AKTIVITAS SITOTOKSIK FRAKSI POLAR EKSTRAK ETANOL
KULIT BATANG SIRSAK (Annona muricata Linn.) TERHADAP
SEL T47D SERTA PROFIL KROMATOGRAFI LAPIS TIPIS
SKRIPSI
Oleh:
MEICELLA AZNI K 100 080 047
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA
SURAKARTA
AKTIVITAS SITOTOKSIK FRAKSI POLAR EKSTRAK ETANOL
KULIT BATANG SIRSAK (Annona muricata Linn.) TERHADAP
SEL T47D SERTA PROFIL KROMATOGRAFI LAPIS TIPIS
SKRIPSI
Diajukan untuk memenuhi salah satu syarat mencapai
Derajat Sarjana Farmasi (S.Farm) pada Fakultas Farmasi
Universitas Muhammadiyah Surakarta
di Surakarta
Oleh:
MEICELLA AZNI
K 100 080 047
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA
SURAKARTA
DEKLARASI
Dengan ini saya menyatakan bahwa dalam skripsi ini tidak terdapat karya yang pernah diajukan untuk memperoleh gelar kesarjanaan di suatu Perguruan Tinggi, dan sepanjang pengetahuan saya juga tidak terdapat karya atau pendapat yang pernah ditulis atau diterbitkan oleh orang lain, kecuali yang secara tertulis diacu dalam naskah ini dan disebutkan dalam daftar pustaka.
Surakarta, 25 Mei 2012
Peneliti
KATA PENGANTAR
Assalamu’alaikum wr wb.
Alhamdulillah, penulis panjatkan puji syukur kehadirat Allah SWT atas segala rahmat, taufiq, dan hidayahNya sehingga penulis dapat menyelesaikan penelitian dan penulisan skripsi dengan judul “Aktivitas Sitotoksik Fraksi Polar Ekstrak Etanol Kulit Batang Sirsak (Annona muricata L.) terhadap Sel T47D Serta Profil Kromatografi Lapis Tipis”.
Skripsi ini diajukan sebagai salah satu syarat untuk mencapai gelar sarjana Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta, semoga segala yang tersaji dalam skripsi ini dapat memberikan manfaat dan pengetahuan bagi pembaca dan untuk perkembangan ilmu pengetahuan.
Penulis ucapkan terima kasih kepada semua pihak yang telah membantu jalannya penelitian, baik langsung maupun tidak langsung, antara lain:
1. Dr. Muhammad Da’i, M.Si, Apt., selaku Dekan Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta dan penguji.
2. Rosita Melannisa, M.Si., Apt selaku penguji.
3. Dr. Haryoto, M.Sc, selaku pembimbing utama dan Peni Indrayudha, M.Biotech., Apt., selaku pembimbing pendamping.
4. Prof. Dr. Supargiono, DTM&H., SU., PhD., SpPark dan Rumbiwati, ST, selaku pembimbing di laboratorium Parasitologi Fakultas Kedokteran Universitas Gadjah Mada.
5. Azis Saifudin, SF, Apt dan Arifah Sri Wahyuni, S.Si., M.Sc., Apt selaku pembimbing akademik.
6. Keluargaku, khususnya Mama yang selalu mendukungku, dan juga almarhum adikku tercinta Ferdian Azni, kamulah inspirasi terbesarku.
7. Teman seperjuanganku Firstca, Aulia, dan Lutfiani.
Semoga Allah SWT membalas kebaikan dan kemurahan hati mereka, penulis mengharapkan saran dan kritik yang bersifat membangun dan menyempurnakan tulisan ini.
Wassalamu’alaikum wr wb.
Surakarta, Mei 2012
BAB II. METODE PENELITIAN
e. Uji Sitotoksik Menggunakan Metode MTT ... 14
6. Uji Kandungan Senyawa Dengan KLT... 14
E. Analisis Data ... 15
BAB III. HASIL DAN PEMBAHASAN A. Ekstraksi dan Fraksinasi ... 17
B. Aktivitas Sitotoksik ... 19
C. Uji Kandungan Senyawa ... 21
BAB IV. KESIMPULAN DAN SARAN A. Kesimpulan ... 24
B. Saran ... 24
DAFTAR PUSTAKA ... 25
DAFTAR GAMBAR
Halaman Gambar 1. Skema Jalannya Penelitian ... 16 Gambar 2. Profil kromatografi hasil 2x fraksinasi ekstrak etanol kulit batang
sirsak dengan metode KCV menggunakan fase diam Silika GF254
dan fase gerak etil asetat : n-heksana 2:8... 18 Gambar 3. Pengaruh fraksi polar ekstrak etanol kulit batang sirsak terhadap
morfologi sel T47D dan pembentukan kristal formazan... 19 Gambar 4. Grafik hubungan antara konsentrasi vs persentase sel hidup... 20 Gambar 5. Profil Kromatografi Lapis Tipis fraksi polar ekstrak etanol kulit
batang sirsak dengan fase diam Silika GF254 dan fase gerak
etil asetat : n-heksana 2:8. Hasil identifikasi golongan senyawa menunjukkan fraksi polar ekstrak etanol kulit batang sirsak
DAFTAR TABEL
Halaman Tabel 1. Kandungan Gizi Daun Sirsak dalam 100 gram... 4 Tabel 2. Penggunaan Eluen pada KCV... 12 Tabel 3. Pengelompokan Fraksi KCV 1 dan KCV 2... 18 Tabel 4. Identifikasi Golongan Senyawa Fraksi Polar Ekstrak Etanolik
DAFTAR LAMPIRAN
Halaman
Lampiran 1. Surat keterangan determinasi... 29
Lampiran 2. Gambar pohon dan kulit batang sirsak ... 31
Lampiran 3. Perhitungan larutan sampel dan perhitungan sel ... 32
Lampiran 4. Pembuatan larutan MTT ... 34
Lampiran 5. Perhitungan Persentase Sel Hidup Sel T47D ... 35
DAFTAR SINGKATAN
DMSO = Dimetil Sulfoksida
ELISA = Enzyme Linked Immuno Sorbant Assay FBS = Fetal Bovine Serum
IC50 = Inhibitory Concentration 50%
KLT = Kromatografi Lapis Tipis KCV = Kromatografi Cair Vakum LAF = Laminar Air Flow
MTT = 3-(4,5-Dimetilltiazol-2-il)-2,5-difeniltetrazolium bromide
p.a = Pro analisis
PBS = Phosphate Buffered Saline
Penstrep = Penicillin Streptomycin Rf = Retardation Factor
UV = Ultraviolet
RPMI = Roswell Park Memorial Institute WHO = World Health Organization SDS = Sodium Dodecyl Sulfate
INTISARI
Tanaman sirsak (Annona muricata L.) merupakan salah satu tanaman yang berkhasiat sebagai antikanker. Penelitian sebelumnya menunjukkan bahwa ekstrak heksana dari kulit batang sirsak (Annona muricata L.) mempunyai efek sitotoksik terhadap sel CEM-SS dengan nilai IC50 sebesar0,8 µg/mL dan ekstrak etil asetat
mempunyai efek sitotoksik terhadap sel HL dengan nilai IC50 0,5 µg/mL. Tujuan
penelitian ini adalah untuk mengetahui efek sitotoksik terhadap sel T47D serta mengetahui kandungan senyawa kimia yang terdapat pada fraksi polar ekstrak etanol kulit batang sirsak dengan analisis KLT.
Ekstraksi kulit batang sirsak dilakukan dengan maserasi menggunakan pelarut etanol 96%. Ekstrak kental yang didapat difraksinasi menggunakan KCV dengan pelarut bertingkat yaitu etil asetat : n-heksana (1:9), (2:8), (3:7), (4:6), dan etanol 96%. Metode yang digunakan dalam penelitan ini adalah metode MTT
assay dengan seri konsentrasi yang digunakan 500, 250, 125, 62,5, 31,25, 15,625,
dan 7,8125 µg/mL, sedangkan untuk identifikasi golongan senyawa kimia menggunakan metode KLT dengan beberapa pereaksi semprot, fase diam Silika GF254 dan fase gerak etil asetat : n-heksana 2:8.
Hasil identifikasi golongan senyawa kimia menggunakan beberapa pereaksi semprot menunjukkan bahwa fraksi polar ekstrak etanol kulit batang sirsak (Annona muricata L.) mengandung golongan senyawa polifenol, alkaloid, saponin, dan flavonoid, tetapi tidak berefek sitotoksik terhadap sel kanker payudara T47D.
Kata kunci: Annona muricata L., fraksi polar, T47D, sitotoksik, kromatografi