i
EFEK VITAMIN E TERHADAP JUMLAH SPERMATOZOA MENCIT YANG DIINDUKSI GENTAMISIN
LAPORAN PENELITIAN
Laporan penelitian ini ditulis sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar
SARJANA KEDOKTERAN
OLEH :
Nadisha Refira NIM : 1111103000043
PROGRAM STUDI PENDIDIKAN DOKTER FAKULTAS KEDOKTERAN DAN ILMU KESEHATAN
UNIVERSITAS ISLAM NEGERI SYARIF HIDAYATULLAH
v
KATA PENGANTAR Assalamualaikum wr. wb.
Puji syukur peneliti panjatkan kepada Allah SWT atas rahmat dan karunia-Nya
sehingga penelitian ini dapat diselesaikan tepat waktu. Salawat serta salam peneliti
sampaikan kepada Nabi Muhammad SAW beserta keluarga dan para sahabatnya.
Penelitian ini berjudul “Efek Vitamin E Terhadap Jumlah Spermatozoa Mencit yang Diinduksi Gentamisin.”
Peneliti ingin mengucapkan terima kasih kepada :
1. Prof. Dr. (hc). dr. M. K. Tadjudin, SpAnd. selaku Dekan Fakultas Kedokteran
dan Ilmu Kesehatan Universitas Islam Negeri Syarif Hidayatullah Jakarta.
2. dr. Witri Ardini, M.Gizi, SpGK. selaku Kepala Program Studi Pendidikan
Dokter FKIK UIN Syarif Hidayatullah Jakarta.
3. dr. Nouval Shahab, SpU, Ph.D, FICS, FACS. dan dr.Nurmila Sari, M.Kes.
selaku dosen pembimbing yang selalu membantu, memotivasi, dan mengayomi
peneliti sepanjang penelitian berlangsung.
4. dr. Ahmad Azwar, M.Biomed. dan Bapak Chris Adhyanto, M.Biomed, Ph.D.
selaku penguji sidang laporan penelitian ini.
5. dr. Flori Ratna Sari, Ph.D. selaku penanggung jawab modul riset PSPD 2011
yang selalu mengingatkan dan menyemangati peneliti untuk segera
menyelesaikan penelitian ini.
6. Ibu Suryani, S.Si. selaku laboran biologi yang selalu meluangkan waktu untuk
membimbing dan memberikan semangat kepada peneliti sepanjang penelitian
berlangsung.
7. Seluruh staf keamanan dan OB yang membantu peneliti selama penelitian
berlangsung, terutama pada hari libur.
8. Ayahanda Firman Rasyid, SE. dan ibunda Regia Septiana yang selalu
memberikan dukungan, baik secara moral dan material terhadap peneliti.
9. Adik-adik peneliti, yaitu Adzhana Aprilla, Adzhani Aprilla, dan Diandra Shafa
vi
10.Teman-teman kelompok peneliti, yaitu Herlina Rahmah dan Hania Asmarani
Rahmanita yang bersama-sama selalu berjuang untuk menyelesaikan penelitian
ini secara baik dan tepat waktu.
11.Teman-teman kost peneliti, Yofara Maulidia Muslihah, Tiara Putri Methas,
Madinatul Munawwaroh, Cut Neubi Getha, Leily Badria, Raeiza Olyvia, dan
Muflikha Mayazi yang selalu mendukung dan menyemangati peneliti untuk
menyelesaikan penelitian ini.
12.Avissa Mada Vashti, Hanindyo Riezky Beksono, dan Evan Pramudito Mulyadi
yang selalu memberi semangat dan membantu peneliti selama proses penelitian
berlangsung.
13.Teman-teman PSPD 2011 yang selalu membantu dan memberi semangat kepada
peneliti selama menjalani masa pendidikan preklinik.
14.Kakak-kakak dan Adik-adik PSPD 2010, 2012, dan 2013 yang selalu
mendukung peneliti.
15.Seluruh civitas akademika FKIK UIN Syarif Hidayatullah Jakarta yang tidak
dapat peneliti sebutkan satu per satu.
Peneliti mengharapkan adanya saran dan kritik yang membangun terhadap
penelitian ini. Semoga penelitian ini bermanfaat.
Ciputat, 9 September 2014
vii ABSTRAK
Nadisha Refira. Program Studi Pendidikan Dokter. Efek Vitamin E Terhadap Jumlah Spermatozoa Mencit yang Diinduksi Gentamisin. 2014
Vitamin E merupakan vitamin yang larut dalam lipid dan memiliki fungsi sebagai antioksidan untuk mencegah terjadinya peroksidasi lipid. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengetahui efek vitamin E terdapat jumlah spermatozoa mencit yang diinduksi gentamisin. Penelitian dilakukan menggunakan 15 mencit jantan strain DDY yang dibagi menjadi tiga kelompok, yaitu K1 (normal), K2 (induksi gentamisin 5 mg/kgBB/hari selama 10 hari), dan K3 (induksi gentamisin 5 mg/kgBB/hari selama 10 hari dan dilanjutkan dengan pemberian vitamin E 100 mg/kgBB/hari selama 14 hari). Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa gentamisin menurunkan jumlah sperma mencit secara bermakna (p <0,05) dan pemberian vitamin E pada mencit yang diinduksi gentamisin meningkatkan jumlah spermatozoa secara signifikan. Vitamin E meningkatkan jumlah spermatozoa mencit yang diinduksi gentamisin secara signifikan dan mungkin berguna untuk pengobatan infertilitas pada pria. Perlu dilakukan penelitian lanjutan untuk mengetahui mekanisme yang mendasarinya.
Kata Kunci : Vitamin E, antioksidan, infertilitas pria, spermatozoa, gentamisin.
ABSTRACT
Nadisha Refira. Medical Education Program. Effect of Vitamin E on The Number of Spermatozoa of Mice that had been Induced by Gentamicin. 2014
Vitamin E is a lipid-soluble vitamin that functions as an antioxidant to prevent lipid peroxidation. The aim of this study was to determine the effect of vitamin E on the number of spermatozoa of mice. Fifteen DDY strain male mice were used in this study. They were divided into three groups, K1 (normal), K2 (administration of 5 mg/kgBW/day gentamicin for 10 days), and K3 (administration of 5 mg/kgBW/day gentamicin for 10 days, followed by administration of vitamin E 100 mg/kgBW/day for 14 days). The results of this study demonstrated that gentamycin decreased the number of spermatozoa and vitamin E increased the number of gentamicin induced mice spermatozoa significantly (p<0.05). Vitamin E increases the number of gentamicin induced mice spermatozoa and it might be useful for the treatment of male infertility. Further study is required in order to elucidate the underlying mechanisms.
viii DAFTAR ISI
Halaman
LEMBAR PERNYATAAN KEASLIAN KARYA ... ii
LEMBAR PERSETUJUAN PEMBIMBING ... iii
PENGESAHAN PANITIA UJIAN ... iv
KATA PENGANTAR ... v
ABSTRAK ... vii
DAFTAR ISI ... viii
DAFTAR GAMBAR ... xi
DAFTAR TABEL ... xii
DAFTAR LAMPIRAN... xiii
BAB I PENDAHULUAN ... 1
1.1 Latar Belakang ... 1
1.2 Rumusan Masalah ... 2
1.3 Hipotesis ... 2
1.4 Tujuan Penelitian ... 2
1.5 Manfaat Penelitian ... 2
1.5.1 Untuk Peneliti ... 2
1.5.2 Untuk Institusi ... 3
1.5.3 Untuk Masyarakat... 3
BAB II ... 4
TINJAUAN PUSTAKA ... 4
2.1 Anatomi Sistem Reproduksi Pria ... 4
2.1.1 Testis ... 4
2.1.2 Sistem Duktus ... 5
2.1.3 Kelenjar Aksesorius ... 6
2.1.4 Skrotum ... 6
ix
2.2 Anatomi Sistem Reproduksi Mencit Jantan ... 8
2.3 Fisiologi Sistem Reproduksi Pria... 9
2.3.1 Spermatogenesis ... 9
2.3.2 Spermatozoa ... 10
2.3.3 Semen ... 11
2.4 Infertilitas ... 11
2.5 Vitamin E ... 12
2.6 Gentamisin ... 14
2.6.1 Efek Gentamisin terhadap Fertilitas ... 16
2.7 Kerangka Teori ... 16
2.8 Kerangka Konsep ... 17
2.9 Definisi Operasional ... 18
BAB III ... 19
METODE PENELITIAN... 19
3.1 Desain Penelitian ... 19
3.2 Waktu dan Tempat ... 19
3.2.2 Tempat Penelitian ... 19
3.3 Alat dan Bahan ... 19
3.3.1 Bahan Penelitian ... 19
3.3.2 Alat Penelitian ... 19
3.4 Besar Sampel ... 20
3.5 Identifikasi Variabel... 21
3.5.1 Variabel Bebas ... 21
3.5.2 Variabel Terikat ... 21
3.6 Alur Penelitian ... 21
3.7 Cara Kerja Penelitian ... 21
3.7.1 Pemilihan Vitamin E ... 21
3.7.2 Adaptasi Mencit ... 22
3.7.3 Tahap Intervensi ... 22
3.7.4 Analisa Jumlah Spermatozoa... 22
x
BAB IV... 24
HASIL DAN PEMBAHASAN ... 24
4.1 Hasil ... 24
4.2 Pembahasan... 27
BAB V ... 30
KESIMPULAN DAN SARAN ... 30
5.1 Kesimpulan ... 30
5.2 Saran ... 30
DAFTAR PUSTAKA ... 31
LAMPIRAN ... 34
xi
DAFTAR GAMBAR
[image:11.595.85.520.121.615.2]Halaman
Gambar 2.1 Potongan sagital sistem reproduksi pria ……….4
Gambar 2.2 Potongan sagital testis………..5
Gambar 2.3 Skrotum dan lapisannya………...7
Gambar 2.4 Potongan frontal penis……….8
Gambar 2.5 Proses spermatogenesis………...9
Gambar 2.6 Morfologi sperma………...10
Gambar 2.7 Mekanisme vitamin E dalam mengikat ROS………..12
Gambar 2.8 Mekanisme vitamin E dalam menetralisir ROS………..13
Gambar 2.9 Struktur formula gentamisin………13
xii
DAFTAR TABEL
[image:12.595.88.517.156.592.2]Halaman
Tabel 4.1 Jumlah Spermatozoa Mencit Normal………..22
Tabel 4.2 Jumlah Spermatozoa Mencit yang Diinduksi Gentamisin……….22
Tabel 4.3 Jumlah Spermatozoa Mencit yang Diinduksi Gentamisin
dan Vitamin E………..23
Tabel 4.4 Rerata Jumlah Sperma ………23
xiii
DAFTAR LAMPIRAN
Halaman
Lampiran 1 Surat keterangan sehat mencit ………...28
Lampiran 2 Surat izin peminjaman laboratorium biologi………...29
Lampiran 3 Surat izin peminjaman animal house………...30
Lampiran 4 Gambaran proses penelitian……….32
[image:13.595.85.519.125.591.2]1
PENDAHULUAN
1.1 Latar Belakang
Infertilitas didefinisikan sebagai ketidakmampuan memperoleh keturunan dalam
jangka waktu lebih dari 12 bulan pada pasangan suami istri yang telah rutin
melakukan hubungan seksual, minimal dua kali dalam seminggu, tanpa
menggunakan alat kontrasepsi.1 Penelitian Rakesh pada tahun 2009 mengatakan
bahwa 20% dari kasus infertilitas murni disebabkan oleh infertilitas pada pria,
sedangkan 30% hingga 40% kasus tambahan lainnya disebabkan oleh faktor
infertilitas pria dan wanita.2 Namun penelitian terbaru yang dilakukan oleh
Edmundh pada tahun 2012 melaporkan bahwa 50% kasus infertlitias disebabkan
oleh infertilitas pada pria.Hal ini membuktikan bahwa terdapat peningkatan jumlah
kasus infertilitas pada pria.3
Terdapat banyak faktor yang dapat menyebabkan terjadinya infertilitas pada
pria. Diantara sekian banyak faktor tersebut, stress oksidatif diketahui sebagai salah
satu penyebab yang dapat memengaruhi status fertilitas.2 Stress oksidatif dapat
disebabkan oleh terjadinya peningkatan Reactive Oxygen Species (ROS). Terjadinya
stress oksidatif dapat menyebabkan kerusakan selular. Stress oksidatif telah
dinyatakan sebagai penyebab mayor dari infertilitas pada pria. Hal ini dibuktikan
dengan hasil studi yang menunjukkan sebagian besar proporsi pria dengan
infertilitas mengalami peningkatan kadar ROS pada vesikula seminalis.4
Berdasarkan studi yang dilakukan oleh Zahedi (2012), gentamisin dikatakan dapat
meningkatkan kadar ROS sehingga menginduksi terjadinya status stress oksidatif
pada testis.5
Gentamisin merupakan antibiotik golongan aminoglikosida yang diproduksi
oleh Micromonospora Purpurae. Gentamisin umumnya digunakan untuk melawan infeksi bakteri Gram negatif. Gentamisin memang efektif dalam melawan infeksi,
namun hasil studi menyatakan bahwa gentamisin memiliki efek lain, yaitu dapat
menginduksi status stress oksidatif dengan meningkatkan pembentukan radikal
bebas dan peroksidasi lipid, serta menurunkan cadangan antioksidan. Hal ini
2
memengaruhi jumlah, motilitas, dan morfologi spermatozoa.6 Untuk menurunkan
status stress oksidatif dibutuhkan antioksidan. Salah satu zat yang memiliki efek
antioksidan adalah vitamin E.7
Vitamin E memiliki fungsi penting dalam melindungi tubuh dalam melawan
kerusakan akibat efek ROS. Substansi biologi aktif yang terdapat dalam vitamin E
diklasifikasikan menjadi dua, yaitu tocopherols dan tocotrienols.8
Meskipun penelitian mengenai efek antioksidan yang dimiliki oleh vitamin E
telah dilakukan, namun belum ada penelitian yang membahas tentang efek vitamin
E terhadap jumlah spermatozoa mencit yang diinduksi dengan gentamisin. Oleh
karena itu, kami melakukan penelitian mengenai efek vitamin E terhadap jumlah
spermatozoa mencit yang diinduksi dengan gentamisin.
1.2 Rumusan Masalah
Apakah vitamin E dapat meningkatkan jumlah spermatozoa mencit yang
diinduksi gentamisin?
1.3 Hipotesis
Vitamin E dapat meningkatkan jumlah spermatozoa mencit yang diinduksi
gentamisin.
1.4 Tujuan Penelitian
Mengetahui efek vitamin E terhadap jumlah spermatozoa mencit yang diinduksi
gentamisin.
1.5 Manfaat Penelitian 1.5.1 Untuk Peneliti
1.1.1.1Menambah wawasan dan pengetahuan mengenai efek vitamin E
terhadap jumlah spermatozoa mencit yang diinduksi gentamisin
1.1.1.2Sebagai salah satu syarat mendapatkan gelar sarjana kedokteran di
Fakultas Ilmu Kedokteran dan Kesehatan Universitas Islam Negeri
1.5.2 Untuk Institusi
Menambah referensi terkait penggunaan vitamin E sebagai terapi
alternatif dalam mengatasi infertilitas pada pria.
1.5.3 Untuk Masyarakat
Menjadi bahan acuan dalam pemilihan vitamin E sebagai terapi alternatif
4 BAB II
TINJAUAN PUSTAKA
2.1 Anatomi Sistem Reproduksi Pria
Organ reproduksi pria seperti yang dijelaskan pada gambar 2.1 terdiri
dari testis, sistem duktus (epididimis, duktus deferens, duktus ejakulatorius,
dan uretra), kelenjar seks aksesorius (vesikula seminalis, prostat, dan
kelenjar bulbouretra), dan struktur penunjang lainnya, yaitu skrotum dan
[image:17.595.109.518.173.615.2]penis.9
Gambar 2.1 Potongan Sagital Sistem Reproduksi Pria
Organ reproduksi pria terdiri atas testis, sistem
duktus, kelenjar seks aksesorius, dan struktur
penunjang lainnya.9
2.1.1 Testis
Testis merupakan kelenjar oval berpasangan yang terdapat di dalam
skrotum. Testis memiliki ukuran panjang sekitar 5 cm dan diameter
sekitar 2,5 cm. Sesuai yang ditampilkan pada gambar 2.2, testis dilapisi
oleh membran serosa yang dinamakan tunica vaginalis. Cairan serosa yang terdapat di dalam tunica vaginalis dinamakan hydrocele. Dibagian dalam tunica vaginalis terdapat jaringan ikat iregular yang dinamakan
membagi bagian dalam testis menjadi beberapa kompartemen internal
yang dinamakan lobulus. Setiap lobulus memiliki satu hingga tiga
tubulus seminiferus, dimana spermatozoa diproduksi.9
Tubulus seminiferus terdiri dari dua jenis sel, yaitu sel
spermatogenik dan sel sertoli. Sel spermatogenik memiliki fungsi
sebagai sel penghasil spermatozoa, sedangkan sel sertoli berfungsi
membantu proses spermatogenesis. Di ruang antara tubulus seminiferus
terdapat kumpulan sel yang disebut sel Leydig. Sel Leydig berfungsi
untuk menghasilkan hormon testosteron, umumnya androgen. Hormon
androgen berfungsi membantu perkembangan maskulin. Selain itu,
[image:18.595.109.523.150.592.2]hormon androgen juga berfungsi menghasilkan libido pada pria.10
Gambar 2.2 Potongan sagital testis
Testis memiliki septum sehingga
membentuk lobulus-lobulus yang
tersusun atas tubulus seminiferus.9
2.1.2 Sistem Duktus
Sistem duktus pada saluran reproduksi pria memiliki fungsi untuk
membawa sperma matur dari testis ke bagian eksterior tubuh. Sperma
yang terdapat pada testis akan disalurkan menuju duktus eferen, lalu
6
penyimpanan sperma. Setelah itu, spermatozoa akan disalurkan menuju
duktus deferen hingga akhirnya memasuki duktus ejakulatorius.
Spermatozoa dialirkan keluar tubuh melalui uretra dalam bentuk
semen.11
2.1.3 Kelenjar Aksesorius
Kelenjar aksesorius memiliki fungsi untuk menutrisi dan melindungi
sperma. Kelenjar aksesorius pada saluran reproduksi pria terdiri atas 3
kelenjar berikut : Vesikula seminalis
Vesikula seminalis merupakan kantong berkelok-kelok yang
berakhir ke dalam duktus ejakulatorius. Sekret yang dihasilkan
berkonsistensi kental dan mengandung basa. Sekret tersebut juga
kaya akan fruktosa yang mampu menutrisi dan melindungi
sperma.11 Kelenjar prostat
Prostat mensekresi cairan basa yang berfungsi untuk menetralisir
keadaan asam dalam vagina. Selain itu, cairan ini juga dapat
meningkatkan motilitas sperma yang akan mencapai kemampuan
optimal dalam pH 6,0 sampai 6,5.11 Kelenjar bulbouretral
Kelenjar ini dikenal juga dengan sebutan kelenjar Cowper.
Kelenjar ini berukuran kecil dan berbentuk menyerupai kacang
polong. Fungsi dari kelenjar bulbouretral adalah untuk
menghasilkan cairan basa yang mengandung mukus ke dalam
uretra penis untuk melumasi dan melindungi sperma.11
2.1.4 Skrotum
Kulit skrotum merupakan kulit yang berpigmen, tersusun atas lipid
dan kaya akan kelenjar keringat dan sebasea. Pada bagian dalam,
skrotum tersusun atas dua kompartemen yang dipisahkan oleh septum.
Pada gambar 2.3 dijelaskan bahwa pada lapisan subkutan skrotum dapat
diidentifikasi M.dartos. Selain itu, masing-masing testis dihubungkan
Skrotum berfungsi sebagai kantong penyangga testis. Selain itu,
skrotum juga berfungsi mengatur suhu testis. Terdapat beberapa
mekanisme untuk meregulasi suhu testis. Lokasi skrotum dan kontraksi
serat otot dapat meregulasi suhu dalam testis. Produksi sperma normal
memerlukan suhu 2°-3°C lebih rendah dari suhu inti tubuh. Pada
temperatur yang lebih rendah, M.cremaster dan M.dartos akan
berkontraksi. Kontraksi M.cremaster akan menyebabkan posisi testis
mendekat ke inti tubuh sehingga dapat menyerap panas tubuh, sedangkan
kontraksi M.dartos menyebabkan kulit skrotum berkerut hingga
[image:20.595.105.518.250.573.2]mengurangi pelepasan panas pada skrotum.9
Gambar 2.3 Skrotum dan lapisannya
Lapisan skrotum dari luar ke dalam tersusun atas kulit
dan lapisan subkutan. Lapisan subkutan tersusun atas M.
Dartos dan M. Cremaster.12
2.1.5 Penis
Penis memiliki uretra sebagai saluran ejakulasi semen dan eksresi
urin pada pria, hal ini dapat dilihat pada gambar 2.4. Penis memiliki
8
Gambar 2.4 Potongan frontal penis
Uretra pada penis memiliki fungsi sebagai saluran
ejakulasi semen dan eksresi urin pada pria.9
2.2 Anatomi Sistem Reproduksi Mencit Jantan
Saluran reproduksi mencit jantan, seperti yang dijelaskan pada gambar
2.10, terdiri atas sepasang testes dengan epididimis, vesikula seminalis,
prostat, kelenjar bulbouretra, kandung kemih, dan penis. Testes dapat terletak
di dalam abdomen atau skrotum, hal ini disebabkan oleh karena hewan
pengerat memiliki kanal ingunalis yang terbuka. Prostat pada mencit terbagi
Gambar 2.10 Saluran reproduksi mencit
Saluran reproduksi mencit jantan terdiri atas
testes, epididimis, veikula seminalis, prostat,
kelenjar bulbouretra, kandung kemih, dan penis.17
2.3 Fisiologi Sistem Reproduksi Pria 2.3.1 Spermatogenesis
Pada manusia, proses spermatogenesis berlangsung selama 65 – 75 hari. Proses spermatogenesis diawali dengan terbentuknya spermatogonia dengan
jumlah kromosom diploid (2n). Spermatogonia merupakan stem cell yang terdapat di membran basal tubulus seminiferus. Spermatogonia yang memasuki
blood-barrier testes akan mengawali proses spermatogenesis. Spermatogonia
berdiferensiasi menjadi spermatosit primer. Spermatosit primer memiliki jumlah
kromosom diploid (2n) dengan total jumlah 46 kromosom sama dengan
spermatogonia.9
Setelah itu, DNA dalam masing-masing kromosom spermatosit primer
bereplikasi secara meiosis. Pada proses meiosis I terbentuk spermatosit
sekunder. Setiap meiosis sekunder mengandung 23 kromosom dan bertipe
10
Gambar 2.5 Proses spermatogenesis
Spermatogenesis terjadi di tubulus seminiferus testis.
Spermatogenesis akan menghasilkan spermatid.9
2.3.2 Spermatozoa
Terdapat 300 sperma yang telah melewati proses spermatogenesis lengkap
setiap harinya. Sperma memiliki panjang 60 µm dan terdiri dari beberapa
struktur yang telah diadaptasi untuk melakukan penetrasi pada oosit sekunder.
Seperti yang dijelaskan pada gambar 2.5, bagian mayor dari sperma dibagi
menjadi dua, yaitu bagian kepala dan ekor. Pada bagian kepala dikandung
sebuah nukleus dengan 23 kromosom. Pada dua pertiga bagian nukleus dilapisi
dengan akrosom yang mengandung enzim hyaluronidase dan protease yang
memudahkan sperma untuk melakukan penetrasi pada oosit sekunder. Bagian
ekor dibagi menjadi empat bagian, yaitu neck, middle piece, principal piece, dan
Gambar 2.6 Morfologi sperma
Sperma terdiri dari dua bagian,
yaitu kepala dan ekor.9
2.3.3 Semen
Semen merupakan campuran dari sperma dan cairan seminal. Cairan seminal
merupakan cairan yang diseksresi oleh tubulus seminiferus, vesikula seminalis,
prostat, dan kelenjar bulbouretra. Volume semen yang disekresikan tiap sekali
ejakulasi pada umumnya sekitar 2,5 – 5 mL dengan jumlah sperma sekitar 50-150 juta per mL semen. Semen memiliki pH yang basa, yaitu sekitar 7,2 – 7,7. Konsistensi semen lengket dan kental, sedangkan penampakannya berwarna
putih susu.10
2.4 Infertilitas
Infertilitas didefinisikan sebagai ketidakmampuan memperoleh keturunan
dalam jangka waktu lebih dari 12 bulan pada pasangan suami istri yang telah
rutin melakukan hubungan seksual tanpa menggunakan alat kontrasepsi.9
Infertilitas pada pria dapat disebabkan oleh beberapa hal, antara lain gangguan
hormon, faktor genetik, faktor imunologi, faktor sistemik, dan faktor eksogen.
Salah satu faktor eksogen yang dapat menyebabkan infertilitas adalah stress
12
Terdapat 15% kasus infertilitas pada pasangan suami di dunia. Pada 30-40%
kasus infertilitas pada pasangan suami istri disebabkan oleh infertilitas pada pria
yang tidak diketahui penyebabnya atau bersifat idiopatik. Pada pasien pria
dengan infertilitas idiopatik, tidak terdapat riwayat masalah fertilitas dan
gangguan hormon. Selain itu, pemeriksaan fisik pada pasien tersebut
menunjukkan hasil yang normal. Namun, pada analisa semen akan didapatkan
penurunan jumlah sperma (oligozoospermia), penurunan motilitas sperma
(asthenozoospermia), dan morfologi sperma abnormal (teratozoospermia).14
Infertilitas pada pria yang bersifat idiopatik cenderung dikaitkan dengan status
stress oksidatif akibat peningkatan kadar ROS.15 Infertilitas pada pria lebih
sering terjadi dibandingkan dengan infertilitas pada wanita. Hal ini disebabkan
oleh sel germinal pria yang memiliki sensitivitas tinggi terhadap stress oksidatif.
Sel sperma secara rutin terpapar oleh ROS, hal ini disebabkan oleh sperma dapat
menghasilkan ROS melalui fosforilasi oksidatif yang terjadi pada mitokondria
sperma. Selain itu, sel sperma terdiri atas banyak polyunsaturated fat, sehingga menjadi target utama terjadinya peroksidasi lipid.16
2.5 Vitamin E
Vitamin E merupakan vitamin yang larut dalam lipid. Vitamin E memiliki dua
substansi biologis yang aktif, yaitu tocopherol dan tocotrienols. Vitamin E merupakan antioksidan terpenting yang dapat larut dalam lipid pada membran
sel. Vitamin E melindungi fosfolipid yang tak tersaturasi pada membran dari
degradasi oksidatif akibat Reactive Oxygen Species (ROS) dan radikal bebas lainnya. Pada gambar 2.7 dilampirkan mekanisme vitamin E, terutama α
Gambar 2.7 Mekanisme vitamin E dalam
mengikat ROS α-tocopherol pada vitamin
E berikatan dengan carbon- centered free
radical sehingga tidak terbentuk ROS.15
Efektivitas vitamin E dalam mengurangi peroksidasi lipid memang
jarang dan sulit dinilai. Namun, sebuah studi telah membuktikan bahwa pentana,
sebuah produksi minor dari peroksidari lipid polyunsaturated, berkurang pada nafas manusia yang diberi suplementasi vitamin E. Hal tersebut cukup menjadi
bukti bahwa vitamin E dapat mengurangi peroksidasi lipid polyunsaturated secara in vivo.13
Dapat dilihat pada gambar 2.8 bahwa pada awalnya terbentuk radikal
bebas dengan berupa carbon-centered free radical, kemudian radikal bebas tersebut berikatan dengan oksigen bebas sehingga membentuk ROS. ROS dapat
dinetralisir oleh lipid (polyunsaturated fat) menjadi Hydroperoxide. Vitamin E, terutama α-tocopherol dapat membantu lipid untuk menetralisir ROS, bahkan kemampuan α-tocopherol dalam menetralisir ROS lebih cepat dibandingkan dengan lipid.13 Vitamin E tentunya dapat mengurangi dan mencegah terjadinya
peroksidasi lipid pada membran sel. Berikut dilampirkan bagan yang
14
Gambar 2.8 Mekanisme vitamin E dalam menetralisir ROS.
Proses netralisasi ROS oleh vitamin E terdiri atas tiga tahap,
yaitu tahap inisiasi, propagasi, dan terminasi ROS via
antioksidan.16
2.6 Gentamisin
Gentamisin merupakan antibiotik golongan aminoglikosida. Gentamisin
merupakan antibiotik yang memiliki kemampuan baik dalam melawan bakteri
Gram negatif termasuk bakteri yang mengalami multi drug resistant. Gentamisin
diproduksi oleh fermentasi Micromonospura purpurae. Gambar 2.9 menjelaskan
Gambar 2.9 Struktur formula gentamisin
Gentamisin tersusun atas atom
C, R, dan H.17
Gentamisin dapat diberikan melalui berbagai rute, antara lain parenteral,
ophthalmic, dan topikal. Pemberian parenteral diberikan melalui intramuskular dan intravena. Dosis gentamisin untuk dewasa diawali dengan dosis inisiasi 2
mg/kgBB per hari, lalu ditingkatkan menjadi 3 mg/kgBB – 5 mg/kgBB per hari diberikan setiap 8 jam.9 Gentamisin injeksi diindikasikan untuk terapi infeksi
serius yang disebabkan oleh mikroorganisme antara lain, Pseudomonas aeruginosa, Proteus sp, Escherichia coli, Klebsiella-Enterobacter-Serratia, Citrobacter sp, dan Staphylococcus sp.10 Infeksi serius yang dapat disebabkan oleh mikroorganisme diatas antara lain, infeksi saluran kemih, pneumonia,
meningitis, endokarditis bakterial, dan sepsis.9
Gentamisin memang efektif sebagai terapi infeksi bakteri Gram negatif,
namun penggunaan gentamisin injeksi dalam jangka waktu panjang dapat
menimbulkan efek toksisitas dari gentamisin. Menurut studi sebelumnya,
seluruh antibiotik golongan aminoglikosida memang memiliki efek toksisitas.
Efek toksisitas yang ditimbulkan antara lain nefrotoksisitas, ototoksisitas, dan
16
2.6.1 Efek Gentamisin terhadap Fertilitas
Selain memiliki efek terapi, gentamisin juga memiliki efek samping terhadap
tubuh manusia. Diantara efek samping tersebut salah satunya mengenai fungsi
fertilitas pada manusia. Pada studi sebelumnya, gentamisin disinyalir dapat
meningkatkan status stress oksidatif terkait peningkatan kadar ROS dalam tubuh
manusia.6
Peningkatan kadar ROS dalam tubuh manusia dapat mengakibatkan
terjadinya peroksidasi lipid pada membran sel, termasuk membran sel sperma.
Selain itu, kadar ROS yang berlebih dapat menimbulkan keadaan stress
oksidatif. Stress oksidatif dapat merusak DNA mitokondria sehingga
menyebabkan menurunnya produksi ATP. Penurunan produksi ATP
menimbulkan efek negatif pada proses spermatogenesis sehingga menyebabkan
penurunan jumlah sperma dan abnormalitas pada morfologi sperma.2,4
2.7 Kerangka Teori
Vitamin E Gentamisin
α-tocopherol
Radical Oxygen Species Antioksidan
larut lipid
Stress oksidatif
Peroksidasi lipid membran sel sperma
2.8 Kerangka Konsep
Keterangan : : Variabel yang diteliti
:Variabel yang tidak diteliti
Induksi gentamisin 5 mg/kgBB (i.p)
Kualitas dan kuantitas sperma
vitamin E 100 mg/kgBB (i.p)
Menurun
Menetap
Meningkat Jumlah
Spermatozoa
Motilitas Spematozoa
Morfologi Spermatozoa
18
2.9 Definisi Operasional
No Variabel Definisi
Operasional
Alat ukur Hasil ukur Skala ukur
1. Vitamin E Vitamin yang bersifat larut lipid dan memiliki delapan senyawa antioksidan, terutama alpha tocopherol. Pemberian
vitamin E (+)
atau (-)
Kategorik
2. Spermatozoa Sel germinal pria yang telah matur
yang diproduksi oleh tubulus seminiferus. Memiliki morfologi yang terdiri atas
kepala dan ekor.
Hemosito-meter, mikroskop cahaya, dan counter. Jumlah sperma mencit dalam juta/mL Numerik
19
METODE PENELITIAN 3.1 Desain Penelitian
Desain yang digunakan pada penelitian ini adalah desain eksperimental
laboratorium.
3.2 Waktu dan Tempat 3.2.1 Waktu Penelitian
Penelitian dilakukan selama bulan April - Agustus 2014.
3.2.2 Tempat Penelitian
Penelitian dilakukan di Ruang Laboratorium Animal House dan
Laboratorium Biologi Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan UIN
Syarif Hidayatullah, jalan Kertamukti No. 05, Pisangan, Ciputat 15419,
Tangerang Selatan.
3.3 Alat dan Bahan
3.3.1 Bahan Penelitian
Bahan utama yang digunakan adalah vitamin E. Hewan yang akan
digunakan sebagai bahan percobaan adalah mencit jantan strain DDY yang memenuhi kriteria inklusi, yaitu berumur 4 – 6 minggu, berat badan 30 - 35 gram, dan dalam kondisi sehat. Mencit jantan strain
DDY diperoleh dari Departemen Patologi Institut Pertanian Bogor (IPB). Bahan kimia yang digunakan untuk menginduksi mencit agar
menjadi infertil adalah gentamisin. Bahan lain yang digunakan, yaitu
pakan mencit standar, NaCl 0,9%, alkohol 70%, larutan George, dan
larutan Giemsa.
3.3.2 Alat Penelitian
Alat-alat yang digunakan pada penelitian ini adalah timbangan untuk
mengukur berat badan mencit, object glass, cover glass, bilik hitung NI, pipet, klem, gunting, spuit 1 cc, mikroskop cahaya, kandang
20
3.4 Besar Sampel
Penentuan besar sampel pada penelitian ini menggunakan rumus IMead’s
resource equation formula, yaitu
Dengan keterangan sebagai berikut : E : Error component ( 10 – 20 )
N : Jumlah sampel dalam semua kelompok dikurangi 1 ( N – 1 ) B : Blocking component ( B = 0 )
T : Jumlah kelompok uji dikurang 1 ( T – 1 )
E = N - 0 - T ≥10 = (N-1) – (T-1)
≥10 = (N-1) – 2 ≥10 = N – 3
N≥ 13
E = N - 0 - T ≤20 = (N-1) – (T-1)
≤20 = (N-1) – 2 ≤20 = N – 3
N≤ 23
N = 13 – 23
Dibagi menjadi 3 kelompok dengan jumlah yang sama.
Didapatkan jumlah sampel terkecil tiap kelompok adalah 5
Dalam penelitian ini terdapat 3 kelompok sampel, antara lain :
Kelompok 1 (K1) : Kontrol mencit jantan strain DDY
Kelompok 2 (K2) : Mencit jantan strain DDY yang diinduksi gentamisin
dengan dosis 5 mg/kgBB i.p
Kelompok 3 (K3) : Mencit jantan strain DDY yang diinduksi gentamisin
dengan dosis 5 mg/kgBB i.p dan diberikan vitamin E dengan dosis 100
mg/kgBB i.p
3.5 Identifikasi Variabel 3.5.1 Variabel Bebas
Variabel bebas pada penelitian ini adalah vitamin E dengan dosis 100
mg/kgBB.
3.5.2 Variabel Terikat
Variabel terikat pada penelitian ini adalah jumlah spermatozoa mencit
jantan strain DDY.
3.6 Alur Penelitian
3.7 Cara Kerja Penelitian
3.7.1 Pemilihan Vitamin E
Bahan yang akan diuji pada penelitian ini adalah vitamin E dengan
22
3.7.2 Adaptasi Mencit
Dalam masa adaptasi yang berlangsung pada hari 0-7, mencit hanya
diberi pakan dan minuman mencit standar. Pemberian makanan dan
minuman disamakan untuk semua hewan sampel.
3.7.3 Tahap Intervensi
Mencit strain DDY sebagai hewan sampel berjumlah 15 dibagi menjadi tiga kelompok, yaitu kelompok I sebagai kontrol. Kelompok
I diberi perlakuan dengan pemberian pakan standar ad libitum. Kelompok II diberi perlakuan dengan pemberian pakan standar ad libitum dan induksi gentamisin dengan dosis 5 mg/kgBB/hari secara intraperitoneal selama 10 hari. Kelompok III diberi perlakuan dengan
pemberian pakan standar ad libitum, induksi gentamisin dengan dosis
5 mg/kgBB/hari secara intraperitoneal, dan vitamin E dengan dosis
100 mg/kgBB/hari secara intraperitoneal selama 14 hari. Setelah 14
hari tahap intervensi selesai, maka mencit akan diterminasi lalu
diambil vesikula seminalisnya untuk dilakukan analisa sperma.
3.7.4 Analisa Jumlah Spermatozoa
Potongan vesikula seminalis diletakkan di kaca arloji yang telah
diberikan cairan NaCl 0,9%. Vesikula seminalis akan diurut sehingga
cairan semen yang berada di dalamnya akan keluar dan bercampur
dengan cairan NaCl 0,9%. Setelah itu, cairan semen yang telah
bercampur dengan NaCl 0,9% diambil sebanyak 20 µL dengan
menggunakan mikropipet dan dicampurkan dengan larutan George
sebanyak 980 µL di dalam tube. Dengan demikian, didapatkan
pengenceran sebesar 50 kali. Setelah itu, dilakukan penghitungan
sperma dengan menggunakan bilik hitung NI. Penghitungan jumlah
sperma dilakukan dengan menggunakan rumus yang telah ditetapkan
WHO, yaitu :
3.7.4 Pengolahan Data
Pada penelitian ini, pengolahan data dilakukan dengan menggunakan
program SPSS 16.0 for Windows. Uji yang digunakan adalah uji parametrik One Way Anova karena data pada penelitian ini memiliki jenis variabel kategorik-numerik yang terdiri lebih dari dua kelompok
tidak berpasangan. Syarat yang harus dipenuhi untuk menggunakan
uji One Way Anova adalah varian data homogen dan distribusi data normal. Oleh sebab itu, hal yang pertama dilakukan adalah menilai
distribusi data dengan menggunakan uji Saphiro Wilk. Berdasarkan hasil uji statistik, data penelitian ini terdistribusi normal dengan nilai
p>0,05. Setelah itu dilakukan uji varian data dengan menggunakan uji Levene. Uji Levene menunjukkan bahwa varian data penelitian ini
tidak homogen nilai p<0,05, sehingga perlu dilakukan transformasi data. Setelah transformasi data dilakukan maka didapatkan data
dengan varian homogen.
Analisa data dilanjutkan dengan menggunakan uji One Way Anova. Hasil uji tersebut menunjukkan hasil penelitian ini bermakna dengan
nilai p<0,05. Setelah itu dilakukan uji Post Hoc untuk membandingkan hasi
l penelitian pada masing-masing kelompok uji. Hasil uji Post Hoc menunjukkan hasil penelitian pada setiap kelompok uji bermakna
24
BAB IV
HASIL DAN PEMBAHASAN
Dalam penelitian ini, peneliti menggunakan hewan coba berupa mencit jantan strain
DDY dengan kisaran berat badan 30 – 35 gram.
4.1 Hasil
Suspensi sperma yang telah dicampur larutan George dengan pengenceran
sebesar 50 kali kemudian diamati dalam bilik hitung NI dibawah mikroskop
cahaya dengan pembesaran 400 kali. Gambar 4.1 menunjukkan gambaran
[image:37.595.112.515.210.586.2]spermatozoa mencit dibawah mikroskop cahaya.
Gambar 4.1 Spermatozoa Mencit
Sumber : dokumentasi pribadi, diambil
Menggunakan kamera Samsung 5 MP
Dengan resolusi 72 dpi.
Berdasarkan hasil pengamatan jumlah spermatozoa mencit dibawah mikroskop
cahaya dengan menggunakan bilik hitung NI, maka didapatkan jumlah
Tabel 4.1 Jumlah Spermatozoa Mencit Normal
Tabel 4.2 Jumlah Spermatozoa Mencit dengan Induksi Gentamisin
He wan Sampel I II III IV V Jumlah Total Jumlah
Spermatozoa
1a 4 1 1 1 0 7 7,5 18,75 x 106
1b 3 2 1 1 1 8
2a 1 3 0 2 3 4 6 15 x 106
2b 0 2 1 3 0 8
3a 0 2 1 0 1 7 7 17,5 x 106
3b 2 2 1 3 0 7
4a 3 1 2 0 1 2 3 7,5 x 106
4b 0 3 2 2 0 4
5a 0 1 1 0 0 9 7,5 18,75 x 106
5b 2 0 0 1 1 6
Tabel 4.3 Jumlah Spermatozoa Mencit dengan Induksi Gentamisin dan Vitamin E
Hewan Sampel I II III IV V Jumlah Total Jumlah
Spermatozoa
1a 3 3 2 1 2 11 11,5 28,5 x 106
1b 2 4 2 2 2 12
2a 2 2 3 1 2 10 10,5 26,5 x 106
2b 0 1 3 4 0 11
3a 1 2 2 1 2 8 9 23, x 106
3b 2 3 4 1 0 10
4a 1 2 1 1 1 6 8 20 x 106
4b 2 2 4 1 1 10
5a 1 1 1 1 3 7 9,5 24 x 106
5b 2 4 4 1 1 12
Hewan Sampel I II III IV V Jumlah Total Jumlah
Spermatozoa
1a 1
1
5 4 6 3 29 29,5 73,75 x 106
1b 7 5 7 6 5 30
2a 2 7 4 5 4 22 23,5 58,75 x 106
2b 7 5 5 5 3 25
3a 3 6 7 4 5 25 23,5 58,75 x 106
3b 5 4 4 4 5 22
4a 2 4 4 3 3 19 19 47,5 x 106
4b 5 3 4 3 4 19
5a 4 7 5 4 4 24 22,5 56,25 x 106
26
Setelah mendapatkan hasil perhitungan jumlah spermatozoa pada
masing kelompok uji, maka dilakukan penghitungan rerata jumlah sperma pada
masing-masing kelompok uji. Rerata jumlah spermatozoa mencit pada masing-masing-masing-masing
[image:39.595.92.515.190.612.2]kelompok uji disajikan pada tabel 4.4 berikut
Tabel 4.4 Rerata Jumlah Sperma
Kelompok Uji N Rerata Jumlah Sperma
(Juta/mL)
X ± SD
K1 (Normal) 5 59 ± 9,4
K2 (Gentamisin) 5 15,5 ± 4,7
K3 (Gentamisin + Vitamin E) 5 24,5 ± 3,2
Berdasarkan tabel 4.1, dapat dilihat bahwa rerata jumlah sperma kelompok
mencit normal, yang hanya diberi pakan standar (K1) adalah 59 juta dengan standar
deviasi 9,4 juta. Pada kelompok mencit yang diinduksi gentamisin 5 mg/kgBB i.p
selama 10 hari (K2), rerata jumlah spermanya adalah 15,5 juta dengan standar
deviasi 4,7 juta. Sedangkan pada kelompok mencit yang diinduksi gentamisin 5
mg/kgBB i.p selama 10 hari dan diberi vitamin E 100 mg/kgBB i.p selama 14 hari
(K3), rerata jumlah spermanya adalah 24,5 juta dengan standar deviasi 3,2 juta.
Analisis data selanjutnya dilakukan dengan menggunakan program SPSS 16.00
for Windows. Dilakukan uji normalitas data menggunakan uji Saphiro Wilk. Hasil uji normalitas data menunjukkan hasil uji signifikan (p value > 0,05), maka dapat
disimpulkan bahwa data terdistribusi normal. Namun, uji varians data pun
menunjukkan hasil varians data yang tidak homogen (p value < 0,05 ), sehingga
dilakukan transformasi data dan dihasilkan varians data yang homogen dengan nilai
p = 0,193.
Selanjutnya dilakukan analisis data menggunakan oneway ANOVA. Hasil
analisis didapatkan p = 0,000, berarti dapat disimpulkan ada perbedaan jumlah sperma diantara ketiga kelompok perlakuan mencit. Analisis lebih lanjut
Tabel 4.5 Analisa Post Hoc
Kelompok Uji K1 K2 K3
K1 (Normal) - 0.000 0.000
K2 (Gentamisin) 0.000 - 0.026
K3 (Gentamisin + Vitamin E) 0.000 0.026 -
4.2 Pembahasan
Gentamisin merupakan antibiotik golongan aminoglikosida yang sering
dikonsumsi masyarakat. Berdasarkan hasil penelitian ini, terbukti bahwa
pemberian gentamisin dengan dosis 5 mg/kgBB/hari i.p selama 10 hari dapat
menyebabkan penurunan jumlah sperma pada mencit strain DDY. Terdapat
perbedaan bermakna antara jumlah sperma mencit yang diinduksi dengan
gentamisin dibandingkan dengan jumlah sperma mencit normal yang tidak
diinduksi dengan gentamisin.
Penurunan jumlah sperma mencit dapat disebabkan oleh peningkatan ROS
akibat induksi gentamisin. Berdasarkan penelitian yang dilakukan sebelumnya
terkait efek gentamisin terhadap kuantitas dan kualitas sperma, diketahui bahwa
gentamisin dapat meningkatkan peroksidasi lipid pada membran sel, sehingga
terjadi peningkatan kadar ROS. Kadar ROS yang tinggi dapat menimbulkan
stress oksidatif yang dapat memengaruhi proses spermatogenesis dengan
berbagai cara, antara lain merusak membran sel sperma dan apoptosis sel
sperma.19
Hasil penelitian ini sesuai dengan hasil studi yang dilakukan oleh Kilakarje
pada tahun 2008. Studi tersebut meneliti tentang efek protektif pemberian jahe
terhadap apoptosis sel testis tikus yang telah diinduksi oleh gentamisin.
Penelitian tersebut membuktikan bahwa pemberian gentamisin sebesar 50
mg/kgBB/hari secara intraperitoneal selama 30 hari mampu meningkatkan
apoptosis sel testis tikus sehingga dapat menyebabkan penurunan jumlah sperma
tikus. Berdasarkan hasil penelitian tersebut dapat dipahami bahwa penurunan
jumlah sperma tikus terjadi akibat meningkatnya apoptosis sel testis yang
28
tubulus seminiferus, tempat dimana terjadinya spermatogenesis, sehingga jika
terjadi peningkatan apoptosis pada sel testis maka akan menganggu proses
spermatogenesis yang dapat menyebabkan terjadinya penurunan jumlah sperma
tikus.19
Selain itu, pada tahun 2009 telah dilakukan penelitian oleh Khaki mengenai
efek pemberian antibiotik aminoglikosida gentamisin terhadap spermatogenesis
tikus Wistar. Hasil penelitian tersebut membuktikan bahwa pemberian gentamisin dengan dosis 5 mg/kgBB/hari selama 10 hari mampu menurunkan
berat testis, jumlah produksi sperma harian, dan berat vesikula seminalis tikus.
Hasil penelitian yang telah dilakukan oleh Khaki sesuai dengan hasil penelitian
ini. Pada penelitian tersebut, dijelaskan bahwa penurunan produksi sperma
harian disebabkan oleh rusaknya sel-sel tubulus seminiferus pada testis akibat
peningkatan kadar radikal bebas intra-testikular. Kadar radikal bebas yang telah
diukur pada penelitian tersebut, seperti antioxidant-superoxide dismutase,
catalase, dan glutathione peroxidase mengalami peningkatan yang signifikan.20
Vitamin E memiliki 2 substansi antioksidan, yaitu tocopherol dan tocotrienol.
Sifat vitamin E larut lipid berperan dalam melindungi membran fosfolipid yang
tidak jenuh pada membran sel dari degradasi oksidatif pada membran sel.
Berdasarkan hasil penelitian ini, terbukti bahwa jumlah sperma mencit yang
diinduksi gentamisin dan vitamin E (K3) lebih tinggi dibandingkan jumlah
sperma mencit yang hanya diinduksi gentamisin (K2). Hal tersebut
membuktikan bahwa vitamin E memberikan efek protektif pada membran sel
sperma terhadap kerusakan akibat kondisi stress oksidatif yang disebabkan oleh
peningkatan kadar ROS.21
Hasil penelitian ini sesuai dengan studi yang telah dilakukan oleh Amrit dan
Gurmail pada tahun 2008. Studi tersebut menjelaskan tentang efek pemberian
vitamin E terhadap motilitas, viabilitas, dan peroksidasi lipid pada sperma sapi
jantan yang mengalami stress oksidatif. Hasil studi tersebut menjelaskan bahwa
pemberian vitamin E dengan dosis 2 mM memiliki efek optimal dalam
meningkatkan motilitas dan viabilitas sperma serta mengurangi peroksidasi lipid
Dalam studi tersebut dijelaskan bahwa vitamin E merupakan komponen primer
pada sistem antioksidan yang dimiliki oleh spermatozoa. Vitamin E merupakan
pelindung mayor pada membran sperma terhadap ROS dan peroksidasi lipid.23
Vitamin E dapat dijadikan lini utama dalam melindungi membran sel sperma
dari kerusakan akibat ROS dan peroksidasi lipid. Hal ini disebabkan oleh
30 BAB V
KESIMPULAN DAN SARAN 5.1 Kesimpulan
Berdasarkan hasil penelitian, maka dapat disimpulkan bahwa vitamin E dapat
meningkatkan jumlah spermatozoa mencit yang diinduksi gentamisin secara
signifikan.
5.2 Saran
Diperlukan penelitian lanjutan yang antara lain bertujuan untuk :
Mengevaluasi kualitas sperma dengan parameter yang lebih beragam,
antara lain jumlah sperma, morfologi sperma, dan motilitas sperma. Mengetahui dosis optimal vitamin E yang memiliki efek protektif
terhadap penurunan kualitas dan kuantitas sperma.
Mengevaluasi kualitas dan kuantitas sperma secara in vivo, sehingga dapat dilakukan penilaian kualitas dan kuantitas sperma sebelum dan
setelah dilakukan induksi serta setelah pemberian vitamin E sehingga
tingkat kepercayaan dalam penelitian dapat meningkat.
Menemukan mekanisme yang mendasari efek vitamin E dalam
meningkatkan jumlah maupun kualitas spermatozoa.
Mengevaluasi keadaan stress oksidatif pada hewan coba dengan
DAFTAR PUSTAKA
1. Seno DH, Birowo P, Rasyid N, Taher A. Etiologies of male infertility in dr. Cipto
Mangunkusumo Hospital Jakarta. Indones J Obstes Gyneco 2011; 35(3). p. 5-8.
2. Makker K, Agarwal A, Sharma R. Oxidative stress and male infertility. Indian J
Med Res 2009. p. 129.
3. Sabanegh E, Agarwal A. Campbell-Walsh Urologi. 10th ed. Sabanegh E, Agarwal
A, editors. USA: Elsevier Saunders; 2012. p. 33-38.
4. Agarwal A, Said TM. Oxidative stress, DNA damage, and apoptosis in male
infertility. BJU International 2005. p. 95.
5. Zahedi A, Fathiazad F, Khaki A, Ahmadnejad B. Protective effect of ginger on
gentamisin-induced apoptosis in testis of rats. Advanced Pharmateutical Bulletin.
2012: p. 197-200.
6. Narayana K. An aminoglycoside antibiotic gentamicin induced oxidatives stress
reduces antioxidant reserve and impairs spermatogenesis in rats. J Toxicol Sci 2008;
p. 85-96.
7. Traber MG, Packer L. Vitamin E beyond antioxidant function. American J Clin Nutr
1995: p. 15015-15095.
8. Galagher ML. Krause’s food and nutrients therapy. 12th ed. USA: Elsevier Saunders; 2008. p. 67-71.
9. Tortora GJ. Principles of anatomy and physiology. 12th ed. USA: John Willey and
Son; 2009. p. 113-118.
10. Sherwood L. Human’s physiology from cells to system. 7th ed. Philadelphia : Cengange learning; 2010.
32
2004.
12. Alan W. Campbell walsh urology international edition. 10th ed. USA: Elsevier
Saunders; 2012.
13. Jungwirth A, Diemer T, Giwercman A, Kopa Z, Krausz C. Guidelines for the
investigation and treatment of male infertility. Eur Urol 2004; 46(5). p. 3-8.
14. Jungwirth A, Diemer T, Dohle GR, Giwercman A. Guidelines on male infertility. In
European association of urology 2012. p. 5-6.
15. Wen C, Joanne, Geffen, David. The role of vitamin E in the treatment of male
infertility. Nutrition bytes. 2006; 11(1. p. 45-48.
16. Almbro, Maria, Dowling, Dalmian K, Simmons, Leigh W. Effects of vitamin E and
beta-carotene on sperm competitiveness. Ecology letters. 2011; 10(11). p. 11-14.
17. Burton GW, Traber MG. Vitamin E antioxidant activity, biokinetics, and
bioavailability. Annual reviews nutrition. 1990: p. 357-382.
18. Cuerpo L. Gentamicin. J veterenarias drugs. 1994: p. 41-47.
19. Kilakarje. An aminoglycoside antibiotic gentamycin induces oxidative stress,
reduces antioxidant reserve and impairs spermatogenesis in rats. J Toxicol Sci 2008;
33(1). p. 58-67.
20. Khaki A, Ghaffari MN, Fathiazad F, Hossinchi J. Ultra structural study of
gentamicin and ofloxacin effect on testis tissue in rats: light and transmission
electron microscopy. Afr J Pharm Pharmaco. 2009; 3(4). p. 12-34.
21. Bansal, Amrit K, Bilaspuri, Gurmail S. Antioxidant effect of vitamin E on motility,
viability, and lipid peroxidation of cattle spermatozoa under oxidative stress. Animal
science papers and reports. Poland: Institute of genetics and animal breeding,
Department of animal reproduction, gynaecology and obstetrics 2009. p. 3-15.
semen quality and biochemical parameters of male rabbits. Animal Repr Sci 2003.
p. 76.
23. Horton, Moran, Rawn. Principles of biochemistry. 3rd ed. Upper saddle river:
34
LAMPIRAN
Lampiran 1
Lampiran 2
36
Lampiran 3
Lampiran 4
Gambar Proses Penelitian
Induksi Gentamisin 5 mg/kgBB/hari i.p
Pemberian vitamin E 100 mg/kgBB/hari i.p Adaptasi hewan sampel hari ke 0-7
38
Lampiran 5
Riwayat Penulis
Identitas
Nama : Nadisha Refira
Jenis kelamin : Perempuan
Tempat, Tanggal Lahir : Jakarta, 26 April 1993
Agama : Islam
Alamat : Jl. Tanah Merdeka no.16 RT 001/ RW 03, Ciracas
Jakarta Timur
Email : Nasha25des@gmail.com
Riwayat Pendidikan
1999 - 2005 : Sekolah Dasar Swasta Kartika IX-I
2005 - 2008 : Sekolah Menengah Pertama Negeri 103 Jakarta
2008 – 2011 : Sekolah Menengah Atas Negeri 39 Jakarta
