i
SKRIPSI
ACH. KHAIRUL HIDAYAT
UJI SITOTOKSISITAS FRAKSI N-HEKSAN AKAR Jatropha gossypifolia L. TERHADAP SEL KANKER PAYUDARA T47D DENGAN METODE MTT ASSAY
PROGRAM STUDI FARMASI FAKULTAS ILMU KESEHATAN
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH MALANG 2017
ii
Lembar Pengesahan
UJI SITOTOKSISITAS FRAKSI N-HEKSAN AKAR Jatropha gossypifolia L. TERHADAP SEL KANKER PAYUDARA T47D DENGAN METODE MTT ASSAY
SKRIPSI
Dibuat untuk memenuhi syarat mencapai gelar Sarjana Farmasi pada Program Studi Farmasi Fakultas Ilmu Kesehatan
Universitas Muhammadiyah Malang 2017
Oleh :
ACH. KHAIRUL HIDAYAT 201310410311198
Disetujui Oleh :
Pembimbing I Pembimbing II
Siti Rofida,S.Si.,M.Farm., Apt Ahmad Shobrun Jamil, S.Si, MP.
NIP UMM: 114.0804.0453 NIP UMM: 113.0907.0469
iii
Lembar Pengujian
UJI SITOTOKSISITAS FRAKSI N-HEKSAN AKAR Jatropha gossypifolia L. TERHADAP SEL KANKER PAYUDARA T47D DENGAN METODE MTT ASSAY
SKRIPSI
Telah diuji dan dipertahankan di depan tim penguji Pada tanggal 20 Juni 2017
Oleh:
ACH. KHAIRUL HIDAYAT NIM: 201310410311198
Tim Penguji
Penguji I Penguji II
Siti Rofida, S.Si., M.Farm., Apt Ahmad Shobrun Jamil, S.Si, MP.
NIP UMM: 114.0804.0453 NIP UMM: 113.0907.0469
Penguji III Penguji IV
Engrid Juni Astuti, M.Farm., Apt. Andri Tilaqza, M.Farm., Apt.
NIP UMM: 112.1612.0589
iv
KATA PENGANTAR
Alhamdulilah, puji syukur kehadirat Allah SWT atas segala rahmat, taufik, hidayah dan karuniaNya, sehingga penulis dapat menyelesaikan karya tulis yang berbentuk skripsi ini sesuai dengan waktu yang telah direncanakan. Shalawat serta salam semoga senantiasa tercurahkan kepada baginda Nabi Muhammad SAW berserta seluruh keluarga dan sahabatnya. Sehingga tugas akhir ini yang berjudul:
“UJI SITOTOKSISITAS FRAKSI n-HEKSAN AKAR Jatropha gossypifolia L. TERHADAP SEL KANKER PAYUDARA T47D DENGAN METODE MTT ASSAY” dapat diselesaikan. Skripsi ini diajukan untuk memenuhi syarat untuk mencapai gelar Sarjana Farmasi pada Program Studi Farmasi Fakultas Ilmu Kesehatan Universitas Muhammadiyah Malang.
Dalam penyusunan skripsi ini penulis tidak terlepas dari peranan pembimbing dan bantuan dari seluruh pihak. Oleh Karena itu, dengan segala kerendahan hati, penulis ingin mengucapkan banyak terima kasih kepada:
1. Yoyok Bekti Prasetyo, S.Kep., M.Kep., Sp.Kom., selaku Dekan Fakultas Ilmu Kesehatan Universitas Muhammadiyah Malang dan Nailis Syifa’, S.Farm., M.Farm., Apt., selaku Ketua Prodi Farmasi Universitas Muhammadiyah Malang yang telah memberikan motivasi dan kesempatan penulis belajar di Program Studi Farmasi Fakultas Ilmu Kesehatan Universitas Muhammadiyah Malang.
2. Siti Rofida S.Si., M.Farm., Apt., selaku Pembimbing I dan Ahmad Shobrun Jamil, S.Si., MP., selaku Pembimbing II yang dengan tulus, ikhlas, penuh kesabaran, dan Memberikan dorongan moral maupun materi kepada penulis sehingga skripsi ini dapat diselesaikan.
3. Engrid Juni Astuti, S.Farm., M.Farm., Apt., dan Andri Tilaqza, S.Farm., M.Farm., Apt., selaku Tim Penguji atas saran dan kritikan yang diberikan sehingga penyusunan skripsi ini menjadi lebih baik.
4. Siti Rofida S.Si., M.Farm., Apt., sebagai dosen wali yang senantiasa dengan penuh kesabaran memberikan bimbingan dan nasehat kepada penulis selama mengikuti pendidikan di Program Studi Farmasi Universitas Muhammadiyah Malang.
v
5. Seluruh staf pengajar Program Studi Farmasi Universitas Muhammadiyah Malang yang telah mendidik dan mengajarkan banyak ilmu pengetahuan yang sangat bermanfaat, sehingga saya dapat menyelesaikan pendidikan sarjana.
6. Prof. Dr. Supargiyono, DTMH., SU., PhD., Sp.Park., dan Staf Teknisi Laboratorium Parasitologi Fakultas Kedokteran Universitas Gadjah Mada Yogyakarta yang telah bersedia meluangkan waktu untuk memberikan ilmu baru kepada penulis tentang kultur jaringan dan memberikan tempat agar penulis dapat melaksanakan penelitiannya dengan baik.
7. Kedua Orang tua tercinta Bapak Salehodin dan Ibu Tuffatul Jannah, dan juga kepada adikku tercinta Khairun Nisa’ Febriyanti yang dengan kasih sayangnya selalu mendukung secara moril dan materil, mendo’akan, memberikan restu, memberikan nasehat dan motivasi sehingga saya dapat menyelesaikan skripsi ini.
8. Teman-teman seperjuangan Skripsi Antikanker (Risa, Fatma, Nikma, Linda, Wulan, Tutut dan Fika), Sahabat tercinta LDG (Andi, Larissa, Dewi, Ikhsan dan Ridwan) dan Teman-teman Kontrakan 17D (Kak Halim, Santoso, Kak Kodir, Kak Sulhan, Kak Mulid, Bahar, Syaiful Bahri dan Kak Ulung) yang selalu memberikan, dukungan, dan motivasi sehingga saya dapat menyelesaikan skripsi ini.
9. Teman-teman Farmasi 2013 khususnya Lelaki 2013 dan Kelas Farmasi E terima kasih atas kebersamaannya selama 4 tahun terakhir ini, kalian memberikan warna baru dalam hidupku.
Penulis menyadari bahwa masih banyak kekurangan yang terdapat pada skripsi ini. Oleh karena itu, penulis mengharapkan kritik dan saran yang bersifat membangun dari berbagai pihak untuk kesempurnaan skripsi ini dan semoga bermanfaat bagi pembaca.
Malang, 27 Juli 2017
Penyusun
(Ach. Khairul Hidayat)
x
DAFTAR ISI
Halaman
HALAMAN JUDUL ... i
LEMBAR PENGESAHAN... ii
LEMBAR PENGUJIAN…... iii
KATA PENGANTAR……... iv
RINGKASAN... vi
ABSTRAK ... viii
ABSTRACT ... ix
DAFTAR ISI ... x
DAFTAR TABEL ... xiv
DAFTAR GAMBAR ... xv
DAFTAR LAMPIRAN ... xvi
DAFTAR SINGKATAN ... xvii
BAB 1 PENDAHULUAN ... 1
1.1 Latar Belakang ... 1
1.2 Rumusan Masalah ... 4
1.3 Tujuan Penelitian ... 4
1.4 Hipotesis ... 4
1.5 Manfaat Penelitian ... 5
BAB 2 TINJAUAN PUSTAKA ... 6
2.1 Tinjauan Tentang Jarak Merah (Jatropha gossypiifolia L) ... 6
2.1.1 Klasifikasi Tanaman ... 6
2.1.2 Nama Daerah ... 6
2.1.3 Morfologi Tanaman ... 7
2.1.4 Ekologi dan Penyebaran ... 7
2.1.5 Manfaat dan Aktivitas Biologi ... 7
2.1.6 Kandungan Kimia Tanaman ... 8
2.2 Tinjauan Tentang Ekstraksi ... 9
2.3 Tinjauan Fraksinasi ... 10
2.4 Tinjauan Tentang Kanker ... 10
2.4.1 Definisi ... 10
xi
2.4.2 Sifat dan Karakteristik Sel Kanker ... 11
2.4.3 Karsinogenesis ... 12
2.4.4 Siklus Sel ... 15
2.4.5 Gejala Kanker ... 15
2.5 Tinjauan Tentang Kanker Payudara ... 16
2.5.1 Definisi ... 16
2.5.2 Epidemiologi ... 17
2.5.3 Faktor Resiko ... 18
2.5.4 Tanda dan Gejala ... 19
2.5.5 Stadium Kanker Payudara ... 19
2.6 Tinjauan Tentang Antikanker ... 22
2.7 Tinjauan Senyawa Metabolit Sekunder sebagai Antikanker ... 25
2.8 Tinjauan Tentang Doxorubicin ... 28
2.9 Tinjauan Tentang Sel Kanker Payudara ... 29
2.9.1 Tinjauan Sel Kanker Payudara T47D ... 30
2.9.2 Perbedaan antara Sel T47D dan Sel MCF-7 ... 31
2.10 Tinjauan Tentang Sel Vero ... 31
2.11 Tinjauan Tentang Kultur Sel ... 31
2.12 Tinjauan Tentang Metode MTT Assay ... 32
BAB 3 KERANGKA KONSEPTUAL ... 33
3.1 Skema Kerangka Konseptual ... 33
3.2 Uraian Kerangka Konseptual ... 34
BAB 4 METODE PENELITIAN ... 36
4.1 Bahan Uji ... 36
4.2 Tempat Penelitian dan Tempat Penelitian ... 36
4.3 Alat dan Bahan Penelitian ... 36
4.3.1 Bahan untuk Kontrol Positif ... 36
4.3.2 Bahan untuk Pembuatan Media ... 36
4.3.3 Alat Penelitian ... 37
4.4 Variabel Penelitian... 37
4.4.1 Variabel Bebas ... 37
4.4.2 Variabel Tergantung ... 38
xii
4.5 Metode Penelitian ... 38
4.5.1 Rancangan Penelitian ... 38
4.5.2 Kerangka Operasional ... 39
4.6 Pembuatan Media ... 40
4.6.1 Pembuatan Media Cair ... 40
4.6.2 Pembuatan Media Kultur ... 40
4.6.3 Penumbuhan Sel... 41
4.6.4 Penggantian Media... 42
4.6.5 Panen Sel ... 42
4.6.6 Perhitungan Sel ... 43
4.7 Pembuatan Larutan Induk dan Larutan Uji Sampel ... 44
4.7.1 Pembuatan Larutan Induk ... 44
4.7.2 Pembuatan Larutan Uji untuk Sel T47D ... 44
4.7.3 Pembuatan Larutan Uji untuk Sel Vero ... 45
4.8 Pembuatan Larutan Induk dan Larutan Uji Kontrol Positif ... 45
4.9 Uji Sitotoksisitas dengan Metode MTT Assay ... 46
4.10 Analisis Data ... 47
BAB 5 HASIL PENELITIAN ... 49
5.1 Hasil Perhitungan Panen Sel dan Kebutuhan Sel untuk Uji Sitotoksisitas dengan Metode MTT Assay ... 49
5.1.1 Hasil Perhitungan Panen Sel dan kebutuhan Sel T47D dalam Kultur Media RPMI ... 49
5.1.2 Hasil Perhitungan Panen Sel dan kebutuhan Sel Vero dalam Kultur Media M199 ... 50
5.2 Data Hasil Uji Sitotoksisitas Fraksi n-Heksan Akar Jatropha gossypifolia L., dan Doxorubicin, Terhadap Sel T47D dan Sel Vero dengan Metode MTT Assay ... 51
5.3 Analisis Data ... 52
BAB 6 PEMBAHASAN ... 53
BAB 7 KESIMPULAN DAN SARAN ... 59
7.1 Kesimpulan ... 59
7.2 Saran ... 59
xiii
DAFTAR PUSTAKA ... 60 LAMPIRAN ... 69
xiv
DAFTAR TABEL
Tabel Halaman I. Indeks Polaritas Pelarut ... 9 II. Kelompok perlakuan kultur sel kanker payudara T47D dalam setiap
percobaan. ... ... 38 III. Data Hasil Uji Sitotoksisitas Fraksi n-Heksan Akar Jatropha gossypifolia
L., dan Doxorubicin, Terhadap Sel T47D dan Sel Vero dengan Metode MTT Assay.. ... ... 51 IV. Hasil nilai IC50 fraksi n-heksan akar (Jatropha gossipifolia L.) dan
Doxorubicin Terhadap Sel Kanker Payudara T47D dan Sel Vero dengan Analisis Probit.. ... ... 52
xv
DAFTAR GAMBAR
Gambar Halaman
2.1. Tanaman jarak merah (Jatropha gossypifolia L.) ... 6
2.2 Proses Karsinogenesis ... 12
2.3 Siklus Sel ... 15
2.4 Anatomi Payudara ... 16
2.5 Stadium 0 (Karsinoma in situ) ... 19
2.6 Stadium IA dam IB kanker payudara ... 20
2.7 Stadium IIA dan IIB kanker payudara ... 20
2.8 Stadium IIIA, IIIB, dan IIIC kanker payudara ... 21
2.9 Stadium IV kanker payudara ... 22
2.10 Struktur Kimia Doxorubicin ... 28
2.11 Sel T47D ... 30
3.1. Skema Kerangka Konseptual ... 33
4.1 Skema Kerangka Operasional ... 39
4.2 Perhitungan Sel ... 43
5.1 Kurva hubungan antara konsentrasi fraksi n-heksan akar Jatropha gossypifolia L. dan Doxorubicin terhadap % viabilitas sel hidup T47D dan Vero... 52
xvi
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran Halaman
1. Daftar Riwayat Hidup ... 69
2. Surat Pernyataan... 70
3. Surat Determinasi Tanaman ... 71
4. Sertifikat Kultur Sel ... 72
5. Proses Ekstraksi pembuatan Fraksi n-heksana Akar Jarak Merah ... 73
6. Hasil Identifikasi KLT golongan senyawa Ekstrak n-Heksan Akar Jatropha gossypifolia L. ... 74
7. Perhitungan Konsentrasi Fraksi n-Heksan Akar Jatropha gossypifolia L. dan Doxorubicin ... 76
8. Data Hasil Pembacaan ELISA reader. ... 78
9. Perhitungan Sitotoksisitas Fraksi n-Heksan Akar Jatropha gossypifolia L. dan Doxorubicin Terhadap Sel T47D dan Sel Vero ... 79
10. Analisis Probit Fraksi n-Heksan Akar Jatropha gossypifolia L. dan Doxorubicin Terhadap Sel T47D dan Sel Vero ... 81
11. Gambar Kondisi Sel Setelah Penambahan Larutan Uji dan Reagen MTT ... 85
12. Dokumentasi Penelitian ... 88
xvii
DAFTAR SINGKATAN
ACS = American Cancer Society
ATCC = American Type Culture Collection Bcl-2 = B cell lymphoma-2
BRCA = Breast Cancer Susceptibility Gene BSLT = Brine Shrimp Lethality Test
C = Celcius
CCRC = Cancer Chemoprevention Research Center CMV = Cytomegalovirus
CO2 = Karbon Dioksida
Depkes RI = Departemen Kesehatan Republik indonesia DES = Diethilstilbestrol
Ditjen POM = Direktorat Jenderal Pengawasan Obat dan Makanan DMEM = Dulbecco’s Modified Eagle Medium
DMSO = Dimethyl Sulfoxide DNA = Deoxyribose Nucleic Acid EBV = Epstein-Barr
EDTA = Ethylene Diamine Tetra Acid
ELISA = Enzyme-linked Immunosorbent Assay ER-α = Estrogen Receptor Alpha
ER-β = Estrogen Receptor Beta
Fraksi HJG = Fraksi n-heksan akar Jatropha gossypifolia L.
FBS = Fetal Bovine Serum FeCl3 = Besi (III) Klorida
HCl = Asam Klorida
HeLa = Henrietta Lacks
HIV = Human Immuno Deficiency Virus HL-60 = Human Promyeleocytic Leukimia Cells HPLC = Kromatografi Cair Kinerja Tinggi HPTLC = Kromatografi Lapis Tipis Kinerja Tinggi HPV = Human Papilloma Virus
xviii IC50 = Inhibitory Concentration 50 KLT = Kromatografi Lapis Tipis KOH = Kalium Hidroksida LAF = Laminar Air Flow LC50 = Lethal Dose 50
MCF-7 = Michigan Cancer Foundation – 7 MTT = Microculture Tetrazolium Salt NCI = National Cancer Institute NaOH = Natrium Hidroksida NaHCO3 = Natrium Bicarbonat RNA = Ribonucleaic Acid
RPMI = Rosewall Park Memorial Institute SDS = Sodium Dedosil Sulfat
T47D = Human Ductal Breast Ephitelial YKI = Yayasan Kanker Indonesia
60
DAFTAR PUSTAKA
Adams T, Anwar R, M. farej M, Rundatz T, Coyle M, Jacqueline S, Mclaughlin.
2015 Nutritional Stress of Cultured Vero Cells Causes Altered Growth and Morphology as Seen in Neoplastic Transformation.: American Journal of Undergraduate Research.
Aiyelaagbe, O., Hamid, A., Fattorusso, E., Taglialatela-Scafati, O., Heinz, C., Muller., W. 2011. Cytotoxic Activity of Crude Extracts as well as of Pure Components from Jatropha Species, Plants Used Extensively in African Traditional Medicine. Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine. Volume 2011, Article ID 134954, page 7.
Aka J.A., Lin S.X. 2012. Comparison of Functional Proteomic Analyses of Human Breast Cancer Cell Line T47D and MCF-7.
American Cancer Society (ACS), 2015. Breast Cancer Facts & Figures 2015- 2016. Atlanta: American Cancer Society, Inc. Available from: http://
www.cancer.org/acs/groups/content/documents/document/acspc030975.p df. Diakses pada tanggal 15 November 2016.
Ammerman, Nicole C., Beier-Sexton, Magda, Azad, Abdu F., 2008. Growth and Maintenance of Vero Cell Lines. Curr Protoc Microbiol, pp 1-10.
Anita, Randall, 2009. Bellyache bush (Jatropha gossypiifolia) management manual. Weed Scientist, The State of Queensland, Department of Employment, Economic Development and Innovation.
Arininggar, A. M., 2008. Uji Aktivitas Ovisidal Terhadap Telur Ascaris suum dan Penentuan Parameter Standar Ekstrak Etanol Daun Pare (Momordica charantia L.). Jember: Skripsi Program Studi Farmasi Universitas Jember.
Armini, E., Nabiuni, M., Bahrara, J., Parivar, K., Asili, J., 2014. Hemolytic and cytotoxic effects of saponin like compounds isolated from Persian Gulf brittle star (Ophiocoma erinaceus). Journal of Coastal Life Medicine 2014; 2(8): 614-620.
Aryati, 2004. ISOLASI SENYAWA ANTIKANKER DARI TANAMAN KELADI TIKUS (Typhonium divaricatum L. Decne). Pusat Penelitian dan Pengembangan Teknologi Isotop dan Radiasi, BATAN. Page 188-190.
ATCC, 2008, Cell Biology, ATCC® Number: HTB-133TM, Designations:
T47D,http://www.atcc.org/ATCCAdvancedSearch/ProductDetails/tabid/4 52/Default.aspx?ATCCNum=HTB-133&Template=cellBiology,Diakses tanggal 30 desember 2016.
61
Azmi AS, Bhat SH, Hanif S, Hadi SM. 2006., Plant polyphenols mobilize endogenous copper in human peripheral lymphocytes leading to oxidative DNA breakage: A putative mechanism for anticancer Properties. FEBS Letters.; 580:533–538.
Balitbang Kemenkes RI. 2013. Riset Kesehatan Dasar; RISKESDAS. Jakarta:
Balitbang Kemenkes RI. pages 85-87. http://www.depkes.go.id/ Diakses tanggal 24 September 2016.
Balmer, C.M., Valley, A.W., and lannucci, A., 2005. Cancer Treatment and Chemotherapy. In : Dipiro, J. T., Talbert, R. L., Yee, G. C., Matzke, G. R., Wells, B. G., and Posey, L. M., , Pharmacotherapy ; A Pathophysiologic Approach, 6th Edition, New York : The McGraw-Hill Co., Inc.
Baud G.S., Sangi M.S., Koleangan H.S.J., 2014. Analisis Senyawa Metabolit Sekunder dan Uji Toksisitas Ekstrak Etanol Batang Tanaman Patah Tulang (Euphorbia tirucalli L.) dengan Metode Brine Shrimp Lethality Test (BLST) . Jurnal Ilmiah Sains Vol. 14 No. 2, Program Studi Kimia FMIPA UNSRAT, Manado.
Biolabss,C., 2011.San Diego : T47D/GFP Cell line. http://www.cellbiolabs.com.
Diakses tanggal 23 Desember 2016
Bishaayee A., Thoppil R.J. 2011 Terpenoids as Potential Chemopreventive and Therapeutic agents in Liver Cancer. Baishideng : World Journal Of Hepatology.
Boik, John.,2001. Natural coumpound In Cancer therapy, Avenue North:
Oregon Medical pree, LCC. Hal 16-17.
CCRC, 2014. Kanker Mammae. http://ccrc.farmasi.ugm.ac.id/?page_id=885 Diakses pada tanggal 9 September 2016.
CCRC, 2014. Sel T47D. http://ccrc.farmasi.ugm.ac.id/?page_id=885 Diakses pada tanggal 9 September 2016.
CCRC, 2009. Prosedur Tetap Uji Sitotoksik Metode MTT. Yogyakarta:
Fakultas Farmasi, UGM.
Childs, A.C., Phaneuf, S.L., Dirks, A.J., Phillips, T., and Leeuwenburgh, 2002.
Doxorubicin Treatment in Vivo Causes Cytochrome c Release and Cardiomyocyte Apoptosis, As Well As Increased Mitochondrial Efficiency, Superoxide Dismutase Activity, and Bcl-2:Bax Ratio.
University of Florida, Biochemistry of Aging Laboratory, College of Health and Human Performance, Gainesville, Florida. CANCER RESEARCH 62, 4592–4598.
62
Chrestella, J., 2009. Neoplasma, Departemen Patologi Anatomi Fakultas
Kedokteran Universitas Sumatera Utara,
http://repository.usu.ac.id/bitstream/123456789.2053/1/10E00541.pdf.
Diakses tanggal 20 Desember 2016.
Corwin, Elizabeth, J. 2008. Buku Saku Patofisiologi. Jakarta. EGC.
Dalimartha, Setiawan. 2004. Deteksi Dini Kanker & Simplisia Antikanker.
Jakarta : Penebar Swadaya Jakarta.
Dalimartha, S. 2006. Atlas Tumbuhan Obat Indonesia Jilid 4. Puspa Swara, Anggota IKAPI. Jakarta.
De Jong, Wim. 2004. Kanker, Apa itu ? pengobatan , Harapan Hidup dan Dukungan Keluarga. Cetakan I. Jakarta : Arcan. Hal : 45, 317.
Departemen Kesehatan Republik Indonesia (2000). Parameter Standart Ekstrak Tumbuhan Obat, Cetakan Pertama, Direktorat Jendral Pengawasan Mutu Obat dan Makanan, Jakarta.
Diananda, Rahma, 2007. Mengenal Seluk Beluk Kanker. Cetakan I. Yogyakarta:
Katahati
Ditjen POM. 1986. “Sediaan Galenik”, Departemen Kesehatan Republik Indonesia, Jakarta.
Dipiro, J.T., Talbert, R.L., Yee, G.C., Matzke G.R., Wells, B.G., and Posey, L,M., 2008. Pharmacotherapy A Pathofisiologic Approach, 7th Edition, New York : The McGraw-Hill Co., Inc.
Dipiro, J.T., Talbert, R.L., Yee, G.C., Matzke G.R., Wells, B.G., and Posey, L,M., 2011. Pharmacotherapy A Pathofisiologic Approach, 8th Edition, New York : The McGraw-Hill Co., Inc.
Ernawati, Fina,2010. Uji Sitotoksik Isolat Aktif dari Ekstrak Kloroform Rumput Mutiara (Hedyotis corymbosa (L.) Lamk) Terhadap Sel Hela dan Siha.
Surakarta : Skirpsi Program Studi Biologi Fakultas Matematika Dan Ilmu Pengetahuan Alam.
Falodun,A., Sheng-Xiang,Q., Parkinson,G., and S. Gibbons,2012. “Isolation and characterization of a new anticancer diterpenoid from Jatropha gossypifolia,” Pharmaceutical Chemistry Journal, vol. 45, no. 10, pp.
636–639 .
Febriansah, R., Bintang, D., Hardika Dwi, S., Prabaningrum, D., Hadi, D.B., Oktafiyani, N., 2012. Kajian secara In Vitro Ekstrak Etanolik Buah Morinda citrifolia L. sebagai Agen Khemopreventif Kanker Payudara yang Potensial. Mutiara Medika Vol. 12 No. 3: 155-162.
63
Felix-Silva.J,, Giodani Brandt R. 2014. Jatropha gossypifolia L.
(Euphorbiaceae) : A review of Tradisional Use, Phytochemistry, Pharmacology, and Toxicology of This Medicinal Plant. 2-5.
Fessenden, R.J., dan Fessenden, J., 1997. Dasar-dasar Kimia Organik. Alloysius Hadyana Pudjaatmaka (Penerjemah). Jakarta : Bina Aksara.
Freshney, R.I., 1987, Culture of Animal Cells: A Manual of Basic Technique, Fourth Ed. A John Wiley and Sons, Inc. Publication, New York, USA.
Gamse T. 2002. Liquid-Liquid Extraction and Solid-Liquid Extraction. Graz University of Technology
Ganiswara S.G., 2007. Farmakologi dan Terapi Edisi 5 (Cetak ulang dengan tambahan, 2012). Jakarta: Departemen Farmakologi dan Teraupetik Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia.
Han, X., Pan, J., Ren, D., Cheng, Y., Fan, P., and Lou, H., 2008, Naringenin-7-O- glucoside protects against doxorubicin-induced toxicity in H9c2 cardiomyocytes by induction of endogenous antioxidant enzymes, Food and Chemical Toxicology, 46:3140-3146.
Hanahan D., Weinberg R.A. 2000. The hallmarks of cancer. Cell. Departement of Biochemistry and Biophysic and Hormone Research Institute. 100: 57–
70.
Harbone, J.B. 1987. Metode Fitokimia, Penentuan Cara Modern Menganalisa Tumbuhan. Bandung: Institute Teknologi Bandung.
Hattenschwiller, S dan Vitousek, P. M. 2000. The role of polyphenols interrestrial ecosystem nutrient cycling. Review PII: S0169- 5347(00)01861-9 TREE vol. 15, no. 6 June 2000
Herbert. R.B, 1995, Biosintesis Metabolit Sekunder, Edisi ke-2, cetakan ke-1.
Terjemahan Bambang Srigandono, IKIP Press Semarang.
Hussaana, A., Chodidjah, Sismindari dan Sudjadi, 2010. Mekanisme In Vitro Induksi Apoptosis dari RIP (Ribosome-Inactivating Protein) Daun Bunga Pukul Empat (Mirabilis jalapa L). Bagian Farmakologi Fakultas Kedokteran Universitas Islam Sultan Agung (UNISSULA). Vol. 2, No. 1, Januari - Juni 2010.
Jain, S., Choudhary, G. P., & Jain, D. K., 2013. Pharmacological Evaluation and Antifertility of Jatropha gossypifolia in Rats, BioMed Research International, 10, 1-5.
64
Kinho, J., Irawati, D., Arini, D., Supratman Tabba, Harwiyadin Kama,Yermias Kafiar, Syamsir Shabri dan Moody C.Karundeng., 2011. Tumbuhan Obat Tradisional di Sulawesi Utara Jilid I. Balai Penelitian Kehutanan Manado Badan Penelitian dan Pengembangan Kehutanan Kementrian Kehutanan.
Kartawiguna, Elna., 2001. Faktor-faktor yang Berperan Pada Karsinogenesis.
Jakarta: Jurusan Kedokteran Universitas Trisakti.
Kintzios,S.E Barberaki,M.G., 2004 Plants and Cancer in Plants that Fight Cancer. Editor : Spiridon E. Kinzios dan Maria G Barberaki. Florida, AS:
CRC press LCC.
Kristanti, A.N, Aminah, N.S, Tanjung, M dan Kurniadi, B., 2008. Buku Ajar Fitokimia. Surabaya : Airlangga University Press.
Kumar S, Pathania AS, Saxena AK, Vishwakarma RA, Ali A, Bhunshan S. 2013.
The anticancer potential of flavonoids isolated from the stem bark of Erythrina suberosa through induction of apoptosis and inhibition of STAT signalling pathway in human leukaemia HL-60 cells. Chemico-Biological Interactions.
Levy S., Arkene and Carley, Shanna-kay, 2012. Cytotoxic Activity of Hexane Extracts of Psidium Guajava L. (Myrtaceae) and Cassia Alata L.
(Caesalpineaceae) in Kasumi-1 and OV2008 Cancer Cell Lines. Tropical Journal of Pharmaceutical Research April 2012; 11 (2): 201-207.
Mukhriani. 2014. Ekstraksi, Pemisahan Senyawa, dan Identifikasi Senyawa Aktif. Program Studi Farmasi Fakultas Ilmu Kesehatan UIN Alauddin Makassar.
Muti, Annisa Farida, 2010. Uji Aktivitas Antikanker Ekstrak Etanol Rimpang Kunyit (Curcuma domestica Val.) Terhadap Kanker Kolon Mencit yang Diinduksi DMBA, Skripsi Fakultas Farmasi Universitas Airlangga.
Nathanael, J., 2015. Uji Aktivitas Sitotoksik Ekstrak Kulit Jeruk Purut (Citrus Hystrix) Pada Sel Hela Cervical Cancer Cell Line. Yogyakarta: Skripsi Fakultas Teknobiologi Universitas Atma Jaya Yogyakarta.
National Cancer Institute (NCI), 2016. Cancer Treatment.
http://www.cancer.gov/cancertopics/treatment.html Diakses tanggal 28 Desember 2016.
National Cancer Institute (NCI), 2016. Rick Factor Cancer.
https://www.cancer.gov/about-cancer/causes-prevention/risk.html Diakses tanggal 28 Desember 2016.
65
National Cancer Institute (NCI), 2016. Stages of Breast Cancer. U.S. Department of Health and Human Services. http://www.cancer.gov/types/breast/
patient/breast-treatment-pdq. Diakses tanggal 26 Desember 2016.
Nugroho A.E., Ikawati M., Putri D.D.P., Meiyanto E., 2011. Cytotoxic Effect of Ethanolic Extract Fraction of Indonesia Plant Ficus septic Burm. F. on Human Breast Cancer T47D cell lines. International Journal of Phytomedicine No:3 page 216-226.
Nurcahyo, Jalu. 2010. Awas Bahaya Kanker Rahim dan kanker payudara.
Yogyakarta: wahana Totalita Publisher.
Nur Fadlila, W., Yuliawati, K.M., Syafnir, L., 2015. Identifikasi Senyawa Aktif Antibakteri dengan Metode Bioautografi KLT terhadap Ekstrak Etanol Tangkai Daun Talas (Colocasia Esculenta (L.) Schott). Prosiding Penelitian Sivitas Akademika Unisba (Kesehatan dan Farmasi), ISSN 2460-6472. Hal 583-590.
Nurwidayati A., Veridiana N.N., Yudith L., 2014. Efektivitas Ekstrak Biji Jarak Merah (Jatropha gossypifolia), Jarak Pagar (Jatropha curcas) Dan Jarak Kastor (Riccinus communis) Famili Euphorbiaceae Terhadap Hospes Perantara Schistosomiasis, Keong (Oncomelania hupensis lindosensis). BALABA, Vol 10 No. 01: 9-14.
Ogundare, A.O. 2007. Trends In Applied Sciences Research, 2(2), 145-150.
Oliveira, A.P., Colaco,A., Raquel, C., Luis,P.G.H.,Cruz, D., Lopes, C., 2007.
Chemical carcinogenesis., Annals of the Brazilian Academy of Sciences.
Panda, B.B, et al., 2009 Anti-Inflammatory and Analgesic Activity of Jatropha gossypifolia in Experimental Animal Models. Global Journal of Pharmacology 3 (1): 01-05, 2009. ISSN 1992-0075. © IDOSI Publications, 2009.
Prapti, Utami., 2008. buku pintar Tanaman Obat. Agromedia Redaksi, Jakarta Selatan: PT Agromedia Pustaka.
Pollack J.R., Minna D.J., Gazdar A.F., Wang P., Boussard T.H., Kwei K.A., Gandhi J., Girard L., Choi Y.L., Bocanegra M., Salari K., Kao J. 2009. Molecular Profilling of Breast Cancer Cell Lines Defines Relevant Tumor Models and Provides a Resource for Cancer Gene Discovery
Pubchem, 2016. Doxorubicin., Diakses melalui https:// pubchem .ncbi.
nlm.nih.gov/compound/443939#section=Top. Diakses pada tanggal 22 Desember 2016.
Rahmaniyah, Miatin. 2016. Uji Aktivitas Antifungi Fraksi N-Heksana Akar Jarak Merah (Jatropha gossypifolia L.) terhadap Pertumbuhan Jamur Candida
66
albicans dengan Metode Difusi Cakram. Malang : Skripsi Program Studi Farmasi Fakultas Ilmu Kesehatan Universitas Muhammadiyah Malang.
Rai, Krati, Tiwari, Dr. Ela ,2012. Epidermal Studies in Identification of Jatropha Species. IOSR Journal of Pharmacy and Biological Science (IOSRJPBS). Vol. , Issue 5, pp 41-51.
Ridha, Asfiatun D., 2016. PENGARUH GETAH JARAK PAGAR (Jatropha Curcas L) TERHADAP PENYEMBUHAN LUKA PADA TIKUS (Rattus norvegcus) STRAIN WISTAR (In Vivo). PUBLIKASI ILMIAH: Pogram Studi Kedokteran Gigi Fakultas Kedokteran Gigi Universitas Muhammadiyah Surakarta.
Robinson, T., 1995, Kandungan Organik Tumbuhan Tinggi, Edisi VI, Hal 191- 216, Diterjemahkan oleh Kosasih Padmawinata, ITB, Bandung.
Rozalina,I.A.,2015. Uji Sitotoksisitas Ekstrak Etanol Akar Jarak Merah (Jatropha gossypifolia L.) terhadap Sel Kanker Payudara MCF-7 dengan Metode MTT Assay. Malang : Skripsi Program Studi Farmasi Fakultas Ilmu Kesehatan Universitas Muhammadiyah Malang
RS.Kanker Dharmais, 2013. Infodatin. Pusat Data dan Informasi Kementrian Kesehatan RI 2015. Stop Kanker. Jakarta Selatan.
Ruddon, R.W. 2007. Cancer Biology. Edisi Keempat. Michigan: Oxford University Press. Halaman 4-5, 12.
Sabandar, C.W., Ahmat, N., Jaafar, F.M., Sahidin, I., 2013. Medicinal property, phytochemistry and pharmacology of several Jatropha species (Euphorbiaceae): A review. Phytochemistry 85 (2013) 7–29.
Singla, R., Negi, A., Singh, V., 2014. Review Article: Indole Based Alkaloid in Cancer: An Overview. PHARMATUTOR (Pharmacy Infopedia) ISSN:
2347-7881 Vol. 2, Issue 1 Paper 9.
Speth, P.A.J., Van Hoesel Q.G.C.M., and Haanen, C., 1998. Clinical Pharmakokinetics of Doxorubicin . Departments of Medical Oncology and Hematology, University Hospital, Nijmegen,The Netherlands. Clinical Pharmakokinetics 15 : 15-31.
Stanitski, conrad L. 2003. Chemestry in Context. New York: Mc Graw-Hill.
Sukardiman, Ekasari, W., & Hapsari, P.P. 2006. Aktivitas Antikanker dan Induksi Apoptosis Fraksi Kloroform Daun Pepaya (Carica papaya L.) terhadap Kultur sel Kanker Myeloma. Media Kedokteran Hewan . vol. 22., No. 2
67
Sukardja, IDG., 2000. Onkologi klinik 2nd ed. Surabaya: Airlangga University Press, 90-150.
Sumardjo, Damin, 2008 Pengantar kimia: Buku panduan kuliah mahasiswa kedokteran dan program strata 1 fakultas bioeksakta. Jakarta: Penerbit Buku Kedokteran EGC.
Sumarlin, L.O., Muawanah, A., Wardhani, P., Masitoh, Aktivitas Antikanker dan Antioksidan Madu di Pasaran Lokal Indonesia. Jurnal Ilmu Pertanian Indonesia (JIPI), Desember 2014. ISSN 0853 – 4217. Vol. 19 (3): 136 144.
Suswondo dan Soekardjo, B. 2000. Kimia Medisinal. Edisi ke-2. Surabaya:
Airlangga University Press.
Talib, Wamidh H. and Mahasneh, Adel M., 2010. Antiproliferative Activity of Plant Extracts Used Against Cancer in Traditional Medicine. Sientia Pharmaceutica. Sci Pharm 2010; 78;33-45.
Tjay, T. H., dan Rahardja, K., 2007, Obat-Obat Penting ; Kasiat, Penggunaan, dan Efek-Efek Sampingnya, Edisi Keenam, Cetakan Pertama, PT. Elex Media Komputindo, Jakarta, 225.
Verma, S.P., Goldin, B.R., and Lin, P.S., 1998, The Inhibition of the Estrogenic Effects of Pesticides dan Enviromental Chemicals by Curcumin and Isoflavonoids, Envir. Health Presp, 106 (12), 807-812.
WHO, 2012. Cancer mortality and morbility. Global Health Observatory, http://www.who.int/gho/ncd/mortalitymorbility/cancer_text/en/indext.html diakses tanggal 26 September 2016.
Winarno, Eko. 2011. Uji Sitotoksisitas Ekstrak Kapang Aspergillus sp.
Terhadap Sel Kanker Payudara T47D. Depok: Skripsi Program Sarjana Universitas Indonesia.
Wahyuni S.F., Firnando. E., Husni. E., 2013. Kajian Efek Sitotoksik Hasil Fraksinasi Ekstrak Etanol Kulit Buah Asam Kandis (Garcinia cowa Roxb.) Terhadap Sel Kanker Payudara T47D dengan Metode Microtetrazolium (MTT). Prosiding Seminar Nasional Perkembangan Terkini Sains Farmasi dan Klinik III 2013, ISSN: 2339-2592. Hal. 79-81.
Winstanley, John. 2009. Advanced breast cancer: diagnosis and treatment.
Developed for NICE by the National Collaborating Centre for Cancer.
Cardiff. Wales.
Witantri, Galuh.,A, Ruspendi, Ayu.,C. dan Saputro, Setyo. 2015.
Keanekaragaman pohon berpotensi obat antikanker di kawasan Kampus Kentingan Universitas Sebelas Maret, Surakarta, Jawa
68
Tengah. PROS SEM NAS MASY BIODIV INDON. Volume 1, Nomor 3, Juni 2015 ISSN: 2407-8050 Halaman: 477-483.
Yayasan Kanker Indonesia (YKI). 2016. Tentang Kanker. Yayasan Kanker Indonesia,http://yayasankankerindonesia.org/tentang-kanker/#a01/.Diakses tanggal 30 September 2016
Zampieri, L., Bianchi, P., Ruff, P., dan Arbuthnot, P., 2002, Differential Modulation by Estradiol of P-glycoprotein Drug Resistance Protein Expression in Cultured MCF7 and T47D Breast Cancer Cells, Anticancer Res., 22 (4): 2253-9.
