1.1.Kesimpulan
Berdasarkan hasil penelitian yang telah dilakukan, dapat diambil beberapa kesimpulan sebagai berikut :
1. Ekstrak n-heksana biji jarak pagar ( Jatropha curcas L. ) pada semua dosis perlakuan (dosis 5 mg/kg BB, 25 mg/kg BB, dan 50 mg/kg BB ) terbukti memiliki aktivitas antifertilitas.
2. Lama pemberian ekstrak n-heksanabiji jarak pagar pada dosis 5 mg/kg BB, 25 mg/kg BB, dan 50 mg/kg BB selama 48 hari pada tikus jantan dapat menurunkan konsentrasi spermatozoa, bobot testis, dan diameter tubulus seminiferus secara bermakna jika dibandingkan dengan kontrol. Makin besar dosis yang diberikan, makin besar pula pengaruhnya terhadap penurunan konsentrasi, berat testis dan diameter tubulus seminiferus.
3. Adanya penurunan jumlah spermatosit pakiten yang bermakna pada kelompok perlakuan ekstrak n-heksanabiji jarak pagardosis 25 mg/kg BB dan 50 mg/kg BB.
1.2.Saran
Adapun saran untuk penelitian lebih lanjut adalah:
1. Perlu dilakukan penelitian tentang pengaruh pemberian ekstrak n-heksanabiji jarak pagar terhadap morfologi spermatozoa yang dikaitkan dengan motilitas spermatozoa 2. Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut dengan dosis yang sama untuk mengetahui
pengaruh ekstrak n-heksana biji jarak pagar terhadap kadar hormonal (FSH, LH, dan testosterone dalam serum darah).
3. Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut mengenai isolasi senyawa untuk mengetahui struktur senyawa yang bertanggung jawab terhadap aktivitas antifertilitas.
Ahirwar, D., Ahirwar, B., and Kharya, M.D. 2010.Effect of Ethanolic Extract of Jatropha curcas Seeds on Estrus Cycle of Female Albino Rats.Der Pharmacia Lettre, 2(6): 146-150.
Andria, Y. 2012.Pengaruh Pemberian Ekstrak Daun Pegagan (Centella asiatica (L) urban) Terhadap Kadar Hormon Estradiol dan KadarHormon Progesteron Tikus Putih (Rattus norvegicus) Betina.Tesis Progam Studi Ilmu Biomedik.
Aregheore, E.M., Becker, K., Makkar H.P.S. 2003. Detoxification of a toxic variety of Jatropha curcas using heat and chemical treatments, and preliminary nutritional evaluation with rats. S. Pac. J. Nat. Sci., 21, 50-56
Azrifitria, 2012.Formulasi Mikroemulsi Kombinasi Testosteron Undekanoat dan Medroksi Progesteron Asetat Untuk Kontrasepsi Pria Serta Profil Farmakokinetik dan Farmakodinamik Pada Tikus Jantan Strain Sprague Dawley.Disertasi.Program Pasca Sarjana. FKUI
Barceloux, D.G., 2008.Medical Toxicology of Natural Substances: Foods, Fungi, Medicinal Herbs, Plants, and Venomous Animals.New Jersey : John Wiley & Sons, Inc.
Bartoli, 2008.Physic nut (Jatropha curcas) cultivation in Honduras – Handbook.Hounduras: Agricultural Communication Center of the Honduran Foundation for Agricultural Research (FHIA). Hal : 6-7, 13.
Bernhoft, A.2010. Bioactive compounds in plants – benefits and risks for man and animals. Proceedings from a symposium held at The Norwegian Academy of Science and Letters. Oslo
Bhakti Ekarini, S.M. 2008.Analisis Faktor-faktor Yang Berpengaruh Terhadap Partisipasi Pria Dalam Keluarga Berencana di Kecamatan Selo Kabupaten Boyolali.Tesis Program Pascasarjana Program Studi Magister Ilmu Kesehatan Masyarakat Konsentrasi Administrasi & Kebijakan Kesehatan Minat Manajemen Kesehatan Ibu dan Anak. Universitas Diponegoro. Semarang.
BKKBN. 2012.Kepala BKKBN Berharap, Melalui Konsolidasi Bidang 2012, Temukan Ide
Tuntaskan Masalah Kependudukan dan KB. Available at:
http://www.bkkbn.go.id/berita/Pages/Kepala-BKKBN-Berharap,-Melalui- Konsolidasi-Bidang-2012,-Temukan-Ide-Tuntaskan-Masalah-Kependudukan-dan-KB.aspx Diakses pada tanggal : 5 April 2012
BKKBN.2006.Perkembangan Teknologi Kontrasepsi Pria Terkini.Available at:
http://gemapria.bkkbn.go.id/article-detail.php?artid=22 Diakses pada tanggal : 5 April 2012
BKKBN.2008. KB sebagai suatu kebutuhan.Available at: http://gemapria.bkkbn.go.id/article-detail.php?artid=96Diakses pada tanggal : 5 April 2012.
Cambie, R. C and A. A. Brewis. 1999. Anti Fertility Plants of the Pacific. Australia: CSIRO. Hal: 85
Chairul, 2003.Identifikasi Cepat Bahan Bioaktif Tumbuhan di Lapangan. Berita Biologi. 6: 4, 624-626.
Costa, D.S., Silva, J.F.S 2006. Wild Boars (Sus scrofa scrofa) Seminiferous Tubules Morphometry. ISSN 1516-8913 Vol.49, n. 5 : pp. 739-745.
Depkes RI . 2000.Parameter Standar Umum Ekstrak Tumbuhan Obat. Direktorat Jendral Pengawasan Obat dan Makanan. Jakarta. Hal : 3-5, 10-12.
Ejelonu, B.C., Oderinde, R.A., and. Balogun, S.A. 2010.The Chemical and Biological Properties of Jatropha curcas and Mucuna solan Seed and Seed Oil.Libyan Agriculture Research Center Journal Internation 1 (4): 263-268.
El-Kashoury ,A.A. 2009.Influence of Subchronic Exposure of Profenofos on Biochemical Markers and Microelements in Testicular Tissue of Rats.Journal of American : 5(1), 19-28.
Fatkhawati, I. 2007. Hubungan Diameter Testis dan Epididimis Terhadap Kualitas Spermatozoa Pada Sapi. Skripsi. Fakultas Sains dan Teknologi. Universitas Islam Negeri. Malang
Fawcett DW. 2002. Buku Ajar Histologi Bloom & Fawcetr. 12th ed Trans Tambayong J.
Jakarta : Penerbit Buku Kedokteran. Hal : 687.
Fransworth, N.R. 1996. Biological and Phytochemical Screening of Plants. Journal of Pharmaceutical Science, 55: 3,259.
Goonasekera, M.M., Gunawardana,V.K., Jaysena, K., Mohammad, S.G., Balasubramaniam, S. 1995. Pregnancy terminating effect of Jatropha curcas in rats.J. Ethnopharmacol., 47, 117-123.
Gupta, RS., Chaudhary, R., Yadav, RK., Verma, SK., Dobhal, MP. 2005. Effect of Saponins of Albizia lebbeck (L.) Benth bark on the reproductive system of male albino rats.J Ethnopharmacol ;96(1-2):31-6.
Hartini. 2011. Pengaruh Dekok Daun Jambu Biji Merah ( Psidium guajava.L ) Terhadap Jumlah Kecepatan dan Morfologi Spermatozoa Tikus Putih Jantan ( Rattus norvegicus ).Tesis Progam Studi Ilmu Biomedik.
Heffner, L.J., Schust, D.J. 2005.At a Glance Sistem Reproduksi Edisi 2. Jakarta: Erlangga. Hal : 26-27
Heller, J. 1996.Physic Nut Jatropha curcas L. Promoting the conservation and used undertilized and neglected crops 1. Rome: Institut of Plant Genetic and Crop Plant Research. Gatersleben/IPGRI.Hal : 9, 18.
Hess, R.A. 1999. Spermatogenesis, Overview.Encyclopedia of Reproduction VOLUME 4. Urbona : Academic Press.
Ilyas, S. 2007. Azoospermia dan Pemulihannya Melaui Regulasi Apoptosis Sel Spermatogenik Tikus (Rattus sp) Pada Penyuntikan Kombinasi TU & MPA.Disertasi. Program doktor IlmuBiomedik FKUI
Kovacevic, K., Budefeld, T., Majdic. 2006. Reduced Seminiferous Tubule Diameter in Mice Neonatally Exposed To Perfume.Slov Vet Res : 43 (4): 177-83.
Krishnalingam V, Ladds PW, Entwistle KW, Holroyd RG. 1982. Quantitative macroscopic and histological study of testicular hypoplasia in Bos indicus strain bulls.Res Vet Sci.(2):131-9.
Kusmana, D. 2001. Pengaruh Penyuntikan Kombinasi Hormon Testoteron dan Enathat (TE) dan Depot Medroksiprogesteron Asetat Terhadap Spermatogenesis Beruk Jantan (Macaca nemestrina) yang Diberi Pakan Berkadar Protein, Lemak, Karbohidarat Berbeda.Disertasi. Program pasca Sarjana FKUI
Luo, MJ., Yang, XY., Liu, WX., Xu, Y., Huang, P., Yan, F., Chen, F. 2006. Expression, purification and anti-tumor activity of curcin. Acta Biochim Biophys Sin (Shanghai) ;38(9):663-8.
Mahmud, Z. 2007. Infotek Jarak Pagar. Bogor: Pusat Penelitian dan Pengembangan Perkebunan, Badan Penelitian dan Pengembangan Pertanian.
Malini ,Vanithakumari.1991. Antifertility effects of beta-sitosterol in male albino rats. Journal of Ethnopharmacology, 35(2):149-153.
Mark DB, Mark AD, Smith CM. 2000. Biokimia Kedokteran Dasar: Sebuah Pendekatan Klinis. Jakarta: EGC. Hal : 717
Mastiholimath, V.K. 2008. Development and Evaluation of Polyherbal Formulations For Antidiabetic And Antihypertensve Activities. Thesis. Rajiv Gandhi University of Health Science. India.
Muliani, H. 2011. Pertumbuhan Mencit (Mus musculus L) Setelah Pemberian Biji Jarak Pagar (Jatropha curcas) White Mouse (Mus musculus L) Growth Exposed to
Barbados Nut’s Seed. BIOMA, Vol. 13, No. 2, Hal. 73-79.
Munson, L., Brown, J.L., Bush, M., Packer, C.1996. Genetic Diversity Afects Testicular Morphology in Fres Ranging Lions of The Serengeti Plains and Ngorongoro Crater.Journal of Reproduction and Fertility 108, 11-15.
Nema, R. K., Yuvaraj, Ramanathan, L., Sripriya. 2011. Effect of β sitosterol fraction of
Ocimum gratissimum on reproductive parameters of male rats.Asian Journal of Biochemical and Pharmaceutical Research Issue 3 (Vol. 1)
Nieminen, P., Mustonen, A.M., Seppa, P.L., Karkkainen, V., Rauhamaa, H.M., Kukkonen J.V.K. 2003. Phytosterols Affect Endocrinology and Metabolism of the Field Vole (Microtus agrestis).Experimental Biology and Medicine, 228:188-193.
Nurcholis, M., Sumarsih. S. 2007. Jarak Pagar dan Pembuatan Biodiesel. Yogyakarta: KANISIUS. Hal : 15, 18-21.
Nurmillah, O.Y. 2009.Kajian Aktivitas Antioksidan dan Antimikroba Ekstrak Biji, Kulit Buah, Batang dan Daun Tanaman Jarak Pagar (Jatropha curcas L.).Skripsi. Fakultas Teknologi Pertanian. Institut Pertanian Bogor.
Partodihardjo, S. 1980. Ilmu Reproduksi Hewan. Jakarta: Mutiara. Hal : 114.
Pokharkar, R.D., Saraswat, R.K., and Kotkar, S. 2010. Survey of Plants Having Antifertility Activity From Western Ghat Area of Maharashtra State. Journal of Herbal Medicine and Toxicology 4 (2) 71-75.
Prasad, D.M.R., Izam, A., and Khan, M.R. 2012.Jatropha curcas: Plant of medical benefits. Journal of Medicinal Plants Research Vol. 6(14), pp. 2691-2699.
Punsuvona, V., Nokkaew, R., Karnasuta, S. 2012. Determination of toxic phorbol esters in biofertilizer produced with Jatropha curcas seed cake. ScienceAsia 38 : 223-225.
Rusmiarti. 2007.Pengaruh Ekstrak Kayu Secang (Caesalpinia sappan L) Terhadap Viabilitas Spermatozoa Mencit Jantan (Mus musculus L). BIOSCIENTIAE Volume 4, Nomor 2, Hal.63-70.
Sachdeva, K., Garg, P., Singhal, M., Srivastava, B. 2012. Pharmacological evaluation of
Jatropha curcas L. extract for Anti-diarrhoeal Activity. Research in Pharmacy 2(2) : 01-07.
Saptogino, R.A. 2010. Pengaruh Lama Pemberian Momordica charantia L. Terhadap Jumlah Spermatozoa Pada Tikus BALB/C Dewasa Jantan. Program Pendidikan Sarjana Kedokteran. Fakultas Kedokteran. Universitas Diponegoro. Semarang. Shweta, G., Chetna, R., Jinkal, S., Nancy, S., Hitesh, J. 2011.Herbal Plants Used as
Contraceptives. International Journal of Current Pharmaceutical Review and Research Volume 2, Issue 1.
Smith, Mangkoewijoyo ,S. 1998. Pemeliharaan,Pembiakan dan Penggunaan Hewan Percobaan di Daerah Tropis. Edisi 1. : Jakarta: UI Press. Hal : 37-39.
Su X, Xu C, Li Y, Gao X, Lou Y,. 2011.Antitumor Activity of Polysaccharides and Saponin Extracted from Sea Cucumber. J Clin Cell Immunol 2:105.
Suckow, M. A., Steven H. W., Craig L. F. 2006. The Laboratory Rat Second Edition. USA: American College of Laboratory Animal Medicine Series
Tim Departemen Teknologi Pertanian. 2005. Proses Pembuatan Minyak Jarak Sebagai Bahan Bajar Alternatif. Departemen Teknologi Pertanian. Fakultas Pertanian. Universitas Sumatera Utara. Medan.
Ulimaz, A. 2010.Uji Antifertilitas Ekstrak Etanol Batang Manggarsih (Parameria laevigata) Pada Struktur Mikroanatomi Tubulus Seminiferus Testis Mencit (Mus musculus ) Galur Swiss. Skripsi Program Studi S-1 Biologi.Fakultas Biologi dan Ilmu Pengetahuan Alam. Universitas Lambung Mangkurat.
Widiyani, T. 2006.Efek Antifertilitas Ekstrak Akar Som Jawa ( Talinum paniculatum Gaertn) Pada Mencit Jantan. Bul. Penel. Kesehatan, Vol.34, No.3 : 119-128.
Wilkinson, J.M., Halley,S., Towers, P.A.2000. Comparison of male reproductive parameters in three rat strains: Dark Agouti, Sprague-Dawley and Wistar. Australia : Laboratory Animals Ltd. Laboratory Animals 34, 70-75
William O. R. 2005. Functional Anatomy and Physiology of Domestic Animals Third Edition. USA: Baltimore, Maryland. Male Reproduction chapter 13 hal 379-399.
World Health Organization.2000. General Guidelines for Methodologies on Research and Evaluation of Traditional Medicine. Geneva: World Health Organization.
Wu J. , Bao J., Wang Li., Hu1 Y., Xu C. 2011.MicroRNA-184 downregulates nuclear receptor corepressor 2 in mouse spermatogenesis.Department of Histology & Embryology. Shanghai Jiaotong University School of Medicine.China.
Yurnadi, Sari, P., Pujianto, D.A., Soeradi, O. 2002. Pengaruh Penyuntikan Ekstrak Biji Pepaya (Carica papaya L.) Terhadap Konsentrasi Spermatozoa dan Keadaan Sel Spermatogenik Tikus Jantan (Rattus norvegicus L.).Artikel Ilmiah. Lembaga Penelitian Universitas Indonesia.
Yotrarlai, S., Chaisuksunt, V., Saenphet, K., Sudwan, P.2011. Effects of Boesenbergia rotunda
juice on sperm qualities in male rats. Journal of medicinal plants research. 5 (16) : 3861-3867.
Lampiran 2. Hasil Penapisan Fitokimia Ekstrak n-heksana Biji Jarak Pagar
(a)(b.1)(+) (b.2)(+)
Gambar10. Hasil Uji Alkaloid
(a) (b) (-)
Gambar 11. Hasil Uji Saponin
(a)(b) (-)
Gambar 12. Hasil Uji Flavonoid
(a) (b) (-)
Gambar 13. Hasil Uji Tanin
(a) (b) (+)
Gambar 14. Hasil Uji Steroid
Keterangan :sebelum diberi pereaksi (a) ; setelah diberi pereaksi (b) ; diberi pereaksi Dragendorf (b.1) ; diberi pereaksi Mayer (b.2) ; memberikan hasil positif (+) ; memberikan hasil negatif (-)
Lampiran 3. Gambar Bahan dan Alat Penelitian
Gambar 15. Biji jarak pagar Gambar 16. Serbuk simplisia bij jarak pagar
Gambar 17. Tikus putih jantan galur Sprague Dawley
Gambar 18.n-heksana
\
Gambar 19. Ekstrak n-heksana biji jarak pagar
Gambar20.Larutan Na CMC 1%
Gambar 23. Larutan NaCL fisiologis Gambar 24. Alat penecekok oral
Gambar 25. Seperangkat alat bedah Gambar 26. Timbangan berat badan hewan uji (Ohauss)
Gambar 27.Vacuum rotary evaporator (Eyela)
Gambar 28. Oven (Memmert)
Gambar 29. Tanur (Thermo Scientific) Gambar 30. Timbangan analitik (AND GH-202)
Gambar 31. Freeze dry (Eyela FDU 1200)
Gambar 32. Mikropipet ukuran 10-20 µl
Gambar 33. Mikropipet ukuran 200 µl Gambar 34. Haemositometer Improved Neubeur
Gambar 35. Mikroskop optik (Motic BA310)
Lampiran 4. Kegiatan Penelitian Uji Antifertilitas Ekstrak N-heksana Biji Jarak Pagar
Gambar 36. Penimbangan serbuk simplisia biji jarak pagar
Gambar 37. Maserasi serbuk simplisia biji jarak pagar dengan n-heksana
Gambar 38. Pemekatan maserat Gambar 39. Penyaringan maserat
Gambar 40.Proses freeze dry ekstrak
cair n-heksana biji jarak pagar Gambar41. Pembuatan lar.NaCMC 1%
Gambar 42. Pemberian makan hewan uji ad libitum
Gambar 43. Pemberian minum hewan uji ad libitum
Gambar 44. Penimbangan berat badan
hewan uji Gambar 45. Pemberian ekstrak secara oral menggunakan alat pencekok oral
Gambar 46. Pembiusan hewan uji Gambar 47. Pembedahan hewan uji
Gambar 48. Pengeluran cairan sperma dari cauda epididymis dengan bantuan
cairan NaCl
Gambar 49. Pencucian organ testis dengan larutan NaCl fisiologis
Gambar 50. Epididimis Gambar51. Pengawetan organ testis di dalam larutan buffer netral formalin
Gambar52. Penimbangan organ testis Gambar53. Organ testis dan epididymis
Gambar 54. Pengambilan cairan spermatozoa
Gambar 55. Pengenceran spermatozoa dengan larutan george
Gambar 56. Spermatozoa pada kamar hemasitometer)
Gambar 57.Pengamatan dibawah mikroskop dengan perbesaran 400x
Lampiran 5. Pemeriksaan Parameter Ekstrak
a. Perhitungan Rendemen
Berat serbuk simplisia yang diekstraksi = 674 g Berat ekstrak kental yang di dapat = 46,6285 g
% Rendemen
=
Berat ekstrak kental yang di dapatBerat serbuk simplisia yang diekstraksi x 100%
=
46,6285 g674 g x 100%
=
14,45 % b. Susut PengeringanBerat botol kosong = 15,1407 gram Berat ekstrak = 1,1379 gram
Berat botol kosong+ekstrak sebelum dikeringkan (W0) = 16,2786 gram Berat botol kosong + ekstrak setelah dikeringkan (W1) = 16,1352gram % Susut Pengeringan = W0
– W
1Wo
= 16,2786 – 16,2049 16,2786 = 0,88 % c. Penetapan Kadar Abu
Bobot cawan : 25,2044 g Bobot sampel : 2,0636 g Bobot akhir : 25,4126 g
% Kadar abu = bobot akhir – bobot cawan bobot sampel = 25,4126 – 25,2044 2,0636 = 10,08 % X 100% X 100% X 100 % X 100 %
Lampiran 6. Alur Penelitian
biji jarak pagar ( Jatropha curcas L.)
biji dikeringkan
serbuk simplisia biji jarak pagar
maserasi dengan n-heksan ekstrak cair
ekstrak kental
pemberian ekstrak pada tikus secara peroral
selama 48 hari n-heksana dipekatkan dengan rotary evaporator penapisan fitokimia parameter non spesifik dihaluskan menggunakan blender determinasi
hewan uji : tikus jantan strain Sprague-Dawley
tikus diaklimatisasi selama 1 minggu
Hewan uji dikelompokkan secara acak berdasarkan perlakuan (@dosis 5 ekor): - dosis tinggi ( 50 mg/kg BB) - dosis sedang ( 25 mg/kg BB) - dosis rendah ( 5 mg/kg BB)
pada hari ke 49 tikus dikorbankan dan diambil organ reproduksinya
cauda epididimis pengukuran konsentrasi spermatozoa testis dihitung bobot testis dibuat preparat histologi pengukuran diameter tubulus seminiferus pengamatan tahapan spermatogenesis
Lampiran 7. Perhitungan Dosis Uji Ekstrak Biji Jarak Pagar
Untuk perhitungan dosis uji ekstrak biji jarak pagar digunakan rumus sebagai berikut :
