UJI SITOTOKSIK FRAKSI SEMIPOLAR EKSTRAK ASETON
KULIT BATANG SUKUN (
Artocarpus communis
)
TERHADAP SEL MYELOMA
SKRIPSI
Oleh:
INAYAH
K. 100 030 048
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA
SURAKARTA
UJI SITOTOKSIK FRAKSI SEMIPOLAR EKSTRAK ASETON
KULIT BATANG SUKUN (
Artocarpus communis
)
TERHADAP SEL MYELOMA
SKRIPSI
Diajukan untuk Memenuhi Salah Satu Syarat Mencapai Derajat Sarjana Farmasi (S. Farm)
Program Studi Ilmu Farmasi Pada Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta
Surakarta
OLEH : INAYAH K 100 030 048
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA
SURAKARTA
HALAMAN PENGESAHAN
Berjudul :
UJI SITOTOKSIK FRAKSI SEMIPOLAR EKSTRAK ASETON
KULIT BATANG SUKUN (
Artocarpus communis
)
TERHADAP SEL MYELOMA
OLEH : INAYAH K 100 030 048
Dipertahankan dihadapan Panitia Penguji Skripsi Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta
Pada tanggal : 4 Juni 2007 Mengetahui
Fakultas Farmasi
Universitas Muhammadiyah Surakarta Dekan,
Dra. Nurul Mutmainah, M.Si., Apt.
Pembimbing Utama Pembimbing Pendamping
Drs. Haryoto, M. Sc Maryati, M.Si., Apt.
Penguji :
1. dr. EM. Sutrisna, M. Kes 1. ……….
2. Wahyu Utami, M. Si, Apt 2. ……….
3. Drs. Haryoto S., M. Sc 3. ……….
DEKLARASI
Dengan ini saya menyatakan bahwa dalam skripsi ini tidak terdapat karya
yang pernah diajukan untuk memperoleh gelar kesarjanaan di suatu Perguruan
Tinggi, dan sepanjang pengetahuan saya tidak terdapat karya atau pendapat yang
pernah tertulis atau diterbitkan oleh orang lain, kecuali yang secara tertulis diacu
dalam naskah ini dan disebutkan dalam daftar pustaka.
Surakarta, Juli 2007
Peneliti
KATA PENGANTAR
Assalamu’alaikum Wr. Wb.
Puji syukur kehadirat Allah SWT, yang senantiasa melimpahkan rahmat,
taufik, dan hidayah-Nya sehingga penulis dapat menyelesaikan penyusunan
skripsi yang berjudul “Uji Aktivitas Sitotoksik Fraksi Semipolar Ekstrak Aseton Kulit Batang Sukun (Artocarpus communis) terhadap Sel Myeloma”. Skripsi ini diajukan untuk memenuhi salah satu syarat mencapai Derajat Sarjana
Farmasi pada Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta.
Penulis menyadari bahwa dalam penyusunan skripsi ini telah banyak
mendapat bantuan dari berbagai pihak, oleh karena itu pada kesempatan ini
penulis mengucapkan terimakasih kepada :
1. Bapak Drs. Haryoto, M.Sc dan Ibu Maryati, M.Si, Apt., selaku Dosen
pembimbing utama dan Dosen pembimbing pendamping yang telah
memberikan banyak bimbingan dan saran selama penelitian dan dalam
penyusunan skripsi ini.
2. Ibu Nurul Muthmainah, M. Si, Apt. selaku Dekan Fakultas Farmasi
Universitas Muhammadiyah Surakarta.
3. Bapak dr. E.M. Sutrisna, M. Kes. selaku dosen penguji ujian tertutup, dan Ibu
Wahyu Utami, M. Si, Apt. selaku dosen penguji ujian tertutup dan terbuka,
terimakasih atas koreksinya.
4. Ibu Rima Munawaroh, S. Si, Apt. selaku dosen penguji ujian terbuka,
5. Abah dan Mama yang selalu memberikan doa dan kasih sayangnya.
6. Suamiku Hassan yang telah sabar dan setia menemaniku serta memberi
semangat dalam mengerjakan skripsi.
7. Adikku Syafiq dan Arif terima kasih atas kasih sayangnya.
8. Temanku satu kelompok, Yuni, Iphe, Erna Fani, terima kasih atas kerja
samanya.
9. Teman-teman seangkatanku ’03, kelas B khususnya Ambar maniest, Umnie,
Nana, Aniek, Andien, Uswa, Novie, Bang Napi, Erico, dan semua
teman-temanku yang tidak cukup bila disebutkan, terima kasih atas kebersamaan kita.
10. Pak Tony dan Mas Bayu, terima kasih atas bantuannya selama penelitian.
Serta semua pihak yang tidak dapat penulis sebutkan satu persatu yang telah
membantu, baik secara langsung maupun tidak langsung dalam penyusunan
skripsi ini.
Akhir kata penulis berharap semoga skripsi ini dapat bermanfaat bagi
pembaca.
Wassalamu’alaikum Wr. Wb.
Surakarta, Mei 2007
DAFTAR ISI
BAB I. PENDAHULUAN ... 1
A. Latar Belakang Masalah ... 1
B. Perumusan Masalah ... 2
C. Tujuan Penelitian... 2
D. Tinjauan Pustaka ... 3
1. Skrining Aktivitas Tanaman Obat Indonesia ... 3
a. Ekstraksi ... 3
b. Kromatografi ... 4
2. Kanker ... 8
a. Karakteristik Sel Kanker ... 8
b. Siklus Sel Kanker... 9
c. Karsinogen, Karsinogenesis ... 10
d. Penanganan kanker ... 12
3. Sel Myeloma... 16
4. Uji Sitotoksik... 19
E. Landasan Teori... 20
F. Hipotesis ... 20
BAB II. METODE PENELITIAN... 21
A. Kategori Penelitian ... 21
B. Bahan dan Alat ... 21
C. Jalannya Penelitian ... 23
D. Cara Analisis ... 30
BAB III. HASIL DAN PEMBAHASAN... 31
A. Determinasi Tanaman... 31
B. Ekstraksi dan Fraksinasi ... 31
C. Uji Sitotoksik ... 35
BAB IV. KESIMPULAN DAN SARAN ... 41
DAFTAR PUSTAKA
DAFTAR GAMBAR
Gambar 1. Fase Sel Kanker ... 10
Gambar 2. Skema Fraksinasi Ekstrak Aseton Kulit Batang Sukun... 26
Gambar 3. Skema Uji Sitotoksik terhadap Sel Myeloma ... 29
Gambar 4. Kromatogram KCV I ... 34
Gambar 5. Kromatogram KCV II ... 34
Gambar 6. Kromatogram Gabungan KCV I dan II ... 35
Gambar 7. Sel Myeloma ... 37
Gambar 8. 3HUODNXDQ )UDNVL 6HPLSRODU JP/ WHUKDGDS 6HO Myeloma ... 37
Gambar 9. Perlakuan DMSO 0,125% terhadap sel Myeloma... 37
Gambar 10. Grafik % Kehidupan Myeloma akibat perlakuan 4 seri konsentrasi fraksi semipolar Ekstrak Aseton kulit batang Artocarpus communis... 39
DAFTAR TABEL
Tabel 1. Penggunaan Eluen pada KCV... 25
Tabel 2. Pengelompokan Fraksi Hasil KCV ... 34
Tabel 3. Pengelompokan Fraksi KCV I dan II ... 35
Tabel 4. Perlakuan DMSO terhadap Sel Myeloma... 37
Tabel 5. Absorbansi Akibat Perlakuan Fraksi Semipolar Ekstrak Aseton Kulit Batang Sukun terhadap Sel Myeloma ... 38
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1. Perhitungan Kepadatan Sel Myeloma ... 45
Lampiran 2. Perhitungan Seri Konsentrasi Stock Fraksi Semipolar Ekstrak
Aseton Kulit Batang Sukun (Artocarpus communis) ... 46
Lampiran 3. Perhitungan Konsentrasi sampel dalam Sumuran ... 47
Lampiran 4. Perhitungan Konsentrasi DMSO ... 48
Lampiran 5. Data Uji Sitotoksisitas dengan Metode MTT tabel harga
absorbansi pada uji Sitotoksisitas dengan plate 96 sumuran
menggunakan ELISAreader... 51
Lampiran 6. Data Uji Sitotoksik dengan Metode MTT akibat Perlakuan
Fraksi Semipolar Ekstrak Aseton Kulit Batang Sukun
(Artocarpus communis)... 52
Lampiran 7. Kromatogram KCV I dan II ... 54
Lampiran 8. Surat Keterangan Pengantar Praktikum Sitotoksik di Bagian
Parasitologi FK UGM... 55
Lampiran 9. Surat Keterangan Determinasi di Laboratorium Biologi FKIP
Biologi UMS ... 56
DAFTAR SINGKATAN
1. WHO : World Health Organization
2. IC50 : Inhibitory Concentration 50 %
3. KLT : Kromatografi Lapis Tipis
4. KCV : Kromatografi Cair Vakum
5. DNA : Deoksiribonucleic Acid
6. RNA : Ribonucleic Acid
7. Nd-laser : Neodynum laser
8. YAG-laser : Yittrium Alumunium Gannet laser
9. P32 : Phosphat 32
10. SDS : Sodium Dodecyl Sulfate
11. GF254 : Gel Fluoresense at UV-254
12. RPMI : Rosewell Park Memorial Institute
13. FBS : Fetal Bovine Serum
14. MTT : 3-(4,5-dimethytiazol-2-il), 2,5-diphenyl tetrazolium bromid
15. PBS : Phosphat Buffer Saline
16. ELISA : Enzime Linked Immunosorbent Assay
INTI SARI
Penelitian untuk mendapatkan obat antikanker telah dilakukan besar-besaran, sehingga dewasa ini banyak dikembangkan pencarian dan penelitian bahan bioaktif dari tanaman obat Indonesia yang mempunyai khasiat antikanker yang potensial dan selektif. Kulit batang Sukun (Artocarpus communis) mengandung flavonoid yang menunjukkan sifat sitotoksik kuat terhadap sel murin leukemia P-388 dan beberapa sel kanker lainnya. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui efek sitotoksik dari fraksi semipolar ekstrak aseton kulit batang Sukun (Artocarpus communis) terhadap sel Myeloma.
Ekstraksi senyawa metabolit sekunder dari kulit batang sukun (Artocarpus communis) dilakukan dengan metode maserasi menggunakan pelarut aseton. Selanjutnya ekstrak difraksinasi dengan teknik Kromatografi Cair Vakum menggunakan pelarut yang ditingkatkan kepolarannya yaitun-Heksan : Etil Asetat dengan perbandingan 8:2, 7:3, 6:4, Etil Asetat, dan Metanol, sehingga didapatkan fraksi nonpolar 1, nonpolar 2, semipolar, polar 1, polar 2. Fraksi semipolar diuji sitotoksik terhadap sel myeloma menggunakan MTT assay dengan seri konsentrasi 250 Pg/mL; 125 Pg/mL; 62,5 Pg/mL dan 31,25 Pg/mL. Hasilnya dibaca dengan ELISA reader pada panjang gelombang 550 nm. Dari hasil absorbansi dihitung nilai IC50menggunakan analisis probit.
Dari hasil penelitian, fraksi semipolar ekstrak aseton kulit batang Sukun (Artocarpus communis) mempunyai efek sitotoksik terhadap sel Myeloma dengan IC50sebesar 148,64Pg/mL.
