Efek Pemberian Ekstrak Buah Andaliman (Zanthoxylum acanthopodium) Terhadap Penurunan Kadar Gula Darah pada Mencit Model Diabetes Mellitus Tipe 1

(1)

CURRICULUM VITAE

Nama : M. Ridho

Alamat : Taman Setiabudi Indah II Blok IV No. 96 Medan Sumatera Utara.

E-mail : ridho110196@gmail.com

Tempat/ tanggal lahir : Medan, sumatera utara / 11 januari 1996

Riwayat Pendidikan

Sekolah Dasar SD Kemala Bhayangkari Medan 2001-2007 Sekolah Menengah Pertama SMP Negeri 1 Medan 2007-2010

Sekolah Menengah Atas SMA Negeri 15 Medan 2010-2013

Pendidikan Sarjana Fakultas Kedokteran Universitas Sumatera Utara Tahun 2013 Sampai Dengan Sekarang

Riwayat Organisasi

1. PEMA FK USU Periode 2014 2. PEMA FK USU Periode 2015 3. PEMA FK USU Periode 2016

Riwayat Kepanitiaan

1.Koor Seksi Publikasi dan Dokumentasi MMB FK USU Tahun 2014 2.Koor Seksi Publikasi dan Dokumentasi Medical Humanity Day Tahun

(2)

3. Anggota Seksi Administrasi dan Kesekretariatan TRY OUT SBMPTN FK USU Tahun 2014

4. Anggota Seksi Publikasi dan Dokumentasi LKMM FK USU Tahun 2014 5. Koor Seksi Publikasi dan Dokumentasi Porseni FK USU 2015

6. Anggota Seksi Publikasi dan Dokumentasi PM AKBAR PEMA FK USU Tahun 2015 7. Anggota Seksi Dana LKMM FK USU Tahun 2015

(3)

(4)

(5)

(6)

(7)

(8)

(9)

(10)

Buah Andaliman

Serbuk simplisia buah andaliman 770 gr

Ekstrak buah andaliman 60,424 gr

Dicuci dan dikeringkan

Simplisia buah andaliman

Maserasi dengan etanol 70% dan disaring dengan kertas saring

Ampas Maserat I Maserasi dengan

Etanol 70% dan Disaring dengan

Kertas saring Maserat II

Maserat I dan II digabung dan dipekatkan dengan rotary evaporator

Dihaluskan dengan blender

Lampiran 8. Proses Pembuatan Ekstrak

Lampiran 9. Perhitungan dosis

a. Dosis Metformin

(11)

Kera 4 kg 0,016 0,11 0,19 0,42 1,0 1,9 6,1 Anjing 12

kg 0,008 0,06 0,10 0,22 0,52 1,0 3,1

Manusia

70 kg 0,0026 0,018 0,031 0,07 0,16 0,32 1,0

1. Tiap tablet metformin mengandung 500 mg metformin-HCl, 2. Dosis untuk manusia dewasa adalah 500 mg - 3000 mg

3. Konversi dosis manusia (70 kg) ke dosis untuk hewan uji mencit dikali 0,0026 4. Dosis metformin untuk mencit (20 g) = (500 mg – 300 mg) x 0,0026 = 1,3 mg – 7,8 mg

5. Metformin yang digunakan = 1,3 mg untuk mencit 20 g 6. Dosis metformin yang diberikan !"!"

!"! =

1. Dosis pemberian secara intravena = 65 mg/kg bb

2. Dosis pemberian secara intraperitoneal = 2-3 kali dosis intravena

3. Perhitungan dosis untuk mencit berat 20 g dengan dosis 125 mg/kg bb =

(12)

c. Dosis Ekstrak Buah Andaliman

1. Dosis suspensi ekstrak buah andaliman yang akan dibuat adalah 100 mg/kg bb, 200 mg/kg bb dan 300 mg/kg bb

2. Cara pembuatan suspensi ekstrak buah andaliman :

Timbang 100 mg, 20 mg dan 300 mg ekstrak buah andaliman, masing-masing dilarutkan dalam 10 ml suspensi CMC 0,5%

3. Volume suspensi ekstrak buah andaliman yang diberikan kepada mencit a. Jumlah ekstrak buah andaliman dosis 100 mg/kg bb = !""!"

!"""! ×

20_� ₌₂_��

Volume larutan yang diberikan = !!"

!""!" ×10��= 0,2�� b. Jumlah ekstrak buah andaliman dosis 200 mg/kg bb = !""!"

!"""! ×

20_� ₌₄_��

Volume larutan yang diberikan = !!" !""!"×

10�� ₌0_,₂�� c. Jumlah ekstrak buah andaliman dosis 300 mg/kg bb = !""!"

!"""! ×20� =6�� Volume larutan yang diberikan = !!"

!""!"×

(13)

(14)

rata-rata 94 304.4 393.

Lampiran 11. Tabel persen penurunan KGD

Kelompok Perulangan hari ke-

(15)

3 5.24 19.93 35.31 50.34 62.58

4 11.57 19 37.74 45.73 65.28

5 5.68 12.08 27.48 37.44 73.22

Rata-rata 13.392 23.322 42.434 53.594 69.446

EBA 300 mg/kg bb

1 -37.1 31.32 47.95 53.49 70.6

2 -30.76 10.68 17.09 26.06 29.48

3 -82.25 -70 -3.54 11.61 40.32

4 3.87 15.84 34.15 37.67 40.49

5 9.31 14.33 19.35 27.59 32.25

Rata-rata -27.386 0.434 23 31.284 42.628

Metformin dosis 65 mg/kg bb

1 5.69 27.51 47.81 67.36 78.55

2 10.09 42.42 51.45 64.07 77.08

3 28.86 32.52 35.77 41.86 55.28

4 14.67 33.33 48.92 64.52 70.33

5 22.34 44.68 50.13 58.58 70.57

(16)

Lampiran 12. Hasil analisis statistik

a. Perbandingan KGD sebelum dan sesudah induksi aloksan 125 mg/kg bb

T-Test kelompok kontrol negatif

Paired Samples Statistics

Mean N Std. Deviation Std. Error Mean

Pair 1

KGD_Normal 112.6000 5 12.64120 5.65332

KGD_Aloksan 258.0000 5 44.74930 20.01250

Paired Samples Correlations

N Correlation Sig.

Pair 1 KGD_Normal & KGD_Aloksan

38.08280 17.03115 -192.68605

Paired Samples Test

Paired Differences t df Sig. (2-tailed) 95% Confidence Interval of the

(17)

T-Test kelompok uji dosis 100

Pair 1

KGD_Normal 69.6000 5 15.85244 7.08943

KGD_Aloksan 348.8000 5 115.28530 51.55715

100.14589 44.78661 -403.54755

(18)

T-Test kelompok uji dosis 200

Pair 1

KGD_Normal 67.4000 5 21.65179 9.68297

KGD_Aloksan 379.8000 5 132.59223 59.29705

N Correlation Sig.

129.82026 58.05739 -473.59314

(19)

T-Test kelompok uji dosis 300

Pair 1

KGD_Normal 94.0000 5 26.96294 12.05819

KGD_Aloksan 304.4000 5 67.60399 30.23343

N Correlation Sig.

70.37968 31.47475 -297.78792

(20)

T-Test kelompok kontrol positif

Pair 1

KGD_Normal 114.6000 5 25.58906 11.44378

KGD_Aloksan 396.4000 5 121.88437 54.50835

N Correlation Sig.

132.13516 59.09264 -445.86747

(21)

b. KGD setelah perlakuan

Tests of Normality

Hari_ke Kolmogorov-Smirnova Shapiro-Wilk

Statistic df Sig. Statistic df Sig.

Test of Homogeneity of Variances

Levene Statistic df1 df2 Sig.

Aquades 2.096 4 20 .119

Dosis_100 4.091 4 20 .014

Dosis_200 2.492 4 20 .076

(22)

Metformin 9.297 4 20 .000

Within Groups 236697.200 20 11834.860

Total 328486.560 24

Dosis_200

Between Groups 157744.240 4 39436.060 6.701 .001 Within Groups 117698.000 20 5884.900

Total 275442.240 24

Kruskal-Wallis Test

Test Statisticsa,b

dosis100 dosis300 metformin

Chi-Square 18.388 16.090 17.479

df 4 4 4

Asymp. Sig. .001 .003 .002

a. Kruskal Wallis Test b. Grouping Variable: Hari_ke

c. Perbandingan KGD sebelum induksi aloksan, hari ke-0 dan hari ke-15 setelah perlakuan

KGD Kolmogorov-Smirnova Shapiro-Wilk

(23)

Hari 0 .175 5 .200* .943 5 .685

*. This is a lower bound of the true significance. a. Lilliefors Significance Correction

Within Groups 51496.000 12 4291.333

Total 106349.733 14

Dosis_300

Total 138369.733 14

Kruskal-Wallis Test

Test Statisticsa

Dosis_100 Dosis_200 Metformin

Chi-Square 11.180 12.042 9.572

df 2 2 2

(24)

d. Persentase penurunan KGD

hari_ke Kolmogorov-Smirnova Shapiro-Wilk

Statistic df Sig. Statistic df Sig.

(25)

Within Groups 34531.951 20 1726.598

Total 51182.188 24 Within Groups 2495.686 20 124.784

Total 12710.546 24

dosis_300

Total 30904.576 24

Metformin

Between Groups 8743.519 4 2185.880 29.638 .000

Within Groups 1475.066 20 73.753

Total 10218.584 24

e. Perbedaan antar perlakuan

Kelompok Kolmogorov-Smirnova Shapiro-Wilk

(26)

hari_6

*. This is a lower bound of the true significance. a. Lilliefors Significance Correction

Within Groups 4323.605 20 216.180

(27)

Kruskal-Wallis Test

Test Statisticsa,b

hari_3 hari_6 hari_9 hari_12

Chi-Square 15.707 17.110 14.880 15.759

df 4 4 4 4

Asymp. Sig. .003 .002 .005 .003

a. Kruskal Wallis Test

b. Grouping Variable: Kelompok

Post Hoc Tests

Sig. 95% Confidence Interval

Metformin -32.80600 11.56668 .069 -67.4178 1.8058

100

Aquades 30.27600 11.56668 .105 -4.3358 64.8878

200 .40800 11.56668 1.000 -34.2038 35.0198

300 41.18600* 11.56668 .015 6.5742 75.7978

Metformin -2.53000 11.56668 .999 -37.1418 32.0818

200

Aquades 29.86800 11.56668 .112 -4.7438 64.4798

100 -.40800 11.56668 1.000 -35.0198 34.2038

300 40.77800* 11.56668 .016 6.1662 75.3898

Metformin -2.93800 11.56668 .999 -37.5498 31.6738

300

Aquades -10.91000 11.56668 .877 -45.5218 23.7018

100 -41.18600* 11.56668 .015 -75.7978 -6.5742

200 -40.77800* 11.56668 .016 -75.3898 -6.1662

Metformin -43.71600* 11.56668 .009 -78.3278 -9.1042

(28)

100 2.53000 11.56668 .999 -32.0818 37.1418 Metformin -1.09200 16.74127 1.000 -51.1882 49.0042

200

Aquades 67.47600* 16.74127 .005 17.3798 117.5722 100 -11.67800 16.74127 .955 -61.7742 38.4182 300 22.88800 16.74127 .654 -27.2082 72.9842 Metformin -12.77000 16.74127 .938 -62.8662 37.3262

300

Aquades 44.58800 16.74127 .096 -5.5082 94.6842 100 -34.56600 16.74127 .273 -84.6622 15.5302 200 -22.88800 16.74127 .654 -72.9842 27.2082 Metformin -35.65800 16.74127 .247 -85.7542 14.4382

Metformin Metformin -1.42400 22.29543 1.000 -68.1403 65.2923

200

Aquades 86.24400* 22.29543 .008 19.5277 152.9603 100 -2.95800 22.29543 1.000 -69.6743 63.7583 300 19.43400 22.29543 .904 -47.2823 86.1503 Metformin -4.38200 22.29543 1.000 -71.0983 62.3343

300

(29)

Metformin Metformin .49600 10.47329 1.000 -30.8440 31.8360

200

Aquades 49.94200* 10.47329 .001 18.6020 81.2820 100 -6.18000 10.47329 .975 -37.5200 25.1600 300 22.31000 10.47329 .246 -9.0300 53.6500 Metformin -5.68400 10.47329 .982 -37.0240 25.6560

300

Aquades 27.63200 10.47329 .101 -3.7080 58.9720 100 -28.49000 10.47329 .086 -59.8300 2.8500 200 -22.31000 10.47329 .246 -53.6500 9.0300 Metformin -27.99400 10.47329 .094 -59.3340 3.3460

Metformin

Metformin -49.24600* 9.29904 .000 -77.0722 -21.4198

100

Aquades 49.75800* 9.29904 .000 21.9318 77.5842

200 1.42800 9.29904 1.000 -26.3982 29.2542

300 28.24600* 9.29904 .046 .4198 56.0722

Metformin .51200 9.29904 1.000 -27.3142 28.3382

200

Aquades 48.33000* 9.29904 .000 20.5038 76.1562

100 -1.42800 9.29904 1.000 -29.2542 26.3982

300 26.81800 9.29904 .062 -1.0082 54.6442

Metformin -.91600 9.29904 1.000 -28.7422 26.9102

(30)

100 -28.24600* 9.29904 .046 -56.0722 -.4198

*. The mean difference is significant at the 0.05 level.

Homogeneous Subsets

Means for groups in homogeneous subsets are displayed.

a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 5.000.

(31)

hari_9

Tukey HSDa

Kelompok N Subset for alpha = 0.05

1 2

Aquades 5 -43.8100

300 5 23.0000

200 5 42.4340

100 5 45.3920

Metformin 5 46.8160

Sig. 1.000 .820

hari_12

Tukey HSDa

1 2

Aquades 5 3.6520

300 5 31.2840 31.2840

200 5 53.5940

Metformin 5 59.2780

100 5 59.7740

Sig. .101 .086

(32)

hari_15

Tukey HSDa

1 2 3

Aquades 5 21.1160

300 5 42.6280 42.6280

200 5 69.4460 69.4460

Metformin 5 70.3620 70.3620

100 5 70.8740

Sig. .182 .051 1.000

(33)

Daftar Pustaka

1. American Diabetes Association. Diagnosis and Classification of Diabetes

Mellitus. American Diabetes Association; 2012

2. Piero M.N, Nzaro, G.M, Njagi J.M. Diabetes mellitus – a devastating

metabolic disorder. Asian Journal of Biomedical and Pharmaceutical Sciences 2014; 04(40): 7-1.

3. Subroto MA. Ramuan herbal untuk diabetes mellitus. Jakarta: Penebar

Swadaya; 2006. p. 16-19.

4. Adibe, M. O. Prevalence of Concurrent Use Of Herbal And Synthetic

Medicines Among Outpatients In A Mission Hospital In Nigeria.

International Journal of Drug Development and Research 2009; 1(1): 66-60.

5. Sudoyo AW, Setiyohadi B, Alwi I, Simadibrata M, Setiati S. Buku Ajar

Ilmu Penyakit Dalam Jilid III edisi V. Jakarta: Interna Publishing; 2009.

6. Siregar B.L. Andaliman (Zanthoxylum acanthopodium DC.) di Sumatera

Utara: deskripsi dan perkecambahan. Hayati 2002;10(1): 40-38.

7. Suarsana I.N, Priosoeryanto B.P, Wresdiyati T, Bintang M. Aktivitas Daya

Hambat Enzim α−Glukosidase dan Efek Hipoglikemik Ekstrak Tempe

pada Tikus Diabetes. Jurnal Veteriner 2010;11(3): 195-190.

8. Ozougwu J.C, Obimba K.C, Belonwu C.D, Unakalamba, C.B. The

pathogenesis and pathophysiology of type 1 and type 2 diabetes mellitus. Academic journals 2013;4(4): 57-46.

9. Wijaya C.H, Triyanti I, Apriyantono A. Identification of volatile compounds and

key aroma compounds of andaliman fruit (Zanthoxylum acanthopodium). J. Food

Sci. Biotechnol 2002;11(6): 683-680.

10. Kristanty R.E, Mun’im A, Katrin. Isolation of antioxidant and xanthine

oxidase inhibitor from n-butanol extract of andaliman fruit (Zanthoxylum

acanthopodium). Int. j. Med. Arom2012;2(3): 376-389.

11. Parhusip, A. J. N.,Sibuea. P, dan Tarigan. A. Studi Tentang Aktivitas

Antimikroba Alami Pada Andaliman. Seminar Nasional Teknologi

Pangan. Jakarta;1999.p.190-193.

12. Robinson, T. Kandungan Organik Tumbuhan Tinggi. Bandung: Penerbit

ITB;1995.p.57-59.

13. Waheed A, Mahmud S, Akhtar M, Nazir T. Studies on the components of

essential oil of Zanthoxylum armatum by GC-MS. American Journal Of

Analytical Chemistry 2011;2: 258-261.

14. Campbell NA and Jane B. Reece. Biology. 10th ed. USA: Pearson

education, inc; 2014.p. 9.

15. Guyton, A.C. and Hall, J.E. Textbook of Medical Physiology. 11th ed.

USA; Elsevier Inc; 2006.p. 831-836.

16. Himawan I.W, Pulungan A.B, Tridjaja B, Batubara R.L. Komplikasi

(34)

17. Ditjen Bina Farmasi dan Alkes. Pharmaceutical Care untuk penyakit Diabetes Mellitus. Jakarta: Departemen Kesehatan RI; 2005.p. 9, 29, 30, 32, 39, 43

18. PERKENI. Pengelolaan dan Pencegahan Diabetes Melitus Tipe 2 di

Indonesia. Perkumpulan Endokrinologi Indonesia; 2011.

19. Yanling W, Yanping D, Yoshimasa T, Wen Z. Risk factors contributing to

type 2 diabetes and recent advances in the treatment and prevention. Int. J. Med. Sci 2014;11(11): 1200-1185.

20. Szkudelski T. The mechanism of alloxan and streptozotocin action in B

cells of the rat pancreas. Physiol. Res 2001; 50: 546-536.

21. Gupta D.D, Mandi S.S. Species Specific AFLP Markers for authentication

of Zanthoxylum acanthopodium & Zanthoxylum oxyphyllum. Journal of Medicinal Plants Studies 2013;1(6): 1-9.

22. Gultom S. Flavonoid Buah Andaliman (Zanthoxylum acanthopodium DC)

sebagai antioksidan dan inhibitor α-glukosidase. Thesis. Bogor: Program

Pascasarjana IPB; 2011.

23. Lenzen S. The mechanisms of alloxan and streptozotocin-induced

diabetes. Diabetologia2008;51: 226-216.

24. Hayati F, Widyarini, S, Helminawati. Efek antihiperglikemia infusa

kangkung darat (Ipomoea reptans Poir) terhadap kadar glukosa darah

mencit jantan yang diinduksi streptozotocin. Jurnal Ilmiah Farmasi 2010;7(1): 22-13.

25. Depkes RI. Cara Pembuatan Simplisia. Jakarta: Departemen Kesehatan

Republik Indonesia;1985.p.2-24.

26. Ditjen POM.Parameter Standar Umum Ekstrak Tumbuhan Obat.

Jakarta: Departemen Kesehatan RI;2000.p. 3-5, 10-11

27. World Health Organization. General Guidelines for Methodologies on

Research and Evaluation of Traditional Medicine. Geneva: WHO; 2001

28. Tensiska. Aktivitas Antioksidan Ekstrak Buah Andaliman (Zanthoxylum

acannhopodium DC) dalam Beberapa Sistem Pangan dan Kesetabilan Aktivitasnya Terhadap Kondisi Suhu dan pH. Thesis. Bogor: Program Pascasarjana IPB;2001.

29. Andayani. Kajian Daya Insektisida Alami Nabati Kulit Buah Manggis

(Garcinia mangostan), Buah Andaliman (Zanthoxylum acanthopodium DC), Getah Gambir (Uncaria gambir Roxb) dan Daun Teh (Camellia sinensis L) Terhadap Perkembangan Hama Gudang Sitophilus zeamays otsh. Skripsi. Bogor: Fakultas Teknologi pertanian IPB; 2000.

30 Robinson, T. Kandungan Organik Tumbuhan Tinggi. 6th ed. Bandung:

Institut Teknologi Bandung;1995.p.191

31. Golbidi S, Ebadi A, Laher I. Antioxidants in the treatment of diabetes.

Current Diabetes Reviews 2011;7: 125-106.

32. Setiawan B, Suhartono E. Stres oksidatif dan peran antioksidan pada

diabetes mellitus. Maj Kedokt Indon 2005;55(2): 91-86.

33. Kristanty RE, Suriawati J. Cytotoxic and antioxidant activity of petroleum

extract of andaliman fruits (Zanthoxylum acanthopodium DC.).

(35)

34. Jiang Y, Huang W, Wang J, Xu Z, He J. Metformin plays a dual role in

MIN6 pancreatic β cell function trough AMPK-dependent autophagy. Int.

J. Biol. Sci 2014;10(3): 277-268.

35. Hur KY, Lee M. New mechanisms of metformin action: Focusing on

mitochondria and the gut. J Diabetes Investig 2015;6: 609-600.

36. Klip A, Leiter LA. Cellular mechanism of action of metformin. Diabetes

care 2013;13(6): 704-694.

37. Rohilla A, Ali S. Alloxan induced diabetes : mehchanisms and effects.

International journal of research in pharmaceutical and biomedical sciences 2012;3(2):823-819.

38. Diandra. Pengaruh Pemberian Infusa Herba Sambiloto (Andrographis

paniculata Nees) Terhadap Glibenklamid Dalam Menurunkan Kadar Glukosa Darah Tikus Putih Jantan Yang Dibuat Diabetes. Depok: Fakultas Matematika da Ilmu Pengetahuan Alam UI; 2011.

39. Katzung BG. Farmakologi dasar dan klinik. Jakarta: Salemba Medika;

2002. p 677-678.

40. Raju SB, Rao, GB, Latha MY. Anti-hyperglycemic activity of Hygrophila

spinosa roots in alloxan-induced diabetic rats. Int. J. Pharm & Ind. Res 2011;1(4): 317-315.

41. Ramaiah A. Antidiabetic activity of methanolic extract of Memecylon

(36)

3.1 Kerangka Teori

Diabetes Mellitus Klasifikasi :

-  Diabetes mellitus tipe 1 -  Diabetes mellitus tipe 2 -  Diabetes gestasional -  Diabetes tipe lain

Gejala Klinis : -  Poliuria -  Polidipsia -  Polifagia

-  Penurunan berat badan -  Gangguan saraf tepi -  Gangguan pengelihatan

Komplikasi :

-  Komplikasi jangka pendek -  Komplikasi jangka panjang

Diagnosa:

-  Glukosa plasma sewaktu > 200 mg/dL dan keluhan klasik -  Glukosa plasma puasa ≥ 126 dan

keluhan klasik -  Tes toleransi glukosa oral

Penatalaksanaan : a. Penatalaksanaan non

farmakologis b. Penatalaksanaan

farmakologis - Obat antidiabetik oral - Insulin

agen pengalkilasi Destruksi sel β pankreas

Inhibitor α glukosidase

(37)

3.2 Kerangka Konsep

3.3 Hipotesis

Hipotesis penelitian ini adalah ekstrak buah andaliman mempunyai efek

terhadap penurunan kadar gula darah mencit model diabetes mellitus tipe 1.

Ekstrak buah andaliman

Kadar gula darah mencit

(38)

4.1 Rancangan Penelitian

Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental laboratorium murni dan

rancangan yang dipakai adalah Pre Test-Post Test Control Group Design.

Penelitian meliputi pengumpulan dan penyiapan bahan, identifikasi tumbuhan

dan pembuatan ekstrak buah andaliman.

4.2 Waktu dan Tempat Penelitian

Penelitian dilakukan di laboratorium Fakultas Farmasi USU dan

laboratorium Fakultas MIPA USU pada bulan april sampai desember 2016.

4.3 Populasi dan Sampel Penelitian

4.3.1 Populasi Penelitian

Populasi penelitian ini adalah mencit yang di aklimatisasi di animal house

Fakultas MIPA USU.

4.3.2 Sampel Penelitian

4.3.2.1 Kriteria Inklusi

Kriteria inklusi dari penelitian ini adalah mencit jantan berusia sekitar 2-3

bulan, berat badan 20-35 gram, kondisi sehat.

4.3.2.2 Kriteria Eksklusi

Kriteria eksklusi dari penelitian ini adalah mencit mati sebelum tiba waktu

observasi dan mencit tidak menderita diabetes mellitus setelah injeksi aloksan.

4.3.3 Besar Sampel

Berdasarkan kriteria WHO, besar sampel untuk penelitian dengan

(39)

penelitian ini terdapat lima kelompok perlakuan. Pada setiap kelompok digunakan

lima ekor mencit, dua ekor masing-masing sebagai cadangan, sehingga jumlah

total mencit adalah 35 ekor mencit.

4.4 Metode Pengumpulan Data

4.4.1 Alat-alat

Alat-alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah lemari pengering,

blender, oven, neraca listrik, neraca hewan, rotary evaporator, glukometer dan

strip glukotest, spuit 1 ml, alat-alat gelas laboratorium.

4.4.2 Bahan-bahan

Bahan tumbuhan yang digunakan pada penelitian ini adalah buah

andaliman. Bahan kimia yang digunakan adalah etanol 96% (destilasi), etanol

70% aquadestilata, larutan fisiologis Natrium klorida 0,9%, aloksan, asam sulfat 2

N, asam klorida 2 N, CMC (Carboxy Methyl Cellulose), metformin 500 mg dan

akuades.

4.4.3 Cara Kerja

4.4.3.1 Prosedur Pembuatan Simplisisia

Sampel yang digunakan adalah buah andaliman (Zanthoxylum

acanthopodium). Pengambilan sampel dilakukan secara purposif tanpa

membandingkan dengan tumbuhan yang sama dari daerah lain.

4.4.3.2 Identifikasi Tumbuhan

Identifikasi tumbuhan dilakukan di Laboratorium Botani, Pusat Penelitian

Biologi, Lembaga Ilmu Pengetahuan Indonesia (LIPI) Cibinong, Bogor.

Tumbuhan dimasukkan ke dalam plastik klip dan dimasukkan ke dalam amplop

(40)

4.4.3.3 Pembuatan Simplisia

Buah dipisahkan dari pengotor lain (sortasi basah), lalu dicuci hingga

bersih di bawah air mengalir, kemudian ditiriskan dan ditimbang (diperoleh berat

basah sebesar 2,5 kg). Selanjutnya dilakukan perajangan untuk mempermudah

proses pengeringan, kemudian dikeringkan di lemari pengering sampai buah

kering untuk mendapatkan simplisia yang tidak mudah rusak, sehingga dapat

disimpan dalam waktu yang lebih lama, kemudian dibuang benda asing atau

pengotor lain yang masih tertinggal pada simplisia kering (sortasi kering),

kemudian ditimbang berat keringnya (diperoleh berat kering sebesar 1,6 kg).

Simplisia yang telah kering diblender menjadi serbuk, lalu ditimbang sebagai

berat serbuk simplisia (960 g), dimasukkan ke dalam wadah kering bertutup dan

disimpan pada suhu kamar.25

4.4.3.4 Pembuatan Ekstrak Buah Andaliman

Serbuk simplisia diekstraksi dengan cara maserasi dengan menggunakan

pelarut etanol 70%. Sebanyak 10 bagian (200 g) serbuk simplisia dimasukkan ke

dalam sebuah bejana, dituangi dengan 75 bagian (1,5 L) cairan penyari (etanol

70%), ditutup, dibiarkan selama 5 hari terlindung dari cahaya sambil sering

diaduk, kemudian diserkai, diperas. Ampas diremaserasi dengan cairan penyari

(etanol 70%) secukupnya hingga diperoleh 2 L (100 bagian). Pindahkan ke bejana

tertutup, dibiarkan di tepat sejuk, terlindung dari cahaya selama 2 hari. Pemekatan

ekstrak dilakukan dengan alat rotary evaporator pada suhu 40°C sampai

diperoleh ekstrak kental (18,36 g). Nilai rendemennya sebesar 9,18%. Pembuatan

ekstrak dilakukan di laboratorium Fakultas Farmasi USU.

4.4.3.5 Pembuatan Larutan dan Suspensi

Pembuatan larutan mencakup suspensi CMC 0,5%, suspensi Metformin 65

mg/kg bb, suspensi ekstrak buah andaliman dosis 100, 200, 300 mg/kg bb.

Pembuatan larutan dan suspensi dilakukan di laboratorium Fakultas Farmasi

(41)

4.4.3.6 Pembuatan Suspensi CMC 0.5%

Sebanyak 0,5 g CMC ditaburkan dalam lumpang yang berisi ± 10 ml air

suling panas (20 bagian). Didiamkan selama 15 menit lalu digerus hingga

diperoleh massa yang transparan, lalu digerus sampai homogen, diencerkan

dengan air suling, dihomogenkan dan dimasukkan ke labu tentukur 100 ml,

dicukupkan volumenya dengan air suling hingga garis tanda.

4.4.3.7 Pembuatan Suspensi Metformin Dosis 65 mg/kg bb

Dosis metformin untuk manusia adalah 500 mg, maka dosis untuk mencit

berat 20 g dikonversikan 0,0026 (maka, 0,0026 x 500 mg = 1,3 mg). Dosis per kg

berat badan adalah = 1,3 mg / 20 g = 65 mg/kg bb. Timbang serbuk tablet

metformin setara dengan 65 mg, dimasukkan ke dalam lumpang lalu ditambahkan

suspensi CMC 0,5% b/v sedikit demi sedikit sambil digerus sampai homogen,

dimasukkan ke dalam labu tentukur 10 ml dicukupkan dengan suspensi CMC

0,5% sampai garis tanda.

4.4.3.8 Pembuatan Suspensi Ekstrak Buah Andaliman

Dalam pengujian digunakan 3 variasi dosis yakni dosis 100, 200 dan 300

mg/kg bb, sejumlah 100, 200 dan 300 mg ekstrak buah andaliman dimasukkan ke

dalam lumpang dan ditambahkan suspensi CMC 0,5% b/v sedikit demi sedikit

sambil digerus sampai homogen, dimasukkan ke dalam labu tentukur 10 ml

dicukupkan dengan suspensi CMC 0,5% sampai garis tanda.

4.4.4 Pengujian Efek Antihiperglikemia Ekstrak Buah Andaliman

Pengujian efek antihiperglikemia ekstrak buah andaliman terdiri,

pengukuran kadar glukosa darah dengan menggunakan alat glukometer dan

pengujian efek antihiperglikemia ekstrak buah andaliman dengan metode induksi

(42)

4.4.5 Pengukuran Kadar Glukosa Darah (KGD)

Kadar glukosa darah mencit yang dipuasakan (tidak diberi makan tetapi

tetap diberi minum) selama 18 jam sebelum percobaan diukur menggunakan

glukometer. Masing-masing mencit diukur dengan diambil darah mencit melalui

pembuluh darah vena, setelah ekor mencit didesinfektan dengan etanol 70%,

ujung ekor digunting secara aseptik, tetesan darah pertama dibuang, tetesan

berikutnya diserapkan pada test strip yang terselip pada alat. Sejumlah darah

tertentu akan terserap sesuai dengan kapasitas serap test strip, setelah itu

pendarahan ekor mencit dihentikan, dalam waktu 10 detik pada layar tertera kadar

glukosa darah dalam satuan mg/dL.

4.4.6 Pengujian Efek Penurunan Kadar Gula Darah Ekstrak Buah

Andaliman Metode Induksi aloksan.

Mencit jantan sebanyak 25 ekor dengan berat badan 20-35 g yang telah

dipuasakan ditimbang berat badannya, ditentukan kadar glukosa darah puasa,

kemudian masing-masing mencit diinduksi dengan aloksan dosis 125 mg/kg bb

secara intravena. Mencit diberi makan dan minum seperti biasa, diamati tingkah

laku dan bobot badan, mencit dianggap diabetes apabila kadar glukosa darah

puasa ≥ 200 mg/dL.24 dan telah dapat digunakan untuk pengujian.

Mencit diabetes dikelompokkan secara acak menjadi 5 kelompok,

masing-masing terdiri dari 5 ekor dan diberi perlakuan secara oral, yakni :

Kelompok I : Aquades

Kelompok II : suspensi ekstrak buah andaliman dosis 100 mg/kg

bb

Kelompok III : suspensi ekstrak buah andaliman dosis 200 mg/kg

bb

Kelompok IV : suspensi ekstrak buah andaliman dosis 300 mg/kg

bb

(43)

Kelima kelompok diberi sediaan uji selama 2 minggu berturut-turut,

pengukuran kadar glukosa darah diukur pada hari ke-0, 3, 6, 9, 12 dan ke-15

menggunakan alat ukur glukometer.

Selanjutnya dihitung persen penurunan KGD dengan rumus :

Keterangan : a = KGD setelah diinduksi aloksan

b = KGD pada waktu pengamatan hari ke-t

4.5 Kerangka Penelitian

4.6 Pengolahan dan Analisis Data

4.6.1 Pengolahan Data

Pengolahan data adalah suatu proses dalam memperoleh data

ringkasan atau angka ringkasan dengan menggunakan cara-cara tertentu.

Proses ini meliputi:

Buah andaliman

Identifikasi Tanaman Ekstraksi buah andaliman Mencit Aklimatisasi

Pengujian efek penurunan Kadar gula darah EBA Metode induksi aloksan.

Kelompok 1 : Diberi Aquades

Kelompok 2 : Diberi EBA 100 mg/kg bb

Kelompok 5 : Diberi Metformin 65 mg/kg bb

Pengukuran kadar gula darah pada hari ke-0, 3, 6,

9, 12 dan 15.

Analisa data menggunakan Uji statistik.

Keterangan :

- EBA : Ekstrak Buah Andaliman

Mencit diinduksi aloksan 125 mg/kg bb

Pengukuran kadar gula darah mencit . Jika KGD 200 mg/dL dapat digunakan Untuk penelitian.

% Penurunan KGD = !!! !

(44)

a. Editing

pada tahap ini diperiksa ketepatan dan kelengkapan data, dan apabila ada

data yang belum lengkap ataupun ada kesalahan data maka dilengkapi

dengan mewawancarai ulang responden.

b. Coding

Data yang telah terkumpul kemudian dikoreksi ketepatan dan

kelengkapannya, kemudia diberi kode secara manual oleh peneliti sebelum

diolah dengan komputer.

c. Entry

Data yang sudah dibersihkan selanjutnya dimasukkan kedalam program

pengolahan statistik di komputer.

d. Cleaning

Semua data yang sudah dimasukkan ke dalam komputer diperiksa kembali

untuk menghidari terjadinya kesalahan dalam pemasukkan data.

e. Saving

Data selanjutnya di simpan dan siap untuk di analisis.

4.6.2 Analisa Data

Data hasil penelitian di olah secara dengan uji statistik. Analisis yang

digunakan adalah uji distribusi normal (Shapiro-Wilk) dan uji homogenitas (uji

Levene). Jika data yang dinyatakan terdistribusi normal dan homogen, uji

dilanjutkan dengan uji analisis varian satu arah (ANAVA). Jika terdapat

perbedaan yang signifikan, maka dilanjutkan dengan uji Tukey. Jika data yang

diperoleh tidak terdistribusi normal atau tidak homogen, uji dilanjutkan dengan

(45)

4.7 Definisi Operasional

Tabel 1. Definisi Operasional

No Variabel Definisi

(46)

4.8 Time Table

Tabel 2. Kalender Kerja

(47)

5.1 Hasil Penelitian

5.1.1 Deskripsi Lokasi Penelitian

Penelitian dilakukan di dua tempat. Pembuatan ekstrak buah andaliman

dilakukan di laboratorium Fakultas Farmasi USU, dan untuk peyimpanan dan

penanganan mencit dilakukan di animal house laboratorium Fakultas MIPA USU.

5.1.2 Deskripsi Karakteristik Sampel

Sampel berupa mencit wistar jantan berusia 2-3 bulan dengan berat badan

20-35 gr yang mengalami diabetes setelah diinduksi aloksan.

5.1.3 Perbandingan KGD Sebelum dan Setelah Induksi Aloksan 125 mg/kg

bb

Tabel 5.1 Mean dan Standar Deviasi KGD Sebelum dan Setelah Induksi Aloksan

125 mg/kg bb.

Keterangan : KGD = Kadar Gula Darah K(-) = Kontrol Negatif (Aquades)

D1 = Ekstrak Buah Andaliman Dosis 100 mg/kg bb D2 = Ekstrak Buah Andaliman Dosis

200 mg/kg bb D3 = Ekstrak Buah Andaliman Dosis 300 mg/kg bb K(+) = Kontrol Positif

(Metformin Dosis 65 mg/kg bb) *Signifikan (p≤0,05)

Hasil analisis uji T-Dependen menunjukkan bahwa ada perbedaan yang

signifikan antara KGD sebelum dan setelah induksi aloksan 125 mg/kg bb pada

(48)

5.1.4 KGD Setelah Perlakuan

Tabel 5.2 Mean dan Standar Deviasi KGD Setelah Perlakuan

No Kelompok Uji n

Hasil uji homogenitas Levene menunjukkan bahwa data kelompok kontrol

negatif dan kelompok uji dosis 200 mg/kg bb homogen (p≥0,05), data kelompok

uji dosis 100, 300 mg/kg bb dan kelompok kontrol positif tidak homogen

(p≤0,05). Hasil analisis uji ANOVA menunjukkan bahwa tidak ada perbedaan

yang signifikan pada kelompok kontrol negatif (p≥0,05) dan adanya perbedaan

yang signifikan pada kelompok uji dosis 200 mg/kg bb (p≤0,05). Hasil analisis uji

Kruskal-Wallis menunjukkan adanya perbedaan yang signifikan pada kelompok

(49)

5.1.5 Perbandingan KGD Sebelum Induksi Aloksan, KGD Hari ke-0 dan

KGD Hari Ke-15 Setelah Perlakuan

Tabel 5.3 Mean dan Standar Deviasi KGD Sebelum Induksi Aloksan, KGD Hari

ke-0 dan KGD Hari Ke-15 Setelah Perlakuan

No Kelompok

Hasil uji homogenitas Levene menunjukkan bahwa data kelompok kontrol

negatif dan kelompok uji dosis 300 mg/kg bb homogen (p≥0,05), data kelompok

(50)

5.1.6 Persentase Penurunan KGD

Tabel 5.4 Mean dan Standar Deviasi Persentase Penurunan KGD

No Kelompok

Hasil analisis uji ANOVA menunjukkan bahwa ada perbedaan yang

signifikan pada kelompok uji dosis 100, 200, 300 mg/kg bb dan kontrol positif

(p≤0,05). Tidak ada perbedaan yang signifikan pada kelompok uji kontrol negatif

(p≥0,05)

5.2 Pembahasan

Pada penelitian ini digunakan hewan percobaan mencit wistar jantan

diabetes dengan kadar glukosa darah ≥ 200 yang diperoleh dengan cara induksi

aloksan. Mencit uji dikelompokkan dalam 5 kelompok perlakuan, masing-masing

kelompok terdiri dari 5 ekor mencit yaitu kelompok kontrol negatif yang diberi

(51)

dosis 100 mg/kg bb, 200 mg/kg bb, dan 300 mg/kg bb) dan kelompok kontrol

positif yang diberi suspensi metformin dosis 65 mg/kg bb.

Metformin digunakan sebagai pembanding positif karena dapat

menghambat glukoneogenesis, mengurangi produksi glukosa pada hati,

mengurangi absorbsi glukosa pada saluran pencernaan, dan meningkatkan

sensitivitas insulin dengan meningkatkan penyerapan glukosa perifer.36 Aloksan

sering digunakan untuk menginduksi diabetes pada hewan percobaan karena efek

penghancuran selektif sel beta di pankreas yang menyebabkan perubahan

konsentrasi insulin yang diikuti dengan perubahan sel beta yang berakhir pada

kematian nekrosis sel. 37

Pemberian sediaan uji pada setiap kelompok mencit yang sudah diabetes

dianggap sebagai hari pertama pemberian sediaan uji (hari ke-0). Pengukuran

KGD mencit dilakukan pada hari ke-3, hari ke-6 hari ke-9, hari ke-12, dan hari

ke-15. Dari hasil pengujian, kelompok uji dosis 100, 200 mg/kg bb dan kontrol

positif telah menunjukkan penurunan KGD pada hari ke-3 dan penurunan KGD

rata-rata sampai batas normal pada hari ke 15. Kelompok uji dosis 300 mg/kg bb

dan kontrol negatif tidak menunjukkan penurunan KGD pada hari ke-3,

penurunan KGD pada kelompok uji dosis 300 mg/kg bb mulai terlihat pada hari

ke-6 dan menunjukkan penurunan sampai batas normal pada hari ke-15.

Kelompok kontrol negatif menunjukkan kenaikan KGD pada hari ke-3, 6 dan 9

lalu terjadi penurunan KGD pada hari ke-12 dan 15.

Metformin dosis 65 mg/kg bb menunjukkan penurunan KGD pada hari

ke-3 dan penurunan KGD rata-rata sampai batas normal pada hari ke 15. Pemberian

aquades sebagai kelompok kontrol juga mengalami penurunan, tetapi masih

dalam kategori diabetes ( ≥ 200 mg/dL). Penurunan kadar glukosa darah pada

kelompok kontrol negatif didukung oleh regenerasi sel beta langerhans pankreas

yang tidak rusak seluruhnya sehingga insulin masih dapat disekresi.38

Pada penurunan KGD diketahui bahwa dosis 100 mg/kg bb memiliki

persen penurunan paling tinggi diantara dosis 200 dan 300 mg/kg bb. Penurunan

(52)

berbeda jauh. Pada hari ke 6 dosis 300 mg/kg bb memiliki persen penurunan

paling rendah dibandingkan dosis 100 dan 200 mg/kg bb.

Efek penurunan KGD seharusnya semakin baik seiring dengan

meningkatnya dosis, namun hasil analisis menunjukkan bahwa peningkatan dosis

ekstrak buah andaliman tidak diikuti dengan meningkatnya efek penurunan KGD

pada mencit. Hal ini diduga karena telah jenuhnya reseptor yang berikatan dan

terjadinya interaksi dengan senyawa kimia bioaktif yang terkandung dalam buah

andaliman. Jika reseptor telah jenuh, maka peningkatan dosis tidak bisa mencapai

efek maksimum.39

Penurunan KGD dengan ekstrak buah andaliman dapat disebabkan oleh

adanya kandungan terpenoid, steroid dan fenolik serta adanya aktivitas sebagai

antioksidan. Hasil identifikasi dengan IR dan UV-Vis menunjukkan bahwa

senyawa aktif utama dalam buah andaliman yang berpotensi sebagai inhibitor α

-glukosidase dan antioksidan merupakan senyawa flavonoid golongan auron dan

flavanon.22

Penelitian lain menunjukkan bahwa ekstrak etil asetat hygrophilla spinosa

yang mengandung senyawa terpenoid dan steroid dapat menurunkan kadar

glukosa darah pada dosis ekstrak 200 mg/kg bb.40 Penelitian antidiabetes yang

menggunakan ekstrak methanol dari Memecylon malabaricum cogn menunjukkan

bahwa senyawa seperti steroid, saponin, flavanoid, tannin dan alkaloid

mempunyai aktivitas antidiabetes.41

Telah diketahui dari penelitian sebelumnya bahwa buah andaliman

memiliki aktivitas sebagai antioksidan dan inhibitor α -glukosidase.22 Telah

diketahui bahwa antioksidan dapat bekerja menghambat formasi oxygen free

radicals yang dapat merusak sel dan menginisiasi penyakit kanker.33 Menurut

penelitian, α-glukosidase inhibitor dapat menghambat enzim mukosa usus (α

-glukosidase) yang mengkonversi polisakarida kompleks menjadi monosakarida

sehingga mengurangi penyerapan karbohidrat.19

Data penurunan KGD pada masing-masing mencit pada semua kelompok

(53)

dengan menggunakan Shapiro-Wilk. Hasil uji normalitas menunjukkan bahwa

data terdistribusi dengan normal (Lampiran 12).

Data di uji dengan uji homogenitas Levene. Hasil uji menunjukkan bahwa

penurunan KGD pada hari ke 15 dilanjutkan dengan uji ANOVA (p≥0,05)

sedangkan penurunan KGD pada hari ke 3, 6, 9, 12 dilanjutkan dengan uji

Kruskal-Wallis (p≤0,05) (lampiran 12).

Hasil uji ANOVA menunjukkan penurunan KGD pada hari ke 15 terdapat

perbedaan bermakna (p≤0,05) maka dilanjutkan dengan uji Tukey (Lampiran 17).

Hasil uji Kruskal-Wallis menunjukkan penurunan KGD pada hari ke 3, 6,

9 dan 12 berbeda secara bermakna (p≤0,05). Data penurunan KGD dilanjutkan

dengan uji Tukey (lampiran 12).

Hasil analisis Tukey pada hari ke-3 menunjukkan bahwa kelompok uji

dosis 300 mg/kg bb berbeda secara bermakna dengan kelompok uji dosis 100, 200

mg/kg bb dan kelompok kontrol positif. Kelompok kontrol negatif tidak berbeda

secara bermakna dengan kelompok lainnya (lampiran 12).

Hasil analisis Tukey pada hari ke-6, 9 dan 12 menunjukkan bahwa

kelompok kontrol negatif berbeda secara bermakna dengan kelompok uji dosis

100, 200 mg/kg bb dan kelompok kontrol positif. Kelompok uji dosis 300 mg/kg

bb tidak berbeda secara bermakna dengan kelompok lainnya (lampiran 12).

Hasil analisis Tukey pada hari ke 15 menunjukkan bahwa kelompok

kontrol negatif berbeda secara bermakna dengan kelompok uji dosis 100, 200

mg/kg bb dan kelompok kontrol positif. Kelompok uji dosis 100 mg/kg bb

berbeda secara bermakna dengan kelompok uji dosis 300 mg/kg bb (lampiran 19).

Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa ekstrak buah andaliman yang

(54)

BAB 6

KESIMPULAN DAN SARAN

6.1 Kesimpulan

Berdasarkan hasil penelitian yang telah dilakukan dapat disimpulkan

bahwa :

1. Ekstrak buah andaliman dapat menurunkan KGD mencit model

diabetes mellitus tipe 1 yang diinduksi aloksan 125 mg/kg bb.

2. Ekstrak buah andaliman dosis 100 mg/kg bb memiliki presentase

penurunan KGD paling tinggi.

3. Ekstrak buah andaliman dosis 100 dan 200 mg/kg bb tidak

menunjukkan perbedaan yang bermakna dengan metformin dosis

65 mg/kg bb dalam menurunkan KGD.

6.2 Saran

1. Perlu dilakukan penelitian lanjutan dengan sampel yang lebih besar

menggunakan variasi dosis yang lebih besar dan durasi pemberian

yang lebih lama untuk melihat dosis optimal ekstrak buah

andaliman sebagai antidiabetes

2. Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut untuk meneliti efek samping

ekstrak buah andaliman terhadap organ-organ mencit agar dapat

dipastikan apakah ekstrak buah andaliman aman untuk digunakan

(55)

2.1 Diabetes Mellitus (DM)

2.1.1 Definisi

Diabetes mellitus adalah kelompok penyakit metabolik yang ditandai dengan hiperglikemia yang disebabkan oleh kecacatan pada sekresi insulin, kinerja insulin atau keduanya. Insulin adalah hormon yang di produksi oleh sel beta di pankreas yang diperlukan untuk menggunakan glukosa dari makanan yang di cerna menjadi sumber energi. Hiperglikemia kronis pada diabetes berhubungan dengan kerusakan jangka panjang, disfungsi atau kegagalan beberapa organ yang

berbeda terutama mata, ginjal, saraf, jantung dan pembuluh darah.1

2.1.2 Klasifikasi diabetes mellitus

Klasifikasi diabetes menurut ADA (American Diabetes Association) adalah :

a. Diabetes Mellitus Tipe 1 (Diabetes mellitus tergantung insulin)

Diabetes tipe ini disebabkan oleh destruksi sel beta di pankreas. Tanda - tanda ketika sel beta hancur meliputi autoantibodi sel islet, autoantibodi terhadap insulin, autoantibodi terhadap GAD (GAD65) dan

autoantibodi terhadap tirosin fosfatase IA-2 dan IA-2β. Destruksi sel beta

dapat disebabkan oleh proses imunologik maupun idiopatik.

b. Diabetes Mellitus Tipe 2 (Diabetes mellitus tak tergantung insulin) Diabetes tipe ini diderita oleh 90-95% penderita diabetes. Individu yang menderita resistensi insulin dan kekurangan insulin relatif tidak memerlukan pengobatan insulin untuk bertahan hidup. Sebagian besar pasien dengan diabetes tipe ini menderita obesitas, dan obesitas sendiri menyebabkan resistensi insulin.

c. Diabetes gestasional

(56)

d. Diabetes mellitus tipe lain

1. Defek genetik pada fungsi sel beta akibat mutasi di :

a. Kromosom 12, HNF-1α (MODY3)

b. Kromosom 7 , glukokinase (MODY2)

c. Kromosom 20, HNF-4α (MODY1)

d. Kromosom 13, insulin promoter factor-1 (IPF-1 ; MODY4)

e. Kromosom 17, HNF-1β (MODY5)

f. Kromosom 2, Neuro D1 (MODY 6)

2. Defek genetik pada aksi insulin a. Resistensi insulin tipe A b. Leprechaunism

c. Sindrom Rabson-Mendenhall d. Lipoatrophic diabetes

3. Penyakit pada bagian eksokrin pankreas a. Pankreatitis

b. Trauma / pankreatektomi c. Neoplasma

d. Fibrosis kistik e. Hemikromatosis

f. Pankreatopati fibro kalkulus 4. Endokrinopati

a. Akromegali b. Sindrom cushing c. Feokromositoma d. Hipertiroidisme e. Somatostatinoma d. Aldosteronoma

5. Diabetes yang disebabkan obat atau bahan kimia 6. Infeksi

(57)

a. Sindrom Down b. Sindrom Klinefelter c. Sindrom Turner

d. Sindrom Wolfram’s ataksia Friedreich’s

e. Chorea Huntington f. Porfiria

g. Sindrom Prader Willi 1

2.1.3 Gejala klinis diabetes mellitus

Gejala klinis diabetes mellitus menurut ADA (American Diabetes Association) adalah :

a. Poliuria (peningkatan sekresi urine) banyak glukosa terkandung dalam urine (glukosuria) karena air mengikuti glukosa yang keluar melalui urine. b. Polidipsia (peningkatan rasa haus) akibat volume urine yang sangat besar dan keluarnya air yang menyebabkan dehidrasi ekstrasel. Dehidrasi intrasel mengikuti dehidrasi ekstrasel karena air intrasel akan berdifusi keluar sel mengikuti penurunan konsentrasi ke plasma yang hipertonik. c. Polifagia (peningkatan rasa lapar) karena kalori dari makanan yang dimetabolisme menjadi glukosa dalam darah tidak dapat digunakan sepenuhnya sehingga penderita merasa selalu lapar. walaupun banyak makan tetapi berat badan menurun.

d. Penurunan berat badan, rasa lelah dan kelemahan otot yang disebabkan oleh glukosa darah yang tidak dapat masuk ke dalam sel untuk digunakan sebagai energi, sehingga sel menggunakan lemak dan otot untuk menghasilkan energi.

e. Gangguan saraf tepi (kesemutan)

(58)

2.1.4 Komplikasi diabetes mellitus

Komplikasi diabetes mellitus dibagi 2 yaitu komplikasi jangka pendek dan jangka panjang. Komplikasi jangka pendek antara lain hipoglikemi dan ketoasidosis. Ketoasidosis diabetik (KAD) dapat dijumpai pada saat diagnosis pertama DM tipe 1 atau pasien lama akibat pemakaian insulin yang salah. Pada anak dengan kontrol metabolik yang jelek, riwayat ketoasidosis diabetik sebelumnya, masa remaja, pada anak dengan gangguan makan, keadaan sosio ekonomi kurang dan tidak adanya asuransi kesehatan, resiko terjadi ketoasidosis

diabetik akan meningkat.16

Komplikasi jangka panjang terjadi akibat perubahan mikrovaskular seperti retinopati, nefropati dan neuropati. Komplikasi yang paling sering ditemukan pada pasien DM tipe 1 adalah retinopati. Faktor resiko dari retinopati adalah kadar gula yang tidak terkontrol dan lamanya pasien menderita diabetes. Nefropati diperkirakan dapat terjadi pada 25-45% pasien DM tipe 1 dan 20-30% akan mengalami mikroalbuminuria subklinis. Mikroalbuminuria adalah manifestasi paling awal dari timbulnya nefropati diabetik. Neuropati jarang ditemukan pada

anak dan remaja.16

Komplikasi jangka panjang dari diabetes adalah retinopati dengan kemungkinan kehilangan pengelihatan. Nefropati menyebabkan gagal ginjal. Neuropati perifer dengan resiko ulser pada kaki, amputasi dan sendi Charcot. Neuropati otonom menyebabkan gejala pada saluran kemih, saluran cerna, jantung, dan disfungsi seksual. Hipertensi dan kelainan metabolisme lipoprotein

sering ditemukan pada individu dengan diabetes.1

2.1.5 Diagnosis Diabetes Mellitus

Berbagai keluhan dapat ditemukan pada penyandang diabetes. Kecurigaan adanya DM perlu dipikirkan apabila terdapat keluhan klasik DM seperti dibawah ini :

(59)

- Keluhan lain dapat berupa : lemah badan, kesemutan, gatal, mata kabur, dan disfungsi ereksi pada pria, serta pruritus vulvae pada wanita.

Diagnosis DM dapat ditegakkan melalui tiga cara :

1. Jika keluhan klasik ditemukan, maka pemeriksaan glukosa plasma sewaktu >200 mg/dL sudah cukup untuk menegakkan diagnosis DM.

2. Pemeriksaan glukosa plasma puasa ≥ 126 mg/dL dengan adanya

keluhan klasik.

3. Tes toleransi glukosa oral (TTGO). Meskipun TTGO dengan beban 75 g glukosa lebih sensitif dan speisfik dibanding dengan pemeriksaan glukosa plasma puasa, namun pemeriksaan ini memiliki keterbatasan tersendiri. TTGO sulit untuk dilakukan berulang-ulang dan dalam praktek

sangat jarang dilakukan karena membutuhkan persiapan khusus.18

2.1.6 Penatalaksanaan Diabetes Mellitus

Penatalaksanaan diabetes mempunyai tujuan akhir untuk menurunkan morbiditas dan mortalitas DM, yang secara spesifik ditujukan untuk mencapai 2 target utama, yaitu :

1. Menjaga agar kadar glukosa plasma berada dalam kisaran normal

2. Mencegah atau meminimalkan kemungkinan terjadinya komplikasi diabetes.17

Dalam penatalaksanaan DM, langkah pertama yang harus dilakukan adalah penatalaksanaan tanpa obat berupa pengaturan diet dan olah raga. Apabila setelah dilakukan langkah pertama ini tujuan penatalaksanaan belum tercapai, dapat dikombinasikan dengan langkah farmakologis berupa insulin atau terapi obat hipoglikemik oral, atau kombinasi keduanya. Diet yang baik merupakan kunci keberhasilan penatalaksanaan diabetes. Diet yang dianjurkan adalah makanan dengan komposisi yang seimbang dalam hal karbohidrat, protein dan lemak sesuai dengan kecukupan gizi baik sebagai berikut :

- Karbohidrat : 60-70%

- Protein : 10-15%

(60)

Jumlah kalori disesuaikan dengan pertumbuhan, status gizi, umur, stres akut dan kegiatan fisik, yang pada dasarnya ditujukan untuk mencapai dan

mempertahankan berat badan ideal.17

Penurunan berat badan telah dibuktikan dapat mengurangi resistensi

insulin dan memperbaiki respons sel-sel β terhadap stimulus glukosa. Dalam salah

satu penelitian dilaporkan bahwa penurunan 5% berat badan dapat mengurangi kadar HbA1c sebanyak 0,6% dan setiap kilogram penurunan berat badan

dihubungkan dengan 3-4 bulan tambahan waktu harapan hidup.17

Berolah raga secara teratur dapat menurunkan dan menjaga kadar gula darah tetap normal. Olahraga yang disarankan adalah yang bersifat CRIPE (Continuous Rhytmical, Interval, Progrssive, Endurance Training). Disesuaikan dengan kemampuan dan kondisi penderita. Beberapa contoh olah raga yang disarankan, antara lain jalan atau lari pagi, bersepeda, berenang dan lain sebagainya. Olah raga akan memperbanyak jumlah dan meningkatkan aktivitas

reseptor insulin dalam tubuh dan juga meningkatkan penggunaan glukosa.17

Terapi farmakologis diabetes mellitus dibagi menjadi 2 yaitu terapi dengan obat antidiabetes oral (ADO) dan insulin. Berdasarkan cara kerjanya obat antidiabetes oral dapat dibagi menjadi 6 kelompok besar yaitu :

a. Biguanida

Metformin adalah obat yang paling sering digunakan untuk terapi lini pertama diabetes mellitus. Selama ini metformin telah terbukti efektif dalam menurunkan kadar gula darah, meningkatkan sensitivitas insulin dan menurunkan resiko kardiovaskular dan hipoglikemi. Efek reduksi glukosa dari metformin kebanyakan melalui proses reduksi hasil glukosa hepatik seperti glukoneogenesis dan glikogenolisis dan meningkatkan penyerapan glukosa yang di stimulasi insulin dan glikogenesis pada otot rangka. Metformin memiliki peran penting

dalam mengaktivasi AMP-activated protein kinase (AMPK). Perlu diingat bahwa

metformin harus digunakan secara hati-hati pada pasien diabetes yang sudah tua. Metformin tidak boleh digunakan pada pasien dengan insufisiensi ginjal kronis atau akut dan harus dihentikan ketika level kreatinin mencapai 1.4 mg/dL (120

(61)

b. Sulfonilurea

Sulfonilurea adalah agen lini kedua yang sering digunakan untuk pasien diabetes mellitus tipe 2 yang tidak mengalami obesitas berat. Obat ini beraksi

langsung pada sel beta untuk menutup K+ channel ATP sensitif dan menstimulasi

sekresi insulin. Efek samping dari sulfonilurea adalah kemungkinan hipoglikemi yang tinggi, terutama pada orang tua dengan gangguan fungsi ginjal, disfungsi hepar dan pasien yang kecanduan alkohol. Hipoglikemi yang disebabkan oleh sulfonilurea dapat diperparah oleh interaksi dengan berbagai obat seperti aspirin, oksidase inhibitor, dan fenilbutazon. Sulfonilurea dapat menyebabkan kenaikan

berat badan.19

c. Thiazolidindion (TZDs)

Thiazolidindion memiliki aksi yang lebih tahan lama dalam meregulasi

hiperglikemi dibandingkan fonylureas dan metformin, dan tidak meningkatkan

resiko hipoglikemi ketika digunakan secara monoterapi. TZDs sangat manjur ketika digunakan bersamaan dengan insulin untuk mengurangi dosis insulin yang tinggi dan meningkatkan kontrol glikemik pada diabetes mellitus tipe 2. Tetapi, TZDs memliki beberapa efek samping yaitu meningkatkan resiko kanker kandung kemih, kenaikan berat badan dan retensi cairan yang menyebabkan edema. Penggunaan obat ini harus dibatasi pada pasien yang sudah tua dengan gagal jantung kongestif atau kelas III-IV. Rosiglitazon dan troglitazon telah ditarik dari

pasar karena resiko miokard infark yang meningkat.19

d. Penghambat α-glukosidase

Penghambat α -glukosidase seperti acarbose, voglibose dan miglitol

terbukti efektif untuk hiperglikemi postprandial. Obat ini menghambat enzim

mukosa usus (α-glucosidase) yang mengkonversi polisakarida kompleks menjadi

monosakarida sehingga mengurangi penyerapan karbohidrat. Efek samping seperti perut kembung, diare dan flatulens selalu diperiksa setelah penggunaan obat jenis ini. Penggunaan obat ini terbatas untuk orang tua karena efek samping saluran pencernaan. Penggunaan secara teratur dilarang pada pasien dengan

(62)

e. Terapi inkretin

Inkretin adalah hormon yang menstimulasi sekresi insulin. Hormon ini di

sekresi dari sel endokrin usus, termasuk glucose-dependent insulinotropid

polypeptide (GIP) dan glucagon-like peptide-1 (GLP-1). Terapi berbasis inkretin sangat ideal untuk manajemen diabetes mellitus tipe 2 karena efisien, tolerabilitas yang baik, resiko yang rendah dari hipoglikemi dan penurunan berat badan. Obat ini mempunyai efek yang positif pada kesehatan jantung, hati dan sistem saraf pusat.19

2.2 Terapi Insulin

Insulin adalah agen anti-hiperglikemi yang paling efektif yang ditemukan oleh Banting dan Best pada 1921. Mekanisme dibalik penurunan kadar glukosa oleh insulin kebanyakan melalui penekanan produksi glukosa hepatik, meningkatkan penggunaan glukosa postprandial dan meningkatkan konsumsi lipoprotein abnormal. Terapi insulin dapat meningkatkan sensitivitas insulin dan fungsi sekresi sel beta. Insulin memiliki 4 jenis sediaan yaitu masa kerja cepat (rapid-acting), masa kerja singkat (short-acting), masa kerja sedang (intermediate-acting) dan masa kerja panjang (long-(intermediate-acting). Ketika perubahan gaya hidup dan obat antidiabetik oral gagal mencapai kontrol glikemik yang memadai pada pasien

diabetes mellitus tipe 2, wajib untuk melakukan terapi insulin.19

2.3 Aloksan

Aloksan menyebabkan diabetes ketika diberikan secara parenteral, intravena, intraperitoneal atau subcutaneus. Dosis aloksan yang dibutuhkan untuk menginduksi diabetes tergantung pada spesies hewan percobaan, cara pemberian dan status nutrisi. Sel pankreas manusia lebih resisten terhadap aloksan dibandingkan mencit atau tikus. Dosis yang paling sering digunakan untuk menginduksi diabetes pada tikus adalah 65 mg/kgBB. Ketika aloksan diberikan secara intraperitoneal atau subcutan, dosisnya harus 2-3 kali lebih besar. Dosis intraperitoneal dibawah 150 mg/kgBB tidak akan cukup untuk menginduksi

(63)

Mekanisme kerja aloksan telah dipelajari menggunakan pankreas mencit yang di perfusi. Aloksan menyebabkan kenaikan sekresi insulin secara tiba-tiba disebabkan oleh penyerapan yang cepat oleh sel B pada pankreas. Walaupun aloksan menyebabkan diabetes, binatang percobaan harus diperiksa setelah beberapa waktu untuk mengurangi efek samping dari kinerja aloksan. Banyak binatang percobaan mati karena nekrosis sel tubular ginjal yang disebabkan oleh

penggunaan dosis aloksan yang terlalu tinggi.20

2.4 Uraian Tanaman Andaliman

Andaliman (Zanthoxylum acanthopodium DC) adalah tanaman liar dengan

rasa yang kuat seperti jeruk dan sangat terkenal di sumatera utara.9

Buah dari Zanthoxylum acanthopodium DC. Sering dikenal dalam

masyarakat batak dengan nama andaliman, tumbuh di sumatera utara dan telah lama digunakan sebagai bumbu untuk masakan tradisional. Tanaman dari genus Zanthoxylum biasa digunakan untuk mengatasi inflamasi dan arthritis. Tanaman andaliman dilaporkan mempunyai aktivitas anti inflamasi dan juga mempunyai

aktivitas antioksidan dari ekstrak etanol.10

Saat ini tanaman andaliman diperhitungkan menjadi sumber senyawa aromatik dan minyak esensial. Buahnya mengandung senyawa aromatik dengan rasa pedas yang khas. Jika dimakan meninggalkan efek menggetarkan alat

pengecap dan menyebabkan lidah terasa kebal.6

2.4.1 Klasifikasi Tanaman Andaliman

Klasifikasi tanaman andaliman adalah sebagai berikut :

Kingdom : Plantae

Divisio : Spermatophyta

Kelas : Dicotyledonae

Ordo : Rutales

Family : Rutaceae

Genus : Zanthoxylum

(64)

2.4.2 Morfologi Tanaman Andaliman

Tanaman andaliman berupa semak atau pohon kecil bercabang rendah, tegak, tinggi mencapai 5 m, menahun. Batang, cabang dan beranak daun gasal, panjang 5-20 cm dan lebar 3-15 cm, terdapat kelenjar minyak. Rakis bersayap, permukaan bagian atas, bagian bawah rakis, dan anak daun berduri; 3-11 anak daun, berbentuk jorong, ujung meruncing, tepi bergerigi halus, paling ujung

terbesar, anak daun panjang 1-7 cm, lebar 0.5-2.0 cm.6

Permukaan atas daun hijau berkilat dan permukaan bawah hijau muda atau pucat, daun muda permukaan atas hijau dan bawah hijau kemerahan. Bunga di ketiak, majemuk terbatas, anak payung menggarpu majemuk, kecil-kecil; dasar bunga rata atau berbentuk kerucut; kelopak 5-7 bebas, panjang 1-2 cm, warna kuning pucat; berkelamin dua, benang sari 5-6 duduk pada dasar bunga, kepala sari kemerahan, putih 3-4, bakal buah apokarp, bakal buah menumpang. Buah kotak sejati atau kapsul, bulat, diameter 2-3 ., muda hijau, tua merah; tiap buah

satu biji, kulit keras, warna hitam berkilat.6

2.4.3 Mekanisme Tanaman Andaliman

Andaliman dapat digunakan sebagai insektisida untuk menghambat

pertumbuhan serangga Sitophilus zeamais.29 Andaliman juga dapat

mempengaruhi perkembangan binatang pengerat, tumbuhan ini memiliki efek

antiinflamasi yang dapat menghambat sintesis prostaglandidn.30 Ekstrak kasar

buah andaliman ini juga memiliki aktivitas fisiologi aktif sebagai antioksidan dan

antimikroba yang potensial.11

Dalam tanaman andaliman terkandung senyawa terpenoid, fenolik dan steroid. Diantara senyawa tersebut, terpenoid memiliki efek antioksidan dan antimirkoba, Sedangkan fenolik merupakan komponen bioaktif yang memiliki

sifat toksik terhadap hewan pemangsa.12

Buah buahan dan biji tanaman andaliman digunakan untuk mengobati demam, dispepsia dan mengusir cacing gelang. Minyak esensial dari tanaman

(65)

Buah andaliman berpotensi sebagai inhibitor α -glukosidase dan antioksidan. Ekstrak etanol buah andaliman memiliki aktivitas yang paling baik

sebagai antioksidan. Hasil identifikasi dengan IR dan UV-Vis menunjukkan

bahwa senyawa aktif utama yang berpotensi sebagai inhibitor α-glukosidase dan

antioksidan diduga merupakan senyawa flavonoid golongan auron dan flavanon.22

α-glukosidase inhibitor menghambat enzim mukosa usus (α-glucosidase) yang

mengkonversi polisakarida kompleks menjadi monosakarida sehingga

mengurangi penyerapan karbohidrat.19

2.5 Ekstraksi

Ekstraksi adalah kegiatan penarikan kandungan kimia yang dapat larut sehingga terpisah dari bahan yang tidak dapat larut dengan pelarut cair. Simplisia yang disari mengandung senyawa aktif yang dapat larut dan senyawa yang tidak dapat larut seperti serat, karbohidrat, protein. Senyawa aktif yang terdapat dalam simplisia dapat digolongkan ke dalam golongan minyak atsiri, alkaloid, flavonoid dan lain –lain. Dengan diketahuinya senyawa aktif yang dikandung simplisia,

pemilihan pelarut dan cara ekstraksi yang tepat akan lebih mudah.26

2.6 Metode Ekstraksi

Ada beberapa metode ekstraksi yaitu : 2.6.1 Cara Dingin

a. Maserasi

Maserasi adalah proses pengekstrakan simplisia dengan menggunakan pelarut dengan beberapa kali pengocokan atau pengadukan pada temperatur ruangan (kamar). Maserasi kinetik berarti dilakukan pengadukan yang kontinu (terus-menerus). Remaserasi berarti dilakukan pengulangan penambahan pelarut

setelah dilakukan penyaringan maserat pertama dan seterusnya.26

b. Perkolasi

(66)

sebenarnya (penetesan/penampungan ekstrak), terus menerus sampai diperoleh

perkolat yang jumlahnya 1-5 kali bahan.26

2.6.2 Cara Panas

a. Refluks

Refluks adalah ekstraksi dengan pelarut pada temperatur titik didihnya, Selama waktu tertentu dan jumlah pelarut terbatas yang relatif konstan dengan adanya pendingin balik. Umumnya dilakukan pengulangan proses pada residu

pertama 3-5 kali sehingga dapat termasuk proses ekstraksi sempurna.26

b. Soxhletasi

Soxhletasi adalah ekstraksi menggunakan pelarut yang selalu baru yang umumnya dilakukan dengan alat khusus. Sampel dibungkus dengan kertas saring sehingga terjadi ekstraksi kontinu dengan jumlah pelarut relatif konstan dengan

adanya pendingin balik.26

c. Digesti

Digesti adalah maserasi kinetik (dengan pengadukan kontinu) pada temperatur yang lebih tinggi dari temperatur ruangan (kamar), yaitu secara umum

dilakukan pada temperatur 40-50°C.26

d. Infundasi

Infundasi adalah ekstraksi dengan pelarut air pada temperatur penangas air (bejana infus tercelup dalam penangas air mendidih, temperatur terukur 96-98°C)

selama waktu tertentu (15-20 menit).26

e. Dekoktasi

Dekoktasi adalah infus pada waktu yang lebih lama (≥30 menit) dan

temperatur sampai titik didih air.26

2.7 Pengaturan Kadar Glukosa Dalam Darah

(67)

mg%. Tujuan dilepaskannya insulin adalah untuk menurunkan konsentrasi glukosa dengan cara meningkatkan ambilan glukosa oleh hati dan menyimpannya sebagai glikogen. Ketika kadar glukosa darah menurun <80 mg%, sel alfa pankreas melepaskan glukagon untuk meningkatkan kadar glukosa dengan

memecah glikogen menjadi glukosa.14

Konsentrasi glukosa darah menentukan jumlah relatif insulin dan glukagon yang disekresikan oleh sel-sel pulau Langerhans. Perombakan glikogen dalam hati dan konversi asam amino dan asam lemak menjadi glukosa dihambat oleh insulin. Gula disimpan sebagai glikogen di hati dan otot rangka, sementara sel-sel jaringan adiposa mengubah glukosa menjadi lemak. Glukagon memberi sinyal ke sel-sel hati untuk meningkatkan hidrolisis glikogen, mengubah asam amino dan asam lemak menajdi glukosa dan memulai pelepasan glukosa secara

perlahan-lahan ke dalam sirkulasi.14

2.8 Metformin

Metformin (1, 1-dimethylbiguanide hydrochloride) telah digunakan secara luas untuk mengobati penyakit diabetes mellitus sejak tahun 1950, dan merupakan

pilihan obat yang direkomendasikan oleh American Diabetes Association dan

European Association for the Study of Diabetes. Mekanisme dari metformin yang

paling banyak diketahui adalah aktivasi adenosine monophosphate

(AMP)-activated protein kinase.35

Metformin lebih banyak bekerja di jaringan target insulin seperti hati, otot

dan jaringan adiposa. Aktivasi AMP-activated protein kinase (AMPK) oleh

metformin menekan produksi glukosa di hati dan meningkatkan penggunaan