AKTIVITAS ANTIBAKTERI DAN BIOAUTOGRAFI
EKSTRAK ETANOL DAUN SIRSAK (
Annona muricata
L
.
)
TERHADAP
Klebsiella pneumoniae
DAN
Staphylococcus
epidermidis
SKRIPSI
Oleh:
YULIANA DWI JAYANTI
K 100 080 183
AKTIVITAS ANTIBAKTERI DAN BIOAUTOGRAFI
EKSTRAK ETANOL DAUN SIRSAK (
Annona muricata
L.)
TERHADAP
Klebsiella pneumoniae
DAN
Staphylococcus
epidermidis
SKRIPSI
Oleh:
YULIANA DWI JAYANTI
K 100 080 183
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA
SURAKARTA
2
AKTIVITAS ANTIBAKTERI DAN BIOAUTOGRAFI
EKSTRAK ETANOL DAN SIRSAK (
Annona muricata
L
.
)
TERHADAP
Klebsiella pneumonia
DAN
Staphylococcus
epidermidis
SKRIPSI
Diajukan untuk memenuhi salah satu syarat mancapai derajat Sarjana Farmasi (S. Farm) pada Fakultas Farmasi
Universitas Muhammadiyah Surakarta di Surakarta
Oleh:
YULIANA DWI JAYANTI
K 100 080 183
4
MOTTO
``
Sesungguhnya sesudah kesulitan itu ada kemudahan``
(Q. S. Al-Insyiroh :6)
``
Pendidikan adalah perlengkapan paling baik untuk hari tua
”
(Aristoteles)
“
Hidup adalah pilihan, di setiap pilihan pasti ada resiko dan konsekuensi yang
PERSEMBAHAN
Ya Allah .. segala puji syukur kupanjatkan untuk-Mu atas rahmat, hidayah, dan
karunia yang telah Engkau anugerahkan.
Dengan ridho-Mu dan penuh kerendahan hati,
cinta, sayang dan doa,
kupersembahkan karya sederhana ini teruntuk:
Mamah Sumaryati dan Papah Sudarno tercinta.
Sebagai ungkapan rasa hormat dan baktiku serta rasa terima kasih atas doa,
kesabaran, pengorbanan dan motivasi yang tak pernah letih dan selalu menuntun
dengan cinta serta kasih sayang
Kakakku tercinta mbak Dani Rahmawati dan mas Zuldhan Triadi
yang senantiasa memberiku semangat tiada henti
dan telah menjadi inspirasiku dalam meraih cita-cita
serta slalu berusaha menjadi kebanggaan untuk semua
Adeku Kamila Najlah Nur Azizah
Yang slalu memberikan semangat dengan keceriaannya
dan mengajariku untuk slalu bangkit ketika terjatuh
serta slalu tersenyum disetiap kendala
Mas Henggar Prasetyo W. Saputro
yang tak pernah lelah untuk slalu memberikan dan menjadi yang terbaik untukku
yang membuktikan padaku bahwa tidak semua hal yang disukai itu terbaik.
Namun, terbaik bisa berawal dari hal yang dibenci sekalipun
Keluarga besar ku tersayang...terima kasih atas segalanya
Almameter Universitas Muhammadiyah Surakarta
KATA PENGANTAR
Assalamu’alaikum warohmatullahi wabarokatuh
Alhamdulillahirobbil’alamin, puji syukur penulis panjatkan hanya untuk-Mu ya Allah atas segala rahmat, nikmat, barokah, dan kekuatan yang tak terhingga untukku untuk terus melangkah.
Alhamdulillah, penulis telah dapat menyelesaikan skripsi dengan judul
Aktivitas Antibakteri dan Bioatugafi Ekstrak Etanol Daun Sirsak (Annona muricata L.) terhadap Klebsiella pneumoniae dan Staphylococcus epidermidis
sebagai salah satu syarat mencapai Derajat sarjana Farmasi (S. Farm) Program Studi Ilmu Farmasi pada Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta.
Terima kasih sebesar-besarnya penulis sampaikan kepada :
1. Bapak Dr. Muhammad Da'i, M.Si., Apt. Dekan Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta.
2. Bapak Dr. Haryoto, M. Sc. Dosen Pembimbing I yang telah meluangkan waktu dan kesempatan untuk memberikan bimbingan nasihat, pengarahan, dan petunjuk serta perhatian selama penelitian, penyusunan, dan penyelesaian skripsi ini.
3. Bapak Peni Indrayudha, M. Biotech., Apt. Dosen Pembimbing II yang dengan penuh kesabaran memberikan bimbingan, nasihat, pengarahan, dan petunjuk, serta perhatian selama penelitian, penyusunan, dan penyelesaian skripsi ini. 4. Ibu Ratna Yuliani, M.Biotech. St. dan bapak Dr. Muhtadi, M.Si. Dosen penguji
yang telah banyak memberi masukan dan saran.
5. Bapak dan Ibu dosen beserta seluruh staf dan karyawan Fakultas Farmasi UMS yang telah banyak membantu.
6. Teman terbaik satu tim yang telah dengan setia melewati berbagai suka duka bersama selama penelitian dan penyusunan skripsi : Wikan, Riska dan Kosworo.
8
Akhir kata semoga apa yang penulis sajikan bisa bermanfaat bagi perkembangan dunia ilmu pengetahuan khususnya di bidang kefarmasian.
Surakarta, 18 Januari 2012
DAFTAR ISI
Halaman
HALAMAN JUDUL ... i
HALAMAN PENGAJUAN ... ii
HALAMAN PENGESAHAN ... iii
MOTTO ... iv
PERSEMBAHAN ... v
DEKLARASI ... v
KATA PENGANTAR ... vii
DAFTAR ISI ... ix
DAFTAR GAMBAR ... xii
DAFTAR TABEL ... xiii
DAFTAR LAMPIRAN ... xiv
DAFTAR SINGKATAN ... xv
INTISARI ... xvi
BAB I. PENDAHULUAN ... 1
A. Latar Belakang Masalah ... 1
B. Perumusan Masalah ... 2
C. Tujuan Penelitian ... 2
D. Tinjauan Pustaka ... 3
1. Daun Sirsak (Annona muricata L.) ... 3
2. Maserasi ... 4
3. Klebsiella pneumoniae ... 4
4. Staphylococcus epidermidis ... 5
5. Antibakteri... 5
6. Uji Aktivitas Antibakteri ... 6
7. Kromatografi Lapis Tipis ... 6
8. Bioautografi ... 7
E. Landasan Teori ... 7
10
BAB II. METODE PENELITIAN ... 9
A. Jenis Penelitian ... 9
B. Variabel Penelitian ... 9
C. Bahan dan Alat ... 9
D. Jalannya Penelitian ... 11
1. Determinasi Tanaman ... 11
2. Pengumpulan Bahan ... 11
3. Pembuatan Ekstrak Etanol Daun Sirsak ... 11
4. Sterilisasi Alat dan Bahan ... 11
5. Pembuatan Media ... 12
6. Pemeliharaan Bakteri ... 12
7. Pembuatan Suspensi Bakteri ... 12
8. Pewarnaan Bakteri ... 12
9. Identifikasi Staphylococcus epidermidis dengan uji biokimia 13 10.Identifikasi Klebsiella pneumoniae dengan uji biokimia….... 13
11.Pembuatan Seri Konsentrasi ... 13
12.Pembuatan Kontrol ... 14
13.Uji Antibakteri Metode Dilusi Padat ... 15
14.Uji Kromatografi Lapis Tipis ... 15
15.Uji Bioautografi ... 16
D. Analisis Data ... 16
BAB III. HASIL DAN PEMBAHASAN ... 17
A. Determinasi Tanaman ... 17
B. Ekstraksi ... 18
C. Identifikasi Bakteri ... 19
D. Uji Aktivitas Antibakteri ... 21
E. Analisis Kualitatif Ekstrak Etanol Daun Sirsak ... 23
BAB IV. KESIMPULAN DAN SARAN ... 28
A. Kesimpulan ... 28
B. Saran ... 28
DAFTAR PUSTAKA ... 29
12
DAFTAR TABEL
Halaman
Tabel 1. Hasil Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daun Sirsak
DAFTAR GAMBAR
Halaman
Gambar 1. Skema Pembuatan Seri Konsentrasi Ekstrak Etanol Daun Sirsak 14
Gambar 2. Hasil Pengecatan Gram Bakteri Klebsiella pneumoniae dan
Staphylococcus epidermidis ... 19 Gambar 3. Identifikasi Biokimia dengan Menggunakan Media KIA, LIA,
dan MIO pada Bakteri Klebsiella pneumoniae ... 20 Gambar 4. Hasil Tes Manitol terhadap Staphylococcus epidermidis ... .. 21 Gambar 5. Hasil Uji Antibakteri Ekstrak Etanol Daun Sirsak terhadap
Klebsiella pneumoniae dan Staphylococcus epidermidis ... 21 Gambar 6. Struktur Senyawa yang Terdapat dalam Tanaman Sirsak... 24 Gambar 7. Hasil KLT Ekstrak Etanol Daun Sirsak ... 25 Gambar 8. Hasil Uji Bioautografi Ekstrak Etanol Daun Sirsak terhadap
Klebsiella pneumonia dan Staphylococcus epidermidis ... 27
14
DAFTAR LAMPIRAN
Halaman
Lampiran 1. Surat Determinasi ... 34
Lampiran 2. Surat Keterangan Bakteri Staphylococcus epidermidis ... 36
Lampiran 3. Surat Keterangan Bakteri Klebsiella pneumonia ... 37
Lampiran 4. Perhitungan ... 39
Lampiran 5. Komposisi Media Bakteri ... 44
Lampiran 6. Komposisi Cat Gram ... 45
Lampiran 7. Pembuatan reagen ... 46
DAFTAR SINGKATAN
ESBL : Extended Spectrum Beta Lactamase
KHM : Kadar Hambat Minimum KLT : Kromatografi Lapis Tipis Rf : Retardation factor
hRf : hundred Retardation factor DMSO : Dimethyl sulfoxide
MH : Mueller Hinton BHI : Brain Heart Infusion
CFU : Colony Forming Unit
BHI ds : Brain Heart Infusion double strength
LAF : Laminar Air Flow
UV : Ultraviolet KIA : Kligler Iron Agar
LIA : Lysine Iron Agar
MIO : Motility Indol Ornithine
16
INTISARI
Penyakit infeksi masih merupakan penyakit utama dan penyebab kematian tertinggi di Indonesia. Salah satu tanaman yang dapat dimanfaatkan sebagai obat adalah tumbuhan sirsak. Penelitian ini dilakukan untuk mengetahui Konsentrasi Hambat Minimum (KHM) pada ekstrak daun sirsak (Annona muricata L.) serta golongan senyawa kimianya yang mempunyai aktivitas antibakteri terhadap
Klebsiella pneumoniae dan Staphylococcus epidermidis.
Daun sirsak diekstraksi dengan metode maserasi menggunakan penyari etanol 96%. Ekstrak yang didapat kemudian diuji aktivitas antibakterinya menggunakan metode dilusi padat. Untuk mengetahui kandungan senyawa dari ekstrak etanol daun sirsak dilakukan uji kromatografi lapis tipis (KLT) dengan menggunakan fase diam silika gel GF254 nm dan fase gerak heksan : etil asetat
(7:3) v/v. Uji bioautografi dengan menempelkan plat KLT hasil elusi pada media yang telah diinokulasi bakteri, senyawa antibakteri ditunjukkan dengan adanya zona jernih.
Hasil penelitian menunjukkan bahwa ekstrak etanol daun sirsak mempunyai aktivitas antibakteri terhadap Klebsiella pneumoniae dan
Staphylococcus epidermidis dengan KHM berturut-turut sebesar 3,25% dan 3,5%. Hasil KLT menunjukkan bahwa golongan senyawa yang terkandung dalam ekstrak etanol daun sisak (Annona muricata L.) adalah polifenol, antrakinon, dan saponin. Golongan senyawa dari ekstrak etanol daun sirsak yang memiliki aktivitas antibakteri terhadap Klebsiella pneumoniae diduga senyawa golongan triterpenoid saponin, dan polifenol. Golongan senyawa dari ekstrak etanol daun sirsak yang memiliki aktivitas antibakteri terhadap Staphylococcus epidermidis
diduga senyawa golongan polifenol dan antrakinon.
Kata kunci : Annona muricata L., antibakteri, Klebsiella pneumoniae,