Identifikasi Bakteri Escherichia coli Pada Es Batu yang Dijual Warung Nasi di Kelurahan Pisangan Tahun 2015

(1)

IDENTIFIKASI BAKTERI

Escherichia coli

PADA ES

BATU YANG DIJUAL WARUNG NASI DI KELURAHAN

PISANGAN TAHUN 2015

Laporan Penelitian ini ditulis sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar SARJANA KEDOKTERAN

OLEH:

Naftalena Dwi Putri

NIM: 1112103000012

PROGRAM STUDI PENDIDIKAN DOKTER

FAKULTAS KEDOKTERAN DAN ILMU KESEHATAN

UNIVERSITAS ISLAM NEGERI SYARIF HIDAYATULLAH

JAKARTA

(2)

(3)

(4)

(5)

v benderang ini. Alhamdulillah berkat rahmat-Nya, saya dapat menyelesaikan penelitian yang berjudul “Identifikasi Bakteri Escherichia coli pada Es Batu yang Dijual Warung Nasi di Kelurahan Pisangan Tahun 2015”

Penyusunan laporan penelitian ini dapat terselesaikan karena bantuan dari berbagai pihak. Oleh karena itu, saya ingin mengucapkan terimakasih kepada:

1. Prof. Dr. H. Arif Sumantri, SKM., M.Kes. selaku Dekan Fakultas Kedokteran dan Ilmu Keseharatan UIN Jakarta,

2. dr. Achmad Zaki, S.Ked, M.Epid, SpOT selaku Ketua Program Studi Pendidikan Dokter beserta segenap dosen prodi yang selalu membimbing dan memberikan ilmu kepada saya selama menjalani masa pendidikan di Program Studi Pendidikan Dokter FKIK UIN Syarif Hidayatullah Jakarta. 3. dr. Flori Ratna Sari, Ph.D selaku Penanggung Jawab Modul Riset Program

Studi Pendidikan Dokter 2012.

4. dr. Intan Keumala Dewi, SpMK selaku pembimbing pertama yang selalu memberikan masukan, arahan dan bimbingan dalam menyusun penelitian ini. Selalu menerima dengan terbuka saat saya datang bimbingan ke tempat beliau. Selain itu juga selalu memberikan semangat dan motivasi di setiap bimbingannya sehingga saya dapat menyelesaikan penelitian ini tepat waktu.

5. dr. Nurmila Sari, M.Kes selaku pembimbing kedua saya yang selalu memberikan masukan dan arahannya dalam menyusun penelitian ini. Senantiasa menyemangati serta membantu saya dalam menjawab pertanyaan-pertanyaan yang saya kurang pahami pada penelitian ini. 6. Ibu Yuliati, S.Si, M.Biomed atas ijin dan bantuanya atas peminjaman lab

(6)

vi

7. Ibu Novi selaku laboran lab mikrobiologi UIN atas bantuan dan arahanya selama di lab mikrobiologi.

8. Para penjaga lab mikrobiologi UIN dalam bantuan peminjaman laboratorium mikrobiologi.

9. Para satpam kampus 2 Psikologi UIN Jakarta atas bantuanya dalam bentuk perijinan peminjaman laboratorium mikrobiologi.

10.Kedua orang tua saya tercinta, Dwi Wahyono S.E dan Almh Hj. Eti Heriwati yang selalu mendukung baik secara materi dan moril serta mendoakan saya demi kelancaran penelitian ini.

11. Adik-adik saya Saffanah Fauziyah, Nafisa Qolbaini, dan Elok Dwi Permata atas dukunganya dalam penelitian ini.

12.Anggota keluarga saya lainya, Asri Wahyuningtyas, Irfan Dewanto, dan Supini yang telah mendukung saya secara moril dan sebagai penyemangat saya dalam menuntaskan penelitian ini.

13.Saudara sepupu saya Layalia Qodri yang ikut berpartisipasi dalam penelitian ini saat pengambilan sampel.

14.Teman sekelompok dan seperjuangan penelitian saya yaitu Octafika H.,

Saya menyadari masih banyak kekurangan dalam penelitian ini. Kritik dan saran yang membangun sangat membantu demi terwujudnya laporan penelitian yang lebih baik dan bermanfaat untuk masyarakat. Akhir kata, semoga segala bantuan yang diberikan dalam penelitian ini akan mendapat balasan, barokah dan ridho dari Allah SWT. Amin.

Wassalamualaikum Wr. Wb

Ciputat, 9 Oktober 2015

(7)

vii

Naftalena Dwi Putri. Identifikasi Bakteri Escherichia coli Pada Es Batu yang Dijual Warung Nasi di Kelurahan Pisangan Tahun 2015

Abstrak

Es batu merupakan produk pangan yang sering dikonsumsi di Indonesia. Hal tersebut didukung letak geografis Indonesia yang merupakan negara tropis. Es batu yang dijual di Indonesia hingga saat ini belum memiliki peraturan mengenai nilai baku mutu. Es batu yang memiliki kualitas yang rendah dapat menimbulkan penyakit, salah satu penyakitnya adalah diare. Es batu yang dapat menimbulakn diare adalah es batu yang mengandung bakteri patogen salah satunya yaitu Escherichia coli (E. coli). Oleh sebab itu perlu dilakukan pemeriksaan kualitas es batu berdasarkan segi mikrobiologi. Pada penelitian ini menggunakan metode deskriptif. Hasil dari pengujian adalah 66,7% sampel mengandung E. coli dan 88,9% sampel memiliki nilai MPN diatas ambang batas. Kesimpulan penelitian ini adalah 88,9% es batu yang dijual warung nasi di Kelurahan Pisangan memiliki kualitas kurang baik berdasarkan indikator mikrobiologi yaitu koliform 0/100 ml dan E. coli 0 koloni.

Kata kunci: diare, E. coli, es batu, koliform

Naftalena Dwi Putri. Identification Escherichia coli bacteria In

Restauran’s Ice Cubes At Pisangan 2015

Abstract standards quality based on microbiological indicators were coliforme 0/100 ml and E. coli 0 colony.

(8)

DAFTAR ISI

1.4.2.Manfaat Bagi Perguruan Tinggi ... 3

1.4.3.Manfaat Bagi Masyarakat ... 3

BAB 2. Tinjauan Pustaka ... 4

2.1.Landasan Teori ... 4

2.1.1.Morfologi dan Klasifikasi Eschericia coli... 4

2.1.2.Patogenesis E.coli ... 4

2.1.3.Es Batu ... 7

2.1.4.Kualitas Air Minum ... 10

2.1.5.Uji Identifikasi koliform dan E. coli ... 11

2.1.5.1.Uji MPN... 11

2.1.5.2.Uji biokimia IMViC dan Gula-gula... 12

2.1.5.3.Pewarnaan Gram... 14

3.2.Lokasi dan Waktu Penelitian ... 17

3.2.1.Lokasi Penelitian ... 17

3.2.2.Waktu Penelitian... 17

3.3.Populasi dan Sampel ... 17

3.4.Kriteria Inklusi dan Ekslusi ... 17

(9)

3.6.2.Bahan Penelitian ... 18

3.7.Alur Penelitian ... 19

3.8.Cara Kerja Penelitian ... 19

3.8.1.Tahap Persiapan ... 19

3.8.2.Pengambilan Sampel ... 20

3.8.3.Uji MPN... 20

3.8.4.Uji Identifikasi E. coli... 21

3.9.Managemen Data ... 23

BAB 4. Hasil dan Pembahasan ... 24

4.1. Hasil Uji MPN ... 24

4.2. Hasil Pewarnaan Gram LB ... 26

4.3. Hasil Uji EMBA ... 27

4.4.Hasil Pewarnaan Gram dari Isolasi EMBA ... 28

4.5.Hasil Uji IMViC ... 29

4.6.Hasil Uji Gula- gula ... 31

4.7.Persentase Hasil ... 34

4.7.1.Persentase Koliform dan E. coli ... 34

4.7.2.Persentase Kualitas Es Batu... 35

4.8.Keterbatasan Penelitian ... 36

4.9.Aspek Keislaman ... 36

BAB 5. Kesimpulan dan Saran ... 37

5.1.Kesimpulan ... 37

(10)

DAFTAR TABEL

Tabel 2.1. Definisi Operasional ... 16

Tabel 4.1. Hasil Uji MPN ... 25

Tabel 4.2. Hasil Pewarnaan Gram LB ... 26

Tabel 4.3. Hasil Inokulasi EMBA ... 28

Tabel 4.4. Hasil Pewarnaan Gram EMBA ... 29

Tabel 4.5. Hasil Uji IMViC... 30

Tabel 4.6. Hasil Uji gula-gula ... 32

Tabel 4.7. Tabel Rangkuman Keseluruhan Uji ... 33

(11)

DAFTAR GAMBAR

Gambar 4.1. Uji MPN sebelum inkubasi ... 24

Gambar 4.2. Uji MPN setelah inkubasi ... 24

Gambar 4.3. Hasil Gram LB dengan pembesaran 100x ... 27

Gambar 4.4. Koloni hasil inokulasi EMBA ... 27

Gambar 4.5. Hasil Gram EMBA degan pembesaran 100x ... 28

Gambar 4.6. Hasil uji IMViC setelah inokulasi ... 30

(12)

DAFTAR SINGKATAN

cAMP : Siklik adenosin monofosfat

E.coli : Eschericia coli

EMBA : Eosin Methylen Blue Agar

IMViC : Indol, Methyl red, Vogus proskauer, Citrate

LB : Lactose broth

ml : Mili liter

MPN : Most Probable Number

(13)

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran 1.Alat dan Bahan... 38

Lampiran 2. Langkah-langkah Uji MPN ... 40

Lampiran 3. Langkah-langkah Pewarnaan Gram ... 41

Lampiran 4. Tabel MPN Seri 3 Tabung ... 42

Lampiran 5. Persyaratan Kualitas Air Minum ... 43

(14)

DAFTAR BAGAN

(15)

1 BAB 1

PENDAHULUAN

1.1.Latar Belakang

WHO (2013) menyatakan bahwa penyakit diare merupakan penyebab kedua kematian pada anak-anak di dunia. Dengan jumlah 780 juta anak di dunia, dilaporkan anak dengan umur kurang dari 5 tahun memiliki angka kejadian diare terbesar yaitu mencapai 760.000 per tahun. Negara berkembang memiliki angka kejadian diare lebih banyak dibandingkan dengan negara maju.1

Penyakit diare masih menjadi fokus masalah kesehatan di Indonesia karena angka morbiditas dan mortalitasnya yang masih tinggi. Survei morbiditas yang dilakukan oleh Departemen Kesehatan dari tahun 2000-2010 memiliki kecenderungan insidensi diare yang meningkat. Pada tahun 2000, kejadian penyakit diare yaitu 301 /1000 penduduk, tahun 2003 naik menjadi 374 / 1000 penduduk, tahun 2006 naik menjadi 423 /1000 penduduk dan pada tahun 2010 menjadi 411/100 penduduk.2

Berdasarkan data Riset Kesehatan Dasar (Riskesdas) tahun 2007 prevalensi periode diare yaitu 9,0% di seluruh Indonesia sedangkan mengenai pola penyebab kematian semua umur, penyakit diare merupakan penyebab kematian peringkat ke-13 dengan proporsi 3,5%. Berdasarkan data mengenai penyakit menular maka diare merupakan penyebab kematian peringkat ke-3 setelah TB dan Pneumonia.

Banten termasuk ke dalam lima provinsi yang memiliki angka insidensi diare tertinggi di Indonesia. Provinsi Banten memiliki insidensi diare pada semua umur sebesar 2,4% sedangkan insidensi diare pada balita sebesar 6,3%.2

(16)

2

kontamiansi pangan. Beberapa bakteri tanda kontaminan pangan yaitu

Salmonella, coliform dan Eschericia coli (E. coli).3 _{E. coli}_dan

Rotavirus.merupakan agen penyebab tersering terjadinya penyakit diare.1 Es batu merupakan salah satu produk pangan pelengkap sering dikonsumsi oleh masyarakat Indonesia. Hal tersebut didukung oleh kondisi geografis Indonesia yaitu terletak garis katulistiwa sehingga Indonesia termasuk negara tropis, negara tropis memiliki suhu lingkungan yang hangat. Karena hal tersebut masyarakat Indonesia sering menggunakan es batu sebagai produk pangan pelengkap. Es batu merupakan produk pangan pelengkap karena cara penyajianya ditambah dengan minuman.

Hingga saat ini di Indonesia, nilai baku mutu untuk produk es batu masih belum ada karena usaha es batu masih tergolong usaha skala kecil dan usaha rumah tangga, sehingga kualitasnya belum terjamin.4,5

Salah satu industri rumah tangga yang menjual es batu adalah warung nasi. Umumnya warung nasi yang ada adalah warung nasi sederhana terutama di daerah Kelurahan Pisangan, Tangerang Selatan. Pada kelurahan Pisangan terdapat Universitas UIN yang memiliki banyak mahasiswa, oleh karena itu di sekitarnya menjamur warung nasi. Warung nasi yang terdapat di Kelurahan Pisangan merupakan warung nasi sederhana sehingga higienitas dan sanitasinya belum diketahui.

Saat ini belum ada penelitian yang meneliliti es batu yang dijual warung nasi di Kelurahan Pisangan pada tahun 2015, oleh karena latar belakang tersebut maka peneliti melakukan penelitian Identifikasi E. coli pada es batu di warung nasi Kelurahan Pisangan Tahun 2015.

1.2.Rumusan masalah

(17)

3

1.3.Tujuan Penelitian

1.3.1.Tujuan Umum

Mengetahui kualitas es batu yang dijual warung nasi di Kelurahan Pisangan secara mikrobiologi.

1.3.2.Tujuan Khusus

Mengetahui es batu yang dijual warung nasi di Kelurahan Pisangan mengandung bakteri E.coli.

1.4.Manfaat Penelitian

1.4.1.Manfaat Bagi Peneliti

a. Melatih kemampuan diri dalam menyusun dan melakukan penelitian.

b. Melatih kemampuan bekerja di unit laboratorium.

c.Menjawab pertanyaan peneliti mengenai kualitas es batu di Kelurahan Pisangan.

d. Sebagai syarat untuk kelulusan pendidikan preklinik Program Studi Pendidikan Dokter Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan UIN Syarif Hidayatullah.

1.4.2. Manfaat Bagi Perguruan Tinggi

a. Menjadi rujukan bagi penelitian selanjutnya di FKIK UIN yang terkait.

b. M6bah publikasi ilmiah dalam bidang mikrobiologi klinik bagi civitas FKIK UIN.

c. M6bah informasi bagi civitas FKIK UIN tentang kualitas es batu di Kelurahan Pisangan.

1.4.3. Manfaat Bagi Masyarakat

a. Memberikan informasi baru kepada masyarakat tentang kualitas es batu yang dijual warung nasi di Kelurahan Pisangan.

(18)

4 BAB 2

TINJAUAN PUSTAKA

2.1. Landasan Teori

2.1.1. Morfologi dan Klasifikasi Eschericia coli

E.coli merupakan bakteri Gram negatif yang memiliki

morfologi kokobasil atau batang pendek, tidak membetuk spora, bermotil dan dapat mengasilkan gas dari glukosa.6 _E.coli_meiliki ukuran 0,4µm – 0,7µm x 1,4µm dan memiliki strain yang berkapsul.7_{E. coli} _{memiliki kompleks antigen yang teridiri dari antigen} O, K, dan H.8

Menurut Melnick Jawetz mengenai klasifikasi bakteri E. coli yaitu7_: penyakit pada manusia tetapi pada beberapa kondisi tertentu, bakteri

E. coli dapat menimbulkan penyakit yaitu bila jumlah koloni terlalu

banyak, E. coli hidup di luar habitatnya atau keadaan manusia sebagai pejamu yang lemah karena suatu kondisi seperti mengalami penyakit imunosupresan.

(19)

5

2.1.2.1. Patogenesis E. coli di ekstraintestinal

Pada patogenesis ekstraintestinal, E. coli dapat menyebabkan infeksi saluran kemih, sepsis, dan penyakit lainya. Pada infeksi saluran kemih, E. coli menjadi penyebab tersering dengan prevalensi mencapai 90% terutama pada penderita wanita.7_{Gejala dan tanda-tandanya infeksi saluran} kemih yaitu sering berkemih, disuria, hematuria, dan piuria. Pada infeksi saluran kemih yang letaknya dibagian atas maka akan timbul pula gejala nyeri pinggang dan demam yang sangat tinggi yaitu mencapai lebih samadengan 39o_C. antigen yang cukup berperan dalam infeksi saluran kemih bagian atas yaitu antigen K, sedangkan antigen O hamper berpran pada seluruh infeksi. Antigen H berperan pada kejadian nefropatogenik akibat infeksi E. coli.7

Selain infeksi saluran kemih, E. coli juga dapat menyebabkan sepsis yang dapat mengancam nyawa. E. coli menjadi penyebab sepsis nosokomial yang cukup tinggi yaitu prevalensinya mencapai 15%. Sepsis akibat E. coli sebagain besar diakibatkan oleh endoktoksin kelompok sepsis enteropatogenesis E. coli (SEPEC) yang rata-rata menunjukan resistensi.8

Pada infeksi lainya, E. coli dapat pula menyebabkan infeksi vesica vellea serta duktus,apendisitis dan meningitis pada bayi prematur.8

2.1.2.2. Patogenesis E. coli di intraintestinal

(20)

6

beberapa kelompok dengan kemampuan virulensi yang berbeda-beda berdasarkan dari endotoksi yang dihasilkan.

Endotoksin dari strain E.coli yang patogen dapat menyebabkan diare berat pada semua kelompok usia. Endotoksin strain E. coli yang dihubungkan dengan diare yaitu:

1. Enteropatogenik E.coli (EPEC): menyebabkan diare pada bayi dan anak di negara berkembang.7_{Jenis diare yang} ditimbulkan yaitu diare encer yang dapat sembuh sendiri tetapi dapat menjadi kronik. Mekanisme EPEC dapat menimbulkan manifestasi yaitu mulanya EPEC menempel pada mukosa intestinal lalu dibantu dengan kromosom pada EPEC, maka perlekatan akan semakin meningkat dan mengakibatkan merusaknya mikrovili yang ada pada mukosa intestinal.7

2. Enterotoksigenik E.coli (ETEC): ETEC adalah penyebab

umum terjadinya “diare wisatawan” dan juga penyebab diare

yang sangat penting pada bayi di negara berkembang.7 Strain bakteri ini menghasilkan toksin LT (termolabil) dan toksin ST (termostabil) saat bakteri ini melekat pada mukosa usus manusia sehingga menyebabkan secretory diarrhea seperti pada kolera. Toksin yang dihasilkan akan masuk ke mukosa intestinal lalu mempengaruhi fungsi sel dengan cara aktivasi adenilil siklase lalu setelah itu akan meningkatkan konsentrasi cAMP lokal.7 _Konsentrasi _cAMP _yang meningkat akan mengakibatkan hipersekresi air dan klorida yang banyak dan lama. Akibat hipersekresi tersebut maka fungsi reabsorpsi natrium dan juga membuat intestinal teregang, akibat peregangan tersebut maka akan terjadi hipermotilitas maka terjadilah diare.

(21)

7

penyakit dengan cara menginvasi sel epitel mukosa intestinal sehingga menimbukan lesi inflamasi dan juga ulkus.8_{Penyakit ini terjadi paling sering pada anak-anak di} negara berkembang dan pada pengunjung negara-negara tersebut. Seperti Shigella, strain EIEC tidak memfermentasikan laktosa atau memfermentasi laktosa dengan lambat dan nonmotil.

4. Enteroagregatif E. coli (EAEC): EAEC dapat menyebabkan diare akut dan kronik dengan durasi rata-rata > 14 hari dan sering terjadi pada masyarakat di negara berkembang. EAEC juga menyebabkan penyakit yang ditularkan melalui makanan di negara industri.7 Mekanisme EAEC hingga sampai menimbulkan manifestasi yaitu dibantu dengan fimbrea, organism ini melekat pada sel epitel mukosa intestinal lalu mengeluarkan toksin yang hampir serupa dangan tipe SL dan hemolisin. Ciri diare yang ditimbulkanya yaitu watery

diarrhe dan bahkan hingga diare berdarah.8

(22)

8

sehingga menjadi massa yang padat dan berbentuk seperti kristal.10_{Terbentuknya massa yang padat dikarenakan salah} satu molekul air yaitu hidrogen akan bergerak lambat pada suhu 0o_{C sehingga molekul hidrogen yang satu tidak mampu} memutuskan ikatanya dengan molekul hidrogen lainya. Kerapatan ikatan antar molekul hidrogen tersebut mengakibatkan air berubah wujud menjadi padat, dan karena air berwarna jernih sehingga gambaran warnanya seperti kristal.10

Umumnya es batu memiliki berbagai macam manfaat, salah satu manfaatnya yaitu sebagai pelengkap yang disajikan bersamaan dengan air minum, oleh sebab itu es batu termasuk jenis produk pangan pelengkap. Tujuan ditambahkanya es batu dalam minuman yaitu untuk menimbulkan sensasi dingin dan segar, hal tersebut berhubungan dengan suhu rerata di Indonesia dimana Indonesia merupakan negara tropis sehingga memiliki suhu yang hangat. Karena hal tersebut masyarakat Indonesia cukup sering mengkonsumsi es batu.

Es batu memiliki suhu yang rendah sehingga aktivitas bakteri termasuk bakteri patogen dapat menurun atau berhenti. Hal tersebut disebabkan karena metabolisme bakteri membutuhkan bantuan enzim dimana aktivitas kerja enzim sangat dipengaruhi oleh suhu. Karena hal tersebut es batu dianggap relatif aman, tetapi pada beberapa penelitian terdahulu mengenai es batu, masih terdapat bakteri patogen pada es batu yang beredar di pasaran. 4

2.1.3.1. Bakteri dalam Es Batu

(23)

9

kemungkinan telah tercemar, selain itu saat pendistribusian es batu yang kurang baik dan bersih pun memungkinkan bakteri patogen terdapat pada es batu. Air yang digunakan sebagai bahan baku es batu pun memegang peranan penting adanya bakteri patogen pada es batu, jika air bahan baku yang digunakan tidak higienis dan baik maka bakteri patogen dapat terdapat di dalam es batu tersebut. Konsumsi es batu yang mengandung bakteri patogen dapat menimbulkan penyakit pada manusia, terutama penyakit enterik.11

Bakteri yang dijadikan indikator dalam pencemaran es batu adalah koliform dan E.coli.5, 11 menurut hasil penelitian, E.coli yang terkandung dalam es tidak akan mati dalam proses pembekuan, sehingga saat es tersebut mencair dapat memungkinkan E.coli hidup kembali.10, 11.

(24)

10

2.1.4. Kualitas Air Minum

Hingga saat ini air merupakan zat yang sangat krusial bagi keberlangsungan kehidupan mahkluk hidup. Karena pentingnya air bagi mahkluk hidup maka pasoka air harus mudah diakses, memadai dan aman.12 _Sehingga manusia harus melakukan upaya untuk mendapatkan air yang aman tersebut. Salah satu air yang dianggap aman adalah air bersih, air bersih dapat dimanfaatkan oleh manusia dalam berbagai macam hal yaitu untuk memasak, mencuci, mandi, dan juga minum.

Definisi air minum berdasarkan Permenkes 01/PRT/M/2009 Pasal 1 menyatakan bahwa air minum adalah air yang memalui proses pengolahan ataupun tanpa proses pengolahan yang memenuhi syarat kesehatan dan dapat langsung diminum. permukaan adalah air sungai, waduk, ataupun danau.

Berdasarkan Peraturan Menteri Kesehatan No. 736 tahun 2010 maka sumber air minum dapat diperoleh dari air minm kemasan, air minum yang didistribusikan melalui pipa dan air yang didistribusikan melalui tanki air. Jenis-jenis air minum tersebut harus memenuhi syarat nilai baku mutu yang telah ditetapkan.3

(25)

11

492/PERMENKES/PER/IV/2010.3_{Salah satu aspek yang} dilihat pada nilai baku mutu adalah indikator mikrobiologi. Pada indikator tersebut dinyatakan bahwa APM koliform 0/100 ml dan E. coli 0 kolon/ ml sehingga bila bakteri pada air minum leih dari nilai baku mutu maka dapat dinyatakan air minum tersebt tidak layak minum.5

2.1.5. Uji Identifikasi Koliform dan E. coli

2.1.5.1.Uji MPN

Metode yang digunakan dalam identifikasi kolifom pada air minum umumnya menggunakan metode uji Most Probable Number (MPN). Pada metode tersebut terdiri dari presumtif test (uji praduga) dan confirmed test (uji peneguhan).14_Pada uji MPN dapat mendeteksi keberadaan bakteri koliform, bakteri gram negatif, dan bakteri basil non-spora yang dapat menfermentasi laktosa dengan inkubasi selama 24 jam pada suhu 370_C.15

Presumtif test media yang digunakan pada

uji ini adalah LB(LB). LB adalah media untuk penanaman Salmonella dan bakteri koliform yang berasal dari makanan dan minuman. LB merupakan media pre-enrichmen bagi Salmonella dan koliform, dimana umumnya bakteri tersebut jumlahnya sedikit pada sampel sehingga sulit dideteksi. Hasil dari tahap presumtif test adalah nilai MPN dimana nilai MPN merupakan jumlah perkiraan unit tumbuh

(growth unit) atau unit pembentuk-koloni (colony

formin unit) dalam sampel.14_{Namun pada umunya}

(26)

12

Salmonella dan koliform memilki

kemampuan untuk menfermentasi laktosa.16_Adanya bakteri koliorm pada uji ini ditunjukan yaitu media menjadi keruh dan terdapat gas pada tabung durham sebab bakteri koliform dapat menfermentasi laktosa (beberapa bakteri enterik tidak dapat menfermentasi laktosa) dan menghasilkan gas.

Pada Presumtif test dilakukan dengan tiga tingkat pengenceran dengan seri tiga tabung yaitu 10 ml, 1 ml, dan 0,1 ml lalu diinkubasi selama ± 48 jam dalam suhu 35o_C.14

Confirmed test bertujuan untuk

memastikan hasil dari uji sebelumnya bahwa bakteri yang tumbuh bukanlah bakteri nonkoliform yang bukan merupana indikator dari pencemaran fekal. Sehingga pada confirmed test dibutuhkan media yang selektif dan diferensiasi. Terdapat dua jenis media yang memenuhi kriteria tersebut yaitu media Endo Agar dan Eosin Methylen Blue Agar (EMBA).16

EMBA memiliki kandungan metilen biru dimana zat tersebut dapat menghambat pertumbuhan bakteri Gram positif sehingga yang tumbuh hanya bakteri Gram negatif saja. Selain itu EMBA memiliki kondisi yang asam sehingga hal tersebut membuat kompleks presipitat dan menimbulkan warna hijau kilap logam pada E. coli dimana bakteri E. coli indikator coliform fekal.16

2.1.5.2. Uji Biokimia IMViC dan Gula-gula

(27)

13

IMViC. Uji biokimia ini bertujuan untuk mengetahui sifat dari bakteri karena setiap bakteri memiliki sifat yang bermacam-macam sehingga dapat ditentukan hingga tingkatan spesies.

Pada uji gula-gula digunakan 5 jenis yaitua glukosa, laktosa, maltose, manitol dan sukrosa. Pada uji gula-gula akan didapatkan hasil positif karena E. coli dapat menfermentasikan gual-gula sehingga hasil fermentasi tersebut adalah asam dan gas. Asam dapat terlihat dengan adanya perubahan warna pada media yaitu dari ungu menjadi kuning keruh dan adanya gas dapat dilihat di tabung durham.

Pada uji IMViC pada E. coli terdapat lima rangkaian uji yaitu uji indol, motil, merah metal, VP, dan sitrat. Pada uji indol E. coli dapat membentuk indol sebab dapat menfermentasi triptofan sebagai sumber karbonya. Pada uji indol maka akan didapatkan hasil positif yaitu terentuknya cincin merah jika ditambahkan reagen kovac. Pada uji motil, menggunakan media yang sama yaitu indol, E. coli memiliki fimbrae sebagai alat gerak sehingga pada uji ini akan didaptkan hasil yang postif dengan ditandai gambaran mnjalar pada media.

Uji methyl red (MR), E. coli dapat

menghasilkan asam metilen glikon dari proses fermentasi glukosa yang terkandung dalam media MR sehingga hasilnya akan positif dimana hal tersebut akan ditunjukan dengan perubahan warna media menjadi merah saat ditetekan indikator MR.

(28)

14

menghasilkan produk netral seperti asetil metil karbinol (asetoin) dari hasil metabolisme glukosa melainkan menghasilkan asam sehingga saat ditetekan alfanaftol dan KOH tidak terjadi perubahan warna media menjadi merah.

Uji sitrat jika yang diduga adalah bakteri

E. coli maka akan didapatka hasil yang negatif

sebab E. coli tidak dapat menggunakan sitrat sebagai sumber karbon maka medianya akan tetap berwarna hijau.

Sehingga pada keseluruhan uji IMViC akan didapatkan hasil Indol akan positif, motil positif, Uji Merah metal akan positif, Voges-proskauer akan negatif dan uji Citrate akan negatif.15

2.1.5.3. Pewarnaan Gram

(29)

15

2.2. Kerangka Teori

Bagan 2.1. Kerangka Teori

2.3.Kerangka Konsep

(30)

16

2.4. Definisi Operasional

Tabel 2.1. Definisi Operasional

(31)

17 BAB 3

METODE PENELITIAN

3.1. Desain Penelitian

Desain penelitian yang digunakan yaitu deskriptif.18_{Penelitian ini} menggunakan beberapa metode identifikasi bakteri. Metode identifikasi bakteri dengan teknik Most Probable Number (MPN), pewarnaan Gram, kultur media spesifik, uji Indol, Metil merah, Vogus Proskauer, Sitrat (IMViC), dan uji gula-gula.

3.2. Lokasi dan Waktu Penelitian

3.2.1. Lokasi Penelitian

Laboratorium Mikrobiologi Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan UIN Syarif Hidayatullah Jakarta.

3.2.2. Waktu Penelitian

Penelitian akan dilakukan pada Bulan Juli-September 2015.

3.3. Populasi dan Sampel

Pada penelitian ini sampel yang digunakan adalah es batu dengan populasi warung nasi di Kelurahan Pisangan. Metode pengambilan sampel yaitu dengan purposive sampling.19_{Jumlah sampel yang diambil adalah 9} sampel.

3.4. Kriteria Inklusi dan Ekslusi

3.4.1. Kriteria Inklusi

Semua jenis es batu yang dijual warung nasi di wilayah Kelurahan Pisangan.

3.4.2. Kriteria Ekslusi

(32)

18

3.5. Variabel

3.5.1. Variabel Bebas

Variabel bebas pada penelitian ini adalah es batu yang dijual warung nasi di Kelurahan Pisangan.

3.5.2. Variabel Terikat

Variabel terikat pada penelitian ini adalah bakteri E.coli yang tumbuh pada media.

3.6. Alat dan Bahan

3.6.1. Alat Penelitian

Alat yang digunakan pada penelitian yaitu :

Tabung reaksi; Ose; Bunsen; Mikro pipet; Pinset; Cawan petri Korek api; Spatula kaca; Kapas; Tisu; Kamera; Pengukur waktu; Baki;

Autoclave; Alat tulis; Label; Incubator; Pot steril; Gelas objek;

Mikroskop; Vortex mixer; Kapas lidi steril; Tabung durham; Lemari steril; Lemari pendingin (refrigerator); Freezer; Stomacher; Timbangan; Magnetic stire.

3.6.2. Bahan Penelitian

Bahan yang digunakan pada penelitian ini yaitu:

Es batu yang dijual di warung nasi Kelurahan Pisangan; Eosin Metylen

Blue Agar; Alkohol 70%; Gentian violet; Lugol; Alkohol 95%;

(33)

19

3.7. Alur Penelitian

Bagan 3.1. Alur Penelitian

3.8. Cara Kerja Penelitian

3.8.1. Tahap Persiapan

3.8.1.1.Persiapan Alat dan Bahan

Peneliti memersiapkan alat dan bahan yang telah disebutkan sebelumnya untuk melakukan penelitian ini.

3.8.1.2. Sterilisasi Alat dan Bahan

(34)

20

durham dan pastikan tidak ada udara setelah itu tutup dengan kapas. Sterilkan alat-alat dan tabung reaksi dengan menggunakan autoclave yang bertekanan 15dyne/cm3 (1 atm) dengan suhu 121o_C.

3.8.2. Pengambilan Sampel

Warung nasi yang dipilih oleh penelitian adalah warung nasi sederhana yang berada di Kelurahan Pisangan. Keadaan warung nasi berdasarkan kebersihanya yaitu ada beberapa yang kurang dan juga cukup baik. Kebersihan warung nasi dinilai dari sumber air yang digunakan untuk mencuci alat makan dan cara penyajian makanan.

Es batu yang telah diambil, selanjutnya dipindahkan di

Pada sampel air, digunakan teknik Most Probable Number (MPN) dalam pengujian untuk mendeteksi bakteri koliform. Terdapat dua langkah dalam teknik MPN yaitu presumtive test dan confirmed test.14_Pengujian_{presumtive test}_{menggunakan seri tiga tabung dan tiga} tingkat pengenceran.

3.8.3.1. Presumtive Test

(35)

21

kocok perlahan. Panaskan mulut tabung lalu masukan 10 ml LB dengan menggunakan pipet ke dalam tabung lalu masukan 0,1 ml sampel larutan pengenceran 10-3 _{dan kocok perlahan.} Inkubasi tabung selama 24-48 jam dengan suhu 350_{C. Hasil}

presumtive test dikatakan positif apalabila terdapat gas pada

tabung durham. Pengujian selalu disertai dengan kontrol positif yaitu koloni E. coli dan control negatif yaitu aquades steril.14

3.8.3.2.Confirmed Test

Dari tabung yang positif gas pada presumtive test dipindahkan menggunakan jarum inokulasi ke dalam media EMBA secara aseptik. Inkubasikan pada suhu 35-37 ± 0,50_C selama 24±2jam. Uji dikatakan positif bila terdapat koloni kehijauan dengan kilap logam.15

3.8.4. Uji Identifikasi E. coli

3.8.4.1. Uji Biokimia IMViC

Dalam menentukan jenis bakteri E.coli maka dilakukan uji biokimia IMViC (Indol, Metil merah, Voges Praskauer dan Sitrat).

1. Uji Indol akan terbentuk lapisan (cincin) berwarna merah muda pada permukaan biakan setelah p6bahan reagen erlich. Hal tersebut menunjukan hasil positif dan menguatkan kemungkinan adanya bakteri E. coli karena E. coli merupakan bakteri yang dapat membentuk indol dari triptofan sebagai sumber karbonnya.

2. Uji methyl red, jika diduga terdapat E. coli maka hasilnya

(36)

22

3. Uji VP, jika diduga pada sampel terdapat E. coli maka hasilnya akan negatif, karena tidak terbentuk warna merah pada medium setelah ditambahkan alfanaftol dan KOH, hal ini disebabkan karena bakteri tidak menghasilkan produk netral seperti asetil metil karbinol (asetoin) dari hasil metabolisme glukosa melainkan menghasilkan asam. Uji PV ini negatif untuk Escherichia coli karena Escherichia coli memfermentasikan karbohidrat menjadi produk asam dan tidak menghasilkan produk netral seperti asetoin. 4. Uji Sitrat, uji ini dilihat kemampuan bakteri untuk

menggunakan sitrat sebagai satu-satunya sumber karbon. Uji ini negatif untuk Escherichia coli karena Escherichia coli tidak dapat menggunakan sitrat sebagai sumber karbon Pernyataan hasil dari uji deteksi Escherichia coli pada uji IMViC memberikan hasil yaitu uji Indol akan positif, Uji Merah metal akan positif, Voges-proskauer akan negatif dan uji Citrate akan negatif.14,17

(37)

23

beri 1 tetes imersi oil dan diamati morfologi sel, serta warnanya di bawah mikroskop dengan pembesaran 100 x.15

3.9. Managemen Data

(38)

24 BAB 4

HASIL DAN PEMBAHASAN

4.1. Hasil Uji MPN

Uji MPN merupakan uji untuk mengetahui jumlah bakteri koliform baik fekal oral maupun non-fekal oral yang terkandung dalam suatu sampel yang diuji dan dinyatakan per 100ml. Uji MPN menggunakan media LB dengan tiga tingkat pengenceran yaitu 10 ml, 1 ml, dan 0,1 ml dan tiga seri tabung per sampelnya. Tabung yang telah berisikan sampel dan LB selanjutnya diinkubasi selama ± 48 jam dalam suhu 35o_C.

Gambar 4.1. Uji MPN sebelum diinkubasi

Gambar 4.2. Uji MPN setelah inkubasi

(39)

25 minum yang layak konsumsi berdasarkan Permenkes RI Nomor 492/PERMENKES/PER/IV/2010.3, 11

Tabel 4.1. Hasil Uji MPN

Hasil analisis dengan tabel MPN maka dapat dilihat bahwa sampel yang memiliki jumlah koliform terbanyak yaitu sampel nomor 5 dan 6 dengan nilai 1100/100 ml, sedangkan sampel yang memiliki jumlah koliform paling sedikit yaitu sampel nomor 8 dengan nilai <3.6/100 ml. Sedangkan hasil analisis mengenai kelayakan es batu tersebut, maka dari 9 sampel yang diperiksa hanya satu sampel yang memenuhi kriteria kelayakan secara mikrobiologi yaitu sampel nomor 8 dengan nilai <3.6/100ml. Pada kriteria tersebut dinyatakan bahwa jumlah koliform 0 MPN/100 ml. Sampel nomor 8 memiliki nilai jumlah koliform yaitu <3.6/100ml dengan batas bawah 0/100 ml dan batas atas 9,5/100 ml (batas kepercayaan 95%) sehingga sampel nomor 8 masih masuk dalam kisaran nilai baku mutu yaitu 0/100 ml. Pada

No

Lactose Broth 48 jam suhu 35C

(40)

26

sampel yang lainya (kecuali sampel nomor 8) dinyatakan tidak layak sebab hasilnya melebihi dari kisaran nilai baku mutu yang ditetapkan.

Pada penelitian lainya, hasil dari uji MPN pada es batu menunjukan hasil bahwa 88,9% sampel tidak layak berdasarkan nilai baku mutu yang telah ditetapkan. Terdapat beberapa faktor yang menyebabkan hal tersebut yaitu air bahan baku es batu yang diolah kurang baik seperti tidak direbus dengan baik sehingga masih mengandung bakteri, cara distribusi hingga ke tangan konsumen yang kurang bersih, dan cara penyajian es batu yang pada umumnya di warung akan dicuci kembali menggunakan air yang tidak layak minum.4

4.2. Hasil Pewarnaan Gram LB

Pewarnaan Gram dilakukan pada tabung uji MPN dengan hasil positif. Peneliti menetapkan kriteria pewarnaan Gram yaitu pada satu sampel diambil 2 tabung yang positif dengan gas terbanyak. Setelah pewarnaan Gram maka hasil diamati menggunakan mikroskop dengan pembesaran 100x dengan minyak imersi.

Tabel 4.2. Hasil Pewarnaan Gram pada LB

No

Pewarnaan Gram LB

Sifat Kokobasil Kokus Batang

(41)

27

berantai. Ke9 sampel yang diperiksa semuanya tampak mangandung bakteri lebih dari satu jenis. Dari 9 sampel yang ada, keseluruhanya mengandung bakteri Gram negatif karena tampak bakteri berwarna merah, dan bentuknya kokobasil. Pada semua sampel tidak tampak bakteri Gram positif karena media LB merupakan media spesifik untuk Gram negatif.

Gambar 4.3. Hasil Gram LB tampak dengan mikroskop pembesaran 100x. Tampak bakteri dengan bentuk beragam.

4.3. Hasil Uji EMBA

Hasil inoklasi pada media EMBA menghasilkan koloni berwarna kehijauan dengan bintik hitam ditengah koloni dan kilap logam dikarenakan EMBA mengandung eosin dan metilen biru yang menghambat pertumbuhan bakteri Gram positif sehingga bakteri yang tumbuh terseleksi hanya bakteri bersifat Gram negatif. EMBA pun memiliki kandungan laktosa sehingga bakteri Gram negatif yang tumbuh pun akan terdiferensiasi berdasarkan sifatnya yang dapat meragi laktosa.20, 21

Pada uji EMBA hanya 8 sampel yang diuji didapatkan koloni bakteri yang bervariatif berdasarkan warnanya, yaitu ada koloni bakteri dengan warna kilap logam, koloni ungu dengan inti hitam yang merupakan koloni dari bakteri Enterobacter aerogenes dengan batang Gram negatif, dan koloni yang takberwarna merupakan bakteri Pseudomonas aeruginosa yang memiliki sifat Gram negatif bentuk batang.7, 22

(42)

28 kilap logam diduga bahwa sampel tersebut mengandung bakteri E.coli. Sebanyak 6 sampel dari 8 sampel yang diuji memiliki koloni bakteri bewarna ungu dengan inti kehitaman dan 4 sampel memiliki koloni bakteri tak berwarna. Pada tahap pengujian ini dapat dinyatakan bahwa 6 sampel dari 8 sampel yang diuji terindikasi kuat mengandung E.coli.

4.4. Hasil Pewarnaan Gram dari Isolasi EMBA

Hasil dari pewarnaan Gram dari isolasi EMBA menunjukan dominasi bakteri bentuk kokobasil dengan sifat Gram negatif.

Gambar 4.5. Hasil Gram EMBA dari koloni bakteri kilap logam yang tampak pada mikroskop pembesaran 100x terlihat dominai bakteri kokobasil Gram

(43)

29

Tabel 4.4. Hasil Pewarnaan Gram EMBA

Berdasarkan tabel 4.4. hasil yang di dapat yaitu 8 sampel menunjukan sifat bakteri Gram negatif ditandai dengan warna bakteri yang merah. Bakteri dengan sifat Gram negatif menunjukan warna merah karena bakteri tersebut memiliki dinding sel yang tipis sehingga warna yang terserap adalah warna sekunder yaitu saffranin.7 _{Setiap sampel memiliki} bermacam-macam jenis bakteri secara morfologi dan semua sampe memiliki bakteri dengan bentuk kokobasil, ciri tersebut merupakan ciri bakteri E.coli dan jenis tersebut mendominasi pada 8 sampel yang dianalisis.

Menurut Apriana dkk (2014) pada jurnal ilmiah yang membahas tentang identifikasi bakteri enterik pada es batu didapatkan hasil dari pewarnaan Gram pada koloni hijau dengan kilap logam adalah Gram negatif

(44)

30

dan uji sitrat. Pada uji ini, fokus identifikasinya yaitu bakteri E. coli. Hasil dari uji IMViC di presentasikan pada tabel 4.5

Gambar 4.6. Hasil Uji IMViC setalah inkubasi

Tabel 4.5. Hasil Uji IMViC

Uji IMViC

No Indol Motil MR VP Sitrat Interpretasi Suspek Bakteri

1 + + - - + Proteus vulgaris, Escherichia

coli, Enterobacter aerogenes

2 Tidak dilakukan 3 Tidak dilakukan

5 + + + - + Escherichia coli

8 Tidak dilakukan

(45)

31

vulgaris, Escherichia coli, Enterobacter aerogenes. Pada sampel nomor 5

maka hasil analisis kemungkinan bakterinya yaitu Escherichia coli.22

Pada uji IMViC ini,terdapat 5 sampel yang hasilnya tidak spesifik menunjukan bakteri E. coli, kemungkinanya hal tersebut dapat terjadi karena bakteri yang tumbuh di media EMBA bukan dalam bentuk koloni E. coli saja sehingga saat dilakukan uji IMViC yang tumbuh hasilnya bervarasi dikarenakan bakteri yang tumbuh tercampur dengan bakteri koliform.

4.6. Hasil Uji Gula-gula

Uji gula-gula merupakan salah satu uji bokimia untuk mengidentifikasi bakteri koliform dengan cara mengetahui kemampuan bakteri tersebut menfermentasi karbohidrat. Uji gula-gula yang digunakan dalam penelitian ini adalah glukosa, laktosa, maltosa, manitol, dan sukrosa..15

Gambar 4.7. Hasil Uji gula-gula setelah inkubasi

(46)

32

Tabel 4.6. Uji Gula-gula

Uji Gula-gula

No Glukosa (kuning)

Laktosa (ungu)

Maltosa (merah)

Manitol (hijau)

Sukros

(biru) Bakteri

1 +/gas +/gas +/gas +/gas +/gas E. coli 2 Tidak dilakukan

3 Tidak dilakukan

4 +/gas +/gas +/gas +/gas +/gas E. coli 5 +/gas +/gas +/gas +/gas +/gas E. coli 6 +/gas +/gas +/gas +/gas +/gas E. coli 7 +/gas +/gas +/gas +/gas +/gas E. coli 8 Tidak dilakukan

9 +/gas +/gas +/gas +/gas +/gas E. coli

(47)

33

(48)

34

4.7.Persentase Hasil

4.7.1. Persentase Koliform dan E. coli

Berdasarkan hasil yang didapatkan setelah dilakukan berbagai uji pada sampel maka dapat diketahui bahwa beberapa sampel mengandung koliform dan ada pula yang tidak.

Untuk mengetahui jumlah koliform yang ada maka diambil dari hasil uji MPN dinama fungsi dari uji MPN adalah untuk mendeteksi adanya bakteri koliform baik yang fekal maupun nonfekal yang ada pada sampel. Persentase Koliform>0/100 ml = Jumlah sampel dengan hasil

MPN>0/100 ml x100% / Total jumlah sampel

Presentase Koliform > 0/100 ml = 8 sampel x 100% / 9 sampel = 88,9%

Berdasarkan persentase di atas maka sampel yang memiliki jumlah koliform pada uji MPN 0/ 100ml adalah 11,1% dan sampel yang memiliki jumlah koliform > 0/100 ml adalah 88,9%. Pada penelitian lainya, didapatkan hasil yang serupa yaitu 88,9% sampel yang diperiksa memiliki jumlah koliform melebihi nilai baku mutu yang ditetapkan.10

(49)

35 mikrobiologi. Pada peraturan yang dikeluarkan oleh Permenkes RI 2010 bahwa indikator mikrobiologi meliputi jumlah koliform dan E. coli yang terkandung. Dinyatakan dalam peraturan tersebut bahwa koliform haruslah 0/100 ml dan E. coli 0 baru dinyatakan kualitas air minum tersebut baik atau layak konsumsi. Hasil dari persentase yaitu kualitas es batu yang kurang baik sebesar 88,9% dan persentase kualitas es batu yang baik adalah 11,1%.

(50)

36

4.8. Keterbatasan Penelitian

1. Keterbatasan alat yang ada di Laboratorium Mikrobiologi UIN Syarif Hidayatullah Jakarta.

2. Keterbatasan biaya penelitian.

3. Keterbatasan data warung nasi yang ada di Kelurahan Pisangan. 4.9. Aspek Keislaman

“Hai sekalian manusia, makanlah yang halal lagi baik dari apa yang terdapat

di bumi, dan janganlah kamu mengikuti langkah-langkah syaitan; karena

sesungguhnya syaitan itu adalah musuh yang nyata bagimu.” QS Al-Baqarah 2: 168

(51)

37 BAB 5

KESIMPULAN DAN SARAN

5.1. Kesimpulan

Berdasarkan hasil yang telah didapat dari uji-uji yang telah dilakukan maka dapat diambil beberapa kesimpulan berupa:

1. Es batu yang dijual warung nasi di Kelurahan Pisangan 66,7% positif mengandung E. coli.

2. Kualitas es batu yang dijual warung nasi di Kelurahan Pisangan berdasarkan indikator mikrobiologi, maka 88,9% kurang baik dan tidak layak konsumsi sedangkan 11,1% memiliki kualitas yang baik dan layak konsumsi.

5.2. Saran

1. Dapat lebih lanjut menganalisi lebih dalam mengenai air bahan baku es, proses pembuatan es, cara pendistribusian dan cara penyajain es batu.

2. Dapat lebih lanjut mengidentifikasi bakteri-bakteri lain yang ada selain dari E. coli.

(52)

38

DAFTAR PUSTAKA

1. World Health Organization. Articel Journal. Dalam: Diarrhea disease.Geneva: WHO; 2013. Diakses pada tanggal 1 Maret 2015 dari http://www.who.int/mediacentre/factsheets/fs330/en/

2. Kemenkes RI. Situasi Diare di Indonesia. Dalam: Buletin Data dan Informasi Kesehatan. Jakarta: Depkes RI; 2011. p 1-9

3. Menteri Kesehatan Republik Indonesia. Persyaratan Kualitas Air Minum. Dalam: Permenkes RI Nomor 492/PERMENKES/PER/IV/2010. Jakarta: Menkes RI; 2010. Diakses pada tanggal 1 Maret 2015 dari http://pppl.depkes.go.id/_asset/_regulasi/53_Permenkes%20492.pdf

4. Hadi B, Elizabeth B. Uji Bakteriologis Es Batu Rumah Tangga yang digunakan Penjual Minuman di Pasar Lubuk Buaya Kota Padang [Skripsi]. Padang: Jurnal Kesehatan Andalas; 2014

5. Standar Nasional Indonesia. Batas Maksimum Cemaran Mikroba Dalam Pangan. Jakarta: Badan Standarisasi Nasional; 2009.

6. Seputro D. Dasar-dasar Mikrobiologi. Jakarta: EGC; 2005

7. Jawetz M, Melnick R, Adelberg. Mikrobiologi Kedokteran. Jakarta : EGC; 2008. p 199-200

8. Keyser F, Kurt A. Medical Microbiology. London: Thieme; 2005. p 292-295

9. FKUI. Buku Ajar Mikrobiologi Kedokteran Edisi Revisi. Jakarta: Binarupa Aksara Publisher; 2010. p 195-198

10.Apriana N, Agus S, Tri N. Analisis Bakteri Patogen Enterik Pada Produk Es Batu Yang Dipasarkan Di Kota Surabaya. Dalam Jurnal Ilmiah Biologi. Surabaya: Universitas Airlangga; 2014

11.Food and Environmental Hygiene Department. The Microbiological Quality Of Edible Ice from Ice Manufacturing Plants and Retail Businesses in Hong Kong. Queensway: The Government of the Hong Kong Special Administrative Region; 2005

(53)

39

13.Moeller DW. Enviromental Health. England: Harvard University Press; 2005

14.Standar Nasional Indonesia. Metode Pengujian Cemaran Mikroba dalam Daging, Telur, dan Susu, Serta hasil Olahanya. Jakarat: Badan Standarisasi Nasional; 2008.

15.Cappuccino JG, Natahlie Sherman. Microbiology A Laboratory Manual Edition 9th_{. California: The Benjamin Cummings Publishing Company;} 2012. p 323-327

16.Anonimus. Media Lactose Broth. Washington DC: Acumedia Inc;

2006.diakses pada Tanggal 7 April 2015 dari

http://www.neogen.com/Acumedia/pdf/ProdInfo/7141_PI.pdf

17.Anathanarayan R, Paniker CKJ. Text Book of Microbiologi 7th_. Himayatnagar: Orient Longman Private Ltd; 2006. p 35-46

18.Sopiyudin M. Membuat Proposal Penelitian Bidang Kedokteran dan Kesehatan. Jakarta: Salemba Medika; 2009. p 45-53

19.Sopiyudin M. Besar Penelitian Kedokteran dan Kesehatan. Jakarta: Salemba Medika; 2009. p 74-79

20.Cheeptham N. Eosin Methylene Blue Agar. Canada: Thompson Rivers University; 2012. Diakses pada tanggal 8 April 2015 dari

http://www.microbelibrary.org/library/laboratory-test/2871-eosinmethylene-blue

21.BPOM RI. Info POM. Dalam Pengujian Mikrobiologi Pangan. Jakarta: Badan Pengawas Obat dan Makanan Republik Indonesia; 2008

22.Tille PM, Endrew A, Ellen WC, dkk. Bailey & Scotts Diagnostic Microbiology 13th_{Edition. Washington DC: Elsevier; 2010. p 605-611} 23.Leboffe MJ, Pierce BE. Brief Microbiology Laboratory Theory &

(54)

38

LAMPIRAN 1 Alat dan Bahan

Kulkas penyimpanan

bahan uji

Luminar Air Flow

Alat-alat untuk uji MPN Oven dan Inkubator

Mikropipet Kulkas Kaca objek

Reagen erlich Alcohol 70% dan NaCl

steril

(55)

39