THE INFLUENCE OF THE GRANTING OF VITAMIN C AGAINST HISTOLOGIC PREVIEW OF BRAINADULT MALE MICE’S (Mus musculus
L) THAT INDUCED MONOSODIUM GLUTAMMATE
By
REZANDI AZIZTAMA
Monosodium glutammate (MSG) is given flavor to food that is often used in the entire world and it is a free radicals that can be destructive to neuron. Vitamin c is free radical antioxidant that counteracting the effects of msg. The purpose of this research is to know influence granting vitamin c against histologic preview of the brain mice adult male that induced monosodium glutammate.
The subject of this research using 25 the tail of a mouse the adult male a strain of dd webster that is divided at random in five a group of K (- ) (msg 4mg / grbb ) , K ( + ) (vitamin C 0, 2 mg / grbb ) , P1 (msg 4 mg / grbb and vitamin C 0,07 mg / grbb ) , P2 (msg 4 mg / grbb and vitamin C 0 , 2 mg / grbb ) , P3 (msg 4 mg / grbb dan vitamin C 0,6 mg / grbb ) after 15 days of the treatment, an enumeration of the amount of mice’sneuron done . analysis of data used a test of one way anova that is continued by analysis post hoc test with the methods of LSD and also a test of kruskal wallis that is continued by test mann whitney .
Obtained results after that the msg and giving vitamin c there are reducing employment neurons damaged in the brain mouse where P < 0,05. This indicates that the granting of MSG and vitamin C affect the cerebrum histologic preview of mice.
PENGARUH PEMBERIAN VITAMIN C TERHADAP GAMBARAN HISTOLOGI OTAK MENCIT JANTAN DEWASA (Mus musculus L)
YANG DIINDUKSI MONOSODIUM GLUTAMAT
Oleh
REZANDI AZIZTAMA
Monosodium Glutamat (MSG) merupakan penambah rasa makanan yang sering digunakan di seluruh dunia dan merupakan radikal bebas yang dapat merusak neuron. Vitamin C merupakan antioksidan yang menangkal efek radikal bebas dari MSG. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengetahui pengaruh pemberian vitamin C terhadap gambaran histologi otak mencit jantan dewasa yang diinduksi Monosodium Glutamat.
Subjek penelitian ini menggunakan 25 ekor mencit jantan dewasa strain DD Websteryang dibagi secara acak dalam 5 kelompok yaitu K (-)(MSG 4mg/grBB), K(+) (vitamin C 0,2 mg/grBB), P1 (MSG 4 mg/grBB dan vitamin C 0,07 mg/grBB), P2 (MSG 4 mg/grBBdan vitamin C 0,2 mg/grBB), P3 (MSG 4 mg/grBB dan vitamin C 0,6 mg/grBB) setelah 15 hari -perlakuan dilakukan penghitungan jumlah degenerasi neuron pada otak mencit. Analisis data yang digunakan uji one way Anova yang dilanjutkan dengan uji analisis post hoc dengan metode LSD dan juga uji Kruskal wallis yang dilanjutkan dengan uji mann whitney.
Diperoleh hasil setelah bahwa pemberian MSG dan pemberian vitamin C terdapat menurunkan jumlah neuron yang rusak pada otak mencit dimana P < 0,05. Hal ini menunjukan bahwa pemberian MSG dan vitamin C berpengaruh terhadap gambaran histologi otak mencit.
1. PENDAHULUAN
A. Latar Belakang
Monosodium Glutamat (MSG) sudah lama digunakan diseluruh dunia sebagai penambah rasa makanan dengan L-Glutamic Acid sebagai komponen asam amino (Geha et al., 2000), dikarenakan MSG dapat menambah kenikmatan rasa makanan (Loliger, 2000). Rata-rata konsumsi MSG di Indonesia sekitar 0,6 g /, atau 0,3-1.0 g / hari di negara industri. Taiwan adalah negara yang paling tinggi konsumsi MSG per kapita, mencapai 3 g per hari sedangkan Amerika adalah negara yang paling rendah konsumsi MSG per kapita, hanya 0,5 g per hari (Sukawan, 2008).
Pada penelitian yang dilakukan oleh Olney (1969) didapatkan bahwa dengan penyuntikan MSG secara subkutan pada mencit baru lahir menyebabkan terjadinya nekrosis akut neuron pada beberapa bagian otak yang sedang berkembang termasuk hipotalamus, ketika dewasa mencit tersebut mengalami kekerdilan tulang rangka, obesitas dan sterilitas pada mencit betina. Penelitian terhadap mencit jantan dewasa yang disuntikan MSG secara subkutan selama 6 hari dengan dosis 4 mg/ gr berat badan dan 8 mg/gr berat badan menyebabkan peningkatan kadar glukosa, peningkatan kadar peroksidasi lipid, kadar totalglutationdan protein yang terikat glutationserta peningkatan aktivitas enzim Glutathione Peroksidase (GR), Glutathione-S-Transferase (GST) dan Glutathione Peroxidase (GPX) ( Ahluwalia et al., 1996). Hal ini menggambarkan bahwa dengan pemberian MSG 4 mg/ g berat badan dapat menimbulkan terjadinya stress oksidatif yang diantisipasi oleh tubuh dengan meningkatkan kadar glutation dengan cara meningkatkan aktivitas enzim metaboliknya ( Ahluwaliaet al., 1996).
melaporkan bahwa pada pemberian MSG sebanyak 4 mg/g bb ke bayi tikus menimbulkan neurodegenerasi berupa jumlah neuron lebih sedikit dan rami dendrit (jaringan antar syaraf otak) lebih renggang. Menurut penelitian Camihortet al.,2004 MSG dapat merusak nukleus arkuata di hipotalamus dan dapat menyebabkan penurunan densitas, volume, ukuran serta sekresi kortikotropin, thyrotropin FSH dan LH gonadotropin.
Berbagai usaha telah dilakukan untuk meningkatkan ketahanan tubuh, khususnya organ otak, dari bahaya berbagai toksikan termasuk MSG. Pemberian vitamin C dengan dosis 0,2 mg/g berat badan secara oral dapat menanggalkan efek senyawa radikal bebas (Fauzi, 2008). Selain itu pemberian vitamin C juga dapat meningkatkan glutathion sehingga dapat mencegah kerusakan sel otak .
Pemberian vitamin C secara oral dengan dosis 200-1000 mg/ hari pada laki-laki infertile meningkatkan jumlah spermatozoa secara in vivo. Vitamin C merupakan antioksidan yang mampu menetralisir hidroksil, superoksid dan radikal peroksidasi hydrogendan mencegah aglutinasi spermatozoa (Agarwal et al., 2005). Secara fisiologis vitamin C adalah pemakan radikal bebas yang
Dari penelitian yang telah dilakukukan, belum ada yang meneliti tentang manfaat vitamin C dalam mengurangi efek dari monosodium glutamat terhadap gambaran histologi otak mencit, sehingga peneliti tertarik untuk meneliti hal tersebut. Sehingga dibuatlah penelitian dengan judul “ Pengaruh pemberian vitamin C terhadap gambaran histologi otak mencit jantan dewasa yang diinduksi monosodium glutamat” yang diharapkan hasilnya akan membantu mengurangi efek dari monosodium glutamat.
B. Masalah Penelitian
Berdasarkan uraian latar belakang yang telah dikemukakan diatas, maka yang menjadi pokok permasalahan dalam penelitian ini yaitu :
Apakah vitamin C dapat menurunkan degenerasi neuron otak mencit jantan dewasa yang diinduksi Monosodium Glutamat?
C. Tujuan Penelitian
Untuk mengetahui apakah pemberian vitamin C dapat menurunkan degenerasi neuron otak mencit jantan dewasa yang diinduksi oleh Monosodium Glutamat
D. Manfaat penelitian
Hasil penelitian ini diharapkan dapat memberikan manfaat :
b. Bagi peneliti, diharapkan dapat menambah pengetahuan dibidang ilmu Biologi Medik sekaligus dapat menerapkan ilmu yang telah didapat selama perkuliahan.
c. Bagi institusi/masyarakat :
1) Sebagai bahan kepustakaan dalam lingkungan Fakultas Kedokteran Universitas Lampung.
2) Bagi industri makanan, agar mengetahui efek samping yang mungkin dapat ditimbulkan dari penggunaan MSG serta kadar toksiknya.
3) Bagi tenaga kesehatan, agar dapat digunakan sebagai referensi untuk mencegah efek samping yang dapat ditimbulkan dari penggunaan MSG dalam keseharian.
E. Kerangka Teori
MSG
Radikal Bebas
Kerusakan Jaringan Otak Peroksidasi Lipid
bebas dengan cara donor electron dan reducting agen. Antioksidan juga merupakan senyawa yang dapat menghambat reaksi oksidasi dengan mengikat radikal bebas dan molekul yang sangat reaktif. Akibatnya, kerusakan sel akan dihambat (Winarsi, 2007).
Gambar 1. Kerangka Teori Penelitian Keterangan :
: Menyebabkan
F. Kerangka Konsep
• Variabel Bebas : MSG & Vit C
• Variabel Terikat : Histologi Otak
Ket :
: memperbaiki gambaran histologi otak : merusak gambaran histologi otak : faktor-faktor yang mempengaruhi
Faktor Endogen:
• Hormon • Psikologis • Genetik
Faktor Eksogen:
• Fisik • Kimia • Obat-obatan
Vitamin C
Gambaran Histologi Otak
Jumlah Neuron
Monosodium Glutamat
G. Hipotesis
A. Monosodium Glutamat
MSG pertama kali ditemukan oleh Ikeda pada tahun 1909 dari mengisolasi garam metalik asam glutamat dari tumbuhan laut (genus Laminaria) atau disebut ‘konbu’ di Jepang (Halpern, 2002). Monosodium Glutamat di indentifikasi sebagai asam amino asam glutamate yang dapat meningkatkan rasa lezat pada makanan (Linderman et al., 2002). Rasa umami ini bertahan lama dan di dalamnya terdapat L-glutammate (suatu asam amino non-essential) dan 5’-ribonucleotide (Yamaguchi dan Ninomiya, 2000). MSG banyak digunakan pada masakan cina dan asia tenggara yang dikenal dengan nama Ajinomoto, Sasa, Vetsin, Miwon atau Weichaun (Gehaet al.,2000).
1. Sifat Kimia dan Metabolisme Monosodium Glutamat
menimbulkan depolarisasi reseptor dan potensial aksi yang sampai ke otak lalu diterjemahkan sebagai rasa lezat (Siregar, 2009). Pada tahun 1995 MSG telah digolongkan sebagai bahan tambahan makanan yang aman seperti garam, cuka dan baking powder tetapi penggunaannya dibatasi sebanyak 120 mg/kg berat badan/hari oleh FDA dan WHO (Ardyanto, 2004). Glutamat yang terdapat dalam MSG merupakan suatu asam amino yang banyak dijumpai pada makanan, kandungan glutamat 20% dari total asam amino pada beberapa makanan baik bebas maupun terikat pada peptida ataupun protein (Garattini, 2000).
Gambar 3. Rumus bangun Monosodium Glutammate (www.chemistry.about.com)
Adapun faktor-faktor yang mempengaruhi kadar puncak asam glutamat adalah rute pemberian (oral< subkutan< intraperitoneal), konsentrasi MSG dalam larutan (2%, 10%) dan usia (hewan baru lahir memetabolisme asam glutamat lebih rendah daripada dewasa) (Garattini, 2000).
mengalami ekstraksi dan penggunaan oleh beberapa jaringan termasuk otot dan hati (Garattini, 2000).
2. Efek Biologis Monosodium Glutamat
Terdapat laporan timbulnya gejala yang tidak nyaman pada manusia antara lain kaku pada bagian belakang leher yang berangsur menjalar pada kedua lengan dan punggung, lemah, jantung berdebar, sakit kepala, rasa terbakar, tekanan pada wajah dan nyeri dada. Kumpulan gejala tersebut dikenal dengan sebutan chinesse restaurant syndrome yang umumnya timbul setelah mengkonsumsi makanan china yang banyak mengandung MSG (FDA, 2011).
Suntikan subkutan pada mencit baru lahir dapat menyebabkan nekrosis otak termasuk hipotalamus yang ketika dewasa dapat terjadi hambatan perkembangan tulang rangka, obesitas bahkan sterilitas pada betina (Olney, 1969).
obesitas serta menurunkan hormon pertumbuhan dalam darah (Giovanbattista et al., 2003). Keadaan stress oksidatif juga terjadi setelah pemberian MSG 4 mg/gr berat badan secara intraperitoneal memperlihatkan peningkatan pembentukan malondialdehida (MDA) di hati, ginjal dan otak tikus. Pemberian makanan yang mengandung vitamin C, E dan quercetin secara bersamaan mengurangi kadar MDA yang muncul akibat MSG tersebut (Farombi dan Onyema, 2006).
Penelitian terhadap tikus Sprague dawley yang mengalami lesi nucleus arkuatus setelah penyuntikan MSG 4 gr/kg berat badan secara subkutan pada hari 1, 3, 5, 7 dan 9 setelah 10 minggu memperlihatkan adanya plak aterosklerotik pada permukaan lumen dinding aorta, degenerasi endothelium, inti endothelium mengalami edema, adanya vesikel berbagai ukuran pada lapisan subendotelium dan otot polos mengalami migrasi dari tunika media ke tunika intima melalui interna elastika yang robek, juga disertai peningkatan kadar kolesterol total, low density lipoprotein (LDL), kadar nitric okside berkurang sedangkan kadar high density lipoprotein (HDL) tidak berubah (Xiao longet al., 2007). Konsumsi MSG dosis tinggi memiliki beberapa efek merusak pada otak tikus wistar. Dapat mempengaruhi fungsi otak, menyebabkan tremor, tidak stabil, gerakan yang tidak terkoordinasi, dan ataksia (Eweka, 2007).
B. Vitamin C
tumbuh-tumbuhan dan hewan dapat mensintesa vitamin C untuk kebutuhannya sendiri. Akan tetapi manusia dan golongan primata lainnya tidak dapat mensintesa vitamin C karena tidak mempunyai enzim gulonolactone oksidase, sama halnya dengan marmut dan kelelawar pemakan buah. Oleh karenanya vitamin C hanya dapat diperoleh melalui konsumsi buah, sayur atau suplemen vitamin C. Banyak keuntungan pada bidang kesehatan yang diperoleh dari vitamin C, seperti fungsinya sebagai antioksidan, anti aterogenik dan imunomodulator(Naidu, 2003). Akan tetapi untuk dapat berfungsi dengan baik sebagai antioksidan, maka kadar vitamin C ini harus dijaga agar kadarnya relatif tinggi di dalam tubuh (Yi Li, 2007).
1. Sumber-Sumber Vitamin C
Vitamin C banyak dijumpai pada buah-buahan dan sayuran segar. Buah yang banyak mengandung vitamin C diantaranya adalah jeruk, lemon, mangga, strawberry dan nanas. Sedangkan sayuran yang banyak mengandung vitamin C adalah sayuran yang berwarna hijau, tomat, brokoli dan kembang kol. Kebanyakan tumbuhan dan hewan memproduksi asam askorbat dari glukosa-D atau galaktosa-D. Sebagian besar hewan memproduksi asam askorbatyang relatif tinggi dari glukosa yang terdapat di liver (Naidu, 2003).
vitamin C yang alami maupun yang sintesis memiliki rumus kimia yang identik dan tidak terdapat perbedaan aktivitas biologi danbioavabilitasnya (Naidu, 2003).
2. Biokimia Vitamin C (Asam Askorbat)
Vitamin C merupakan 6 karbon lakton yang disintesa dari glukosa yang terdapat dalam liver. Adapun nama kimia dari vitamin C adalah 2-oxo-L-threo-hexono-1,4-lactone-2,3-enediol. Bentuk utama dari vitamin C yang
dimakan adalahL-ascorbicdandehydroascorbic acid(Naidu, 2003).
Gambar 4. Rumus bangun vitamin C (www.chemistry.about.com) Kebanyakan spesies mamalia dapat mensintesa vitamin C kecuali manusia dan primata lainnya, marmot dan kelelawar pemakan buah juga tidak dapat mensintesa vitamin C. Hal ini disebabkan karena mereka tidak memiliki enzim gulonolacton oksidase yang sebenarnya sangat penting dalam mensintesa immediate precursor vitamin C yaitu 2-keto-1-gulonolacton. DNA yang memberi kode untuk gulonolacton oksidase
C. Otak
1. Anatomi Otak
Otak merupakan alat untuk memproses data tentang lingkungan internal dan eksternal tubuh yang diterima reseptor pada alat indera (seperti mata, telinga, kulit, dan lain-lain). Data tersebut dikirimkan oleh urat saraf yang dikenal dengan sistem saraf keseluruhan. Sistem saraf ini memungkinkan seluruh urat saraf mengubah rangsangan dalam bentuk implus listrik. Kemudian implus listrik dikirim ke pusat sistem saraf, yang berada di otak dan urat saraf tulang belakang. Disinilah data diproses dan direspon dengan rangsangan yang ‘’cocok’’. Biasanya dalam tahap ini timbul saraf efektor, yang berfungsi untuk mengirim implus saraf ke otot sehingga otot berkontraksi atau rileks (Price dan Wilson, 2006).
Sistem saraf pusat adalah bagian yang terpenting dari seluruh sistem saraf dalam tubuh, didalam sistem saraf pusat mengandung pusat pengelola rangsang saraf, rangsang ini setelah ditafsirkan dapat disimpan atau diteruskan ke sistem saraf tepi untuk menimbulkan tanggapan. Banyak rangsangan sederhana berhubungan dengan tindakan refleks/aksi spontan (misalnya, dengan cepat kita mengibaskan tangan saat menyentuh piring panas). Otak tidak terlibat langsung dalam proses ‘’identifikasi’’ mengenai
a. Bagian-Bagian Otak
Otak nampak seperti sebuah ‘’kembang kol’’ yang beratnya rata-rata 1,2 kg pada laki-laki dan 1 kg pada perempuan. Otak dapat dibagi menjadi serebrum (otak besar), trunkus ensefalikus (batang otak), dan serebelum (otak kecil). Serebrum (otak depan atau prosensefalon) terdiri dari telensefalon dan diensefalon. Telensefalon mencakup korteks serebrum, substansia grisea, substansia subkortikal, dan ganglia basalis yang merupakan massa kelabu yang terdapat jauh di bagian dalam hemisfer serebrum. Sub bagian utama dari diensefalon adalah talamus dan hipotalamus (DeGroot dan Joseph, 1997).
Serebrum dipisahkan oleh fisura media menjadi dua hemisfer, hemisfer kanan dan kiri. Permukaan lateral masing-masing hemisfer dibedakan menjadi lobus frontal, parietal, temporal, dan oksipital. Otak mendapat darah dari arteri karotis interna dan arteri vertebralis (Moore, 2002).
yang besar, menonjol ke lateral yang disebut hemisfer serebeli, dan setiap hemisfer ini dibagi menjadi zona intermediat dan zona lateral (Guyton dan hall, 2006).
Zona intermediat hemisfer berhubungan dengan pengaturan kontraksi otot yang terletak di bagian distal anggota badan atas dan anggota badan bawah, khususnya tangan dan jari-jari tangan serta kaki dan jari-jari kaki. Zona lateral hemisfer bekerja pada tempat yang lebih jauh, karena tampaknya area ini ikut berperan dalam seluruh rangkaian gerakan motorik. Tanpa adanya zona lateral ini, maka sebagian besar aktivitas gerakan tubuh yang khas akan tidak tepat lagi sehingga menjadi sangat tidak teratur (Guyton dan hall, 2006).
b. Perdarahan Otak
Otak manusia mempunyai berat 2% dari berat badan orang dewasa (3 pon), menerima 20 % curah jantung dan memerlukan 20% pemakaian oksigen tubuh dan sekitar 400 kilokalori energi setiap harinya. Otak merupakan jaringan yang paling banyak memakai energi dalam seluruh tubuh manusia dan terutama berasal dari proses metabolisme oksidasi glukosa. Jaringan otak sangat rentan terhadap perubahan oksigen dan glukosa darah, aliran darah berhenti 10 detik saja sudah dapat menghilangkan kesadaran manusia. Berhenti dalam beberapa menit, merusak permanen otak. Hipoglikemia yang berlangsung berkepanjangan juga merusak jaringan otak (Prince, & Wilson, 2006) .
Circulus arteriosus willisi pada dasar otak adalah anatomosis yang penting antara lima arteri yang memasok darah kepada otak. Circulus arteriosus willisi dibentuk oleh arteri cerebri anterior, arteri comunicans anterior, arteri carotis interna, arteri cerebri posterior dan arteri comunicans posterior (Moore, 2002).
Gambar 6.Circulus arteriosus willisi(www.ims.uni-stuttgart.d)
2. Histologi otak
Pada potongan melintang dari serebrum, serebelum dan medula spinalis tampak daerah-daerah yang berwarna putih (substansia alba) dan kelabu (substansia grisea). Distribusi mielin yang berbeda dalam SSP menyebabkan perbedaan ini, komponen utama dari substansia alba adalah akson yang bermielin dan oligodendrosit yang memproduksi mielin dan tidak mengandung badan sel neuron. Serebelum terdiri dari vermis dan dua lobus lateralis (DeGroot dan Joseph, 1997; Junqueiraet al., 2007).
Pada serebrum terdapat sel-sel pyramid dan sel stellata diantara sel-sel pyramid. Substansia grisea terletak di bagian korteks dan tersusun atas lapisan-lapisan berikut ini dari korteks ke medulla:
a. lapisan molekular (terdiri dari sedikit sel-sel granuler)
b. lapisan sel-sel pyramid (mengalami perubahan ukuran dan makin membesar menuju medulla)
c. lapisan multiformis (terdiri atas neuron dengan berbagai bentuk) Bagian medulla merupakan substansia alba yang berisi serabut-serabut saraf (Junqueira, 2007).
a. Neuron
diinterpretasi dan direspon. Respons terhadap stimulus dari SSP adalah aktivasi otot dan/atau kelenjar tertentu (Eroschencko, 2003).
Tiga kelompok utama neuron adalah multipolar, bipolar dan unipolar. Klasifikasi anatomiknya didasarkan kepada jumlah dendrit dan akson yang keluar dari badan sel. Neuron multipolar adalah jenis yang paling banyak terdapat di otak dan mencakup neuron motoris dan interneuron otak. Banyak dendrit bercabang terjulur keluar dari badan sel neuron multipolar. Pada sisi lain, yang berlawanan dengan neuron, terdapat satu cabang yaitu akson. Neuron bipolar yang lebih sedikit, merupakan neuron sensoris murni. Pada neuron ini satu dendrit dan satu akson keluar dari badan sel neuron. Neuron bipolar adalah sel reseptor sensoris pada retina mata, telinga dalam dan epitel olfaktoris dibagian atap rongga hidung. Kebanyakan neuron pada organisme dewasa yang hanya memiliki satu cabang, pada awalnya adalah bipolar. Inilah neuron unipolar neuron ini juga bersifat sensoris. Neuron unipolar terdapat pada banyak ganglion kranisakral tubuh (Eroschencko, 2003).
b. Neuroglia
dalan susunan saraf. Ada tiga jenis sel neuroglia yaitu astrosit, oligodendrosit dan mikroglia (Eroschencko, 2003).
BAB III. METODE PENELITIAN
A. Desain Penelitian
Desain yang digunakan pada penelitian ini adalah penelitian eksperimental dengan Rancangan Acak Terkontrol (RAT). Penelitian ini menggunakan 5 (lima) kelompok perlakuan terhadap hewan percobaan mencit putih jantan (Mus musculus L) strain DD Webster dewasa.
B. Waktu dan Tempat Penelitian
Penelitian dilaksanakan di Laboratorium farmakologi dan patologi anatomi fakultas kedokteran UNILA selama 3 bulan.
C. Variabel Penelitian
1. Variabel Bebas
a. MSG
b. Vitamin C 2. Variabel Terikat
D. Definisi Operasional
1. Monosodium Glutamat adalah penambah rasa makanan dengan L-Glutamic Acid sebagai komponen asam amino. Adapun MSG yang digunakan dalam penelitian ini sebanyak 4 mg/ kgBB (Nayanataraet al., 2007)
2. Vitamin C yang diberikan pada perlakuan dalam bentuk vitamin C sintetik berupa cairan yang diberikan per oral dengan beberapa macam dosis yang berbeda pada setiap kelompok perlakuan. Dosis efektif vitamin C pada mencit adalah 0,2 mg/grBB. Dosis vitamin C 0,2 mg/grBB diberikan pada kelompok kontrol positif; 0,07 mg/grBB diberikan pada kelompok perlakuan 1; 0,2 mg/grBB diberikan pada kelompok perlakuan 2 dan 0,6 mg/grBB diberikan pada kelompok perlakuan 3. Peningkatan dosis berdasarkan buku panduan penelitian ASEAN (ASEAN, 2007).
3. Histologi otak
Dari setiap mencit dibuat preparat otak dan dibaca dalam 5 lapangan pandang dengan perbesaran 400x. Sasaran yang dibaca adalah jumlah sel neuron dari 5 lapang pandang lalu diambil nilai rata-ratanya (Tjandra, 2010).
E. Alat dan Bahan 1. Alat Penelitian
2. Bahan Penelitian
a. Bahan Biologis: mencit jantan (Mus musculus L) strain DD webster dewasa. umur 2,5-3 bulan dengan berat 25-35 gram dan sehat.
b. Bahan kimia: Vitamin C sintetik, monosodium glutamat murni, NaCl 0,9%, pelet ayam sebagai pakan mencit, , alkohol 70-100%, paraffin, xylol, canada balsam, dan zat warna HE (Haematoksilin-Eosin) dan aquadest.
F. Populasi dan Sampel Penelitian
Populasi dari penelitian ini adalah mencit jantan (Mus musculus L) strain DD webster dewasa. umur 2,5-3 bulan dengan berat 25-35 gram dan sehat yang ditandai dengan gerakan aktif, diperoleh dari IPB (Institut Pertanian Bogor). Besar sampel ditentukan berdasarkan buku panduan penelitian WHO yaitu minimal 5 ekor mencit tiap kelompok. Sedangkan, banyaknya pengulangan ditentukan berdasarkan rumus Federer (Federer, 1967).
(5-1)(n-1)≥15 4(n-1)≥15 4n–4≥15 4n≥19 n≥4,83 n≥5 n≥4,83 n≥5
t = kelompok perlakuan (5 kelompok )
1. Kriteria Inklusi : a. Sehat
b. Memiliki berat badan antara 25-35 gr c. Jenis kelamin jantan
d. Usia 2,5-3 bulan
2. Kriteria Eksklusi:
a. Terdapat penurunan berat badan lebih dari 10% setelah 1 minggu masa adaptasi di laboratorium.
H. Prosedur Penelitian
1. Pemeliharaan Hewan Uji
Hewan uji yang digunakan adalah mencit jantan (Mus musculus L)strain DD webster dewasa. umur 2,5-3 bulan dengan berat 25-35 gram dan sehat. Dasar kandang dilapisi dengan sekam padi setebal 0,5-1 cm dan diganti setiap tiga hari untuk mencegah infeksi yang dapat terjadi akibat kotoran mencit tersebut. Dalam 1 kelompok, 5 ekor mencit ditempatkan dalam 1 kandang. Cahaya ruangan dikontrol persis 12 jam terang (pukul 06.00 sampai dengan pukul 18.01) dan 12 jam gelap (pukul 18.00 sampai dengan pukul 06.01), sedangkan suhu dan kelembaban ruangan dibiarkan berada dalam kisaran alamiah.
2. Persiapan Hewan Uji
Sebelum diberi perlakuan, mencit diadaptasikan selama satu minggu di Ruang penelitian Fakultas Kedokteran Unila tempat dilaksanakannya penelitian. Terhadap setiap mencit ditimbang berat badannya dan diamati kesehatannya secara fisik ( gerakannya, makan dan minumnya), sebelum diberi perlakuan.
3. Penyediaan Vitamin C dan Monosodium Glutamat
Vitamin C didapatkan dari Vitamin C sintetik yang terdapat dipasaran. Sedangkan untuk Monosodium Glutamat didapatkan dari Bagian Kimia FMIPA UNILA dalam bentuk Monosodium Glutamat murni yang dilarutkan dalam larutan NaCl 0,9% sebanyak 0,5 ml.
Pada penelitian ini zat padat yang digunakan berupa Monosodium Glutammate dengan kadar toksik 4 mg/gr berat badan (Nayanatara et al, 2008). Sedangkan larutan yang digunakan sebagai pelarut ialah NaCl (larutan garam) 0.9% sebanyak 0,5 ml.
a. Pelarutan Monosodium Glutamat
Tahap selanjutnya adalah melarutkan MSG, terlebih dahulu diukur berat MSG yang akan digunakan. Berdasarkan referensi dosis MSG yang digunakan ialah 4 mg/gr BB hewan percobaan (Nayanataraet al., 2008). Dikarenakan berat badan hewan percobaan sebesar 30 gr, maka MSG yang digunakan sebesar:
MSG = dosis x berat badan mencit = 4 mg/gr BB x 30 gr
Didapati berat MSG yang digunakan sejumlah 120 mg. Tahap selanjutnya ialah menimbang MSG dengan menggunakan neraca analitik sampai berat MSG 120 mg. Setelah ditimbang, kemudian dimasukkan ke dalam gelas ukur lalu ditambahkan dengan 0,5 ml larutan NaCl 0,9%. Setelah itu diaduk dengan spatula sampai kristal MSG larut.
b. Pengenceran Vitamin C
Pada penelitian ini vitamin C yang akan diinduksi harus dilakukan pengenceran terlebih dahulu dengan menggunakan suatu larutan . Dalam hal ini, zat yang digunakan sebagai pelarut adalah aquades.
Berdasarkan Pedoman penelitian ASEAN, dosis yang akan diberikan pada masing-masing hewan percobaan ialah:
- Kontrol : 0,2 mg/gr BB
- Perlakuan 1 : 0,07 mg/gr BB
- Perlakuan 2 : 0,2 mg/gr BB
- Perlakuan 3 : 0,6 mg/gr BB
Dikarenakan sediaan yang digunakan dalam penelitian ini berupa vitamin C dalam bentuk cairan, maka sebelum diencerkan terlebih dahulu dikonversikan ke dalam satuan mililiter (ml). Adapun perhitungannya ialah sebagai berikut:
Diketahui:
- Berat badan mencit : 30 gram
- Dosis Vitamin C:
• Perlakuan 2 : 0,2 mg/gr BB • Perlakuan 3 : 0,6 mg/gr BB
- Tiap 2 ml vitamin C yang ada dalam 1 ampul mengandung 200 mg vitamin C
Perhitungan volume ,vitamin C yang akan diencerkan ialah: • Dosis Vitamin C untuk kontrol :
K = dosis x berat badan = 0,2 mg/gr BB x 30 gr = 6 mg
Didapatkan dosis vitamin C dalam bentuk sediaan padat (gram) sebesar 6 gram, kemudian dikonversikan kedalam satuan mililiter dengan cara:
2 ml Vitamin C = 200 mg Vitamin C
X (Dosis vitamin C yang dicari) = 6 mg Maka hasil yang didapat ialah:
X= (2ml x 6mg) / 200mg X= 0, 06 ml
Jadi dosis vitamin C untuk kontrol ialah 0,06 ml.
• Dosis Vitamin C untuk Perlakuan 1 : K = dosis x berat badan
= 0,07 mg/gr BB x 30 gr = 2,1 mg
Didapatkan dosis vitamin C dalam bentuk sediaan padat (gram) sebesar 2,1 gram, kemudian dikonversikan kedalam satuan mililiter dengan cara:
X (Dosis vitamin C yang dicari) = 2,1 mg
Maka hasil yang didapat ialah:
X= (2ml x 2,1mg) / 200mg
X= 0,021 ml
Jadi dosis vitamin C untuk perlakuan 1 ialah 0,021 ml.
• Dosis Vitamin C untuk Perlakuan 2 : K = dosis x berat badan
= 0,2 mg/gr BB x 30 gr = 6 mg
Didapatkan dosis vitamin C dalam bentuk sediaan padat (gram) sebesar 6 gram, kemudian dikonversikan kedalam satuan mililiter dengan cara:
2 ml Vitamin C = 200 mg Vitamin C
X (Dosis vitamin C yang dicari) = 6 mg Maka hasil yang didapat ialah:
X= (2ml x 6mg) / 200mg X= 0, 06 ml
Jadi dosis vitamin C untuk perlakuan 2 ialah 0,06 ml. • Dosis Vitamin C untuk perlakuan 3 :
Didapatkan dosis vitamin C dalam bentuk sediaan padat (gram) sebesar 18 gram, kemudian dikonversikan kedalam satuan mililiter dengan cara:
2 ml Vitamin C = 200 mg Vitamin C
X (Dosis vitamin C yang dicari) = 18 mg
Maka hasil yang didapat ialah: X= (2ml x 18mg) / 200mg X= 0, 18 ml
Jadi dosis vitamin C untuk perlakuan 3 ialah 0,18 ml.
Setelah dilakukan perhitungan, cairan vitamin C tersebut kemudian diambil dengan menggunakan pipet mikron sesuai dosisnya masing-masing, dan dimasukkan ke dalam labu ukur satu per satu. Selanjutnya ditambahkan 0,5 ml aquades yang merupakan zat pelarut ke dalam labu ukur, lalu dihomogenkan/dilarutkan.
4. Pemberian Perlakuan
Setiap kelompok mempunyai perlakuan yang berbeda, yaitu:
1. Kontrol (-) : hanya diberi MSG 4 mg/gr berat badan yang dilarutkan dalam 0,5 ml NaCl 0,9% secara intraperitoneal.
2. Kontrol (+) : diberi vitamin C 0,2 mg/gr berat badan yang dilarutkan dalam 0,5 ml aquadest secara oral setiap hari selama 15 hari.
0,07 mg/rg berat badan yang dilarutkan dalam 0,5 ml aquadest secara oral setiap hari selama 15 hari.
4. P2: diberi MSG 4 mg/gr berat badan yang dilarutkan dalam 0,5 ml NaCl 0.9% secara intraperitoneal setiap hari selama 15 hari + diberi vitamin C 0,2 mg/gr berat badan yang dilarutkan dalam 0,5 ml aquadest secara oral setiap hari selama 15 hari
5. P3 : diberi MSG 4 mg/gr berat badan yang dilarutkan dalam 0,5 ml NaCl 0.9% secara intraperitoneal setiap hari selama 15 hari + diberi vitamin C 0,6 mg/gr berat badan yang dilarutkan dalam 0,5 ml aquadest secara oral setiap hari selama 15 hari
Perlakuan dilakukan selama 15 hari karena menurut penelitian yang dilakukan oleh Nayanatara et al (2008) bahwa dalam waktu 15 hari sudah dapat menyebabkan akumulasi MSG dalam jaringan. Dosis toksik dari MSG didapatkan dari penelitian sebelumnya yang dilakukan pada tikus Wistar jantan dewasa yang disuntikan MSG dengan dosis 4 mg/kg berat badan selama 15 hari (kelompok jangka pendek) dan 30 hari (kelompok jangka panjang) (Nayantara et al, 2008). Dosis Vitamin C didapatkan dari dosis maksimal penelitian sebelumnya yang belum berhasil yaitu 0,2 mg/gr barat badan kemudian dikalikan 1/3x untuk P1 yaitu 0,07 mg/gr berat badan , 1x untuk P2 yaitu 0,2 mg/gr berat badan dan 3x untuk P3 yaitu 0,6 mg/kg berat badan.
5. Pengamatan
a. Pembuatan preparat otak
Pembuatan sediaan mikroskopis dilakukan dengan metode paraffin dan pewarnaan Hematoksilin-Eosin. Hematoksilin memiliki sifat pewarna basa, yaitu memulas unsur jaringan yang basofilik, sedangkan eosin memulas unsur jaringan yang bersifat asidofilik. Kombinasi ini yang paling banyak digunakan (Junqueira dan Jose, 2007).
Sampel otak ini lalu difiksasi dengan formalin 10%. Selanjutnya, sampel ini dikirim ke laboratorium Patologi Anatomi FK Unila untuk pembuatan sediaaan mikroskopis jaringan otak
Metode teknik pembuatan preparat histopatologi menurut bagian PA FK Unila (2011):
1) Fixation
a. Spesimen berupa potongan organ otak yang telah dipotong secara representatif kemudian segera difiksasi dengan formalin 10% selama 3 jam.
b. Dicuci dengan air mengalir sebanyak 3-5 kali. 2) Trimming
a. Organ dikecilkan hingga ukuran ± 3 mm.
b. Potongan organ otak tersebut lalu dimasukkan ke dalamtissue cassette.
3) Dehidrasi
b. Berturut-turut organ hepar direndam dalam alkohol 70% selama 0,5 jam, alkohol 96% selama 0,5 jam, alkohol absolut selama 1 jam, dan alkohol xylol 1:1 selama 0,5 jam.
4) Clearing
Untuk membersihkan sisa alkohol, dilakukan clearing dengan xylol I dan II, masing-masing selama 1 jam.
5) Impregnasi
Impregnasi dilakukan dengan menggunakan paraffin selama 1 jam dalam oven suhu 650C.
6) Embedding
a) Sisa paraffin yang ada pada pan dibersihkan dengan memanaskan beberapa saat di atas api dan diusap dengan kapas.
b) Paraffin cair disiapkan dengan memasukkan paraffin ke dalam cangkir logam dan dimasukkan dalam oven dengan suhu di atas 580C.
c) Paraffin cair dituangkan ke dalam pan.
d) Dipindahkan satu per satu daritissue cassetteke dasar pan dengan mengatur jarak yang satu dengan yang lainnya.
e) Pan dimasukkan ke dalam air.
f) Paraffin yang berisi potongan hepar dilepaskan dari pan dengan dimasukkan ke dalam suhu 4-60C beberapa saat.
g) Paraffin dipotong sesuai dengan letak jaringan yang ada dengan menggunakan skalpel/pisau hangat.
h) Lalu diletakkan pada balok kayu, diratakan pinggirnya, dan dibuat ujungnya sedikit meruncing.
7) Cutting
a) Pemotongan dilakukan pada ruangan dingin.
b) Sebelum memotong, blok didinginkan terlebih dahulu di lemari es.
c) Dilakukan pemotongan kasar, lalu dilanjutkan dengan
pemotongan halus dengan ketebalan 4-5 mikron. Pemotongan dilakukan menggunakanrotary microtomedengandisposable knife.
d) Dipilih lembaran potongan yang paling baik, diapungkan pada air, dan dihilangkan kerutannya dengan cara menekan salah satu sisi lembaran jaringan tersebut dengan ujung jarum dan sisi yang lain ditarik menggunakan kuas runcing.
e) Lembaran jaringan dipindahkan ke dalamwater bathsuhu 600C selama beberapa detik sampai mengembang sempurna.
f) Dengan gerakan menyendok, lembaran jaringan tersebut diambil denganslidebersih dan ditempatkan di tengah atau pada sepertiga atas atau bawah.
g) Slideyang berisi jaringan ditempatkan pada inkubator (suhu 370C) selama 24 jam sampai jaringan melekat sempurna. 8) Staining(pewarnaan) dengan Harris Hematoksilin-Eosin
dibilas dengan air mengalir, lalu diwarnai dengan eosin selama maksimal 1 menit. Selanjutnya, didehidrasi dengan alkohol 70% selama 2 menit, alkohol 96% selama 2 menit, dan alkohol absolut selama 2 menit. Kemudian dilakukan penjernihan dengan xylol I selama 2 menit dan xylol II selama 2 menit.
9) Mountingdengan entelan dan tutup dengandeck glass
Setelah pewarnaan selesai, slide ditempatkan di atas kertas tisu pada tempat datar, ditetesi dengan bahan mounting, yaitu entelan, dan ditutup dengandeck glass,cegah jangan sampai terbentuk gelembung udara.
10) Slidedibaca dengan mikroskop
Slidediperiksa di bawah mikroskop cahaya dengan perbesaran 1000x.
b. Pengamatan histologi otak
Variabel dependen berupa degenerasi neuron otak mencit. Skala yang digunakan adalah skala numerik. Dari setiap mencit dibuat preparat otak dan dibaca dalam 5 lapangan pandang dengan perbesaran 400x. Sasaran yang dibaca adalah perubahan jumlah neuron dari organ otak (Tjandra, 2010).
6. Analisis Data dan Pengujian Hipotesis
Hewan percobaan dalam 5 kelompok
Kontrol +
Kontrol
-Perlakuan 1
Perlakuan 2
Perlakuan 3
Hewan siap untuk penelitian (Diberi perlakuan)
Hewan yang telah diberi perlakuan Kontrol + Kontrol -Perlakuan 1 Perlakuan 2 Perlakuan 3
[image:41.595.117.520.67.567.2]Interpretasi hasil perlakuan Kontrol + Kontrol -Perlakuan 1 Perlakuan 2 Perlakuan 3 ? ? ? ? ?
Gambar 7. Bagan Alir penelitian Kontrol + Kontrol -Perlakuan 1 Perlakuan 2 Perlakuan 3
•Kontrol (-): IP MSG 4 mg/gBB
•Kontrol (+): Oral Vit C 0,2 mg/gBB
•Perlakuan 1: IP MSG 4 mg/gBB + Oral Vit
C 0,07 mg/gBB
•Perlakuan 2: IP MSG 4 mg/gBB + Oral Vit
C 0,2 mg/gBB
•Perlakuan 3: IP MSG 4 mg/gBB + Oral Vit
C 0,6 mg/gBB
•Determinasi dan pembedahan
•Pembuatan preparat histologi dan pengamatan
(Skripsi)
Oleh
REZANDI AZIZTAMA
FAKULTAS KEDOKTERAN UNIVERSITAS LAMPUNG
Halaman
DAFTAR GAMBAR ... i
DAFTAR TABEL... ii
DAFTAR GRAFIK ... iii
I. PENDAHULUAN A. Latar Belakang ... 1
B. Masalah Penelitian ... 4
C. Tujuan Penelitian... 4
D. Manfaat penelitian... 4
E. Kerangka Teori ... 5
F. Kerangka Konsep... 7
G. Hipotesis... 8
II. TINJAUAN PUSTAKA A. Monosodium Glutamat... 9
1. Sifat Kimia dan Metabolisme Monosodium Glutamat... 9
2. Efek Biologis Monosodium Glutamat ... 11
B. Vitamin C ... 13
1. Sumber-sumber Vitamin C... 13
2. Biokimia Vitamin C ... 14
C. Otak ... 15
1. Anatomi Otak ... 15
a. Bagian-bagian Otak ... 16
b. Perdarahan Otak... 18
2. Histologi Otak ... 20
a. Neuron ... 21
B. Tempat dan Waktu Penelitian ... 24
C. Variable Penelitian ... 24
D. Definisi Operational ... 25
E. Alat dan Bahan ... 25
1. Alat Penelitian ... 25
2. Bahan Penelitian ... 26
F. Populasi dan Sample Penelitian ... 26
G. Kriteria Inklusi dan Eksklusi... 27
1. Kriteria Inklusi... 27
2. Kriteria Eksklusi ... 27
H. Prosedur Penelitian... 27
1. Pemeliharaan Hewan Uji ... 27
2. Persiapan Hewan Uji ... 28
3. Penyediaan Vitamin C dan Monosodium Glutamate ... 28
a. Pelarutan Monosodium Glutamat ... 28
b. Pengenceran Vitamin C ... 29
4. Pemberian Perlakuan ... 32
5. Pengamatan... 34
a. Pembuatan Preparat Otak... 34
b. Pengamatan Preparat Otak... 37
6. Analisa Data dan Pengujian Hipotesis... 37
IV. HASIL PENELITIAN DAN PEMBAHASAN A. Hasil Penelitian ... 39
1. Perhitungan Jumlah Neuron ... 39
a. Gambaran Histologi Otak Mencit... 39
b. Jumlah Neuron ... 42
2. Uji Normalitas Jumlah Degenerasi Neuron Mencit Jantan Dewasa ... 43
3. Uji Homogenitas Jumlah Degenerasi Neuron Mencit JantanDewasa ... 44
4. Uji0ne-way AnovaJumlah Degenerasi Neuron Mencit Jantan Dewasa ... 44
5. UjiPost HocJumlah Degenerasi Neuron Mencit Jantan Dewasa ... 44
B. Saran... 50
DAFTAR PUSTAKA
DAFTAR GAMBAR
Gambar Halaman
1. Kerangka Teori Penelitian... 6
2. Kerangka Konsep Penelitian ... 7
3. Rumus bangun Monosodium ... 10
4. GlutamatRumus bangun vitamin C... 14
5. Otak potongan median ... 18
6.Circulus arteriosus willisi... 20
7. Bagan Alir penelitian ... 39
DAFTAR TABEL
Tabel Halaman
1. Hasil perhitungan jumlah degenerasi neuron (%) mencit jantan dewasa setelah pemberian MSG sebagai radikal bebas dan vitamin C sebagai
antioksidan ... 43 2. Hasil uji normalitas data jumlah degenerasi neuron mencit pada kelompok
perlakuan ... 44 3. Hasil UjiPost HocDegenerasi neuron mencit jantan dewasa setelah
pemberian MSG sebagai radikal bebas dan vitamin C sebagai
DAFTAR GRAFIK
Grafik Halaman
DAFTAR PUSTAKA
Agarwal, A., Prabakaran, S. & Said, T. 2005. Prevention of oxydative stress injury to sperm. J Androl. 26: 654-60.
Ahluwalia, P., Tewari, K. & Choudary, P. 1996, Studies on the effect of monosodium glutamate (MSG) on oxydative stress on erithrocyte of adult male mice.Toxicol lett. 84: 161-5.
Ardyanto, T.D. 2004. MSG dan Kesehatan : Sejarah, Efek dan Kontroversinya. inovasi Vol 1/XVI/ Agustus. Asean Countries. 2007. Standart of Asean Herbal Medicine. Vol. I, Jakarta.
Asean Countries. 2007. Standart of Asean Herbal Medicine. Vol. I, Jakarta.
Camihort G, Dumm C G, Luna G, Fersese C, 2004 Relathioship between pituitary and Adpdiposa Tissue after Hypothalamic Denervation in the famale rats Circulus arteriosus willisi available at www.ims.uni-stuttgart.d)
DeGroot, J. dan Joseph G. 1997.Neuroanatomi Korelatif. EGC: Jakarta.
Diniz, Y. S., Faine, L. A., Galhardi, C. M., Rodriges, H. G., Ebaid, G. X., Burneiko, R. C., Cicogna, A. C. & Novelli, E. L. 2005. Monosodium glutamate in standart and high-fiber diets : metabolic syndrome and oxydative stress in rats.Nutrition. 21: 749-55.
Eroschencko, V. P. 2003.Atlas Histologi diFiore dengan Korelasi Fungsional. Jakarta. Penerbit Buku Kedokteran EGC. p: 279-287.
Eweka, A. O. 2007. Histologi studies of the effect of monosodium glutamate on the kidney of adults wistar rats. J.Health. 6(2).
Fauzi, T. 2008. Pengaruh pemberian timbal dan vitamin C terhadap peroksidasi lipid dan kualitas spermatozoa di dalam sekresi epididimis mencit jantan (Mus Musculus L) strain DDW. Biomedic. Medan, Universitas Sumatra Utara.
Federer, W. T. 1967. Eksperimental design : Theory and Aplication. Oxford& IBH Publising Co., New Delhi. 544 pp.
FDA. 2011. FDA and monosodium glutamate (MSG) available at http://www.fda.gov/opacom/backgrounders/msg.html.
Garattini, S. 2000. Glutamic Acid, Twenty Years Later. J.Nutrition. 130: 901-909. Geha, R., Beiser, A., Ren, C., Patterson, R., Greenberger, P., Grammer, L., Ditti, A., Harris, K., Saughnassy, M., Yarnold, P., Corrent, J., & Saxon, A. 2000. Review og alleged reaction to monosodium glutamate and outcome of a multicenter double-blind placebo-controlled study. TheJournal of Nutrition. 130: 1058-62.
Giovan Battista, franca, S Calandra, et al. 2003, Modullatory Effec of leptin on Leydig Cell Function of Normal and Hiperleptinemia rats, Reproduktive Guyton, A. dan John E. 2006. Buku Ajar Fisiologi Kedokteran Edisi 11. EGC:
Jakarta.
Halpern, B. 2002. What’ in a name? Are MSG and umami are the same?. Chemical Sense.
Iswara, Arya.2009. Pengaruh Pemberian AntioksidanVitamin CDan E Terhadap Kualitas Spermatozoa Tikus Putih Terpapar Allethrin. Skripsi, Jurusan Biologi universitas andalas.
Junqueira, L. dan Jose C. 2007. Histologi Dasar Teks dan Atlas. Edisi 10. EGC. Jakarta.
Kiss, P., Tamas, A., Lubics, A., Szalai, M., Szalontay, L., Lenguari, I. And Reglodi, D. 2005. Development of neurological reflexes and motor coordination in rats neonatally treated with monosodium glutamate.Journal of Neuroscience Research.
Linderman B, Ogiwara Y, et al. 2002, the discovery of Umami, Chemical senses Univercitydes Sarlandes, Medical falculty.
Martinez, C., Huerta, M., Lopez-perez, S., Garcia-Estrada, J., Luquin, S., Beas-Zarate, C. 2002. Astrositic and microglia cells reactivity induced by neonatal administration of glutamate in cerebral cortex of adult rats.Journal of Neuroscience Research.200-10.
Moore, K.L. dan A.M.R. Agur. 2002. Anatomi Klinis Dasar.Hipokrates. Jakarta. 505 hlm.
Naidu, K. 2003. Vitamin C in human health and desease is still mystery?. Nutrition Journal, 1-10.
Nayanatara, A., Vinodini, N., Damodar, G., Ahamed, B., Ramaswamy, C., Shabarinath & Bath, R. 2008. Role of ascorbic acid in monosodium glutamate mediated effect on testicular weight, sperm morphology and sperm count, in rat testis.Journal of Chinesse Clinical Medicine.3: 1-5. Olney, J, W., Schainker, B. 1969. Glutamat-type hipothalamic-pituitary syndrome
in mice treated with aspartat or cysteated in infancy. Journal of Neural Transmission , Volume 35, Number 3, 207-215, DOI: 10.1007/BF01258952.
Price, S.A. dan L.M. Wilson. 2006. Patofisiologi Konsep Klinis Proses-proses Penyakit Edisi 6.EGC. Jakarta. 734 hlm.
Putz, R. dan Reinhard P. 2006. Sobotta, Atlas Anatomi Manusia jilid 1, edisi 22. EGC: Jakarta.
Siregar, J.H. 2009. Pengaruh Pemberian Vitamin C Terhadap Jumlah Sel Leydig dan Jumlah Sperma Mencit Jantan Dewasa (Mus musculus L) Yang Terpapar Monosodium Glutamat (MSG) Tesis Pascasarjana. Universitas Sumatra Utara.
Sukawan Uke Yohani, 2008, Efek Toksik Monosodium Glutamat (msg) Pada Binatang Percobaan, diakses 6 mei 2009, <http://www.ukip.ac.id/journaldown/ EfekToksikMonosodiumGlutamatMSGPadaBinatangPercobaan.pdf > Tjandra, Aditya. 2010. Pengaruh pemberian dekstrometorpfan dosis bertingkat
terhadap gambaran histopatologis otak tikus. Skipsi.
Urenna, D., Jenni, F. 2005. MSG effect at brain. Journal of Chinesse Clinical Medicine.3: 1-5.
Winarsi. 2007. Antioksidan dan kegunannya. Borobudur. Yogyakarta.
Yamaguchi, S . & Nionomiya, K. 2000. Umami and food palatability. Journal Nutrition. 130: 921S-926S.
Oleh
REZANDI AZIZTAMA
Skripsi
Sebagai Salah Satu Syarat untuk Mencapai Gelar SARJANA KEDOKTERAN
Pada
Fakultas Kedokteran Universitas Lampung
FAKULTAS KEDOKTERAN UNIVERSITAS LAMPUNG
1. Tim Penguji
Ketua : dr. Susianti, M.Sc
---Sekretaris : Prof.Dr.dr. Efrida Warganegara, M.Kes., Sp.MK
---Penguji
Bukan Pembimbing : dr. Khairunnisa Berawi, M.Kes., AIFO
---2. Dekan Fakultas Kedokteran
Dr. Sutyarso, M.Biomed NIP. 195704241987031001
YANG DIINDUKSI MONOSODIUM GLUTAMAT Nama Mahasiswa : Rezandi Aziztama
Nomor Pokok Mahasiswa : 0818011040 Program studi : Pendidikan Dokter
Fakultas : Kedokteran
MENYETUJUI 1.Komisi Pembimbing
Dr. Susianti, M.Sc Prof.Dr.dr. Efrida Warganegara, M.Kes, Sp.MK NIP. 197808052005012003 NIP. 195012231977102001
2. Dekan Fakultas Kedokteran Unila
Penulis dilahirkan di Bandar Lampung pada tanggal 8 Mei 1990, sebagai anak pertama dari dua bersaudara, dari Bapak Adi Erlansyah dan Ibu Rusdiana Dewi.
Pendidikan Sekolah Dasar (SD) diselesaikan di SDN 02 Rawa Laut Bandar Lampung pada tahun 2002, Sekolah Menengah Pertama (SMP) di SMPN 02 Bandar Lampung diselesaikan pada tahun 2005, dan Sekolah Menengah Atas (SMA) di SMAN 02 Bandar Lampung pada tahun 2008.
Puji syukur penulis panjatkan ke hadirat Allah AWT, karena berkat rahmat dan hidayah-Nya skripsi ini dapat diselesaikan.
Skripsi dengan judul “ Pengaruh Pemberian Vitamin C Terhadap Gambaran Histologi Otak Mencit Jantan Dewasa (Mus musculus L) yang Diinduksi
Monosodium Glutamat”adalah salah satu syarat untuk memperoleh gelar sarjana Kedokteran di Universitas Lampung .
Dalam kesempatan ini penulis mengucapkan terimakasih kepada:
1. Bapak Prof. Dr. Ir. Sugeng P. Harianto, M.S., selaku Rektor Universitas Lampung;
2. Bapak Dr. Sutyarso, M.Biomed.,selaku Dekan Fakultas Kedokteran Universitas Lampung;
penyelesaian skripsi ini;
5. Dr. Khairunnisa Berawi, M.Kes., AIFO selaku pembahas yang telah memberikan banyak masukan dan nasehat selama penyelasaian skripsi ini; 6. dr. Muhartono, M.Kes., Sp.PA selaku Pembimbing Akademik;
7. Seluruh dokter dan staf pengajar di Fakultas Kedokteran Universitas Lampung;
8. Bapak dan Ibu Staf Administrasi Fakultas Kedokteran Universitas Lampung; 9. Yang tercinta Papa dan Mama yang tidak henti-hentinya mendoakan saya
dalam setiap waktu dan selalu memberikan semangat kepada saya;
10. Untuk adikku tersayang, Rivandi Arief Harista terimakasih atas doa dan dukungan yang selalu diberikan ;
11. Untuk Nenek tercinta yang selalu mendoakan saya; 12. Untuk semua angkatan 2008 FK UNILA;
13. Terimakasih untuk Ardiansyah WIEN yang sudah menyemangati ; 14. Untuk sahabatku Arienaldo Rahman dan Elza Puspita;
15. Keluarga besarku yang selalu mendukungku dan mendoakanku;
16. Untuk anak INDIGO, Dodi, Rifki, Danisa, Harry, terimakasih atas pengalaman spiritualnya;
Akhir kata, Penulis menyadari bahwa skripsi ini masih jauh dari kesempurnaan, akan tetapi sedikit harapan semoga skripsi yang sederhana ini dapat berguna dan bermanfaat bagi kita semua. Amiin.
Bandar Lampung, Oktober 2012,
