SKRIPSI
NENI HARTINAH DWITATI
PENGARUH DOSIS KOMBINASI EKSTRAK
ETANOL DAUN Annona squamosa Linn. dan
Persea americana Mill. TERHADAP KADAR
KOLESTEROL TOTAL
(Pada Tikus
Rattus novergicus
Hiperkolesterol yang
Diinduksi Pakan Aterogenik)
PROGRAM STUDI FARMASI
FAKULTAS ILMU KESEHATAN
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH MALANG
iii
iv
KATA PENGANTAR
Bismillahirrohmanirrohim
Assalamualaikum warohmatullahi wabaraokatuh
Puji syukur tercurahkan kepada Allah SWT, Tuhan semesta alam karena
berkat rahmat dan hidayahnya, penulis dapat menyelesaikan skripsi yang berjudul “Pengaruh Dosis Kombinasi Ekstrak Etanol Daun Annona Squamosa linn. dan Persea americana mill. Terhadap Profil Lipid (Pada Kadar Kolesterol
Total Tikus Rattus novergicus Hiperkolestremia)”.
Skripsi ini diajukan untuk memenuhi persyaratan dalam mencapai gelar
Sarjana Farmasi pada Program Studi Farmasi Fakultas Ilmu Kesehatan Universitas
Muhammadiyah Malang. Dalam penyusunan skripsi ini penulis tidak terlepas dari
peranan pembimbing dan bantuan dari seluruh pihak. Oleh karena itu, dengan
segala kerendahan hati, penulis ingin mengucapkan banyak terima kasih kepada:
1. Allah SWT, Tuhan semesta alam yang memberikan rahmat, nikmat dan
hidayahnya kepada umatnya, Rasulullah SAW, yang sudah menuntun kita
menuju jalan yang lurus.
2. Ibu Siti Rofida, S.Si., M.Farm., Apt., selaku Dosen Pembimbing I, dan bapak
Ahmad Shobrun Jamil, S.Si., MP selaku Dosen Pembimbing II disela
kesibukan beliau masih bisa meluangkan waktu untuk membimbing
danmemberi pengarahan dan dorongan moril sampai terselesaikannya skripsi
ini.
3. Ibu Uswatun Chasanah., Apt.,M.Kes. dan Ibu Engrid Juni Apt., S.Farm selaku
Dosen Penguji yang telah banyak memberikan saran dan masukan serta
motivasi demi kesempurnaan skripsi ini.
4. Bapak Yoyok Bekti Prasetyo, S.Kep., M.Kep., Sp.Kom. selaku Dekan Fakultas
Ilmu Kesehatan Universitas Muhammadiyah Malang yang telah memberikan
kesempatan penulis belajar di Fakultas Ilmu Kesehatan Universitas
Muhammadiyah Malang.
5. Ibu Nailis Syifa’, S.Farm.,M.Sc.,Apt. selaku Ketua Program Studi Farmasi
v
kesempatan penulis belajar di Program Studi Farmasi Universitas
Muhammadiyah Malang.
6. Ibu Sovia Aprina Basuki, M.Si., Apt. selaku Kepala Laboratorium Program
Studi Farmasi Universitas Muhammadiyah Malang yang telah membantu,
mengarahkan dan memberikan kemudahan sarana dan prasarana sehingga
skripsi ini dapat terselesaikan dengan baik.
7. Mbak Bunga selaku laboran yang telah banyak membantu serta memberikan
sarana dan prasarana sehingga penelitian skripsi ini dapat terselesaikan dengan
baik.
8. Staff dan Laboran Laboratorium Klinik Rumah Sakit Pendidikan Universitas
Muhammadiyah Malang yang telah berkenan membantu penelitian sehingga
skripsi ini terselesaikan dengan baik.
9. UPT. Materia Medika Batu yang telah membantu kelancaran penelitian sehingga skripsi ini dapat terselesaikan dengan baik.
10. Dian Ernawati., S.Farm., M.Farm., Apt. selaku dosen wali yang telah berkenan membimbing, berdiskusi serta memberikan masukan sampai terselesaikannya
skripsi ini.
11. Untuk semua para bapak dan ibu dosen Program Studi Farmasi Universitas
Muhammadiyah Malang, yang telah memberikan waktunya untuk
mengajarkan ilmu-ilmu yang sangat bermanfaat. Terutama Ibu Sendi Lia
Yunita, S.Farm.,Apt. yang telah bersusah payah membantu jalannya ujian
skripsi sehingga kami dapat melaksanakan ujian skripsi dengan baik.
12. Staf Tata Usaha Program Studi Farmasi Universitas Muhammadiyah Malang
terima kasih karena telah banyak membantu dalam hal administrasi.
13. Orang tua tercinta, Bapak Tamsi, S.Pd dan Ibu Sri Murwati S.Pd , yang tiada
hentinya memotivasi dalam segala hal, dengan sabar mendoakan untuk
kesuksesan putrinya. Terima kasih banyak atas didikan, kerja keras, dan kasih
sayangnya untuk membuat anak-anaknya bahagia serta mendapatkan ilmu
yang bermanfaat.
14. Saudara dan keluarga besar yang selalu menjadi alasan utama untuk terus
vi
15. Buat sahabat kelompok skripsi, Ratna Yulia, Kartika Puspa, dan Alfy Afifa
sebagai partner kerjasama yang mau saling membantu dan selalu kompak
menyelesaikan tiap tahapan penelitian ini.
16. Teman-teman angkatan 2012 yang tiada hentinya memberikan motivasi, dan
pecutan semangat untuk terus berjuang.
17. Teman-teman farmasi F yang selalu jadi penyemangat ketika penulis
mengalami kejenuhan mengerjakan skripsi, terimakasih atas kebaikan kalian.
18. Seluruh warga kantin dan jajanannya yang selalu dijadikan tempat favorit
penulis untuk mengerjakan skripsi.
19. Untuk semua pihak yang belum disebutkan namanya, penulis mohon maaf dan
terima kasih yang sebesar-besarnya. Semua keberhasilam ini tak luput dari
bantuan, doa yang telah kalian semua berikan
Jasa dari semua pihak yang telah membantu dalam penelitian ini, penulis tidak
mampu membalas dengan apapun. Semoga amal baik semua pihak mendapat
imbalan dari Allah SWT. Semoga skripsi ini dapat bermanfaat bagi pembaca dan
menambah ilmu pengetahuan. Penulis menyadari bahwa skripsi ini jauh dari
kesempurnaan, oleh karena itu penulis mengharapkan kritik dan sarannya demi
kesempurnaan skrispsi dan dapat digunakan untuk penelitian selanjutnya.
Malang, 01 Juni 2016
Peneliti,
vii
RINGKASAN
Dislipidemia merupakan penyebab penyakit jantung koroner dan stroke iskemik utama dimana terjadi peningkatan kadar kolesterol total >200 mg/dL, pengingkatan low-density lipoprotein (LDL) >100 mg/dL dan penurunan
high-density lipoprotein (HDL) ≤60 mg/dL. American Association of Clinical
Endocrinologist (AACE) mengusulkan resiko penyakit jantung dapat turun apabila kadar kolesterol total dibawah 200 mg/dL.
Upaya penurunan kadar kolesterol salah satunya yaitu dengan terapi farmakologis menggunakan obat antihiperlipidemia. Simvastatin merupakan drug of choice obat antihiperlipidemia golongan statin yang paling sering di gunakan karena paling poten dalam menurunkan LDL.
Penggunaan bahan tanaman sebagai penurun kolesterol pun sudah lama di lakukan oleh masyarakat sejak dulu. Saat ini, produk-produk bahan alam dalam bentuk multi compound lebih dipilih karena efektifitasnya dapat meningkat apabila bekerja secara potensiasi dalam bentuk kombinasi dibandingkan dengan pemberian ekstrak tunggal. Ekstrak etanol daun P. americana yang mengandung beberapa fitokonstituen diantaranya luteolin, rutin, kuersetin dan apigenin yang merupakan golongan senyawa flavonoid dapat bekerja sebagai antioksidan yang berperan
dalam pencegahan atherogenesis dengan menghambat pembentukan ox-LDL,
sedangkan ekstrak etanol A. squamosa yang mengandung acetogenin dapat berperan dalam menghabat uptake kolesterol di intestin dan mencegah interaksi antara reseptor CD36 dengan ox-LDL yang dapat mencetuskan sinyal pro-atherogenik. Ekstrak etanol daun P. americana dan A. squamosa dengan berbagai fitokonstituennya dapat bekerja sinergis sehingga efektifitas penurunan kadar kolesterol total dapat meningkat.
Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui pengaruh pemberian dosis kombinasi ekstrak etnol daun P. americana dan A. squamosa terhadap penurunan kadar kolesterol total tikus putih jantan Rattus norvegicus hiperkolestremia serta memperoleh dosis optimum kombinasi ekstrak yang dapat menurunkan kadar kolesterol total pada R. Norvegicus hiperkolestremia.
Dalam penelitian ini digunakan metode posttest only control group design, dimana tiap kelompok perlakuan mendapatkan dosis P. americana : A. squamosa masing-masing 125 mg/KgBB : 125 mg/KgBB (P1) ; 125 mg/KgBB : 250 mg/KgBB (P2) ; 250mg/KgBB : 125 mg/KgBB (P3) selama 21 hari ; sedangkan kelompok kontrol positif mendapatkan simvastatin 0,018 mg/200gBB selama 21 hari ; kelompok kontrol negatif mendapatkan larutan pembawa CMC-Na 0,5% selama 21 hari ; kelompok hewan sehat diberi minum dan pakan standar ad libitum selama masa penelitian.
Hasil analisis statistik menggunakan one way anova menunjukkan adanya penurunan kadar kolesterol total pada tikus putih R. Norvegicus, namun tidak signifikan secara statistik. P=0,062 (P>0,05). Sedangkan hasil skrining fitokimia pada ekstrak etanol daun P. americana dan A. squamosa menunjukkan adanya senyawa golongan flavonoid, saponin triterpenoid, antrakuinon dan alkaloid.
viii
DAFTAR ISI
Halaman
KATA PENGANTAR ... iv
RINGKASAN ... vii
ABSTRAK ... viii
ABSTRACT ... ix
DAFTAR ISI ... x
DAFTAR TABEL ... xiii
DAFTAR GAMBAR ... xiv
DAFTAR LAMPIRAN ... xv
DAFTAR SINGKATAN ... xvi
DAFTAR PUSTAKA ... 67
BAB I PENDAHULUAN ... 1
DAFTAR ISI BAB I PENDAHULUAN ... 1
1.1 Latar Belakang Masalah ... 1
1.2 Rumusan Masalah ... 3
1.3 Tujuan Penelitian ... 4
1.3.1 Tujuan Umum ... 4
1.3.2 Tujuan Khusus ... 4
1.4 Manfaat ... 4
1.4.1 Manfaat akademik ... 4
1.4.2 Manfaat praktis ... 4
1.4.3 Manfaat masyarakat ... 4
1.4.4 Manfaat jangka panjang ... 4
BAB II TINJAUAN PUSTAKA ... 5
2.1.Tinjauan Tentang Tanaman ... 5
2.1.1 Tinjauan tentang Persea americana ... 5
2.1.2 Tinjauan Tentang Annona squamosa ... 9
2.2 Tinjauan Tentang Ekstraksi ... 13
ix
2.2.2 Perkolasi ... 16
2.2.3 Soxhletasi ... 16
2.3.Tinjauan Tentang Lipid ... 16
2.4.Tinjauan tentang Biosintesis Kolesterol ... 17
2.5.Tinjauan Tentang Lipoprotein ... 19
2.6.Tinjauan Tentang Jalur Metabolisme Lipoprotein ... 22
2.7.Tinjauan Tentang Hiperkolestremia ... 23
2.8.Tinjauan Tentang Metode Pengukuran Kadar Kolesterol ... 24
2.9.Tinjauan Tentang Hewan Coba Rattus norvegicus ... 26
2.10 Aklimatisasi Hewan Coba... 27
BAB III KERANGKA KONSEPTUAL ... 29
3.1 Kerangka Konsep ... 29
3.2 Uraian Kerangka Konsep ... 30
BAB IV METODOLOGI PENELITIAN ... 33
4.1 Jenis Penelitian ... 33
4.2 Tempat dan Waktu Penelitian ... 33
4.2.1 Ekstraksi Tanaman ... 33
4.2.2 Pengujian aktivitas ... 33
4.3Populasi Sampel ... 33
4.3.1 Populasi ... 33
4.3.2 Sampel dan Besar Sampel ... 33
4.4 Alat dan Bahan ... 34
4.4.1 Alat ... 34
4.4.2 Bahan ... 34
4.5 Pengumpulan Data ... 35
4.5.1 Ekstraksi ... 35
1. Ekstraksi daun A. squamosa ... 35
2. Ekstraksi daun P. americana ... 36
4.5.2 Persiapan Hewan Coba ... 37
4.5.3 Persiapan Bahan Uji ... 38
4.5.4 Penetapan Dosis Simvastatatin ... 38
x
A. squamosa ... 38
4.6.Prosedur kerja ... 40
4.7 Pengukuran kadar kolesterol Total ... 40
4.8Analisis Data ... 41
4.9Alur Penelitian ... 42
BAB V HASIL PENELITIAN ... 44
5.1 Pembuatan Simplisia Kering Daun P. americana dan A. squamosa .. 44
5.2 Hasil Pembuatan Ekstrak ... 44
5.2.1 Hasil Pembuatan Ekstrak Etanol daun P. americana ... 44
5.2.2 Hasil Pembuatan Ekstrak Etanol Daun A. squamosa ... 45
5.3 Penetapan Komposisi Eluen ... 46
5.4 Hasil Skrining Fitokonstituen Ekstrak Etanol Daun P. americana dan A. squamosa ... ... 47
5.4.1 Identifikasi Senyawa Golongan Flavonoid ... 48
5.4.2 Indentifikasi Senyawa Golongan Triterpenoid ... 49
5.4.3 Indentifikasi Senyawa Golongan Antrakuinon ... 50
5.4.4 Indentifikasi Senyawa Golongan Alkaloid ... 51
5.5 Hasil Penimbangan Sisa Pakan Atherogenik Pada Hewan Coba ... 52
5.6 Pengambilan Sampel Darah ... 54
5.7 Pengaruh Pemberian Dosis Kombinasi Ekstrak Terhadap Penurunan Kadar Kolesterol Total ... 54
5.8 Hasil Analisis Statistik ... 56
BAB VI PEMBAHASAN ... 57
BAB VII KESIMPULAN DAN SARAN ... 66
xi
DAFTAR TABEL
Tabel
Halaman
II.1 Jumlah komponen fitokimia yang terkandung dalam ogan daun,
buah dan biji P. americana ... 8
II.2 Fitokonstituen daun srikaya ... 12
II.3 Indeks polaritas pelarut untuk ekstraksi ... 14
II.4 Tipe lipoprotein pada plasma normal ... 19
II.5 Klasifikasi kadar kolesterol pada orang dewasa menurut American Heart Association (AHA) ... 24
II.6 Parameter normal tikus dewasa ... 26
IV.1 Alat ... 34
IV.2 Bahan ... 34
IV.3 Perhitungan dosis kombinasi ekstrak P. americana dan A. Squamosa ... 39
V.1 Hasil pembuatan ekstrak etanol daun P. americana dan A. squamosa 45 V.2 Hasil skrining fitokimia ekstrak daun P. americana dan A. squamosa 48 V.3 Profil rata-rata dan SD berat badan hewan coba sebelum dan Sesudah induksi pakan aterogenik dan perlakuan ... 53
xii
DAFTAR GAMBAR
Gambar Halaman
2.1 Daun Persea americana Mill. ... 5
2.2 Daun Annona squamosa ... 10
2.3 Garis besar jalur biosintesis kolesterol ... 18
2.4 Mekanisme yang mendasari pengaruh penyakit kardiovaskuler ... 21
2.5 Jalur eksogen dan endogen metabolisme lipid ... 22
2.6 Mekanisme reaksi metode pengukuran kadar kolesterol ... 25
3.1 Kerangka konseptual ... 29
4.1 Bagan ekstraksi daun Annona squamosa... 36
4.2 Bagan ekstraksi daun Persea americana ... 37
4.3 Persamaan persen rendemen ekstrak ... 37
4.4 Persamaan perhitungan dosis simvastatin ... 38
4.5 Bagan alur penelitian ... 42
5.1 Ekstrak kental daun P. americana ... 46
5.2 Ekstrak kental daun A. squamosa ... 46
5.3 Pola pemisahan noda ekstkrak daun A. squamosa ... 47
5.4 Pola pemisahan noda ekstkrak daun P. americana ... 47
5.5 Noda pada uji senyawa golongan flavonoid daun P. americana ... 48
5.6 Noda pada uji senyawa golongan flavonoid daun A. squamosa... 49
5.7 Noda pada uji senyawa golongan triterpenoid daun P. americana . 49 5.8 Noda pada uji senyawa golongan triterpenoid daun A. squamosa .. 50
5.9 Noda pada uji senyawa golongan antrakuinon daun P. americana . 51 5.10 Noda pada uji senyawa golongan antrakuinon daun A. squamosa .. 51
5.11 Hasil reaksi pengendapan ekstrak P. americana ... 52
5.12 Hasil reaksi pengendapan ekstrak A. squamosa ... 52
5.13 Grafik berat badan hewan coba ... 53
5.14 Proses pengambilan sampel darah ... 54
xiii
LAMPIRAN
Lampiran Halaman
1. Daftar riwayat hidup ... 71
2. Surat pernyataan ... 72
3. Lampiran surat determinasi tanaman Alpukat ... 73
4. Lampiran surat determinasi tanaman Srikaya ... 74
5. Perhitungan dosis ... 75
6. Data sisa pakan atherogenik ... 78
7. Data berat badan hewan coba ... 79
8. Hasil pengukuran kadar kolesterol total ... 80
9. Hasil pengolahan data SPSS 18.0 uji One Way Anova ... 81
xiv
DAFTAR SINGKATAN
AACE : Americam Association of Clinical Endocrinologist
AAP : 4-aminoantipyrin
ABTS : 2,2-azinobia-(3-ethylbenzothiazoline-6-sulphate)
ACAT : acyl-CoA cholesterol acyltransferase
AHA : American Heart Association
ALB : Asam Lemak Bebas
APO : Apolipoprotein
AS : Annona squamosa
BPOM : Balai Pengawasan Obat dan Makanan
CE : Cholesteryl ester
Ch : Cholesterol
CHOD : Cholesterol oxidation
CPPSEA : Control and Supervision of Experiments on Animal
DPPH : diphenyl, 2-picryl hydrazil
EC : Endothelial Cell
FAT/CD36 : Fatty acid translocase
HDL : High-Density Lipoprotein
HMG-CoA : 3-hydroxy-3-methylglutaryl CoA
HS : Kontrol hewan sehat
IDL : Intermediete-Density Lipoprotein
K+ : Kontrol positif
K- : Kontrol negatif
LCAT : Lecitin Cholesteryl Acyltransferase
LDL : Low- Density Lipoprotein
LPL : Lipoprotein Lipase
LRP : Receptor-Related Protein
NHANES : National Health and Nutrition Examination Survey
OxLDL : oxidized LDL
P1 : Kelompok perlakuan 1
xv
P3 : Kelompok perlakuan 3
PA : Persea americana
PJK : Penyakit Jantung Koroner
Pl : Phospolipid
Pr : Protein
POD : Peroxidase
SMC : Smooth Muscle Cell
SPSS : Statistic Program for Social Science
STZ : Streptozotosin
TG : Triglyceride
TGF : Transforming Growth Factor
VLDL : Very Low-Density Lipoprotein
WHF : World Heart Federation
xvi
DAFTAR PUSTAKA
Adnan, J.M., Zearah, S.A., 2013. Total Antioxidant Capacity And Antihyperlipidemic Activity Of Alkaloid Extract From Aerial Part Of
Anethum graveolens L. Plant. European Scientific Journal., Vo. 9, No.33,
pp. 413-23.
Anggiawan, R., 2014. Efektifitas Ekstrak Etanol Daun Srikaya (Annona squamosa L.) Terhadap Penurunan Kadar Kolesterol Total Tikus Putih (Rattus norvegicus L.) Hiperlipidemia. Malang : Skripsi Program Sarjana.
Anonim, 2013. Penyajian Pokok-Pokok Hasil Riset Kesehatan Dasar 2013, Badan Penelitian dan Pengembangan Kesehatan Kementerian Kesehatan RI
Arukwe, U., Amadi, B.A., Duru, M. K.C., Agomuo,E.N., Adindu, E. A., Odika, P.C., Lele, K.C., Egejuru, L., and Anudike, J., 2012. Chemical Compotition of Persea Americana Leaf, Fruit and Seed. IJRRAS., Vol. 11 No.02, pp. 1-4.
Archbold, R.A., Timmis A.D., 1998. Cholesterol lowering and coronary artery disease: mechanisms of risk reduction. Heart, Vol. 80, pp. 543–47.
Brai, B.I.C., Odetola, A.A., Agomo, P.U., 2007. Hypoglycemic and Hypocholesterolemic Potential of Persea americanaLeaf Extracts. J Med Food., Vol. 10 No. 02, pp. 356-59.
Dipiro, J.T., Talbert, L R., Yee, G.C., Matzke, G. R., Wells, B. G., Posey, L. M., 2008. Pharmacotherapy A Pathophysiologic Approach, Ed. 7th, USA : MC Graw Hill Medical., pp. 385-403.
Fox, J.G., Anderson L.C., Loew F.M,. Quimby F.D., 2002. Laboratory Animal
Medicine. Second Edition. USA: American College of Laboratory Animal Medicine Series. Pp. 121-133.
Gani, N., Momuat, L., I., Pitoi, M., M., 2013. Profil Lipida Plasma Tikus Wistar yang Hiperkolestremia Pada Pemberian Gedi Merah (Albelmoschus manihot L.). Jurnal MIPA UNSRAT Online., Vol.02, No.1, pp. 44-49.
Gasserro, P., Proto, M.C., Gangemi, G., Malfitano, A.M., Pisanti, S., Santoro, A., Laezza, C., and Bifulco, M., 2012. Pharmacological Actions of Statins : A Critical Appraisal in the Management of Cancer. Pharmacological Review. Vol.64, No.1, pp.102-46.
Gokaraju et al., 2012. Extract, Fractions and Composition Comprising Acetogenins and Their Application , United States : Patent Applications Publication. Haeckel, B. A., Sonntag, O., Külpmann, W.R., and Feldmann, U., 1979.
Comparison of 9 Methods for the Determination of Cholesterol. J.Clin.Chem.Clin.Bioohem. Vol.17, pp.553-563.
xvii
Himesh, S., Sarvesh, S., Sharan, P.S., Mishra, K., Singhai, A.K., 2011. Preliminary Phytochemical Screening and HPLC Analysys of Flavonoid From Methanolic Extract of Leaves of Annona Squamosa. IRJP ( International Research Journal of Pharmacy), Vol. 2 No. 5, pp. 242-46
Istyana, R. D. N., 2014. Pengaruh Ekstrak Etanol Daun Alpukat (Persea americana Mill.) Terhadap Kadar LDL Pada Tikus (Rattus novergicus). Malang : Skripsi Program Sarjana.
Frostegård, J., 2013. Immunity, atherosclerosis and cardiovascular disease. BMC Medicine, Vol. 11 N0. 117, pp. 1-13.
Kaminskas, A., Mažeikienė, A., 2012. Biochemistry Laboratory Manual. Vilnius : Vilnius University, pp. 28-30.
Kolawole, O. T., Kolawole, S. O., Ayankunle, A. A., and Olaniran I. O., 2012. Methanol Leaf Extract of Persea americana Protects Rats against Cholesterol-Induced Hyperlipidemia. British Journal of Medicine & Medical Research., Vol. 2 No. 2, pp. 235-242.
Kusumastuty, I. 2014. Sari Buah Markisa Ungu Mencegah Peningkatan MDA Serum Tikus Dengan Diet Aterogenik. Indonesian Journal of Human Nutrition. Vol. 1, No.1, pp. 50-56.
Kwan, B. C. H., Kronenberg, F., Beddhu, S. and Cheung, A.K., 2007. Lipoprotein
Metabolism and Lipid Management in Chronic Kidney Disease. J Am Soc
Nephrol., Vol. 18, pp. 1246-61.
Kwang, B., H., Kang, S., C., Sharma, A., Bajpai, V.,K., 2014. Antioxidant, Lipid Peroxidation Inhibition and Free Radical Scavenging Efficacy of A Diterpenoid Compound Sugiol Isolated From Metasequoia glyptostroboides. Asian Pacific Journal of Tropical Medicine, Vol 9, No. 15.
Lakhanpal, P., and Rai., D. K., 2007. Quercetin : A Versatile Flavonoid. Internet Journal of Medical Update., Vol 2, No.02, pp. 22-37.
Malaguarnera, M., Vacante, M., Russo, C., Malaguarnera, G., Antic, T., Malaguarnera, L., Bella, R., Pennisi, G., Galvano, F., and Frigiola, A., 2013.
Lipoprotein(a) in Cardiovascular Diseases. BioMed Research
International., Vol. 10 No. 11, pp. 1-9.
Mariod, A.A., Abdelwahab, S.I., Elkheir, S., Ahmed,Y.M., Fauzi, P.N.M., and Chuen C.S., 2012. Antioxidant Activity of Different Parts from Annona Squamosa, and Catunaregam Nilotica Methanolic Extract. Acta Sci. Pol., Technol. Aliment., Vol. 11 No.3, pp: 249-257.
Mazur, A.W., Pikul, S., Daggy, P. B., 1997. Cholesterol Lowering Compounds. United States Patent., No. 5,591,836.
xviii
emodi Rhizomes In Dyslipidemic Rats. Journal of Natural Medicine, Vol.
68, pp. 363-71.
Mizoguchi, T., Edano, T., and Koshi, T., 2004. A method of direct measurement for the enzymatic determination of cholesteryl esters. Journal of Lipid Research, Vol. 45 , pp. 396-01.
Murray, K. R., Granner, D. K., Rodwell, V. W., 2006. Biokimia Harper (Harper’s Illustrated Biochemistry), Ed. 27th, Toronto : Penerbit Buku Kedokteran., pp.225-249.
Mustafa, M.R., Leong, X.F., Ng, C.Y., and Jaarin, K. 2015. Effects of Repeated Heating of Cooking Oils on Antioxidant Content and Endotheliat Function. Austin J Pharmacol Ther. Vol.03, No.2, pp.1068.
Narwal, S. S., Sampietro, D.A., Catalan, C. A. N., Vattuone, M.A, 2009. Isolation, Identification and Characterization of Allelochemicals/Natural Products, Ed. 1st, Enfield, NH, USA : Science Publishers., pp. 31-34.
Nwodo, N.J., Nnadi, C.O., Ibezim, A., and Mbah C.J., 2014. Plants with
Hypolipidaemic Effects from Nigerian Flora, INTECH,
http://creativecommons.org/licenses/by/3.0. Diakses tanggal 23 September 2015
Orwa C., Mutua, A., Kindt, R., Jamnadass, R., and Anthony., 2009. Agroforestree Database: a tree reference and selection guide version 4.0,
http://www.worldagroforestry.org/sites/treedbs/treedatabases.asp, Diakses tanggal 14 Oktober 2015.
Oteiza, P. i., Erlejman, A. G., Verstraeten, S., V., Keen, C.,L., Fraga, C., G., 2005. Flavonoid-Membrane Interactions : A Protective Role Of Flavonoids At the Membrane Suerface?. Clinical & Developmental Immunology, Vol. 12, No. 01, pp. 19-25.
Page, I. H., and Brown, H.B., 1952. Induced Hypercholesterolemia and Atherogenesis. Circulation, Vol. 11, pp. 681-86.
Pal, D., Verma, P., 2013. Flavonoid : A Powerful and Abundant Source of Antioxidants. Academic Science, Vol. 5 No. 3, pp. 95-98.
Pamela, C.C., Richard, A. H., 2009. Farmakologi Ulasan Bergambar. Edisi ke-4, USA : Penerbit Buku Kedokteran EGC, hal 293-304.
Pandey, N., Barve, D., 2011. Phytochemical and Pharmacological Review on
Annona squamosa Linn. International Journal of Research in
Pharmaceutical and Biomedical Sciences,Vol. 2 No. 4, pp. 1404-10
Parameswaran, I., Murthi, V.K., 2014. Comparative study on Physico & Phyto-Chemical analysis of Persea americana & Actinidia deliciosa. IJSRP., Vol. 4 No. 5, pp. 1-3.
xix
Pusparini, 2006. Low density lipoproteinpadat kecil sebagai faktor risiko aterosklerosis. Universa Medicina, Vol. 25 No. 1, pp. 22-32.
Qiao, L., Zou, C., Shao, P., Schaack, J., Johnson, P.F., and Shao, J., 2008. Transcriptional Regulation of Fatty Acid Expression by
CCAAT/Enhancher-Binding Protein α. The Journal of Biological Chem., Vol. 283, No. 14, pp.8788-95.
Riahi, S., Mohammadi, M.T., Sobhani, V., and Soleimany M., 2015. Chronic Effects of Aerobic Excercise on Gene Expression of LOX-1 in the Heart of Rats Fed With High Fat Diet. Iran J Basic Med Sci., Vol. 18, p. 805-12.
Saha, R., 2011. Pharmacognosy and pharmacology of Annona squamosa: A review. International Journal of Pharmacy & Life Sciences, Vol. 2 No.10, pp. 1183-89.
Sahebkar, A., Simental-Mendia, L. E., Pedone, C., Ferretti, G., Nachtigal, P., Bo, S., Derosa, G., Maffioli, P., and Watts, G.F. 2015. Statin Therapy and Plasma Free Fatty Acid : A Systematic Review and Meta-analysis of Controlled Clinical Trials. British Journal of Clinical Pharmacology., Vol. 81, No.5, pp.807-18.
Sarker, S.D., 2006. Natural Products Isolation, Ed. 2nd, Totowa, New Jersey : Humana Press Inc., pp. 323-346
Sasidharan, S., Chen, Y., Saravanan. D., Sundram, D.K., Yoga, L., 2011. Extraction, Isolation and Characterization of Bioactive Compounds from
Plant’s Extracts. Afr J Tradit Complement Altern Med., Vol. 8 No. 1, pp. 1-10.
Saxena, M., Saxena, J., Nema, R., Singhand, D., and Gupta, A., 2013. Journal of Pharmacognosy and Phytochemistry. Phytochemistry of Medicinal Plants. Journal of Pharmacognosy and Phytochemistry, Vol. 1 No.6, pp. 174-75.
Sen, S., Raghavendra, H.G., Reddy, S.R., Sridhar, C., Chakraborty, R., Suchitra, B., Nagaiah, B., Jyothi, B. A., Babu, K. A., Babu, P.M., Viswanadhan, T., Sujatha, D. 2012. Synergistic Activiti of Tribulus Terrestris and Annona Squamosa Extracts Againts Alloxan Induced Diabetes and Hyperlipidemia in Rats. An International Journal of Pharmaceutical Science. Vol. 2, No.2, pp. 12-23.
Shastry, C. S., Ambalal, P. N., Himanshu, J., and Aswanthanarayana, B.J., 2011. Evaluation of Effect of Reused Edible Oils on Vital Organs of Wistar Rats. Nitte University Journal of Health Sciense., Vol.01, No.4, pp 10-15.
Silverstein, R. L., Lee, W., Park, Y.M., and Rahaman, S.O., 2010. Mechanisms of Cell Signaling by the Scavenger Receptor CD36 : Implications in Atherosclerosis and Thrombosis. Transactions of the American Clinical and Climatological Association., Vol. 121, pp. 206-217.
xx
Stapleton, P.A., Goodwill, A.G., James, M.E., Brock, R.W., Frisbee. J.C., 2010. Hypercholesterolemia and microvascular dysfunction: interventional strategies. Journal of Inflammation, Vol. 7 No. 54, pp. 3-10.
Sundari. N., 2014. Pengaruh Ekstrak Etanol Daun Alpukat (Persea americana Mill.) Terhadap Kadar Kolesterol Total Pada Tikus (Rattus novergicus).
Malang : Skripsi Program Sarjana.
Tidarria, W. A., 2014. Pengaruh Pemberian Ekstrak Etanol Daun Annona squamosa Linn. Terhadap Peningkatan Kadar HDL Pada Tikus Rattus norvegicus
Malang : Skripsi Program Sarjana.
Tsalisavrina, I., Handayani, D., Wahono, D., 2006. Pengaruh Pemberian Diet Tinggi Karbohidrat Dibandingkan Diet Tinggi Lemak Terhadap Kadar Trigliserida dan HDL Darah Pada Rattus norvegicus Galur Wistar. Jurnal Kedokteran Brawijaya., Vol. 22, No.02.
Usunobun U., Okolie N. P., Anyanwu O. G. and Adegbegi A.J., 2014. Phytochemical Screening and Proximate Composition of Annona muricata Leaves. European Journal of Botany Plant Science and Pathology, Vol.2 No.1, pp. 18-28
1
BAB I
PENDAHULUAN
1.1 Latar Belakang Masalah
Penyakit kardiovaskuler merupakan penyebab kematian nomor satu tiap
tahunnya. Tipe penyakit kardiovaskuler menurut World Heart Federation (WHF)
yaitu meliputi penyakit jantung koroner (PJK), stroke, emboli, trombosis, penyakit
jantung bawaan, dan penyakit jantung reumatik. World Health Organisation
(WHO) melaporkan PJK merupakan penyakit yang menyebabkan kematian
tertinggi, yaitu sebanyak 7,2 juta kematian pada tahun 2002. Pusat data dan
informasi Kementerian Kesehatan RI menyatakan pada tahun 2008 terdapat 17,3
juta kasus kematian karena penyakit kardiovaskuler dan diperkirakan akan terus
meningkat mencapai 23,3 juta kematian. Data riset Kesehatan Dasar 2013
melaporkan di Indonesia angka penderita PJK pada usia ≥ 15 tahun yaitu 1,5% atau sekitar 2,7 juta orang.
American Association of Clinical Endocrinologists (AACE) menyatakan
bahwa penyebab penyakit jantung koroner (PJK) yang utama yaitu dislipidemia
dimana terjadi peningkatan kadar kolesterol total (hiperkolestremia) >200 mg/dL,
peningkatan low-density lipoprotein (LDL) >100 mg/dL, dan penurunan
high-density lipoprotein (HDL) ≤ 60 mg/dL. Data epidemiologi juga menyebutkan bahwa hiperkolestremia merupakan faktor resiko pada stroke iskemik. AACE
mengusulkan resiko penyakit jantung dapat turun apabila kadar kolesterol total
sekitar < 200 mg/dL.
Upaya penurunan kadar kolesterol dapat dilakukan diantaranya dengan
mengendalikan diet makanan berkolesterol tinggi yang ditujukan untuk mengurangi
kadar kolesterol plasma. Apabila upaya diet tersebut kurang membantu, maka terapi
dilakukan dengan menggunakan obat-obat penurun lipid (antihiperlipidemia)
seperti golongan statin (simvastatin ; lovastatin; pravastatin) , golongan fibrat
(fenofibrate; gemfibrozil; fenofibric acid) dan niacin (immediete-release;
extended-release (Paul et al, 2012). Dari golongan obat diatas, simvastatin merupakan drug
2
bekerja dengan mengganggu konversi 3-hydroxy-3-methylglutaryl CoA
(HMG-CoA) menjadi mevalonat dengan menghambat HMG-CoA reductase (Dipiro,
2008).
Popularitas statin dipengaruhi oleh banyaknya data uji klinik yang
mengkonfirmasi bahwa penurunan kadar lipid pada pasien yang diterapi akan
berakibat pada turunnya resiko penyakit kardiovaskuler (Williams, 2005). Namun,
obat golongan statin dilaporkan memiliki efek samping yang umum yaitu,
gangguan pencernaan, mual, muntah, sakit kepalaatau pening (Rohilla, 2012).
Penggunaan bahan tanaman sebagai penurun kolesterol sudah lama di lakukan
oleh masyarakat sejak dulu. Saat ini pun telah banyak beredar obat bahan alam
sebagai alternatif pengobatan hiperkolesterol yang telah teregistrasi di Balai
Pengawasan Obat dan Makanan (BPOM) antara lain produk jamu Alpukin (ekstrak
daun Alpukat); Ace Maxs (kombinasi ekstrak kulit manggis dan daun srikaya);
Mengkudu, dan lain-lain.
Produk bahan alam yang sudah teregistrasi oleh BPOM diatas membuktikan
ekstrak daun alpukat (Persea americana) dan srikaya (Annona squamosa L.)
memiliki aktifitas sebagai penurun kolesterol. Saat ini, belum ada produk bahan
alam yang beredar sebagai antihiperkolestremia yang berasal dari kombinasi
ekstrak daun P. americana dan A. squamosa . Tidak menutup kemungkinan jika
ekstrak daun alpukat dan srikaya apabila dikombinasikan akan memberikan
outcome terapi yang lebih signfikan dibandingkan pemberian ekstrak tunggal.
Hasil penelitian Niswan (2014) dan Reny (2014), menunjukkan bahwa
pemberian ekstrak etanol daun P. americana dengan dosis 250 mg/KgBB yang
diberikan pada tikus putih Rattus novergicus selama 14 hari pelakuan dapat
menurunkan kadar kolesterol total dan LDL secara signifikan.
Penelitian serupa juga di lakukan oleh Kolawole (2012), selama 8 minggu pada
tikus Wistar, yaitu dengan perlakuan berupa pemberian dosis 20 mg/kgBB dan 40
mg/kgBB ekstrak etanol daun P. americana terjadi penurunan profil lipid kolesterol
total, trigliserida dan LDL serta kenaikan HDL secara signifikan pada kedua dosis
tersebut. Dosis 40 mg/kgBB lebih mendominasi penurunan profil lipid dan
3
Hasil penelitian sebelumnya yang dilakukan oleh Wisnu (2014) dan Rengki
(2014), menunjukkan bahwa pengaruh pemberian ekstrak etanol daun A. squamosa
pada tikus putih Rattus novergicus hiperkolesterol selama 14 hari perlakuan terjadi
penurunan kadar kolesterol total pada dosis 250 mg/KgBB, serta terjadi
peningkatan HDL pada dosis 750 mg/KgBB, namun penurunan kolesterol total dan
peningkatan HDL tersebut tidak signifikan. Sedangkan penelitian yang dilakukan
oleh Panda (2013), selama 10 hari perlakuan, pada dosis 400 mg/KgBB pada tikus
putih Rattus novergicus terjadi penurunan LDL yang signifikan.
Berdasarkan latar belakang penelitian diatas, penulis tertarik untuk meneliti
dan mengembangkan terapi antihiperkolestremia dengan pemberian kombinasi
ekstrak daun P. americana dan A. squamosa. Saat ini, kebanyakan produk bahan
alam diformulasikan dalam bentuk multi compound karena efektifitasnya dapat
meningkat bila bekerja secara potensiasi (Dixit, 2008).
Pada penelitian ini, akan dilakukan pemberian kombinasi ekstrak etanol daun
P. americana dan ekstrak etanol daun A. squamosa pada beberapa dosis kombinasi
terhadap kelompok perlakuan hewan coba Rattus novergicus hiperkolestremia.
Dengan menggunakan post test only control group design, perlakuan akan
dilaksanakan selama 21 hari, kemudian kadar kolesterol total dari kelompok uji dan
kelompok kontrol di ukur lalu dibandingkan penurunan kolesterol total antara
kelompok kontrol dan kelompok perlakuan menggunakan analisis statistik.
1.2 Rumusan Masalah
1. Bagaimana pengaruh 3 dosis kombinasi ekstrak etanol daun P. americana dan
ekstrak etanol daun A. squamosa terhadap kadar kolesterol total pada tikus putih
(Rattus novergicus) hiperkolestremia ?
2. Berapakah dosis optimum dari kombinasi ekstrak etanol daun P. americana
dan ekstrak etanol daun A. squamosa yang dapat menurunkan kadar kolesterol
4
1.3 Tujuan Penelitian
1.3.1 Tujuan Umum
Berdasarkan latarbelakang dan rumusan masalah, maka tujuan dari penelitian
ini adalah untuk mengetahui pengaruh pemberian dosis kombinasi ekstrak etanol
daun P. americana dan ekstrak etanol daun A. squamosa terhadap penurunan kadar
kolesterol tikus putih (Rattus norvegicus) hiperkolestremia.
1.3.2 Tujuan Khusus
Memperoleh dosis kombinasi optimum ekstrak etanol daun P. americana
dan ekstrak etanol daun A. squamosa yang dapat menurunkan kadar kolesterol total
tikus Rattus norvegicus hiperkolestremia.
1.4 Manfaat
1.4.1 Manfaat akademik
Hasil penelitian ini diharapkan dapat dijadikan acuan untuk pengembangan
penelitian selanjutnya yang berkaitan dengan aktivitas ekstrak daun P. americana
dan daun A. squamosa sebagai antihiperkolestremia.
1.4.2 Manfaat praktis
Sebagai salah satu alternatif terapi hiperkolestremia yang merupakan faktor
resiko penyakit jantung koroner (PJK).
1.4.3 Manfaat masyarakat
Penelitian ini diharapkan dapat memberikan informasi kepada masyarakat
yang menderita hiperkolestremia bahwa pemberian kombinasi ekstrak etanol daun
P. americana dan ekstrak etanol daun A. squamosa pada dosis tertentu dapat
menurunkan kadar kolesterol total.
1.4.4 Manfaat jangka panjang
Penelitian mengenai dosis kombinasi ekstrak etanol daun P. americana
dan ekstrak etanol daun A. squamosa ini memiliki potensi untuk dapat
dikembangkan menjadi produk jamu, obat herbal terstandar atau fitofarmaka
