PENGUJIAN KETAHANAN ANGGREK Phalaenopsis
TERHADAP PENYAKIT BUSUK LUNAK
YANG DISEBABKAN OLEH Erwinia carotovora
SECARA IN VITRO
HARDIYANTO A34402008
PROGRAM STUDI
PEMULIAAN TANAMAN DAN TEKNOLOGI BENIH
FAKULTAS PERTANIAN
PENGUJIAN KETAHANAN ANGGREK Phalaenopsis
TERHADAP PENYAKIT BUSUK LUNAK
YANG DISEBABKAN OLEH Erwinia carotovora
SECARA IN VITRO
Skripsi
Skripsi sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar sarjana pada
Departemen Agronomi dan Hortikultura, Fakultas Pertanian Institute Pertanian Bogor
HARDIYANTO A34402008
PROGRAM STUDI
PEMULIAAN TANAMAN DAN TEKNOLOGI BENIH
FAKULTAS PERTANIAN
ABSTRAK
HARDIYANTO. Pengujian Ketahanan Anggrek Phalaenopsis terhadap Penyakit Busuk Lunak yang Disebabkan oleh Erwinia carotovora Secara in Vitro.
Dibimbing oleh Agus Purwito dan Sri Rianawati.
Penyakit busuk lunak (soft rot) merupakan penyakit penting dalam budidaya anggrek Phalaenopsis. Penyakit ini disebabkan oleh bakteri Erwinia carotovora, yang biasanya menginfeksi melalui pelukaan. Bakteri Erwinia carotovora dapat menyerang semua bagian tubuh tanaman, apabila keadaan lingkungan mendukung seperti kelembaban tinggi, bakteri ini dapat berkembang dengan cepat terutama pada jaringan muda dan dapat menyebabkan kematian pada bibit angrek. Pemuliaan tanaman merupakan salah satu solusi untuk mengendalikan penyakit pada tanaman anggrek. Melalui pemulian tanaman dapat dirakit tanaman yang tahan terhadap hama dan penyakit dengan cara penyilangan dan seleksi in vitro. Melalui persilangan diharapkan adanya penggabungan sifat-sifat unggul dari tetua seperti sifat-sifat ketahanan terhadap penyakit, dan seleksi in vitro digunakan sebagai seleksi awal dengan tujuan agar proses pemuliaan tanaman lebih efektif dan efisien. Metode seleksi in vitro pada penelitian ini menggunakan agen penyeleksi yaitu bakteri Ervinia carotovora dengan konsentrasi 109 cfu/ml dan 1010 cfu/ml, dengan cara inokulasi melalui pelukaan dan tanpa pelukaan pada daun Phalaenopsis. Anggrek Phalaenopsis yang digunakan yaitu populasi 508, 529, 655, dan 688. Pengamatan dilakukan setiap hari selama sepuluh hari dan parameter yang diamati adalah intensitas serangan, kejadian penyakit, dan masa inkubasi. Berdasarkan hasil penelitian menunjukan
Erwinia carotovora dapat menyebabkan penyakit busuk lunak pada daun
Phalaenopsis in vitro. Penyakit ini umumnya menyerang melalui pelukaan, akan tetapi penyakit ini juga dapat menyerang Phalaenopsis tanpa pelukaan. Metode seleksi in vitro dengan agen penyeleksi (bakteri Erwinia carotovora) dengan cara inokulasi melalui pelukaan terbukti efektif, akan tetapi penggunaan konsentrasi yang dicoba menunjukan hasil yang tidak berbeda. Berdasarkan hasil dari keempat populasi yang diuji terhadap tingkat ketahanan terhadap penyakit busuk lunak, menunjukkan bahwa populasi 508 merupakan populasi yang rentan (rata-rata intensitas serangan 41.5%) dan populasi 529, 655, dan 688 termasuk ke dalam populasi yang agak rentan (rata-rata intensitas serangan berturut-turut 27.7%, 27.4%, dan 26.5%). Berdasarkan kejadian penyakit setelah sepuluh hari masa inkubasi, menunjukan penyakit ini melalui pelukaan dapat menyerang bibit
HALAMAN PENGESAHAN
Judul
: PENGUJIAN KETAHANAN ANGGREK
Phalaenopsis
TERHADAP PENYAKIT
BUSUK LUNAK YANG DISEBABKAN
OLEH
Erwinia carotovora SECARA
IN
VITRO
Nama
: HARDIYANTO
NIM
: A34402008
Menyetujui,
Dosen Pembimbing
(Dr. Ir. Agus Purwito, M.Sc Agr) (Dra. Sri Rianawati M.Si.) NIP. 19611101 198703 1 00 NIP. 080104192
Mengetahui,
Dekan Fakultas Pertanian
(Prof. Dr. Ir. Didy Sopandie, M. Agr) NIP. 19571222 1982 03 1 002
RIWAYAT HIDUP
Penulis dilahirkan di Banjarnegara, Jawa Tengah dari Bapak Sukriyo
Hadinoto dan Ibu Mistiyah. Penulis merupakan anak terakhir dari enam
bersaudara.
Pendidikan formal yang pernah penulis tempuh yaitu, Sekolah Menengah
Umum Negeri 1 Bawang selesai tahun 2002. Pada tahun yang sama, penulis
masuk Institut Pertanian Bogor melalui jalur USMI (Undangan Seleksi Masuk
IPB) di Departemen Agronomi dan Hortikultura, Program Studi Pemuliaan
Tanaman dan Teknologi Benih. Selama menjadi mahasiswa di Departemen
Agronomi dan Hortikultur, penulis aktif dalam organisasi paduan suara
PRAKATA
Puji syukur penulis panjatkan kehadirat Allah SWT atas segala nikmat,
rahmat, dan hidayah-Nya sehingga penulis dengan segala keterbatasannya dapat
menyelesaikan skripsi.
Skripsi ini dapat terselesaikan dengan baik karena bantuan dan dukungan
dari berbagai pihak. Untuk itu dengan penuh rasa cinta dan kasih sayang penulis
ingin mengucapkan terimakasih kepada “Kedua Orang Tua” tercinta yang selalu
memberikan doa, nasihat, dan kasih sayangnya yang tulus dan tiada henti.
Terimakasih dan penghargaan penulis sampaikan kepada Dr. Ir. Agus
Purwito, M.Sc. AGr. dan Dra. Sri Rianawati M.Si. sebagai dosen pembimbing
skripsi yang dengan sangat sabar membimbing dan mengarahkan penulis dalam
proses penelitian yang telah penulis jalankan, Dr. Ir. Dewi Sukma Sp. M.Si.
selaku dosen penguji tamu yang telah berkenan memberikan saran perbaikan
skripsi kepada penulis, dan Prof. Dr. Ir. Surjono H. S. Msc. sebagai dosen
pembimbing akademik yang telah memberikan nasehat dan bimbingannya selama
penulis menempuh studi di Departemen Agronomi dan Hortikultura IPB.
Penulis mengucapkan terimakasih kepada kakanda tercinta Basuki
Subagio, Suharti, Ahmad Subagio, Muhamad Surahmat, dan Sudiyarti, dan
keponakan tercinta Yuliana, Helmi, Ifan, Fasa, Dinda, Rona, Meira, dan Azmi
yang tiada hentinya memberikan perhatian dan semangat, serta Miftahul Huda
atas bantuan dan perhatiannya. Penulis juga menyampaikan ucapan terimakasih
dan rasa simpatik kepada Firman (Galoeh), Esto, Ade, Harlan (Bela), Pandi,
Misnen, Ust. Iqbal, keluarga besar Agriaswara, keluarga besar PMT 39, pecinta
dan pedagang tanaman hias kota Bogor, dan teman-teman yang telah membantu
penulis menyelesaikan tugas akhir ini.
Penulis masih menyadari bahwa skripsi ini masih jauh dari kesempurnaan,
namun penulis berharap skripsi ini dapat bermanfaat bagi semua pihak yang
memerlukan.
DAFTAR ISI
Halaman
DAFTAR TABEL vi
DAFTAR GAMBAR vii
DAFTAR LAMPIRAN viii
PENDAHULUAN 1
Latar Belakang 1
Tujuan 3
Hipotesis 3
TINJAUAN PUSTAKA 4
Botani Phalaenopsis 4
Kultur Jaringan Anggrek 5
Penyakit Busuk Lunak (Erwinia carotovora pv. carotovora). 6
Gejala Penyakit 7
Pemuliaan Tanaman Anggrek 8
Seleksi In Vitro 8
BAHAN DAN METODE 10
Waktu dan Tempat 10
Bahan dan Alat 10
Metode 10
Pelaksanaan 11
Persiapan Tanaman 11
Persiapan Inokulum 11
Perlakuan 12
Pengamatan 12
HASIL DAN PEMBAHASAN 15
Kondisi Umum 15
Pengaruh Jenis Populasi Anggrek terhadap Intensitas
Serangan Bakteri Erwinia carotovora 16
Pengaruh Konsentrasi Bakteri terhadap Intensitas Serangan
Pengaruh Cara Inokulasi terhadap Intensitas Serangan
Bakteri Erwinia carotovora 22
Interaksi Antar Perlakuan terhadap Intensitas Serangan
Bakteri Erwinia carotovora 25
KESIMPULAN DAN SARAN 29
Kesimpulan 29
Saran 29
DAFTAR PUSTAKA 30
DAFTAR TABEL
Nomor Halaman
Teks
1. Klasifikasi ketahanan tanaman terhadap intensitas serangan
penyakit 14
2. Hasil analisis sidik ragam perlakuan terhadap intensitas
serangan penyakit busuk lunak 16
3. Pengaruh populasi terhadap intensitas serangan pada daun anggrek Phalaenopsis pada 10 hari pengamatan 17
4. Perbandingan nilai koefisien keragaman tiap populasi
Phalaenopsis pada inokulasi dengan pelukaan terhadap
intensitas serangan 18
5. Pengaruh konsentrasi bakteri terhadap intensitas serangan
pada daun Phalaenopsis 22
6. Pengaruh cara Inokulasi terhadap intensitas serangan pada
daun Phalaenopsis 22
7. Interaksi populasi dengan konsentrasi bakteri terhadap
intensitas serangan pada daun Phalaenopsis 25
8. Interaksi populasi dengan cara inokulasi terhadap intensitas
DAFTAR GAMBAR
Nomor Halaman
Teks
1. Uji virulensi Erwinia carotovora 15
2. Tanaman anggrek Phalaenopsis setelah 10 hari pengamatan
pada setiap popupasi 19
3. Perbedaan antara tanaman yang tahan dan tidak tahan
terhadap penyakit busuk lunak 20
4. Intensitas serangan pada setiap populasi dengan cara
inokulasi melalui pelukaan 20
5. Intensitas serangan pada setiap populasi dengan cara
inokulasi tanpa pelukaan 21
6. Pengaruh cara inokulasi terhadap Intensitas serangan pada
setiap populasi 23
7. Grafik perkembangan serangan pada inokulasi melalui
PENGUJIAN KETAHANAN ANGGREK Phalaenopsis
TERHADAP PENYAKIT BUSUK LUNAK
YANG DISEBABKAN OLEH Erwinia carotovora
SECARA IN VITRO
HARDIYANTO A34402008
PROGRAM STUDI
PEMULIAAN TANAMAN DAN TEKNOLOGI BENIH
FAKULTAS PERTANIAN
PENGUJIAN KETAHANAN ANGGREK Phalaenopsis
TERHADAP PENYAKIT BUSUK LUNAK
YANG DISEBABKAN OLEH Erwinia carotovora
SECARA IN VITRO
Skripsi
Skripsi sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar sarjana pada
Departemen Agronomi dan Hortikultura, Fakultas Pertanian Institute Pertanian Bogor
HARDIYANTO A34402008
PROGRAM STUDI
PEMULIAAN TANAMAN DAN TEKNOLOGI BENIH
FAKULTAS PERTANIAN
ABSTRAK
HARDIYANTO. Pengujian Ketahanan Anggrek Phalaenopsis terhadap Penyakit Busuk Lunak yang Disebabkan oleh Erwinia carotovora Secara in Vitro.
Dibimbing oleh Agus Purwito dan Sri Rianawati.
Penyakit busuk lunak (soft rot) merupakan penyakit penting dalam budidaya anggrek Phalaenopsis. Penyakit ini disebabkan oleh bakteri Erwinia carotovora, yang biasanya menginfeksi melalui pelukaan. Bakteri Erwinia carotovora dapat menyerang semua bagian tubuh tanaman, apabila keadaan lingkungan mendukung seperti kelembaban tinggi, bakteri ini dapat berkembang dengan cepat terutama pada jaringan muda dan dapat menyebabkan kematian pada bibit angrek. Pemuliaan tanaman merupakan salah satu solusi untuk mengendalikan penyakit pada tanaman anggrek. Melalui pemulian tanaman dapat dirakit tanaman yang tahan terhadap hama dan penyakit dengan cara penyilangan dan seleksi in vitro. Melalui persilangan diharapkan adanya penggabungan sifat-sifat unggul dari tetua seperti sifat-sifat ketahanan terhadap penyakit, dan seleksi in vitro digunakan sebagai seleksi awal dengan tujuan agar proses pemuliaan tanaman lebih efektif dan efisien. Metode seleksi in vitro pada penelitian ini menggunakan agen penyeleksi yaitu bakteri Ervinia carotovora dengan konsentrasi 109 cfu/ml dan 1010 cfu/ml, dengan cara inokulasi melalui pelukaan dan tanpa pelukaan pada daun Phalaenopsis. Anggrek Phalaenopsis yang digunakan yaitu populasi 508, 529, 655, dan 688. Pengamatan dilakukan setiap hari selama sepuluh hari dan parameter yang diamati adalah intensitas serangan, kejadian penyakit, dan masa inkubasi. Berdasarkan hasil penelitian menunjukan
Erwinia carotovora dapat menyebabkan penyakit busuk lunak pada daun
Phalaenopsis in vitro. Penyakit ini umumnya menyerang melalui pelukaan, akan tetapi penyakit ini juga dapat menyerang Phalaenopsis tanpa pelukaan. Metode seleksi in vitro dengan agen penyeleksi (bakteri Erwinia carotovora) dengan cara inokulasi melalui pelukaan terbukti efektif, akan tetapi penggunaan konsentrasi yang dicoba menunjukan hasil yang tidak berbeda. Berdasarkan hasil dari keempat populasi yang diuji terhadap tingkat ketahanan terhadap penyakit busuk lunak, menunjukkan bahwa populasi 508 merupakan populasi yang rentan (rata-rata intensitas serangan 41.5%) dan populasi 529, 655, dan 688 termasuk ke dalam populasi yang agak rentan (rata-rata intensitas serangan berturut-turut 27.7%, 27.4%, dan 26.5%). Berdasarkan kejadian penyakit setelah sepuluh hari masa inkubasi, menunjukan penyakit ini melalui pelukaan dapat menyerang bibit
HALAMAN PENGESAHAN
Judul
: PENGUJIAN KETAHANAN ANGGREK
Phalaenopsis
TERHADAP PENYAKIT
BUSUK LUNAK YANG DISEBABKAN
OLEH
Erwinia carotovora SECARA
IN
VITRO
Nama
: HARDIYANTO
NIM
: A34402008
Menyetujui,
Dosen Pembimbing
(Dr. Ir. Agus Purwito, M.Sc Agr) (Dra. Sri Rianawati M.Si.) NIP. 19611101 198703 1 00 NIP. 080104192
Mengetahui,
Dekan Fakultas Pertanian
(Prof. Dr. Ir. Didy Sopandie, M. Agr) NIP. 19571222 1982 03 1 002
RIWAYAT HIDUP
Penulis dilahirkan di Banjarnegara, Jawa Tengah dari Bapak Sukriyo
Hadinoto dan Ibu Mistiyah. Penulis merupakan anak terakhir dari enam
bersaudara.
Pendidikan formal yang pernah penulis tempuh yaitu, Sekolah Menengah
Umum Negeri 1 Bawang selesai tahun 2002. Pada tahun yang sama, penulis
masuk Institut Pertanian Bogor melalui jalur USMI (Undangan Seleksi Masuk
IPB) di Departemen Agronomi dan Hortikultura, Program Studi Pemuliaan
Tanaman dan Teknologi Benih. Selama menjadi mahasiswa di Departemen
Agronomi dan Hortikultur, penulis aktif dalam organisasi paduan suara
PRAKATA
Puji syukur penulis panjatkan kehadirat Allah SWT atas segala nikmat,
rahmat, dan hidayah-Nya sehingga penulis dengan segala keterbatasannya dapat
menyelesaikan skripsi.
Skripsi ini dapat terselesaikan dengan baik karena bantuan dan dukungan
dari berbagai pihak. Untuk itu dengan penuh rasa cinta dan kasih sayang penulis
ingin mengucapkan terimakasih kepada “Kedua Orang Tua” tercinta yang selalu
memberikan doa, nasihat, dan kasih sayangnya yang tulus dan tiada henti.
Terimakasih dan penghargaan penulis sampaikan kepada Dr. Ir. Agus
Purwito, M.Sc. AGr. dan Dra. Sri Rianawati M.Si. sebagai dosen pembimbing
skripsi yang dengan sangat sabar membimbing dan mengarahkan penulis dalam
proses penelitian yang telah penulis jalankan, Dr. Ir. Dewi Sukma Sp. M.Si.
selaku dosen penguji tamu yang telah berkenan memberikan saran perbaikan
skripsi kepada penulis, dan Prof. Dr. Ir. Surjono H. S. Msc. sebagai dosen
pembimbing akademik yang telah memberikan nasehat dan bimbingannya selama
penulis menempuh studi di Departemen Agronomi dan Hortikultura IPB.
Penulis mengucapkan terimakasih kepada kakanda tercinta Basuki
Subagio, Suharti, Ahmad Subagio, Muhamad Surahmat, dan Sudiyarti, dan
keponakan tercinta Yuliana, Helmi, Ifan, Fasa, Dinda, Rona, Meira, dan Azmi
yang tiada hentinya memberikan perhatian dan semangat, serta Miftahul Huda
atas bantuan dan perhatiannya. Penulis juga menyampaikan ucapan terimakasih
dan rasa simpatik kepada Firman (Galoeh), Esto, Ade, Harlan (Bela), Pandi,
Misnen, Ust. Iqbal, keluarga besar Agriaswara, keluarga besar PMT 39, pecinta
dan pedagang tanaman hias kota Bogor, dan teman-teman yang telah membantu
penulis menyelesaikan tugas akhir ini.
Penulis masih menyadari bahwa skripsi ini masih jauh dari kesempurnaan,
namun penulis berharap skripsi ini dapat bermanfaat bagi semua pihak yang
memerlukan.
DAFTAR ISI
Halaman
DAFTAR TABEL vi
DAFTAR GAMBAR vii
DAFTAR LAMPIRAN viii
PENDAHULUAN 1
Latar Belakang 1
Tujuan 3
Hipotesis 3
TINJAUAN PUSTAKA 4
Botani Phalaenopsis 4
Kultur Jaringan Anggrek 5
Penyakit Busuk Lunak (Erwinia carotovora pv. carotovora). 6
Gejala Penyakit 7
Pemuliaan Tanaman Anggrek 8
Seleksi In Vitro 8
BAHAN DAN METODE 10
Waktu dan Tempat 10
Bahan dan Alat 10
Metode 10
Pelaksanaan 11
Persiapan Tanaman 11
Persiapan Inokulum 11
Perlakuan 12
Pengamatan 12
HASIL DAN PEMBAHASAN 15
Kondisi Umum 15
Pengaruh Jenis Populasi Anggrek terhadap Intensitas
Serangan Bakteri Erwinia carotovora 16
Pengaruh Konsentrasi Bakteri terhadap Intensitas Serangan
Pengaruh Cara Inokulasi terhadap Intensitas Serangan
Bakteri Erwinia carotovora 22
Interaksi Antar Perlakuan terhadap Intensitas Serangan
Bakteri Erwinia carotovora 25
KESIMPULAN DAN SARAN 29
Kesimpulan 29
Saran 29
DAFTAR PUSTAKA 30
DAFTAR TABEL
Nomor Halaman
Teks
1. Klasifikasi ketahanan tanaman terhadap intensitas serangan
penyakit 14
2. Hasil analisis sidik ragam perlakuan terhadap intensitas
serangan penyakit busuk lunak 16
3. Pengaruh populasi terhadap intensitas serangan pada daun anggrek Phalaenopsis pada 10 hari pengamatan 17
4. Perbandingan nilai koefisien keragaman tiap populasi
Phalaenopsis pada inokulasi dengan pelukaan terhadap
intensitas serangan 18
5. Pengaruh konsentrasi bakteri terhadap intensitas serangan
pada daun Phalaenopsis 22
6. Pengaruh cara Inokulasi terhadap intensitas serangan pada
daun Phalaenopsis 22
7. Interaksi populasi dengan konsentrasi bakteri terhadap
intensitas serangan pada daun Phalaenopsis 25
8. Interaksi populasi dengan cara inokulasi terhadap intensitas
DAFTAR GAMBAR
Nomor Halaman
Teks
1. Uji virulensi Erwinia carotovora 15
2. Tanaman anggrek Phalaenopsis setelah 10 hari pengamatan
pada setiap popupasi 19
3. Perbedaan antara tanaman yang tahan dan tidak tahan
terhadap penyakit busuk lunak 20
4. Intensitas serangan pada setiap populasi dengan cara
inokulasi melalui pelukaan 20
5. Intensitas serangan pada setiap populasi dengan cara
inokulasi tanpa pelukaan 21
6. Pengaruh cara inokulasi terhadap Intensitas serangan pada
setiap populasi 23
7. Grafik perkembangan serangan pada inokulasi melalui
DAFTAR LAMPIRAN
Nomor Halaman
Teks
1. Intensitas serangan dan ketahanan masing-masing tanaman pada populasi 508 terhadap penyakit busuk lunak dengan konsentrasi inokulasi Erwinia carotovora 109 cfu/ml 34
2. Intensitas serangan dan ketahanan masing-masing tanaman pada populasi 529 terhadap penyakit busuk lunak dengan konsentrasi inokulasi Erwinia carotovora 109
cfu/ml 35
3. Intensitas serangan dan ketahanan masing-masing tanaman pada populasi 655 terhadap penyakit busuk lunak dengan konsentrasi inokulasi Erwinia carotovora 109 cfu/ml 36
4. Intensitas serangan dan ketahanan masing-masing tanaman pada populasi 688 terhadap penyakit busuk lunak dengan konsentrasi inokulasi Erwinia carotovora 109 cfu/ml 37
5. Intensitas serangan dan ketahanan masing-masing tanaman pada populasi 508 terhadap penyakit busuk lunak dengan konsentrasi inokulasi Erwinia carotovora 1010 cfu/ml 38
6. Intensitas serangan dan ketahanan masing-masing tanaman pada populasi 529 terhadap penyakit busuk lunak dengan konsentrasi inokulasi Erwinia carotovora 1010 cfu/ml 39
7. Intensitas serangan dan ketahanan masing-masing tanaman pada populasi 655 terhadap penyakit busuk lunak dengan konsentrasi inokulasi Erwinia carotovora 1010 cfu/ml 40
PENDAHULUAN
Latar Belakang
Anggrek merupakan salah satu tanaman hias yang banyak digemari
masyarakat Indonesia maupun mancanegara karena keindahan bunganya. Variasi
bunganya yang unik, telah menarik perhatian dan minat para botanis yang gemar
tanaman hias sejak dua abad yang lalu. Phalaenopsis merupakan salah satu jenis anggrek yang paling digemari oleh pasar (Puspitaningtyas 2003).
Menurut Dinas Tanaman Hias Departemen Pertanian (2009), komoditas
ekspor bunga potong anggrek menunjukkan penurunan, baik dari segi volume
maupun nilai ekspor setiap tahunnya. Tahun 2007 ekspor bunga potong anggrek
mencapai sekitar 10.398 kg senilai 231.416 US $, dan pada tahun 2008 ekspornya
menurun hingga 3.140 kg senilai 8.796 US $. Impor bunga potong anggrek juga
mengalami penurunan. Tahun 2006, Indonesia mengimpor 231.993 kg senilai
171.798 US $ dan tahun 2007 impor bunga potong anggrek menurun menjadi
1.617 kg senilai 8.394 US $. Menurut Hendaryono (2007), Indonesia baru mampu
mengekspor 25% dari anggrek yang tersedia di seluruh pelosok nusantara.
Kondisi ini menunjukkan bahwa produksi anggrek dalam negeri masih belum
dapat memenuhi kebutuhan pasar.
Rendahnya produksi anggrek di Indonesia disebabkan antara lain oleh
lahan produksi yang terbatas dan mutu bibit yang buruk. Dibandingkan dengan
produktivitas anggrek dari negara tetangga seperti Thailand dengan rata-rata
10-12 tangkai per tanaman, maka produktivitas anggrek Indonesia secara nasional
rata-rata sangat kecil, yaitu hanya dapat mencapai 3-4 tangkai per tanaman.
Umumnya bibit anggrek yang digunakan hanya mengutamakan keindahan
bunganya saja akan tetapi ketahanan terhadap hama dan penyakit masih rendah.
Penggunaan kultivar baru yang tahan terhadap penyakit ini merupakan salah satu
solusi yang tepat untuk mengatasi kendala tersebut. Pemuliaan tanaman untuk
karakter ketahanan terhadap penyakit merupakan salah satu cara efektif untuk
melindungi tanaman dari kerusakan akibat faktor biotik, khususnya oleh
mikroorganisme patogen. Penggunaan klon yang tahan penyakit dapat menghemat
ramah lingkungan dibandingkan menggunakan pengendalian dengan pestisida
sintetis (Yusnita 2005, Dirjen PPHP 2005).
Salah satu penyakit penting yang menjadi masalah pada budidaya anggrek
adalah penyakit busuk lunak (soft rot) yang disebabkan oleh bakteri Erwinia carotovora. Erwinia carotovora dapat menyerang seluruh bagian tanaman dan apabila lingkungan mendukung serangan bakteri ini dapat meluas dengan cepat
dan dapat menyebabkan kematian pada tanaman anggrek. Penyakit ini juga dapat
menyebabkan kerusakan hingga 80%-100%, terutama pada saat di pembibitan
anggrek (Agrios 1996, Mcmillan 2007).
Bakteri Erwinia carotovora adalah satu-satunya bakteri patogenik tumbuhan yang bersifat anaerob fakultatif. Bakteri ini mempunyai aktivitas pektolitik yang
kuat dan menyebabkan busuk lunak pada tanaman kentang. Bakteri inimenyerang
jaringan tanaman pada umumnya melalui pelukaan dan juga dapat melalui lubang
alami (Agrios 1996). Menurut Janse (2005) pada tanaman kentang bakteri Erwinia
carotovora dapat menimbulkan penyakit pada konsentrasi 107
Pemuliaan tanaman merupakan salah satu solusi untuk mengendalikan
hama dan penyakit pada tanaman anggrek. Melalui pemulian tanaman dapat
dirakit tanaman yang tahan terhadap hama dan penyakit. Pemuliaan tanaman
dapat dilakukan dalam berbagai cara, antara lain persilangan, seleksi, mutasi, fusi
protoplas, transfomasi dan seleksi terhadap ragam somaklonal. Pemuliaan
tanaman untuk sifat resistensi terhadap penyakit dapat menggunakan seleksi in vitro dengan menggunakan agensiasia penyeleksi (Mangoendidjojo 2003,Yusnita 2005).
cfu/ml (cfu =
colony farming unit) dengan periode inkubasi sekitar empat hari.
Penelitian untuk mendapatkan tanaman yang tahan terhadap serangan
hama dan penyakit telah banyak dilakukan melalui seleksi in vitro baik pada tanaman hortikultura maupun pada tanaman perkebunan, antara lain pada tanaman
abaka yang tahan terhadap layu fusarium yang disebabkan oleh Fusarium
(Purwati 2007), dan kentang tahan layu bakteri yang disebabkan oleh Ralstonia solanaccarum (Palupi 2001).
Tujuan
Secara umum penelitian ini bertujuan untuk mengetahui tingkat ketahanan
bibit anggrek Phalaenopsis hasil persilangan terhadap busuk lunak yang disebabkan bakteri Erwinia carotovora secara in vitro.
Hipotesis
1. Terdapat tanaman anggrek Phalaenopsis yang tahan terhadap busuk lunak yang disebabkan oleh bakteri Erwinia carotovora pada tingkat serangan tertentu.
2. Inokulasi Erwinia carotovora melalui pelukaan lebih efektif dibandinkan dengan tanpa pelukaan untuk seleksi in vitro pada bibit angrek
Phalaenopsis.
TINJAUAN PUSTAKA
Phalaenopsis
Keluarga tanaman anggrek terdiri dari 900 marga. Marga tersebut yang
telah dikenal sekarang diperkirakan 50 000 jenis, diantaranya kurang lebih 5000
jenis anggrek terdapat di Indonesia (Puspitaningtyas 1999). Anggrek dapat
diklasifikasikan berdasarkan beberapa faktor yaitu morfologi, ekologi, cara
reproduksi, sitologi dan sitogenetika, biokimia, fitokimia dan anatomi (Arditti
1992).
Anggrek secara taksonomi dilasifikasikan :
Kerajaan : Plantae
Divisi : Magnoliophyta
Kelas : Liliopsida
Ordo : Asparagales
Famili : Orchidaceae
Marga : Phalaenopsis, Dendrobium, Bulbophyllum, Vanda, Catleya,
Cymbidium, Nephelaphyllum, dan lain-lain.
Phalaenopsis merupakan salah satu marga anggrek yang memiliki bunga menyerupai kupu-kupu atau lebah, oleh karena itu anggrek ini diberi nama
Phalaenopsis yang berasal dari kata “Phalaina” yang berarti lebah atau kupu-kupu dan “opsis” yang artinya penampakan (Puspitaningtyas 1999). Marga
Phalaenopsis terutama tersebar di daerah tropik seperti Vietnam, Burma, Thailand, Malaysia, Indonesia dan Papua Nugini. Selain ini juga tersebar di
daerah subtropik seperti India, Cina selatan, Filipina, dan Australia utara (Yulia
2005).Menurut Christenson (2001) terdapat sekitar 60 jenis Phalaenopsis didunia dan menurut Puspitaningtyas (1999) 21 jenis tersebar di indonesia.
Anggrek Phalaenopsis tumbuh monopodial dan epifit yaitu menumpang pada batang tanaman atau batu dan tidak ada yang hidup di tanah (Nursandi
1997). Akar anggrek Phalaenopsis agak pipih, berdaging dan mengandung klorofil, berbatang pendek terbungkus oleh pangkal pelepah daun, daun berwarna
hijau atau hijau muda mengkilap, berbentuk lonjong yang biasanya makin melebar
Susunan bunga Phalaenopsis ada yang berbentuk tunggal, tandan atau malai dan dapat berbunga serentak atau bergantian. Jumlah bunganya 1-30 kuntum dan
kelopak mahkotanya tidak berlekatan. Marga Phalaenopsis umumnya memiliki warna bunga yang menyolok dengan variasi putih, merah jambu, ungu, kuning
yang dihiasi dengan pola garis-garis atau totol-totol berwarna merah hati, coklat,
merah jambu, yang menimbulkan kesan warna kontras. Perhiasan bunga yaitu
kelopak dan mahkotanya sering kali mempunyai pola dan warna yang sama
(Puspitaningtyas 1999).
Kelebihan aggrek Phalaenopsis dibandingkan bunga anggrek yang lainnya, yaitu relatif cepat berbunga, warna dan bentuknya menarik, serta penampilanya
bervariasi, ada yang tersusun rapi di sepanjang tangkai bunga, berkelompok di
ujung tangkai bunga atau mekar satu-satu (Nursandi 1997).
Kultur Jaringan Anggrek
Kultur jaringan tanaman adalah metode atau teknik mengisolasi jaringan,
organ, sel maupun protoplas tanaman, menjadikan eksplan dan menumbuhkannya
ke dalam media pertumbuhan yang aseptik sehingga eksplan tersebut dapat
tumbuh dan berkembang, berorganogenesis dan dapat beregenerasi menjadi
tanaman sempurna. Teknik kultur jaringan beranjak dari teori totipotensi (total genetic potensial) yang dikemukakan oleh Sleiden dan Schwan pada tahun 1838. Menurut teori ini sel tanaman adalah suatu unit yang otonom yang didalamnya
mengandung material genetik lengkap, sehingga apabila ditumbuhkan didalam
lingkungan tumbuh yang sesuai akan tumbuh dan bregenerasi menjadi tanaman
lengkap/utuh (Mattjik 2005).
Menurut Yusnita (2003) kultur jaringan dapat digunakan untuk keperluan ;
menyimpan plasma nutfah, menyelamatkan embrio, memperbanyak klonal
tanaman, manipulasi kultur protoplas, merekayasa genetik tanaman, memproduksi
tanaman haploid, dan menginduksi ragam somaklonal. Perbanyakan tanaman
secara kultur jaringan sangat bermanfaat untuk memperbanyak tanaman
introduksi, tanaman klon unggul baru, dan tanaman bebas patogen yang perlu
diperbanyak dalam jumlah besar dalam waktu relatif singkat. Aklimatisasi planlet
tanaman yang digunakan sebagai eksplan, perlu memperhatikan umur fisiologis
dan ontogenetik tanaman induk, serta ukuran eksplan karena ini merupakan faktor
penting dalam kultur jaringan. Eksplan yang digunakan pada umumnya adalah
bagian tunas pucuk (tunas apikal) atau mata tunas lateral pada potongan batang
berbuku dan bagian daun.
Pada kultur jaringan penyimpangan dalam proses mitosis tetap dapat terjadi.
Penyimpangan mitosis ini akan mengakibatkan perubahan genetika sehingga
tanaman baru yang dihasilkan tidak sama dengan induknya (ragam somaklonal).
Ragam somaklonal didefinisikan sebagai ragam genetik dari tanaman yang
dihasilkan oleh sel somatik tanaman yang ditumbuhkan secara in vitro (Mattjik 2005).
Perbanyakan anggrek dapat dilakukan secara generatif maupun vegetatif.
Secara generatif, perbanyakan dilakukan melalui proses perkecambahan biji
anggrek secara in vitro yang diawali dengan penanaman biji dengan cara penaburan biji pada media padat atau cair. Biji tersebut dapat ditumbuhkan
langsung menjadi planlet. Secara vegetatif perbanyakan dapat dilakukan
menggunakan bagian somatis tanaman melalui subkultur yang ditanam dalam
media tanam sehingga tumbuh menjadi PLB (protocorm like bodies) dan kemudian diregenerasikan menjadi planlet. Hal tersebut dapat dilakukan melalui
modifikasi media baik hormon maupun nutrisi (Hendaryono 2000).
Penyakit busuk lunak (Erwinia carotovora pv. carotovora)
Penyakit busuk lunak (soft root) biasanya banyak dijumpai menyerang pada tanaman kentang, akan tetapi penyakit ini juga menyerang tanaman-tanaman
lainnya seperti anggrek. Penyakit ini disebabkan oleh bakteri Erwinia carotovora
pv. carotovora. Pada tanaman anggrek penyakit ini dapat menyebar dan berkembang dengan pesat terutama pada bibit anggrek/umur muda (Janse 2006).
Penyakit ini juga dapat menyebabkan kerusakan hingga 80%-100% pada
pembibitan anggrek, sehinggga sangat merugikan pada budidaya anggrek
Bakteri Erwinia carotovora adalah satu-satunya bakteri patogenik tumbuhan yang bersifat anaerob fakultatif. Bakteri ini berbentuk batang lurus dengan
ukuran 0,5-1,0 kali 1,0-3,0 µm, motil dengan beberapa sampai banyak bulu
cambuk peritrik. Erwinia tidak menghasilkan enzim pektik dan menyebabkan penyakit nekrosis atau layu (kelompok “amylovora”), sedangkan Erwinia yang lain mempunyai aktivitas pektolitik yang kuat dan menyebabkan busuk lunak
pada tumbuhan, kelompok “caratovora” (Agrios 1996).
Penyakit busuk lunak dapat terjadi pada setiap fase pertumbuhan tanaman
dan akan menyebar, terutama bila kelembaban udara tinggi. Infeksi Erwinia
carotovora akan menyebabkan pembusukan pada jaringan parenkim. Pada tanaman kentang, luka berlendir seringkali menyebabkan batang menjadi lunak
secara cepat karena umbi bibit yang membusuk dan infeksi pada tunas muda atau
stolon yang lanjut, sehingga dapat menyebabkan kematian pada tanaman. Bakteri
ini juga dapat masuk melalui lentisel. Busuk lunak sering dipicu oleh kerusakan
mekanik atau kerusakan oleh serangan hama atau penyakit lainya (Astuti 2004).
Gejala Penyakit
Pada tanaman anggrek, bakteri Erwinia carotovora pada umumnya masuk
ke dalam jaringan tanaman melalui luka-luka dan menyebabkan busuk lunak yang
berkembang dengan pesat terutama pada masa pembibitan. Gejala pada anggrek
yang terserang ditandai dengan timbulnya bercak yang berwarna coklat
kehitaman, kemudian daun menjadi berair, lembek, turgornya hilang, dan
mengeluarkan bau busuk. Pada jaringan muda yang lunak pembusukan terjadi
dengan pesat, tetapi pada bagian yang lebih dewasa khususnya pada umbi semu
atau akar rimpang, pembusukan berkembang lebih lambat. Pada lingkungan yang
lembab penyakit ini mudah sekali meluas dan menjalar sampai ke pucuk tanaman
atau titik tumbuh, sehingga dapat menyebabkan kematian pada tanaman dengan
Penyakit busuk lunak dapat ditularkan melalui berbagai cara yaitu infeksi
antar tanaman, air, lubang-lubang alami, peralatan yang telah terinfeksi, dan
serangga. Bakteri Erwinia carotovora dapat bertahan dalam usus serangga selama beberapa jam, sehingga dapat dipindahkan secara mudah oleh serangga (Astuti
2004).
Pemuliaan Tanaman Anggrek
Pemuliaan tanaman untuk merakit suatu varietas unggul merupakan proses
berkelanjutan dan pemuliaan tanaman sangat erat hubunganya dengan kegiatan
seleksi. Pada dasarnya, pemuliaan tanaman dapat dilakukan dengan 1) melakukan
seleksi terhadap suatu populasi tanaman yang sudah ada, 2) melakukan kombinasi
sifat-sifat yang diinginkan secara generatif, 3) melakukan penggandaan kromosom
dan/atau mutasi sebelum melakukan seleksi, 4) melalui rekayasa genetika
(Mangoendidjojo 2003).
Pemuliaan anggrek secara konvensional biasanya dilakukan melalui
persilangan. Tujuan persilangan selain untuk mendapatkan tanaman anggrek yang
memiliki keindahan bunganya, juga bertujuan untuk mendapatkan tanaman
anggrek yang memiliki sifat tahan terhadap serangan hama dan penyakit. Tetapi
perbanyakan anggrek dengan biji (generatif) pada umumnya sangat sulit
dilakukan di lapangan, hal ini disebabkan biji anggrek tidak memiliki cadangan
makanan (endosperm) dan hanya tediri dari embrio dan kulit pembungkus (testa)
serta biji anggrek sulit berkecambah apabila lingkungan kurang mendukung. Oleh
karena itu pembibitan anggrek secara in vitro merupakan alternatif yang tepat untuk mengatasi kendala tersebut (Hendaryono 2000, Puspaningtyas 2003).
Seleksi In Vitro
Pemanfaatan hasil persilangan dalam pemuliaan awalnya dengan
mendorong terjadinya penggabungan sifat-sifat tetua dan mendapatkan ragam
kemudian dilakukan seleksi terhadap tanaman yang memiliki sifat-sifat tertentu.
Melalui persilangan diharapkan tetua yang memiliki sifat menguntungkan dapat
diturunkan dan ragam yang dihasilkan dari hasil persilangan secara terarah dapat
diseleksi menggunakan suatu agensia penyeleksi untuk mendapatkan tanaman
anggrek Phalaenopsis yang tahan terhadap penyakit busuk lunak dapat dilakukan melalui seleksi in vitro. Bakteri Erwinia carotovora pv. carotovora
diinokulasikan ke dalam jaringan tanaman anggrek (daun), dan berdasarkan
analisis tingkat intensitas serangannya maka setiap populasi dapat dipisahkan dan
dikelompokkan berdasarkan tingkat ketahanannya terhadap agensia penyeleksi
(Matsumoto et al. 1995, Mangoendidjojo 2003, Yusnita 2005)
Uji ketahanan dengan seleksi in vitro merupakan seleksi awal yang dilakukan untuk mengetahui sifat-sifat tertentu yang diinginkan agar dapat
menghemat biaya dan waktu. Seleksi in vitro telah banyak digunakan terhadap penyakit pada berbagai jenis tanaman. Seleksi awal secara in vitro dilakukan dengan tujuan agar kegiatan pemilihan tanaman lebih efektif dan efisien. (Orlando
BAHAN DAN METODE
Tempat dan waktu Penelitian
Penelitian ini dilaksanakan di laboratorium kultur jaringan Departemen
Agronomi dan Hortikultura Faperta IPB, mulai bulan Agustus sampai September
2008.
Bahan
Tanaman yang digunakan pada penelitian ini adalah empat populasi hasil
persilangan Phalaenopsis koleksi dari Balai Penelitian Tanaman Hias, Deptan Segunung, Cianjur Jawa Barat, yaitu ;
1) Populasi 508 (hasil selfing Phalaenopsis Taisuco Kochdian)
2) Populasi 529(hasil persilangan Phalaenopsis Brother Sara Gold x Saga)
3) Populasi 655 (hasil persilangan Phalaenopsis Taisuco Kochdian/Yukimai
x Phalaenopsis Thaisuco Kochdian)
4) Populasi 688 (hasil persilangan Phalaenopsis Mary Strip/Modern Beauty x [Dor Pulcharrima x Formosa Rose/Taisuco Rosemary])
Jenis bakteri Erwinia yang digunakan adalah bakteri Erwinia carotovora yang
berasal dari tanaman Phalainopsis yang terkena busuk lunak. Bahan yang digunakan antara lain spirtus, alkohol 70%, dan kertas koran.
Metode
Penelitian ini adalah Percobaan faktorial dengan tiga faktor yaitu 1) Jenis
populasi angrek, 2) Konsentrasi bakteri Erwinia carotovora dan 3) Cara inokulasi. Penelitian disusun dalam Rancangan Acak Lengkap (RAL). Faktor populasi
anggrek terdiri atas empat taraf yaitu populasi 508, 529, 655, dan 688. Faktor
konsentrasi bakteri Erwinia carotovora terdiri atas dua taraf yaitu 109 cfu/ml dan 1010
Yijk = µ + αi + βj+ τk + (αβ)ij + (ατ)ik + (βτ)jk +(αβτ)ijk +εijk
cfu/ml (cfu : colony forming units). Faktor cara inokulasi terdiri atas dua taraf yaitu dengan pelukaan yang dilakukan pada daun dan tanpa pelukaan. Jumlah
perlakuan terdiri dari 16 kombinasi dan diulang 8-10 kali (botol) dimana setiap
Keterangan
Yijk : Nilai pengamatan karena faktor populasi pada taraf ke i, faktor
konsentrasi Erwinia ke j, faktor cara inokulasi ke k dan ulangan ke l
µ : Nilai rataan umum
αi : Pengaruh perlakuan populasi pada taraf ke i
βj : Pengaruh perlakuan konsentrasi Erwinia carotovora ke j τk : Pengaruh cara inokulasi ke k
(αβ)ij : Pengaruh interaksi antara faktor populasi dan faktor konsentrasi Erwinia
carotovora
(ατ)ik : Pengaruh interaksi antara faktor populasi dan faktor cara inokulasi
(βτ)jk : Pengaruh interaksi antara faktor konsentrasi bakteri Erwinia carotovora
dan cara inokulasi
(αβτ)ijk: Pengaruh interaksi antara faktor populasi, faktor konsentrasi bakteri
Erwinia carotovora dan faktor cara inokulasi.
εijkl : Pengaruh acak dari faktor populasi pada taraf ke I, faktor konsentrasi
Erwinia carotovora pada taraf ke j, faktor cara inokulasi pada taraf ke k dan ulangan ke l
Data yang diperoleh diuji secara statistik dengan uji F melalui analisis
ragam ANOVA dengan uji lanjut DMRT pada taraf nyata 5%.
Pelaksanaan 1. Persiapan Tanaman
Tanaman Phalaenopsisin vitro yang digunakan adalah yang telah berumur delapan bulan sejak biji disemai, minimal memiliki dua daun panjang sekitar 2.5
cm yang telah membuka sempurna dan dalam kondisi sehat. Setiap botol dipilih
3-7 tanaman, kemudian setiap tanaman yang digunakan diberi tanda dengan
menggunakan spidol pada botol.
2. Persiapan Inokulum
Isolat (biakan murni) Erwinia carotovora yang digunakan berasal dari koleksi Laboratorium Kultur Jaringan Balai Penelitian Tanaman Hias, Deptan
yang telah tersedia kemudian sebagian diencerkan untuk mendapatkan konsentrasi
109 cfu/ml. Pengenceran untuk mendapatkan konsentrasi 109 cfu/ml, dilakukan dengan cara mengambil 10 ml isolat bakteri asal diencerkan hingga 100 ml
menggunakan aquades seteril di dalam gelas gelas ukur. Konsentrasi inokulum
yang digunakan dalam penelitian ini yaitu 109 cfu/ml dan 1010
3. Perlakuan
cfu/ml.
Tanaman anggrek yang telah dsiapkan kemudian diinokulasi bakteri
Erwinia carotovora dengan cara 1) Melukai bagian daun (setiap helai daun ditusuk sebanyak tiga tusukan) menggunakan jarum yang telah dicelupkan pada
bakteri Erwinia carotovora dan 2) Membasahi daun anggrek sebanyak 1 ml dengan bakteri Erwinia carotovora menggunakan pipet, kedua perlakuan ini dilakukan di dalam kotak tanam.
4. Pengamatan
Pengamatan dilakukan setiap hari setelah inokulasi selama 10 hari. Anggrek
yang telah diinokulasi diamati perkembangan serangan bakteri pada daun dengan
mengamati gejalanya (busuk lunak yang berwarna coklat kehitaman dan agak
basah/agak berlendir pada daun yang terserang). Peubah yang diamati meliputi :
1) Masa inkubasi yaitu selang waktu dari awal inokulasi hingga timbulnya
gejala pada anggrek ,
2) Lebar serangan yaitu persentase luas daun yang terserang terhadap lebar
setiap daun, dan
3) Persentase tanaman anggrek yang terserang Erwinia carotovora yaitu jumlah anggrek yang terserang setelah 10 hari pengamatan. Intensitas serangan
penyakit busuk lunak dihitung dengan rumus yang dikemukakan oleh Norman et al. dalam Balithi (2006):
�
=
∑(���)Dimana ;
I : Intensitas serangan
N : Jumlah daun total
n : Jumlah daun terserang pada tiap nilai sekala
v : Nilai skala untuk setiap daun
Z : Nilai skala tertinggi.
∑ : Jumlah nilai skala pada setiap daun selama masa inkubasi Penentuan nilai skala (v) sebagai berikut ;
Nilai
0 : Tanpa gejala
1 : Bercak kecil pada luasan 1% dari luas daun
3 : Bercak 2 % - 10 % dari luas daun
5 : Bercak agak meluas 11 % - 25 % dari luas daun
7 : Bercak meluas 26 % - 50 % dari luas daun
9 : Bercak melebar > 50% dari luas daun
Cara pengamatan yaitu :
1. Melihat apakah terdapat gejala atau tidak, hal ini untuk menentukan
nilai skala 0 (tanpa gejala) dan skala 1 (Bercak kecil pada luasan 1%
dari luas daun).
2. Apabila terdapat gejala dan gejala tersebut meluas, maka persentase
tingkat serangan diukur dengan cara membandingkan luasan serangan
dengan luas daun yaitu ;
a. Menentukan nilai skala 3 (Bercak 2 % - 10 % dari luas daun) :
Luas daun seolah-olah dibagi 10 bagian yang sama, kemudian satu
bagian luasan tersebut dibandingkan dengan luasan serangan,
apakah serangan mencapai luasan tersebut atau tidak, jika luas
serangan melebihi maka serangan termasuk pada skala 5,
b. Menentukan nilai skala 5 (Bercak 11 % - 25 % dari luas daun) :
Luas daun seolah-olah dibagi 4 bagian yang sama, kemudian satu
bagian luasan tersebut dibandingkan dengan luasan serangan,
apakah serangan mencapai luasan tersebut atau tidak, jika luas
c. Menentukan nilai skala 7 (Bercak 26 % - 50 % dari luas daun) :
Luas daun seolah-olah dibagi 2 bagian yang sama, kemudian satu
bagian luasan tersebut dibandingkan dengan luasan serangan,
apakah serangan mencapai luasan tersebut atau tidak, jika luas
serangan melebihi maka serangan termasuk pada skala 9,
d. Menentukan nilai skala 9 (Bercak > 50 % dari luas daun) : Luas
daun seolah-olah dibagi 2 bagian yang sama, kemudian satu
bagian luasan tersebut dibandingkan dengan luasan serangan, luas
serangan tersebut harus telah melebihi setengah bagian daun.
Selanjutnya berdasarkan intensitas serangan tersebut, tingkat ketahanan
[image:35.595.109.513.352.506.2]Phalaenopsis terhadap penyakit busuk lunak ditentukan berdasarkan kriteria yang dikemukakan oleh Handayani (2004) dalam Balithi (2006) (Tabel 1).
Tabel 1 klasifikasi ketahanan tanaman terhadap intensitas serangan penyakit Intensitas Serangan Penyakit (I) Klasifikasi Ketahanan
0 % Imun
0 % < x ≤ 10 % Resisten
10 % < x ≤ 20 % Agak Resisten
20 % < x ≤ 40 % Agak Rentan
40 % < x ≤ 60 % Rentan
60 % < x Sangat Rentan
Menurut Sinaga (2006) tanaman dikategorikan imun apabila tanaman
bebas dari infeksi, dalam hal ini hubungan patogen dengan inang meliputi
ketahanan yang absolut yang dilakukan oleh inang. Resisten/ketahanan yaitu
ukuran kemampuan inang tanaman dalam menghambat serangan pathogen.
Tanaman dikategorikan resisten apabila infeksi pathogen menyebabkan gejala
serangan penyakit pada tanaman akan tetapi tanaman dapat meghambat
infeksi/serangan patogen sehingga infeksi tidak dapt berkembang meluas
HASIL DAN PEMBAHASAN
1. Kondisi Umum
Tanaman Phalaenopsis pada setiap botol tidak digunakan seluruhnya, hanya 3-7 tanaman (disesuaikan dengan keadaan tanaman). Hal ini disebabkan oleh
pertumbuhan tanaman yang tidak merata dimana banyak tanaman anggrek yang
masih terlalu kecil.
[image:36.595.113.513.379.571.2]Bakteri patogen yang dipakai adalah bakteri Erwinia yang telah teridentifikasi (dalam laboratorium) baik jenis yaitu Erwinia carotovora, maupun jumlahnya. Bakteri tersebut juga telah teruji dapat menginfeksi (virulen) dan menyebabkan penyakit busuk lunak (soft-rot) pada umbi kentang (Gambar 1). Bakteri Erwinia carotovora memiliki aktivitas pektolitik yang kuat dan dapat menyebabkan penyakit busuk lunak (Agrios 1996).
Gambar 1. Uji virulensi Erwinia carotovora, A : Umbi kentang normal, B : Umbi kentang terinfeksi bakteri Erwinia carotovora
Hasil analisis sidik ragam menunjukkan bahwa perlakuan populasi, cara
inokulasi, interaksi populasi dengan konsentrasi bakteri, dan interaksi populasi
dengan cara inokulasi berpengaruh sangat nyata terhadap intensitas serangan
penyakit busuk lunak pada Phalaenopsis. Hasil perlakuan tunggal konsentrasi bakteri, konsentrasi bakteri dengan cara inokulasi, dan populasi dengan
konsentrasi bakteri dengan cara inokulasi tidak berpengaruh nyata terhadap
intensitas serangan pada Phalaenopsis (Tabel 2).
Tabel 2 Hasil analisis sidik ragam perlakuan terhadap intensitas serangan
Peubah Intensitas Serangan (%)
Jenis Populasi **
Konsentrasi Bakteri tn
Cara Inokulasi **
Jenis Populasi x Konsentrasi Bakteri **
Jenis Populasi x Cara Inokulasi **
Konsentrasi Bakteri x Cara Inokulasi tn
Jenis Populasi x Konsentrasi Bakteri x Cara Inokulasi tn
Keterangan : ** = sangat nyata, tn = tidak nyata pada α = 5 %
2. Pengaruh Jenis Populasi Anggrek terhadap Intensitas Serangan Bakteri Erwinia carotovora
Jenis populasi menunjukan pengaruh yang nyata terhadap intensitas
serangan penyakit. Populasi 508 merupakan populasi paling tidak tahan terhadap
serangan bakteri Erwinia carotovora dengan rata-rata intensitas serangan sebesar 41.5%, dibandingkan dengan populasi 529, 655 dan 688 dengan rata-rata
intensitas serangan berturut-turut 27.7%, 27.4% dan 26,5%. Berdasarkan tingkat
ketahanan terhadap penyakit busuk lunak, populasi 508 merupakan populasi yang
rentan sedangkan populasi 529, 655, dan 688 termasuk populasi yang agak rentan
(Tabel 3).
Berdasarkan kejadian penyakit setelah 10 hari pengamatan, menunjukkan
bahwa bakteri Erwinia carotovora dapat menginfeksi dan menyebabkan penyakit busuk lunak pada tanaman Phalaenopsis sehingga sebagian besar tanaman terkena penyakit busuk lunak (98%-100%). Intensitas serangan dari masing-masing
individu tanaman pada setiap populasi sangat bervariasi. Hal ini dapat dilihat pada
setiap populasi kisaran intensitas serangan berbeda. Populasi 508 kisaran
intensitas serangan antara 24.4% sampai 91.1%, sedangkan populasi 529, 655,
dan 688 dengan kisaran intensitas serangan berturut-turut antara 8.9% sampai
Tabel 3 Pengaruh jenis populasi terhadap intensitas serangan pada daun anggrek
Phalaenopsis pada 10 hari pengamatan Jenis
Populasi
Kejadian Penyakit pada 10 Hsi
(%)
Interval Intensitas Serangan
(%)
Rata-rata Intensitas Serangan
(%)
Tingkat Ketahanan
508 100 24.4 – 91.1 41.5 a Rentan
529 100 20.0 – 77.8 27.7 b Agak Rentan
655 99.0 0.0 – 77.8 27.4 b Agak Rentan
688 98.3 0.0 – 77.8 26.5 b Agak Rentan
Keterangan : Nilai pada baris perlakuan yang sama diikuti huruf yang sama tidak berbeda nyata menurut uji Duncan Multiple Range Test (DMRT) pada taraf nyata 5%; Hsi : hari setelah inokulasi
Gejala penyakit yang disebabkan oleh Erwinia carotovora pada bibit anggrek dicirikan oleh terdapatnya bercak coklat kehitaman yang lunak, berlendir
disertai bau yang khas (busuk) dan terus meluas pada masa inkubasi. Penyakit ini
dapat menyebar dengan cepat karena pada bibit anggrek yang masih muda banyak
terdapat jaringan lunak. Perlakuan dilakukan pada daun anggrek, akan tetapi
dalam perkembangannya penyakit ini juga menyerang batang dan akar dengan
cepat dan menyebabkan kematian pada bibit anggrek. Berdasarkan hasil penelitian
menunjukkan bahwa semua populasi yang diuji (populasi 508, 529, 655 dan 688)
merupakan populasi yang berdasarkan tingkat intensitas serangan tergolong tidak
tahan terhadap serangan penyakit busuk lunak (rata-rata intensitas serangan >
20%).
Setiap populasi yang diseleksi memiliki koefisien keragaman yang besar
(> 20%). Nilai koefisien keragaman tiap-tiap populasi menunjukan bahwa pada
setiap perlakuan populas memiliki ragam yang tinggi terhadap penyakit busuk
lunak. Ragam tersebut tercermin pada hasil respon setiap tanaman terhadap
intensitas serangan. Berdasarkan hasil nilai ragam, berturut-turut dari populasi
yang memiliki ragam tertinggi yaitu populasi 655, 688, 529, dan 508 dengan nilai
Tabel4 Perbandingan nilai koefisien keragaman tiap populasi Phalaenopsis pada inokulasi dengan pelukaan terhadap intensitas serangan
Populasi Koefisien Keragaman (%)
508 36.6
529 45.8
655 54.1
688 46.7
Ragam yang tinggi pada setiap populasi terhadap intensitas serangan
bakteri Erwinia carotovora, memberikan kemungkinan adanya tanaman yang tahan terhadap serangan penyakit busuk lunak. Selanjutnya jika dikaitkan dengan
tingkat ketahanan tanaman terhadap penyakit busuk lunak, hasil seleksi individu
mengindikasikan masing-masing tanaman baik dalam populasi yang sama
maupun antar populasi memiliki tingkat ketahanan yang berbeda terhadap
penyakit busuk lunak. Perlakuan konsentrasi inokulum 109
Hasi seleksi pada konsentrasi bakteri Erwinia carotovora 10
cfu/ml pada populasi
655 ditemukan enam tanaman Phalaenopsis yang memiliki ketahanan dengan kategori imun (satu tanaman), resisten (dua tanaman) dan agak resisten (tiga
tanaman) (Lampiran 3). Pada populasi 688 terdapat tiga genotip yang tahan yaitu
imun (satu tanaman), resisten (satu tanaman) dan agak resisten (satu tanaman)
(Lampiran 4).
10
cfu/ml,
populasi 529 ditemukan empat tanaman Phalaenopsis yang memiliki ketahanan dengan kategori resisten (satu tanaman) dan agak resisten (tiga tanaman)
(Lampiran 6), pada populasi 688 terdapat dua genotip tahan yaitu kategori resisten
(satu tanaman) dan agak resisten (satu tanaman) (Lampiran 8). Tanaman yang
tahan tersebut menunjukkan perkembangan intensitas serangan yang lambat atau
tanaman tidak terserang (luka mengering) atau serangan bakteri Erwinia
carotovora tidak menyebabkan infeksi terhadap tanaman yang tahan, sehingga tanaman tersebut tidak terserang penyakit busuk lunak. Terdapatnya tanaman
imun dan resisten menunjukan bahwa ragam yang tinggi memberikan peluang
terdapatnya tanaman terpilih. Tanaman terplih tersebut merupakan kandidat
tanaman tahan penyakit terhadap penyakit busuk lunak, kemudian tanaman
[image:39.595.114.510.112.219.2]kestabilan sifat ketahanannya. Gambar 2 merupakan salah satu contoh tanaman
pada setiap populasi setelah 10 hari inokulasi bakteri Erwinia Carotovora dengan cara pelukaan pada daun Phalainopsis.
[image:40.595.114.512.151.453.2]
Gambar 2. Tanaman anggrek Phalaenopsis setelah 10 hari pengamatan pada setiap popupasi
Perbedaan antara tanaman yang tahan dan tidak tahan terhadap penyakit
busuk lunak dapat dilihat pada Gambar 3. Gambar 3 A menunjukan daun anggrek
Phalaenopsis yang tidak tahan terhadap serangan bakteri Erwinia carotovora
lunak dan intensitas serangannya telah meluas. Gambar 3 B menunjukan daun
anggrek Phalaenopsis tahan terhadap serangan bakteri Erwinia carotovora, meskipun telah diinokulasi menggunakan jarum yang telah dicelupkan ke dalam
bakteri Erwinia carotovora akan tetapi bakteri tersebut tidak dapat menginfeksi dan luka pada daun mengalami penyembuhan.
508
529
Gambar 3. A : anggrek Phalaenopsis yang tidak tahan terhadap serangan bakteri
Erwinia carotovora, B : anggrek Phalaenopsis yang tahan terhadap serangan bakteri Erwinia carotovora
Perbandingan intensitas serangan setiap populasi pada cara inokulasi yang
berbeda, menunjukkan adanya perbedaan yang signifikan pada cara inokulasi
dengan pelukaan dan tanpa pelukaan. Inokulasi bakteri Erwinia carotovora
melalui pelukaan menghasilkan intensitas serangan sangat tinggi dibandingkan
dengan tanpa pelukaan. Populasi 508 menunjukan tingkat respon terhadap
intensitas serangan tertinggi baik pada cara inokulasi dengan pelukaan maupun
tanpa pelukaan, hal ini menunjukan bahwa populasi 508 merupakan populasi yang
paling rentan terhadap serangan penyakit busuk lunak (Gambar 4 dan 5).
Gambar 4. Intensitas serangan pada setiap populasi dengan cara inokulasi melalui pelukaan
A
B
65.6
54.4
45.7
51.5
0 10 20 30 40 50 60 70
508 529 655 688
Int
e
nsi
tas
Se
r
an
gan
%
[image:41.595.113.514.474.692.2]Gambar 5. Intensitas serangan pada setiap populasi dengan cara inokulasi tanpa pelukaan
Mekanisme ketahanan yang terjadi pada tanaman yang resisten terhadap
penyakit busuk lunak diduga berhubungan dengan reaksi pertahanan nekrotik
yaitu patogen mungkin mempenetrasi dinding sel, tetapi segera setelah patogen
kontak dengan protoplasma sel, reaksi hipersensitif menyebabkan hancurnya
semua membran seluler dari sel-sel yang kontak dengan bakteri, dan kemudian
diikuti dengan pengeringan dan nekrosis jaringan daun yang terserang bakteri
tersebut. Resistensi terhadap penyakit busuk lunak diduga berhubungan dengan
reaksi detoksifikasi salah satu faktor patogenitas yaitu kutinase yang dapat
merombak kutin yang merupaka komponen utama kutikula, serta pektinase yang
dapat menguraikan zat pektik yang merupakan penyusun utama dinding sel dan
lamella tengah pada tumbuhan (Agrios 1996). Resistensi tersebut diwujudkan
dalam berbagai mekanisme, misalnya modifikasi dinding sel, induksi sintesis
enzim yang terlibat dalam biosintesis fitoaleksin, sintesis enzim hidrolitik dan
sintesis inhibitor bermacam-macam proteinase (Yuwono 2006). 6.6
0.2
0.8
0.2 0
1 2 3 4 5 6 7
508 529 655 688
Int
e
nsi
tas
Se
r
an
gan
%
3. Pengaruh Konsentrasi Bakteri terhadap Intensitas Serangan Bakteri Erwinia carotovora pada daun Phalaenopsis
Perlakuan konsentrasi bakteri tidak berpengaruh nyata terhadap intensitas
serangan, dengan kata lain penggunaan konsentrasi bakteri 109 cfu/ml dan 1010
Tabel 5 Pengaruh konsentrasi bakteri terhadap intensitas serangan pada daun
Phalaenopsis
cfu/ml menunjukkan hasil yang tidak berbeda terhadap tingkat intensitas serangan
bakteri (Tabel 5).
Konsentrasi Bakteri Intensitas Serangan (%)
109 10
cfu/ml
10
31.421 a
cfu/ml 30.701 a
Keterangan : Nilai pada baris perlakuan yang sama diikuti huruf yang sama tidak berbeda nyata menurut uji Duncan Multiple Range Test (DMRT) pada taraf nyata 5 %.
Hasi perlakuan konsentrasi bakteri terhadap intensitas serangan menunjukan
bahwa intensitas serangan bakteri Erwinia carotovora pada daun Phalaenopsis,
tidak ditentukan oleh konsentrasi inokulum akan tetapi dipengaruhi oleh virulensi
bakteri Erwinia carotovora dalam menginfeksi jaringan anggrek Phalaenosis. Bakteri Erwinia carotovora memiliki aktivitas pektolitik yang kuat dan dapat menyebabkan penyakit busuk lunak (Agrios 1996).
4. Pengaruh Cara Inokulasi terhadap Intensitas Serangan Bakteri Erwiniacarotovora pada daun Phalaenopsis.
Perlakuan cara inokulasi berpengaruh sangat nyata terhadap intensitas
serangan bakteri Erwinia carotovora pada daun anggrek Phalaenopsis. Cara inokulasi dengan pelukaan menyebabkan intensitas serangan bakteri tinggi yaitu
54.1%, sedangkan inokulasi tanpa pelukaan intensitas serangannya kecil yaitu
1.9% (Tabel 6).
Tabel 6 Pengaruh cara inokulasi terhadap intensitas serangan pada daun
Phalaenopsis
Cara Inokulasi Intensetas serangan (%)
Pelukaan Tanpa Pelukaan
54.1 a 1.9 b
[image:43.595.110.510.649.729.2]Berdasarkan hasil penelitian, bakteri Erwinia carotovora dapat dengan mudah menyerang daun Phalaenopsis melalui pelukaan dan hanya beberapa tanaman mengalami serangan Erwinia carotovora tanpa melalui pelukaan.
Perbandingan perlakuan cara inokulasi terhadap rata-rata intensitas serangan
bakteri Ewinia carotovora pada tiap populasi, menunjukan bahwa intensitas serangan tertinggi terdapat pada cara inokulasi melalui pelukaan (Gambar 6).
Gambar 6. Pengaruh cara inokulasi terhadap intensitas serangan pada setiap populasi
66.3
53.3
44.7
51.5
6.6
0.2 0.8 0.2
0 10 20 30 40 50 60 70
508 529 655 688
Int
e
ns
it
a
s S
e
ra
ng
a
n %
Populasi
[image:44.595.115.510.213.705.2]Setelah satu hari inokulasi, daun Phalaenopsis yang diinokulasi dengan pelukaan pada umumnya menunjukkan gejala serangan bakteri Erwinia carotovora dengan skala 1 (bercak kecil berwarna coklat kehitaman), kemudian serangan terus berkembang hingga pengamatan hari kesepuluh. Semua populasi
menunjukkan respon yang sama terhadap intensitas serangan penyakit busuk
lunak yaitu perkembangan serangan penyakit terus meluas seiring dengan
bertambahnya waktu. Laju perkembangan serangan penyakit tertinggi terdapat
pada populasi 508 dan laju perkembangan serangan bakteri terkecil terdapat pada
[image:45.595.114.512.282.548.2]populasi 655 (Gambar 7).
Gambar 7. Grafik perkembangan serangan pada inokulasi melalui pelukaan
Setiap populasi memiliki tingkat ketahanan yang berbeda. Tingkat
ketahanan setiap populasi diduga dipengaruhi oleh sifat pertahanan struktural
yang terdapat pada tumbuhan tanaman, yang diduga diwariskan dari tetua.
Interaksi antara populasi dengan konsentrasi membuktikan bahwa bakteri Erwinia
carotovora merupakan bakteri patogen yang dapat menginfeksi daun tanaman anggrek secara nyata dan mengakibatkan penyakit busuk lunak (soft-rot) pada daun bibit anggrek Phalaenopsis.
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
Int
ens
it
as
Se
ran
gan
%
Masa Inkubasi (hari)
508
529
655
688
100
80
60
40
Bakteri Erwinia carotovora pada umumnya masuk ke dalam tanaman anggrek melalui luka-luka dan menyebabkan busuk lunak yang berkembang
dengan pesat terutama pada masa pembibitan. Melalui perlakuan pelukaan pada
daun dengan menggunakan jarum yang telah dicelupkan kedalam bakteri Erwinia carotovora menunjukkan pengaruh yang sangat nyata terhadap inveksi bakteri terhadap daun bibit Phalaenopsis. Berdasarkan hasil dari hari pertama pengamatan hingga hari kesepuluh, tiap populasi menunjukkan respon yang
positif terhadap perkembangan intensitas serangan penyakit. Terutama pada
populasi 508 menunjukkan respon terbesar terhadap serangan penyakit, hal ini
menunjukkan populasi ini merupakan populasi yang paling rentan terhadap
serangan penyakit busuk lunak dibanding dengan populasi yang lain, sedangkan
pada populasi 655 menunjukkan nilai intensitas serangan terkecil.
Masuknya bakteri Erwinia carotovora pada perlakuan cara inokulasi tanpa pelukaan diduga melalui lubang alami pada jaringan tanaman Phalaenopsis. Penyakit busuk lunak dapat ditularkan melalui berbagai cara yaitu infeksi antar
tanaman, air, lubang-lubang alami, peralatan yang telah terinfeksi, dan serangga.
Bakteri Erwinia carotovora dapat bertahan dalam usus serangga selama beberapa
jam, sehingga dapat dipindahkan secara mudah oleh serangga (Semangun 2007).
5. Interaksi Antar Perlakuan terhadap Intensitas Serangan Erwinia carotovora pada Daun Phalaenopsis
Interaksi populasi dengan konsentrasi bakteri menunjukkan hasil berbeda
nyata terhadap intensitas serangan. Interaksi populasi 508 dengan konsentrasi
bakteri respon intensitas serangannya tertinggi dan berdasarkan uji lanjut,
populasi 508 berbeda nyata terhadap populasi 529, 655 dan 688 (Tabel 7).
Tabel 7 Interaksi populasi dengan konsentrasi bakteri terhadap intensitas serangan pada daun Phalaenopsis
Konsentrasi
Inokulum (cfu/ml)
Populasi
508 529 655 688
(intensitas serangan %)
109 40.5 a 29.5 b 28.0 b 25.7 b
1010 42.8 a 26.1 b 24.9 b 29.0 b
[image:46.595.111.510.646.725.2]Salah satu mekanisme yang dimiliki oleh tanaman untuk menekan serangan
suatu patogen adalah dengan cara menghambat pertumbuhan dan perkembangan
patogen dalam jaringan yang telah terinfeksi. Tanaman resisten menggunakan
hasil metabolismenya berupa toksin untuk mempertahankan diri dari serangan
suatu patogen atau dikenal sebagai fitoaleksin (Agrios 1996). Berkaitan dengan
hasil percobaan ini dapat dikemukakan bahwa individu-individu yang
menunjukkan ketahanan tersebut diduga menghasilkan suatu senyawa toksin yang
dapat mencegah perkembangan dan pertumbuhan patogen di dalam jaringan
tanaman. Padahal patogen busuk lunak telah diinokulasikan secara langsung ke
dalam jaringan tanaman.
Interaksi populasi dan cara inokulasi menunjukkan berbeda nyata terhadap
intensitas serangan. Setiap populasi memiliki respon yang berbeda terhadap
intensitas serangaan bakteri Erwinia carotovora. Interaksi populasi 508 dengan cara inokulasi melalui pelukaan menunjukkan intensitas serangan tertinggi,
sedangkan pada populasi 655 memiliki intensitas serangan terendah (Tabel 8).
Tabel 8 Interaksi populasi dengan cara inokulasi terhadap intensitas serangan pada daun Phalaenopsis
Cara Inokulasi
(cfu/ml)
Populasi
508 529 655 688
(intensitas serangan %)
Pelukaan 65.9 a 53.3 b 44.8 c 51,5 b
Tanpa Pelukaan 6.6 d 0.2 e 0,8 e 0,2 e
Keterangan : Nilai pada baris perlakuan yang sama diikuti huruf yang sama tidak berbeda nyata menurut uji Duncan Multiple Range Test (DMRT) pada taraf nyata 5 %
Pertahanan struktural yang terdapat pada tumbuhan antara lain jumlah dan
kualitas lilin dan kutikula yang menutupi sel epidermis, struktur dinding sel
epidermis, ukuran, letak, dan bentuk stomata dan lentisel, dan jaringan dinding sel
yang tebal. Meskipun pertahanan internal ada yang telah ada sebelumnya, tetapi
sebagian besar patogen masih mampu melakukan peleburan inangnya dan
menyebabkan infeksi, oleh sebab itu biasanya tumbuhan memberikan tanggapan
dengan membentuk suatu jenis struktur atau lebih untuk mempertahankan
serangan patogen. Bentuk struktural tersebut antara lain struktur pertahanan
[image:47.595.115.511.437.525.2]structure), reaksi pertahanan sitoplasma (cytoplasmic defense reaction), nekrotik atau sistem pertahanan hipersensitif (hypersensitive defense reaction) (Agrios 1996).
Menurut Janse (2006) perkembangan penyakit yang disebabkan oleh bakteri
Erwinia carotovora tergantung pada : 1) kelembaban (air hujan, embun, air dari semprotan/penyiraman/pengairan, dan debu/tanah), 2) ketahanan varietas, umur,
vigor, dan asal bunga induk, 3) kemampuan perkembangan koloni bakteri.
4) terbawa serangga, 5) terbawa angin dari tanaman sakit/sumber penyakit,
6) suhu terutama pada tanaman muda. Melalui pengetahuan terhadap sistem
perkembangan penyakit dan akibat yang ditimbulkan, dapat membantu dalam
memprediksi dan mengendalikan penyakit.
Berdasarkan hasil penelitian dapat disimpulkan bahwa bakteri Erwinia
carotovora dapat menyebabkan penyakit busuk lunak pada daun bibit
Phalaenopsis. Penyakit ini pada umumnya menyerang melalui pelukaan, akan tetapi penyakit ini juga dapat menyerang bibit Phalaenopsis tanpa pelukaan. Masuknya inveksi bakteri Erwinia carotovora tanpa pelukaan diduga melalui lubang-lubang alami. Cara mendapatkan tanaman yang tahan terhadap penyakit
busuk lunak, dapat menggunakan metode seleksi in vitro dengan agensia penyeleksi (bakteri Erwinia carotovora) yang telah terbukti virulen. Berdasarkan hasil dari keempat populasi yang diuji terhadap tingkat ketahanan terhadap
penyakit busuk lunak (intensitas serangan), menunjukkan bahwa populasi 508 merupakan populasi yang rentan (40% < x ≤ 60%) dan populasi 529, 655, dan 688 termasuk ke dalam populasi yang agak rentan (20% < x ≤ 40%).
Berdasarkan kejadian penyakit setelah sepuluh hari masa inkubasi,
menunjukan penyakit ini melalui pelukaan dapat menyerang bibit Phalaenopsis
hingga 98% - 100%. Hasil analisis ragam pada populasi yang diuji, menunjukkan
setiap populasi memiliki koefisien keragaman yang tinggi (>20%). Nilai koefisien
keragaman menunjukan nilai ragam dalam populasi dan ragam yang tinggi
memberikan peluang adanya kemungkinan terdapatnya tanaman yang tahan, hal
ini terbukti dengan didapatnya beberapa tanaman yang tergolong imun (dua
tanaman) dan resisten (lima tanaman) terhadap penyakit busuk lunak, akan tetapi
mengetahui kestabilan sifat ketahanan terhadap penyakit busuk lunak baik dalam
kultur maupun diluar kultur (alam), dan pada akhirnya kegiatan pemuliaan ini
harus memperhatikan apakah tanaman hasil seleksi tersebut memiliki nilai
ekonomis atau tidak.
Metode seleksi in vitro juga telah banyak dilakukan untuk mendapatkan tanaman yang tahan terhadap serangan hama dan penyakit baik pada tanaman
hortikultura maupun pada tanaman perkebunan, antara lain pada tanaman abaka
yang tahan terhadap layu fusarium yang disebabkan oleh Fusarium oxysporum
f.sp. cubeuse (Purwati 2007), kacang tanah resisten penyakit busuk batang yang disebabkan oleh infeksi Sclerotium rolfsii (Hemon 2006), tebu toleran terhadap fitotoksin yang dihasilkan oleh Dreehslera sacchari (toksin DS) (Purwati 2007), dan kentang tahan layu bakteri yang disebabkan oleh Ralstonia solanaccarum
KESIMPULAN DAN SARAN
Kesimpulan
1. Untuk mengevaluasi respons ketahanan populasi Phalaenopsis secara in vitro terhadap penyakit busuk lunak yang disebabkan oleh bakteri Erwinia
carotovora, metode inokulasi yang paling efektif adalah dengan cara melukai daun dengan jarum yang telah dicelupkan dalam bakteri Erwinia
carotovora.
2. Populasi 508 berdasarkan intensitas serangan tergolong populasi yang
rentan sedangkan populasi 529, 655, dan 688 tergolong populasi agak
rentan.
3. Terdapat dua tanaman yang imun dan lima tanaman resisten terhadap
penyakit busuk lunak Erwinia carotovora.
4. Penggunakan konsentrasi bakteri Erwinia carotovora 109 cfu/ml dan 1010
5. Metode pengujian ketahanan in vitro pada Phalaenopsis terhadap penyakit busuk lunak dengan age
