VALIDASI METODE DAN PENETAPAN KADAR NATRIUM
DIKLOFENAK DENGAN KCKT SERTA APLIKASINYA
PADA PENETAPAN NATRIUM DIKLOFENAK TABLET
SPESIALITE
DALAM PLASMA DARAH TIKUS WISTAR
JANTAN SECARA
IN VITRO
SKRIPSI
Untuk memenuhi sebagian persyaratan Mencapai Derajat Sarjana S-1
Diajukan Oleh
HERLINDA AYUNINGSIH 0908010075
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH PURWOKERTO PURWOKERTO
1
VALIDASI METODE DAN PENETAPAN KADAR NATRIUM
DIKLOFENAK DENGAN KCKT SERTA APLIKASINYA
PADA PENETAPAN NATRIUM DIKLOFENAK TABLET
SPESIALITE
DALAM PLASMA DARAH TIKUS WISTAR
JANTAN SECARA
IN VITRO
Skripsi
Sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana Farmasi padaProgram Studi Farmasi
HERLINDA AYUNINGSIH 0908010075
FAKULTAS FARMASI
4
HALAMAN PERNYATAAN
Yang bertanda tangan di bawah ini :
Nama : Herlinda Ayuningsih
NIM : 0908010075
Program Studi : Farmasi
Fakultas : Farmasi
Universitas :Universitas Muhammadiyah Purwokerto
Menyatakan dengan sebenar-benarnya bahwa skripsi ini adalah hasil karya saya dan bukan penjiplakan dari hasil karya orang lain.
Demikian pernyataan ini, dan apabila kelak dikemudian hari terbukti ada unsur penjiplakan, maka saya bersedia mempertanggungjawabkan sesuai ketentuan yang berlaku.
Purwokerto, 13 Febuari 2014 Yang menyatakan
DAFTAR RIWAYAT HIDUP
A. IDENTITAS
Nama : Herlinda Ayuningsih
Nim : 0908010075
Tempat Tanggal Lahir : Banjarnegara, 18 Juni 1990
Agama : Islam
Alamat : Karangsalam, RT 04/ II Kec. Susukan 53475
Kabupaten Banjarnegara, Jawa Tengah
B. RIWAYAT PENDIDIKAN
Pendidikan :
1. SDN 02 Karangsalam Tahun 1997-2002
2. SMPN 01 Susukan Tahun 2003-2006
3. SMAN 01 Purworejo Klampok Tahun 2006-2009 4. Program Sarjana S-1 Farmasi Tahun 2009-2014
C. RIWAYAT PEKERJAAN -
D. RIWAYAT KELUARGA
Nama orangtua :
1. Ayah : Alm Paryoto sastro pranoto 2. Ibu : suparti
6
HALAMAN PERSEMBAHAN
Sebuah karya kecil ini penulis persembahkan untuk:
Allah SWT yang telah memberiku rahmat, anugrah, kemudahan dalam
menyelesaikan karya ini.
Almarhum ayah tercinta yang selalu memberiku kekuatan.
Ibunda dan papa tercinta yang senantiasa memberi semangat,
mendoakan kebahagian dan keberhasilanku, beribu rasa terimakasih dan
rasa hormat tak mampu untuk membalas semua yang ibu dan papa
berikan kepadaku.
Kakakku Heris tersayang, yang telah memberikan semangat dan doa
serta dukungan kepadaku.
Adeku Deni cahyaningrum yang selalu ada untuk membuatku tersenyum
karena keceriaanmu.
Sahabat-sahabatku Arini (Nene), Sinta(0c0r), Anggun(aun), Lita,
Maulia, Fuad, Mas Aan, yang selalu ada dan membantuku, memberikan
semangat. Terimakasih sahabat.
MOTTO
“
Jangan jadikan suatu masalah sebagai sebuah alasan untuk berhenti
melakukan sesuatu. Manusia hanya bisa berusaha dan berdoa, namun
hanya
Allah yang menentukan segalanya”.
“
Berjalan dengan tenang, melangkah dengan pasti adalah jalan terbaik
untuk meraih kesuksesan”.
“
Jangan pernah menyerah dengan keadaan, walaupun dihadapan kita
begitu banyak kesulitan, yakinlah kalo kita bisa melewati semua dengan
baik”.
“
Apapun kata yang keluar b
egitu menyakitkan. Dengarkanlah”
ABSTRACT
HERLINDA AYUNINGSIH. Method Validation and Levels Determination of Diclofenac Sodium by HPLC and Its Application to Determination Diclofenac Sodium Tablets Spesialite in Blood Plasma Male Wistar Rats in Vitro.
Under guidance of SUSANTI and ASMIYENTI DJALIASRIN DJALIL
The Background: The use of diclofenac sodium in addressing various problems for all kinds of pain, migraine and gout. Activities by way of inhibiting the enzyme cyclo-oxygenase that inhibited prostaglandin formation (Tjay and Rahardja, 2007). To ensure safety and minimize the side effects of a drug necessary to test the drug analysis in biological fluids (Shargel and Yu, 2005).
The Aim of Research: This research conducted to prove that the high performance liquid chromatography method is very valid to define levels of diclofenac sodium in tablets Spesialite on Wistar rat plasma in vitro.
The Method of Research: Type of research method used is non-experimental, instruments such as HPLC UV detector (273 nm), mobile phase of methanol: acetate buffer pH 4.2 by comparison 70:30, the stationary phase chromatography-octadecyl coloumliquid cylane and a flow rate of 0.7 mL / min. Standard materials used are e merck diclofenac sodium, diclofenac sodium tablets Spesialite and wistar rat blood plasma. Validation of analytical methods include liniearitas, limit of detection, limit of quantitation, precision, accuracy, and conducted determination method diklofenakspesialite sodium in Wistar rat plasma in vitro.
The Result: Linearity test results obtained with the correlation coefficient r count or value = 0.998 (> r table 0.707), limit of detection = 0.2 mg / mL, the limit of quantitation = 0.6 mg / mL, accuracy or precision concentration of 4 mg / mL = 0.57% coefficient of variation (≤ 2%), precision or accuracy for the addition of diclofenac sodium. 7 mg / mL average recovery of 105.4762%, and determination of diclofenac sodium tablets 50 mg Spesialite plasma concentrations obtained with the 3 series range of levels of 51.002 mg / tablet 50.902 mg / tablet or acquired 98.51% percent of - 102%.
Conclusion: Based on the above results it can be concluded that the high performance liquid chromatography method is valid to analyze Spesialite diclofenac sodium levels in the blood plasma of Wistar rats in vitro.
Key words: natrium diklofenak, validation method, high performance liquid chromatography, plasma, in vitro.
10
PRAKATA
Segala puji bagi Allah SWT atas rahmat, petunjuk dan kemudahan yang telah diberikan dalam penyusunan skripsi yang berjudul ”Validasi Metode dan Penetapan Kadar Natrium diklofenak dengan KCKT serta Aplikasinya Pada Penetapan Natrium diklofenak Tablet Spesialite dalam Plasma Darah Tikus Wistar Jantan secara In Vitro.Skripsi ini disusun sebagai salah satu syarat untuk mencapai gelar Sarjana Farmasi di Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Purwokerto.
Penulis sepenuhnya menyadari bahwasannya terselesaikannya skripsi ini tidak terlepas dari bantuan berbagai pihak. Oleh karena itu penulis ingin mengucapkan rasa terimakasih kepada:
1. Bapak Dr. Syamsuhadi Irsyad, S.H.,M.H. selaku Rektor Universitas Muhammadiyah Purwokerto.
2. Dr. Nunuk aries Nurulita, M.Si, Apt selaku Dekan Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Purwokerto.
3. Susanti, M.Phil, Apt (pembimbing I) dan Dr. Asmiyenti D.D, S.Si, M.Si(pembimbing II) yang telah senantiasa memberikan waktu, didikan, arahan, saran dan masukan serta ilmu pengetahuannya dengan penuh kesabaran dan perhatian, sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi ini dengan sebaik-baiknya.
4. Drs. Sabikhis.,Apt dan Anjar Mahardian M,si.,Apt selaku sebagai ketua dan sekretaris penguji pada sidang skripsi yang telah memberikan waktu, arahan, serta saran masukan ilmu pengetahuannya.
5. Seluruh Dosen dan Staf Karyawan Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Purwokerto.
6. Rochmadi Budi Setiyanto dan Dra. Titi Sumarti yang telah membantu dan mendukung penulis sehingga penelitian ini berjalan lancar..
9. Kakakku yang selalu memberikan semangat dan motivasi kepadaku.
10. Teman seperjuanganku Maulia dan Fuad yang selalu berjuang bersama sampai selesainya skripsi ini.
11. Sahabat-sahabatku, terima kasih atas dukungan, kebersamaan dan canda tawa yang kalian berikan selama ini.
12. Kakak angkatan yang telah membantu dan memberikan arahan kepadaku. 13. Teman-teman Farmasi angkatan 2009 terimakasih atas kebersamaan dan
kekeluargaan yang kalian berikan selama ini.
14. Teman-teman cost yang selalu ada dalam suka dukaku dan terimakasih atas kebersamaannya.
15. PT. Phapros yang memberikan bahan baku untuk digunakan dalam penelitian ini.
16. Semua pihak yang telah membantu hingga selesainya skripsi ini.
Dalam penyusunan skripsi ini penulis menyadari masih terdapat banyak kekurangan, untuk itu penulis mohon maaf. Saran dan kritik yang bersifat membangun sangat penulis harapkan demi penyempurnaan skripsi ini. Sebagai kata penutup, penulis berharap semoga penelitian ini dapat memberikan manfaat bagi penulis pada khususnya dan bagi pembaca pada umumnya.
Purwokerto, 13 Februari 2014
Herlinda Ayuningsih
12
C. AnalisisCairan Biologis dalam Darah ... 5
D. Validasi Metode Analisis ... 6
1. Uji Presisi ... 6
2. Uji Liniearitas ... 6
3. Uji Kecermatan ... 6
BAB III METODOLOGI PENELITIAN ... 12
4. Kondisi kromatografi cair kinerja tinggi ... 14
5. Prosedur Pengambilan Plasma ... 14
b. Penetapan kadar tablet na.diklofenak merk ... 17
9. Analisis hasil ... 17
BAB IV HASIL PENELITIAN DAN PEMBAHASAN ... 18
1. Hasil Validasi Penetapan Kadar Na.diklo pada KCKT ... 18
a. Uji Linearitas... 20
b. Uji Presisi ... 26
c. Batas Deteksi dan Batas Kuantitasi ... 30
d. Uji Kecermatan... 31
14
2. Hasil Uji Metode Penetapan Kadar Natrium
diklofenakMerk dalam sediaan Tablet ... 32
a. Hasil Uji Keseragamaan Bobot ... 35
b. Penetapan Kadar Na.diklofenak merk dalam Sediaan Tablet ... 35
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN ... 42
A. Kesimpulan ... 42
B. Saran ... 42
DAFTAR PUSTAKA ... 43
DAFTAR TABEL
Tabel Judul halaman
1. kondisi sistem KCKT ... 15
2. syarat penyimpanan bobot tablet ... 17
3. hasil perhitungan larutan baku ... 21
4. Hasil uji presisi 4 μg ... 27
5. data LOD dan LOQ ... 32
6. Perhitungan perolehan kembali ... 33
16
DAFTAR GAMBAR
Gambar Judul halaman
Gambar 1. Struktur Natrium diklofenak ... 5
Gambar 2. Skema KCKT ... 9
Gambar 3. Kromatogram Kurva Baku ... 23
Gambar 4. Grafik Persamaan Regresi Linear ... 24
Gambar 5. Kromatogram Uji Presisi ... 28
DAFTAR LAMPIRAN
halaman
Lampiran 1. Perhitungan Koefisien Sederhana ... 44
Lampiran 2. Perhitungan LOD dan LOQ ... 45
Lampiran 3. Perhitungan Uji Presisi ... 46
Lampiran 4. Data Kromatogram uji Blanko ... 47
Lampiran 5. Perhitungan Perolehan Kembali ... 50
Lampiran 6. Data Aplikasi keseragaman Bobot ... 52
Lampiran 7. Perhitungan Kadar Natrium diklofenak e merck ... 53
Lampiran 8. Perhitungan SD Penetapan Kadar Na. Diklo ... 57
