P-5
Mahasiswa
mampu
menetapkan
kadar
glukosa
dengan
metode
Anthrone
Tujuan Praktikum
Prinsip metode Anthrone
Komponen darah
Prinsip Spektrofotometri
Aplikasi dikehidupan sehari-hari
Mekanisme reaksi
Alat :
Tabung Reaksi 9 buah
Rak tabung reaksi
Pipet ukur 1ml dan 0,2 ml
Labu takar 10 ml
Spektrofotometer UV-Vis
Neraca analitik
Sentrifugator
Baskom
Alat dan Bahan
Bahan :
Asam trikloro Asetat (TCA)
EDTA
Asam Sulfat pekat
Anthrone
Standar glukosa
Sampel darah
Aquadest
Membuat Pereaksi Anthrone 0.1%
Menimbang 100 mg serbuk anthrone
↓
Melarutkan serbuk dengan H
2SO
4hingga volume 10 ml dalam es batu
↓
Mengaduk dengan batang pengaduk
hingga homogen
Cara Kerja
Persiapan Sample
Menyayat ekor tikus dengan pisau ↓
Menampung darah dalam tabung reaksi secukupnya ↓
Meneteskan EDTA dan TCA beberapa tetes ke dalam tabung
↓
Mensentrifuge campuran darah selama 5 menit ↓
Menyiapkan 9 tabung reaksi ↓
Mengambil 1.0 ml ke dalam tabung sebagai larutan blanko
↓
Mengambil 0.1 – 0.5 ml larutan standar glukosa sebagai seri konsentrasi
↓
Mengencerkan larutan standar dengan aquadest hingga volume 1.0 ml dalam labu takar
↓
Mengambil cairan sentrifugasi sebanyak 1.0 ml sebagai sampel (replikasi 3x)
↓
Cara Kerja
Menambahkan 1.0 ml pereaksi anthrone ke dalam seluruh tabung
↓
Mencampurkan dan mendiamkan dalam es dengan T + 00C
↓
Ukur serapan pada λ = 635 nm ↓
Membuat kurva baku dengan menggunakan persamaan regresi linear
↓
Menghitung kadar glukosa dalam darah dan
