EFEK EKSTRAK ETANOL DAUN BANGUN-BANGUN
(
Plectranthus amboinicus
(Lour.) Spreng) TERHADAP KADAR
NITRO OXIDE PADA TIKUS JANTAN YANG DIINDUKSI
DOKSORUBISIN
SKRIPSI
OLEH:
FURAIDA
NIM 111524077
PROGRAM EKSTENSI SARJANA FARMASI
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
EFEK EKSTRAK ETANOL DAUN BANGUN-BANGUN
(
Plectranthus amboinicus
(Lour.) Spreng) TERHADAP KADAR
NITRO OXIDE PADA TIKUS JANTAN YANG DIINDUKSI
DOKSORUBISIN
SKRIPSI
Diajukan sebagai salah satu syarat untuk memperoleh
Gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi
Universias Sumatera Utara
OLEH:
FURAIDA
NIM 111524077
PROGRAM EKSTENSI SARJANA FARMASI
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
PENGESAHAN SKRIPSI
EFEK EKSTRAK ETANOL DAUN BANGUN-BANGUN
(
Plectranthus amboinicus
(Lour.) Spreng) TERHADAP KADAR
NITRO OXIDE PADA TIKUS JANTAN YANG DIINDUKSI
DOKSORUBISIN
OLEH: FURAIDA NIM 111524077
Dipertahankan dihadapan Panitia Penguji Skripsi Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara
Pada Tanggal: 7 Agustus 2015
Disetujui Oleh,
Dosen Pembimbing I, Panitia Penguji,
Prof. Dr. Urip Harahap, Apt. Prof. Dr. Rosidah, M.Si., Apt. NIP 195301011983031004 NIP195103261978022001
Dosen Pembimbing II, Prof. Dr. Urip Harahap, Apt.
NIP 195301011983031004
Aminah Dalimunthe, S.Si., M.Si., Apt. Drs. Saiful Bahri, M.S., Apt.
NIP 197806032005012004 NIP 195208241983031001
KATA PENGANTAR
Puji dan syukur kehadirat Allah S.W.T atas segala nikmat dan rahmat yang tak terhingga yang senantiasa dilimpahkan-Nya kepada penulis, sehingga
penulis dapat menyelesaikan penelitian dan penulisan skripsi yang berjudul “Efek
Ekstrak Etanol Daun Bangun-Bangun (Plectranthus amboinicus (Lour.) Spreng) Terhadap Kadar Nitro Oxide Pada Tikus Jantan Yang Diinduksi Doksorubisin”. Skripsi ini diajukan sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara. Shalawat dan salam juga penulis panjatkan kepada Rasulullah SAW.
Pada kesempatan ini penulis mengucapkan terima kasih kepada Ibu Dr. Masfria, M.S., Apt Dekan Farmasi Universitas Sumatera Utara yang telah
Penulis mengucapkan terima kasih yang tak terhingga dan penghargaan yang tulus kepada Ayahanda Tanwirman dan Ibunda Ratnawati, yang tiada
hentinya berdo’a dan berkorban dengan tulus dan ikhlas bagi kesuksesan penulis,
untuk kakanda Husain Malagapy, Armiani, Anna Widiawati dan Andi Saputra serta FManagement dan teman-teman yang selalu setia memberi do’a, dorongan dan semangat kepada penulis dalam penyelesaian penulisan skripsi ini.
Penulis menyadari bahwa skripsi ini masih banyak kekurangan, oleh karena itu penulis mengharapkan kritik dan saran yang bersifat membangun demi kesempurnaan skripsi ini. Akhir kata penulis berharap semoga skripsi ini dapat bermanfaat bagi ilmu pengetahuan khususnya dalam bidang farmasi.
Medan, Agustus 2015 Penulis,
Furaida
EFEK EKSTRAK ETANOL DAUN BANGUN-BANGUN
(Plectranthus amboinicus (Lour.) Spreng) TERHADAP KADAR
NITRO OXIDE PADA TIKUS JANTAN YANG DIINDUKSI DOKSORUBISIN
ABSTRAK
Doksorubisin adalah golongan antrasiklin yang digunakan pada pengobatan kanker, namun penggunaannya terbatas karena menyebabkan kardiotoksisitas yang diduga akibat peningkatan nitrit oxide (NO) yang diinduksi doksorubisin. Daun bangun-bangun (Plectranthus amboinicus (Lour.) Spreng) famili Lamiaceace adalah tanaman yang memiliki potensi antioksidan sehingga memperlambat atau mencegah proses oksidasi dan menghentikan kerusakan akibat radikal bebas. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui efek pemberian ekstrak etanol daun bangun-bangun terhadap kadar nitrit NO plasma darah yang diinduksi doksorubisin.
Penelitian ini meliputi pengujian pada hewan dan pengukuran kadar NO plasma hewan. Kadar NO plasma diukur dalam bentuk nitrit dan nitrat menggunakan pereaksi griess secara spektrofotometri UV-Vis pada panjang gelombang 540 nm. Penelitian ini menggunakan 5 kelompok perlakuan, yaitu kelompok blanko, kelompok kontrol negatif (CMC 0,5 %), kelompok doksorubisin, kelompok ekstrak etanol daun bangun-bangun dan kelompok ekstrak etanol daun bangun-bangun + doksorubisin. Pada hari ke tujuh diambil darah dan jantung tikus. Gambaran jaringan jantung diamati dengan menggunakan hematoxilin eosin.
Hasil pengukuran dengan spektrofotometer UV-Vis menunjukkan peningkatan kadar nitrit dan nitrat plasma darah secara signifikan (n = 3, p < 0,05) kelompok yang diinduksi doksorubisin (kadar nitrit 6,45612 ± 0,34309 µg/ml dan kadar nitrat 6,77500 ± 1,14485 µg/ml) dibandingkan dengan kelompok blanko (kadar nitrit 3,14092 ± 0,09518 µg/ml dan kadar nitrat 3,56952 ± 0,14537 µg/ml). Pemberian ekstrak etanol daun bangun-bangun menunjukkan penurunan kadar nitrit dan nitrat plasma darah yang signifikan (n = 3, p < 0,05) pada kelompok yang diberikan ekstrak etanol daun bangun-bangun + doksorubisin (kadar nitrit 4,67975 ± 0,14537 µg/ml dan kadar nitrat 4,90180 ± 0,14537 µg/ml) dibandingkan dengan kelompok yang diinduksi dengan doksorubisin.
Gambaran histopatologi jantung dengan pewarnaan hematoxilin eosin tidak tampak kerusakan pada kelompok blanko, kelompok kontrol negatif dan kelompok perlakuan, sel otot jantung normal. Pada kelompok yang diberikan doksorubisin tampak kerusakan yaitu perdarahan interstitial dan nekrosis. Pemberian ekstrak etanol daun bangun-bangun + doksorubisin menunjukkan perbaikan pada histopatologis otot jantung dibandingkan dengan kelompok yang diinduksi dengan doksorubisin.
Berdasarkan hasil penelitian dapat disimpulkan bahwa pemberian ekstrak etanol daun bangun-bangun pada tikus yang diinduksi doksorubisin dapat menurunkan kadar nitrit dan nitrat plasma tikus jantan dan mempengaruhi perubahan gambaran histopatologis kerusakan otot jantung.
EFFECT OF ETHANOL EXTRACT OF BANGUN-BANGUN
(Plectranthus amboinicus (Lour.) Spreng.) LEAVES ON BLOOD
NITRIC OXIDE INDUCTED WHITE RAT BY DOXORUBICIN
ABSTRACT
Doxorubicin is one of anthracycline class used in cancer treatment, but its use is limited due to its cardiotoxicity that is caused by increased nitric oxide (NO) level. The leaves of Plecranthus amboinicus (Lour.) Spreng of the family of the family Lamiaceace has antioxidant property which can delay or inhibit oxidation so that prevent the cell damage caused by free radicals. This study aimed to determine the effect of ethanol extract of bangun-bangun leaves on blood nitric oxide level in doxorubicin inducet rat.
This research included animal testing and the form of nitrite and nitrate using the Griess reagent by UV-Vis spectrophotometry at wavelength 540 nm. This study used 5 groups, blank group, control negative group (0.5 % CMC), doxorubicin group, ethanol extract of bangun-bangun leaves group and ethanol extract of bangun-bangun leaves + doxorubicin group. In seventh day taken blood and rat heart. The image of heart tissue was observed using hematoxiline-eosine staining.
Measurement results by UV-Vis spectrophotometer showed significant increased of blood plasma nitrite and nitrate level (n = 3, p < 0.05) in doxorubicin-induced group (nitrite level 6.45612 ± 0.34309 µg/ml and nitrate level 6.77500 ± 1.14485 µg/ml) compared to the blank group (nitrite level 3.14092 ± 0.09518 µg/ml and nitrate level 3.56952 ± 0.14537 µg/ml). Ethanol extract of bangun-bangun leaves showed signivicant decresed of blood plasma nitrite and nitrate level (n = 3, p < 0.05) in group given with ethanol extract of bangun-bangun leaves + doxorubisin (nitrite level 4.67975 ± 0.14537 µg/ml and nitrate level 4.90180 ± 0.14537 µg/ml) compared to the group induced by doxorubicin.
Histopathologi of heart with hematoxylin eosin staining showed no damage to the blank group, control negative group and treated group, normal heart muscle cells. The group given doxorubisin appear damage interstitial hemorrhage and necrosis. In group given ethanol extract of bangun-bangun leaves + doxorubisin an improvement in cardiac muscle histopathologic.
Based of the research it can be concluded that ethanol extract of bangun-bangun leaves can decrease blood plasma nitrite and nitrate level and histopathological change of heart muscle damage in doxorubicin-induced rats. Keywords: Doxorubicin, bangun-bangun leaves, plasma NO, Griess reagent,
DAFTAR ISI
Halaman
JUDUL ... i
LEMBAR PENGESAHAN ... iii
KATA PENGANTAR ... iv
ABSTRAK ... vi
ABSTRACT ... vii
DAFTAR ISI ... viii
DAFTAR TABEL ... xii
DAFTAR GAMBAR ... xiii
DAFTAR LAMPIRAN ... xiv
BAB I PENDAHULUAN ... 1
1.1Latar Belakang ... 1
1.2Perumusan Masalah ... 3
1.3Hipotesis ... 4
1.4Tujuan Penelitian ... 4
1.5Manfaat Penelitian ... 5
1.6Kerangka Pikir Penelitian ... 6
BAB II TINJAUAN PUSTAKA ... 7
2.1 Uraian Tumbuhan ... 7
2.1.1 Sistematika Tumbuhan ... 7
2.1.2 Nama Daerah ... 7
2.1.4 Kandungan Kimia Tumbuhan ... 8
2.1.5 Khasiat Tumbuhan ... 9
2.2 Uraian Kandungan Kimia Tumbuhan ... 9
2.2.1 Alkaloid ... 9
2.2.2 Flavonoida ... 9
2.2.3 Saponin ... 10
2.2.4 Tanin ... 10
2.2.5 Glikosida ... 11
2.2.6 Glikosida Antrakuinon ... 11
2.2.7 Steroid/Triterpenoid ... 11
2.3 Doksorubisin ... 12
2.4 Nitrogen Monooksida ... 13
2.5 Spektrofotometri UV Visible ... 14
2.6 Pereaksi Griess ... 16
BAB III METODE PENELITIAN ... 18
3.1 Alat-alat ... 18
3.2 Bahan-bahan ... 19
3.3 Prosedur Pembuatan Simplisia ... 19
3.3.1 Pengumpulan Bahan Tumbuhan ... 19
3.3.2 Identifikasi Tumbuhan ... 19
3.3.3 Pembuatan Simplisia ... 19
3.4 Pemeriksaan Karakteristik Simplisian dan Ekstrak ... 20
3.4.1 Pemeriksaan Makroskopik dan Organoleptik... 20
3.4.3 Penetapan Kadar Air ... 20
3.4.4 Penetapan Kadar Sari Larut Dalam Air ... 21
3.4.5 Penetapan Kadar Sari Larut Dalam Etanol ... 22
3.4.6 Penetapan Kadar Abu Total ... 22
3.4.7 Penetapan Kadar Abu Tidak Larut Dalam Asam ... 22
3.5 Skrining Fitokimia Simplisia ... 23
3.5.1 Pemeriksaan Flavonoid ... 23
3.5.2 Pemeriksaan Alkaloid ... 23
3.5.3 Pemeriksaan Saponin ... 23
3.5.4 Pemeriksaan Tanin ... 24
3.5.5 Pemeriksaan Glikosida ... 24
3.5.6 Pemeriksaan Steroid/Triterpenoid ... 24
3.6 Pembuatan Ekstrak Etanol Daun Bangun-bangun... 25
3.7 Pembuatan Pereaksi ... 25
3.7.1 Pembuatan Suspensi Na CMC 0,5% ... 25
3.7.2 Pembuatan Suspensi Ekstrak Etanol Daun Bangun bangun 5 % ... 26
3.7.3 Pembuatan Pereaksi TCA 20% b/v ... 26
3.7.4 Pembuatan Larutan Asam Asetat Glasial 15% b/v .... 26
3.7.5 Pembuatan Pereaksi Griess ... 26
3.7.5.1 Pembuatan Pereaksi Asam Sulfanilat 1% b/v. 26 3.7.5.2 Pembuatan Pereaksi NED 0,1% b/v ... 26
3.8 Penyiapan Hewan Percobaan ... 26
3.9 Perlakuan Hewan Percobaan... 27
3.11 Pengukuran Kadar Nitrat dan Nitrit Pada Plasma ... 28
3.11.1 Pembuatan Larutan Induk Baku Nitrit ... 28
3.11.2 Penentuan Panjang Gelombang Maksimum Nitrit Baku ... 28
3.11.3 PenentuanWaktu Kerja Nitrit Baku ... 29
3.11.4 Penentuan Kurva Kalibrasi Nitrit Baku... 29
3.11.5 Pengukuran Kadar Nitrit Dalam Plasma ... 29
3.11.6 Pengukuran Kadar Nitrat Dalam Plasma... 29
3.12 Pengambilan Organ Jantung Hewan Uji ... 30
3.13 Pemeriksaan Histopatologi Organ Jantung ... 30
3.14 Analisa Data ... 32
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ... 34
4.1 Hasil Identifikasi Tumbuhan... 34
4.2 Skrining Fitokimia Simplisia Daun Bangun-bangun ... 34
4.3 Karakterisasi Simplisia Dan Ekstrak Daun Bangun-bangun 34 4.4 Hasil Pengukuran Kadar Nitrat dan Nitrit Dalam Plasma Darah ... 37
4.5 Pemeriksaan Histologi Organ Jantung Tikus Putih ... 41
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN ... 44
5.1 Kesimpulan ... 44
5.2 Saran ... 45
DAFTAR PUSTAKA ... 46
DAFTAR TABEL
Tabel Halaman
4.1 Hasil Pemeriksaan Skrining Fitokimia Simplisia Daun
DAFTAR GAMBAR
Gambar Halaman
1.1 Diagram Kerangka Pikir Penelitian ... 6 2.2 Skema Reaksi Diazotasi ... 17 4.3 Grafik Kadar Nitrat dan Nitrit dalam Plasma ... 38 4.4 Gambaran histologi jantung tikus dengan pewarnaan
Hematoxylin dan Eosin pada berbagai perlakuan
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran Halaman
1 Bagan Kerja Penelitian ... 50
2 Rekomendasi Persetujuan Etik Penelitian Kesehatan ... 51
3 Hasil Identifikasi Tumbuhan... 52
4 Gambar Daun Bangun-bangun ... 53
5 Gambar Simplisia Daun Bangun-bangun... 54
6 Hasil Pemeriksaan Mikroskopik Daun Bangun-bangun ... 55
7 Gambar Alat-alat yang Digunakan ... 56
8 Perhitungan Hasil Penetapan Kadar Air Serbuk Simplisia Daun Bangun-bangun ... 58
9 Perhitungan Hasil Penetapan Kadar Sari Larut dalam Air Serbuk Simplisia Daun Bangun-bangun ... 59
10 Perhitungan Hasil Penetapan Kadar Sari Larut dalam Etanol Serbuk Simplisia Daun Bangun-bangun ... 60
11 Perhitungan Hasil Penetapan Kadar Abu Total Serbuk Simplisia Daun Bangun-bangun ... 61
12 Perhitungan Hasil Penetapan Kadar Abu Total Larut Asam Serbuk Simplisia Daun Bangun-bangun ... 62
13 Contoh Perhitungan Volume Suspensi Ekstrak dan Larutan Doksorubisin yang Diberikan pada Hewan ... 63
14 Kurva Panjang Gelombang Maksimum Natrium Nitrit Baku ... 64
15 Tabel Operating Time Natrium Nitrit Baku... 65
16 Kurva Kalibrasi Natrium Nitrit Baku ... 66
17 Perhitungan Persamaan Regresi Kurva Kalibrasi Nitrit... 67
