1
出國報告（出國類別：參加國際會議）
次世代測序法診斷免疫缺陷患兒口 腔真菌定植的多樣性
(參加「2018 年第 36 屆歐洲兒科 傳染病學會年會」報告)
服務機關：臺中榮民總醫院兒童醫學中心 姓名職稱：黃芳亮 科主任
派赴國家：瑞典 瑪爾默
出國期間：107 年 5 月 28 日至 107 年 6 月 3 日
報告日期：107 年 6 月 24 日
2
摘要（含關鍵字）
兒童癌症病人因化學藥物治療，白血球減少、口腔黏膜受損，使得免疫力低下，
所以容易造成黴菌伺機性感染。我們挑選黴菌伺機性感染陽性之病童與對照組樣 品進行次世代定序 (Next Generation Sequencing , NGS），分析病患與正常族群口腔 真菌菌叢的多樣性以及數量的差異。國內尚未見使用此法研究兒童伺機性黴菌感 染。我們將此結果投稿今年 5 月 28 日至 6 月 2 日，於瑞典瑪爾默舉行的歐洲兒 科傳染病學會年會 (36th Annual Meeting of the European Society for Paediatric Infectious Diseases, ESPID 2018)獲得論文發表的機會，藉此與國際學者專家交流並 吸收最新研究知識與趨勢。由於此研究主要為臨床的研究，對於臨床病患的治療 較為助益，建議免疫力低損的孩童應有一定的黴菌感染的警覺與預防。
關鍵字
免疫力低損、兒童癌症，黴菌伺機性感染
3
目 次
目的 ... 4
過程 ... 4
心得 ... 6
建議 ... 7
內文 一
職 照，
症病 易造 (Nex 以及 與 效評 菌感 洲兒 Infe 吸收
二
由 雖名 的代 舉凡 熱門 的研 打的 與效 用與
文
、 目的
職於臨床上
，平日專精於 病人因化學 造成黴菌伺 xt Generatio 及數量的差 C. parapsiro
評估於兒童 感染。我們 兒科傳染病 ectious Disea 收最新研究
、 過程
由於此為綜 名為歐洲會 代表與專家 凡與兒童感 門議題為各 研究方向與 的建議、口 效價、亞洲 與登革熱疫
的
上主要照顧兒 於免疫力低 學藥物治療，
伺機性感染。
on Sequencin 差異。在 LH- osis 之病患 童癌症病患口 們將此結果投 病學會年會
ases, ESPID 究知識與趨勢
程
綜合性歐洲兒 會議，但是仍 家，所以包含 感染的議題都 各種病毒感染 與應用，例如 服輪狀病毒 洲區的新型日 疫苗的發展等
兒童血液腫 低損的感染
，白血球減
。我們挑選 ng , NGS）， -PCR 與 N 患檢體數高於
口腔念珠菌 投稿今年 5
(36th Annua 2018)獲得論 勢。
兒童感染症 仍有來自世 含的主題項目
都有。整個 染流行病學 如四價流感 毒疫苗的流 日本腦炎的 等。此行除
4
腫瘤患者，且 問題，尤其 少、口腔黏 選陽性之病童
，分析病患 GS 之分析 於對照組。
菌感染。國內 月 28 日至 l Meeting of 論文發表的
症會議，
世界各國 目很多，
個主要的 學與疫苗 感疫苗施 流行病學 的疫苗應 除了論文
且本身具有感 其是侵襲性黴 黏膜受損，使
童與對照組 與正常族群 中，出現C
顯示 LH-P 內尚未見使用
6 月 2 日，
f the Europe 的機會。藉此
感染與血液 黴菌方面的 使得免疫力 組樣品進行次
群口腔真菌 C. albicans、
PCR 和 NG 用此法研究
，於瑞典瑪 ean Society f 此與國際學
液症的雙次專 的感染。兒童 力低下，所以 次世代定序
菌叢的多樣 C. dublinie
S 可能可以 究兒童伺機性
爾默舉行的 for Paediatri 學者專家交流
專執 童癌 以容 序
樣性 iensis
以有 性黴 的歐
ic 流並
的發 吸收 究與 充實 我 表電 如同 一、
主要 口腔 菌的 分子 二、
檢測 轉錄 spac 作簡 區域 spec 分子 和次 Seq 養，
三、
腔沖
發表外，職也 收一些國外 與建議(右圖 實與新穎。
我們於會議 電子壁報論 同我們之前
、侵襲性黴菌 要死亡原因 腔與腸道的 的改變，及 子生物技術
、分子技術 測，利用分 錄間隔區 (i cer ,ITS) 序 簡便等優點 域所使用之
cies，亦可偵 子技術，例 次世代定序 quencing , N
，而直接檢 本研究收集 沖洗液和25
也參加一些 外專家最新的
圖)。整個會
議給予的 5 月 論文(下頁右圖 前提出的發表
菌感染是免 因，而侵襲性 的念珠菌感染 及檢驗方法日 術於臨床黴菌 術廣泛地應用 分子技術分析 internal tran 序列，具高敏 點。檢測ITS 之通用引子除
偵測其它黴 例如即時定量 序 (Next Gen
NGS) 等方法 檢測臨床檢體
集了30例血
5例健康對
些有興趣的演 的兒童流感 會議的過程
月 29 日時間 圖)。
表重點：
免疫力低損患 性黴菌的感 染為先，因 日新月異，
菌學上。
用於念珠菌 析黴菌rRN
nscribed 敏感度、快
1-5.8S rRN 除了Candid 黴菌種類。
量 PCR、L neration 法可以不需 體的黴菌。
血液癌症患 對照個案。進
5
演講如流感 感的研
，內容
間，發
患童的 感染多以 因應念珠 可應用
菌之感染
NA的內
快速及操 NA-ITS2
da 而這些 LH-PCR
需要培
患兒的口 進行了口
感於兒童的預預防等議題題的大會節目目，
6
腔沖洗的 DNA 提取。在這些 DNA 樣本中, 我們用即時 PCR 技術對真菌的內部轉錄間 隔區進行定量定量分析。從樣品中獲得的序 列進行分析。對於每個序列,超過98% 個標 識的最近的黴菌種類作為候選個案。
四、共有9例(5名患者和4個健康對照)的進 行分析,找出這些樣品中真菌種類的多樣性。
在研究中從這些標本中發現了19種不同的真 菌種類, 其中包括4種主要的念珠菌，呈現出 二組不同的表現。
五、結論：這些結果顯示口腔念珠菌生物多 樣性可能涉及口腔念珠菌病的發病機制, 次 世代定序分析方法可以是一個有用的方法來 調查口腔真菌感染。
與會學者專家也提出建議與疑問，例如個
案數目的較少、患者的免疫力不等等問題，
但也肯定此研究，有助於臨床患童的侵襲性黴菌感染的預防方向。
三、 心得
很高興有此機會參與兒童國際感染會議，並提出研究的結果並發表，與會期
間也參加了其他教育或論文發表的一些節目，由於會議內容項目很多，且皆為同 時數個主題在進行，所以只能挑選有興趣的主題參加，儘管如此，仍然覺得收穫 很多。對於本身較有研究與興趣的議題，免疫力低損患童的黴菌感染部分，雖然 並非兒童感染的主流議題，但也有其他專家的論文發表，並有專家於會場提出看 法與意見，增進交流，此為與會的最大收穫。感謝院方長官的支持，讓職有機會 參加高水準的國際學術會議，一定對國際視野的提升以及未來學術研究的動力與
7
方向有所助益。
四、 建議事項（包括改進作法）
I. 國際會議有助於國際視野提升，以及促進學術研究的動力與方向，職會於部 內找尋有興趣的年輕醫師，鼓勵他們多參與，讓年輕醫師也有研究的目標與 方向。
II. 由於此研究主要為臨床的研究，對於臨床病患的治療較為助益，建議免疫力 低損的孩童應有一定的黴菌感染的警覺與預防。
