Analisis Kandungan Mineral Kalsium, Magnesium, Kalium dan Natrium Pada Biji Kakao (Theobroma cacao Linn.) Non Fermentasi dan Fermentasi Secara Spektrofotometri Serapan Atom

(1)

Biji Kakao Non Fermentasi Dan Biji Kakao Fermentasi

Tanaman Kakao (Theobroma cacao Linn.)

(2)

Buah kakao yang sedang difermentasi

Biji kakao sebelum penjemuran Biji kakao setelah fermentasi 5 hari

(3)

Biji kakao non fermentasi hasil pengeringan

(4)

(5)

Dibelah menjadi dua

Dikeringkan di bawah sinar matahari selama 7 hari

Dikupas kulit arinya

Dihaluskan dengan blender

Ditimbang ± 25 gram di dalam krus porselen

Diarangkan di atas hot plate

Diabukan dalam tanur dengan temperatur awal 100°C dan perlahan-lahan temperatur dinaikkan hingga suhu 500°C dengan interval 25°C setiap 5 menit

Dilakukan selama 48 jam dan dibiarkan hingga dingin di dalam tanur hingga suhu ± 27°C

Ditambahkan 5 ml HNO3 (1:1)

Diuapkan pada hot plate sampai kering

Dimasukkan kembali dalam tanur dengan temperatur awal 100oC dan perlahan-lahan temperatur dinaikkan hingga suhu 500oC dengan interval 25oC setiap 5 menit

Dilakukan selama 1 jam dan dibiarkan hingga dingin dalam tanur hingga suhu ± 27oC

Buah Kakao

Sampel yang telah dihaluskan

Sampel yang telah mengarang

Sampel yang telah mengabu

(6)

Lampiran 4. Bagan Alir Proses Destruksi Kering Biji Kakao Fermentasi

Dimasukkan daging buah ke dalam kotak fermentasi

Ditutup dengan daun pisang, biarkan selama 5 hari

Dicuci secara hati-hati

Dikeringkan di bawah sinar matahari selama 7 hari

Dikupas kulit arinya

Dihaluskan dengan blender

Ditimbang ± 25 gram di dalam krus porselen

Diarangkan di atas hot plate

Diabukan dalam tanur dengan temperatur awal 100°C dan perlahan-lahan temperatur dinaikkan hingga suhu 500°C dengan interval 25°C setiap 5 menit

Dilakukan selama 48 jam dan dibiarkan hingga dingin di dalam tanur hingga suhu ± 27°C

Ditambahkan 5 ml HNO3 (1:1)

Diuapkan pada hot plate sampai kering

Dimasukkan kembali dalam tanur dengan temperatur awal 100oC dan perlahan-lahan temperatur dinaikkan hingga suhu 500oC dengan interval 25oC setiap 5 menit

Dilakukan selama 1 jam dan dibiarkan hingga dingin dalam tanur hingga suhu ± 27oC

Buah Kakao

Sampel yang telah dihaluskan

Sampel yang telah mengarang

Sampel yang telah mengabu

Hasil

(7)

Dilarutkan dalam 5 ml HNO3 (1:1)

Dimasukkan ke dalam labu tentukur 50 ml

Dibilas krus porselen sebanyak tiga kali dengan akuademineralisata

Dicukupkan dengan akuademineralisata hingga garis tanda

Disaring dengan kertas saring Whatman No.42

Dibuang 5 ml filtrat pertama untuk menjenuhkan kertas saring

Dimasukkan ke dalam botol

Dilakukan analisis kuantitatif dengan spektrofotometer

serapan atom pada 422,7 nm untuk kadar kalsium, 285,2 nm untuk kadar magnesium, 766,5 nm untuk

kadar kalium, dan 589,0 nm untuk kadar natrium dengan

nyala udara-asetilen. Sampel hasil destruksi

Filtrat

Larutan sampel

(8)

Lampiran 6. Data Kalibrasi Kalsium Dengan Spektrofotometer Serapan Atom,

Perhitungan Persamaan Garis Regresi Dan Koefisien Korelasi (r)

No Konsentrasi ( g/ml) (X)

Absorbansi (Y)

1. _0,0000 _-0,0002

2. _2,0000 _0,0812

3. _4,0000 _0,1472

4. _6,0000 _0,2121

5. _8,0000 _0,2879

6. _10,0000 _0,3552

No X Y XY X² Y²

1 0,0000 -0,0002 0,0000 0,0000 0,00000004

2 2,0000 0,0812 0,1624 4,0000 0,00659344

3 4,0000 0,1472 0,5888 16,0000 0,02166784

4 6,0000 0,2121 1,2726 36,0000 0,04498641

5 8,0000 0,2879 2,3032 64,0000 0,08288641

6 10,0000 0,3552 3,5520 100,0000 0,12616704

∑X = 30,0000

∑Y = 1,0834

∑XY= 7,8790

∑X²= 220,0000

∑Y² = 0,28230118

X = 5 Y= 0,1806

Y = aX + b

b = Y – a X

= 0,1806 – (0,0352 x 5)

= 0,0046

(9)

Lanjutan Lampiran 6

r =

√( – )

r = –

√( )( )

√

r =

r = 0,9995199544

(10)

Lampiran 7. Data Kalibrasi Magnesium Dengan Spektrofotometer Serapan

Atom, Perhitungan Persamaan Garis Regresi Dan Koefisien Korelasi (r)

Absorbansi (Y)

1. _0,0000 _-0,0003

2. _0,2000 _0,1137

3. _0,4000 _0,2369

4. _0,6000 _0,3391

5. _0,8000 _0,4497

6. _1,0000 _0,5665

No X Y XY X² Y²

1 0,0000 -0,0003 0,0000 0,0000 0,00000009

2 0,2000 0,1137 0,0227 0,0400 0,01292769

3 _0,4000 _0,2369 _0,0948 _0,1600 _0,05612161

4 _0,6000 _0,3391 _0,2035 _0,3600 _0,11498881

5 0,8000 0,4497 0,3598 0,6400 0,20223009

6 1,0000 0,5665 0,5665 1,0000 0,32092225

∑ X = 3,0000

∑ Y = 1,7056

∑ XY = 1,2473

∑ X² = 2,2000

∑ Y² = 0,70719054

X = 0,5 Y = 0,2843

_² _²

Y = a X + b

b = Y – a X

= 0,2843 – (0,5636 x 0,5)

= 0,0025

(11)

r =

√( – )

r =

–

√( )( )

_√

√

r =

r = 0,9998364369

(12)

Lampiran 8. Data kalibrasi Kalium Dengan Spektrofotometer Serapan Atom,

Absorbansi (Y)

1. 0,0000 -0,0020

2. 2,0000 0,0853

3. 4,0000 0,1711

4. 6,0000 0,2437

5. 8,0000 0,3267

6. 10,0000 0,4036

No X Y XY X² Y²

1 0,0000 -0,0020 0,0000 0,0000 0,00000400

2 2,0000 0,0853 0,1706 4,0000 0,00727609

3 _4,0000 _0,1711 _0,6844 _16,0000 _0,02927521

4 6,0000 0,2437 1,4622 36,0000 0,05938969

5 8,0000 0,3267 2,6136 64,0000 0,10673289

6 _10,0000 _0,4036 _4,0360 _100,0000 _0,16289296

∑ X = 30,0000

∑ Y = 1,2284

∑ XY = 8,9668

∑ X² = 220,0000

∑ Y² = 0,36557084

X = 5 Y = 0,2047

Y = a X + b

b = Y – a X

= 0,2047 – (0,0404 x 5) = 0,0027

(13)

r =

√( – )

r =

–

√( )( )

√

r

=

0,9996333934

(14)

Lampiran 9. Data Kalibrasi Natrium Dengan Spektrofotometer Serapan Atom,

Absorbansi (Y)

1. _0,0000 _-0,0001

2. _0,2000 _0,0265

3. _0,4000 _0,0489

4. _0,6000 _0,0715

5. _0,8000 _0,0932

6. _1,0000 _0,1186

No _X _Y _XY _X² _Y²

1 0,0000 -0,0001 0,0000 0,0000 0,00000001

2 _0,2000 _0,0265 _0,0053 _0,0400 _0,00070225

3 0,4000 0,0489 0,0195 0,1600 0,00239121

4 0,6000 0,0715 0,0429 0,3600 0,00511225

5 0,8000 0,0932 0,0745 0,6400 0,00868624

6 _1,0000 _0,1186 _0,1186 _1,0000 _0,01406596

∑ X = 3,0000

∑ Y = 0,3586

∑ XY = 0,2608

∑ X² = 2,2000

∑ Y² = 0,03095792

X = 0,5 Y = 0,0598

_² _²

Y = a X + b

b = Y – a X

= 0,0598 – (0,1164 x 0,5)

= 0,0016

(15)

r =

√( – )

– [ ]

√( ) ( )

√

r = 0,999542489

(16)

Lampiran 10. Hasil Analisis Kadar Kalsium, Magnesium, Kalium Dan Natrium

Dalam Sampel

1. Hasil analisis kadar kalsium dalam biji kakao non fermentasi Sampel Berat Sampel

(g)

Absorbansi (Y)

Konsentrasi ( g/ml)

Kadar (mg/100g)

1 25,0379 0,1111 3,0255 30,2092

2 25,0379 0,1113 3,0312 30,2661

3 25,0379 0,1115 3,0369 30,3230

4 25,0392 0,1117 3,0426 30,3784

5 25,0377 0,1111 3,0255 30,2094

6 25,0378 0,1111 3,0255 30,2093

2. Hasil analisis kadar kalsium dalam biji kakao fermentasi Sampel Berat Sampel

(g)

Absorbansi (Y)

Konsentrasi ( g/ml)

Kadar (mg/100g)

1 25,0008 0,1215 3,3210 33,2089

2 25,0009 0,1213 3,3153 33,1518

3 25,0008 0,1218 3,3295 33,2939

4 25,0009 0,1216 3,3238 33,2368

5 25,0006 0,1215 3,3210 33,2092

6 25,0008 0,1217 3,3267 33,2659

3. Hasil analisis kadar magnesium dalam biji kakao non fermentasi Sampel Berat Sampel

(g)

Absorbansi (Y)

Konsentrasi ( g/ml)

Kadar (mg/100g)

1 25,0379 0,2323 0,4077 154,6914

2 25,0379 0,2322 0,4075 154,6156

3 25,0379 0,2324 0,4079 154,7674

4 25,0392 0,2324 0,4079 154,7593

5 25,0377 0,2323 0,4077 154,6927

(17)

4. Hasil analisis kadar magnesium dalam biji kakao fermentasi Sampel Berat Sampel

(g)

Absorbansi (Y)

Konsentrasi ( g/ml)

Kadar (mg/100g)

1 25,0008 0,2614 0,4593 174,5284

2 25,0009 0,2616 0,4597 174,6797

3 25,0008 0,2619 0,4602 174,8704

4 25,0009 0,2617 0,4599 174,7557

5 25,0006 0,2617 0,4599 174,7578

6 25,0008 0,2615 0,4595 174,6044

5. Hasil analisis kadar kalium dalam biji kakao non fermentasi Sampel Berat Sampel

(g)

Absorbansi (Y)

Konsentrasi ( g/ml)

Kadar (mg/100g)

1 25,0379 0,0845 2,0247 606,4905

2 25,0379 0,0848 2,0321 608,7072

3 25,0379 0,0849 2,0346 609,4561

4 25,0392 0,0846 2,0272 607,2079

5 25,0377 0,0845 2,0247 606,4954

6 25,0378 0,0847 2,0297 607,9907

6. Hasil analisis kadar kalium dalam biji kakao fermentasi Sampel Berat Sampel

(g)

Absorbansi (Y)

Konsentrasi ( g/ml)

Kadar (mg/100g)

1 25,0008 0,0959 2,3069 692,0478

2 25,0009 0,0959 2,3069 692,0451

3 25,0008 0,09577 2,3019 690,5479

4 25,0009 0,0956 2,2995 689,8252

5 25,0006 0,0960 2,3094 692,8034

(18)

Lanjutan Lampiran 10

7. Hasil analisis kadar natrium dalam biji kakao non fermentasi Sampel Berat Sampel

(g)

Absorbansi (Y)

Konsentrasi ( g/ml)

Kadar (mg/100g)

1 25,0379 0,0406 0,3350 6,6898

2 25,0379 0,0408 0,3367 6,7238

3 25,0379 0,0406 0,3350 6,6899

4 25,0392 0,0404 0,3333 6,6556

5 25,0377 0,0405 0,3341 6,6719

6 25,0378 0,0407 0,3359 6,7079

8. Hasil analisis kadar natrium dalam biji kakao fermentasi Sampel Berat Sampel

(g)

Absorbansi (Y)

Konsentrasi ( g/ml)

Kadar (mg/100g)

1 25,0008 0,0434 0,3591 7,1817

2 25,0009 0,0435 0,3599 7,1977

3 25,0008 0,0435 0,3599 7,1978

4 25,0009 0,0438 0,3625 7,2497

5 25,0006 0,0437 0,3616 7,2318

6 25,0008 0,0434 0,3591 7,1817

(19)

Natrium Pada Sampel

1. Perhitungan kadar kalsium pada biji kakao non fermentasi

a. Berat sampel yang ditimbang = 25,0379 gram

Absorbansi (Y) = 0,1111

Persamaan regresi: Y = 0,0352 X + 0,0046

X =

= 3,0255 g/ml

Konsentrasi kalsium = 3,0255 g/ml

Kadar ( g/g) =

=

= 302,0920 g/g

= 30,2092 mg/100 g

2. Perhitungan kadar kalsium pada biji kakao fermentasi

X =

= 3,3210 g/ml

Konsentrasi kalsium = 3,3210 g/ml

Kadar ( g/g) =

=

= 332,0894 g/g

(20)

Lanjutan Lampiran 11

3. Perhitungan kadar magnesium pada biji kakao non fermentasi

X =

= 0,4077 g/ml

Konsentrasi magnesium = 0,4077 g/ml

Kadar ( g/g) =

=

= 1546,9148 g/g

= 154,6914 mg/100 g

4. Perhitungan kadar magnesium pada biji kakao fermentasi

X =

= 0,4593 g/ml

Konsentrasi magnesium = 0,4593 g/ml

Kadar ( g/g) =

=

= 1745,2842 g/g

(21)

5. Perhitungan kadar kalium pada biji kakao non fermentasi

X =

= 2,0247 g/ml

Konsentrasi kalium = 2,0247 g/ml

Kadar ( g/g) =

=

= 6064,9056 g/g

= 606,4905 mg/100 g

6. Perhitungan kadar kalium pada biji kakao fermentasi

X =

= 2,3069 g/ml

Konsentrasi kalium = 2,3069 g/ml

Kadar ( g/g) =

=

= 6920,4785 g/g

(22)

Lanjutan Lampiran 11

7. Perhitungan kadar natrium pada biji kakao non fermentasi

X =

= 0,3350 g/ml

Konsentrasi natrium = 0,3350 g/ml

Kadar ( g/g) =

=

= 66,8986 g/g

= 6,6898 mg/100 g

8. Perhitungan kadar natrium pada biji kakao fermentasi

X =

= 0,3591 g/ml

Konsentrasi natrium = 0,3591 g/ml

Kadar ( g/g) =

=

= 71,8177 g/g

(23)

Natrium Dalam Sampel

1. Perhitungan statistik kadar kalsium dalam biji kakao non fermentasi

No Xi

Kadar (mg/100g)

(Xi - Xi) (mg/100g)

(Xi - Xi)² (mg/100g)

1 30,2092 -0,0567 0,0032

2 30,2661 0,0002 0,0000

3 30,3230 0,0571 0,0033

4 30,3784 0,1125 0,0127

5 30,2094 -0,0565 0,0032

6 30,2093 -0,0566 0,0032

∑ Xi = 181,5954 ∑ (Xi - Xi)² = 0,0256

Xi = 30,2659

√

=

√

= 0,0716 mg/100g

Pada interval kepercayaan 99% dengan nilai α= 0,01 dk=5 diperoleh nilai t tabel =

α/ 2, dk = 4,0321.

Data diterima jika t hitung < t tabel

t hitung = | | √

t hitung 1 = | | √

= 1,9418

t hitung 2 = | | √

= 0,0068

t hitung 3 = | |

(24)

t hitung 4 = | |

√ = 3,8527

t hitung 5 = | |

√ = 1,9349

t hitung 6 = | |

√ = 1,9384

Dari hasil perhitungan diatas di dapat semua t hitung < t tabel, maka semua data

tersebut diterima.

Kadar kalsium dalam biji kakao non fermentasi: µ = Xi ± (t (α / 2, dk) x SD / √

= 30,2659 mg/100g ± (4,0321 x 0,0716 mg/100g / √

= (30,2659 ± 0,1177) mg/100g

2. Perhitungan statistik kadar kalsium dalam biji kakao fermentasi

No Xi

Kadar (mg/100g)

(Xi - Xi) (mg/100g)

(Xi - Xi)² (mg/100g)

1 33,2089 -0,0189 0,0004

2 33,1518 -0,0760 0,0058

3 33,2939 0,0661 0,0044

4 33,2368 0,0090 0,0000

5 33,2092 -0,0186 0,0003

6 33,2659 0,0381 0,0015

∑ Xi = 199,3665 _∑_{(Xi - Xi)² = 0,0124}

Xi= 33,2278

√

=

√

(25)

α/ 2, dk = 4,0321.

t hitung = | | √

t hitung 1 = | | √

= 0,9310

t hitung 2 = | | √

= 3,7438

t hitung 3 = | |

√ = 3,2562

t hitung 4 = | |

√ = 0,4433

t hitung 5 = | |

√ = 0,9163

t hitung 6 = | |

√ = 1,8768

Dari hasil perhitungan di atas di dapat semua t hitung < t tabel, maka semua data

tersebut diterima.

Kadar kalsium dalam biji kakao fermentasi:

µ = Xi ± (t _{(α / 2, dk)} x SD / √

= 33,2278 mg/100g ± (4,0321 x 0,0498 mg/100g / √

(26)

Lanjutan Lampiran 12

3. Perhitungan statistik kadar magnesium dalam biji kakao non fermentasi

No Xi

Kadar (mg/100g) _(mg/100g)(Xi - Xi) _(mg/100g)(Xi - Xi)²

1 154,6914 -0,0307 0,0009

2 154,6156 -0,1065 0,0113

3 154,7674 0,0453 0,0021

4 154,7593 0,0372 0,0014

5 154,6927 -0,0294 0,0009

6 154,8059 0,0838 0,0070

∑ Xi = 928,3323 _∑_{(Xi - Xi)² = 0,0236}

Xi= 154,7221

√

=

√

= 0,0687 mg/100g

α/ 2, dk = 4,0321.

t hitung = | | √

t hitung 1 = | | √

= 1,0964

t hitung 2 = | - | √

= 3,8036

t hitung 3 = | |

(27)

t hitung 4 = | |

√ = 1,3286

t hitung 5 = | |

√ = 1,0500

t hitung 6 = | |

√ = 2,9929

tersebut diterima.

Kadar magnesium dalam biji kakao non fermentasi: µ = Xi ± (t _{(α / 2, dk)} x SD / √

= 154,7221 mg/100g ± (4,0321 x 0,0687 mg/100g / √

= (154,7221 ± 0,1129) mg/100g

4. Perhitungan statistik kadar magnesium dalam biji kakao fermentasi

No Xi

1 174,5284 -0,1710 0,0292

2 174,6797 -0,0197 0,0004

3 174,8704 0,1710 0,0292

4 174,7557 0,0563 0,0032

5 174,7578 0,0584 0,0034

6 174,6044 -0,0950 0,0090

∑ Xi = 1048,1964 _∑_{(Xi - Xi)² = 0,0744}

Xi= 174,6994

√

(28)

Lanjutan Lampiran 12

√

=

_{0,1220 mg/100g}

α/ 2, dk = 4,0321.

t hitung = | | √

t hitung 1 = | | √

= 3,4337

t hitung 2 = | | √

= 0,3956

t hitung 3 = | |

√ = 3,4337

t hitung 4 = | |

√ = 1,1305

t hitung 5 = | |

√ = 1,1727

t hitung 6 = | |

√ = 1,9076

tersebut diterima.

Kadar magnesium dalam biji kakao fermentasi:

µ = Xi ± (t (α / 2, dk) x SD / √

= 174,6994 mg/100g ± (4,0321 x 0,1220 mg/100g / √

(29)

5. Perhitungan statistik kadar kalium dalam biji kakao non fermentasi

No Xi

1 606,4905 -1,2341 1,5230

2 608,7072 0,9826 0,9655

3 609,4561 1,7315 2,9981

4 607,2079 -0,5167 0,2670

5 606,4954 -1,2292 1,5109

6 607,9907 0,2661 0,0708

∑ Xi = 3646,3478 _∑_{(Xi - Xi)² = 7,3353}

Xi = 607,7246

√

= 1,2112 mg/100g

α/ 2, dk = 4,0321.

t hitung = | | √

t hitung 1 = | | √

= 2,4957

t hitung 2 = | | √

(30)

Lanjutan Lampiran 12

t hitung 3 = | |

√ = 3,5015

t hitung 4 = | |

√ = 1,0449

t hitung 5 = | |

√ = 2,4857

t hitung 6 = | |

√ = 0,5381

tersebut diterima.

Kadar kalium dalam biji kakao non fermentasi:

µ = Xi ± (t (α / 2, dk) x SD / √

= 607,7246 mg/100g ± (4,0321 x 1,2112 mg/100g / √

= (607,7246 ± 1,9939) mg/100g

6. Perhitungan statistik kadar kalium dalam biji kakao fermentasi

No Xi

Kadar (mg/100g)

(Xi - Xi) (mg/100g)

(Xi - Xi)² (mg/100g)

1 692,0478 0,6199 0,3843

2 692,0451 0,6172 0,3809

3 690,5479 -0,8800 0,7744

4 689,8252 -1,6027 2,5686

5 692,8034 1,3755 1,8920

6 691,2979 -0,1300 0,0169

∑ Xi = 4148,5673 _∑_{(Xi - Xi)² = 6,0171}

(31)

√

_{= 1,1020 mg/100g}

α/ 2, dk = 4,0321.

Data diterima jika t hitung < t tabel

t hitung = | | √

t hitung 1 = | | √

= 1,3779

t hitung 2 = | | √

= 1,3719

t hitung 3 = | |

√ = 1,9560

t hitung 4 = | |

√ = 3,5623

t hitung 5 = | |

√ = 3,0573

t hitung 6 = | |

√ = 0,2890

(32)

Kadar kalium dalam biji kakao fermentasi: µ = Xi ± (t _{(α / 2, dk)} x SD / √

= 691,4279 mg/100g ± (4,0321 x 1,1020 mg/100g / √

= (691,4279 ± 1,8140) mg/100g

7. Perhitungan statistik kadar natrium dalam biji kakao non fermentasi

No Xi

1 6,6898 0,0001 0,0000

2 6,7238 0,0340 0,0012

3 6,6899 0,0001 0,0000

4 6,6556 -0,0342 0,0012

5 6,6719 -0,0179 0,0003

6 6,7079 0,0181 0,0003

∑ Xi = 40,1389 _∑_{(Xi - Xi)² = 0,0030}

Xi= 6,6898

√

_√

= 0,0245 mg/100g

(33)

t hitung = | | √

t hitung 1 = | | √

= 0,0100

t hitung 2 = | | √

= 3,4000

t hitung 3 = | |

√ = 0,0100

t hitung 4 = | |

√ = 3,4600

t hitung 5 = | |

√ = 1,7000

t hitung 6 = | |

√ = 1,7200

tersebut diterima.

Kadar natrium dalam biji kakao non fermentasi:

µ = Xi ± (t _{(α / 2, dk)} x SD / √

= 6,6898 mg/100g ± (4,0321 x 0,0245 mg/100g / √

(34)

Lanjutan Lampiran 12

8. Perhitungan statistik kadar natrium dalam biji kakao fermentasi

No Xi

1 7,1817 -0,0250 0,0006

2 7,1977 -0,0090 0,0000

3 7,1978 -0,0089 0,0000

4 7,2497 0,0430 0,0018

5 7,2318 0,0251 0,0006

6 7,1817 -0,0250 0,0006

∑ Xi = 43,2404 _∑_{(Xi - Xi)² = 0,0036}

Xi = 7,2067

√

= _{0,0268 mg/100g}

α/ 2, dk = 4,0321.

t hitung = | | √

t hitung 1 = | | √

= 2,2936

t hitung 2 = | | √

(35)

t hitung 3 = | |

√ = 0,8165

t hitung 4 = | |

√ = 3,9450

t hitung 5 = | |

√ = 2,3028

t hitung 6 = | |

√ = 2,2936

tersebut diterima.

Kadar natrium dalam biji kakao fermentasi:

µ = Xi ± (t (α / 2, dk) x SD / √

= 7,2067 mg/100g ± (4,0321 x 0,0268 mg/100g / √

(36)

Lampiran 13. Persentase Peningkatan Kadar Kalsium, Magnesium, Kalium Dan

Natrium Pada Biji Kakao Non Fermentasi Menjadi Biji Kakao Fermentasi

1. Kalsium

Kadar kalsium dalam biji kakao non fermentasi adalah: 30,2659 mg/100g

Kadar kalsium dalam biji kakao fermentasi adalah: 33,2278 mg/100g

Persentase peningkatan kadar:

x 100%

= 9,7863%

2. Magnesium

Kadar magnesium dalam biji kakao non fermentasi adalah: 154,7221 mg/100g

Kadar magnesium dalam biji kakao fermentasi adalah: 174,6994 mg/100g

x 100%

= 12,9117%

3. Kalium

Kadar kalium dalam biji kakao non fermentasi adalah: 607,7246 mg/100g

Kadar kalium dalam biji kakao fermentasi adalah: 6921,4279 mg/100g

(37)

x 100%

= 13,7732%

4. Natrium

Kadar natrium dalam biji kakao non fermentasi adalah: 6,6898 mg/100g

Kadar natrium dalam biji kakao fermentasi adalah: 7,2067 mg/100g

x 100%

(38)

Lampiran 14. Pengujian Beda Nilai Rata-Rata Kadar Kalsium, Magnesium, Kalium Dan Natrium Pada Sampel

1. Pengujian beda nilai rata-rata kadar kalsium pada sampel

No Fermentasi Non Fermentasi

1. X1 = 33,2278 X2 = 30,2659 2. S1 = 0,0498 S2 = 0,0716

Dilakukan uji F dengan taraf kepercayaan 99% untuk mengetahui apakah variasi kedua populasi sama (σ1 = σ2) atau berbeda (σ1 ≠ σ2).

- H0: σ1= σ2 H1: σ1≠ σ2

- Nilai kritis F yang diperbolehkan dari tabel (F 0,01/2, (m,n)) → (F 0,005, (5,5)) adalah = 14,94

- Daerah kritis penolakan: hanya jika F0 ≥ 14,94

F0 =

F0 = 0,4838

- Dari hasil uji ini menunjukkan H0 diterima dan H1 ditolak sehingga disimpulkan bahwa σ1 = σ2. Berarti tidak terdapat perbedaan yang signifikan rata-rata kadar kalsium dalam biji kakao non fermentasi dengan biji kakao fermentasi.

- Kemudian dilanjutkan dengan uji beda rata–rata menggunakan distribusi t,

- Simpangan bakunya adalah:

Sp =

√

=

√

=

√

(39)

- H0 : µ1 = µ 2 H1 : µ1≠ µ 2

- Dengan menggunakan taraf kepercayaan 99% dengan nilai α = 1%

t 0,01/2 t 0,005 = ± 3,1693 untuk df = 6 + 6 - 2 = 10

- Daerah kritis penerimaan: - 3,1693 ≤ t0≤ 3,1693

- Daerah kritis penolakan: t0 < -3,1693 dan t0 > 3,1693

t0 = √

=

√

=

_{= 83,1994}

Karena t0 = 83,1994 > 3,1693 maka hipotesis H0 ditolak. Berarti terdapat

perbedaan yang signifikan rata-rata kadar kalsium dalam biji kakao non fermentasi dan biji kako fermentasi.

2. Pengujian beda nilai rata-rata kadar magnesium pada sampel

1. X1 = 174,6994 X2 = 154,7221 2. S1 = 0,1220 S2 = 0,0687

- H0: σ1= σ2 H1: σ1≠ σ2

(40)

Lanjutan Lampiran 14

F0 =

F0 = 3,1536

- Dari hasil uji ini menunjukkan H0 diterima dan H1 ditolak sehingga disimpulkan bahwa σ1 = σ2. Berarti tidak terdapat perbedaan yang signifikan rata-rata kadar magnesium dalam biji kakao non fermentasi dengan biji kakao fermentasi.

Sp =

√

=

√

= 0,0990

- H0 : µ1 = µ 2 H1 : µ1≠ µ 2

t 0,01/2 t 0,005 = ± 3,1693 untuk df = 6 + 6 - 2 = 10

(41)

t0 = √

=

√

=

= 349,2535

perbedaan yang signifikan rata-rata kadar magnesium dalam biji kakao non fermentasi dan biji kako fermentasi.

3. Pengujian beda nilai rata-rata kadar kalium pada sampel

No Non Fermentasi Fermentasi

1. X1 = 691,4279 X2 = 607,7426 2. S1 = 1,1020 S2 = 1,2112

- H0: σ1= σ2 H1: σ1≠ σ2

F0 =

F0 = 0,8278

- Dari hasil uji ini menunjukkan H0 diterima dan H1 ditolak sehingga disimpulkan bahwa σ1 = σ2. Berarti tidak terdapat perbedaan yang signifikan rata-rata kadar kalium dalam biji kakao non fermentasi dengan biji kakao fermentasi.

(42)

Lanjutan Lampiran 14

Sp =

√

=

√

= 1,1579

- H0 : µ1 = µ 2 H1 : µ1≠ µ 2

t 0,01/2 t 0,005 = ± 3,1693 untuk df = 6 + 6 - 2 = 10

t0 = √

=

√

=

_{= 125,1919}

(43)

4. Pengujian beda nilai rata-rata kadar natrium pada sampel

1. X1 = 7,2067 X2 = 6,6898 2. S1 = 0,0268 S2 = 0,0245

- H0: σ1= σ2 H1: σ1≠ σ2

F0 =

F0 = 1,1966

- Dari hasil uji ini menunjukkan H0 diterima dan H1 ditolak sehingga disimpulkan bahwa σ1 = σ2. Berarti tidak terdapat perbedaan yang signifikan rata-rata kadar natrium dalam biji kakao non fermentasi dengan biji kakao fermentasi.

Sp =

√

=

√

(44)

Lanjutan Lampiran 14

- H0 : µ1 = µ 2 H1 : µ1≠ µ 2

t 0,01/2 t 0,005 = ± 3,1693 untuk df = 6 + 6 - 2 = 10

t0 = √

=

√

=

_{= 34,9257}

(45)

Sebelum Dan Sesudah Penambahan Masing-Masing Larutan Baku Pada Biji Kakao

1. Hasil analisis kadar kalsium (Ca) sebelum ditambahkan larutan baku

Sampel Berat Sampel (g)

Absorbansi (A)

Konsentrasi ( g/ml)

Kadar (mg/100g)

1 25,0008 0,1215 3,3210 33,2089

2 25,0009 0,1213 3,3153 33,1518

3 25,0008 0,1218 3,3295 33,2939

4 25,0009 0,1216 3,3238 33,2368

5 25,0006 0,1215 3,3210 33,2092

6 25,0008 0,1217 3,3267 33,2659

∑ 150,0048 199,3665

Rata-rata 25,0008 33,2278

2. Hasil analisis kadar kalsium (Ca) setelah ditambahkan larutan baku

Absorbansi (A)

Konsentrasi ( g/ml)

Kadar (mg/100g)

1 25,0015 0,1333 3,6562 36,5598

2 25,0019 0,1335 3,6619 36,6162

3 25,0017 0,1330 3,6477 36,4745

4 25,0010 0,1332 3,6534 36,5325

5 25,0015 0,1334 3,6591 36,5888

6 25,0018 0,1330 3,6477 36,4744

∑ 150,0104 219,2462

Rata-rata 25,0017 36,5410

3. Hasil analisis kadar magnesium (Mg) sebelum ditambahkan larutan baku

Absorbansi (A)

Konsentrasi ( g/ml)

Kadar (mg/100g)

1 25,0008 0,2614 0,4593 174,5284

2 25,0009 0,2616 0,4597 174,6797

3 25,0008 0,2619 0,4602 174,8704

4 25,0009 0,2617 0,4599 174,7557

5 25,0006 0,2617 0,4599 174,7578

6 25,0008 0,2615 0,4595 174,6044

∑ 150,0048 1048,1964

(46)

Lanjutan Lampiran 15

4. Hasil analisis kadar magnesium (Mg) setelah ditambahkan larutan baku

Absorbansi (A)

Konsentrasi ( g/ml)

Kadar (mg/100g)

1 25,0015 0,2856 0,5023 190,8625

2 25,0019 0,2858 0,5027 191,0115

3 25,0017 0,2859 0,5028 191,0510

4 25,0010 0,2857 0,5025 190,9424

5 25,0015 0,2860 0,5030 191,1285

6 25,0018 0,2858 0,5027 191,0122

∑ 150,0104 1146,0081

Rata-rata 25,0017 191,0014

5. Hasil analisis kadar kalium (K) sebelum ditambahkan larutan baku

Absorbansi (A)

Konsentrasi ( g/ml)

Kadar (mg/100g)

1 25,0008 0,0959 2,3069 692,0478

2 25,0009 0,0959 2,3069 692,0451

3 25,0008 0,0957 2,3019 690,5479

4 25,0009 0,0956 2,2995 689,8252

5 25,0006 0,0960 2,3094 692,8034

6 25,0008 0,0958 2,3044 691,2979

∑ 150,0048 4148,5673

Rata-rata 25,0008 691,4279

6. Hasil analisis kadar kalium (K) setelah ditambahkan larutan baku

Absorbansi (A)

Konsentrasi ( g/ml)

Kadar (mg/100g)

1 25,0015 0,1010 2,4332 729,9162

2 25,0019 0,1007 2,4257 727,6547

3 25,0017 0,1009 2,4307 729,1604

4 25,0010 0,1006 2,4233 726,9609

5 25,0015 0,1008 2,4282 728,4163

6 25,0018 0,1008 2,4282 728,4076

∑ 150,0104 4370,5161

(47)

7. Hasil analisis kadar natrium (Na) sebelum ditambahkan larutan baku

Absorbansi (A)

Konsentrasi ( g/ml)

Kadar (mg/100g)

1 25,0008 0,0434 0,3591 7,1817

2 25,0009 0,0435 0,3599 7,1977

3 25,0008 0,0435 0,3599 7,1978

4 25,0009 0,0438 0,3625 7,2497

5 25,0006 0,0437 0,3616 7,2318

6 25,0008 0,0434 0,3591 7,1817

∑ 150,0048 43,2404

Rata-rata 25,0008 7,2067

8. Hasil analisis kadar natrium (Na) setelah ditambahkan larutan baku

Absorbansi (A)

Konsentrasi ( g/ml)

Kadar (mg/100g)

1 25,0015 0,0482 0,4003 8,0055

2 25,0019 0,0484 0,4021 8,0414

3 25,0017 0,0481 0,3995 7,9895

4 25,0010 0,0483 0,4012 8,0237

5 25,0015 0,0485 0,4029 8,0575

6 25,0018 0,0483 0,4012 8,0234

∑ 150,0104 48,1410

(48)

Lampiran 16. Perhitungan Jumlah Baku Yang Ditambahkan Untuk Persen

Perolehan Kembali Kalsium, Magnesium, Kalium Dan Natrium Pada Biji Kakao

1. Kalsium

Berat sampel = 25 gram

Kadar rata–rata kalsium pada biji kakao (X) = 33,2278 mg/100 g

C*A = 10 % x X

=

x 33,2278 mg/100 g = 3,32278 mg/100 g

= 33,2278 g/g

V

=

= = 0,8 ml

2. Magnesium

Kadar rata–rata magnesium pada biji kakao (X) = 174,6994 mg/100 g

C*A = 10 % x X =

x 174,6994 mg/100 g = 17,46994 mg/100 g = 174,6994 g/g

V

=

(49)

3. Kalium

Kadar rata–rata kalium pada biji kakao (X) = 691,4279 mg/100 g

C*A = 5 % x X

=

x 691,4279 mg/100 g = 34,57139 mg/100 g = 345,7139 g/g

V

=

= 9 ml 4. Natrium

Kadar rata–rata natrium pada biji kakao (X) = 7,2067 mg/100 g

C*A = 10 % x X

=

x 7,2067 mg/100 g = 0,72067 mg/100 g = 7,2067 g/g

V

=

(50)

Lampiran 17. Contoh Perhitungan Uji Perolehan Kembali Kadar Kalsium,

Magnesium, Kalium Dan Natrium Pada Sampel Biji Kakao

1. Perhitungan uji perolehan kembali kadar kalsium Sampel 1

Persamaan regresi : Y = 0,0352 X + 0,0046

X =

= 3,6562 g/ml

Konsentrasi setelah ditambahkan larutan baku = 3,6562 g/ml

CF =

x Volume (ml) x Faktor pengenceran

=

x 50 ml x 50

= 365,5981 = 36,5598 mg/100g

Kadar sampel 1 setelah ditambah larutan baku (CF) = 36,5598 mg/100g

Kadar rata-rata sampel sebelum ditambahkan lautan baku (CA) adalah kadar rata-rata dari keenam sampel

CA =

= 33,2278 mg/100g

Berat sampel rata-rata uji recovery = 25,0017 g Kadar larutan standar yang ditambahkan (C*A) adalah

C*A =

x Volume (ml)

=

x 0,8 ml

= 31,9978 = 3,1997 mg/100g

Maka % perolehan kembali kalsium =

x 100%

=

x 100%

(51)

2. Perhitungan uji perolehan kembali kadar magnesium Sampel 1

X =

= 0,5023 g/ml

CF =

=

x 50 ml x 1900

= 1908,6255 = 190,8625 mg/100g

CA =

= 174,6994 mg/100g

C*A =

x Volume (ml)

=

x 4 ml

= 159,9891 = 15,9989 mg/100g

Maka % perolehan kembali magnesium=

x 100%

=( - )

x100%

(52)

Lanjutan Lampiran 17

3. Perhitungan uji perolehan kembali kadar kalium Sampel 1

X = -

= 2,4332 g/ml

CF =

=

x 50 ml x 1500

= 7299,1621 = 729,9162 mg/100g

CA =

= 691,4279 mg/100g

C*A =

x Volume (ml)

=

x 9 ml

= 359,9755 = 35,9975 mg/100g

Maka % perolehan kembali kalium =

x 100%

= ( - )

x100%

(53)

4. Perhitungan uji perolehan kembali kadar natrium Sampel 1

X = -

= 0,4003 g/ml

CF =

=

x 50 ml x 100

= 80,0552 = 8,0055 mg/100g

CA =

= 7,2067 mg/100g

C*A =

x Volume (ml)

=

x 0,2 ml

= 7,9995 = 0,7999 mg/100g

Maka % perolehan kembali natrium =

x 100%

= ( - )

x100%

(54)

Lampiran 18. Kesimpulan Uji Perolehan Kembali Kalsium, Magnesium, Kalium

Dan Natrium Pada Sampel

1. Uji Perolehan Kembali Kalsium

No Berat Sampel

(g) Absorbansi

Konsentrasi ( g/ml)

Kadar CF

( g/g)

Kadar CF (mg/100g)

% Recovery

1. 25,0015 0,1333 3,6562 365,5981 36,5598 104,1348

2. 25,0019 0,1335 3,6619 366,1622 36,6162 105,8974

3. 25,0017 0,1330 3,6477 364,7452 36,4745 101,4689

4. 25,001 0,1332 3,6534 365,3254 36,5325 103,2816

5. 25,0015 0,1334 3,6591 365,8880 36,5888 105,0411

6. 25,0018 0,1330 3,6477 364,7437 36,4743 101,4626

Jumlah: 150,0104 0,7994 21,9260 2192,4626 219,2461 621,2864

Rata-rata: 25,0017 0,1332 3,6543 365,4104 36,5410 103,5477

2. Uji Perolehan Kembali Magnesium No. Berat Sampel

(g) Absorbansi

Konsentrasi ( g/ml)

Kadar CF

( g/g)

Kadar CF (mg/100g)

% Recovery

1. 25,0015 0,2856 0,5023 1908,6255 190,8625 101,0263

2. 25,0019 0,2858 0,5027 1910,1148 191,0114 101,9570

3. 25,0017 0,2859 0,5028 1910,5101 191,0510 102,2045

4. 25,001 0,2857 0,5025 1909,4236 190,9423 101,5251

5. 25,0015 0,286 0,5030 1911,2853 191,1285 102,6889

6. 25,0018 0,2858 0,5027 1910,1225 191,0122 101,9620

Jumlah: 150,0104 1,7148 3,0160 11460,0818 1146,0079 611,3638

Rata-rata: 25,0017 0,2858 0,5027 1910,0136 191,0013 101,8940

3. Uji Perolehan Kembali Kalium

No Berat Sampel

(g) Absorbansi

Konsentrasi ( g/ml)

Kadar CF

( g/g)

Kadar CF (mg/100g)

% Recovery

1. 25,0015 0,101 2,4332 7299,1621 729,9162 106,9194

2. 25,0019 0,1007 2,4257 7276,5470 727,6547 100,6370

3. 25,0017 0,1009 2,4307 7291,6042 729,1604 104,8198

4. 25,001 0,1006 2,4233 7269,6092 726,9609 98,7096

5. 25,0015 0,1008 2,4282 7284,1630 728,4163 102,7527

6. 25,0018 0,1008 2,4282 7284,0755 728,4075 102,7282

Jumlah: 150,0104 0,6048 14,5693 43705,1610 4370,5160 616,5667

(55)

4. Uji Perolehan Kembali Natrium

No Berat Sampel

(g) Absorbansi

Konsentrasi ( g/ml)

Kadar CF ( g/g)

Kadar CF

(mg/100g)

% Recovery

1. 25,0015 0,0482 0,4003 80,0552 8,0055 99,8625

2. 25,0019 0,0484 0,4021 80,4139 8,0413 104,3380

3. 25,0017 0,0481 0,3995 79,8946 7,9894 97,8497

4. 25,001 0,0483 0,4012 80,2368 8,0236 102,1253

5. 25,0015 0,0485 0,4029 80,5752 8,0575 106,3633

6. 25,0018 0,0483 0,4012 80,2342 8,0234 102,1003

Jumlah: 150,0104 0,2898 2,4072 481,4099 48,1407 612,6391

(56)

Lampiran 19. Perhitungan Simpangan Baku Relatif (RSD) Pada Sampel Biji

Kakao

1. Kalsium

No. (%) Perolehan Kembali

(Xi) (Xi - Xi) (Xi - Xi)

2

1. _104,1348 0,5871 0,3445

2. 105,8974 2,3497 5,5211

3. _101,4689 -2,0788 4,3214

4. _103,2816 -0,2661 0,0708

5. _105,0411 1,4934 2,2302

6. _101,4626 -2,0851 4,3476

∑Xi = 621,2864 ∑(Xi - Xi)2 = 16,8356 Xi = 103,5477

SD =

√

=

√

= √ = 1,8350

RSD =

x 100%

=

x 100% = 1,7721 %

2. Magnesium

2

1. _101,0263 -0,8677 0,7529

2. 101,9570 0,0630 0,0040

3. _102,2045 0,3105 0,0964

4. _101,5251 -0,3689 0,1361

5. _102,6889 0,7949 0,6319

6. _101,9620 0,0680 0,0046

(57)

SD =

√

=

√

= √ = 0,5702

RSD =

x 100%

=

x 100% = 0,5596 %

3. Kalium

2

1. _106,9194 4,1583 17,2915

2. _100,6370 -2,1241 4,5118

3. 104,8198 2,0587 4,2382

4. _98,7096 -4,0515 16,4147

5. _102,7527 -0,0084 0,0000

6. _102,7282 -0,0329 0,0011

∑Xi = 616,5667 ∑(Xi - Xi)2 = 42,4573 Xi = 102,7611

SD =

√

=

√

= √

(58)

RSD =

x 100%

=

x 100%

= 2,8357 %

4. Natrium

2

1. _99,8625 -2,244 5,0355

2. 104,3380 2,2315 4,9796

3. _97,8497 -4,2568 18,1203

4. _102,1253 0,0188 0,0004

5. _106,3633 4,2568 18,1203

6. _102,1003 -0,0062 0,0000

∑Xi = 612,6391 ∑(Xi - Xi)2 = 46,2561 Xi = 102,1065

SD =

√

=

√

= √

= 3,0416

RSD =

x 100%

=

x 100%

(59)

1. Perhitungan batas deteksi dan batas kuantitasi kalsium Y = 0,0352 X + 0,0046

Slope = 0,0352

No

Konsentrasi (µg/ml)

X

Absorbansi

(Y) Yi Y-Yi (Y-Yi)

2

1 0,0000 -0,0002 0,0046 -0,0048 0,00002304

2 2,0000 0,0812 0,0750 0,0062 0,00003844

3 4,0000 0,1472 0,1454 0,0018 0,00000324

4 6,0000 0,2121 0,2158 -0,0037 0,00001369

5 8,0000 0,2879 0,2862 0,0017 0,00000289

6 10,0000 0,3552 0,3566 -0,0014 0,00000196

∑(Y-Yi)2= 0,00008326

Simpangan Baku =

√

=

√

= 0,0045

Batas Deteksi = ⁄

=

= 0,3888 g/ml

Batas Kuantitasi = _⁄

(60)

Lanjutan Lampiran 20

2. Perhitungan batas deteksi dan batas kuantitasi magnesium

Y = 0,5636 X + 0,0025 Slope = 0,5636

No

X

Absorbansi

(Y) Yi Y-Yi (Y-Yi)

2

1 0,0000 -0,0003 0,0025 -0,0028 0,00000784

2 0,2000 0,1137 0,1152 -0,0015 0,00000225

3 0,4000 0,2369 0,2279 0,0090 0,00008100

4 0,6000 0,3391 0,3407 -0,0016 0,00000256

5 0,8000 0,4497 0,4534 -0,0037 0,00001369

6 1,0000 0,5665 0,5661 0,0004 0,00000016

∑(Y-Yi)2= 0,00010750

Simpangan Baku =

√

=

√

= 0,0051

Batas Deteksi = ⁄

=

= 0,0275 g/ml

Batas Kuantitasi = ⁄

=

(61)

3. Perhitungan batas deteksi dan batas kuantitasi kalium Y = 0,0404 X + 0,0027

Slope = 0,0404

No

X

Absorbansi

(Y) Yi Y-Yi (Y-Yi)

2

1 0,0000 -0,0020 0,0027 -0,0047 0,00002209

2 2,0000 0,0853 0,0835 0,0018 0,00000324

3 4,0000 0,1711 0,1643 0,0068 0,00004624

4 6,0000 0,2437 0,2451 -0,0014 0,00000196

5 8,0000 0,3267 0,3259 0,0008 0,00000064

6 10,0000 0,4036 0,4067 -0,0031 0,00000961

∑(Y-Yi)2= 0,00008380

Simpangan Baku =

√

=

√

= 0,0045

Batas Deteksi = ⁄

=

= 0,3398 g/ml

=

(62)

4. Perhitungan batas deteksi dan batas kuantitasi natrium

Y = 0,1164 X + 0,0016 Slope = = 0,1164

No

X

Absorbansi

(Y) Yi Y-Yi (Y-Yi)

2

1 0,0000 -0,0001 0,0016 -0,0017 0,00000289

2 0,2000 0,0265 0,0249 0,0016 0,00000256

3 0,4000 0,0489 0,0482 0,0007 0,00000049

4 0,6000 0,0715 0,0714 0,0001 0,00000001

5 0,8000 0,0932 0,0947 -0,0015 0,00000225

6 1,0000 0,1186 0,1180 0,0006 0,00000036

∑(Y-Yi)2= 0,00000856

Simpangan Baku =

√

=

√

= 0,0014

Batas Deteksi = ⁄

=

= 0,0377 g/ml

=

(63)

(64)

(65)

Tanur

Alat Spektrofotometer Serapan Atom (AAS)

[image:65.595.126.497.136.351.2]

(66)

DAFTAR PUSTAKA

Almatsier, S. (2004). Prinsip Dasar Ilmu Gizi. Jakarta: PT. Gramedia PustakaUtama. Halaman 228, 230 – 237, 242 – 243, 246 – 248.

Ambardini, S. (2009). Perubahan Kadar Lemak Biji Kakao (Theobroma cacao L.) Melalui Fermentasi Beberapa Isolat Khamir. Warta-Wiptek, Vol. 17, No. 01 Januari 2009, ISSN 0854-0667. Available from: http://118.97.35.230/download/29072010/sriambardini/MIPA/perubahan/ kadar/lemak/biji/kakao.doc. Tgl 19 Juni 2015.

Budiyanto, M.A.K. (2004). Dasar-Dasar Ilmu Gizi. Edisi Kedua. Cetakan Ketiga. Malang: UMM-Press. Halaman 60, 64 - 65.

Darmono. (1995). Logam Dalam Sistem Biologi Makhluk Hidup. Jakarta: Penerbit Universitas Indonesia Press. Halaman 127, 130.

Ditjen, POM. (1979). Farmakope Indonesia. Edisi Ketiga. Jakarta: Departemen Kesehatan Republik Indonesia. Halaman 692.

Doume, Z.S.Y., Rostiati., dan Hutomo, G.S. (2013). Karakteristik Kimia Dan Sensoris Biji Kakao Hasil Fermentasi Pada Tingkat Petani Dan Skala Laboratorium. Agrotekbis 1 (2) : 145-152, Juni 2013, ISSN: 2338-3011. Available from: http://jurnal.untad.ac.id/jurnal/index.php. Tgl 18 Juni 2015.

Elisabeth, D.A.A., Suharyanto., dan Rubiyo. (2007). Pengaruh Fermentasi Biji Kakao Terhadap Mutu Produk Olahan Setengah Jadi Cokelat. Available from: http://ntb.litbang.pertanian.go.id/ind/2007/pengaruhfermentasi.doc. Tgl 19 Juni 2015.

Ermer, J., and McB. Miler, J.H. (2005). Method Validation in Pharmaceutical Analysis. Weinheim: Wiley-Vch Verlag GmbH & Co. KGaA. Halaman 171.

Gandjar, I.G., dan Rohman, A. (2009). Kimia Farmasi Analisis. Yogyakarta: Pustaka Pelajar. Halaman 298 - 321.

Harmita. (2004). Petunjuk Pelaksanaan Validasi Metode dan Cara Perhitungannya. Review Artikel. Majalah Ilmu Kefarmasian. Vol. I, No. 3, 1(3). Halaman 117 – 119,12 – 122, 127 – 130.

(67)

SNI Biji Kakao 01-2323-2008. Yogyakarta: Perpustakaan Nasional Katalog Dalam Terbitan. Halaman 19 – 20, 24 – 25.

Hayati, R., Yusmanizar., Mustafril., dan Fauzi, H. (2012). Kajian Fermentasi dan

Suhu Pengeringan Pada Mutu Kakao (Theobroma cacao L.). Jurnal Keteknikan Pertanian. Available from:

http://id.portalgaruda.org/ref=browsemod=viewarticle=144077. Tgl 17 Juni 2015.

Helrich, K. (1990). Official Methods Of Analysis Of The Association Of Official Analytical Chemists. Edisi ke-15. Virginia: AOAC International. Halaman 42.

Khopkar, S.M. (2003). Konsep Dasar Kimia Analitik. Jakarta: Universitas Indonesia Press. Halaman 274 - 279.

Knight, I. (1999). Chocolate and Cocoa : Health and Nutrition. Berlin, Germany: Blackwell Publishing Ltd. Halaman 145.

Kristianingrum, S. (2012). Kajian Berbagai Proses Destruksi Sampel Dan Efeknya. Available from: https://www.academia.edu.6847858/kajian-berbagai-proses-destruksi-sampel-dan-efeknya. Tgl 18 Juni 2015.

Poedjiwidodo, Y. (1996). Sambung Samping Kakao. Ungaran: PT. Trubus Agriwidya. Halaman 5, 17 - 18, 99.

Pusat Penelitian Kopi dan Kakao Indonesia. (2004). Panduan Lengkap Budi Daya Kakao. Jakarta: Agromedia Pustaka. Halaman 29, 156, 159.

Rosmarkam, A., dan Yuwono, N.W. (2002). Ilmu Kesuburan Tanah. Yogyakarta: Kanisius. Halaman 62 – 64.

SNI 2323:2008. (2008). Standar Nasional Indonesia (SNI) Biji Kakao. Jakarta: Badan Standardisasi Nasional. Halaman 3.

Sudjana. (2005). Metode Statistika. Edisi Keenam. Bandung: Tarsito. Halaman 93, 168, 239.

Susanto, F.X. (1994). Tanaman Kakao Budidaya Dan Pengolahan Hasil. Yogyakarta: Kanisius. Halaman 160.

(68)

Widyotomo, S., dan Mulato, S. (2008). Teknologi Fermentasi Dan Diversifikasi Pulpa Kakao Menjadi Produk Yang Bermutu Dan Bernilai Tambah.

Review Penelitian Kopi dan Kakao 2008, 24(1) 65-82. Available from:

http://dokumen.tips/teknologi-fermentasi-dan-diversifikasi- pulpa-kakao-menjadi-produk-yang-bermutu-dan-bernilai-tambah.html. Tgl 16 Juni 2015.

(69)

METODE PENELITIAN

Metode penelitian yang dilakukan ini adalah penelitian yang besifat

deskriptif, yang bertujuan menggambarkan suatu keadaan secara sistematis yaitu

untuk mengetahui kadar kalsium, magnesium, kalium dan natrium pada biji kakao

non fermentasi dan fermentasi.

3.1 Tempat Dan Waktu Penelitian

Tempat dan waktu penelitian ini dilakukan di Laboratorium Penelitian

Farmasi Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara pada bulan Mei 2015 –

Agustus 2015.

3.2 Bahan - Bahan 3.2.1 Sampel

Sampel yang digunakan dalam penelitian ini adalah buah kakao yang

diambil dari kebun di belakang rumah saudara, di Jalan Coklat No. 78, Kelurahan

Sukarame, Kecamatan Binjai Darat, Provinsi Sumatera Utara.

3.2.2 Pereaksi

Bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah pro analisis keluaran

E. Merck yaitu asam nitrat pekat 65% b/v, akuademineralisata, larutan baku

kalsium 1000 g/ml, larutan baku magnesium 1000 g/ml, larutan baku kalium

1000 g/ml dan larutan baku natrium 1000 g/ml (Laboratorium Penelitian

(70)

3.3 Alat – Alat

Alat–alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah Spektrofotometer

Serapan Atom (Hitachi Z-2000) dengan nyala udara-asetilen lengkap dengan

lampu katoda kalsium, magnesium, kalium dan natrium, Tanur (Naberthem),

Kertas Whatman No.42, Neraca analitik (BOECO Germany), Krus porselen, Hot

plate (BOECO Germany), Blender (Aragawa), Alat-alat gelas (Pyrex dan Oberoi).

3.4 Identifikasi Sampel

Identifikasi tumbuhan dilakukan oleh Herbarium Bogoriense, Bidang

Botani, Pusat Penelitian dan Pengembangan Biologi, Lembaga Ilmu Pengetahuan

Indonesia (LIPI) Bogor, Jalan Raya Jakarta–Bogor Km.46, Cibinong.

3.5 Pembuatan Pereaksi 3.5.1 Larutan HNO3 (1:1)

Asam Nitrat 65% sebanyak 100 ml diencerkan dengan akuademineralisata 100 ml (Ditjen POM, 1979).

3.6 Prosedur Penelitian 3.6.1 Pengambilan Sampel

Metode pengambilan sampel dilakukan dengan cara sampling purposif

yang dikenal juga sebagai sampling pertimbangan dimana sampel ditentukan atas

pertimbangan bahwa populasi sampel adalah homogen dan sampel yang tidak

diambil mempunyai karakteristik yang sama dengan sampel yang sedang diteliti

(71)

3.6.2.1 Penyiapan Sampel Non Fermentasi

Percobaan dilakukan dimulai dari pemetikan buah kakao dengan

menggunakan pisau. Buah kakao yang baru dipetik, lalu dibelah menjadi dua

bagian. Kemudian dikeringkan dibawah sinar matahari selama 7 hari. Sampel

yang sudah kering, lalu dikupas kulit arinya dan diblender (dihaluskan).

3.6.2.2 Penyiapan Sampel Fermentasi

Percobaan dilakukan dimulai dari pemetikan buah kakao dengan

menggunakan pisau. Buah kakao yang baru dipetik, lalu dibelah menjadi dua

bagian. Kemudian dilakukan proses fermentasi biji kakao yang dimasukkan ke

dalam kotak fermentasi dan ditutup dengan menggunakan daun pisang.

Fermentasi dilakukan selama 5 hari dengan pembalikan sekali setelah 48 jam

fermentasi. Biji yang sudah difermentasi dicuci secara hati-hati. Kemudian biji

dikeringkan dibawah sinar matahari selama 7 hari. Sampel yang telah kering, lalu

dikupas kulit arinya dan diblender (dihaluskan).

3.6.3 Proses Destruksi

Sampel yang telah dihaluskan ditimbang sebanyak 25 gram didalam krus

porselen, diarangkan diatas hot plate, lalu diabukan dalam tanur dengan

temperatur awal 100°C dan perlahan-lahan temperatur dinaikkan hingga suhu

500°C dengan interval 25°C setiap 5 menit. Pengabuan dilakukan selama 48 jam

dan dibiarkan hingga dingin pada desikator. Abu yang diperoleh ditambahkan

5 ml HNO3 (1:1) secara hati-hati. Kemudian kelebihan HNO3 (1:1) diuapkan pada

hot plate sampai kering. Krus porselen dimasukkan kembali ke dalam tanur

(72)

suhu 500oC dengan interval 25oC setiap 5 menit, dilakukan selama 1 jam dan

dibiarkan hingga dingin pada desikator (Helrich, 1990).

3.6.4 Pembuatan Larutan Sampel

Hasil destruksi dilarutkan dengan 5 ml HNO3 (1:1), dimasukkan ke

dalam labu tentukur 50 ml dan krus porselen dibilas dengan akuademineralisata

sebanyak 3 kali. Hasil pembilasan dimasukkan ke dalam labu tentukur. Setelah itu

dicukupkan volumenya dengan akuademineralisata hingga garis tanda. Lalu

disaring dengan kertas Whatman No. 42 dengan membuang ± 5 ml larutan

sampel pertama hasil penyaringan untuk menjenuhkan kertas saring dan

selanjutnya ditampung ke dalam botol. Larutan ini digunakan untuk uji kuantitatif

kalsium, magnesium, kalium dan natrium.

3.6.5 Analisis Kuantitatif

3.6.5.1 Pembuatan Kurva Kalibrasi Kalsium

Larutan baku kalsium (1000 g/ml) dipipet sebanyak 5 ml, dimasukkan

kedalam labu tentukur 50 ml dan dicukupkan hingga garis tanda dengan

akuademineralisata (konsentrasi 100 g/ml) (LIB I).

Larutan untuk kurva kalibrasi kalsium dibuat dengan memipet (0,5; 1;

1,5; 2; dan 2,5 ml) dari LIB I, masing-masing dimasukkan ke dalam labu tentukur

25 ml dan dicukupkan hingga garis tanda dengan akuademineralisata (larutan ini

mengandung 2; 4; 6; 8 dan 10 g/ml) dan diukur pada panjang gelombang

422,7 nm dengan nyala udara-asetilen.

3.6.5.2 Pembuatan Kurva Kalibrasi Magnesium

Larutan baku magnesium (1000 g/ml) dipipet sebanyak 5 ml,

(73)

dimasukkan ke dalam labu tentukur 50 ml dan dicukupkan hingga garis tanda

dengan akuademineralisata (konsentrasi 10 g/ml) (LIB II).

Larutan untuk kurva kalibrasi magnesium dibuat dengan memipet (1; 2;

3; 4; dan 5 ml) dari LIB II, masing-masing dimasukkan ke dalam labu tentukur

50 ml dan dicukupkan hingga garis tanda dengan akuademineralisata (larutan ini

mengandung 0,2; 0,4; 0,6; 0,8 dan 1 g/ml) dan diukur pada panjang gelombang

3.6.5.3 Pembuatan Kurva Kalibrasi Kalium

Larutan baku kalium (1000 g/ml) dipipet sebanyak 5 ml, dimasukkan

kedalam labu tentukur 50 ml dan dicukupkan hingga garis tanda dengan

akuademineralisata (konsentrasi 100 g/ml) (LIB I).

Larutan untuk kurva kalibrasi kalium dibuat dengan memipet (0,5; 1; 1,5;

2; dan 2,5 ml) dari LIB I, masing-masing dimasukkan ke dalam labu tentukur 25

ml dan dicukupkan hingga garis tanda dengan akuademineralisata (larutan ini

mengandung 2; 4; 6; 8 dan 10 g/ml) dan diukur pada panjang gelombang

3.6.5.4 Pembuatan Kurva Kalibrasi Natrium

Larutan baku natrium (1000 g/ml) dipipet sebanyak 5 ml, dimasukkan

ke dalam labu tentukur 50 ml dan dicukupkan hingga garis tanda dengan

akuademineralisata (konsentrasi 100 g/ml), kemudian dipipet 5 ml dimasukkan

ke dalam labu tentukur 50 ml dan dicukupkan hingga garis tanda dengan

(74)

Larutan untuk kurva kalibrasi natrium dibuat dengan memipet (1; 2; 3; 4;

dan 5 ml) dari LIB II, masing-masing dimasukkan ke dalam labu tentukur 50 ml

dan dicukupkan hingga garis tanda dengan akuademineralisata (larutan ini

mengandung 0,2; 0,4; 0,6; 0,8 dan 1 g/ml) dan diukur pada panjang gelombang

3.6.5.5 Penetapan Kadar Kalsium, Magnesium, Kalium Dan Natrium Dalam Sampel

Sebelum dilakukan penetapan kadar kalsium, magnesium, kalium dan

natrium dalam sampel terlebih dahulu alat spektrofotometer serapan atom

dikondisikan dan diatur metodenya sesuai dengan mineral yang akan diperiksa.

3.6.5.5.1 Penetapan Kadar Kalsium Dalam Sampel

Larutan sampel biji kakao hasil destruksi dipipet sebanyak 1 ml

dimasukkan kedalam labu tentukur 50 ml dan dicukupkan dengan

akuademineralisata hingga garis tanda (Faktor pengenceran = 50/1 = 50 kali).

Diukur absorbansinya dengan menggunakan spektrofotometer serapan atom pada

panjang gelombang 422,7 nm. Nilai absorbansi yang diperoleh harus berada

dalam rentang kurva kalibrasi larutan baku kalsium. Konsentrasi kalsium dalam

sampel ditentukan berdasarkan persamaan garis regresi dari kurva kalibrasi.

3.6.5.5.2 Penetapan Kadar Magnesium Dalam Sampel

Larutan sampel biji kakao hasil destruksi dipipet sebanyak 0,1 ml

dimasukkan kedalam labu tentukur 50 ml, dicukupkan dengan akuademineralisata

hingga garis tanda. Kemudian dipipet lagi sebanyak 6,5 ml dimasukkan kedalam

labu tentukur 25 ml dan dicukupkan dengan akuademineralisata hingga garis

(75)

285,2 nm. Nilai absorbansi yang diperoleh harus berada dalam rentang kurva

kalibrasi larutan baku magnesium. Konsentrasi magnesium dalam sampel

ditentukan berdasarkan persamaan garis regresi dari kurva kalibrasi.

3.6.5.5.3 Penetapan Kadar Kalium Dalam Sampel

Larutan sampel biji kakao hasil destruksi dipipet sebanyak 0,1 ml

dimasukkan kedalam labu tentukur 50 ml, dicukupkan dengan akuademineralisata

hingga garis tanda. Kemudian dipipet lagi sebanyak 8,3 ml dimasukkan kedalam

labu tentukur