنچ
Multi drug resistance (MDR)
هیک تی.ا
ل. نآ رد یی لو ه یی . یا ی ناطر ی عم رد هک ي یی
ضر کي یوراد
:لوئسم فلوم این ینلاک همطاف
- دهشم : ژولونكتویب تاقیقحت کرم ،يلعوب هدكشهوژپ ،دهشم يكش پ مولع هاگشناد ی
Kalaliniaf@mums.ac.ir E-mail:
، يییشویب دشرا ي.انشراک ناريا ،دهشم ،دهشم رون مایپ ،مولع هدكشناد ،يیشویب هورگ ،
0 ،رايدات.ا ب هورگ ی ژولونكتو ی كش پ ي
، يكش پ هدكشناد ،
هاگشناد مولع يكش پ
،دهشم
،دهشم ناريا
3 یژولونكتویب تاقیقحت کرم هدكشهوژپ ،
ف یاهيروان نيون ييوراد ،
،دهشم يكش پ مولع هاگشناد ناريا ،دهشم
4 رایشناد ، یژولونكتویب تاقیقحت کرم هدكشهوژپ ،
یاهيروانف نيون ييوراد
،دهشم يكش پ مولع هاگشناد ، ناريا ،دهشم
: تفايرد خيرات
،1 / 3 /
،331 : تاحلاصا تهج عاجرا خيرات 02
/ 3 /
،331 ات بيوصت خير : 5 / 3 /
،331
هتفرگ رارق ناطر.دپ یرگيد ناطر.دپ یاهوراد هب ،دنا
توایفتم هییلوا یوراد ایب دریكلیع و نایتخا. رظن زا هک يم نایشن تمواقم ،دنتسه دینهد
(
،
تیمواقم هیک ينایمز )
يم داجيا یب رادقم زا دياب دوش هبلغ روظنم هب وراد یرت
تلاح نيا رد ،دوش هدافت.ا تمواقم رب ضراویع یقف هن
يم رهاظ يبناج نيا هكلب ،دوش
تیمواقم نتفر لااب ثعاب لیع
لول.
يم وراد هب اه دوش
( 0
یاهریسم )
يلوكلوم يیفلتخم
لییخد يیيوراد دنچ تمواقم پیتونف زورب رد يیم
دیشاب
نتخادیینا نوریییب يا ییفا ،وراد ،،ییج هاییک دییننایه (
Efflux
يا یفا ،وراد تییلاعف هایک ،لول. زا وراد ) یغ ،وراد دییه دییح زا یییب نایییب ،وراد ندوییب لاییعفر
وراد بی.آ یزا.زاب يا فا و وراد ده نوی.اتوم
( 3 )
پییپ ی.وت لولی. زا وراد نتخادنا نوریب يا فا یایه
لویعم ،يياشغ هدیش هدهاشم ييوراد تمواقم تلع نيرت
نيا ت.ا ينیلاب یاهدربراک و يهاگشيامزآ تاقیقحت رد نیئتورییپ تروپییسنارت یاییه داوناییخ هییب قییلعتم يییيوراد ر
نیئتوریپ هیب هدنویش لیصتم یایه (ATP
ATP-binding
cassette transporters (ABC transporters)
دنتیسه )
مهم زا هک نآ نيرت
يم اه هیب ناویت (MDR1
Multidrug-
resistance gene 1
،) (MRP1 Multidrug-resistant
protein 1
و ) (MRP2 n 2 resistant protei -
Multidrug
)
دوین هراشا
( 1
، 2
)
نيریكنایگ (
Gankyrin (also khnown
as PSMD10 or P28GANK)
) یدیيدج نیئتورپویكنا ،
يلویكلوم نزو ایب ت.ا 05
یوایح هیک نویتلادولیک 001
هنیمآ دی.ا رد
تفه تی.ا نيریكنآ راركت نیئتوریپ نیيا
قن رایهم ،يلولی. لكیی. تفریشیپ رد ار یددعتم یاه
اجيا ین و زوتپوپآ يیم ایفيا ناطری. تفرشیپ و د
دینک
(
، )
نيریكناییگ هیی.
نایییب ،لوا دراد يلییصا يلولیی. درییكلیع
نیئتوریییپ هییي جت و نویییی.لايروفسفرپیه اییب نيریكناییگ بتریم تی.ا رو.رپا. روموت روتکاف کي هک اموت.لابونیتر يم دشاب هایک ثعاب هجیتن رد هک دریكلیع
اموتی.لابونیتر
يییم دوییش
( 4،5
هییب نيریكناییگ ،مود )
نیئتورییپ يبوییيE3
زایگیل نیتییویک (MDM2
Mouse double minute 2
)
يم لصتم بیيرخت و دوش
يیم لیهیست ارP53
نیيا ،دینک نژ تیییلاعف زا لیییع
پوپآ یاییه وت
هییب هتییسباو کیییت
P53
تعنایم هدرک يیب ،لولی. ندنام هدنز هب و و موینژ يتایبا
يم کیک ينژوكنا لكش رییغت دینک
( 1
، 2
لایصتا ،موی. )
هیب نيریكناگ (CDK4
Cyclin Dependent Kinase 4
) ،
یراهم دركلیع يلول. لكی. تفرشیپ
روی.رپا. رویموت
P16INK4A
و
P18INK4A
يییم يییثنخ ار دیینک
( 1
نییيا )
نوییی.لايروفسف ثییعاب لیییع (Rb
Retinoblastoma
) ،
يسيونور روتکاف تیلاعف يلولی. لكیی. تفرشیپ وE2F
يم دوش
( 3
ریب يیفنم راا اب نيریكناگ عویجم رد نياربانب )
هب هتسباو ينا.ر مایپ ریسم ود وpRb
يییهم یقن ،P53
لكش رد ناطر.زا یرایسب یریگ يم افيا اه
دنک
(
،0
ًاریخا )
اب بترم نيریكناگ نایب يا فا هک ت.ا هدش هداد ناشن ناییب رد ریییغت قیيرط زا يیيوراد تیمواقم پییتونف زورب خرب نیئتورپ زا ي دیننایه زویتپوپآ ریسم رب راوم یاه
Bcl-2
،
،Bax E2F-1
زاپ.اک ، 1 زاپ.اک و 3 يم دشاب
(
،،
میه )
نیینچ
رد يیيوراد تیمواقم یلااب ط. هک ت.ا هدش صخشم لول. يخرب رد نویی.اتوم زوریب هیجیتن رد یرویموت یاه
يییم نآ درییكلیع صییقن هییجیتن رد وP53
دییشاب
(
،0
نییيا )
تيوقت تادهاشم ک
نيریكنایگ هک دنتسه هیپرف نيا هدنن
يم لكش رد دناوت یقن يیيوراد تیمواقم پیتونف یریگ
رد ،هیعلاطم نیيا رد دیشاب هتشاد يیهم یرگلایبرغ کیي
لولی. رد نيریكناگ هياپ نایب نا یم ،هیلوا هیب موایقم یایه
زا يیكي نایب يا فا زا يلدم ناونع هب کي ره هک( وراد قم رد لیخد يلصا نیئتورپ ود يیيوراد تیموا
وMDR1
لول. اب )دنتسه حرطمMRP2
،وراد هب ساسح دلاو یاه
دش هسياقم
اه شور و داوم
داوم تییشک یییحم
RPMI 1640
(
Roswell Park
Memorial Institute medium 1640
نییینج مریی. و )
( یوایگ
FBS (Fetal Bovine Serum)
) تکریش زا
Gibco
ویلب نایپيرت دیش یرادیيرخ ایلارت.ا روشک يینپ ،
نیلیی.
-
تکریش زا درویفدارب رگشنکاو و نیسياموتپرت.ا
Sigma
يتنآ دندش هیهت نایلآ نيریكنایگ دیپ لانولک يلپ یداب
تکرش زا
Santa Cruz
يتنآ ،اكيرمآ نیتکا اتب دپ یداب
تکرش زا
Sigma
يتنآ و نایلآ ایب هگوژنوک هيوناا یداب
(HRP Horseradish peroxidase ا)
تکریش ز
Abcam
رمآ تکریییش زا يییینیئتورپ ردیییل دیییش یرادیییيرخ ایییكي
Thermo Scientific
ایهریيارپ ديدرگ یراديرخ نایلآ
تکرییش زا
Metabion
ارختیی.ا تیییک ،نایییلآ
RNA
(
TriPure Isolation Reagent Kit
تکریش زا )
Roche
نکاو تیک و نایلآ
Real Time RT-PCR
تکرش زا
Takara
دش یراديرخ نپاژ
يلول. تشک در هیه ه قییقحت نیيا رد هدافتی.ا درویم يلول. یاه
یژولوتایپ هوریگ( هیگلا نایمره روسفورپ .وت ،يبرجت هاگشيامزآ نيا هب )نایلآ ،نیلرب ،هتيرچ هاگشناد ،يلوكلوم هدر دندوب هدش هيده ترایبع هدافتی.ا درویم يلول. یاه
هیب موایقم ينایسنا نادییخت ناطری. يلول. هدر زا دندوب نیتلاپ سی.
A2780/RCIS
هیک يلولی. لدیم ناونع هب
يم نایب ييلااب ط.رد ارMRP2
سایسح دلاو لول. و دنک
ينعي نآ یوراد هب
A2780
يلول. هدر ، هدعم ناطر.
يناسنا
نیسیبوروسکود هب مواقم
EPG85-257/RDB
ناوینع هیب
هک يلول. لدم يیم نایب ييلااب ط. رد ارMDR1
دینک
يینعي نآ یوراد هیب ساسح دلاو لول. و
EPG85-257
هدر هیییه تییشک یییحم رد يلولیی. یاییه
RPMI-1640
یواییح درادناتیی.ا
(v/v)
،0 دییصرد ،FBS
-L
نیماییتولگ
0mM
نیییسياموتپرت.ا( کیییتویب يییتنآ و
μg/mL
،00 ،
ينپ نیلی.
،00U/mL
لولی. دندیش هداد تیشک ) رد ایه
یامد 32ºC
یواح رفسیتا و 5
دصرد هداد هدیشرCO2
يم دندش
نکاو ماجنا
Real Time RT-PCR
لولیی.
تیییلپ نورد اییه یاییه
1 هداد تییشک هییناخ
يییسنیولفناک هییب ندییی.ر زا سییپ و دندییش 20
،دییصرد
لولییی. لاییتوتRNA
تییییک لیییکوتورپ ایییب قبایییطم ایییه
Tripure Isolation Reagent
نییییعت دییش ارختیی.ا تییظلغ
هاگتیی.د زا هدافتیی.ا اییب هدییش ارختیی.اRNA
لدیم اردوناین
Thermo scientific NanoDrop1000
هزادنا صولخ و دش یریگ تبسن ابRNA
یاه 030 / 010 و
010 / 010 يیییم يییی.ررب دیییش
هدیییمآ تییی.د هیییبRNA
ر ییيرف رد هلییصافلاب 10ºC
- يیی.ررب یارییب یدییعب یاییه
هب دش یرادهگن ،نيریكنایگ نایب ي.ررب روظنم
،MRP1
وMRP2
نیییکاو ،MDR1 Real Time RT-PCR
هینوین یور یایه
ک زا هدافتی.ا ایبRNA
تیی
One Step
PCR (Takara) -
PrimeScriptTM RT SYBR Ⓡ
و
هاگتی.د
Real time cycler Mx3000P™ Stratagen
يلاوت دش ماجنا ترایبع هدافتی.ا درویم یایهریيارپ یاه
:نيریكنایگ دراوروف يلاوت زا دندوب
5´-AGC AGC CAA
GGG TAA CTT GA-3´
نيریكناییگ سروییير يلاوییت ، :
5´-TAC TTG CTC CTT GGG ACA CC-3´
(
،3
،)
دراورویف يلاویت
MRP-1
:
5´-GTG TTT CTG GTC
AGC CCA ACT-3´
سروییير يلاوییت ،
MRP-1
:
5´-
TTG GAT CTC AGG ATG GCT AGG-3´
(
،4
،)
دراورویف يلاوت
MRP-2 5′-AGC AGC CAT AGA :
GCT GGC CCT T-3′
سروییير يلاوییت ،
MRP-2 5′- :
AGC AAA ACC AGG AGC CAT GTG CC-3′
(
،5
، )
یف يلاویت دراورو
MDR-1
:
5´-CCC ATC ATT GCA
ATA GCA GG-3´
، سروير يلاوت
MDR-1
:
5´-TGT
TCA AAC TTC TGC TCC TGA-3´
(
،1
و)
يلاویت
:نیییتکا اییتب دراوروییف
5´-TAC TGA AGT GTG ACG
TGG ACA TC-3´
:نییتکا ایتب سرویير يلاوت و
5´-CAG
GAG GAG CAA TGA TCT TGA TCT-3´
(
،2 ،
،1
)
نییکاو رییه مییجح 05 µL
یواییح و 5µL
/
،0 رفاییب زا
PCR -
Ⓡ RT 2X One Step SYBR
،
،µL
مي ینآ زا
PrimeScriptTM 1 step Enzyme Mix II
، 0µL
زا
( لاییتوتRNA
050 ،)مرگونایین
،µL
سروییير مي یینآ زا
،زاتپيركسنارت
،µL
تیياهن رد و ایهریيارپ زا کي ره زا
5µL
/ 2 دقاف ،آ زا
RNase
دوب
راک هب ييامد لكی.
مییظنت ترویص نيدب هدش هدرب
تخا. هلحرم ادتبا رد هک دش یامد ردcDNA
40°C
یارب
تدم 5 رد نوی.اروتاند هلحرم زا دعب و هدش ماجنا هقیقد
یامد 35°C
تدیم یارب
،0 يلاویت رییثكت هیلحرم ،هییناا
رد ده 40
لماش ييامد لكی.
35°C
تدم هب 5 ،هیناا
10°C
تدم هب 30 و هیناا 20°C
تدم هب 30 مایجنا هیناا
يم لوصحم ندوب يصاصتخا زا نانییطا یارب تياهن رد دش هینوین ریه رد دیش ماجنا ،وذ ينحنم یلانآ ،هدش دیلوت
هدافتی.ا ایب نیتکااتب نژ نایب نا یم لباقم رد نژ ره نایب نا یم مرن زا را فا
MxPro-Mx3000P
هیب جيایتن و دیش ه یلامرن
ره نایب نا یم تبسن تروص نا یم هب مواقم لول. رد نژ
ساسح دلاو لول. رد نژ رد نآ نایب دش نایب وراد هب
گنیتلاب نرت.و نیئتوریییپ ناییییب نا ییییم هیییسياقم و يییی.ررب تیییهج
لول. رد نيریكناگ لول. ،مواقم و دلاو یاه
هدافت.ا اب اه
رفاییب زا
NP-40
(
Nonidet-P40
نآ نیئتورییپ و یییل ) اییه
هییک بیییترت نيدییب دییش یزایی.ادج هییب ندییی.ر زا سییپ
يییسنیولفناک 20
لولیی. ،دییصرد رایییش و هنیییسپيرت اییه
یوایح تیلپ یور سپ. دندش
،01
× 3 ،لولی.
،00µL
تدم هب و دش هتخير يلول. هدننک یل رفاب
،5 یور هقیقد
راد ،ورییپ روتاكینویی. یی.وت تا یییل دییش هییبوكنا خییي (
Bandelin, uw mini20
لكی. ه. يط ) 00
هییناا ایب یا
تردیق 00 د ایب و دییصر 0
لكییی. ریه نیییب هلیصاف هییقیقد
رد تياهن رد و دش تیكینو.
،4000rpm
تدیم هیب 00
رد هقیقد 4°C
طایتحا اب ييور لولحم ديدرگ ژوفيرتنا.
کي هب و دوشن طولخم تیلپ اب هک یروط هب ،دش هتشادرب یوایح هیک يیيور لویلحم دش لقتنم رگيد ویتوركیم
Total Protein
ر يرف رد ،دوب 00°C
- ایت دیش یرادهگن
اب نیئتورپ تظلغ تفرگ ماجنا تلاب نرت.و هک يماگنه دش نییعت دروفدارب ور زا هدافت.ا 50
مرگوركیم ییئتورپ
ی ن
ند ی و هدش هروتا لژ یور
(w/v)
،5 دیصرد
SDS-PAGE
(
Sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis
) ژاتلو رد
،،0V
ریب ایتا یامد رد ، یا
و زرویفورتكلا تعا. کي دودح تدم ایشغ هیب سپی.
(PVDF Polyvinylidene fluoride
دییش هداد لاییقتنا ) زا سپ
04 یواح هدننک کلاب رفاب اب نوی.ابوكنا تعا.
(w/v) BSA
0 رد بیش کیي تدیم هیب اهایشغ ،دیصرد
یامد 4°C
نيریكنایگ دپ يشوگرخ هیلوا یداب يتنآ اب
يناسنا تقر رد
،:050 يیتنآ اي دیپ يیشوم هییلوا یدایب
يناسنا نیتکااتب تقر رد
،:5000 زا سیپ دندش هبوكنا 0
اییب وییشتسش راییب (PBS
Phosphate-buffered saline
،)
يتنآ دپ هيوناا یداب يتنآ اب اشغ يیشوگرخ هیلوا یداب
ایب هیگوژناک يیشوم هییلوا یدایب يیتنآ دپ اي هیب ،HRP
تییقر رد بیییترت
،:0000 و
،:2000 یارییب کییي تدییم
. تعا زا سپ دندش هبوكنا 0
ایه ایشغ ،ویشتسش راب ایب
تدیم هیب سنی. هینیمول يیک يا فا رگشنکاو 0
هیقیقد
نیشیتنمویکاد لژ هاگتی.د ی.وت اهدیناب و دندش رواجم
Syngene
اییب اهدییناب هتیییسناد تییياهن رد دندییش ناییياین
مرن زا هدافت.ا را فا
ImageJ 1.46r
هازدنا دش یریگ
ور هي جت و لیلحت هداد یرامآ اه
يامزآ هیه یاریب دندیش راركت راب ه. لقادح اه
لیییلحت هداد اییه زا نوییمزآ یلایینآ سناییيراو کییي
هییفرط
(One Way-ANOVA)
هارییه هیب
Tukey’s post-hoc
جياتن دش هدافت.ا هب
تروص
Mean ± SD
دیيدرگ هیارا
و 05 / 0
<
ينعمp
راد رد رظن هتفرگ دش دادعت هرات.
یایه
دوجوم رد ره رادوین ناشن هدنهد دودح
p value
تی.ا :
( 00،
/ 0
<
،p
،***
0،
/ 0
<
،p
،**
05 / 0
<
)p
*
اه هتفای
نکاو يياراک نا یم
Real Time RT-PCR
ریثكت یارب
هعلاطم دروم یاه نژ نیکاو ييارایک نا ییم يی.ررب تهج یاریبPCR
نژ ریثكت درادناتی.ا يینحنم ریظن درویم نژ ریه یاریب ایه
افتیی.ا اییب يبییسن تییظلغ زا هد
یاییه
، اییت 500ng
زا
RNA
زا يياه تقر( لاتوت تبیسن ابRNA
، هیب 4 دیش می.ر )
هرایش رادوین(
، نیکاو هیک دینداد ناشن جياتن )
PCR
یاریب نژ یایه ،MRP1
،MRP2
، MDR1
نيریكنایگ اییتب و
نیییتکا ييآراییک اییب بیییترت هییب 43
/
،05 ،دییصرد 03 / 10
،دصرد 1 /
،00 ،دصرد 0 / 31 و دصرد 1 /
،0،
یصرد رد د
دش ماجنا ي.ررب تحت هدودحم
نایب نا یم وMRP1
ناطر. يلول. یاه هدر ردMRP2
نادیخت نایییب نا یییم تواییفت وMRP1
طیی. ردMRP2
هییب مواییقم نادیییخت ناطریی. لولیی. هدر نیییبmRNA
یوراد
A2780/RCIS
موایییقمریغ دیییلاو لولییی. هدر و
ور هییب نآ یوراد هییب
Real time RT-PCR
يیی.ررب
يایتن دیش نایییب طی. هیک داد نایشن ج وMRP1
MRP2
لولییی. رد
A2780/RCIS
بییییترت هیییب 03
/
، و 30 /
،3
يلولیی. هدر رد اییه نآ نایییب طیی. رییبارب
A2780
تیی.ا
هرایش رادوین(
0 ) نادیخت ناطر. يلول. یاه هدر رد نيریكناگ نایب نا یم
طیی. رد نيریكناییگ نایییب تواییفت نا یییم يیی.ررب وایییییقم يلولییییی. هدر ود نییییییبmRNA
یوراد هیییییب م
A2780/RCIS
نآ یوراد هب مواقمریغ دلاو لول. هدر و
ور هب
Real time RT-PCR
ناییب نا ییم هک داد ناشن
يینعم ترویص هب مواقم يلول. هدر رد نيریكناگ و یراد
دودییح رد 54
مییک دییصرد هدر رد نآ نایییب نا یییم زا رییت
هراییش رادوین( ت.ا دلاو يلول.
3A
،ریگيد یوی. زا )
تن هچ رگا هیب نيریكنایگ نیئتوریپ ناییب طی. ي.ررب جيا نیئتوریپ ناییب طی. هک داد ناشن گنیتلاب نرت.و ور
يلولیی. هدر رد نيریكناییگ
A2780/RCIS
هدر زا یییب
يلول.
A2780
یرایمآ اایحل زا توایفت نیيا ایما ،ت.ا
هرایش رادوین( دوبن راد ينعم 3B
و )C
هرامش رادومن 1
نژ يبسن درادنات.ا ينحنم: نیکاو رد ي.ررب دروم یاه
Real Time RT-PCR نیکاو ييارایک نا ییم يی.ررب تیهج
یاریبPCR
یاه تظلغ زا هدافت.ا اب يبسن درادنات.ا ينحنم رظن دروم نژ ره یارب اه نژ ریثكت
، ات 500ng زا زا يياه تقر( لاتوتRNA تبسن ابRNA
، هیب 4 )
دش م.ر
هرامش رادومن 2
ب نا یم ي.ررب: هیياپ نایی
وMRP1 طی. ردMRP2
ور زا هدافتیی.ا اییب نادیییخت ناطریی. يلولیی. یاییه هدر ردmRNA Real time RT-PCR یاییه هداد زا هدافتیی.ا ایب نژ رییه ناییب طیی.
رد نوتی. ریه تی.ا هدیش ه یلامرن نیتکا اتب نژ نایب ط. زا لصاح نیگنایم رگناياین رادوین رایعم ارحنا±
ه. لقادح زا لصاح(SD)
دشاب يم راركت راب .
هرامش رادومن 3
طی. رد نيریكنایگ هياپ نایب نا یم ي.ررب: mRNA
( ( نیئتورییپ و )A وB
نادیییخت ناطریی. يلولیی. یاییه هدر رد )C ؛A
طیی. رد نيریكناییگ هییياپ نایییب نا یییم ور زا هدافتیی.ا اییبmRNA
Real time RT-PCR زا هدافتی.ا ایب نژ ریه ناییب طی. دیش مایجنا
هداد دنا هدش ه یلامرن نیتکا اتب نژ نایب ط. زا لصاح یاه وB
؛C
وراد هییب مواییقم يلولیی. هدر رد نيریكناییگ نیئتورییپ نایییب طیی.
(A2780/RCIS) هدر رد نیئتورپویكنا نیيا نایب نا یم اب نآ هسياقم و
وراد هب مواقمریغ دلاو يلول.
( (A2780 نرتی.و کینكت زا هدافت.ا اب
د دش ماجنا گنیتلاب را یفا مرن کیک هب اهدناب هتیسنا
ImageJ 1.46r
نیئتورییپ نایییب نا یییم لییباقم رد نيریكناییگ نایییب نا یییم و دییش یلایینآ رگنایياین رادویین رد نوتی. ریه دیش ه یلایمرن هینوین ناییه نیتکا اتب نیگنایم ارحنا± رایعم يم راركت راب ه. لقادح زا لصاح(SD)
دشاب
و هدنهد ناشن***
00،
/ 0 p <
م دشاب ي
نایب نا یم هدعم ناطر. يلول. یاه هدر ردMDR1
نایب نا یم توافت ط. ردMDR1
هدر نیبmRNA
وراد هب مواقم هدعم ناطر. لول.
(EPG85-257/RDB)
ور هییب نآ یوراد هییب مواییقمریغ دییلاو لولیی. هدر و
Real time RT-PCR
هدر هیک داد ناشن جياتن دش ي.ررب
روسکود هب مواقم يلول.
هب نیسیبو يهجویت لباق رایسب روط
دودح رد و 501
دلاو لول. ربارب
EPG85-257
،
MDR1
يم نایب ار هرایش رادوین( دنک
4 )
هرامش رادومن :4
هياپ نایب نا یم ي.ررب ط. ردMDR1
ردmRNA
هدر ور زا هدافت.ا اب هدعم ناطر. يلول. یاه Real time RT-PCR
دافت.ا اب نژ ره نایب ط.
نایب ط. زا لصاح یاه هداد زا ه
رگناياین رادوین رد نوت. ره ت.ا هدش ه یلامرن نیتکااتب نژ نیگنایم رایعم ارحنا± دشاب يم راركت راب ه. لقادح زا لصاح(SD)
.
هدعم ناطر. يلول. یاه هدر رد نيریكناگ نایب نا یم رد نيریكناییییگ نایییییب تواییییفت نا یییییم يیییی.ررب
طییی.
ر ود نییییبmRNA
وراد هیییب موایییقم يلولییی. هد
(EPG85-257/RDB)
هییب مواییقمریغ دییلاو لولیی. هدر و
ور هب نآ یوراد
Real time RT-PCR
هیک داد نایشن
دودیح رد مواقم يلول. هدر رد نيریكناگ نایب نا یم 33
تی.ا دلاو يلول. هدر رد نآ نایب نا یم زا رت مک دصرد هرایش رادوین(
4A
يی.ررب جيایتن هبایشم روط هب ) طی.
نایشن گینیتلاب نرتی.و ور هیب نيریكناگ نیئتورپ نایب يلولیی. هدر رد نيریكناییگ نیئتورییپ نایییب طیی. هییک داد
EPG85-257/RDB
دودح رد 04
هدر زا ریت مک دصرد
دلاو يلول.
EPG85-257
اایحل زا اه توافت نيا ت.ا
هرایش رادوین( دوبن راد ينعم یرامآ 5B
و )C
هرامش رادومن :5
ي.ررب طی. رد نيریكنایگ هياپ نایب نا یم (mRNA
) A
( نیئتورپ و وB
هدعم ناطر. يلول. یاه هدر رد )C ناییب نا ییم ؛A
طی. رد نيریكناگ هياپ ور زا هدافتی.ا ایبmRNA
Real time RT-PCR
طی. زا لیصاح یایه هداد زا هدافت.ا اب نژ ره نایب ط. دش ماجنا ا هدییش ه یلاییمرن نیییتکا اییتب نژ نایییب دیین
وB نیئتورییپ نایییب طیی. ؛C
وراد هییب مواییقم يلولیی. هدر رد نيریكناییگ (EPG85-257/RDB)
و
دییلاو يلولیی. هدر رد نیئتورپوییكنا نییيا نایییب نا یییم اییب نآ هییسياقم وراد هییب مواییقمریغ (
(EPG85-257 نرتیی.و کییینكت زا هدافتیی.ا اییب
را یفا مرن کیک هب اهدناب هتیسناد دش ماجنا گنیتلاب ImageJ 1.46r
ایتب نیئتوریپ ناییب نا ییم لیباقم رد نيریكنایگ نایب نا یم و دش یلانآ نیگناییم رگناياین رادوین رد نوت. ره دش ه یلامرن نیتکا اریحنا±
رایعم دشاب يم راركت راب ه. لقادح زا لصاح(SD)
ثحب
تمواقم ييوراد تبسن هیب یایهوراد یلتخم
دیپ
ناطر.
يكي زا تلاكشم ي.ا.ا و هدیع رد نامرد ناطری.
يم دشاب
( 04
هدیعم ناطر. رد هدش هدهاشم ييوراد تمواقم )
يم يفلتخم لماوع زا لصاح نادیخت و ریظن هیب هک دشاب
يم میسیناكم د.ر هیک ی ییچ نآ زا ییب یددیعتم یایه
هدش هتخانش نونکات نآ زورب رد ،دنا
دیشاب لیخد اه
( 05
، 01
)
مسیناكم نيا رتهب نتسناد ا،ل يیم ایه
ییپ هیب دیناوت يینیب
ریجنم تیياهن رد و دیياین کیک ييوراد تمواقم عوقو ور يحارط هب هب هک يناراییب یارب رتراوم ينامرد یاه
نامرد يین خ.اپ يلویعم یاه دوش ،دنهد
ییسب راتخای. ایب نیئتوریپ کي نيریكناگ تیظافح را
لا. رد هک ت.ا نرادناتسپ رد هدش ناوینع هیب رییخا یاه
تی.ا هدیش هتخانیش نیئتورپوكنا کي
( 1
، 02
نيریكنایگ )
مهم ریسم ود يفنم میظنت قيرط زا ًاتدیع رگبوکری.
رویموت ریییسم لماییش
INK4-CDK-pRb
و
ARF-MDM2-P53
يم لیع دياین
( 03
نيریكنایگ ناییب يا فا یدیلک قن )
ييازروموت رد ناطر. زا یرایسب رد
دیننایه ينایسنا یاه
ناطر.
،لایتکرولوک ،هدیعم ،یریم ،ناهد ،دبک ،هير یاه هدیش هداد نایشن محر هناهد و نادیخت ،ناتسپ ،ساركناپ
ت.ا
(
،3 ، 33 - 04
د نایشن ،رگيد یو. زا )
تی.ا هدیش هدا
يم نيریكناگ هک ایب نایمرد هب تمواقم یاقلا ثعاب دناوت
ناوینع هب ،دنوش ينامرد يیش رد هدافت.ا دروم یاهوراد يم لاثم رد بینیفاروی. یوراد هیب تمواقم یاقلا هب ناوت هرایشا نيریكناگ .وت رلاول.وتاپه یامونی.راک نامرد
دوین
( 34 )
ناشن هدعم ناطر. يلول. هدر رد یرگيد هعلاطم رد لول. رد نيریكناگ نایب هک دش هداد تبیسن يناطر. یاه
لول. هب ثیعاب يا یفا نیيا و ت.ا هتفاي يا فا لامرن یاه
نآ رد زوتپوپآ هاک و يلول. ریثكت و دشر يا فا ایه
ناییب هایک هیک دینهد ناشن دنتسناوت ناققحم دوب هدش رد نيریكناگ لول. نيا
يم اه تیمواقم هاک ثعاب دناوت
یاهوراد هب 5
- يم نیتلاپ سی. و لی.ارواورولف دوش
( 35 )
و نيریكناییگ نیییب طاییبترا دوییجو رییب لاد یدهاوییش یاه نیئتورپ نایب میظنت هعلاطم رد دراد دوجوMDR
یا
زا يیخرب تمواقم تلع ي.ررب ده اب هک هیب ایهروموت
یرت کین.رآ دياسکا
تی.ا هیتفرگ ماجنا(AS)
، هدر ود
هییب مواییقم يلولیی.
ناطریی. یاییه لولیی.(AS
دییبک یاییه
(HepG2/AS)
هدعم و
(SGC7901/AS)
يبایيزرا درویم
نژ نایییب يیی.ررب دیینتفرگ رارییق نییيا رد ییلتخم یاییه
لول.
نآ هسياقم و مواقم یاه لول. اب اه
نایشن دیلاو یاه
یب نا یم هک داد یاهرتروپسنارت نا
ABCB1
،
ABCC1
و
ABCC2
لول. رد لولی. زا رتلااب مواقم یاه دیلاو یایه
مه ت.ا هدوب نیئتورپ نایب نا یم نینچ
یایه ،P53 MDM2
نوی.لايرفسف نا یم ین و نيریكناگ و لول. رد Rb
یایه
هیک دیندوین حریطم ناققحم نيا دوب هتفاي يا فا مواقم ندش لاعف ریغ وP53
هبRb
و نيریكنایگ رویوح تیلع
نیيا رد يیيوراد تیمواقم زوریب تیلع ًلاایتحا ،MDM2
لول.
ت.ا هدوب اه
( 04 )
نیئتورپویكنا ناییب نا یم ي.ررب ده اب هعلاطم نيا هیسياقم رد وراد هیب مواقم يلول. یاه هدر رد نيریكناگ
هدر اب مواقمریغ دلاو يلول. یاه هیب دیش مایجنا وراد هیب
عماج ي.ررب روظنم لایت ،ييوراد تمواقم اب طابترا رت
هدر زا دش يلدیم ناوینع هب مادک ره هک يفلتخم يلول. یاه تمواقم رد لیخد يلصا پیپ ود زا يكي نایب يا فا زا
يیم راییش هب ييوراد نیيا دویش هدافتی.ا ،دینيآ
هدر یایه
لماییش يلولیی.
A2780/RCIS
رت یارییب يلدییم(
رتروپییسنا
و )MRP2 EPG85-257/RDB
رتروپیسنارت یارب يلدم(
( نیییتلاپ سییی. دییندوب )MDR1 Cisplatin
) زا يییكي
ناطری. نایمرد رد هدافتی.ا دروم یاهوراد نيرتدربراکرپ ایه
ميژر رد صوصخ هب ت.ا ييوراددنچ یاه
( 31
هدهاشم )
یمواقم زوریب هیک ت.ا هدش هدر رد نییتلاپ سیی. هیب ت
يناسنا نادیخت ناطر. لول.
A2780
يا یفا تیلع هیب
يياشغ پیپ نایب يمMRP2
دیشاب
( 32
نییسیبوروسکود )
(
Doxorubicin
( نییسيامايردآ مان اب هک )
Adriamycin
)
ينیلكیی.ارتنآ یایهوراد هتی.د زا ،دویش يیم هتخانیش ین ت.ا ناطری.دپ يلیصا یاهوراد ناونع هب مه زونه هک
لولیی. رد زوییتپوپآ یاهریییسم هدییننکاقلا يناطریی. یاییه
ییلتخم يییم دنییشاب
( 31
هییک تیی.ا هدییش هداد ناییشن )
نایب يا فا نایسنا هدیعم ناطری. لول. هدر ردMDR1
EPG85-257
نیسیبوروسکود یوراد هیب تمواقم ثعاب
يییم دوییش
( 33
رد )
یلااییب نایییب ،ادییتبا رد ییین هییعلاطم نییيا
وMRP2
هدر ردMDR1
هیب تبیسن موایقم يلولی. یاه
هدر دلاو يلول. یاه هب وراد هب مواقمریغ
ور کیک یایه
Real time-RT-PCR
يیی.ررب ،هییمادا رد دییش هداد ناییشن
ط. ود رد نيریكناگ نژ نایب نا یم نیئتوریپ وmRNA
،
ور کییک هب بیترت هب یایه
Real time-RT-PCR
و
تفرگ ماجنا تلاب نرت.و نایب ط. هک دنداد ناشن جياتن نيریكنایگmRNA
يلولیی. هدر رد
A2780/RCIS
یینعم تروییص هییب ي
یراد
مک ناییب طی. زا رت يلولی. هدر رد نيریكنایگmRNA
A2780
نيریكنایگ نیئتورپ نایب نا یم ،هک يلاح رد دوب يلول. هدر رد
A2780/RCIS
یب ، ایب زا رت نیيا ن نیئتوریپ يلولیی. هدر رد
A2780
نایییب يا ییفا نییيا يییلو ،دوییب
دیشن هدهایشم رادانعم تروص هب نيریكناگ نآ زا.
هیکاج
سییی. یوراد هییب مواییقم لولیی.
نیییتلاپ
A2780/RCIS
رتروپسنارت ییب رایسب نا یم هب ارMRP2
لولی. زا یریت
يم نایب دلاو يم داهنشیپ جياتن نيا ،دنک
طایبترا هیک دینک
یی.وكعم نژ ود نایییب نا یییم نیییب ي نيریكناییگ وMRP2
هیک تی.ا هدش هداد ناشن یرگيد هعلاطم رد دراد دوجو هدر تی.اسح يا فا ثعاب نيریكناگ نایب نا یم هاک يلول.
SGC7901/VCR
هدعم یامونی.راکوندآ لول.(
يم ناطر.دپ یاهوراد هب )نیتسيرک نيو هب مواقم دویش
مه و لول. نيا يياناوت نینچ اه
نیسيامايردآ رودص رد ار
نآ دهد يم هاک لول. زا راخ هب هیک دنداد ناشن اه
نژ نایب
P28GANK
نایب هاک ثعاب رد ،دشMDR1
نایب نا یم یور یراا هک يلاح تشادنMRP
( 05 )
نایب نا یم هک دنداد ناشن قیقحت نيا جياتن نيریكناگ
هدر رد يلول. یاه
EPG85-257/RDB
طی. رد
mRNA
مک ،نیئتورپ و هدر رد نآ ناییب نا ییم زا رت
يلولی. یایه
نآ یوراد هب ساسح دلاو ( اه
EPG85-257
زا دشاب يم )
نییسیبوروسکود یوراد هیب موایقم یاه لول. هک اج نآ (
EPG85-257/RDB
( نییییسيامايردآ و )
MCF7/ADR
)
رتروپسنارت ایسب نا یم هب ارMDR1
لولی. زا یرت یب ر
يم نایب دلاو يم داهنشیپ جياتن نيا ،دنک
طایبترا هیک دینک
نژ ود نایییب نا یییم نیییب يیی.وكعم نيریكناییگ وMDR1
يیی.ررب هییب یرییگيد هییعلاطم رد ناییققحم دراد دوییجو رد يیيوراد تیمواقم هایک رد نيریكنایگ راا مسیناكم لولیی.
نآ دیینتخادرپ امونییی.راکوئت.ا یاییه هدهاییشم اییه
دندرک هیب موایقم لولی. رد نيریكنایگ ناییب يا یفا هک
نیتلاپ سی.
Saos2/CDDP
لولی. هیب تبسن دیلاو یایه
مه دراد دوجو وراد هب ساسح نيریكنایگ ناییب یایقلا نینچ
لولیی. رد یاییه
Saos2
نآ تییمواقم زورییب ثییعاب هییب اییه
هب هتسباوریغ و هتسباو یاهوراد يمMDR1
تیهج رد و دش
يریكنایگ ناییب راهم ،لباقم لولی. رد ن
یایه
Saos2/CDDP
نآ تی.اسح يا فا ثعاب ينامرد يییش یاهوراد هب اه
يم ایقلا زویتپوپآ رایهم بیجوم نيریكنایگ نژ نایب دش
مه و نیسيامايردآ .وت هدش عییجت نا یم هاک نینچ
هک دش هدهاشم تياهن رد دش نیسيامايردآ يلول. لخاد ژ نایب يا فا اب هاریه نيریكناگ نژ نایب ن
یایه
MDR1
و نایییب هاییک وBcl2
نآ عویییجم رد دوییبBax
اییه
ثییعاب نيریكناییگ نژ نایییب هاییک هییک دییندرک داهنییشیپ لول. تی.اسح يا فا یاهوراد هب امونی.راکوئت.ا یاه
ناییب هایک قیيرط زا ينامرد يییش وMDR1
وBcl2
نایب يا فا يمBax
دوش
(
،،
)
هیسياقم هیب هییلوا یرگلابرغ کي رد ،هعلاطم نيا رد لولی. رد نيریكنایگ هياپ نایب نا یم وراد هیب موایقم یایه
ناییب يا یفا زا يلدیم ناوینع هب کي ره هک(
وMRP2
لول. اب )دنتسه حرطمMDR1
،وراد هب ساسح دلاو یاه
رد نيریكناییگ نایییب هییک داد ناییشن جياییتن دییش هییتخادرپ هدر يلولیی. یاییه
A2780/RCIS
و
EPG85-257/RDB
هب تبسن هیصلاخ رویط هیب ت.ا هتفاي هاک دلاو لول.
يی.وكعم طایبترا هیک داد ناشن راب نیلوا یارب جياتن نيا ييوراد تمواقم پیتونف زورب و نيریكناگ نایب نا یم نیب تروپیسنارت ناییب يا یفا زا يشان
دویجو يیيوراد یایه
يیم حریطم هییپرف نيا ا،ل دراد یک دویش
ناییب يا یفا ه
يیییخرب دریییكلیع و ناییییب يیییيوراد یاهرتروپیییسنارت نیئتورپوكنوا يم هاک ار اه
يم هیپرف نيا دنهد دیناوت
هتسناد رد يبلاقنا تیمواقم پییتونف هیب عیجار يیلبق یاه
پییپ نایب يا فا هک حرش نيدب ،دنک داجيا ييوراد ایه
يم یروموت لول. رب وراد راا هاک ثعاب هچ رگا ،دوش
اما نیئتورپوكنوا راهم اب يیم ایه
و مجایهم پییتونف دیناوت
ناطریی. تفرییشیپ زا و دییياین راییهم ار لولیی. یازروییموت دنک یریگولج
یرازگساپس
موییلع هاگییشناد يییشهوژپ تیینواعم زا ناگدنییسيون دهشم يكش پ -
دهشم - یارب يلام تيایح رطاخ هب ناريا
هرایش تنارگ( هژورپ نيا زا 3،0330
دیننک يیم ركشت )
ن راکری. ييوجیشناد هیمان نایياپ زا يیشخب هلاقم نيا جيات
ت.ا هدوب دشرا ي.انشراک هرود رد یرهاط ميرم مناخ
References
1. Choi CH. ABC transporters as multidrug resistance mechanisms and the development of chemosensitizers for their reversal. Cancer Cell Int 2005; 5: 30.
2. Ozben T. Mechanisms and strategies to overcome multiple drug resistance in cancer.
FEBS Letters 2006; 580(12): 2903-2909.
3. Palakurthi S, Yellepeddi VK, Vangara KK.
Recent trends in cancer drug resistance reversal strategies using nanoparticles.
Expert Opin Drug Deliv 2012; 9(3): 287-301.
4. Krzywda S, Brzozowski AM, Higashitsuji H, Fujita J, Welchman R, Dawson S, et al. The crystal structure of gankyrin, an oncoprotein found in complexes with cyclin-dependent kinase 4, a 19 S proteasomal ATPase
regulator, and the tumor suppressors Rb and p53. J Biol Chem 2004; 279(2): 1541-1545.
5. Nakamura Y, Nakano K, Umehara T, Kimura M, Hayashizaki Y, Tanaka A, et al. Structure of the oncoprotein gankyrin in complex with S6 ATPase of the 26S proteasome. Structure 2007; 15(2): 179-189.
6. Qin JM, Fu XY, Li SJ, Liu SQ, Zeng JZ, Qiu XH, et al. Gene and protein expressions of p28GANK in rat with liver regeneration.
World J Gastroenterol 2003; 9(11): 2523- 2527.
7. Higashitsuji H, Higashitsuji H, Itoh K, Sakurai T, Nagao T, Sumitomo Y, et al. The oncoprotein gankyrin binds to MDM2/HDM2, enhancing ubiquitylation and degradation of p53. Cancer Cell 2005; 8(1): 75-87.
8. Dawson S, Apcher S, Mee M, Higashitsuji H, Baker R, Uhle S, et al. Gankyrin is an ankyrin-repeat oncoprotein that interacts with CDK4 kinase and the S6 ATPase of the 26 S proteasome. J Biol Chem 2002; 277(13):
10893-10902.
9. Ying H, Xiao ZX. Targeting retinoblastoma protein for degradation by proteasomes. Cell Cycle 2006; 5(5): 506-508.
10. Hickman ES, Moroni MC, Helin K. The role of p53 and pRB in apoptosis and cancer. Curr Opin Genet Dev 2002; 12(1): 60-66.
11. Wang G, Rong J, Zhou Z, Duo J. Novel gene P28GANK confers multidrug resistance by modulating the expression of MDR-1, Bcl-2 and Bax in osteosarcoma cells. Mol Biol (Mosk) 2010; 44(6): 1010-1017.
12. Keshelava N, Zuo JJ, Waidyaratne NS, Triche TJ, Reynolds CP. p53 mutations and loss of p53 function confer multidrug resistance in neuroblastoma. Med Pediatr Oncol 2000;
35(6): 563-568.
13. Ortiz CM, Ito T, Tanaka E, Tsunoda S, Nagayama S, Sakai Y, et al. Gankyrin oncoprotein overexpression as a critical factor for tumor growth in human esophageal squamous cell carcinoma and its clinical significance. Int J Cancer 2008; 122(2): 325- 332.
14. Horibe S, Nagai J, Yumoto R, Tawa R, Takano M. Accumulation and photodynamic activity of chlorin e6 in cisplatin-resistant human lung cancer cells. J Pharm Sci 2011;
100(7): 3010-3017.
15. Tanaka N, Kimura H, Faried A, Sakai M, Sano A, Inose T, et al. Quantitative analysis of cisplatin sensitivity of human esophageal squamous cancer cell lines using in-air micro-PIXE. Cancer Sci 2010; 101(6): 1487- 1492.
16. Zhao X, Yang L, Hu J. Down-regulation of miR-27a might inhibit proliferation and drug resistance of gastric cancer cells. Journal of Experimental & Clinical Cancer Research:
CR 2011; 30(1): 55.
17. Kalalinia F, Elahian F, Hassani M, Kasaeeian J, Behravan J. Phorbol ester TPA modulates chemoresistance in the drug sensitive breast cancer cell line MCF-7 by inducing expression of drug efflux transporter ABCG2. Asian Pac J Cancer Prev 2012; 13(6): 2979-2984.
18. Kalalinia F, Elahian F, Mosaffa F, Behravan J. Celecoxib Up Regulates the Expression of Drug Efflux Transporter ABCG2 in Breast Cancer Cell Lines. Iran J Pharm Res 2014;
13(4): 1393-1401 (Persian).
19. Tang S, Yang G, Meng Y, Du R, Li X, Fan R, et al. Overexpression of a novel gene gankyrin correlates with the malignant phenotype of colorectal cancer. Cancer Biol Ther 2010; 9(2): 88-95.
20. Lage H. Molecular analysis of therapy resistance in gastric cancer. Digestive diseases (Basel, Switzerland) 2003; 21(4): 326-338.
21. Ozols RF, O'Dwyer PJ, Hamilton TC.
Clinical reversal of drug resistance in ovarian cancer. Gynecol Oncol 1993; 51(1): 90-96.
22. Yuan C, Li J, Mahajan A, Poi MJ, Byeon IJ, Tsai MD. Solution structure of the human oncogenic protein gankyrin containing seven ankyrin repeats and analysis of its structure-- function relationship. Biochemistry 2004;
43(38): 12152-12161.
23. Lozano G, Zambetti GP. Gankyrin: an intriguing name for a novel regulator of p53 and RB. Cancer Cell 2005; 8(1): 3-4.
24. Chen X, Zhang M, Liu LX. The overexpression of multidrug resistance- associated proteins and gankyrin contribute to arsenic trioxide resistance in liver and
gastric cancer cells. Oncology Reports 2009;
22(1): 73-80.
25. Li X, Zhang Y, Xiong C, Jin H, Jing B, Zhang Y, et al. Overexpression of a new gene P28GANK confers multidrug resistance of gastric cancer cells. Cancer Invest 2009;
27(2): 129-139.
26. Man JH, Liang B, Gu YX, Zhou T, Li AL, Li T, et al. Gankyrin plays an essential role in Ras-induced tumorigenesis through regulation of the RhoA/ROCK pathway in mammalian cells. J Clin Invest 2010; 120(8): 2829-2841.
27. Meng Y, He L, Guo X, Tang S, Zhao X, Du R, et al. Gankyrin promotes the proliferation of human pancreatic cancer. Cancer Lett 2010; 297(1): 9-17.
28. Li J, Knobloch TJ, Kresty LA, Zhang Z, Lang JC, Schuller DE, et al. Gankyrin, a biomarker for epithelial carcinogenesis, is overexpressed in human oral cancer.
Anticancer Res 2011; 31(9): 2683-2692.
29. Kim YH, Kim JH, Choi YW, Lim SK, Yim H, Kang SY, et al. Gankyrin is frequently overexpressed in breast cancer and is associated with ErbB2 expression. Exp Mol Pathol 2013; 94(2): 360-365.
30. Song X, Wang J, Zheng T, Song R, Liang Y, Bhatta N, et al. LBH589 Inhibits proliferation and metastasis of hepatocellular carcinoma via inhibition of gankyrin/STAT3/Akt pathway. Mol Cancer 2013; 12(1): 114.
31. Zhang J, Yang Y, Zhang Z, He Y, Liu Z, Yu Y, et al. Gankyrin plays an essential role in estrogen-driven and GPR30-mediated endometrial carcinoma cell proliferation via the PTEN/PI3K/AKT signaling pathway.
Cancer Lett 2013; 339(2): 279-287.
32. Gao L, Xie H, Dong L, Zou J, Fu J, Gao X, et al. Gankyrin is essential for hypoxia
enhanced metastatic potential in breast cancer cells. Mol Med Rep 2014; 9(3): 1032- 1036.
33. Liu Y, Zhang J, Qian W, Dong Y, Yang Y, Liu Z, et al. Gankyrin is frequently overexpressed in cervical high grade disease and is associated with cervical carcinogenesis and metastasis. PloS One 2014;9(4): e95043.
34. Sakurai T, Yada N, Hagiwara S, Arizumi T, Minaga K, Kamata K, et al. Gankyrin induces STAT3 activation in tumor microenvironment and sorafenib resistance in hepatocellular carcinoma. Cancer Sci 2017; 108(10): 1996- 2003
35. Zeng YC, Sun D, Li WH, Zhao J, Xin Y.
Gankyrin promotes the proliferation of gastric cancer and is associated with chemosensitivity.
Tumour Biol 2017; 39(6): 1010428317704820.
36. Scanlon KJ, Kashani-Sabet M. Elevated expression of thymidylate synthase cycle genes in cisplatin-resistant human ovarian carcinoma A2780 cells. Proc Natl Acad Sci U S A 1988; 85(3): 650-653.
37. Aird RE, Cummings J, Ritchie AA, Muir M, Morris RE, Chen H, et al. In vitro and in vivo activity and cross resistance profiles of novel ruthenium (II) organometallic arene complexes in human ovarian cancer. Br J Cancer 2002;
86(10): 1652-1657.
38. Arola OJ, Saraste A, Pulkki K, Kallajoki M, Parvinen M, Voipio-Pulkki LM. Acute doxorubicin cardiotoxicity involves cardiomyocyte apoptosis. Cancer Res 2000;
60(7): 1789-1792.
39. Lage H, Jordan A, Scholz R, Dietel M.
Thermosensitivity of multidrug-resistant human gastric and pancreatic carcinoma cells. Int J Hyperthermia 2000; 16(4): 291- 303.
