Penetapan Kadar Kalium, Kalsium, Natrium, dan Magnesium Pada Buah Pare Putih (Momordica charantia L.) Segar dan Direbus Secara Spektrofotometri Serapan Atom

(1)

Lampiran 1. Gambar Buah Pare Putih (Momordica charantia L.)

Gambar 1. BuahPare Putih

(2)

Lampiran 1. (Lanjutan)

Gambar 3. Buah Pare yang Telah Selesai Dipotong Kecil-Kecil

Gambar 4. BuahPare yang Telah Selesai Direbus

(3)

(4)

(5)

Lampiran 3. Bagan Alir Proses Destruksi Kering

1. Buah Pare Putih Segar Buah Pare Putih Segar

Dicuci bersih dan dibilas dengan akua demineralisata

Dicabut tangkainya dari buah pare

Dipotong tipis-tipis buah pare dan dibuang bijinya

Sampel yang telah dipotong kecil-kecil

Ditimbang sebanyak 20 gram di atas krus Diarangkan di atas hot plate pada suhu 100o C-120oC

Diabukan dalam tanur dengan temperatur awal 100oC dan perlahan-lahan temperatur dinaikkan hingga suhu 500oC dengan interval 25oC setiap 5 menit

Dilakukan selama 24 jam dan dibiarkan hingga dingin pada desikator

Abu putih

(6)

Lampiran 3. (Lanjutan)

2. Buah Pare Putih Rebus Buah Pare Putih Segar

Dicuci bersih, dibilas dengan akua demineralisata

Dicabut tangkainya dari buah pare

Dipotong tipis-tipis buah pare dan dibuang bijinya

Direbus dengan menggunakan air mendidih 500 ml pada suhu 95oC selama 15 menit lalu ditiriskan

Ditimbang sebanyak 20 gram di atas krus Diarangkan di atas hot plate pada suhu 100o C-120oC

Diabukan dalam tanur dengan temperatur awal 100oC dan perlahan-lahan temperatur dinaikkan hingga suhu 500oC dengan interval 25oC setiap 5 menit

Dilakukan selama 24 jam dan dibiarkan hingga dingin pada desikator

Abu putih Sampel yang telah dipotong kecil-kecil

(7)

Lampiran 4. Bagan Alir Pembuatan Larutan Sampel

Abu putih hasil destruksi

Dilarutkan dalam 5 ml HNO3 (1:1)

Dipindahkan ke dalam labu tentukur 100 ml

Dibilas krus porselen sebanyak tiga kali dengan akua demineralisata. Dicukupkan dengan akua demineralisata hingga garis tanda

Disaring dengan kertas saring Whatman No. 42 Filtrat

Dimasukkan ke dalam botol Larutan sampel

Dilakukan analisis kuantitatif dengan Spektrofotometer Serapan Atom pada λ 766,5 nm untuk kadar kalium, pada λ 422,7 nm untuk kadar kalsium, pada λ 589,0 nm untuk kadar natrium dan pada λ 285,2 nm untuk kadar magnesium

(8)

Lampiran 5. Data Kalibrasi Kalium dengan Spektrofotometer Serapan Atom,

Perhitungan Persamaan Garis Regresi dan Koefisien Korelasi (r) No. Konsentrasi (µg/ml)

(X)

Absorbansi (Y)

1. 0,0000 -0,0020

2. 2,0000 0,0853

3. 4,0000 0,1711

4. 6,0000 0,2437

5. 8,0000 0,3267

6. 10,0000 0,4036

No. X Y X2 Y2 XY

1. 0,0000 -0,0020 0,0000 0,00000400 0,0000

2. 2,0000 0,0853 4,0000 0,00727609 0,1706

3. 4,0000 0,1711 16,0000 0,02927521 0,6844

4. 6,0000 0,2437 36,0000 0,05938969 1,4622

5. 8,0000 0,3267 64,0000 0,10673289 2,6136

6. 10,0000 0,4036 100,0000 0,16289296 4,0360 ∑ 30,0000

X = 5

1,2284 Y = 0,20473

220,0000 0,36557084 8,9668

a =

( )

X n

X n Y X XY / / 2 2

∑

∑ ∑

− − =

( )(

)

( )

30 /6 220 6 / 2284 , 1 30 9668 , 8 2 − − = 0,040354 Y = a X + b b = Y− aX

= 0,20473 – (0,040354)(5) = 0,002962

Maka persamaan garis regresinya adalah: Y = 0,040354X+0,002962

=

( )(

)

( )

(9)

Lampiran 6. Data Kalibrasi Kalsium dengan Spektrofotometer Serapan Atom,

(X)

Absorbansi (Y)

1. 0,0000 -0,0002

2. 2,0000 0,0812

3. 4,0000 0,1472

4. 6,0000 0,2121

5. 8,0000 0,2879

6. 10,0000 0,3552

No. X Y X2 Y2 XY

1. 0,0000 -0,0002 0,0000 0,00000004 0,0000

2. 2,0000 0,0812 4,0000 0,00659344 0,1624

3. 4,0000 0,1472 16,0000 0,02166784 0,5888

4. 6,0000 0,2121 36,0000 0,04498641 1,2726

5. 8,0000 0,2879 64,0000 0,08288641 2,3032

6. 10,0000 0,3552 100,0000 0,12616704 3,5520 ∑ 30,0000

X = 5

1,0834 Y = 0,180567

220,0000 0,28230118 7,8790

a =

( )

X n

X n Y X XY / / 2 2

∑

∑ ∑

− − =

( )(

)

( )

30 /6 220 6 / 0834 , 1 30 8790 , 7 2 − − = 0,035171 Y = a X + b b = Y− aX

= 0,180567 – (0,035171)(5) = 0,0047095

Maka persamaan garis regresinya adalah: Y = 0,035171X + 0,004710

=

( )(

)

( )

(10)

Lampiran 7. Data Kalibrasi Natrium dengan Spektrofotometer Serapan Atom,

(X)

Absorbansi (Y)

1. 0,0000 -0,0001

2. 0,2000 0,0265

3. 0,4000 0,0489

4. 0,6000 0,0715

5. 0,8000 0,0932

6. 1,0000 0,1186

No. X Y X2 Y2 XY

1. 0,0000 -0,0001 0,0000 0,00000001 0,0000

2. 0,2000 0,0265 0,0400 0,00070225 0,0053

3. 0,4000 0,0489 0,1600 0,00239121 0,01956

4. 0,6000 0,0715 0,3600 0,00511225 0,0429

5. 0,8000 0,0932 0,6400 0,00868624 0,07456

6. 1,0000 0,1186 1,0000 0,01406596 0,1186

∑ 3,0000

X = 0,5

0,3586 Y= 0,059767

2,2000 0,03095792 0,26092

a =

( )

X n

X n Y X XY / / 2 2

∑

∑ ∑

− − =

( )(

)

( )

3 /6 2 , 2 6 / 3586 , 0 3 26092 , 0 2 − − = 0,116600 Y = a X + b b = Y− aX

= 0,059767 – (0,116600)(0,5) = 0,001467

=

( )

(11)

Lampiran 8. Data Kalibrasi Magnesium dengan Spektrofotometer Serapan

Atom, Perhitungan Persamaan Garis Regresi dan Koefisien Korelasi (r)

No. Konsentrasi (µg/ml) (X)

Absorbansi (Y)

1. 0,0000 -0,0001

2. 0,2000 0,0801

3. 0,4000 0,1611

4. 0,6000 0,2369

5. 0,8000 0,3163

6. 1,0000 0,3848

No. X Y X2 Y2 XY

1. 0,0000 -0,0001 0,0000 0,00000001 0,0000

2. 0,2000 0,0801 0,0400 0,00641601 0,01602

3. 0,4000 0,1611 0,1600 0,02595321 0,06444

4. 0,6000 0,2369 0,3600 0,05612161 0,14214

5. 0,8000 0,3163 0,6400 0,10004569 0,25304

6. 1,0000 0,3848 1,0000 0,14807104 0,3848

∑ 3,0000 X = 0,5

1,1791 Y = 0,196517

2,2000 0,33660757 0,86044

a =

( )

X n

X n Y X XY / / 2 2

∑

∑ ∑

− − =

( )

3 /6 2 , 2 6 / 1791 , 1 3 86044 , 0 2 − − = 0,386986 Y = a X + b b = Y− aX

= 0,196517 – (0,386986)(0,5) = 0,003024

=

( )

(12)

Lampiran 9. Perhitungan Batas Deteksi dan Batas Kuantitasi

1. Perhitungan Batas Deteksi dan Batas Kuantitasi Kalium Y = 0,040354X+0,002962

Slope = 0,040354

No

Konsentrasi (µg/ml)

(X)

Absorbansi

(Y) Yi Y-Yi (Y-Yi)

2

x10-6

1 0,0000 -0,0020 0,002962 -0,004962 24,62

2 2,0000 0,0853 0,083670 0,001630 2,66

3 4,0000 0,1711 0,164378 0,006722 45,19

4 6,0000 0,2437 0,245086 -0,001386 1,92

5 8,0000 0,3267 0,325794 0,000906 0,82

6 10,0000 0,4036 0,406502 -0,002902 8,42

Ʃ 83,63

( )

2 -n

Y -Yi /

2

∑

= x Sy

=

2 6

10 x 83,63 -6

− = 0,00457247

LOD =

Slope x Sy x( / ) 3

= 3 x 0,00457247 0,040354

= 0,3399 µg/ml

LOQ =

= 10 x 0,00457247

0,040354

= 1,1331 µg/ml

(13)

2. Perhitungan Batas Deteksi dan Batas Kuantitasi Kalsium Y = 0,035171X+0,004710

Slope = 0,035171

No

(X)

Absorbansi

(Y) Yi Y-Yi (Y-Yi)

2

x10-6

1 0,0000 -0,0002 0,004710 -0,004910 24,11

2 2,0000 0,0812 0,075052 0,006148 37,8

3 4,0000 0,1472 0,145394 0,001806 3,26

4 6,0000 0,2121 0,215736 -0,003636 13,22

5 8,0000 0,2879 0,286078 0,001822 3,32

6 10,0000 0,3552 0,356420 -0,001220 1,49

Ʃ 83,2

( )

2 -n

Y -Yi /

2

∑

= x Sy

=

2 6

10 x 83,2 -6

− = 0,00456070

LOD =

= 3 x 0,00456070 0,035171

= 0,3890 µg/ml

LOQ =

= 10 x 0,00456070

0,035171

= 1,2967 µg/ml

(14)

3. Perhitungan Batas Deteksi dan Batas Kuantitasi Natrium Y = 0,116600X+0,001467

Slope = 0,1166

No

(X)

Absorbansi

(Y) Yi Y-Yi (Y-Yi)

2

x10-6

1 0,0000 -0,0001 0,001467 -0,001567 2,455

2 0,2000 0,0265 0,024787 0,001713 2,934

3 0,4000 0,0489 0,048107 0,000793 0,629

4 0,6000 0,0715 0,071427 0,000073 0,005

5 0,8000 0,0932 0,094747 -0,001547 2,393

6 1,0000 0,1186 0,118067 0,000533 0,284

Ʃ 8,7

( )

2 -n

Y -Yi /

2

∑

= x Sy

=

2 6

10 x 8,7 -6

− = 0,00147479

LOD =

= 3 x 0,00147479 0,1166

= 0,0379 µg/ml

LOQ =

= 10 x 0,00147479

0,1166

= 0,1265 µg/ml

(15)

4. Perhitungan Batas Deteksi dan Batas Kuantitasi Magnesium Y = 0,386986X+0,003024

Slope = 0,386986

No

(X)

Absorbansi

(Y) Yi Y-Yi (Y-Yi)

2

x10-6 1 0,0000 -0,0001 0,0030240 -0,0031240 9,76

2 0,2000 0,0801 0,0804212 -0,0003212 0,1

3 0,4000 0,1611 0,1578184 0,0032816 10,77

4 0,6000 0,2369 0,2352156 0,0016844 2,84

5 0,8000 0,3163 0,3126128 0,0036872 13,6

6 1,0000 0,3848 0,3900100 -0,0052100 27,14

Ʃ 64,21

( )

2 -n

Y -Yi /

2

∑

= x Sy

=

2 6

10 x 64,21 -6

− = 0,00400656

LOD =

= 3 x 0,00400656 0,386986

= 0,0311 µg/ml

LOQ =

= 10 x 0,00400656

0,386986

(16)

Lampiran 10. Hasil Analisis Kadar Kalium, Kalsium, Natrium, dan Magnesium

dalam Pare Segar 1. Hasil Analisis Kadar Kalium

Sampel Berat Sampel (g) Absorbansi (A) Konsentrasi (µg/ml) Kadar (mg/100g)

1 20,0150 0,2851 6,9915 174,6565

2 20,0800 0,2836 6,9544 173,1673

3 20,0250 0,2898 7,1080 177,4782

4 20,0350 0,2899 7,1105 177,4519

5 20,0500 0,2891 7,0906 176,8304

6 20,0600 0,2866 7,0287 175,1919

2. Hasil Analisis Kadar Kalsium Sampel Berat Sampel

(g) Absorbansi (A) Konsentrasi (µg/ml) Kadar (mg/100g)

1 20,0150 0,2826 7,9011 3,9476

2 20,0800 0,2824 7,8954 3,9320

3 20,0250 0,2890 8,0830 4,0365

4 20,0350 0,2889 8,0802 4,0330

5 20,0500 0,2902 8,1172 4,0485

6 20,0600 0,2876 8,0433 4,0096

3. Hasil Analisis Kadar Natrium Sampel Berat Sampel

1 20,0150 0,0809 0,6812 3,4034

2 20,0800 0,0791 0,6658 3,3157

3 20,0250 0,0833 0,7018 3,5046

4 20,0350 0,0799 0,6726 3,3571

5 20,0500 0,0828 0,6975 3,4788

6 20,0600 0,0849 0,7155 3,5667

4. Hasil Analisis Kadar Magnesium Sampel Berat Sampel

1 20,0150 0,3254 0,8330 41,6187

2 20,0800 0,3136 0,8025 39,9651

3 20,0250 0,3141 0,8038 40,1398

4 20,0350 0,3063 0,7836 39,1115

5 20,0500 0,3137 0,8028 40,0399

(17)

Lampiran 11. Hasil Analisis Kadar Kalium, Kalsium, Natrium, dan Magnesium

dalam Pare Rebus 1. Hasil Analisis Kadar Kalium

Sampel Berat Sampel (g) Absorbansi (A) Konsentrasi (µg/ml) Kadar (mg/100g)

1 20,0550 0,1788 4,3574 108,6362

2 20,0850 0,1658 4,0352 100,4531

3 20,0350 0,1598 3,8865 96,9927

4 20,0250 0,1733 4,2211 105,3957

5 20,0750 0,1745 4,2508 105,8729

6 20,0400 0,1610 3,9163 97,7121

2. Hasil Analisis Kadar Kalsium Sampel Berat Sampel

1 20,0550 0,2187 6,0843 3,0338

2 20,0850 0,2173 6,0445 3,0095

3 20,0350 0,2170 6,0359 3,0127

4 20,0250 0,2162 6,0132 3,0029

5 20,0750 0,2166 6,0246 3,0011

6 20,0400 0,2207 6,1411 3,0644

3. Hasil Analisis Kadar Natrium Sampel Berat Sampel

1 20,0550 0,0596 0,4986 2,4862

2 20,0850 0,0572 0,4780 2,3798

3 20,0350 0,0579 0,4840 2,4157

4 20,0250 0,0598 0,5003 2,4984

5 20,0750 0,0573 0,4788 2,3851

6 20,0400 0,0592 0,4951 2,4705

4. Hasil Analisis Kadar Magnesium Sampel Berat Sampel

1 20,0550 0,2812 0,7188 35,8414

2 20,0850 0,2740 0,7002 34,8618

3 20,0350 0,2773 0,7088 35,3781

4 20,0250 0,2855 0,7299 36,4494

5 20,0750 0,2737 0,6994 34,8393

(18)

Lampiran 12. Contoh Perhitungan Kadar Kalium, Kalsium, Natrium, dan

Magnesium dalam Pare Segar 1. Contoh Perhitungan Kadar Kalium

Berat Sampel yang ditimbang = 20,0150 gram Absorbansi (Y) = 0,2851

Persamaan Regresi: Y= 0,040354X + 0,002962 X = 040354 , 0 002962 , 0 2851 , 0 −

= 6,9915 µg/ml Konsentrasi Kadar Kalium = 6,9915 µg/ml

Kadar logam(µg/g) = Konsentrasi(µg/ml) x Volume (ml) x Faktor Pengenceran Berat Sampel (g)

= g mlx mlx g 0150 , 20 ) 5 , 0 / 25 ( 100 / 9915 , 6 µ

= 1746,5651 µg/g = 174,6565 mg/100g

2. Contoh Perhitungan Kadar Kalsium

= 7,9011 µg/ml Konsentrasi Kadar Kalsium = 7,9011 µg/ml

= g mlx mlx g 0150 , 20 ) 100 / 100 ( 100 / 9011 , 7 µ

(19)

Lampiran 12. (Lanjutan)

3. Contoh Perhitungan Kadar Natrium

= 0,6812 µg/ml Konsentrasi Kadar Natrium = 0,6812 µg/ml

= g mlx mlx g 0150 , 20 ) 5 , 2 / 25 ( 100 / 6812 , 0 µ

= 34,0344 µg/g = 3,4034 mg/100g

4. Contoh Perhitungan Kadar Magnesium Berat Sampel yang ditimbang = 20,0150 gram Absorbansi (Y) = 0,3254

= 0,8330 µg/ml

Konsentrasi Kadar Magnesium = 0,8330 µg/ml

= g mlx mlx g 0150 , 20 ) 25 , 0 / 25 ( 100 / 8330 , 0 µ

(20)

Lampiran 13. Contoh Perhitungan Kadar Kalium, Kalsium, Natrium, dan

Magnesium dalam Pare Rebus 1. Contoh Perhitungan Kadar Kalium

= 4,3574 µg/ml Konsentrasi Kadar Kalium = 4,3574 µg/ml

= g mlx mlx g 0550 , 20 ) 5 , 0 / 25 ( 100 / 3574 , 4 µ

= 1086,3625 µg/g = 108,6362 mg/100g

2. Contoh Perhitungan Kadar Kalsium

= 6,0843 µg/ml Konsentrasi Kadar Kalsium = 6,0843 µg/ml

= g mlx mlx g 0550 , 20 ) 100 / 100 ( 100 / 0843 , 6 µ

(21)

Lampiran 13. (Lanjutan)

3. Contoh Perhitungan Kadar Natrium

= 0,4986 µg/ml Konsentrasi Kadar Natrium = 0,4986 µg/ml

= g mlx mlx g 0550 , 20 ) 5 , 2 / 25 ( 100 / 4986 , 0 µ

= 24,8616 µg/g = 2,4862 mg/100g

4. Contoh Perhitungan Kadar Magnesium Berat Sampel yang ditimbang = 20,0550 gram Absorbansi (Y) = 0,2812

= 0,7188 µg/ml

Konsentrasi Kadar Magnesium = 0,7188 µg/ml

= g mlx mlx g 0550 , 20 ) 25 , 0 / 25 ( 100 / 7188 , 0 µ

(22)

Lampiran 14.Perhitungan Statistik Kadar Kalium dalam Sampel

1. Perhitungan Statistik Kadar Kalium dalam Pare Segar

No.

Xi

Kadar (mg/100g) (Xi-X ) (Xi-X)2

1. 174,6565 -1,1395 1,29846025

2. 173,7547 -2,6287 6,91006369

3. 177,4782 1,6822 2,82979684

4. 177,4519 1,6559 2,74200481

5. 176,8304 1,0344 1,06998336

6. 175,1919 -0,6041 0,36493681

∑ 1054,7762

X _{= 175,7960}

15,21524576

SD =

( )

1 -n X -Xi 2

∑

= 1 -6 21524576 , 15 = 1,7444

Pada interval kepercayaan 99%, dengan nilai α = 0.01 n = 6 dk = 5, diperoleh nilai t tabel = α/2, dk = 4,0321.

Data diterima jika t hitung < t tabel

t hitung =

n SD X Xi / −

t hitung 1 =

6 / 7444 , 1 1395 , 1 − = 1,6002

t hitung 2 =

6 / 7444 , 1 6287 , 2

− _{= 3,6914}

t hitung 3 =

6 / 7444 , 1 6822 , 1 = 2,3623

t hitung 4 =

6 / 7444 , 1 6559 , 1 = 2,3253

t hitung 5 =

(23)

t hitung 6 =

6 / 7444 , 1 6041 , 0 − = 0,8483

Dari hasil perhitungan di atas, didapat semua t hitung < t tabel , maka semua data

diterima.

Kadar Kalium dalam Pare Segar adalah µ = X ± t (α/2, dk) x SD / √n

= 175,7960 ± (4,0321 x 1,7444 / √6 ) = (175,7960 ± 2,8712) mg/100g

2. Perhitungan Statistik Kadar Kalium dalam Pare Rebus

No.

Xi

Kadar (mg/100g) (Xi-X ) (Xi-X )2

1. 108,6362 6,1257 37,52420049

2. 100,4531 -2,0574 4,23289476

3. 96,9927 -5,5178 30,44611684

4. 105,3957 2,8852 8,32437904

5. 105,8729 3,3624 11,30573376

6. 97,7121 -4,7984 23,02464256

∑ 615,0627

X _{= 102,5105}

114,8579675

SD =

( )

1 -n X -Xi 2

∑

= 1 -6 8579675 , 114 = 4,7928

t hitung =

n SD X Xi / −

t hitung 1 =

(24)

Lampiran 14. (Lanjutan)

t hitung 2 =

6 / 7928 , 4

0574 , 2 −

= 1,0515

t hitung 3 =

6 / 7928 , 4

5178 , 5 −

= 2,8201

t hitung 4 =

6 / 7928 , 4

8852 , 2

= 1,4745

t hitung 5 =

6 / 7928 , 4

3624 , 3

= 1,7185

t hitung 6 =

6 / 7928 , 4

7984 , 4

− _{= 2,4524}

diterima.

Kadar Kalium dalam Pare Rebus adalah µ = X ± t (α/2, dk) x SD / √n

(25)

Lampiran 15. Perhitungan Statistik Kadar Kalsium dalam Sampel

1. Perhitungan Statistik Kadar Kalsium dalam Pare Segar

No.

Xi

1. 3,9476 -0,0536 0,00287296

2. 3,9320 -0.0692 0,00478864

3. 4,0365 0,0353 0,00124609

4. 4,0330 0,0318 0,00101124

5. 4,0485 0,0473 0,00223729

6. 4,0096 0,0084 0,00007056

∑ 24,0072

X _{= 4,0012}

0,01222678

SD =

( )

1 -n X -Xi 2

∑

= 1 -6 01222678 , 0 = 0,0495

t hitung =

n SD X Xi / −

t hitung 1 =

6 / 0495 , 0 0536 , 0

− _{= 1,0828}

t hitung 2 =

6 / 0495 , 0 0692 , 0

− _{= 3,4257}

t hitung 3 =

6 / 0495 , 0 0353 , 0 = 1,7475

t hitung 4 =

6 / 0495 , 0 0318 , 0 = 1,5743

t hitung 5 =

(26)

Lampiran 15. (Lanjutan)

t hitung 6 =

6 / 0495 , 0 0084 , 0 = 0,4158

diterima.

Kadar Kalsium dalam Pare Segar adalah µ = X ± t (α/2, dk) x SD / √n

= 4,0012 ± (4,0321 x 0,0495 / √6 ) = (4,0012 ± 0,0814) mg/100g

2. Perhitungan Statistik Kadar Kalsium dalam Pare Rebus

No.

Xi

1. 3,0338 0,0131 0,00017161

2. 3,0095 -0,0112 0,00012544

3. 3,0127 -0,0080 0,00006400

4. 3,0029 -0,0178 0,00031684

5. 3,0011 -0,0196 0,00038416

6. 3,0644 0,0437 0,00190969

∑ 18,1244

X _{= 3,0207}

0,00297174

SD=

( )

1 -n X -Xi 2

∑

= 1 -6 00297174 , 0 = 0,0244

t hitung =

n SD X Xi / −

t hitung 1 =

(27)

Lampiran 15. (Lanjutan)

t hitung 2 =

6 / 0244 , 0 0112 , 0 − = 1,1313

t hitung 3 =

6 / 0244 , 0 0080 , 0 − = 0,8081

t hitung 4 =

6 / 0244 , 0 0178 , 0 − = 1,7979

t hitung 5 =

6 / 0244 , 0 0196 , 0 − = 1,9797

t hitung 6 =

6 / 0244 , 0 0437 , 0 = 4,4141

Dari hasil perhitungan di atas, data ke-6 tidak memenuhi, sehingga perhitungan diulangi dengan cara yang sama tanpa mengikutsertakan data ke-6.

No.

Xi

1. 3,0338 0,0218 0,00047524

2. 3,0095 -0,0025 0,00000625

3. 3,0127 0,0007 0,00000049

4. 3,0029 -0,0091 0,00008281

5. 3,0011 -0,0109 0,00011881

∑ 15,0600

X _{= 3,0120}

0,0006836

SD =

( )

1 -n X -Xi 2

∑

= 1 -5 0006836 , 0 = 0,0131

t hitung =

(28)

Lampiran 15. (Lanjutan)

t hitung 1 =

5 / 0131 , 0

0218 , 0

= 3,6949

t hitung 2 =

5 `/ 0131 , 0

0025 , 0 −

= 0,4237

t hitung 3 =

5 / 0131 , 0

0007 , 0

= 0,1186

t hitung 4 =

5 / 0131 , 0

0091 , 0 −

= 1,5423

t hitung 5 =

5 / 0131 , 0

0109 , 0

− _{= 1,8475}

diterima.

Kadar Kalsium dalam Pare Rebus adalah µ = X ± t (α/2, dk) x SD / √n

(29)

Lampiran 16. Perhitungan Statistik Kadar Natrium Sampel

1. Perhitungan Statistik Kadar Natrium dalam Pare Segar

No.

Xi

1. 3,4034 -0,0343 0,00117649

2. 3,3157 -0,1220 0,01488400

3. 3,5046 0,0669 0,00447561

4. 3,3571 -0,0806 0,00649636

5. 3,4788 0,0411 0,00168921

6. 3,5667 0,1290 0,01664100

∑ 20,6263

X _{= 3,4377}

0,04536267

SD =

( )

1 -n X -Xi 2

∑

= 1 -6 04536267 , 0 = 0,0952

t hitung =

n SD X Xi / −

t hitung 1 =

6 / 0952 , 0 0343 , 0

− _{= 0,8840}

t hitung 2 =

6 / 0952 , 0 1220 , 0

− _{= 3,1443}

t hitung 3 =

6 / 0952 , 0 0669 , 0 = 1,7242

t hitung 4 =

6 / 0952 , 0 0806 , 0

− _{= 2,0773}

t hitung 5 =

(30)

Lampiran 16. (Lanjutan)

t hitung 6 =

6 / 0952 , 0 1290 , 0 = 3,3247

diterima.

Kadar Natrium dalam Pare Segar adalah µ = X ± t (α/2, dk) x SD / √n

= 3,4377 ± (4,0321 x 0,0952 / √6 ) = (3,4377 ± 0,1564) mg/100g

2. Perhitungan Statistik Kadar Natrium dalam Pare Rebus

No.

Xi

1. 2,4862 0,0469 0,00219961

2. 2,3798 -0,0595 0,00354025

3. 2,4157 -0,0236 0,00055696

4. 2,4984 0,0591 0,00349281

5. 2,3851 -0,0542 0,00293764

6. 2,4705 0,0312 0,00097344

∑ 14,6357

X _{= 2,4393}

0,01370071

SD =

( )

1 -n X -Xi 2

∑

= 1 -6 01370071 , 0 = 0,0523

t hitung =

n SD X Xi / −

t hitung 1 =

(31)

Lampiran 16. (Lanjutan)

t hitung 2 =

6 / 0523 , 0

0595 , 0 −

= 2,7934

t hitung 3 =

6 / 0523 , 0

0236 , 0 −

= 1,1079

t hitung 4 =

6 / 0523 , 0

0591 , 0

= 2,7746

t hitung 5 =

6 / 0523 , 0

0542 , 0 −

= 2,5446

t hitung 6 =

6 / 0523 , 0

0312 , 0

= 1,4647

diterima.

Kadar Natrium dalam Pare Rebus adalah µ = X ± t (α/2, dk) x SD / √n

(32)

Lampiran 17. Perhitungan Statistik Kadar Magnesium dalam Sampel

1. Perhitungan Statistik Kadar Magnesium dalam Pare Segar

No.

Xi

1. 41,6710 1,3649 1,86295201

2. 39,6500 -0,2887 0,08334769

3. 40,7770 -0,1140 0,01299600

4. 39,6088 -1,1423 1,30484929

5. 40,5896 -0,2139 0,04575321

6. 40,8279 0,3942 0,15539364

∑ 241,5230

X _{= 40,2538}

3,46529184

SD =

( )

1 -n X -Xi 2

∑

= 1 -6 46529184 , 3 = 0,8325

Data diterima jika t hitung < ttabel

t hitung =

n SD X Xi / −

t hitung 1 =

6 / 8325 , 0 3649 , 1 = 4,0167

t hitung 2 =

6 / 8325 , 0 2887 , 0

− _{= 0,8496}

t hitung 3 =

6 / 8325 , 0 1140 , 0

− _{= 0,3354}

t hitung 4 =

6 / 8325 , 0 1423 , 1

− _{= 3,3616}

t hitung 5 =

6 / 8325 , 0 2139 , 0

(33)

Lampiran 17. (Lanjutan)

t hitung 6 =

6 / 8325 , 0 3942 , 0 = 1,1600

diterima.

Kadar Magnesium dalam Pare Segar adalah µ = X ± t (α/2, dk) x SD / √n

= 40,2538 ± (4,0321 x 0,8325 / √6 ) = (40,2538 ± 1,3701) mg/100g

2. Perhitungan Statistik Kadar Magnesium dalam Pare Rebus

No.

Xi

1. 35,7259 0,3233 0,10452289

2. 34,6860 -0,6563 0,43072969

3. 35,7054 -0,1400 0,01960000

4. 36,6745 0,9313 0,86731969

5. 34,7458 -0,6788 0,46076944

6. 35,7856 0,2204 0,04857616

∑ 213,1085

X _{= 35,5181}

1,93151787

SD =

( )

1 -n X -Xi 2

∑

= 1 -6 93151787 , 1 = 0,6215

t hitung =

n SD X Xi / −

t hitung 1 =

(34)

Lampiran 17. (Lanjutan)

t hitung 2 =

6 / 6215 , 0

6563 , 0 −

= 2,5869

t hitung 3 =

6 / 6215 , 0

1400 , 0 −

= 0,5518

t hitung 4 =

6 / 6215 , 0

9313 , 0

= 3,6708

t hitung 5 =

6 / 6215 , 0

6788 , 0 −

= 2,6756

t hitung 6 =

6 / 6215 , 0

2204 , 0

= 0,8687

diterima.

Kadar Magnesium dalam Pare Rebus adalah µ = X ± t (α/2, dk) x SD / √n

(35)

Lampiran 18. Persentase Penurunan Kadar Kalium, Kalsium, Natrium, dan

Magnesium dalam Pare Segar dan Rebus 1. Kalium

Kadar Kalium Pare Segar adalah 175,7960 mg/100g Kadar Kalium Pare Rebus adalah 102,5105 mg/100g Persentase Penurunan Kadar Kalium pada Pare adalah :

Kadar rata−rata logam dalam Pare segar – Kadar rata−rata logam dalam Pare rebus

Kadar rata−rata logam dalam Pare segar x 100%

(175,7960 − 102,5105) mg/100g

175,7960 mg/100g x 100% = 41,69%

2. Kalsium

Kadar Kalsium Pare Segar adalah 4,0012 mg/100g Kadar Kalsium Pare Rebus adalah 3,0120 mg/100g Persentase Penurunan Kadar Kalsium pada Pare adalah :

(4,0012 − 3,0120) mg/100g

4,0012 mg/100g x 100% = 24,72%

3. Natrium

Kadar Natrium Pare Segar adalah 3,4377 mg/100g Kadar Natrium Pare Rebus adalah 2,4393 mg/100g Persentase Penurunan Kadar Natrium pada Pare adalah :

(3,4377 – 2,4393) mg/100g

(36)

Lampiran 18. (Lanjutan)

4. Magnesium

Kadar Magnesium Pare Segar adalah 40,2538 mg/100g Kadar Magnesium Pare Rebus adalah 35,5181 mg/100g Persentase Penurunan Kadar Magnesium pada Pare adalah :

(40,2538 – 35,5181) mg/100g

(37)

Lampiran 19. Hasil Pengujian Beda Nilai Rata-Rata Kadar Kalium dalam Pare

Segar dan Pare Rebus

No. Pare Segar Pare Rebus

1. X1 = 175,7960 mg/100g X2 = 102,5105 mg/100g

2. S1 = 1,7444 S2 = 4,7928

Dilakukan uji F dengan taraf kepercayaan 99% untuk mengetahui apakah variasi kedua populasi sama (σ1 = σ2) atau berbeda (σ1 ≠ σ2 ).

− Ho : σ1 = σ2

H1 : σ1 ≠ σ2

− Nilai kritis F yang diperoleh dari tabel (F0,01/2 (5,5)) adalah = 14,94

Daerah kritis penerimaan : Jika Fo ≤ 14,94 Daerah kritis penolakan : jika Fo ≥ 14,94

Fo = 2 2 2 1 S S

Fo = ₂

2

7928 , 4 1,7444

Fo = 0,1325

− Dari hasil ini menunjukkan bahwa Ho diterima dan H1 ditolak sehingga

disimpulkan bahwa σ1 = σ2, simpangan bakunya adalah:

Sp =

2 1 1 2 1 2 2 2 2 1 1 − − − n + n )S (n + )S (n = 2 6 6 4,7928 1 6 7444 , 1 1

6 2 2

(38)

Lampiran 19. (Lanjutan)

− Ho : µ1 = µ2

H1 : µ1 ≠ µ2

− Dengan menggunakan taraf kepercayaan 99% dengan nilai α = 1 % → t0,01/2 = 3,1693 untuk df = 6+6-2 = 10

− Daerah kritis penerimaan : -3,1693 ≤ to≤ 3,1693

Daerah kritis penolakan : to< -3,1693 dan to> 3,1693

to =

(

)

2 1

/ 1 / 1

x -x

n n

Sp +

=

(

)

6 1 6 1 3,6065

102,5105

-175,7960 +

= 35,1962

− Karena to = 35,1962 > 3,1693 maka hipotesis ditolak. Berarti terdapat

(39)

Lampiran 20. Hasil Pengujian Beda Nilai Rata-Rata Kadar Kalsium dalam Pare

1. X1 = 4,0012 mg/100g X2 = 3,0120 mg/100g

2. S1 = 0,0495 S2 = 0,0244

− Ho : σ1 = σ2

H1 : σ1 ≠ σ2

Fo = 2 2 2 1 S S

Fo = ₂

2

0244 , 0 0,0495

Fo = 4,1148

Sp =

2 1 1 2 1 2 2 2 2 1 1 − − − n + n )S (n + )S (n = 2 5 6 0,0244 1 5 0495 , 0 1

6 2 2

(40)

Lampiran 20. (Lanjutan)

− Ho : µ1 = µ2

H1 : µ1 ≠ µ2

to =

(

)

2 1

/ 1 / 1

x -x

n n

Sp +

=

(

)

5 1 6 1 0,0403

3,0120

-4,0012 +

= 40,5409

(41)

Lampiran 21. Hasil Pengujian Beda Nilai Rata-Rata Kadar Natrium dalam Pare

1. X1 = 3,4377 mg/100g X2 = 2,4393 mg/100g

2. S1 = 0,0952 S2 = 0,0523

− Ho : σ1 = σ2

H1 : σ1 ≠ σ2

Fo = 2 2 2 1 S S

Fo = ₂

2

0523 , 0 0,0952

Fo = 3,3137

Sp =

2 1 1 2 1 2 2 2 2 1 1 − − − n + n )S (n + )S (n = 2 6 6 0,0523 1 6 0952 , 0 1

6 2 2

(42)

Lampiran 21. (Lanjutan)

− Ho : µ1 = µ2

H1 : µ1 ≠ µ2

to =

(

)

2 1

/ 1 / 1

x -x

n n

Sp +

=

(

)

6 1 6 1 0,0767

2,4393

-3,4377 +

= 22,5372

(43)

Lampiran 22. Hasil Pengujian Beda Nilai Rata-Rata Kadar Magnesium dalam

Pare Segar dan Pare Rebus

1. X1 = 40,2538 mg/100g X2 = 35,5181 mg/100g

2. S1 = 0,8325 S2 = 0,6215

− Ho : σ1 = σ2

H1 : σ1 ≠ σ2

Fo = 2 2 2 1 S S

Fo = ₂

2

6215 , 0 0,8325

Fo = 1,7942

Sp =

2 1 1 2 1 2 2 2 2 1 1 − − − n + n )S (n + )S (n = 2 6 6 0,6215 1 6 8325 , 0 1

6 2 2

(44)

Lampiran 22. (Lanjutan)

− Ho : µ1 = µ2

H1 : µ1 ≠ µ2

to =

(

)

2 1

/ 1 / 1

x -x

n n

Sp +

=

(

)

6 1 6 1 0,7346

35,5181

-40,2538 +

= 11,1665

(45)

Lampiran 23. Hasil Uji Recovery Kalium, Kalsium, Natrium, dan Magnesium

Setelah Penambahan Masing-masing Larutan Baku dalam Pare Segar

1. Hasil Uji Recovery Kalium Setelah Ditambahkan Larutan Baku Kalium Sampel Berat

Sampel (g) Absorbansi (A) Konsentrasi (µg/ml) Kadar (mg/100g) Persen Perolehan Kembali (%)

1 20,0250 0,3171 7,7845 194,3695 106,33

2 20,0350 0,3172 7,7870 194,3349 106,13

3 20,0500 0,3182 7,8118 194,8080 108,84

∑ 321,30

X 107,10

2. Hasil Uji Recovery Kalsium Setelah Ditambahkan Larutan Baku Kalsium Sampel Berat

1 20,0250 0,3220 9,0213 4,5050 100,94

2 20,0350 0,3228 9,0440 4,5141 102,76

3 20,0500 0,3214 9,0042 4,4909 98,12

∑ 301,82

X 100,60

3. Hasil Uji Recovery Natrium Setelah Ditambahkan Larutan Baku Natrium Sampel Berat

1 20,0250 0,0942 0,7953 3,9715 106,95

2 20,0350 0,0938 0,7919 3,9526 103,16

3 20,0500 0,0941 0,7945 3,9626 105,17

∑ 315,28

X 105,09

4. Hasil Uji Recovery Magnesium Setelah Ditambahkan Larutan Baku Magnesium

Sampel Berat Sampel (g) Absorbansi (A) Konsentrasi (µg/ml) Kadar (mg/100g) Persen Perolehan Kembali (%)

(46)

2 20,0350 0,3535 0,9057 45,2059 99,22

3 20,0500 0,3536 0,9059 45,1820 98,74

∑ 298,33

X 99,44

Lampiran 24.Perhitungan Penambahan Larutan Baku Kalium, Kalsium, Natrium,

dan Magnesium dalam Pare Segar 1. Penambahan Larutan Baku Kalium pada Sampel

Kadar Kalium = 175,7960 ± 2,8712 mg/100g = 176 mg/100 g

Penambahan baku 10% dari baku 1000 µg/ml = 176mg

100g × 10g

100ml= 176µg/ml

Volume penambahan baku kalium yang diambil dari larutan baku kalium dengan konsentrasi 1000 µg/ml =

Kadar baku standar = konsentrasi logam yang ditambah

berat sampel rata-rata × volpenambahan baku 176µg/ml =

g ml g 20

Y × / 1000µ

Y =

ml g ml g

/ 1000

20g × / 176

µ µ

= 3,5 ml

2. Penambahan Larutan Baku Kalsium pada Sampel Kadar Kalsium = 4,0012 ± 0,0814 mg/100g

= 4,0 mg/100 g

Penambahan baku 10% dari baku 1000 µg/ml = 4,0 mg

100g × 10g

(47)

Lampiran 24.(Lanjutan)

Volume penambahan baku kalsium yang diambil dari larutan baku kalsium dengan konsentrasi 100 µg/ml =

berat sampel rata-rata × volpenambahan baku 4,0 µg/ml =

g ml g 20 Y × / 100µ Y = ml g ml g / 100 20g × / 0 , 4 µ µ

= 1 ml

3. Penambahan Larutan Baku Natrium pada Sampel Kadar Natrium = 3,4377 ± 0,1564 mg/100g

= 3,4 mg/100 g

100g × 10g

100ml= 3,4 µg/ml

Volume penambahan baku natrium yang diambil dari larutan baku natrium dengan konsentrasi 100 µg/ml =

g ml g 20 Y × / 100µ Y = ml g ml g / 100 20g × / 4 , 3 µ µ

(48)

Lampiran 24.(Lanjutan)

4. Penambahan Larutan Baku Magnesium pada Sampel Kadar Magnesium = 40,2538 ± 1,3701 mg/100g

= 40,3 mg/100g

100g × 10g

100ml= 40,3 µg/ml

Volume penambahan baku magnesium yang diambil dari larutan baku magnesium dengan konsentrasi 1000 µg/ml =

g ml g 20

Y × / 1000µ

Y =

ml g ml g

/ 1000

20g × / 3 , 40

µ µ

(49)

Lampiran 25. Contoh Perhitungan Uji Perolehan Kembali Kalium, Kalsium,

Natrium, dan Magnesium dalam Pare Segar 1. Contoh Perhitungan Uji Perolehan Kembali Kadar Kalium Persamaan regresi: Y= 0,040354X + 0,002962

Absorbansi (Y) = 0,3171 X = 040354 , 0 002962 , 0 3171 , 0 −

= 7,7845 µg/ml

Konsentrasi setelah ditambahkan larutan baku = 7,7845 µg/ml Kadar sampel setelah ditambah larutan baku (CF)

CF = Konsentrasi(µg/ml) x Volume (ml) x Faktor Pengenceran

Berat Sampel (g) = g mlx mlx g 0250 , 20 ) 5 , 0 / 25 ( 100 / 7845 , 7 µ

= 1943,6954 µg/g = 194,3695 mg/100g

Kadar sampel setelah ditambah larutan baku (CF) = 194,3695 mg/100g

Kadar rata-rata sampel sebelum ditambah larutan baku (CA) = 175,7960 mg/100g

Berat sampel rata-rata uji recovery = 20,0367 g Kadar larutan standar yang ditambahkan (C*A)

C*A = Konsentrasi logam yang ditambahkan x ml yang ditambah

Berat sampel rata-rata = g ml g 0367 , 20 / 1000µ

x 3,5 ml = 174,6794 µg/g = 17,4679 mg/100g

(50)

Lampiran 25. (Lanjutan)

2. Contoh Perhitungan Uji Perolehan Kembali Kadar Kalsium Persamaan regresi: Y= 0,035171X + 0,004710

Absorbansi (Y) = 0,3220 X = 035171 , 0 004710 , 0 3220 , 0 −

= 9,0213 µg/ml

Berat Sampel (g) = g mlx mlx g 0250 , 20 ) 100 / 100 ( 100 / 0213 , 9 µ

= 45,0502 µg/g = 4,5050 mg/100g

x 1 ml = 4,9908 µg/g = 0,4991 mg/100g

(51)

Lampiran 25. (Lanjutan)

3. Contoh Perhitungan Uji Perolehan Kembali Kadar Natrium Persamaan regresi: Y= 0,116600X + 0,001467

Absorbansi (Y) = 0,0942 X = 01166 , 0 001467 , 0 0942 , 0 −

= 0,7953 µg/ml

= 39,7153 µg/g = 3,9715 mg/100g

x 1 ml = 4,9908 µg/g = 0,4991 mg/100g

(52)

Lampiran 25. (Lanjutan)

4. Contoh Perhitungan Uji Perolehan Kembali Kadar Magnesium Persamaan regresi: Y= 0,386986X + 0,003024

Absorbansi (Y) = 0,3538 X = 386986 , 0 003024 , 0 3538 , 0 −

= 0,9064 µg/ml

= 452,6342 µg/g = 45,2634 mg/100g

x 1 ml = 49,9084 µg/g = 4,9910 mg/100g

(53)

Lampiran 26. Perhitungan Simpangan Baku Relatif (RSD) Kadar Kalium,

Kalsium, Natrium, dan Magnesium dalam Pare Segar 1. Perhitungan Simpangan Baku Relatif (RSD) Kadar Kalium

No. % Perolehan Kembali (Xi) (%) (Xi-X ) (Xi-X )2

1. 106,33 -0,77 0,5929

2. 106,13 -0,97 0,9409

3. 108,84 1,74 3,0276

∑ 321,30 4,5614

X 107,10

SD =

( )

1 -n

X -Xi 2

∑

=

1 -3 5614 , 4

= 1,51

RSD = X SD

x 100%

= 1 , 107

51 , 1

(54)

2. Perhitungan Simpangan Baku Relatif (RSD) Kadar Kalsium

1. 100,94 0,34 0,1156

2. 102,76 2,16 4,6656

3. 98,12 -2,48 6,1504

∑ 301,82 10,9316

X 100,60

SD =

( )

1 -n

X -Xi 2

∑

=

1 -3

9316 , 10

= 2,33

RSD = X SD

x 100%

=

60 , 100

33 , 2

(55)

3. Perhitungan Simpangan Baku Relatif (RSD) Kadar Natrium

1. 106,95 1,86 3,4596

2. 103,16 -1,93 3,7249

3. 105,17 0,08 0,0064

∑ 315,28 7,1909

X 105,09

SD =

( )

1 -n

X -Xi 2

∑

=

1 -3 1909 , 7

= 1,89

RSD = X SD

x 100%

=

09 , 105

89 , 1

(56)

4. Perhitungan Simpangan Baku Relatif (RSD) Kadar Magnesium

1. 100,37 0,93 0,8649

2. 99,22 -0,22 0,0484

3. 98,74 -0,70 0,4900

∑ 298,33 1,4033

X 99,44

SD =

( )

1 -n

X -Xi 2

∑

=

1 -3 4033 , 1

= 0,84

RSD = X SD

x 100%

= 44 , 99

84 , 0

(57)

[image:57.595.126.496.97.426.2]

Lampiran 27. Gambar Alat-Alat yang Digunakan

Gambar 6. Spektrofotometer Serapan Atom (HITACHI Seri Z-2000)

(58)

[image:58.595.195.431.103.348.2]

Gambar 8. Neraca Analitik (BOECO)

Gambar 9. Purelab UHQ (Elga)

[image:58.595.205.418.387.609.2]

(59)

[image:59.595.207.417.83.301.2]

Gambar 10. Hot plate (BOECO)

Lampiran 28. Tabel Kandungan Nutrisi Buah Pare /100 g

(60)

Air 93,8 %

Energi 20 KJ

Karbohidrat 0,20 g

Serat 3,30 g

Asam organik 0,11 g

Abu 0,60 g

Kalsium 22 mg

Kalium 260 mg

Magnesium 16 mg

Besi 0,9 mg

Natrium 3,0 mg

Seng 0,1 mg

Vitamin A 0,04 mg

Thiamin 0,05 mg

Riboflavin 0,03 mg

Niacin 0,40 mg

Vitamin C 50,00 mg

Protein 0,90 g

Lemak 0,10 g

(Islam, dkk., 2011).

(61)

(62)

(63)

DAFTAR PUSTAKA

Almatsier, S. (2013). Prinsip Dasar Ilmu Gizi. Cetakan Kesembilan. Jakarta: PT. Gramedia Pustaka Utama. Halaman 228-238, 241-243, 247-250.

Anonim. (2014).Flame Atomic Absorption Spectroscopy.Diakses pada tanggal 1 September

Dalimartha, S. (2008). Atlas Tumbuhan Obat Indonesia Jilid 5. Cetakan Pertama. Jakarta: Pustaka Bunda. Halaman 131-132.

Ermer, J. dan McB. Miller, J. H. (2005). Method Validation in Pharmaceutical Analysis. A Guide to Best Practice. Weinheim: Wiley-Vch Verlag GmBH & Co. KGaA. Halaman 171.

Gandjar, I. G. dan Rohman, A. (2007).Kimia Farmasi Analisis. Cetakan Kedua. Yogyakarta: Pustaka Pelajar. Halaman 298-321.

Gemede, H. F. DanRatta, N. (2014). Antinutritional Factors in Plant Foods: Potential Health Benefits and Adverse Effects. International Journal of Nutrition and Food Sciences. 3(4): 284-289.

Harmita. (2004). Petunjuk Pelaksanaan Validasi Metode dan Cara Perhitungannya. Review Artikel Majalah Ilmu Kefarmasian. 1(3): 117-135. Isaac, R.A. (1988). Metal in Plants: Atomic Absorption Spectrophotometric

Method. Disunting Oleh: Helrich, K. (1990). Official Method of Analysis of the Association of Official of Chemist. Edisi Kelima belas. Virginia: AOAC Internasional. Halaman 42.

Islam, S., Mohammad, J., dan Navam, S.H. (2011). Bio-Active Compounds of Bitter Melon Genotypes (Momordica charantia L.) in Relation to Their Physiological Functions. Functional Foods in Heals and Disease. 2(1): 61-74.

Khomsan, A. (2009). Rahasia Sehat dengan Makanan Berkhasiat.Jakarta: PT Kompas Media Nusantara. Halaman 128, 132-135.

Khopkar, S. M. (1985). Basic Concepts of Analytical Chemistry. Penerjemah: A. Saptorahajo (1990). Konsep Dasar Kimia Analitik. Jakarta: UI Press. Halaman 275.

Koplik, R. (2014). Atomic Spectrometry. Diunduh dari http://web.vscht. cz/~poustkaj/en%20asfa%20au%20koplik%20atomic%20spectrometry.pdf.

(64)

Rizki, F. (2013). The Miracle of Vegetables.Jakarta: PT Agro Media Pustaka. Halaman 153.

Rohman, A., Harsojo, Raharjo, T. J., Sismindari, Triyana, K., dan Astuti, P. (2012). Analisis Makanan Dan Lingkungan Secara Fisika-Kimia. Cetakan Pertama. Yogyakarta: Pustaka Pelajar. Halaman 14-15.

Saparinto, C. (2013). Grow Your Own Vegetables. Panduan Praktis Menanam 14 Sayuran Konsumsi Populer di Pekarangan. Yogyakarta: Lily Publisher. Halaman 126.

Sudjana. (2005). Metode Statistika. Edisi Keenam. Bandung: Tarsito. Halaman 168-254.

Syamsuhidayat, S.S dan Hutapea, J.R. (1991). Inventaris Tanaman Obat Indonesia. Jakarta: Departemen Kesehatan RI. Halaman 388.

United States Department of Agriculture. (2015). Bitter Melon. Diunduh

dari

(65)

BAB III

METODE PENELITIAN

3.1 Tempat dan Waktu Penelitian

Penelitian ini dilakukan di Laboratorium Penelitian Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara pada bulan Maret 2015 – Juni 2015.

3.2 Bahan-Bahan

3.2.1 Sampel

Sampel yang digunakan dalam penelitian ini adalah buah pare putih yang berasal dari Pasar Pancurbatu, Kabupaten Deli Serdang, Sumatera Utara. Gambar dapat dilihat pada Lampiran 1 halaman 39.

3.2.2 Pereaksi

Bahan-bahan yang digunakan dalam penelitian ini berkualitas pro analisa keluaran E. Merck yaitu asam nitrat 65% b/v, larutan baku kalium nitrat 1000 µg/ml, larutan baku kalsium nitrat 1000 µg/ml, larutan baku natrium nitrat 1000 µg/ml dan larutan baku magnesium nitrat 1000 µg/ml kecuali akua demineralisata.

3.3 Alat-Alat

Alat-alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah spektrofotometer serapan atom (Hitachi Zeeman-2000) dengan nyala udara-asetilen lengkap dengan lampu katoda K, Ca, Na, dan Mg, neraca analitik (BOECO), tanur (Stuart), hot plate (BOECO), purelab UHQ (Elga), kertas saring Whatman no. 42, krus

(66)

3.4 Pembuatan Pereaksi

3.4.1 Larutan HNO3 (1:1)

Larutan HNO3 65% b/v sebanyak 500 ml diencerkan dengan 500 ml akua

demineralisata (Isaac, 1988).

3.5 Prosedur Penelitian

3.5.1 Pengambilan Sampel

Metode pengambilan sampel secara purposif ini ditentukan atas dasar pertimbangan bahwa sampel yang tidak terambil mempunyai karakteristik yang sama dengan sampel yang diteliti dan dianggap sebagai sampel yang representatif (Sudjana, 2005).

3.5.2 Penyiapan Sampel

Pare dicuci bersih, dibilas dengan akua demineralisata, dicabut tangkainya dan buah pare yang segardibagi menjadi dua bagian, masing-masing ± 500 g, dipotong tipis-tipis lalu dibuang bijinya. Bagian pertama dipotong kecil-kecildan bagian keduadirebus dengan menggunakan air mendidih 500 ml pada suhu 95oCselama 15 menit lalu ditiriskan dan dipotong kecil-kecil.

3.5.3 Proses Destruksi Kering

(67)

dingin lalu dipindahkan kedesikator.Bagan alir proses destruksi kering dapat dilihat pada Lampiran 3 halaman 42.

3.5.4 Pembuatan Larutan Sampel

Abu hasil destruksi yang telah dingin dilarutkan dengan 5 ml HNO3 (1:1)

lalu dipindahkan ke dalam labu tentukur 100 ml dan krus porselen dibilas sebanyak 3 kali dengan akua demineralisata. Hasil pembilasan dimasukkan ke dalam labu tentukur, kemudian larutan dicukupkan volumenya dengan akua demineralisata hingga garis tanda dan disaring dengan kertas saring Whatman No. 42, filtrat pertama dibuang sebanyak 5 ml untuk menjenuhkan kertas saring kemudian filtrat selanjutnya ditampung dalam botol. Filtrat ini digunakan sebagai larutan sampel untuk analisa kuantitatif logam kalium, kalsium, natrium, dan magnesium. Perlakuan yang sama diulang sebanyak enam kali untuk masing-masing sampel. Bagan alir proses pembuatan larutan sampel dapat dilihat pada Lampiran4halaman 44.

3.5.5Analisa Kuantitatif

3.5.5.1 Pembuatan Kurva Kalibrasi Kalium

Larutan baku kalium (1000 µg/ml) dipipet sebanyak 5 ml, dimasukkan ke dalam labu tentukur 100 ml dan dicukupkan hingga garis tanda dengan akua demineralisata (konsentrasi 50 µg/ml).

(68)

3.5.5.2 Pembuatan Kurva Kalibrasi Kalsium

Larutan baku kalsium (1000 µg/ml) dipipet sebanyak 5 ml, dimasukkan ke dalam labu tentukur 100 ml dan dicukupkan hingga garis tanda dengan akua demineralisata (konsentrasi 50 µg/ml).

Larutan untuk kurva kalibrasi kalsium dibuat dengan memipet (2; 4; 6; 8; dan 10) ml larutan baku 50 µg/ml, masing-masing dimasukkan ke dalam labu tentukur 50 ml dan dicukupkan hingga garis tanda dengan akua demineralisata(larutan ini mengandung (2; 4; 6; 8; dan 10) µg/ml) dan diukur pada panjang gelombang 422,7 nm dengan nyala udara-asetilen.

3.5.5.3 Pembuatan Kurva Kalibrasi Natrium

Larutan baku natrium (1000 µg/ml) dipipet sebanyak 1 ml, dimasukkan ke dalam labu tentukur 100 ml dan dicukupkan hingga garis tanda dengan akua demineralisata (konsentrasi 10 µg/ml).

Larutan untuk kurva kalibrasi natrium dibuat dengan memipet (1; 2; 3; 4; dan 5) ml larutan baku 10 µg/ml, masing-masing dimasukkan ke dalam labu tentukur 50 ml dan dicukupkan hingga garis tanda dengan akua demineralisata (larutan ini mengandung (0,2; 0,4; 0,6; 0,8; dan 1,0) µg/ml) dan diukur absorbansinya pada panjang gelombang 589,0 nm dengan nyala udara-asetilen.

3.5.5.4 Pembuatan Kurva Kalibrasi Magnesium

Larutan baku magnesium (1000 µg/ml) dipipet sebanyak 1 ml, dimasukkan ke dalam labu tentukur 100 ml dan dicukupkan hingga garis tanda dengan akua demineralisata (konsentrasi 10 µg/ml).

(69)

tentukur 50 ml dan dicukupkan hingga garis tanda dengan akua demineralisata (larutan ini mengandung (0,2; 0,4; 0,6; 0,8; dan 1,0) µg/ml) dan diukur absorbansinya pada panjang gelombang 285,2 nm dengan nyala udara-asetilen.

3.5.6 Penetapan Kadar Mineral dalam Sampel

3.5.6.1 Penetapan Kadar Kalium

Larutan sampel pare segar hasil destruksi sebanyak 0,5 ml dimasukkan ke dalam labu tentukur 25 ml dan dicukupkan dengan akua demineralisata hingga garis tanda.

Larutan sampel parerebus hasil destruksi sebanyak 0,5 ml dimasukkan ke dalam labu tentukur 25 ml dan dicukupkan dengan akua demineralisata hingga garis tanda.

Diukur absorbansinya dengan menggunakan spektrofotometer serapan atom pada panjang gelombang 766,5 nm dengan nyala udara-asetilen. Nilai absorbansi yang diperoleh harus berada dalam rentang kurva kalibrasi larutan baku kalium. Konsentrasi kalium dalam sampel ditentukan berdasarkan persamaan garis regresi dari kurva kalibrasi.

3.5.6.2 Penetapan Kadar Kalsium

Larutan sampel pare segar dari larutan induk baku hasil destruksi dan larutan sampel parerebus dari larutan induk baku hasil destruksi.

(70)

3.5.6.3 Penetapan Kadar Natrium

Larutan sampel pare segar hasil destruksi sebanyak 2,5 ml dimasukkan ke dalam labu tentukur 25ml dan dicukupkan dengan akua demineralisata hingga garis tanda.

Larutan sampel parerebus hasil destruksi sebanyak 2,5 ml dimasukkan ke dalam labu tentukur 25ml dan dicukupkan dengan akua demineralisata hingga garis tanda.

Diukur absorbansinya dengan menggunakan spektrofotometer serapan atom pada panjang gelombang 589,0 nm dengan nyala udara-asetilen. Nilai absorbansi yang diperoleh harus berada dalam rentang kurva kalibrasi larutan baku natrium. Konsentrasi natrium dalam sampel ditentukan berdasarkan persamaan garis regresi dari kurva kalibrasi.

3.5.6.4 Penetapan Kadar Magnesium

Larutan sampel pare segar hasil destruksi sebanyak 0,25 ml dimasukkan ke dalam labu tentukur 25ml dan dicukupkan dengan akua demineralisata hingga garis tanda.

Larutan sampel parerebus hasil destruksi sebanyak 0,25 ml dimasukkan ke dalam labu tentukur 25ml dan dicukupkan dengan akua demineralisata hingga garis tanda.

(71)

3.5.6.5 Perhitungan Kadar Mineral dalam Sampel

Kadar kalium, kalsium, magnesium dan natrium dalam sampel dapat dihitung dengan cara berikut:

Kadar logam(µg/g) = Konsentrasi(µg/ml) x Volume (ml) x Faktor Pengenceran Berat Sampel (g)

3.5.7 Analisa Data Secara Statistik

3.5.7.1 Penolakan Hasil Pengamatan

Kadar kalium, kalsium, natrium, dan magnesium yang diperoleh dari hasil pengukuran masing-masing larutan sampel dianalisis secara statistik. Menurut Sudjana (2005), standar deviasi dapat dihitung dengan menggunakan rumus:

SD =

( )

1 -n

X

-Xi 2

∑

Keterangan: Xi = Kadar sampel

X = Kadar rata-rata sampel n = Jumlah perlakuan Untuk mencari t hitung digunakan rumus:

t hitung =

n SD

X Xi

/

−

dan untuk menentukan kadar mineral di dalam sampel dengan interval kepercayaan 99%, dengan nilai α = 0.01, dk= n-1, dapat digunakan rumus:

µ = X± t (α/2, dk) x SD / √n

Keterangan: SD = standar deviasi µ = interval kepercayaan

X = kadar rata-rata sampel

t = harga t tabel sesuai dengan dk= n – 1 n = jumlah pengulangan

� = tingkat kepercayaan

(72)

3.5.7.2 Pengujian Beda Nilai Rata-Rata Antar Sampel

Menurut Sudjana (2005), sampel yang dibandingkan adalah independen dan jumlah pengamatan masing-masing lebih kecil dari 30 dan variansi (�) tidak diketahui sehingga dilakukan uji F untuk mengetahui apakah variansi kedua populasi sama (�1 = �2) atau berbeda (�1≠�2) dengan menggunakan rumus:

Fo=

2 2

2 1 S

S

Keterangan: Fo = Beda nilai yang dihitung

S1 = Standar deviasi sampel 1

[image:72.595.160.394.422.561.2]

Tabel distribusi F dapat dilihat pada Lampiran 29 halaman 85

Apabila dari hasilnya diperoleh Fo tidak melewati nilai kritis F, maka dilanjutkan

uji dengan distribusi t dengan rumus:

to =

(

)

2 1

/ 1 / 1

X -X

n n

Sp +

Keterangan: X1 = kadar rata-rata sampel 1 2

X = kadar rata-rata sampel 2 Sp = simpangan baku

n1 = jumlah perlakuan sampel 1

Kedua sampel dinyatakan berbeda apabila to yang diperoleh melewati nilai

kritis t dan sebaliknya jika Fo melewati nilai kritis F, maka dilanjutkan uji dengan

distribusi t dengan rumus :

to =

(

)

2 2 2 1 2 1

2 1

/ /

X -X

n S n

(73)

Keterangan: X1 = kadar rata-rata sampel 1 1

X = kadar rata-rata sampel 2 S1 = Standar deviasi sampel 1

Kedua sampel dinyatakan berbeda apabila to yang diperoleh melewati nilai

kritis t, dan sebaliknya.

3.5.8 Uji Perolehan Kembali (Recovery)

Uji perolehan kembali atau recovery dilakukan dengan metode penambahan larutan standar (Standard addition method). Dalam metode ini, kadar mineral dalam sampel ditentukan terlebih dahulu, selanjutnya dilakukan penentuan kadar mineral dalam sampel setelah penambahan larutan baku dengan konsentrasi tertentu. Larutan baku yang ditambahkan yaitu, 3,5 ml larutan baku kalium (konsentrasi 1000 µg/ml), 1 ml larutan baku kalsium (konsentrasi 100µg/ml), 1 ml larutan baku natrium (konsentrasi 100 µg/ml) dan1 ml larutan baku magnesium (konsentrasi 1000 µg/ml).

(74)

Menurut Harmita (2004), persen perolehan kembali dapat dihitung dengan rumus berikut:

% Perolehan Kembali = CF- CA

C*_A x 100% Keterangan:

CA = kadar logam dalam sampel sebelum penambahan baku

CF = kadar logam dalam sampel setelah penambahan baku

C*A = kadar larutan baku yang ditambahkan

3.5.9 Simpangan Baku Relatif

Keseksamaan atau presisi diukur sebagai simpangan baku relatif atau koefisien variasi. Keseksamaan atau presisi merupakan ukuran yang menunjukkan derajat kesesuaian antara hasil individual ketika suatu metode dilakukan secara berulang untuk sampel yang homogen. Nilai simpangan baku relatif yang memenuhi persyaratan menunjukkan adanya keseksamaan metode yang dilakukan (Harmita, 2004).

Menurut Harmita (2004), rumus untuk menghitung simpangan baku relatif adalah sebagai berikut:

RSD = X SD

x 100% Keterangan:

X = Kadar rata-rata sampel SD = Standar Deviasi

(75)

3.5.10 Penentuan Batas Deteksi (Limit of Detection) dan Batas Kuantitasi

(Limit of Quantitation)

Batas deteksi adalah jumlah terkecil analit dalam sampel yang dapat dideteksi yang masih memberikan respon signifikan. Batas kuantitasi merupakan kuantitas terkecil analit dalam sampel yang masih dapat memenuhi kriteris cermat dan seksama (Harmita, 2004).

Menurut Harmita (2004), batas deteksi dan batas kuantitasi ini dapat dihitung dengan rumus sebagai berikut:

Simpangan Baku Residual

( )

2 -n

Y -Yi )

/ (

2

∑

=

x Sy

Batas Deteksi (LOD) =

Batas Kuantitasi (LOQ) =

(76)

BAB IV

HASIL DAN PEMBAHASAN

4.1 Identifikasi Sampel

Hasil identifikasi sampel yang dilakukan oleh bagian Herbarium Bogoriense Bidang Botani Pusat Penelitian LIPI Bogor terhadap tumbuhan pare adalah jenis Momordica charantia L. suku Cucurbitaceae. Hasil identifikasi sampel dapat dilihat pada Lampiran 2 halaman 41.

4.2 Analisa Kuantitatif

4.2.1 Kurva Kalibrasi Kalium, Kalsium, Natrium, dan Magnesium

Kurva kalibrasi dalam spektrofotometri serapan atom dibuat dalam berbagai konsentrasi dengan konsentrasi yang meningkat. Dari pengukuran kurva kalibrasi diperoleh persamaan garis regresi yaitu Y= 0,040354X + 0,002962 untuk kalium, Y= 0,035171X + 0,004710 untuk kalsium, Y= 0,116600X + 0,001467 untuk natrium, dan Y= 0,386986X + 0,003024 untuk magnesium.

(77)

[image:77.595.150.430.85.275.2] [image:77.595.153.421.321.489.2]

Gambar 4.1 Kurva Kalibrasi Larutan Baku Kalium

[image:77.595.155.422.536.704.2]

Gambar 4.2 Kurva Kalibrasi Larutan Baku Kalsium

Gambar 4.3 Kurva Kalibrasi Larutan Baku Natrium

(78)

Berdasarkan kurva di atas diperoleh hubungan yang linier antara konsentrasi dengan absorbansi, dengan koefisien korelasi (r) kalium sebesar 0,9996, kalsium sebesar 0,9995, natrium sebesar 0,9995, dan magnesium sebesar 0,9997. Nilai r≥0,97 menunjukkan adanya korelasi linier yang menyatakan adanya hubungan antara X (Konsentrasi) dan Y (Absorbansi) (Ermer dan McB. Miller, 2005). Data hasil pengukuran absorbansi larutan baku kalium, kalsium, natrium, dan magnesium dan perhitungan persamaan garis regresi dapat dilihat pada Lampiran 5 sampai dengan Lampiran 8, halaman 45 sampai dengan halaman 48.

4.2.2 Analisis Kadar Kalium, Kalsium, Natrium, dan Magnesium pada Pare

Segar dan Pare Rebus

Penentuan kadar kalium, kalsium, natrium, dan magnesium dilakukan secara spektrofotometri serapan atom. Konsentrasi mineral kalium, kalsium, natrium, dan magnesium dalam sampel ditentukan berdasarkan persamaan regresi kurva kalibrasi larutan baku masing-masing mineral. Agar konsentrasi mineral kalium, kalsium, natrium, dan magne