PERAN IHK PD KANKER(POI)

(1)

PERAN

IMMUNOHISTOKIMIA (IHK)

PADA KANKER

(2)

PENDAHULUAN

• Kanker merupakan penyakit yang masih

ditakuti

• Ketakutan bisa difahami karena :

- Susah dicegah/diprediksi

- Diagnosis pasti sering susah ditegakkan

- Penyembuhan yang belum menjanjikan

(3)

PENDAHULUAN

• Pemeriks.histopatologis selama ini :

• Pengecatan HE

• Pengecatan histokimia

(4)

PENDAHULUAN

Tujuan : untuk menunjukkan peran IHK pada

(5)

PENDAHULUAN

• Awal mula pem.IHK

• _{Definisi IHK}

• _{Setiap sel memiliki protein spesifik}

• _{Memisahkan protein spesifik}

• _{Membuat antibodi spesifik}

• _{Memanfaatkan Ab sp.utk marker sel}

(6)

PENDAHULUAN

• _{Perkembangan :}

• _{Sbg sel marker}

• _{Enzim marker}

• _{Hormon marker}

• _{Reseptor marker}

• _Ig.marker

• _{Molekuler/gene marker}

(7)

PEMBUATAN ANTIBODI

1. INYEKSI ANTIGEN KETIKUS ,

2. LIMFOSIT B DIDAPAT DARI LIMPA TIKUS & DIGABUNG DENGAN SEL MIELOMA 3. SEL HIBRID DIKEMBANGKAN DG TRANPL.ANTASI DLM CAV.PERITONEAL

TIKUS YG SINERGIK ATAU MEDIUM KULTUR

(8)

DASAR PEMIKIRAN

Didalam/pada sel terdapat berbagai macam struktur protein yang spesifik baik tingkat selular maupun

tingkat molekuler.

 Contoh protein spesifik selular :

pertanda sel : LCA , Vimentin , CK , CD 20 , CD 3 , Desmin, dll

 Contoh protein spesifik molekuler : RE, RP ,

Her 2 , p53, Bcl 2 dll

(9)

DASAR PEMIKIRAN

• _{Kalau dapat diperoleh antigen spesifik yang}

murni maka akan didapat antibodi(Ab) spesifik terhadap antigen tersebut (selanjutnya Ab akan diproduk oleh pabrik)

• Pengecatan thd ikatan Ag-Ab tsb dapat

dilakukan apabila Ab primer tsb dapat dilabel atau sudah berlabel

(10)

PRINSIP PENGECATAN IHK

• Ag.spesifik diikat oleh Ab spesifik yang

berlabel

Label tsb kemudian di cat dg cat chromogen



langsung ( direct )

• _{Bila Ag spesifik diikat oleh Ab.spesifik yang tak}

berlabel

Ikatan tsb diikat oleh antibodi non spesifik

yang dapat dilabel



cat dgn chromogen

(11)

PRINSIP PENGECATAN IHK

• _{IHK ada 2 cara : IMF dan IME/P}

• _{Label ada 2 macam : - fluorescent ( IMF )}

- enzym / peroks. ( IME/P)

• Label fluorescent tak perlu dicat lagi

(12)

PRINSIP PENGECATAN IHK





Ag. = segitiga biru , Ab.prim = canggah merah , Ab.sek.= canggah biru Avidin = silang kuning , biotin = segitiga hijau , label = lingkaran coklat

direk indirek

(13)

BEDA IMF dan IME

• Mikroskop medan gelap

• Slide tak tahan lama

• Harus segera difoto

• Jaringan tak jelas

• Terutama utk kulit & ginjal

• IMUNOENZIM/PEROKS

• Proses : Embeding

• Bahan tak harus segar

• Label : peroksidase

alkalin fosfatase

• Mikroskop cahaya

• Slide tahan disimpan lama

• Tak harus segera difoto

• Jaringan tampak jelas

(14)

SYARAT BAHAN UTK IHK

• Prosesing jaringan harus standard

• _{Fiksasi buffer formalin / Bouin}

• _{Panas tak boleh lebih dari 65° C}

• _{Titik lebur ( TL ) parafin < 60° C}

• _{Objek glass yang dipakai tak boleh diberi}

(15)

MANFAAT IHK

• Sel marker mis.pada kasus tumor anaplastik

• Penyempurnaan dx. mis. pada LMNH

• _{Penentuan metastasis kecil}

• _{Tumor marker mis. PSA , Thyroglob.}

• Membedakan hiperplasi dg neoplasma…

mis. Hiperplasia folikular vs LMNH

• Mencari reseptor ataupun onkogen

(16)

KAPAN DAPAT MEMANFAATKAN IHK

• Kalau tahu jenis protein yg mau dideteksi

• Kalau tahu protein tersebut lokasinya dimana

• Kalau pabrik sudah membuat Ab primernya

• _{Kalau lab.PA punya kemampuan pem.IHK}

(17)

CONTOH APLIKASI

• _{Di dx :}_{tu. ganas}

anaplastik /

undifferentited…???

• _{Maka perlu dilakukan}

(18)

CONTOH APLIKASI

• _{Didiagnosis suatu kasus sbg}

LMNH

dg pengecatan HE

• _{Untuk klasifikasi menurut}

(19)

SEL B ( CD 20 ) + & SEL T ( CD 3 ) +

PADA KELENJAR LIMFE NORMAL

(20)

LMNH DG Bcl 2 POSITIP

(21)

CONTOH APLIKASI

(22)

CONTOH APLIKASI

• Di dx : Ca mama dgn dif. jelek ; dilakukan pem.IHK dgn Ab. ER , PR & Her 2

• Kesimpulan :

(23)

CA.MAMMA DG ER POSITIP

(24)

CA.MAMMA DG PR POSITIP

(25)

CA.MAMMA DG HER 2 POSITIP

(26)

CONTOH APLIKASI

• _{Di dx :}

_{Adenokars recti}

• Dilakukan pem IHK

dgn Ab. EGFR & K-RAS

• _Interpr.

• EGFR dijumpai pada 80% kanker

colorectal



terapi cetuximab responsif

• EGFR+



agresif , potensi

invasif/metastasis & prognosis jelek

(27)

CONTOH APLIKASI

CK EMA VIM LCA S100 HMB45

Carcinoma + + - - -/+

-Melanoma - - + - + +

Limfoma - -/+ + + -

-Anaplastic round cell tumor in adult

(28)

CONTOH APLIKASI

LCA VIM CK DES MSA NF S100 NSE Leu7

Limfoma/

Round cell tumor in childhood

LCA=leucocyt common antigen,VIM=vimentin,CK=cytokeratin,DES=desmin,

(29)

GUIDE TO CHOICE OF ANTIBODY PANEL

FOR DIFFICULT CASES

Carcinoma vs Lymphoma EMA,CK,CEA vs LCA

Carcinoma vs Melanoma EMA,CK,CEA vs S100

Lymphoma vs Oat cell ca LCA vs NSE

Metastatic Ca vs Astrocytoma EMA,Keratin,CEA vs GFAP

Prostat vs Bladder Ca PAP,PSA

Carcinoma vs Mesotelioma CEA

(30)

POLA IHK PD KANKER PROSTAT & LESI JINAK

Kanker prostat Prostat jinak

* Note : AMACR dapat + pada PIN,hiperplasia adenoma atipik/adenosis & nefrogenik adenoma