UJI EFEK ANTIINFLAMASI EKSTRAK ETANOL KULIT
BUAH ROTAN (
Daemonorops draco
(Willd.) Blume)
TERHADAP TIKUS YANG DIINDUKSI KARAGENAN
SKRIPSI
OLEH:
FRISKA RANI SARAH
NIM 101501051
PROGRAM STUDI SARJANA FARMASI
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
UJI EFEK ANTIINFLAMASI EKSTRAK ETANOL KULIT
BUAH ROTAN (
Daemonorops draco
(Willd.) Blume)
TERHADAP TIKUS YANG DIINDUKSI KARAGENAN
SKRIPSI
Diajukan sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi
Universitas Sumatera Utara
OLEH:
FRISKA RANI SARAH
NIM 101501051
PROGRAM STUDI SARJANA FARMASI
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
PENGESAHAN SKRIPSI
UJI EFEK ANTIINFLAMASI EKSTRAK ETANOL KULIT
BUAH ROTAN (
Daemonorops draco
(Willd.) Blume)
TERHADAP TIKUS YANG DIINDUKSI KARAGENAN
OLEH:
FRISKA RANI SARAH
NIM 101501051
Dipertahankan di Hadapan Panitia Penguji Skripsi Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara
Pada Tanggal: 29 November 2014
Medan, Desember 2014 Fakultas Farmasi
Universitas Sumatera Utara Dekan,
Prof. Dr. Sumadio Hadisahputra, Apt. NIP 195311281983031002
Pembimbing I,
Prof. Dr. Sumadio Hadisahputra, Apt. NIP 195311281983031002
Pembimbing II,
Marianne, S.Si., M.Si., Apt. NIP 198005202005012006
Panitia Penguji,
Prof. Dr. Urip Harahap, Apt. NIP 195301011983031004
Prof. Dr. Sumadio Hadisahputra, Apt. NIP 195311281983031002
Khairunnisa, S.Si., M.Pharm., Ph.D., Apt. NIP 197802152008122001
KATA PENGANTAR
Puji syukur penulis ucapkan kepada Tuhan YME atas segala limpahan
berkat, rahmat dan karuniaNya, sehingga penulis dapat menyelesaikan penelitian
dan penyusunan skripsi ini.
Skripsi ini disusun untuk melengkapi salah satu syarat mencapai gelar
Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara, dengan judul
Uji Efek Antiinflamasi Ekstrak Etanol Kulit Buah Rotan (Daemonorops draco
(Willd.) Blume) terhadap Tikus yang Diinduksi Karagenan.
Pada kesempatan ini dengan segala kerendahan hati penulis mengucapkan
terima kasih yang sebesar-besarnya kepada Bapak Prof. Dr. Sumadio
Hadisahputra, Apt., selaku Dekan Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara
Medan, yang telah memberikan fasilitas sehingga penulis dapat menyelesaikan
pendidikan. Bapak Prof. Dr. Sumadio Hadisahputra, Apt., dan Ibu Marianne,
S.Si., M.Si., Apt., yang telah membimbing dan memberikan petunjuk serta
saran - saran selama penelitian hingga selesainya skripsi ini. Bapak Prof. Dr. Urip
Harahap, Apt., Ibu Khairunnisa, S.Si., M.Pharm., Ph.D., Apt., dan Ibu Aminah
Dalimunthe, S.Si., M.Si., Apt., selaku dosen penguji yang telah memberikan
kritik, saran dan arahan kepada penulis dalam menyelesaikan skripsi ini. Bapak
dan Ibu staf pengajar Fakultas Farmasi USU Medan yang telah mendidik selama
perkuliahan dan Ibu T. Ismanelly Hanum, S.Si., M.Si., Apt., selaku penasehat
akademik yang selalu memberikan bimbingan, perhatian dan motivasi kepada
penulis selama masa perkuliahan. Ibu Marianne, S.Si., M.Si., Apt., selaku kepala
dan Ibu Dra. Suwarti Aris, M.Si., Apt., selaku kepala Laboratorium Farmakognosi
Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara yang telah memberikan izin dan
fasilitas untuk penulis sehingga dapat mengerjakan dan menyelesaikan penelitian.
Penulis juga mengucapkan terima kasih dan penghargaan yang tiada
terhingga kepada Ayahanda Parsaoran Purba dan Ibunda Diana Tambunan, S.Pd.,
yang telah memberikan cinta dan kasih sayang yang tidak ternilai dengan apapun,
pengorbanan baik materi maupun motivasi beserta doa yang tulus yang tidak pernah
berhenti. Abangku Raymon Fanal dan adikku Febrina Yosephine serta seluruh
keluarga yang selalu mendoakan dan memberikan semangat. Sahabat-sahabat
terbaikku serta semua pihak yang tidak dapat disebutkan satu persatu yang telah
banyak membantu hingga selesainya penulisan skripsi ini.
Penulis menyadari sepenuhnya bahwa dalam penulisan skripsi ini masih
jauh dari kesempurnaan, oleh karena itu dengan segala kerendahan hati, penulis
menerima kritik dan saran demi kesempurnaan skripsi ini. Akhirnya, penulis
berharap semoga skripsi ini dapat memberi manfaat bagi kita semua.
Medan, Desember 2014 Penulis,
UJI EFEK ANTIINFLAMASI EKSTRAK ETANOL KULIT BUAH ROTAN (Daemonorops draco (Willd.) Blume) TERHADAP TIKUS YANG
DIINDUKSI KARAGENAN ABSTRAK
Natrium diklofenak merupakan obat golongan antiiflamasi nonsteroid (AINS). Obat golongan ini dapat menimbulkan efek samping apabila dikonsumsi dalam jangka panjang. Penggunaan obat ini dapat meningkatkan insiden terjadinya perdarahan dan perforasi pada saluran pencernaan bagian atas. Indonesia memiliki potensi sumber daya rotan tertinggi didunia, salah satunya dari genus Daemonorops. Genus Daemonorops ini memiliki getah yang disebut
dragon’s blood, yang terdapat pada permukaan kulit buahnya dan memiliki efek terapi. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui efek antiinflamasi pemberian ekstrak etanol kulit buah rotan (Daemonorops draco (Willd.) Blume) terhadap tikus jantan yang diinduksi karagenan 1% dan membandingkannya dengan obat yang beredar di pasaran.
Penelitian ini meliputi karakterisasi simplisia, skrining fitokimia, pengujian pada hewan dengan pengukuran perubahan volume kaki tikus yang diinduksi karagenan 1% dengan alat pletismometer air raksa setiap 30 menit selama 360 menit. Penelitian ini menggunakan 5 kelompok perlakuan, yaitu kelompok I diberikan CMC 0,5% (1% berat badan), kelompok II diberikan natrium diklofenak dosis 4,5 mg/kg bb, kelompok III diberikan ekstrak etanol kulit buah rotan (EEKBR) dosis 100 mg/kg bb, kelompok IV diberikan dosis EEKBR dosis 200 mg/kg bb, dan kelompok V diberikan EEKBR dosis 400 mg/kg bb. Dari data hasil penelitian, dihitung persen radang dan persen inhibisi radang. Data dianalisis dengan uji Kruskal Wallis, dilanjutkan dengan uji Mann Whitney untuk melihat ada atau tidaknya perbedaan antar kelompok.
Dari hasil penelitian, EEKBR dosis 100 mg/kg bb, EEKBR dosis 200 mg/kg bb dan EEKBR dosis 400 mg/kg bb memiliki efek sebagai antiinflamasi terhadap radang buatan pada telapak kaki tikus yang diinduksi dengan karagenan 1% secara subplantar. EEKBR dosis 400 mg/kg bb memiliki efek inhibisi radang rata-rata yang paling besar dibandingkan EEKBR dosis 200 mg/kg bb dan dosis 100 mg/kg bb. Hasil uji statistik Mann-Whitney menunjukkan bahwa tidak terdapat perbedaan yang signifikan antara EEKBR dosis 400 mg/kg bb dengan natrium diklofenak 4,5 mg/kg bb pada tingkat kepercayaan 95%.
EVALUATION ANTIINFLAMMATORY EFFECT OF ETHANOL EXTRACT OF RATTAN FRUIT’S LEATHER (Daemonorops draco (Willd.)
Blume) IN RAT CARRAGEENAN-INDUCED ABSTRACT
Sodium diclofenac is a nonsteroidal antiinflammatory agents (NSAIDs). These kind of drugs can cause side effects if it consumed in long term. The use of these drugs may increase the incidence of bleeding and perforation of the upper gastrointestinal tract. Indonesia has the highest potential of rattan resources in the world, one of them was genus Daemonorops. Daemonorops’ genus has resin called dragon's blood, which found on the surface of the leather and it has therapeutic uses. This study aimed to determine the anti-inflammatory effects of ethanol extract of rattan fruit’s leather (Daemonorops draco (Willd.) Blume) againts carrageenan-induced male rats 1% and compare it to all drugs that has spread in market.
This research includes the characterization of simplex, phytochemical screening, animal testing and measuring the volume changes of rat’s paw induced carrageenan 1% using mercury pletismometer every 30 minutes until 360 minutes. This research uses 5 treatment groups, group I was given CMC 0.5% (1% body weight), group II was given diclofenac sodium dose of 4.5 mg/kg bw, group III was given the ethanol extract of rattan fruit’s leather (EEKBR) dose of 100 mg/kg bw, group IV EEKBR dose of 200 mg/kg bw, and group V EEKBR dose of 400 mg/kg bw. From the result of the research, percent of inhibition of inflammation and inflammation was calculated. Datas were analyzed with the Kruskal-Wallis test, followed by Mann Whitney test for the presence or absence the significant differences from each group.
From the research, EEKBR dose of 100 mg/kg bw, EEKBR dose of 200 mg/kg bw and EEKBR dose of 400 mg/kg bw has an antiinflammatory effect. EEKBR dose of 400 mg/kg bw has the highest effect of inhibiting inflammation compared to EEKBR dose of 200 mg/kg bw and 100 mg/kg bw. Results of Mann-Whitney statistical test showed that there was no significant difference between EEKBR dose of 400 mg/kg bw with diclofenac sodium dose of 4.5 mg/kg bw at 95% confidence level.
DAFTAR ISI
Halaman
JUDUL ... i
LEMBAR PENGESAHAN ... iii
KATA PENGANTAR ... iv
ABSTRAK ... vi
ABSTRACT ... vii
DAFTAR ISI ... viii
DAFTAR TABEL ... xii
DAFTAR GAMBAR ... xiii
DAFTAR LAMPIRAN ... xiv
BAB I PENDAHULUAN ... 1
1.1 Latar Belakang ... 1
1.2 Perumusan Masalah ... 4
1.3 Hipotesis ... 4
1.4 Tujuan Penelitian ... 4
1.5 Manfaat Penelitian ... 5
1.6 Kerangka Penelitian ... 5
BAB II TINJAUAN PUSTAKA ... 7
2.1 Uraian Tumbuhan ... 7
2.1.1 Sistematika Tumbuhan ... 7
2.1.2 Nama lain ... 8
2.1.3 Sifat tumbuhan ... 8
2.1.5 Kegunaan tumbuhan ... 8
2.2 Simplisia dan Ekstrak ... 9
2.3 Inflamasi (Radang) ... 11
2.3.1 Mediator inflamasi ... 11
2.3.2 Gejala-gejala terjadinya respon inflamasi ... 12
2.3.3 Mekanisme terjadinya inflamasi ... 14
2.4 Obat Antiinflamasi ... 16
2.4.1 Obat antiinflamasi golongan steroida ... 16
2.4.2 Obat antiinflamasi golongan non steroida ... 16
2.4.2.1 Natrium diklofenak ... 17
2.5 Karagenan ... 18
2.6 Pengujian Efek Antiinflamasi Akut ... 19
BAB III METODE PENELITIAN ... 21
3.1 Alat dan Bahan ... 21
3.1.1 Alat-alat ... 21
3.1.2 Bahan-bahan ... 21
3.2 Penyiapan Sampel ... 22
3.2.1 Pengambilan bahan ... 22
3.2.2 Identifikasi bahan ... 22
3.2.3 Pembuatan simplisia ... 22
3.3 Pemeriksaan Karakteristik Simplisia ... 22
3.3.1 Pemeriksaan makroskopik ... 22
3.3.2 Pemeriksaan mikroskopik ... 23
a. Penjenuhan toluen ... 23
b. Penetapan kadar air simplisia ... 23
3.3.4 Penetapan adar sari larut air ... 24
3.3.5 Penetapan kadar sari larut etanol ... 24
3.3.6 Penetapan kadar abu total ... 24
3.3.7 Penetapan kadar abu tidak larut asam ... 25
3.3.8 Skrining fitokimia simplisia ... 25
a. Pemeriksaan alkaloida ... 25
b. Pemeriksaan flavonoida ... 25
c. Pemeriksaan tanin ... 26
d. Pemeriksaan glikosida ... 26
e. Pemeriksaan saponin ... 27
f. Pemeriksaan steroida/triterpenoida ... 27
3.4 Pembuatan Ekstrak Etanol Kulit Buah Rotan ... 27
3.5 Skrining Fitokimia Ekstrak ... 28
a. Pemeriksaan alkaloida ... 28
b. Pemeriksaan flavonoida ... 28
c. Pemeriksaan tanin ... 29
d. Pemeriksaan glikosida ... 29
e. Pemeriksaan saponin ... 30
f. Pemeriksaan steroida/triterpenoida ... 30
3.6 Penyiapan Bahan Uji, Kontrol dan Obat Pembanding ... 30
3.6.1 Pembuatan suspensi CMS 0,5% ... 31
3.6.3 Pemeriksaan suspensi ekstrak etanol kulit buah rotan 31
3.7 Penyiapan Induktor Radang ... 31
3.8 Penyiapan Hewan Percobaan ... 31
3.9 Prosedur Pengujian Efek Antiinflamasi ... 32
3.10 Perhitungan persen Radang ... 33
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ... 35
4.1 Hasil Identifikasi Tumbuhan ... 35
4.2 Hasil Karakterisasi Bahan Tumbuhan dan Simplisia ... 35
4.2.1 Pemeriksaan makroskopik ... 35
4.2.2 Pemeriksaan mikroskopik ... 35
4.2.3 Pemeriksaan karakteristik serbuk simpilisia ... 35
4.3 Skrining Fitokimia ... 36
4.4 hasil Pengujian Antiinflamasi ... 37
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN ... 44
5.1 Kesimpulan ... 44
5.2 Saran ... 44
DAFTAR PUSTAKA ... 45
DAFTAR TABEL
Tabel Halaman
4.1 Hasil Pemeriksaan Karakteristik Serbuk Simplisia ... 36
4.2 Hasil Skrining Fitokimia Simplisia dan Ekstrak Kulit Buah Rotan ... 37
4.3 Perbandingan Ada Tidaknya Perbedaan Bermakna Antara Kelompok
DAFTAR GAMBAR
Gambar Halaman
1.1 Kerangka Pikir Penelitian ... 5
2.1 Mekanisme Terjadinya Inflamasi ... 15
2.2 Rumus Natrium Diklofenak ... 17
2.3 Grafik Persen Radang Rata-Rata Telapak Kaki Kiri Tikus Tiap Waktu
Pengamatan ... 38
2.4 Grafik Persen Inhibisi Radang Rata-Rata telapak Kaki Kiri Tikus Tiap
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran Halaman
1. Persetujuan Komite Etik Penelitian Hewan ... 48
2. Hasil Identifikasi Tumbuhan ... 49
3. Gambar karakteristik Tumbuhan ... 50
4. Hasil Pemeriksaan Mikroskopik Serbuk Simplisia ... 52
5. Perhitungan Hasil Kaarakterisasi Simplisia ... 53
6. Bagan Kerja Penelitian ... 57
7. Gambar Alat ... 58
8. Gambar Hewan Percobaan ... 59
9. Contoh Perhitungan Dosis ... 60
10. Contoh Perhitungan Persen Radang dan Persen Inhibisi Radang ... 61
11. Tabel Konversi Dosis ... 62
12. Data Volume Kaki Tikus, Persen Radang dan Inhibisi Radang Rata-Rata ... 63
UJI EFEK ANTIINFLAMASI EKSTRAK ETANOL KULIT BUAH ROTAN (Daemonorops draco (Willd.) Blume) TERHADAP TIKUS YANG
DIINDUKSI KARAGENAN ABSTRAK
Natrium diklofenak merupakan obat golongan antiiflamasi nonsteroid (AINS). Obat golongan ini dapat menimbulkan efek samping apabila dikonsumsi dalam jangka panjang. Penggunaan obat ini dapat meningkatkan insiden terjadinya perdarahan dan perforasi pada saluran pencernaan bagian atas. Indonesia memiliki potensi sumber daya rotan tertinggi didunia, salah satunya dari genus Daemonorops. Genus Daemonorops ini memiliki getah yang disebut
dragon’s blood, yang terdapat pada permukaan kulit buahnya dan memiliki efek terapi. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui efek antiinflamasi pemberian ekstrak etanol kulit buah rotan (Daemonorops draco (Willd.) Blume) terhadap tikus jantan yang diinduksi karagenan 1% dan membandingkannya dengan obat yang beredar di pasaran.
Penelitian ini meliputi karakterisasi simplisia, skrining fitokimia, pengujian pada hewan dengan pengukuran perubahan volume kaki tikus yang diinduksi karagenan 1% dengan alat pletismometer air raksa setiap 30 menit selama 360 menit. Penelitian ini menggunakan 5 kelompok perlakuan, yaitu kelompok I diberikan CMC 0,5% (1% berat badan), kelompok II diberikan natrium diklofenak dosis 4,5 mg/kg bb, kelompok III diberikan ekstrak etanol kulit buah rotan (EEKBR) dosis 100 mg/kg bb, kelompok IV diberikan dosis EEKBR dosis 200 mg/kg bb, dan kelompok V diberikan EEKBR dosis 400 mg/kg bb. Dari data hasil penelitian, dihitung persen radang dan persen inhibisi radang. Data dianalisis dengan uji Kruskal Wallis, dilanjutkan dengan uji Mann Whitney untuk melihat ada atau tidaknya perbedaan antar kelompok.
Dari hasil penelitian, EEKBR dosis 100 mg/kg bb, EEKBR dosis 200 mg/kg bb dan EEKBR dosis 400 mg/kg bb memiliki efek sebagai antiinflamasi terhadap radang buatan pada telapak kaki tikus yang diinduksi dengan karagenan 1% secara subplantar. EEKBR dosis 400 mg/kg bb memiliki efek inhibisi radang rata-rata yang paling besar dibandingkan EEKBR dosis 200 mg/kg bb dan dosis 100 mg/kg bb. Hasil uji statistik Mann-Whitney menunjukkan bahwa tidak terdapat perbedaan yang signifikan antara EEKBR dosis 400 mg/kg bb dengan natrium diklofenak 4,5 mg/kg bb pada tingkat kepercayaan 95%.
EVALUATION ANTIINFLAMMATORY EFFECT OF ETHANOL EXTRACT OF RATTAN FRUIT’S LEATHER (Daemonorops draco (Willd.)
Blume) IN RAT CARRAGEENAN-INDUCED ABSTRACT
Sodium diclofenac is a nonsteroidal antiinflammatory agents (NSAIDs). These kind of drugs can cause side effects if it consumed in long term. The use of these drugs may increase the incidence of bleeding and perforation of the upper gastrointestinal tract. Indonesia has the highest potential of rattan resources in the world, one of them was genus Daemonorops. Daemonorops’ genus has resin called dragon's blood, which found on the surface of the leather and it has therapeutic uses. This study aimed to determine the anti-inflammatory effects of ethanol extract of rattan fruit’s leather (Daemonorops draco (Willd.) Blume) againts carrageenan-induced male rats 1% and compare it to all drugs that has spread in market.
This research includes the characterization of simplex, phytochemical screening, animal testing and measuring the volume changes of rat’s paw induced carrageenan 1% using mercury pletismometer every 30 minutes until 360 minutes. This research uses 5 treatment groups, group I was given CMC 0.5% (1% body weight), group II was given diclofenac sodium dose of 4.5 mg/kg bw, group III was given the ethanol extract of rattan fruit’s leather (EEKBR) dose of 100 mg/kg bw, group IV EEKBR dose of 200 mg/kg bw, and group V EEKBR dose of 400 mg/kg bw. From the result of the research, percent of inhibition of inflammation and inflammation was calculated. Datas were analyzed with the Kruskal-Wallis test, followed by Mann Whitney test for the presence or absence the significant differences from each group.
From the research, EEKBR dose of 100 mg/kg bw, EEKBR dose of 200 mg/kg bw and EEKBR dose of 400 mg/kg bw has an antiinflammatory effect. EEKBR dose of 400 mg/kg bw has the highest effect of inhibiting inflammation compared to EEKBR dose of 200 mg/kg bw and 100 mg/kg bw. Results of Mann-Whitney statistical test showed that there was no significant difference between EEKBR dose of 400 mg/kg bw with diclofenac sodium dose of 4.5 mg/kg bw at 95% confidence level.
BAB I PENDAHULUAN
1.1Latar Belakang
Tumbuhan merupakan keanekaragaman hayati yang selalu ada di sekitar
kita, baik itu yang tumbuh secara liar maupun yang sengaja dibudidayakan. Sejak
zaman dahulu, tumbuhan sudah digunakan sebagai tanaman obat, walaupun
penggunaannya disebarkan secara turun-temurun maupun dari mulut ke mulut
(Widyawati, 2011).
Dewasa ini, didukung dengan penelitian ilmiah, tumbuhan secara
fungsional tidak lagi dipandang sebagai bahan konsumsi maupun penghias saja,
tetapi juga sebagai tanaman obat yang multifungsi. Mengingat biaya pengobatan
yang tidak terjangkau oleh semua orang, pengobatan alamiah dengan tanaman
obat tradisional dipandang sebagai alternatif yang terjangkau dan kembali ke alam.
Bahkan fungsinya sebagai tanaman obat sudah dikomersialkan sebagai lahan
penghasilan yang sangat menguntungkan (Widyawati, 2011).
Indonesia memiliki potensi sumber daya rotan tertinggi di dunia. Dari 530
jenis rotan dunia, lebih kurang 316 jenis terdapat di berbagai wilayah hutan
Indonesia. Di wilayah hutan Sumatera terdapat 132 jenis, Jawa 29 jenis,
Kalimantan 138 jenis, Sulawesi 86 jenis, Maluku dan Papua 47 jenis (Kemenhut,
2013).
Keanekaragaman jenis rotan yang tercatat, terangkum ke dalam 13 genus.
Genus Daemonorops memiliki jumlah jenis terbanyak kedua setelah genus
2005). Genus Daemonorops (lebih dikenal jernang) yang menghasilkan getah,
berjumlah 12 jenis. Jenis Jernang yang menghasilkan getah terbanyak dan bernilai
ekonomis tinggi adalah Daemonorops draco (Willd.) Blume (Purwanto, dkk.,
2005). Potensi rotan jernang di Indonesia tersebar di Sumatera dan Kalimantan. Di
Sumatera, rotan jernang dijumpai di Provinsi Aceh, Riau, dan Jambi. Sedangkan
di Kalimantan, terdapat di Kalimantan Barat, Kalimantan Tengah dan Kalimantan
Selatan (Kemenhut, 2013).
Jernang adalah resin yang merupakan hasil sekresi buah rotan jernang.
Resin tersebut menempel dan menutupi bagian luar buah rotan, dimana untuk
mendapatkannya diperlukan proses ekstraksi. Musim berburu jernang dilakukan
pada bulan September sampai dengan Desember (Elvidayanty dan Erwin, 2006).
Buah rotan jernang yang sudah tua berwarna cokelat kemerahan. Buah yang
menghasilkan banyak jernang adalah buah yang tua namun belum terlalu masak.
Secara umum, antara satu sampai dua bulan sebelum buah masak potensi jernang
yang terbentuk sangat optimal. Apabila buah yang dipetik sudah masak, maka
jernang yang terkandung dalam buah rotan terlah berkurang karena dapat mencair
dengan sendirinya dan membusuk (Matangaran, 2012).
Jernang cukup dikenal sebagai obat tradisional dan digunakan untuk
pengobatan haemostatik, antidiare, antiulcer, antimikroba, antivirus, antitumor,
antioksidan, dan antiinflamasi (Gupta, 2008). Kegunaan jernang di Indonesia
adalah sebagai bahan pewarna cat dan obat-obatan, misalnya mengobati luka
akibat gatal-gatal dan juga sebagai ramuan yang dioleskan di kening ibu-ibu yang
melaporkan bahwa ekstrak etanol dari jernang Daemonorops draco iniketika diuji
efek antiinflamasinya secara in vitro, menunjukkan hasil yang positif.
Inflamasi adalah suatu respon protektif yang ditujukan untuk
menghilangkan penyebab awal kerusakan sel serta membuang sel dan jaringan
nekrotik yang diakibatkan oleh kerusakan asal. Inflamasi melakukan tugas
pertahanannya dengan megencerkan, menghancurkan, atau menetralkan agen
berbahaya (misalnya, mikroba atau toksin). Tanda-tanda terjadinya inflamasi
adalah panas (kalor), merah (rubor), pembengkakan (tumor), nyeri (dolor) dan
hilangnya fungsi (functio laesa) akibat adanya perluasan mediator dan kerusakan
yang diperantarai leukosit (Robbins, dkk., 2007).
Salah satu obat untuk inflamasi adalah natrium diklofenak. Natrium
diklofenak merupakan obat golongan antiiflamasi nonsteroid (AINS). Obat
golongan ini dapat menimbulkan efek samping apabila dikonsumsi dalam jangka
panjang. Penggunaan obat ini dapat meningkatkan insiden terjadinya perdarahan
dan perforasi pada saluran pencernaan bagian atas (Christianie, dkk., 2008).
Oleh karena itu, peneliti tertarik untuk menguji efek antiinflamasi ekstrak
etanol kulit buah rotan terhadap tikus jantan yang diberikan secara oral, untuk
mengetahui pada dosis berapa ekstrak yang terbaik dan membandingkannya
1.2 Perumusan Masalah
Berdasarkan latar belakang di atas, maka perumusan masalah pada
penelitian ini adalah:
a. apakah ekstrak etanol kulit buah rotan memiliki efek sebagai antiinflamasi
terhadap radang buatan pada telapak kaki tikus yang diinduksi dengan
karagenan?
b. apakah ekstrak etanol kulit buah rotan memiliki efek antiinflamasi yang sama
dengan natrium diklofenak?
1.3 Hipotesis
Berdasarkan perumusan masalah di atas maka hipotesisnya adalah:
a. ekstrak etanol kulit buah rotan memiliki efek antiinflamasi terhadap radang
buatan pada telapak kaki tikus yang diinduksi dengan karagenan.
b. ekstrak etanol kulit buah rotan memiliki efek antiinflamasi yang sama dengan
natrium diklofenak.
1.4 Tujuan Penelitian
Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui:
a. efek antiinflamasi ekstrak etanol kulit buah rotan terhadap radang buatan pada
telapak kaki tikus yang diinduksi dengan karagenan.
1.5 Manfaat Penelitian
Hasil penelitian diharapkan memberikan informasi tentang kulit buah rotan
yang berkhasiat sebagai antiinflamasi, sehingga ke depan tanaman ini dapat
dikembangkan sebagai sediaan fitofarmaka dengan efek samping yang relatif kecil
dibanding obat antiinflamasi dari bahan kimia sintesis.
1.6 Kerangka Pikir Penelitian
Penelitian dilakukan terhadap tikus putih jantan. Varibel bebas terdiri dari
serbuk simplisia kulit buah rotan, CMC 0,5%, natrium diklofenak dosis 4,5 mg/kg
bb, serta ekstrak etanol kulit buah rotan dengan variasi dosis 100 mg/kg bb, 200
mg/kg bb, dan 400 mg/kg bb. Variabel terikat meliputi karakteristik simplisia,
skrining fitokimia simplisia dan ekstrak, serta volume telapak kaki tikus yang
terinduksi karagenan 1%. Terdapat beberapa parameter dalam penelitian ini yaitu
makroskopik, mikroskopik, kadar air, kadar sari larut air, kadar sari larut etanol,
kadar abu total, kadar abu tidak larut asam, alkaloid, flavonoid, tanin
triterpen/steroid, glikosida, serta untuk pengujian antiinflamasi parameternya
adalah persen radang rata-rata dan persen inhibisi radang rata-rata yang dapat
Adapun kerangka pikir penelitian ini:
Variabel bebas Variabel terikat Parameter
Gambar 1.1 Kerangka pikir penelitian Karakteristik tidak larut dalam asam
Ekstrak etanol kulit buah rotan dosis 100 mg/kg bb
Ekstrak etanol kulit buah rotan dosis 200 mg/kg bb
Ekstrak etanol kulit buah rotan dosis 400 mg/kg bb
CMC 0,5% (kontrol negatif)
Natrium diklofenak 4,5 mg/kg bb (kontrol positif)
BAB II
TINJAUAN PUSTAKA
2.1 Uraian Tumbuhan
Rotan merupakan hasil hutan bukan kayu (HHBK). Dari 530 jenis rotan di
dunia, sebanyak 316 jenis terdapat di hutan Indonesia. Di wilayah hutan Sumatera
terdapat 132 jenis, Jawa 29 jenis, Kalimantan 138 jenis, Sulawesi 86 jenis,
Maluku dan Papua 47 jenis. Rotan (Daemonorops sp) biasanya tumbuh dengan
membentuk rumpun, memanjat hingga ketinggian 30 meter tergantung. Batang
rotan penghasil jernang langsing, berdiameter 2 - 3 cm dipenuhi duri-duri kecil
dan tajam. Daun rotan berwarna hijau terdiri dari helaian anak daun yang tersusun
berpasang-pasangan, permukaan bawah daun sedikit cekung. Rotan penghasil
jernang mulai berbuah pada usia 2 tahun, akan tetapi baru menghasilkan getah
jernang setelah berumur 5 tahun. Buah rotan ini pada umumnya yaitu bulat
kecil-kecil berkumpul seperti buah salak (Kemenhut, 2013).
2.1.1 Sistematika tumbuhan
Sistematika tumbuhan rotan adalah sebagai berikut:
Super Divisi : Spermatophyta
Kelas : Monocotyledoneae
Ordo : Arecales
Famili : Arecaceae
Genus : Daemonorops
2.1.2 Nama lain
Getah dari buah rotan ini memiliki nama lain yaitu:
Nama daerah : Limbayung (Sumatera Barat), Jernang Kuku, Jernang Huar,
Jernang Seronang, Jernang Uhan (Kalimantan), Getih Badak
(Banten) dan Getih Warok (Jawa).
Nama asing : Dragon’s Blood, Kino, Red Benzoin, Sanguis Draconis, Sang
Ragon, atau Ostindisches Drachenblut(Kemenhut, 2013).
2.1.3 Sifat tumbuhan
Daemonorops draco menghasilkan getah jernang yang keras, berwarna
merah, berbentuk amorf, berat jenis berkisar antara 1,18-1,20, titik cair sekitar
120oC, meleleh bila dipanaskan dan mudah terbakar dengan mengeluarkan asap
dan bau yang khas (Waluyo, 2013).
2.1.4 Kandungan kimia tumbuhan
Komponen utama pada jernang adalah resin ester dan dracoresinotanol
(57-82%). Selain itu, resin berwarna merah dan juga mengandung
senyawa-senyawa seperti dracoresene (14%), dracoalban (hingga 2,5%), resin tak larut
(0,3%), residu (18,4%), asam benzoat, asam benzoilasetat, dracohodin, dan
beberapa pigmen terutama nordracorhodin dan nordracorubin (Waluyo, 2013).
2.1.5 Kegunaan tumbuhan
Jernang cukup dikenal sebagai obat tradisional dan digunakan untuk
pengobatan haemostatik, antidiare, antiulcer, antimikroba, antivirus, pengobatan
luka, antitumor, antiinflamasi dan antioksidan. Di samping sebagai pengobatan,
jernang ini juga dapat digunakan untuk bahan baku industri pewarna untuk
adalah sebagai bahan pewarna cat dan obat-obatan, misalnya mengobati luka
akibat gatal-gatal dan juga sebagai ramuan yang dioleskan di kening ibu-ibu yang
baru melewati proses persalinan (Yetty, dkk., 2013).
2.2 Simplisia dan Ekstrak
Simplisia adalah bahan alam yang telah dikeringkan dan digunakan
sebagai obat yang tinggi belum mengalami pengolahan apapun (Depkes, 1979).
Ekstrak merupakan sediaan yang dapat berupa kering, kental, dan cair,
dibuat dengan menyari simplisia nabati dan hewani menurut cara yang sesuai,
yaitu maserasi, perkolasi atau penyeduhan dengan air mendidih. Cairan penyari
yang digunakan adalah air, eter atau campuran etanol dan air. Penyarian dilakukan
diluar pengaruh cahaya matahari langsung. Pembuatan ekstrak dimaksudkan agar
zat berkhasiat yang terdapat di simplisia di dapat dalam bentuk yang mempunyai
kadar yang tinggi (Anief, 2000).
Ekstrak diperoleh dengan ekstraksi, yaitu penarikan zat yang diinginkan
dengan menggunakan pelarut yang sesuai. Metode ekstraksi dengan menggunakan
pelarut dapat dibagi ke dalam dua cara, yaitu:
a. Cara dingin
i. Maserasi, berasal dari bahasa Latin macerare, yang artinya
“merendam”. Merupakan proses perendaman simplisia dalam pelarut
yang sesuai sampai meresap dan melunakkan susunan sel, sehingga
zat-zat yang mudah larut akan melarut.Maserasi biasanya dilakukan pada
temperatur 15-20oC dalam waktu selama 3 hari (Ansel, 2005).
ii Perkolasi, berasal dari bahasa Latin per yang artinya “melalui” dan
ekstraksi dengan pelarut yang selalu baru sampai sempurna dan
umumnya dilakukan pada temperatur ruangan. Proses ini terdiri dari
tahapan pengembangan bahan, tahap maserasi, dan tahap perkolasi
sebenarnya (penetesan/penampungan ekstrak), terus menerus sampai
diperoleh ekstrak (perkolat) yang jumlahnya 1-5 kali bahan.
a. Cara Panas
i. Refluks adalah ektraksi dengan pelarut pada temperatur titik didihnya,
selama waktu tertentu dan jumlah pelarut terbatas yang relatif konstan
dengan adanya pendingin balik. Umunya dilakukan pengulangan proses
pada residu pertama sampai 3-5 kali sehingga dapat termasuk proses
ekstraksi sempurna.
ii. Sokletasi, adalah ekstraksi menggunakan pelarut yang selalu baru yang
umumnya dilakukan dengan alat khusus sehingga terjadi ekstraksi
kontinu dengan jumlah pelarut relatif konstan dengan adanya pendingin
balik.
iii. Digesti, adalah maserasi kinetik (dengan pengadukan kontinu) pada
temperatur yang lebih tinggi dari temperatur ruangan (kamar), yaitu
secara umum dilakukan pada temperatur 40-50oC.
iv. Infus, adalah ekstraksi dengan pelarut air pada temperatur penangas air
(bejana infus tercelup dalam penangas air mendidih, temperatur terukur
96-98oC) selama waktu tertentu (15-20 menit).
v. Dekok, adalah infus pada waktu yang lebih lama (≥30 oC) dan
2.3 Inflamasi (Radang)
Inflamasi adalah suatu respon protektif yang ditujukan untuk
menghilangkan penyebab awal kerusakan sel serta membuang sel dan jaringan
nekrotik yang disebabkan oleh kerusakan asal. Inflamasi terbagi menjadi dua pola
dasar, yaitu:
a. Inflamasi akut adalah inflamasi yang berlangsung relatif singkat, dari
beberapa menit sampai beberapa hari, dan ditandai dengan eksudasi cairan
dan protein plasma serta akumulasi leukosit neutrofilik yang menonjol.
b. Inflamasi kronik berlangsung lebih lama yaitu berhari-hari sampai
bertahun-tahun dan ditandai khas dengan influks limfosit dan makrofag
disertai dengan proliferasi pembuluh darah dan pembentukan jaringan
parut (Robbins, 2007).
2.3.1 Mediator inflamasi
Inflamasi dimulai saat sel mast berdegranulasi dan melepaskan
bahan-bahan kimianya seperti histamin, serotonin dan bahan-bahan kimia lainnya. Histamin
merupakan mediator kimia utama inflamasi, juga dilepaskan oleh basofil dan
trombosit. Akibat pelepasan histamin adalah terjadi vasodilatasi pembuluh darah
sehingga terjadi peningkatan aliran darah dan peningkatan permeabilitas kapiler
pada awal inflamasi (Corwin, 2008).
Lalu dilepaskan juga mediator lain yaitu faktor kemotaktik neutrofil dan
eusinofil oleh leukosit, yang dapat menarik sel-sel ke daerah cedera. Selain itu
dilepaskan prostaglandin yang dapat meningkatkan aliran darah ke tempat yang
mengalami inflamasi, meningkatkan permeabilitas kapiler dan merangsang
kapiler dan meningkatkan adhesi leukosit pada pembuluh kapiler selama cedera
(Corwin, 2008).
Berikut ini adalah mediator-mediator inflamasi beserta efeknya (Robbins, 2007) :
a. Vasodilatasi : prostaglandin dan nitrit oksida
b. Peningkatan permeabilitas vaskular : histamin, serotonin, bradikinin,
leukotrien C4, leukotrien D4, dan leukotrien E4
c. Kemotaksis, aktivasi leukosit : leukotrien B4, kemokin (misalnya:
interleukin 8 [IL-8])
d. Demam : IL-1, IL-6, prostaglandin, faktor nekrosis tumor (TNF)
e. Nyeri: prostaglandin dan bradikinin
f. Kerusakan jaringan: nitrit oksida, enzim lisosom neutrofil dan makrofag
2.3.2 Gejala-gejala terjadinya respon inflamasi
Gejala terjadinya inflamasi akut ada 5, yaitu kemerahan (rubor), panas
(kalor), nyeri (dolor), pembengkakan (tumor), dan perubahan fungsi (funtio laesa):
a. Kemerahan ( rubor)
Kemerahan, atau rubor, merupakan hal pertama yang terlihat di daerah
yang mengalami inflamasi akut. Waktu reaksi inflamasi mulai timbul maka arteri
yang mensuplai darah ke daerah tersebut berdilatasi, dengan demikian lebih
banyak darah mengalir ke dalam mikrosirkulasi lokal. Pembuluh-pembuluh darah
yang sebelumnya kosong atau sebagian saja meregang dengan cepat dan terisi
penuh oleh darah. Keadaan ini dinamakan hiperemia dan menyebabkan warna
merah lokal karena inflamasi akut. Timbulnya hiperemia pada permulaan reaksi
inflamasi diatur oleh tubuh melalui pengeluaran mediator, seperti histamin (Price
b. Panas (kalor)
Panas, atau kalor, terjadi bersamaan dengan kemerahan dari reaksi
inflamasi akut. Panas merupakan reaksi inflamasi yang khas karena terjadi pada
permukaan tubuh yakni kulit. Daerah inflamasi pada kulit menjadi lebih panas
dari daerah sekitarnya, sebab darah dengan suhu 37oC yang disalurkan tubuh ke
permukaan daerah yang terkena inflamasi lebih banyak disalurkan daripada ke
daerah normal (Price dan Wilson, 1995).
c. Rasa Nyeri (dolor)
Rasa nyeri, atau dolor, adalah reaksi inflamasi yang dapat dihasilkan
dengan berbagai cara. Perubahan pH lokal atau konsentrasi ion-ion tertentu dapat
merangsang ujung-ujung saraf, pengeluaran mediator tertentu, misalnya histamin
atau pembengkakan jaringan yang meinflamasi mengakibatkan peningkatan
tekanan lokal yang dapat menimbulkan rasa nyeri (Price dan Wilson, 1995).
d. Pembengkakan (tumor)
Gejala yang paling menyolok dari inflamasi akut adalah tumor atau
pembengkakan. Hal ini terjadi akibat adanya peningkatan permeabilitas dinding
kapiler serta pengiriman cairan dan sel-sel dari sirkulasi darah ke jaringan yang
cedera. Pada inflamasi, dinding kapiler tersebut menjadi lebih permeabel dan
lebih mudah dilalui oleh leukosit dan protein terutama albumin, yang diikuti oleh
molekul yang lebih besar sehingga plasma jaringan mengandung lebih banyak
protein daripada biasanya, yang kemudian meninggalkan kapiler dan masuk
kedalam jaringan sehingga menyebabkan jaringan menjadi bengkak (Price dan
Wilson, 1995).
e. Perubahan Fungsi (Fungsio Laesa)
Gangguan fungsi, atau functio laesa, merupakan konsekuensi dari suatu
proses inflamasi. Gerakan yang terjadi pada daerah inflamasi, baik yang dilakukan
secara sadar ataupun secara reflek akan mengalami hambatan oleh rasa sakit,
pembengkakan yang hebat secara fisik mengakibatkan berkurangnya gerak
jaringan (Price dan Wilson, 1995).
2.3.3 Mekanisme terjadinya inflamasi
Salah satu faktor penyebab terjadinya inflamasi adalah produk yang
dihasilkan dari metabolisme asam arakhidonat. Asam arakhidonat merupakan
suatu asam lemak tak jenuh ganda dengan 20 atom karbon. Asam arakhidonat
dilepaskan oleh fosfolipid melalui fosfolipase sel yang telah diaktifkan oleh
rangsang mekanik, kimiawi, atau fisik. Proses metabolisme asam arakhidonat
terjadi melalui dua jalur utama, yaitu siklooksigenase dengan menyintesis
prostaglandin juga tromboksan dan lipooksigenase yang menyintesis leukotrien
dan lipoksin.
Jalur utama metabolisme asam arakhidonat, yaitu:
a. Jalur siklooksigenase, produk yang dihasilkan oleh jalur ini adalah
prostaglandin E2 (PGE2), PGD2, prostasiklin (PGI2), dan tromboksan A2
(TXA2). TXA2 adalah pengagregasi trombosit dan vasokonstriktor,
merupakan produk utama prostaglandin dalam trombosit. PGI2 adalah
suatu vasodilator dan inhibitor agregasi trombosit. PGD2 merupakan
metabolit utama jalur siklooksigenase dalam sel mast, bersama dengan
PGE2 menyebabkan vasodilatasi dan meningkatkan pembentukan edema.
inflamasi, PGE2 membantu menigkatkan sensitivitas nyeri terhadap
berbagai rangsang dan berinteraksi dengan sitokin yang menyebabkan
demam.
b. Jalur lipooksigenase, merupakan enzim yang memetabolisme asam
arakhidonat yang menonjol dalam neutrofil. Enzim ini menghasilkan
leukotrien. Leukotrien pertama yang dihasilkan disebut leukotrien A4
(LTA4) yang selanjutnya akan menjadi LTB4 melalui hidrolisis enzimatik.
LTB4 merupakan agen kemotaksis dan menyebabkan agregasi neutrofil.
LTC4 dan metabolit berikutnya, LTD4 dan LTE4 menyebabkan
vasokonstriksi, bronkospasme, dan meningkatkan permeabilitas vaskular.
Kemudian lipoksin A4 (LXA4) yang menyebabkan vasodilatasi dan
menghambat kemotaksis neutrofil (Robbins, 2007).
Mekanisme terjadinya inflamasi dapat dilihat pada Gambar 2.1.
2.4 Obat Antiinflamasi
Obat antiinflamasi adalah golongan obat yang memiliki aktivitas menekan
atau mengurangi peradangan. Berdasarkan mekanisme kerjanya obat antiinflamasi
terbagi menjadi dua golongan. Golongan pertama adalah golongan obat
antiinflamasi steroid. Obat antiinflamasi yang kedua yaitu golongan obat
antiinflamasi nonsteroid (AINS)
2.4.1 Obat antiinflamasi golongan steroida
Obat antiinflamasi golongan steroida bekerja menghambat sintesis
prostaglandin dengan cara menghambat enzim fosfolipase, sehingga fosfolipid
yang berada pada membran sel tidak dapat diubah menjadi asam arakidonat.
Akibatnya prostaglandin tidak akan terbentuk dan efek inflamasi tidak ada.
Contoh obat antiinflamasi steroid adalah deksametason, betametason dan
hidrokortison (Tan, dan Rahardja, 2007).
2.4.2 Obat antiinflamasi golongan non steroida
Obat antiinflamasi golongan nonsteroida digunakan untuk pengobatan
nyeri, rheumatoid arthritis, osteoarthritis, dan lainnya. Semua obat antiinflamasi
nonsteroid mempunyai efek klinis yaitu dengan menghambat sintesis
prostaglandin. Prostaglandin menyebabkan terjadinya inflamasi. Prostaglandin
juga ikut mengatur temperatur tubuh, rasa nyeri, agregasi platelet dan efek lainnya.
Waktu paruhnya hanya hitungan menit. Jadi, ketika enzim pembuat prostaglandin
dihambat, maka tidak terjadi pengeluaran prostaglandin. Enzim pembuat
prostaglandin adalah siklooksigenase. Dua isoform siklooksigenase (COX) telah
lambung. COX-2 terdapat di otak dan ginjal, juga dapat menyebabkan inflamasi.
COX-1, terdapat di platelet (Stringer, 2001).
Obat antiinflamasi nonsteroid awal, memiliki cara kerja dengan
menghambat semua isoform COX. Kemudian, obat antiinflamasi nonsteroid yang
spesifik menghambat COX-2 mulai ada. Obat spesifik penghambat COX-2 dapat
mengobati inflamasi tanpa merusak saluran pencernaan dan mengubah fungsi
platelet. Contoh dari obat ini adalah rofecoxib dan celecoxib (Stringer, 2001).
Secara kimiawi, penggolongan obat antiinflamasi nonsteroida ini dibagi dalam
beberapa kelompok, yaitu (Tan, dan Rahardja, 2007) :
a. Salisilat: asetosal, benorilat dan diflunisal
b. Asetat: natrium diklofenak, indometasin dan sulindac
c. Propionat: ibuprofen, ketoprofen, flurbiprofen, naproksen, dan tiaprofenat
d. Oxicam: piroxicam, tenoxicam, dan meloxicam
e. Pirazolon: oksifenilbutazon, dan azapropazon
f. Lainnya: mefenaminat, nabumeton, benzidamin dan bufexamac
2.4.2.1 Natrium diklofenak
Rumus bangun natrium diklofenak dapat dilihat pada Gambar 2.2.
Rumus molekul : C14H10Cl2NNaO2
Nama kimia : asam benzeneasetat, 2-[(2,6-diklorofenil)amino]
monosodium
Berat molekul : 318,13
Pemerian : serbuk kristal putih atau sedikit kuning, agak higroskopis
Kelarutan : Sedikit larut dalam air, mudah larut dalam metanol, larut
dalam etanol (96 persen), dan sedikit larut dalan aseton
(British Pharmacopoeia, 2009).
Diklofenak adalah suatu turunan asam fenilasetat yang relatif tidak selektif
sebagai penghambat siklooksigenase. Obat ini memiliki waktu paruh singkat yaitu
1-3 jam. Efek samping yang lazim dari obat ini ialah, mual, gastritis, eritema kulit
dan sakit kepala. Pemakaian obat ini harus hati-hati terhadap pasien tukak
lambung. Pemakaian selama kehamilan tidak dianjurkan. Dosis orang dewasa
100-150 mg sehari terbagi dalam 2-3 dosis (Wilmana, 2009).
2.5 Karagenan
Iritan yang digunakan untuk pengujian efek inflamasi beragam jenisnya,
salah satunya adalah karagenan. Karagenan merupakan suatu polisakarida hasil
ekstrak rumput laut dari famili Euchema, Chondrus, dan Gigartina. Bentuknya
berupa serbuk berwarna putih hingga kuning kecoklatan, ada yang berbentuk
butiran kasar hingga serbuk halus, tidak berbau, serta memberi rasa berlendir di
lidah. Berdasarkan kandungan sulfat dan potensi pembentukan gelnya, karagenan
dapat menjadi tiga jenis, yaitu lamda karagenan, iota karagenan, dan kappa
Karagenan berperan dalam pembentukan udem pada model inflamasi akut.
Karagenan dipilih karena dapat melepaskan mediator inflamasi, yaitu
prostaglandin setelah disuntikkan ke hewan uji. Oleh karena itu, karagenan dapat
digunakan sebagai iritan dalam metode uji yang bertujuan untuk mencari
obat-obat antiinflamasi, tepatnya yang bekerja dengan menghambat sintesis
prostaglandin (Winter, 1961). Penggunaan karagenan sebagai penginduksi
memiliki beberapa keuntungan, antara lain: tidak meninggalkan bekas, tidak
menimbulkan kerusakan jaringan dan memberikan respon yng lebih peka terhadap
obat antiinflamasi dibanding senyawa iritan lainnya (Siswanto dan Nurulita, 2005).
2.6 Pengujian Efek Antiinflamasi Akut
Beberapa metode yang dapat digunakan untuk model inflamasi akut
(Suralkar, 2008), adalah:
a. Induksi Karagenan
Induksi udem dilakukan pada kaki hewan uji. Dalam hal ini disuntikkan
suspensi karagenan secara subplantar. Obat uji diberikan secara oral. Volume
udem kaki diukur dengan alat pletismometer. Aktivitas inflamasi obat uji
ditunjukkan oleh kemampuan obat uji mengurangi udem yang diinduksi pada
telapak kaki hewan uji.
b. Induksi Histamin
Metode yang digunakan hampir sama dengan metode induksi karagenan,
hanya saja penginduksi yang digunakan adalah larutan histamin 1%.
Metode ini bertujuan untuk mengevaluasi aktivitas inhibisi obat terhadap
peningkatan permeabilitas vaskular yang diinduksi oleh asam asetat secara
intraperitoneal. Sejumlah pewarna (Evan’s Blue 10%) disuntikkan secara
intravena. Aktivitas inhibisi obat uji terhadap peningkatan permeabilitas vaskular
ditunjukkan dengan kemampuan obat uji dalam mengurangi konsentrasi pewarna
yang menempel dalam ruang abdomen yang disuntikkan sesaat setelah induksi
asam asetat.
d. Induksi Xylene pada udem daun telinga
Hewan uji diberikan obat, kemudian diinduksi xylene dengan mikropipet
pada kedua permukaan daun telinga kanannya. Telinga kiri digunakan sebagai
kontrol. Terdapat dua parameter yang diukur dalam metode ini, yaitu ketebalan
dan bobot dari daun telinga hewan uji. Ketebalan daun telinga hewan uji yang
telah diinduksi diukur dengan menggunakan jangka sorong digital, lalu
dibandingkan dengan telinga kiri. Jika menggunakan parameter bobot daun
telinga, maka daun telinga hewan uji dipotong dan ditimbang. Kemudian
dibandingkan beratnya dengan telinga kiri.
e. Induksi Asam Arakhidonat pada udem daun telinga
Metode yang digunakan hampir sama dengan metode induksi xylene, hanya
saja penginduksi yang digunakan adalah asam arakhidonat yang diberikan secara
BAB III
METODE PENELITIAN
Penelitian ini menggunakan metode eksperimental dengan tahapan
penelitian yaitu identifikasi tumbuhan, pengumpulan dan pengolahan tumbuhan,
pembuatan simplisia, karakterisasi simplisia, pembuatan ekstrak secara perkolasi,
skrining fitokimia ekstrak dan pengujian efek antiinflamasi secara oral terhadap
tikus jantan menggunakan alat pletismometer air raksa. Data dianalisis dengan
menggunakan program SPSS.
3.1 Alat dan Bahan
3.1.1 Alat-alat
Alat-alat yang digunakan dalam penelitian adalah alat-alat gelas
laboratorium, alumunium foil, blender (Miyako), lemari pengering, mortir dan
stamfer, neraca analitik (Boeco), neraca hewan (GW-1500), oral sonde, penangas
air (Griffin), pletismometer air raksa, rotary evaporator (Heidolph WB-2000),
spuit, mikroskop, desikator, oven, tanur.
3.1.2 Bahan-bahan
Bahan-bahan yang digunakan dalam penelitian adalah kulit buah rotan
(Daemonorops draco (Willd.) Blume) serta bahan kimia berupa bahan kimia yang
digunakan, asam asetat anhidrat, asam klorida, asam sulfat pekat, besi (III) klorida,
etanol 96% (hasil destilasi), n-heksan, natrium diklofenak, isopropanol, karagenan,
karboksi metil seluluosa (CMC), kloroform, serbuk magnesium, timbal (II) asetat,
serbuk seng, pereaksi Meyer, pereaksi Bouchardat, pereaksi Dragendorff, metanol,
3.2 Penyiapan Sampel
Penyiapan sampel meliputi pengambilan bahan, identifikasi bahan dan
pembuatan simplisia.
3.2.1 Pengambilan bahan
Pengambilan bahan dilakukan secara purposif. Bahan diambil dari Desa
Onan Sau, Kecamatan Habinsaran, Kabupaten Toba Samosir, Provinsi Sumatera
Utara tanpa membandingkan dengan bahan yang sama dari daerah lain. Bahan
yang digunakan adalah kulit buah rotan (Daemonorops draco (Willd.) Blume)
3.2.2 Identifikasi bahan
Identifikasi bahan dilakukan di Herbarium Bogoriense Bidang Botani
Pusat Penelitian Biologi LIPI Bogor.
3.3.3 Pembuatan simplisia
Buah rotan yang telah dikumpulkan, dipisahkan dari daging buah dan
bijinya kemudian dikumpulkan kulitnya dan disebarkan diatas kertas perkamen
hingga airnya meresap lalu ditimbang sebagai berat basah. Kemudian, untuk
mencegah timbulnya jamur, selama pengeringan dikeringkan dalam lemari
pengering pada suhu 40°C - 50°C. Simplisia yang telah kering diblender menjadi
serbuk. Kemudian, serbuk dimasukkan kedalam wadah tertutup dan disimpan
pada suhu kamar
3.3 Pemeriksaan Karakteristik Simplisia
3.3.1 Pemeriksaan makroskopik
Pemeriksaan makroskopik dilakukan dengan mengamati bentuk luar dari
3.3.2 Pemeriksaan mikroskopik
Pemeriksaan mikroskopik dilakukan terhadap serbuk simplisia kulit buah
rotan. Serbuk simplisia ditaburkan diatas kaca objek yang telah ditetesi dengan
larutan kloralhidrat dan ditutup dengan kaca penutup, kemudian diamati di bawah
mikroskop.
3.3.3 Penetapan kadar air
a. Penjenuhan toluen
Toluen sebanyak 200 ml dimasukkan ke dalam labu alas bulat, lalu
ditambahkan 2 ml air suling, kemudian alat dipasang dan dilakukan destilasi
selama 2 jam. Destilasi dihentikan dan dibiarkan dingin selama ± 30 menit,
kemudian volume air dalam tabung penerima dibaca dengan ketelitian 0,05 ml.
b. Penetapan kadar air simplisia
Labu berisi toluen tersebut dimasukkan 5 g serbuk simplisia yang telah
ditimbang seksama, dipanaskan hati-hati selama 15 menit. Setelah toluen
mendidih, kecepatan toluen diatur 2 tetes per detik sampai sebagian besar air
terdestilasi, kemudian kecepatan destilasi dinaikkan sampai 4 tetes per detik.
Setelah semua air terdestilasi, bagian dalam pendingin dibilas dengan toluen.
Destilasi dilanjutkan selama 5 menit, tabung penerima dibiarkan mendingin pada
suhu kamar. Setelah air dan toluen memisah sempurna, volume air dibaca dengan
ketelitian 0,05 ml. Selisih kedua volume air yang dibaca sesuai dengan kadar air
yang terdapat dalam bahan yang diperiksa. Kadar air dihitung dalam persen
3.3.4 Penetapan kadar sari larut air
Sebanyak 5 g serbuk yang telah dikeringkan, dimaserasi selama 24 jam
dalam 100 ml air-kloroform (2,5 ml kloroform dilarutkan di dalam 1 L akuades)
dalam labu tersumbat sambil sesekali dikocok selama 6 jam pertama, kemudian
dibiarkan selama 18 jam, lalu disaring. Sejumlah 20 ml filtrat pertama diuapkan
sampai kering dalam cawan penguap berdasar rata yang telah dipanaskan dan
ditara. Sisa dipanaskan pada suhu 105°C sampai bobot tetap. Kadar dalam
persensari yang larut dalam air dihitung terhadap bahan yang telah dikeringkan
(Depkes, 1995).
3.3.5 Penetapan kadar sari larut etanol
Sebanyak 5 g serbuk yang telah dikeringkan, dimaserasi selama 24 jam
dalam 100 ml etanol 95% dalam labu tersumbat sambil sesekali dikocok selama 6
jam pertama, kemudian dibiarkan selama 18 jam. Kemudian disaring cepat untuk
menghindari penguapan etanol. Sejumlah 20 ml filtrat pertama diuapkan sampai
kering dalam cawan penguap berdasar rata yang telah dipanaskan dan ditara. Sisa
dipanaskan pada suhu 105°C sampai bobot tetap. Kadar dalam persen sari yang
larut dalam etanol 95% dihitung terhadap bahan yang telah dikeringkan (Depkes,
1995).
3.3.6 Penetapan kadar abu total
Sebanyak 2 g serbuk yang telah digerus dan ditimbang seksama
dimasukkan ke dalam krus porselin yang telah dipijar dan ditara, kemudian
diratakan. Krus porselin dipijar perlahan-lahan sampai arang habis, pemijaran
ditimbang sampai diperoleh bobot tetap. Kadar abu dihitung terhadap bahan yang
telah dikeringkan (WHO, 2011).
3.3.7 Penetapan kadar abu tidak larut dalam asam
Abu yang telah diperoleh dalam penetapan kadar abu dididihkan dalam 25
ml asam klorida encer selama 5 menit, bagian yang tidak larut asam dikumpulkan,
disaring melalui kertas saring dan dipijar sampai bobot tetap, kemudian
didinginkan dan ditimbang. Kadar abu yang tidak larut dalam asam dihitung
terhadap bahan yang dikeringkan (WHO, 2011).
3.3.8 Skrining fitokimia simplisia
a. Pemeriksaan alkaloida
Sebanyak 0,5 g serbuk simplisia ditimbang kemudian ditambahkan 1 ml
asam klorida 2 N dan 9 ml air suling, dipanaskan diatas penangas air selama 2
menit, didinginkan lalu disaring. Filtrat digunakan untuk percobaan berikut:
i. Diambil 3 tetes filtrat, lalu ditambahkan 2 tetes pereaksi Meyer
ii. Diambil 3 tetes filtrat, lalu ditambahkan 2 tetes pereaksi Bouchardat
iii. Diambil 3 tetes filtrat, lalu ditambahkan 2 tetes pereaksi Dragendorff
Alkaloida dianggap positif jika terjadi endapan paling sedikit dua dari tiga
percobaan diatas (Depkes, 1995).
b. Pemeriksaan flavonoida
Larutan Percobaan:
Sebanyak 0,5 g serbuk simplisia disari dengan 10 ml metanol lalu
direfluks selama 10 menit, disaring panas-panas melalui kertas saring, filtrat
dikocok hati-hati, didiamkan. Lapisan metanol diambil, diuapkan pada temperatur
40°C, sisa dilarutkan dalam 5 ml etil asetat, disaring.
Cara percobaan:
i. Sebanyak 1 ml larutan percobaan diuapkan hingga kering, sisanya dilarutkan
dalam 1-2 ml etanol 96%, ditambahkan 0,5 g serbuk seng dan 2 ml asam
klorida 2 N, didiamkan selama satu menit. Ditambahkan 10 ml asam klorida
pekat, jika dalam waktu 2-5 menit terjadi warna merah yang intensif
menunjukkan adanya flavonoida
ii. Sebanyak 1 ml larutan percobaan diuapkan hingga kering, sisanya dilarutkan
dalam 1 ml etanol 96%, ditambahkan 0,1 g magnesium dan 10 tetes asam
klorida pekat, terjadi warna merah jingga sampai merah ungu menunjukkan
adanya flavonoida (Depkes, 1995).
c. Pemeriksaan tanin
Sebanyak 0,5 g serbuk simplisia disari dengan 10 ml air suling, disaring
lalu filtratnya diencerkan dengan air suling sampai tidak berwarna. Diambil 2 ml
larutan lalu ditambahkan 1-2 tetes pereaksi besi (III) klorida. Terjadi warna biru
atau hijau kehitaman menunjukkan adanya tannin.
d. Pemeriksaan glikosida
Sebanyak 3 g serbuk simplisia disari dengan 30 ml campuran etanol
96%-air suling (7 : 3), lalu ditambahkan 10 ml HCl 2 N, direfluks selama 10 menit,
didinginkan dan disaring. Diambil 20 ml filtrat ditambahkan 25 ml air suling dan
25 ml timbal (II) asetat 0,4 M, dikocok, didiamkan selama 5 menit lalu disaring.
Filtrat disari sebanyak 3 kali, tiap kali dengan 20 ml campuran
anhidrat secukupnya, disaring dan diuapkan pada temperatur tidak lebih dari 50°C,
dilarutkan sisanya dengan 2 ml metanol, kemudian diambil 0,1 ml larutan
percobaan di masukkan kedalam tabung reaksi, diuapkan diatas penangas air.
Pada sisa ditambahkan 2 ml air dan 2 tetes pereaksi molish, ditambahkan hati-hati
2 ml asam sulfat pekat, terbentuk cincin warna ungu pada batas kedua cairan
menunjukkan adanya ikatan gula (Depkes, 1995).
e. Pemeriksaan saponin
Sebanyak 0,5 g serbuk simplisia dimasukkan kedalam tabung reaksi dan
ditambahkan 10 ml air suling panas, didinginkan kemudian dikocok kuat-kuat
selama 10 detik, timbul busa yang mantap tidak kurang dari 10 menit setinggi 1-
10 cm. ditambahkan 1 tetes larutan asam klorida 2N, bila buih tidak hilang
menunjukkan adanya saponin (Depkes, 1995).
f. Pemeriksaan steroida/triterpenoida
Sebanyak 1 g serbuk simplisia dimaserasi dengan 20 ml n-heksan selama
2 jam. Filtrat diuapkan dalam cawan penguap. Pada sisa ditambahkan 2 tetes asam
asetat anhidrat dan 1 tetes asam sulfat pekat. Timbul warna ungu atau merah
kemudian berubah menjadi biru hijau menunjukkan adanya steroida/triterpenoida
(Harborne, 1987).
3.4 Pembuatan Ekstrak Etanol Kulit Buah Rotan
Pembuatan ekstrak dilakukan secara perkolasi dengan menggunakan
pelarut etanol 96%. Caranya, basahi 400 gram simplisia dengan 200 ml pelarut
etanol 96%, masukkan ke dalam bejana tertutup sekurang-kurangnya 3 jam.
hati-hati, tuangi dengan pelarut etanol 96% sampai cairan mulai menetes dan
diatas simplisia masih terdapat pelarutnya, tutup perkolator, biarkan selama 24
jam. Biarkan cairan menetes dengan kecepatan 1 ml per menit, tambahkan
berulang-ulang pelarut etanol 96% secukupnya sehingga selalu terdapat selapis
pelarut secukupnya diatas simplisia. Kemudian perkolat dipekatkan. Pemekatan
dilakukan dengan alat rotary eveporator pada suhu 40oC sampai diperoleh ekstrak
kental (Depkes RI, 1979).
3.5 Skrining Fitokimia Ekstrak
g. Pemeriksaan alkaloida
Sebanyak 0,5 g ekstrak ditimbang kemudian ditambahkan 1 ml asam
klorida 2 N dan 9 ml air suling, dipanaskan diatas penangas air selama 2 menit,
didinginkan lalu disaring. Filtrat digunakan untuk percobaan berikut:
i. Diambil 3 tetes filtrat, lalu ditambahkan 2 tetes pereaksi Meyer
ii. Diambil 3 tetes filtrat, lalu ditambahkan 2 tetes pereaksi Bouchardat
iii. Diambil 3 tetes filtrat, lalu ditambahkan 2 tetes pereaksi Dragendorff
Alkaloida dianggap positif jika terjadi endapan paling sedikit dua dari tiga
percobaan diatas (Depkes, 1995).
h. Pemeriksaan flavonoida
Larutan Percobaan:
Sebanyak 0,5 g ekstrak disari dengan 10 ml metanol lalu direfluks selama
10 menit, disaring panas-panas melalui kertas saring, filtrat diencerkan dengan 10
didiamkan. Lapisan metanol diambil, diuapkan pada temperatur 40°C, sisa
dilarutkan dalam 5 ml etil asetat, disaring.
Cara percobaan:
i. Sebanyak 1 ml larutan percobaan diuapkan hingga kering, sisanya dilarutkan
dalam 1-2 ml etanol 96%, ditambahkan 0,5 g serbuk seng dan 2 ml asam
klorida 2 N, didiamkan selama satu menit. Ditambahkan 10 ml asam klorida
pekat, jika dalam waktu 2-5 menit terjadi warna merah yang intensif
menunjukkan adanya flavonoida
ii. Sebanyak 1 ml larutan percobaan diuapkan hingga kering, sisanya dilarutkan
dalam 1 ml etanol 96%, ditambahkan 0,1 g magnesium dan 10 tetes asam
klorida pekat, terjadi warna merah jingga sampai merah ungu menunjukkan
adanya flavonoida (Depkes, 1995).
i. Pemeriksaan tanin
Sebanyak 0,5 g ekstrak disari dengan 10 ml air suling, disaring lalu
filtratnya diencerkan dengan air suling sampai tidak berwarna. Diambil 2 ml
larutan lalu ditambahkan 1-2 tetes pereaksi besi (III) klorida. Terjadi warna biru
atau hijau kehitaman menunjukkan adanya tannin.
j. Pemeriksaan glikosida
Sebanyak 3 g ekstrak disari dengan 30 ml campuran etanol 96% - air
suling (7 : 3), lalu ditambahkan 10 ml HCl 2 N, direfluks selama 10 menit,
didinginkan dan disaring. Diambil 20 ml filtrat ditambahkan 25 ml air suling dan
25 ml timbal (II) asetat 0,4 M, dikocok, didiamkan selama 5 menit lalu disaring.
Filtrat disari sebanyak 3 kali, tiap kali dengan 20 ml campuran
anhidrat secukupnya, disaring dan diuapkan pada temperatur tidak lebih dari 50°C,
dilarutkan sisanya dengan 2 ml metanol, kemudian diambil 0,1 ml larutan
percobaan di masukkan kedalam tabung reaksi, diuapkan diatas penangas air.
Pada sisa ditambahkan 2 ml air dan 2 tetes pereaksi molish, ditambahkan hati-hati
2 ml asam sulfat pekat, terbentuk cincin warna ungu pada batas kedua cairan
menunjukkan adanya ikatan gula (Depkes, 1995).
k. Pemeriksaan saponin
Sebanyak 0,5 g ekstrak dimasukkan kedalam tabung reaksi dan
ditambahkan 10 ml air suling panas, didinginkan kemudian dikocok kuat-kuat
selama 10 detik, timbul busa yang mantap tidak kurang dari 10 menit setinggi 1-
10 cm. ditambahkan 1 tetes larutan asam klorida 2 N, bila buih tidak hilang
menunjukkan adanya saponin (Depkes, 1995).
l. Pemeriksaan steroida/triterpenoida
Sebanyak 1 g ekstrak dimaserasi dengan 20 ml n-heksan selama 2 jam.
Filtrat diuapkan dalam cawan penguap. Pada sisa ditambahkan 2 tetes asam asetat
anhidrat dan 1 tetes asam sulfat pekat. Timbul warna ungu atau merah kemudian
berubah menjadi biru hijau menunjukkan adanya steroida/triterpenoida (Harborne,
1987).
3.6 Penyiapan Bahan Uji, Kontrol dan Obat Pembanding
Ekstrak etanol kulit buah rotan dengan dosis 100, 200, 400 mg/kg bb
(bahan uji) dan natrium diklofenak 4,5 mg/kg bb (kontrol positif) dibuat dalam
bentuk suspensi CMC 0,5%. Dan sebagai kontrol negatif yang digunakan adalah
3.6.1 Pembuatan suspensi CMC 0,5%
Sebanyak 500 mg CMC ditaburkan merata ke dalam lumpang yang telah
berisi air suling panas sebanyak 35 ml. Didiamkan selama 15 menit hingga
diperoleh massa yang transparan, digerus hingga terbentuk gel kemudian
diencerkan dengan sedikit air, dimasukkan ke dalam labu ukur 100 ml, lalu
ditambahkan air suling sampai garis tanda.
3.6.2 Pembuatan suspensi natrium diklofenak dosis 4,5 mg/kg bb
Ditimbang sebanyak 4,5 mg serbuk natrium diklofenak kemudian digerus
dengan penambahan suspensi CMC 0,5% sampai homogen, dimasukkan ke dalam
labu ukur 10 ml, dicukupkan sampai garis tanda dengan suspensi CMC 0,5%.
2.6.3 Pembuatan suspensi ekstrak etanol kulit buah rotan dosis 100 mg/kg bb, 200 mg/kg bb, dan 400 mg/kg bb (konsentrasi 3%)
Ditimbang 750 mg ekstrak etanol kulit buah rotan, kemudian digerus
dengan penambahan suspensi CMC 0,5% sampai homogen, dimasukkan ke dalam
labu ukur 25 ml, dicukupkan sampai garis tanda dengan suspensi CMC 0,5%.
3.7 Penyiapan Induktor Radang (karagenan 1%)
Ditimbang sebanyak 100 mg karagenan, lalu dihomogenkan dengan
larutan NaCl 0,9%, kemudian dimasukkan ke dalam labu ukur 10 ml kemudian
dicukupkan dengan larutan NaCl 0,9% sampai garis tanda.
3.8 Penyiapan Hewan Percobaan
Hewan percobaan yang digunakan adalah tikus putih jantan sebanyak 25
Pemilihan tikus sebagai hewan uji berdasarkan sifatnya yang tenang, mudah
ditangani dan tidak terlalu fotofobik. Selain itu, ukuran telapak kaki tikus lebih
mudah diamati dan diukur volume kakinya. Tikus putih cenderung aktif pada
malam hari, sedangkan siang hari digunakan untuk istirahat dan tidur, sehingga
pada siang hari tikus putih lebih mudah ditangani. Sebelum pengujian, hewan
percobaan dipelihara pada kandang yang mempunyai ventilasi yang baik dan
selalu dijaga kebersihannya. Tikus yang sehat ditandai dengan adanya
peningkatan berat badan dan cenderung stabil dari hari ke hari.
3.9 Prosedur Pengujian Efek Antiinflamasi
Pengujian aktivitas antiinflamasi menggunakan metode Winter (1961).
Sebelum pengujian, tikus dipuasakan selama 18 jam dengan tetap diberi air
minum. Tikus dikelompokkan ke dalam 5 kelompok, yaitu kelompok kontrol
negatif (suspensi CMC 0,5%), kelompok bahan uji (tiga dosis suspensi ekstrak
etanol kulit buah rotan), dan kontrol positif (natrium diklofenak).
a. Pada hari pengujian, masing-masing hewan ditimbang dan diberi tanda pada
kaki kirinya, kemudian kaki kiri tikus dimasukkan ke dalam pletismometer
yang berisi cairan sampai cairan tersebut naik sampai garis batas pada kaki kiri
tikus.
b. Kemudian, catat angka pada skala pletismometer sebagai volume awal (Vo)
yaitu volume kaki sebelum diberi obat dan diinduksi dengan larutan karagenan.
c. Masing-masing tikus diberi suspensi bahan uji secara oral sesuai dengan
d. Lalu 60 menit kemudian, masing-masing telapak kaki tikus disuntik secara
subplantar dengan 0,05 ml larutan karagenan 1%.
e. Setelah 30 menit, dilakukan pengukuran dengan cara mencelupkan kaki kiri
tikus ke dalam pletismometer sampai cairan tersebut naik sampai garis batas
pada kaki kiri tikus.
f. Dicatat angka pada skala pletismometer. Perubahan volume cairan yang terjadi
dicatat sebagai volume telapak kaki tikus pada waktu tertentu (Vt).
Pengukuran dilakukan setiap 30 menit selama 360 menit. Volume radang adalah
selisih volume telapak kaki tikus setelah dan sebelum disuntikkan karagenan.
Pada waktu pengukuran, volume cairan harus sama setiap kali pengukuran, tanda
batas pada kaki tikus harus jelas, kaki tikus harus tercelup sampai batas yang
dibuat.
3.10 Penghitungan Persen Radang
Persen radang dapat dihitung dengan rumus di bawah ini (Mansjoer, 1997):
Persen radang =
Di mana:
Vt = Volume radang setelah waktu t
Vo = Volume awal kaki tikus
Persen inhibisi radang dihitung dengan rumus di bawah ini:
Persen inhibisi radang =
Di mana:
a = Persen radang rata-rata kelompok kontrol
b = Persen radang rata-rata kelompok perlakuan bahan uji atau obat pembanding Vt- Vo x 100
Vo
Kemudian data persen radang (%) pada masing-masing tikus pada tiap
kelompok perlakuan dianalisis secara statistik dengan uji Kruskal-Wallis untuk
melihat ada atau tidaknya perbedaan antara kelompok perlakuan. Lalu dilakukan
uji Mann-Whitney untuk melihat perbedaan nyata dari setiap perlakuan pada tiap
kelompok.
Bila hasil uji statistik Kruskal Wallis terdapat α < 0,05 menunjukkan
terdapat perbedaan yang signifikan antar kelompok perlakuan. Hal ini berarti
semua kelompok perlakuan memiliki perbedaan yang signifikan terhadap radang
pada telapak kaki tikus yang diinduksi karagenan.
Untuk melihat perbedaan yang nyata antar kelompok, dilakukan uji
statistik Mann Whitney dari menit ke-30 sampai menit ke-360. Apabila
signifikansi > 0,05 menunjukkan bahwa antar perlakuan tidak ada perbedaan yang
bermakna dan sebaliknya apabila signifikansi < 0,05 menunjukkan bahwa terdapat
BAB IV
HASIL DAN PEMBAHASAN
4.1 Hasil Identifikasi Tumbuhan
Hasil identifikasi tanaman dilakukan di Herbarium Bogoriense, Bidang
Botani, Pusat Penelitian Biologi-LIPI, menyebutkan bahwa tanaman yang
digunakan adalah tanaman rotan Daemonorops draco (Willd.) Blume. Hasil
identifikasi tanaman dapat dilihat pada Lampiran 2 halaman 49.
4.2 Hasil karakterisasi Bahan Tumbuhan dan Serbuk Simplisia 4.2.1 Pemeriksaan makroskopik
Hasil pemeriksaan makroskopik dari tumbuhan yaitu kulit buah rotan
berwarna coklat kemerahan dan permukaan kulit bersisik, bentuk kulit bulat
memanjang, panjang 2 - 3 cm, lebarnya 3 cm, dan ujung kulit meruncing.
4.2.2 Pemeriksaan mikroskopik
Hasil pemeriksaan mikroskopik dari serbuk simplisia kulit buah rotan
dijumpai adanya parenkim, sklerenkim, berkas pengangkut dengan penebalan
spiral dan sklereid. Pengamatan serbuk simplisia kulit buah rotan menggunakan
mikroskop dapat dilihat pada Lampiran 4 halaman 52.
4.2.3 Pemeriksaan karakteristik serbuk simplisia
Hasil pemeriksaan karakteristik serbuk simplisia kulit buah rotan diperoleh
kadar air sebesar 5,66%, kadar sari yang larut dalam air sebesar 5,14%, kadar sari
yang larut dalam etanol sebesar 3,62%, kadar abu total sebesar 5,70% dan kadar
abu yang tidak larut dalam asam sebesar 2,45%. Hasil pemeriksaan karakteristik
Tabel 4.1 Hasil pemeriksaan karakteristik serbuk simplisia.
Hasil penetapan kadar air serbuk simplisia kulit buah rotan menunjukkan
hasil yang lebih kecil dari 10%. Hal ini baik karena kelebihan air dalam simplisia
akan mendorong pertumbuhan mikroba dan jamur. Penetapan kadar sari larut air
untuk mengetahui kadar sari yang larut dalam air. Senyawa-senyawa yang dapat
larut dalam air adalah glikosida, gula, gom, protein, enzim, zat warna, dan asam
organik. Penetapan kadar sari larut etanol untuk mengetahui kadar sari yang larut
dalam pelarut polar. Senyawa-senyawa yang dapat larut dalam etanol adalah
glikosida, antrakinon, steroid terikat, klorofil, dan dalam jumlah sedikit yang larut
yaitu lemak dan saponin (Depkes, 1986). Penetapan kadar abu total untuk
mengetahui kadar zat anorganik yang terdapat pada simplisia, sedangkan
penetapan kadar abu tidak larut asam untuk mengetahui kadar zat anorganik yang
tidak larut dalam asam (Depkes, 1995).
4.3 Skrining fitokimia
Skrining fitokimia serbuk simplisia dan ekstrak etanol kulit buah rotan
dilakukan untuk mendapatkan informasi golongan senyawa metabolit sekunder
yang terdapat didalamnya. Adapun pemeriksaan yang dilakukan terhadap
simplisia dan ekstrak etanol kulit buah rotan adalah pemeriksaan golongan
senyawa alkaloid, flavonoid, glikosida, saponin, tanin, dan triterpenoid/steroid.
No Parameter Hasil (%)
1 Kadar air 5,66
2 Kadar sari larut dalam air 5,14
3 Kadar sari larut dalam etanol 3,62
4 Kadar abu total 5,70
