EFEK EKSTRAK ETANOL DAUN PUGUH TANOH
(Curanga fel-terrae Merr.) TERHADAP KADAR NITROGEN
MONOOKSIDA PLASMA DARAH TIKUS SEBAGAI
TERAPI PENDAMPING PADA PENGGUNAAN
DOKSORUBISIN
SKRIPSI
OLEH:
FENNIE SJAHRIAL NIM 091501067
PROGRAM STUDI SARJANA FARMASI
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
EFEK EKSTRAK ETANOL DAUN PUGUH TANOH
(Curanga fel-terrae Merr.) TERHADAP KADAR NITROGEN
MONOOKSIDA PLASMA DARAH TIKUS SEBAGAI
TERAPI PENDAMPING PADA PENGGUNAAN
DOKSORUBISIN
SKRIPSI
Diajukan untuk melengkapi salah satu syarat untuk memperoleh Gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi
Universitas Sumatera Utara
OLEH:
FENNIE SJAHRIAL NIM 091501067
PROGRAM STUDI SARJANA FARMASI
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
PENGESAHAN SKRIPSI
EFEK EKSTRAK ETANOL DAUN PUGUH TANOH
(Curanga fel-terrae Merr.) TERHADAP KADAR NITROGEN
MONOOKSIDA PLASMA DARAH TIKUS SEBAGAI
TERAPI PENDAMPING PADA PENGGUNAAN
DOKSORUBISIN
OLEH:FENNIE SJAHRIAL NIM 091501067
Dipertahankan di Hadapan Panitia Penguji Skripsi Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara
Pada Tanggal: 27 Agustus 2013
Pembimbing I, Panitia Penguji,
Pembimbing II,
Prof. Dr. Sumadio Hadisahputra, Apt. NIP 195311281983031002
Prof. Dr. Urip Harahap, Apt. NIP 195301011983031004 Aminah Dalimunthe, S.Si., M.Si., Apt.
NIP 197806032005012004
Poppy Anjelisa Z. Hasibuan, S.Si, M.Si., Apt. NIP 197506102005012003
Drs. Suryadi Achmad, M.S., Apt. NIP 195109081985031002
Aminah Dalimunthe, S.Si., M.Si., Apt. NIP 197806032005012004
KATA PENGANTAR
Puji dan syukur kepada Tuhan Yang Maha Kuasa yang telah
melimpahkan anugerah dan kemurahan-Nya sehingga penulis dapat
menyelesaikan skripsi yang berjudul “Efek ekstrak etanol daun puguh tanoh
(Curanga fel-terrae Merr.) terhadap kadar nitrogen monooksida plasma
darah tikus sebagai terapi pendamping pada penggunaan Doksorubisin”.
Skripsi ini diajukan sebagai salah satu syarat guna memperoleh gelar Sarjana
Farmasi dari Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara.
Pada kesempatan ini penulis hendak menyampaikan rasa hormat dan
terima kasih yang sebesar-besarnya kepada Bapak Prof. Dr. Sumadio
Hadisahputra, Apt., selaku Dekan Fakultas Farmasi Universitas Sumatera
Utara yang telah memberikan fasilitas dan bantuan selama masa pendidikan
dan penelitian, kepada Ibu Aminah Dalimunthe, S.Si., M.Si., Apt., dan Ibu
Poppy Anjelisa Z. Hasibuan, S.Si., M.Si., Apt., selaku dosen pembimbing yang
telah banyak memberikan bimbingan, arahan dan bantuan selama masa
penelitian hingga selesainya penulisan skripsi ini. Penulis juga menyampaikan
ucapan terima kasih kepada Bapak Prof. Dr. Urip Harahap, Apt., Ibu Marianne,
S.Si., M.Si., Apt. dan Bapak Drs. Suryadi Achmad, M.Sc., Apt. selaku dosen
penguji yang telah memberikan masukan dalam penyusunan skripsi ini serta
kepada Ibu Aswita Hafni Lubis, M.Si., Apt., selaku dosen pembimbing
Ucapan terima kasih serta penghargaan yang tulus dan tak terhingga
penulis sampaikan kepada orangtua tersayang Ayahanda Herry Sjahrial dan
Ibunda Nina Tandiono, kakak Lannie Sjahrial dan adik Jovian Sjahrial serta
kakek (Alm.) Herman Sjahrial atas doa dan dukungan baik moril maupun
materiil kepada penulis selama masa perkuliahan hingga selesainya
penyusunan skripsi ini.
Penulis juga mengucapkan terima kasih kepada seluruh staf pengajar,
asisten laboratorium, kakak-kakak, abang-abang dan teman-teman
seperjuangan angkatan 2009 khususnya Masinis 09 dan Farmasi B’09 atas
motivasi dan segala bantuan selama perkuliahan dan penyelesaian skripsi ini.
Semoga Tuhan Yang Maha Kuasa memberikan balasan yang berlipat
ganda kepada semua pihak yang telah membantu dalam penulisan skripsi ini.
Tiada gading yang tak retak, begitu juga halnya dengan skripsi ini. Penulis
menyadari bahwa skripsi ini masih banyak kekurangan. Oleh karena itu,
dengan kerendahan hati, penulis menerima kritik dan saran yang bersifat
membangun dari semua pihak untuk menyempurnakan skripsi ini. Akhir kata
penulis berharap semoga skripsi ini bermanfaat bagi ilmu pengetahuan
khususnya bidang farmasi.
Medan, Agustus 2013
Penulis,
EFEK EKSTRAK ETANOL DAUN PUGUH TANOH
(Curanga fel-terrae Merr.) TERHADAP KADAR NITROGEN
MONOOKSIDA PLASMA DARAH TIKUS SEBAGAI TERAPI PENDAMPING PADA PENGGUNAAN DOKSORUBISIN
ABSTRAK
Doksorubisin adalah agen kemoterapi golongan antrasiklin yang digunakan pada pengobatan kanker, namun penggunaannya terbatas karena menyebabkan kardiotoksisitas yang diduga akibat peningkatan nitrogen monooksida yang diinduksi oleh Doksorubisin. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui efek pemberian ekstrak etanol daun puguh tanoh terhadap kadar NO plasma darah yang diinduksi Doksorubisin.
Penelitian ini meliputi karakterisasi simplisia dan ekstrak, skrining fitokimia simplisia dan ekstrak, pengujian pada hewan, dan pengukuran kadar NO plasma darah hewan. Kadar NO plasma diukur dalam bentuk nitrit dan nitrat menggunakan pereaksi Griess secara spektrofotometri UV-Vis pada panjang gelombang 540 nm. Penelitian ini menggunakan 5 kelompok perlakuan, yaitu kelompok blanko (tanpa perlakuan), kelompok kontrol ( CMC 0,5%), kelompok Doksorubisin, kelompok EEDPT, dan kelompok EEDPT+Doksorubisin.
Hasil pemeriksaan karakteristik simplisia dan ekstrak secara berturut-turut diperoleh kadar air 5,99% dan 18,43%, kadar sari larut air 15,68% dan 59,40%, kadar sari larut etanol 12,38% dan 70,93%, kadar abu total 9,77% dan 7,29% serta kadar abu tidak larut asam 0,72% dan 0,58%. Hasil skrining fitokimia simplisia dan ekstrak menunjukkan adanya senyawa golongan flavonoid, glikosida, saponin dan steroid/triterpenoid. Hasil pengukuran dengan spektrofotometer UV-Vis menunjukkan peningkatan kadar nitrit dan nitrat plasma darah secara signifikan (n = 3, p < 0,05) kelompok yang diinduksi Doksorubisin (kadar nitrit 6,47883 ± 0,46676 μg/ml dan kadar nitrat
6,60247 ± 0,29809 μg/ml) dibandingkan dengan kelompok blanko (kadar nitrit
3,35680 ± 0,19305 μg/ml dan kadar nitrat 3,94413 ± 0,16062 μg/ml). Pemberian ekstrak etanol daun puguh tanoh menunjukkan penurunan kadar nitrit dan nitrat plasma darah yang signifikan (n = 3, p < 0,05) pada kelompok yang diberikan ekstrak etanol daun puguh tanoh+Doksorubisin (kadar nitrit
4,37688 ± 0,05355 μg/ml dan nitrat 4,59327 ± 0,24537 μg/ml) dibandingkan dengan kelompok yang diinduksi dengan Doksorubisin.
Dari hasil penelitian dapat disimpulkan bahwa pemberian ekstrak etanol daun puguh tanoh pada tikus yang diinduksi Doksorubisin dapat menurunkan kadar nitrit dan nitrat plasma darah tikus.
EFFECT OF ETHANOL EXTRACT OF PUGUH TANOH
(Curanga fel-terrae Merr.) LEAVES ON BLOOD NITRIC OXIDE
LEVEL AS ADJUVANT THERAPY IN DOXORUBICIN
ABSTRACT
Doxorubicin is an anthracycline class of chemotherapeutic agents used in cancer treatment, but its use is limited due to its cardiotoxicity that is caused by increased nitric oxide level. This study aimed to determine the effect of ethanol extract of puguh tanoh leaves on blood NO level in Doxorubicin-induced rat.
This research included the characterization of simplex and extract, phytochemical screening of simplex and extract, animal testing, and measurement of blood plasma NO level. Plasma NO level were measured in the form of nitrite and nitrate using the Griess reagent by UV-Vis spectrophotometry at wavelength 540 nm. This study used 5 groups, blank group (without treatment), control group (0.5% CMC), Doxorubicin group, EEDPT group, and EEDPT + Doxorubicin group.
Results of the examination showed characteristic of simplex and extract respectively were water content 5.99% and 18.43%, water-soluble extract 15.68% and 59.40%, ethanol-soluble extract 12.38% and 70.93% , total ash content 9.77% and 7.29% and acid- insoluble ash 0.72% and 0.58%. Phytochemical screening results indicated the presence of flavonoid, glycosides, saponins and steroids / triterpenoids compounds in both simplex and extract. Measurement results by UV-Vis spectrophotometer showed significant increased of blood plasma nitrite and nitrate level (n = 3, p < 0.05) in Doxorubicin-induced group (nitrite level 6.47883 ± 0.46676 μg/ml and nitrate levels 6.60247 ± 0.29809 μg/ml) compared to the blank group (nitrite
level 3.35680 ± 0.19305 μg/ml and nitrate level 3.94413 ± 0.16062 μg/ml).
Ethanol extract of puguh tanoh leaves showed significant decreased of blood plasma nitrite and nitrate level (n = 3, p < 0.05) in group given with ethanol extract of puguh tanoh + Doxorubicin (nitrite level 4.37688 ± 0.05355 μg/ml
and nitrate level 4.59327 ± 0.24537 μg/ml) compared with the group induced
by Doxorubicin.
From the research it can be concluded that ethanol extract of puguh tanoh leaves can decrease blood plasma nitrite and nitrate level in Doxorubicin-induced rats.
DAFTAR ISI
Halaman
JUDUL ... i
HALAMAN JUDUL ... ii
LEMBAR PENGESAHAN ... iii
KATA PENGANTAR ... iv
ABSTRAK ... vi
ABSTRACT ... vii
DAFTAR ISI ... viii
DAFTAR TABEL ... xii
DAFTAR GAMBAR ... xiii
DAFTAR LAMPIRAN ... xiv
BAB I PENDAHULUAN ... 1
1.1 Latar Belakang ... 1
1.2 Perumusan Masalah ... 3
1.3 Hipotesis ... 3
1.4 Tujuan Penelitian ... 4
1.5 Manfaat Penelitian ... 4
1.6 Kerangka Pikir Penelitian ... 5
BAB II TINJAUAN PUSTAKA ... 6
2.1 Uraian Tumbuhan ... 6
2.1.1 Sistematika Tumbuhan ... 6
2.1.3 Nama Asing ... 7
2.1.4 Morfologi Tumbuhan ... 7
2.1.5 Khasiat Tumbuhan ... 7
2.2 Kandungan Kimia ... 8
2.2.1 Flavonoid ... 8
2.2.2 Fenilpropanoid ... 8
2.3 Ekstraksi ... 9
2.4 Doksorubisin ... 11
2.5 Nitrogen Monooksida (NO) ... 13
2.6 Spektrofotometri UV-Vis ... 15
2.7 Pereaksi Griess ... 17
BAB III METODE PENELITIAN ... 18
3.1 Alat-alat ... 18
3.2 Bahan-bahan ... 19
3.3 Prosedur Pembuatan Simplisia ... 19
3.3.1 Pengumpulan Bahan Tumbuhan ... 19
3.3.2 Identiikasi Tumbuhan ... 19
3.3.3 Pembuatan Simplisia ... 20
3.4 Pemeriksaan Karakteristik Simplisia dan Ekstrak ... 20
3.4.1 Pemeriksaan Makroskopik dan Organoleptik ... 20
3.4.2 Pemeriksaan Mikroskopik ... 20
3.4.3 Penetapan Kadar Air ... 21
3.4.5 Penetapan Kadar Sari Larut dalam Etanol ... 22
3.4.6 Penetapan Kadar Abu Total ... 22
3.4.7 Penetapan Kadar Abu Tidak Larut dalam Asam ... 23
3.5 Skrining Fitokimia Simplisia dan Ekstrak ... 23
3.5.1 Pemeriksaan Flavanoid ... 23
3.5.2 Pemeriksaan Alkaloid ... 24
3.5.3 Pemeriksaan Saponin ... 25
3.5.4 Pemeriksaan Tanin ... 25
3.5.5 Pemeriksaan Glikosida ... 25
3.5.6 Pemeriksaan Steroid / Triterpenoid ... 26
3.6 Pembuatan Ekstrak Etanol Daun Puguh Tanoh ... 26
3.7 Pembuatan Pereaksi ... 27
3.7.1 Pembuatan Suspensi Na-CMC 0,5% ... 27
3.7.2 Pembuatan Suspensi Ekstrak Etanol Daun Puguh Tanoh (EEDPT) 5% ... 27
3.7.3 Pembuatan Pereaksi TCA 20% b/v ... 27
3.7.4 Pembuatan Larutan Asam Asetat Glasial 15% v/v ... 27
3.7.5 Pembuatan Pereaksi Griess ... 27
3.7.5.1 Pembuatan Pereaksi Asam Sulfanilat 1% b/v .. 28
3.7.5.2 Pembuatan Pereaksi NED 0,1% b/v ... 28
3.8 Penyiapan Hewan Percobaan ... 28
3.9 Perlakuan Hewan Percobaan ... 28
3.10 Penyiapan Plasma Darah Tikus ... 29
3.11.1 Pembuatan Larutan Induk Baku Nitrit ... 29
3.11.2 Penentuan Panjang Gelombang Maksimum Nitrit Baku ... 30
3.11.3 Penentuan Waktu Kerja Nitrit Baku ... 30
3.11.4 Penentuan Kurva Kalibrasi Nitrit Baku ... 30
3.11.5 Pengukuran Kadar Nitrit dalam Plasma ... 31
3.11.6 Pengukuran Kadar Nitrat dalam Plasma ... 31
3.12 Analisis Data ... 31
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ... 32
4.1 Hasil Karakterisasi Simplisia dan Ekstrak ... 32
4.2 Hasil Skrining Fitokimia Simplisia dan Ekstrak ... 34
4.3 Hasil Pengukuran Kadar Nitrit dan Nitrat dalam Plasma Darah ... 35
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN ... 40
5.1 Kesimpulan ... 40
5.2 Saran ... 40
DAFTAR PUSTAKA ... 41
DAFTAR TABEL
Halaman
Tabel 4.1 Hasil Karakterisasi Simplisia dan Ekstrak ... 33
Tabel 4.2 Hasil Skrining Fitokimia Simplisia dan Ekstrak ... 34
DAFTAR GAMBAR
Halaman
Gambar 1.1 Kerangka Pikir Penelitian ... 5
Gambar 2 .1 Skema Reaksi Diazotasi ... 17
DAFTAR LAMPIRAN
Halaman
Lampiran 1 Bagan Kerja Penelitian ... 44
Lampiran 2 Hasil Identifikasi Tumbuhan ... 45
Lampiran 3 Gambar Tumbuhan dan Daun Puguh Tanoh ... 46
Lampiran 4 Gambar Simplisia Daun Puguh Tanoh ... 47
Lampiran 5 Hasil Pemeriksaan Mikroskopik Daun Puguh Tanoh 48 Lampiran 6 Alat – alat Yang Digunakan ... 49
Lampiran 7 Perhitungan Hasil Penetapan Kadar Air Serbuk Simplisia Daun Puguh Tanoh ... 51
Lampiran 8 Perhitungan Hasil Penetapan Kadar Sari Larut dalam Air Serbuk Simplisia Daun Puguh Tanoh ... 52
Lampiran 9 Perhitungan Hasil Penetapan Kadar Sari Larut dalam Etanol Serbuk Simplisia Daun Puguh Tanoh .. 53
Lampiran 10 Perhitungan Hasil Penetapan Kadar Abu Total Serbuk Simplisia Daun Puguh Tanoh ... 54
Lampiran 11 Perhitungan Hasil Penetapan Kadar Abu Tidak Larut Asam Serbuk Simplisia Daun Puguh Tanoh . 55 Lampiran 12 Perhitungan Hasil Penetapan Kadar Air Ekstrak Etanol Daun Puguh Tanoh ... 56
Lampiran 13 Perhitungan Hasil Penetapan Kadar Sari Larut dalam Air Ekstrak Etanol Daun Puguh Tanoh ... 57
Lampiran 14 Perhitungan Hasil Penetapan Kadar Sari Larut dalam Etanol Ekstrak Etanol Daun Puguh Tanoh .... 58
Lampiran 15 Perhitungan Hasil Penetapan Kadar Abu Total Ekstrak Etanol Daun Puguh Tanoh... 59
Lampiran 17 Contoh Perhitungan Volume Suspensi Ekstrak dan Larutan Doksorubisin yang Diberikan
pada Hewan ... 61
Lampiran 18 Kurva Panjang Gelombang Maksimum Natrium Nitrit Baku ... 62
Lampiran 19 Tabel Operating Time Natrium Nitrit Baku ... 63
Lampiran 20 Kurva Kalibrasi Natrium Nitrit Baku ... 64
Lampiran 21 Perhitungan Persamaan Regresi Kurva Kalibrasi Nitrit ... 65
Lampiran 22 Contoh Perhitungan dan Tabel Kadar Nitrit dalam Plasma ... 66
Lampiran 23 Contoh Perhitungan dan Tabel Kadar Nitrat dalam Plasma ... 67
Lampiran 24 Hasil Analisis ANAVA ... 68
Lampiran 25 Data Orientasi Kadar Nitrit ... 71
