1 BAB I
PENDAHULUAN
1.1. Latar Belakang
Ikan nila merupakan salah satu jenis ikan air tawar yang mempunyai nilai
ekonomis tinggi, dan fluktuasi harganya relatif stabil per kg berkisar Rp. 12.000 –
14.000. Jenis ikanini banyak disukai oleh konsumen dan permintaannya terus
tinggi walaupun banyak jenis ikan budidaya lain sebagai pilihan. Selain itu, ikan
ini mudah untuk dipelihara dan pertumbuhannya relatif lebih cepat.
Pemerintah merencanakan akan meningkatkan produksi ikan nila sebesar
1,25 juta ton pada tahun 2014 atau meningkat rata-rata 27% per tahunnya dengan
total kenaikan sebesar 329% (Poernomo 2009), sehingga perlu diusahakan
budidaya dengan sistem intensif. Di dalam perdagangan internasional ikan ini pun
populer dibudidayakan dengan sistem intensif. Meskipun intensifnya sistem
budidaya,ikan nila tidak terlepas dari serangan penyakit bakterial. Sebagai contoh
bakteri Streptococcosis sp yang dapat menyebabkan kematian pada ikan (Perera
etal. 1994).
Streptococcosis sp akibat infeksi Streptococcus agalactiae merupakan
penyakit padaikan nila yang biasa dihadapi oleh pembudidaya dan dapat
menyebabkan kematian yang tinggi. Serangan bakteri S. agalactiae telah
menyebabkan kematian hingga 60% pada budidayaa ikan nila di Sumatera
Selatan(Yuasa et a, 2008). Penyakit Streptococcosis sp timbul akibat rendahnya
2 pemeliharaan yang buruk dan manajemen pemberian pakan yang kurang baik
sehingga terjadi ketidak seimbangan.
Vaksinasi merupakan upaya penanggulangan penyakit yang murah dan
mudah dilaksanakan. Prinsip penggunaan vaksin adalah untuk meningkatkan daya
tahan inang dengan pertahanan humoral yang bersifat spesifik juga dapat
meningkatkan pertahanan seluler yang bersifat non spesifik. Vaksinasi dapat
dilakukan dengan metode oral, injeksi, dan perendaman (Sheehan et al. 2009).
Salah satu faktor yang menentukan efektifitas vaksin adalah dosis yang
diberikan. Pada penelitian terdahulu (Hastuti 2008), berdasarkan pengamatan titer
antibodi terlihat bahwa vaksin dengan dosis 10µl menghasilkan titer antibodi yang
terbanyak dan lebih stabil dibandingkan dengan dosis 5 dan 15 µl. Oleh karena itu
penelitian ini mencoba untuk mengekstrasi antigen bakteri Streptococcus
agalactiae sebagai vaksin yang diberikan secara oral (cekok) terhadap ikan nila
dan kemudian diamati titer antibodinya.
Proses patogenisitas dari serangan bakteri S. agalactiae baik tipe β-
hemolitik maupun tipe non-hemolitik terhadap ikan nila ini belum diketahui dan
dipelajari pada jaringan dan organ tubuh ikan nila sehingga informasi yang
diperoleh diharapkan dapat bermanfaat dalam upaya pengendalian penyakit
3 1.2 Rumusan Masalah
Berdasarkan latar belakang diatas, maka dapat dirumuskan masalah sebagai
berikut:
1. Apakah aplikasi antigen bakteri Streptococcus agalactiae secara oral
berpengaruh terhadap titer antibodi dan kelulushidupan ikan nila
(Oreochromis niloticus)?
2. Dosis antigen berapakah yang memberikan titer antibodi dan kelulushidupan
yang paling baik pada ikan nila (Oreochromis niloticus) ?
1.3.Tujuan Penelitian
Adapun Tujuan dari pelaksanaan penelitian ini adalah sebagai berikut:
1. Untuk mengetahui pengaruh antigen bakteri Streptococcus agalactiae secara
oral terhadap respon titer antibodi dan kelulushidupan ikan nila (Oreochromis
niloticus).
2. Untuk mengetahui dosis antigen yang paling efektif yang memberikan titer
antibodi dan kelulushidupan ikan nila (Oreochromis niloticus).
1.4. Kegunaan Penelitian
Hasil penelitian ini diharapkan dapat memberikan manfaat dan informasi
bagi penulis sendiri dan masyarakat luas, terutama bagi para pembudidaya ikan
nila (Oreochromis niloticus), khususnya mengenai penanggulangan terhadap
penyakit yang disebabkan oleh bakteri Streptococcus agalactiae melalui upaya
4 1.5.Hipotesis
H0 : Diduga pemberian vaksin antigen bakteri Streptococcus
agalactiae secara oral tidak berpengaruh terhadap titer antibodi
dan kelulushidupan pada ikan nila (Oreochromis niloticus).
H1 : Diduga pemberian vaksin antigen Streptococcus agalactiae
secara oral berpengaruh terhadap titer antibodi dan
i UJI EFEKTIFITAS ANTIGEN BAKTERI Streptococcus agalactiae
SECARA ORAL TERHADAP TITER ANTIBODI DAN KELULUSHIDUPAN IKAN NILA (Oreochromis niloticus)
S K R I P S I
Diajukan sebagai Persyaratan Memperoleh Gelar Sarjana Strata Satu (S1)
Program Studi Budidaya Perairan
Oleh : LIFIA PUTRI AYU NIM : 08930001
JURUSAN PERIKANAN
FAKULTAS PERTANIAN - PETERNAKAN UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH MALANG
ii UJI EFEKTIFITAS ANTIGEN BAKTERI Streptococcus agalactiae
SECARA ORAL TERHADAP TITER ANTIBODI DAN KELULUSHIDUPAN IKAN NILA (Oreochromis niloticus)
S K R I P S I
Oleh : LIFIA PUTRI AYU NIM : 08930001
Skripsi ini disusun guna memperoleh gelar Sarjana Perikanan dari Fakultas Pertanian – Peternakan
Universitas Muhammadiyah Malang
JURUSAN PERIKANAN
FAKULTAS PERTANIAN - PETERNAKAN UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH MALANG
iii HALAMAN PENGESAHAN
NAMA : LIFIA PUTRI AYU NIM : 08930001
JURUSAN : BUDIDAYA PERIKANAN FAKULTAS : PERTANIAN - PETERNAKAN
JUDUL : UJI EFEKTIFITAS ANTIGEN BAKTERI
Streptococcus agalactiae SECARA ORAL TERHADAP
TITER ANTIBODI DAN KELULUSHIDUPAN IKAN NILA
(Oreochromis niloticus)
Skripsi ini telah diterima sebagai persyaratan untuk memperoleh gelar sarjana
Perikanan pada program studi Budidaya Perairan Fakultas Pertanian-peternakan
Universitas Muhammadiyah Malang.
Mengesahkan,
Dekan, Ketua Jurusan,
iv SKRIPSI
UJI EFEKTIFITAS ANTIGEN BAKTERI Streptococcus agalactiae SECARA ORAL TERHADAP TITER ANTIBODI DAN KELULUSHIDUPAN IKAN NILA (Oreochromis niloticus)
Oleh :
LIFIA PUTRI AYU NIM : 08930001
Disetujui :
Dosen Pembimbing I
acc Tanggal : 21 Januari 2013
Hany Handajani S.Pi, M.Si NIP UMM : 110.0309.0406
Dosen Pembimbing II
acc Tanggal : 21 Januari 2013
Drh. Sri Samsundari, MM NIP UMM : 110.8903.0100
Mengetahui Dekan,
v S K R I P S I
UJI EFEKTIFITAS ANTIGEN BAKTERI Streptococcus agalactiae SECARA ORAL TERHADAP TITER ANTIBODI DAN KELULUSHIDUPAN IKAN NILA (Oreochromis niloticus)
Yang dipersiapkan oleh : LIFIA PUTRI AYU
NIM : 08930001
Telah dipertahankan didepan dewan penguji Pada tanggal :………
Dosen Pembimbing I Dosen Pembimbing II
Hany Handajani S.Pi, M.Si Drh. Sri Samsundari, MM NIP UMM : 110.8903.0100 NIP UMM : 110.0309.0406
Dosen Penguji I Dosen Penguji II
Sri Dwi Hastuti, S.Pi, M.Aqua Dr. Ir. David Hermawan MP NIP UMM : 110.9911.0353 NIP : 196405261990031003
Malang,
Universitas Muhammadiyah Malang Fakultas Pertanian – Peternakan
Dekan,
vi SURAT PERNYATAAN
Yang bertanda tangan di bawah ini saya :
Nama : Lifia Putri Ayu
NIM : 08930001
Tempat, tanggal lahir : Malang, 31 Agustus 1990
Agama : Islam
Alamat : Madyoporo G2A/17 RT:07 RW:01 kel. Madyopuro Kecamatan Kedungkandang, Malang
Dengan menyebut nama Allah SWT, saya menyatakan dengan sebenarnya dan sesungguhnya bahwa:
1. Karya Ilmiah ini adalah karya akademik saya asli, yang saya susun berdasarkan dari hasil penelitian yang saya lakukan.
2. Saya tidak melakukan plagiasi, duplikasi dan replikasi dari hasil penelitian orang lain yang menyebabkan karya ilmiah ini tidak otentik
3. Karya ilmiah ini, telah disusun dengan persetujuan dan bimbingan dari Dewan Pembimbing dan telah diuji dihadapan Dewan Penguji Tugas akhir Fakultas Pertanian Peternakan Universitas Muhammadiyah Malang
Demikian surat pernyataan ini saya buat dengan sebenar-benarnya dan saya bertanggung jawab sepenuhnya terhadap pernyataan ini.
Malang, 23 Januari 2013 Mengetahui
Pembimbing Utama Yang Menyatakan
vii KATA PENGANTAR
Assalamua’alaikum Wr. Wb.
Puji syukur kehadirat Allah SWT, karena dengan rahmat dan hidayahNya
penulis dapat menyelesaikan karya ilmiah berupa Laporan Penelitian dengan judul
“Uji Efektifitas Antigen Bakteri Streptococcus agalactiae Secara Oral
Terhadap Titer Antibodi Dan Kelulushidupan Ikan Nila (Oreochromis niloticus)” Skripsi ini disusun dalam rangka menempuh tugas akhir guna
memenuhi persyaratan untuk memperoleh gelar Sarjana Strata Satu di Jurusan
Perikanan Fakultas Pertanian Peternakan Universitas Muhammadiyah Malang.
Penulis menyadari sepenuhnya bahwa skripsi ini dapat terselesaikan berkat
bantuan, motivasi, dorongan dan bimbingan dari berbagai pihak, maka pada
kesempatan ini penulis menyampaikan penghargaan dan ucapan terima kasih yang
sebesar-besarnya kepada :
1. Bapak Dr. Ir. Damat, MP selaku Dekan Fakultas Pertanian Peternakan
Universitas Muhammadiyah Malang
2. Ibu Sri Dwi Hastuti, S.Pi, M,Aqua selaku Ketua Jurusan Perikanan Fakultas
Pertanian Peternakan Universitas Muhammadiyah Malang, sekaligus Dosen
Penguji Utama dan pembimbing lapangan yang telah banyak membantu
dalam penelitian ini
3. Ibu Hany Handajani S.Pi, M.Si selaku Pembimbing Utama yang telah
meluangkanwaktu, memberikan masukan dan arahan selama penyelesaian
laporan akhir, juga yang selalu memotivasi dan menginspirasi, terimakasih
banyak saya sampaikan. bersedia meluangkan waktu untuk memberikan
pengarahan selama penyusunan skripsi ini
4. Ibu drh. Sri Samsundari, MM selaku Dosen Pembimbing Pendamping yang
viii 5. Bapak Dr. Ir. David Hermawan MP selaku Dosen Penguji Pendamping yang
telah memberikan waktu untuk menguji dan memberi masukan dalam
pembuatan laporan
6. Pak Hariyadi, S.Pi., M.Si. selaku Kepala Laboratorium Perikanan yang telah
memberikan fasilitas selama penelitian
7. Sujud sembah dan rasa hormat kepada mama Dra Arumi dan papa Tri
Yuwono S.sos tercinta yang tak kenal lelah untuk melimpahkan kasih
sayangnya, memberikan dorongan dan doanya, yang selalu memotivasi agar
selalu jadi yang terbaik dan menjadi anak yang baik, serta adikku tercinta
Risky Wahyu
8. Tunanganku Pratu Anang Murdianto (BEKANGDAM IX UDAYANA) yang
sudah banyak memberi semangat dan motivasi dalam pembuatan laporan
9. Teman-teman Angkatan 2008, dan teman-teman perikanan UMM semuanya.
10. Ibu Nia (Kedokteran UB), Bapak Joko (Kedokteran UMM) yang banyak
membantu dalam penelitian ini sehingga penelitian dapat terselesaikan
Penulis sangat menyadari penyusunan skripsi ini masih jauh dari sempurna.
Kritik dan saran dari pembaca sangat penulis harapkan, sehingga dapat membantu
dalam penyusunan karya ilmiah berikutnya. Namun penulis sangat berharap
skripsi ini dapat bermanfaat bagi seluruh pembaca.
Demikianlah, mudah-mudahan semua ini dapat bermanfaat khususnya bagi
penulis untuk jalan meretas kehidupan dan masa depan yang lebih baik dan penuh
harapan atas ridho Allah SWT. Amin. Selanjutnya, selama menempuh pendidikan
di Jurusan Perikanan Fakultas Pertanian Peternakan Universitas Muhammadiyah
Malang, apabila ada kekurangan dan kesalahan, penulis menyampaikan
permohonan maaf yang sebesar-besarnya. Terima kasih atas perhatiannya.
Wassalamu’alaikum Wr. Wb.
Malang, 23 Agustus 2013
ix DAFTAR ISI
Halaman
HALAMAN JUDUL ... i
LEMBAR PENGESAHAN ... iii
SURAT PERNYATAAN ... vi
RINGKASAN ... vii
SUMMARY ... viii
KATA PENGANTAR ... ix
DAFTAR ISI ... xiii
DAFTAR TABEL ... xv
DAFTAR GAMBAR ... xvi
DAFTAR LAMPIRAN ... xvii
BAB I. PENDAHULUAN 1.1 Latar Belakang ... 1
1.2 Perumusan Masalah ... 3
1.3 Tujuan Penelitian ... 3
1.4 Kegunaan. ... 3
1.5 Hipotesis ... 4
BAB II. TINJAUAN PUSTAKA 2.1 Ikan Nila(Oreochromis niloticus) ... 5
2.1.1 Klasifikasi dan Morfologi ... 5
2.1.2 Habitat Ikan Nila ... 6
2.1.3 Perkembangbiakan Ikan Nila... 6
2.1.4 Kebiasaan Makan Ikan Nila... ... 7
2.2 Pakan da Pertumbuhan Ikan…... 8
2.3 Bakteri Streptococcus agalactiae ... 9
2.3.1 Klasifikasi dan Morfologi ... 9
2.3.2 Patogenitas ... 11
2.3.3 Bio Ekologi Patoghen... ... 12
2.3.4 Sifat Patogenik dan Tanda Penyerangan... ... 12
2.3.5 Gejala Klinis... ... 13
2.3.6 Antigen Bakteri Streptococcus agalactiae... .... 13
2.3.7 Vaksin dan Vaksinasi... ... 15
2.3.8 Imunogenitas Antigen... 16
2.3.9 Titer Antibodi... ... 17
2.3.10 Antigen... ... 18
2.3.11 Kelulushidupan... ... 18
BAB III. METODOLOGI 3.1 Waktu dan Tempat ... 20
x
3.2.1 Bahan ... 20
3.2.2 Alat ... 21
3.3 Batasan Variabel ... 21
3.4 Metode Penelitian ... 23
3.5 Rancangan Penelitian... 23
3.5.1 Perlakuan ... 24
3.5.2 Denah Percobaan ... 24
3.6 Prosedur Penelitian ... 25
3.6.1 Persiapan Penelitian... ... 25
3.6.2 Pelaksanaan Penelitian... 28
3.6.3 Metode Titer antibodi... ... 29
3.7 Parameter Uji ... 30
4.2.1 Paarameter Utama... ... 30
4.2.2 Parameter Penunjang... ... 30
3.8 Analisa Data... 31
BAB IV. HASIL DAN PEMBAHASAN 4.1 Pembuatan Antigen Streptococcus agalactiae ... 33
4.1.1 Pengadaan Bakteri... ... 33
4.1.2 Kultur Bakteri... ... 33
4.1.3 Ekstraksi Antigen... 34
4.2 Titer Antibodi ... 35
4.2.1 Pemberian Vaksin... ... 35
4.2.2 Pengambilan Darah... ... 37
4.2.3 Pengukuran Titer antibodi... ... 38
4.3 Tingkat Kelulushidupan Ikan Nila (Oreochromis niloticus) ... 45
4.3.1 Sebelum Uji Tantang... ... 45
4.3.2 Setelah Uji Tantang... ... 48
4.4 Kualitas Air ... 55
4.4.1 Suhu ... 56
4.4.2 Derajat Keasaman (pH) ... 57
4.4.3 Oksigen Terlarut (DO) ... 57
BAB V. KESIMPULAN DAN SARAN 5.1 Kesimpulan ... 59
5.2 Saran ... 60
DAFTAR PUSTAKA LAMPIRAN
xi DAFTAR TABEL
Tabel Halaman
1. Bahan yang digunakan dalam Penelitian ... 20
2. Alat yang digunakan dalam Penelitian ... 21
3. Perlakuan (P) Ulangan (U) ... 31
4. Sidik Ragam... 32
5. Jadwal Pemberian Vaksin dan Uji Titer Antibodi ... 37
6. Hasil Uji Titer Antibodi Pertama... ... 39
7. Hasil Uji Titer Antibodi Kedua... ... 42
8. Kelulushidupan Ikan Nila Sebelum Uji Tantang... ... 46
9. Kelulushidupan Ikan Nila Setelah Uji Tantang... ... 47
10. Sidik Ragam Sebelum Uji Tantang... ... 47
11. Analisa Data Sebelum Uji Tantang... ... 49
12. Sidik Ragam Setelah Uji Tantang... ... 51
13. Analisa Data Setelah Uji Tantang... 51
14. Uji BNT Antigen Bakteri Streptococcus agalactiae Secara Oral Terhadap Titer Antibodi Dan Kelulushidupan Ikan Nila (Oreochromis niloticus)……… 52
xii DAFTAR GAMBAR
Gambar Halaman
1. Ikan Nila (Oreochromis niloticus) ... 5
2. Bakteri Streptococcus agalactiae ... 9
3. Denah Percobaan dalam Penelitian ... 24
xiii DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran Halaman
1. Skema Pembuatan Antigen Streptococcus agalactiae ... 64
2. Perhitungan Analisa Sidik Ragam ... 65
3. Data Kualitas Air Selama Penelitian ... 72
4. Dokumentasi Kegiatan... 74
xiv DAFTAR PUSTAKA
Abbas, A.K, dalam trianto, Hernayanti dan Budiyono (2004) Pengendalian Penyakit Pada Ikan Berbasis Imunisasi dan Biosecuriti. Seminar Nasional Penyakit Ikan. Purwokerto.
Achmad Farouq. 2011. Meningkatkan Respon Imun Dan Kelangsungan Hidup Ikan Nila (Oreochromis niloticus) Yang Diinfeksi Streptococcus agalactiae. Skripsi. Departemen Budidaya Perairan. Fakultas Perikanan dan Kelautan. Institut Pertanian Bogor (IPB). Bogor.
Alifudin, 2004.Peningkatan Efektifitas Vaksin Dengan Booster. Institut Pertanian Bogor (IPB). Bogor
Anderson, DP. 1974.Data Statistik BRKP-DKP. Departemen Kelautan dan Perikanan Indonesia. Hal 61-65.
Anonymous, 2010. Mengenal Probiotik. Diakses Pada Tanggal 25 Oktober 2010. http://budidayaperikanan.blogspot.com
Arikunto, H., S. Mortazavi, H. Kazemian. 2004. Prosedur Penelitian Suatu pendekatan Praktek, Vol. 33, No. 1, 45-51 pp. PT Rineka Cipta. Jakarta.
Austin. 2007. Teknologi Budidaya Ikan Nila (Oreochromis niloticus). Karya Ilmiyah. Fakultas Perikanan. IPB. Bogor.
Beisel, 1992 dalam Linder. C. Maria. 1992. Biokimia Nutrisi dan Metabolisme.
Penerbit UI Press. Jakarta
Billroth 1878 dalam Ruliah Asni 2008. Petunjuk Teknis Budidaya Ikan Nila.
Karya Ilmiah. Institut Pertanian Bogor Fakultas Perikanan. Bogor.
Brooks, G. F; j.s. Butel dan S.A. Morse. 2001. Mikrobiologo Kedokteran.
Penerjemah: TIM Mikrobiologi Fakultas Kedokteran Universitas Airlangga. Salemba medika. Jakarta.
Daniswara, 2008. Budidaya Ikan Jilid 1. Direktorat Pembinaan Sekolah Menengah Kejuruan Direktorat Jendral Manajemen Pendidikan Dasar dan Menengah, Departemen Pendidikan Nasional. Jakarta.
xv Fahri. M. 2009. AplikasiProbiotik Untuk Pencegahan Penyakit Di
Lingkungan Tambak. Universitas Brawijaya. Malang.
Gatesoupe 1999 dalam Suryahman 2009. Buku Vaksin dan Kelulushidupan. Salemba. Jakarta. Hal 18
Ghufran, K H M dan Tancung, B A. 2005. Pengelolaan Kualitas Air dalam Budidaya Perairan. Rineka Cipta. Jakarta
Hariati. 1998. Probiotik Akuakultur. Gajah Mada University Press. Yogyakarta.
Hastuti dan Handajani. 2011. Penuntun Praktikum Manajemen Kualitas Air dan Purifikasi. Laboratorium perikanan jurusan perikanan.UMM. Malang.
Irianto, A. 2003. Probiotik Akuakultur. Gajahmada University Press.
Kamiso dan Triyanto. 1990. Diklat Kuliah Penyakit Ikan. Departemen Pertanian Badan Pendidikan Latihan dan Penyuluhan Pertanian. Pendidikan dan Ahli Usaha Perikanan. Jakarta.
Kamiso dan Triyanto. 1992. Kualitas Air untuk Ikan Hias Air Tawar. Penebar Swadaya. Jakarta. Hal 4.
Khairuman dan Khairul A. 2008. Buku Pintar Budidaya 15 Ikan Konsumsi. PT. Agro Media Pustaka. Jagakarsa. Jakarta Selatan.
Khairuman & Amri. 2008. Asal Usul Penyebaran & Klasifikasi Ikan Nila (Orechromis niloticus). Agromedia Pustaka. Jakarta.
Kresno, B.S 2003. Imunologi Diagnosa dan Prosedur Laboratorium. Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia. Jakarta.
Marmono, A., 1992. Rancangan Percobaan Laboratorium. Universitas Jendral Sudirman. Purwokerto.
Powanda dan Biesel, 1982 dalam Linder. C. Maria. 1992. Biokimia Nutrisi dan
Metabolisme. Penerbit UI Press. Jakarta
Prihadi, T.H. 2005. Pengelolaan Budidaya Ikan Nila Secara Lestari di Waduk (Studi Kasus di Perairan Waduk Cirata, Jawa Barut).Disertasi. Sekolah PascaSarjana. IPB. Bogor.
xvi Poernomo. 2009. Budidaya Ikan Nila Dengan Cara Semi Intensif. Tarsito.
Bandung.
Rini dan Anthonius, 2010, Karya Ilmiah. Pakan & Pertumbuhan Ikan. Universitas Diponegoro. Semarang.
Saparinto, C., 2010. Usaha Ikan Konsumsi di Lahan 100 m2. Penebar Swadaya. Jakarta.
Serdati N. 2008. Pengaruh Padat Penebaran Terhadap Pertumbuhan Ikan Nila Gift (Oreochromis niloticus) yang Dipelihara Dalam Wadah Terkontrol. Universitas Tadulako Jurusan Budidaya Perairan. Donggala.
Soeseno. R.S. 1970. Limnologi. Sekolah Perikanan Darat Menengah Atas Bogor.
SNI 7550, 2009. Produksi Ikan Nila (Oreochoromis niloticus bleeker) kelas pembesaran di kolam air tenang. Badan standarisasi internasional Indonesia. Jakarta.
Sumantadinata.K.etc. 1985. Kamus Istilah Budidaya Ikan. Pusat Pembinaan dan Pengembangan Bahasa. Departemen Pendidikan dan Kebudayaan. Jakarta. 61 hal.
Suwandi, U., 1992. Mekanisme Kerja Antibiotika. Cermin Dunia Kedokteran No. 76, 1992
Stickney. R.R. 1979. Principles of Warmwater aquaculture. Jonh Willey & Sons. Inc. New York.
Wahab, Samik dan Soeripto, Noerhajati. 1993. Imunologi III. Gajah Mada
University Press. Yogyakarta.
Wibawan.1989. Pengaruh Penggunaan Dosis Vaksin yang Berbeda terhadap
Kualitas air pada Bak-Bak Pemeliharaan Ikan Nila. Skripsi. Program Studi Manajemen Perairan Fakultas Universitas Brawijaya. Malang hal 78.
Wright, 1981. Dalam Linder. C. Maria. 1992. Biokimia Nutrisi dan
Metabolisme. Penerbit UI Press. Jakarta
