PENGARUH PEMBERIAN EKSTRAK ETANOL DAUN SIRSAK (Annona muricata L.) TERHADAP PERTUMBUHAN SEL NEUROGLIA BABY
HAMSTER YANG DIPAPAR DENGAN 7, 12-DIMETILBENZ (α) ANTRASEN (DMBA) DALAM KONDISI IN VITRO
SKRIPSI
oleh:
RAHMA NAUMA HANUM NIM. 08620035
JURUSAN BIOLOGI
FAKULTAS SAINS DAN TEKNOLOGI UNIVERSITAS ISLAM NEGERI MAULANA MALIK IBRAHIM MALANG
PENGARUH PEMBERIAN EKSTRAK ETANOL DAUN SIRSAK (Annona muricata L.) TERHADAP PERTUMBUHAN SEL NEUROGLIA BABY
HAMSTER YANG DIPAPAR DENGAN 7, 12-DIMETILBENZ (α) ANTRASEN (DMBA) DALAM KONDISI IN VITRO
SKRIPSI
Diajukan kepada: Fakultas Sains dan Teknologi
Universitas Islam Negeri Maulana Malik Ibrahim Malang Untuk Memenuhi Salah Satu Persyaratan dalam
Memperoleh Gelar Sarjana Sains (S.Si)
Oleh:
RAHMA NAUMA HANUM NIM. 08620035/S-1
JURUSAN BIOLOGI
FAKULTAS SAINS DAN TEKNOLOGI UNIVERSITAS ISLAM NEGERI MAULANA MALIK IBRAHIM MALANG
SURAT PERNYATAAN ORISINALITAS PENELITIAN
Saya yang bertanda tangan di bawah ini:
Nama : Rahma Nauma Hanum
NIM : 08620035
Fakultas / Jurusan : Sains dan Teknologi / Biologi
Judul Penelitian : Pengaruh Pemberian Ekstrak Etanol Daun Sirsak (Annona muricata L.) terhadap Pertumbuhan Sel Neuroglia Baby
Hamster yang Dipapar dengan 7,12-Dimetilbenz (α) Antrasen (DMBA) dalam Kondisi In Vitro
Menyatakan dengan sebenar-benarnya bahwa hasil penelitian saya ini tidak terdapat unsur-unsur penjiplakan karya penelitian atau karya ilmiah yang pernah dilakukan atau dibuat oleh orang lain, kecuali yang secara tertulis dikutip dalam naskah ini dan disebutkan dalam sumber kutipan dan daftar pustaka.
Apabila ternyata hasil penelitian ini terbukti terdapat unsur-unsur jiplakan, maka saya bersedia untuk mempertanggung jawabkan, serta diproses sesuai peraturan yang berlaku.
Malang, 29 Januari 2013 Yang Membuat Pernyataan,
Rahma Nauma Hanum NIM. 08620035
PENGARUH PEMBERIAN EKSTRAK ETANOL DAUN SIRSAK (Annona muricata L.) TERHADAP PERTUMBUHAN SEL NEUROGLIA BABY
HAMSTER YANG DIPAPAR DENGAN 7, 12-DIMETILBENZ (α) ANTRASEN (DMBA) DALAM KONDISI IN VITRO
SKRIPSI
Oleh:
RAHMA NAUMA HANUM NIM. 08620035
Telah Disetujui oleh:
Pembimbing I, Pembimbing II,
Kiptiyah, M.Si M. Imamuddin, M.A NIP. 19731005 2002 12 2 0003 NIP. 19740602 200901 1 010
PENGARUH PEMBERIAN EKSTRAK ETANOL DAUN SIRSAK (Annona muricata L.) TERHADAP PERTUMBUHAN SEL NEUROGLIA BABY
HAMSTER YANG DIPAPAR DENGAN 7, 12-DIMETILBENZ (α) ANTRASEN (DMBA) DALAM KONDISI IN VITRO
SKRIPSI
Oleh:
RAHMA NAUMA HANUM NIM. 08620035
Telah Dipertahankan di depan dewan penguji Skripsi dan Dinyatakan Diterima Sebagai Salah Satu Persyaratan
untuk Memperoleh Gelar Sarjana Sains (S.Si)
Halaman Persembahan
Rasa syukurku yang tiada henti aku persembahkan kepada Allah Swt yang selalu memberikan jalan bagiku di setiap langkahku, memantapkan hatiku di setiap kebimbangankau dan memudahkan segala urusanku di setiap kesulitanku sehingga aku yakin akan satu kalimat dalam kalam-Nya dalam Q.S At-Taubah: 40 ”Janganlah kamu bersedih karena Allah bersama kita…”
Shalawat serta salam senantiasa tercurahkan kepada Figure panutan sepanjang masa Nabi Besar Muhammad Saw.
Karyaku ini aku persembahkan untuk Bapakku Misbakhul Munir dan Ibuku Viva Nurul Aini. Terima kasih pak.. buk… atas kerja keras, do’a dan kasih sayang serta pengorbanan yang begitu besar yang telah bapak dan ibu berikan kepadaku sehingga aku bisa terus bersekolah hingga ke jenjang ini… dan untuk adik-adikku.. Rizal, Rifqi dan Rina.. terima kasih telah menjadi bagian dari hidupku dan mewarnai hariku dengan canda tawa dan perselisihan serta pertengakaran…
Terima kasih untuk pembimbingku ibu Kiptiyah M.Si, sosok luar biasa yang mampu membangun semangat anak bimbingannya. Jika bukan ibu, mungkin saya tidak akan pernah mencari tau apa yang sebenarnya harus saya ketahui. Pesan-pesan ibu akan selalu saya ingat hingga kapan pun dan dimanapun.
Terima kasih untuk pembimbing laboratorium ibu Kholifah Holil M.Si yang selalu memotivasi kami tiada henti untuk berusaha menyelesaikan penelitian yang kami jalani. Satu pesan ibu yang
akan selalu saya ingat ketika kami sudah berputus asa, bahwa “Selama matahari masih terbit, itu artinya kesempatan masih ada nak.. walaupun itu hanya tersisa 1 x 24 jam”
Sahabat-sahabatku… Nasikatus Sairiyah, Firdausi Nuzula, Bilqis, Nuris Fajroti dan Aland Yusro Argaloka terima kasih atas suara tawa kalian yang menghiasi hari-hariku dengan sempurna dan menjadi tempat berkeluh kesah saat aku dalam kesulitan
Anggota Tissue Culture Laboratory Anis, Firda, Presti, Fila, Aland, Nuris, Tari dan Arum.. terima kasih atas kebersamaan selama 1 tahun menghuni Lab kebanggaan kita.. saksi bisu dari semua proses kerja keras kita, keceriaan kita, dan tangisan kita…
Teman-teman seperjuanganku Biologi 2008… terima kasih untuk 4 tahun lebih waktu terindah yang telah kalian berikan dalam kisahku..
Terima kasih untuk Bpk. Dr. H. Eko Budi Minarno M.Si dan Bpk. Imamuddin M.A serta seluruh dosen-dosen serta seluruh karyawan di jurusan biologi. Terima kasih untuk mbak lil yang telah bersedia menjadi manager kami anak-anak KJH dan bersabar untuk kami yang sangat alay dan juga cerewet. Terima kasih buat seluruh laboran jurusan biologi: mas basyar, mas ismail, mas zulfan, mbak retno dan mas saleh.
Teman-teman kamarku yang senantiasa mendukungku.. Fitroh, Reni, Himma, Fika dan seluruh anggota kamar 28 ABA, KD 41, 19 dan 30.. terima kasih telah menciptakan suasana kamar yang menyenangkan.
사랑해
여러븐
KATA PENGANTAR
Assalamu’alaikum Wr. Wb
Alhamdulillahirabbil ‘Alamin, segala puji hanya bagi Allah SWT Tuhan semesta alam karena atas segala berkat, rahmat, taufik dan hidayah-Nyalah,
penulis dapat menyelesaikan penulisan tugas akhir ini dengan judul “Pengaruh
Pemberian Ekstrak Etanol Daun Sirsak (Annona muricata L.) terhadap Pertumbuhan Sel Neuroglia Baby Hamster yang Dipapar dengan 7, 12-Dimetilbenz (α) Antrasen (DMBA) dalam Kondisi In Vitro”. Shalawat serta salam senantiasa terlantunkan kepada Nabi Muhammad SAW yang telah membimbing
kita ke jalan yang lurus dan jalan yang di ridhoi-Nya yakni agama Islam.
Berkat bantuan, bimbingan dan dorongan dari berbagai pihak, maka
penulis mengucapkan banyak terima kasih dan hanya ungkapan serta doa yang
penulis berikan, khususnya kepada:
1. Prof. Dr. H. Imam Suprayogo, selaku Rektor Universitas Islam Negeri (UIN)
Maulana Malik Ibrahim Malang.
2. Prof. Drs. Sutiman Bambang Sumitro, S.U, D.Sc selaku Dekan Fakultas Sains
dan Teknologi UIN Maliki Malang.
3. Dr. H. Eko Budi Minarno, M.Pd selaku ketua jurusan Biologi Fakultas Sains
dan Teknologi UIN Maliki Malang.
4. Kiptiyah, M.Si, selaku dosen pembimbing utama, yang telah membimbing
penulis dengan penuh kesabaran dan keikhlasannya meluangkan waktu
memberikan bimbingan dan pengarahan sehingga tugas akhir ini dapat
5. M. imamuddin, M.A selaku dosen pembimbing agama, karena atas bimbingan,
pengarahan, keikhlasan dan kesabaran beliau penulisan tugas akhir dapat
terselesaikan.
6. Kholifah Holil, M.Si selaku dosen pembimbing laboratorium yang telah
memberikan motivasi tiada henti kepada penulis untuk terus berjuang
menyelesaikan penelitian ini.
7. Segenap Dosen dan karyawan Jurusan Biologi Fakultas Sains dan Teknologi
Universitas Islam Negeri (UIN) Maulana Malik Ibrahim Malang.
8. Ayahku Misbakhul Munir dan Ibuku Viva Nurul Aini, adik-adikku Rizal,
Rifqi, Rina dan keluarga yang telah memberikan do’a, dukungan dan motivasi
kepada penulis.
9. Teman-teman seperjuangan Jurusan Biologi angkatan 2008 serta teman
seperjuangan Tissue Culture Laboratory
Semoga hasil yang minimal ini dapat memberikan manfaat yang maksimal bagi kita semua, Amin. Apabila ada sesuatu yang kurang berkenan
sehubungan dengan penyelesaian skripsi ini, penulis mohon maaf yang
sebesar-besarnya. Akhirul kalam semoga Allah berkenan membalas kebaikan
kita semua. Amin.
Malang, 30 Januari 2013
DAFTAR ISI
KATA PENGANTAR ... i
DAFTAR ISI ... iii
DAFTAR TABEL ... vi
DAFTAR GAMBAR ... vii
DAFTAR LAMPIRAN ... …viii
ABSTRAK ... ix BAB I PENDAHULUAN ... 1 1.1Latar Belakang ... 1 1.2Rumusan Masalah ... 5 1.3Tujuan Penelitian ... 6 1.4Hipotesis ... 6 1.5Manfaat Penelitian ... 7 1.6Batasan Masalah ... 7 BAB II KAJ IAN PUSTAKA ... ... ... ... 9
2.1 Deskripsi Tumbuhan Sirsak ... 9
2.2 Sistematika Sirsak (Annona muricata L.) ... 10
2.3 Kandungan Bahan Aktif Daun Sirsak ... 11
2.4 Manfaat Ekstrak Daun Sirsak ... 16
2.5 Sel Neuroglia ... 20
2.5.1 Deskripsi dan Karakteristik Sel Neuroglia Hasil Kultur ... 20
2.5.3 Konfluen, Viabilitas dan Uji Sitotoksisitas Sel Neuroglia ... 24
2.6 DMBA (7, 12-Dimetilbenz (α) antrasen) ... 26
2.7 Kanker ... 30
2.7.1 Deskripsi Kanker ... 30
2.7.2 Kanker Otak ... 31
2.7.3 Karsinogenesis dan Pertumbuhan Sel Kanker ... 33
BAB III METODE PENELITIAN ... 35
3.1Rancangan Penelitian ... 35
3.2Variabel Penelitian ... 35
3.3Waktu dan Tempat ... 36
3.4Alat dan Bahan ... 36
3.3.1 Alat ... 36 3.3.2 Bahan ... 36 3.4 Preparasi ... 37 3.4.1 Preparasi Ruang ... 37 3.4.2 Preparasi Alat... 38 3.4.3 Preparasi Bahan ... 38 3.4.3.1 Media DMEM ... 38 3.4.3.2 Antibiotik ... 39
3.4.3.3 Media Kultur, Media Maintenance dan Media Washing ... 39
3.4.3.4 Pembuatan Ekstrak Etanol Daun Sirsak (Annona muricata Linn.) ... 39
3.4.3.5Uji Fitokimia Daun Sirsak (Annona muricata Linn.) ... 40
3.5 Isolasi Sel Neuroglia Baby Hamster ... 40
3.6.1 Pembagian Kelompok Sampel ... 41
3.6.2 Pemberian Konsentrasi Ekstrak Etanol Daun Sirsak (Annona muricata Linn.)... 42
3.6.3Perlakuan Pemberian Dimetilbenz (α) Antrasen (DMBA) dan ekstrak daun sirsak ... 42
3.7 Pengamatan dan Perhitungan... 43
3.7.1 Pengamatan Konfluen Sel Neuroglia Baby Hamster ... 43
3.7.2 Uji Viabilitas Sel Neuroglia Baby Hamster... 44
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ... 46
4.1Pengaruh Pemberian Ekstrak Etanol Daun Sirsak (Annona muricata L.) terhadap Konfluen Sel Neuroglia Baby Hamster yang Dipapar dengan 7, 12-Dimetilbenz (α) Antrasen (DMBA) dalam Kondisi In Vitro ... 46
4.2Pengaruh Pemberian Ekstrak Etanol Daun Sirsak (Annona muricata L.) terhadap Viabilitas Sel Neuroglia Baby Hamster yang Dipapar dengan 7, 12-Dimetilbenz (α) Antrasen (DMBA) dalam Kondisi In Vitro ... 54
4.3Pengaruh Pemberian Ekstrak Etanol Daun Sirsak (Annona muricata L.) terhadap Sitotoksisitas Sel Neuroglia Baby Hamster yang Dipapar dengan 7, 12-Dimetilbenz (α) Antrasen (DMBA) dalam Kondisi In Vitro ... 60
BAB V PENUTUP ... 64
5.1 Kesimpulan ... 64
5.2 Saran... 64
DAFTAR PUSTAKA ... 65
DAFTAR TABEL
Tabel 4.1 Ringkasan ANAVA tunggal tentang pengaruh pemberian ekstrak etanol daun sirsak (Annona muricata L.) terhadap konfluen sel neuroglia baby
hamster yang dipapar dengan 7, 12-dimetilbenz (α) antrasen (DMBA) dalam kondisi in vitro ... 47 Tabel 4.2 Ringkasan BNT 0.05 tentang pengaruh pemberian ekstrak etanol daun sirsak (Annona muricata L.) terhadap konfluen sel neuroglia baby
hamster yang dipapar dengan 7, 12-dimetilbenz (α) antrasen (DMBA) dalam kondisi in vitro ... 48 Tabel 4.3 Ringkasan ANAVA tunggal tentang pengaruh pemberian ekstrak etanol daun sirsak (Annona muricata L.) terhadap viabilitas sel neuroglia baby
hamster yang dipapar dengan 7, 12-dimetilbenz (α) antrasen (DMBA) dalam kondisi in vitro ... 55 Tabel 4.4 Ringkasan BNJ 0.01 tentang pengaruh pemberian ekstrak etanol daun sirsak (Annona muricata L.) terhadap viabilitas sel neuroglia baby
hamster yang dipapar dengan 7, 12-dimetilbenz (α) antrasen (DMBA) dalam kondisi in vitro ... 56
DAFTAR GAMBAR
Gambar 2.1 Daun Sirsak dengan Tangkai Daun ... 11
Gambar 2.2 Struktur umum Acetogenin ... 13
Gambar 2.3 Kultur primer sel astrosit ... 22
Gambar 2.4. Siklus sel pada eukariot ... 23
Gambar 2.5. Struktur 7, 12-dimetilbenz (α) antrasen (DMBA) ... 28
Gambar 2.6 Mekanisme karsinogenesis oleh DMBA ... 29
Gambar 4.1 Perbedaan Tingkat Konfluen Kultur Primer Sel Neuroglia Fetus Hamster dengan Berbagai Konsentrasi ... 51
Gambar 4.2 Sel Neuroglia Fetus Hamster pada Saat perhitungan viabilitas dengan Pewarnaan Tripan Blue ... 57
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1. Kerangka Konsep Penelitian ... 72
Lampiran 2. Alur Penelitian ... 73
Lampiran 3. Pembuatan Stok Dimetilbenz (α) Antrasen (DMBA) ... 74
Lampiran 4. Pembuatan Ekstrak Etanol Daun Sirsak (Annona muricata L.) ... 75
Lampiran 5. Pembuatan Stok Ekstrak Etanol Daun Sirsak dengan konsentrasi 100 µg/mL dalam 50 ml ... 76
Lampiran 6. Gambar Bahan-bahan yang Digunakan dalam Penelitian ... 77
Lampiran 7. Gambar Alat-alat yang Digunakan dalam Penelitian ... 78
Lampiran 8. Foto Kegiatan Penelitian ... 79
Lampiran 9. Data Hasil Perhitungan Langsung Pengaruh Pemberian Ekstrak Etanol Daun Sirsak (Annona muricata L.) Terhadap Pertumbuhan Sel Neuroglia Baby Hamster yang Dipapar Dimetilbenz (α) Antrasen (DMBA) dalam Kondisi In Vitro ... 80
Lampiran 10. Perhitungan Statistik Manual Pengaruh Pemberian Ekstrak Etanol Daun Sirsak (Annona muricata L.) Terhadap Konfluen Sel Neuroglia Baby Hamster yang Dipapar Dimetilbenz (α) Antrasen (DMBA) dalam Kondisi In Vitro ... 84
Lampiran 11. Perhitungan Statistik Manual Pengaruh Pemberian Ekstrak Etanol Daun Sirsak (Annona muricata L.) Terhadap Viabilitas Sel Neuroglia Baby Hamster yang Dipapar Dimetilbenz (α) Antrasen (DMBA) dalam Kondisi In Vitro ... 86
Lampiran 12. Data Hasil Uji Sitotoksisitas Mengunakan Analisis Probit tentang Pengaruh Pemberian Ekstrak Etanol Daun Sirsak (Annona muricata L.) Terhadap Pertumbuhan Sel Neuroglia Baby Hamster yang Dipapar Dimetilbenz (α) Antrasen (DMBA) dalam Kondisi In Vitro ... 88
Lampiran 13. Hasil Uji Statistik ANAVA Tunggal menggunakan program SPSS Pengaruh Pemberian Ekstrak Etanol Daun Sirsak (Annona muricata L.) Terhadap Konfluen Sel Neuroglia Baby Hamster yang Dipapar Dimetilbenz (α) Antrasen (DMBA) dalam Kondisi In Vitro ... 89
Lampiran 14. Hasil Uji Statistik ANAVA Tunggal menggunakan program SPSS Pengaruh Pemberian Ekstrak Etanol Daun Sirsak (Annona muricata L.) Terhadap Viabilitas Sel Neuroglia Baby Hamster yang Dipapar Dimetilbenz (α) Antrasen (DMBA) dalam Kondisi In Vitro... 93
ABSTRAK
Hanum, Rahma Nauma. 2013. Pengaruh Pemberian Ekstrak Etanol Daun Sirsak (Annona muricata L.) terhadap Pertumbuhan Sel Neuroglia Baby Hamster yang Dipapar dengan 7, 12-Dimetilbenz (α) Antrasen (DMBA) dalam Kondisi in vitro. Pembimbing: Kiptiyah, M.Si dan M. Imamuddin, M.A
Kata Kunci: Kanker Otak, Dimetilbenz (α) Antrasen (DMBA), Ekstrak Daun Sirsak (Annona muricata L.), Sel Neuroglia Baby HamsterIn Vitro
Kanker otak merupakan salah satu penyebab kematian. Sel penyusun otak yang berpotensi untuk mengalami kanker adalah sel neuroglia. Salah satu senyawa karsinogen penyebab kanker adalah 7,12 dimetilbenz (α) antrasen (DMBA). Beberapa penelitian telah dilakukan untuk pengobatan penyakit kanker dengan cara mengisolasi senyawa antikanker dari bahan alam seperti tumbuh-tumbuhan. Salah satu tumbuhan yang berpotensi sebagai obat kanker adalah Sirsak (Annona muricata L.). Sirsak memiliki senyawa aktif yang berpotensi sebagai antikanker yaitu Annonaceous Acetogenin. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh dan nilai LC50 pemberian ekstrak
etanol daun sirsak (Annona muricata L.) terhadap pertumbuhan sel neuroglia baby hamster yang dipapar dengan 7,12-dimetilbenz (α) antrasen (DMBA) dalam kondisi in vitro.
Penelitian ini menggunakan sel neuroglia yang diambil dari baby hamster umur dua hari yang ditumbuhkan dalam medium dasar DMEM (Dulbecco’s Modified Eagle’s Medium) dengan dan tanpa dimetilbenz (α) antrasen (DMBA). Konsentrasi ekstrak etanol daun sirsak yang digunakan adalah 0 µg/ml, 10 µg/ml, 20 µg/ml, 40 µg/ml, 80 µg/ml dan 160 µg/ml. Parameter dalam penelitian ini adalah konfluen, viabilitas dan uji sitotoksisitas dengan menggunakan analisis probit sehingga didapatkan LC50.
Hasil penelitian menunjukkan bahwa, pemberian ekstrak etanol daun sirsak (Annona muricata L.) berpengaruh terhadap pertumbuhan sel neuroglia baby hamster
yang dipapar dengan 7,12-dimetilbenz (α) antrasen (DMBA) dalam kondisi in vitro. Pemberian ekstrak daun sirsak mampu menurunkan persentase konfluen, meningkatkan persentase kematian dan bersifat sangat toksik terhadap sel kanker berdasarkan hasil analisis probit dengan nilai LC50 sebesar 27,64 µg/mL.
ABSTRACT
Hanum, Rahma Nauma. 2013. Effect of Soursop (Annona muricata L.) Leaf Ethanol Extract on the Growth of Neuroglia Cells Baby Hamster were Exposed with 7,12-Dimethylbenz (α) Antracene (DMBA) in vitro conditions.
Advisor: Kiptiyah, M.Si and M. Imamuddin, M.A
Keywords: Brain Cancer, Dimetilbenz (α) Antrasen (DMBA), Leaf Ethanol Extract Soursop (Annona muricata L.), Neuroglia Cells from Baby Hamster In Vitro Brain cancer is one of the causes of death. Tues brain cell constituent that has the potential to develop cancer are neuroglia cells. One of the compounds carcinogen was 7.12 dimetilbenz (α) antrasen (DMBA). Several studies have been conducted for the treatment of cancer by means of anticancer compounds isolated from natural ingredients such as herbs. One of the plants that have the potential as a cancer drug is Soursop (Annona muricata L.). Soursop has a potentially active compounds as anticancer is
Annonaceous acetogenin. This study aimed to investigate the effect and LC50 values of
soursop (Annona muricata L.) leaf ethanol extract on the growth of neuroglia cells baby hamster were exposed to 7.12-dimetilbenz (α) antrasen (DMBA) in vitro conditions.
This study uses neuroglia cells taken from baby hamster two days old grown in basic medium DMEM (Dulbecco's Modified Eagle's Medium) with and without dimetilbenz (α) antrasen (DMBA). Concentration of Soursop leaf ethanol extract used is 10 µg/ml, 20 µg/ml, 40 µg/ml, 80 µg/ml and 160 µg/ml. The parameters in this study were confluent, viability and cytotoxicity assay using probit analysis to obtain the LC50.
The results showed that the ethanol extract of soursop leaf (Annona muricata L.) having an effect on the growth of neuroglia cells baby hamster were exposed with 7.12-dimetilbenz (α) antrasen (DMBA) in vitro conditions. Soursop leaf ethanol extract can lower percentage of confluent, increase the percentage of deaths and is highly toxic to the cancer cells by probit analysis with LC50 values of 27.64 µg/mL.
i
