Percobaan pendahuluan Analisa Vitamin B-Kompleks Secara Kromatografi Lapisan Tipis Repository - UNAIR REPOSITORY

(1)

BAB X

5OTJAUAH FUBfcAKA

1. TIHJAUAff TffiTTAng VITAMIN B-KOFtPLKKfl.

Dari ragi, knlit ari beraa dan aumber-auriber alam lainnya dapat dlparolah vitamin B yang larut dalam air*

Dalam aadlaan faraaai vitamin B-komplekajang digunakan, blaaanya merupakan campuran yang terdiri

atas % Tiamina Hidroklorida* Hiboflavina, Piridokel

na Hidroklorida, Sianokobalamina, ETlkotlnamlda dan Kalaium pantotenat.

Saparti halnya golongan vitamin-vitamin la*

innya, maka vitamin B-kospleka ini Juga aangat dibji tubkan olah tubuh. Hal ini torlihat bila tubuh kekg

rangan vitamin B-kompleka maka akan tampak gejala-

gejala timbulnya beberapa panyakit miaalnya t beri-beri, dermatitia, pellagra, pemieioue anemia, po* lineuritia dan eebagainya.

Gejala-gejala tereebut akan hilang bila tubuh sttdah

cukup mandapat vitamin B-kompleka yang diperlukan.

(2)

1-1* glaaina HidrokXorldq, (2i)

3-(4- «Jnlno- 2- a«tll piriaidiX- 5- aotil)- 4-

aetiX- 5»/^ - hldrok«l atiX tiaftoXiua- klorlda hidroklorida.

JKuraa aoXakul * 0 ^ 03.OX.HOI

Bobot aoXakul t 337*28

Naaa lain i Vitamin B1

Aneurin Hidroklorida

aifatsifat i 8«rt>uk putihf ban khas« ra*a

-pahit* bila dlpanagkan baa ka~ ce^e.

KoXarutan « Larut daXea 1 bagian air*

da-Xaa 18 bagian gXlsarol dan da*

laa 100 baglan atanoX 952*

tl-dak larut dalaa 9t«r, asaton *

kXorcfor® dan bansan*

?an«an (19 3 5) »a»barikan naaa Anaurin

i/ untuk cuitlpollnaurltls vitamin dan tamyata

na lnl dlpakal aaeara Xuaa* aadangfcan dl Aaa-

(3)

3

Vitaoin banyak terdapat pada kuXit a-

ri boras9 gandua dan pada ragi. Kaoang tanah -

dan kapri yang nasak Jaga aarupakan auabar rl*

taain B1, sadang dalaa otfgan-organ binatang, vj,

taain tardapat dalaa hati, ginjaX dan seba-

gainya (9« 16 )•

Kaknrangan vitamin yang parah dapat

menyababkan penyakit beri-barif aadangkan penyfc

kit yang labih ringan yang disebabkan karana k£

kurangan vitanin B1« \mussya ditandai dangan p£ rabahan pada siatim aaraf , kejang-kajang pada £ tot dan Xain-Xain (8t 19).

Polineuritie earing dijumpai pada paainua alko- hoi yang kronis dan pada vanita yang ha&il (8)*

1*2* RlbofXavina. (21) i fH2CH

h o-c h

I HO-OB

I HO-CH

I CBa

I 2

(4)

Rumus aolekul

Bobot jenla : 376,36 Nam* lain

c17H2 0 \ °6

Sifat-clfet

: Vitamin B2

Laktoflarina

Ovoflarlna

Kepatoflavina

; Serbuk* warna kuning aarapai k& ning jingga* bau lemah# raoa a

gak pahit.

Kelaruton : larut dalam 3000 sampal 20000 baglan air*

4

tldak larut dalam klorofona *

•ter# aseton* alkohol dan ben-

sen*

Vitamin Bg merupakan faktor yang pan-ting untuk pertumbuhan badan dan berguna untuk

melindungl tubuh terhadap pellagra (9)« Kekurangan vitamin B2 akan menghambat pert urn-

buhan badan* menyebabkan dermatitis dan menim-

bulkan suatu gejala yang mirip pellagra oleh karena itu dinamakan "pellagra sine pellagra” yang kelainannya terutama ditandal oleh luka-

(5)

Plrldokalna Hidroklorida* (21)

HOI

2* a*til- 3* hidroksi -4,5 - bis (hidrokai ma-

til) piridixsa hidroklorida*

Romas molakul * 0Q H^ H0^ « HCl Bobot molakul s 2 0 5,6*

Hama lain t Vitamin B,

Adarmin Hidroklorida

Piridoksol Hidroklorida

Sifnt-aifat t Sorbtik, vama putih, tidak baj*

batu

Eelarutan * Larut dalaa 5 bagian air,

da-Ian 100 bagian atanol 95£, la-rut dalam prop 11 on glikol,

ti-dak larut dalaa klorofom dan

•tar.

Vitamin Bg banyak tardapat pada ragi dan bora a, di dalam bahan makanan vitamin B&

yang didapatkan morupakan oampuran dari piri-

dokslna, piridoksal dan piridoksamin (3,5)*

Vitamin akan melindungi tubuh manusia terha-

(6)

Slanofcobalaaina. (21)

HO ™ OH.?

Huau* aolakul t 06? Co »14 0n# P

Bobot aolekul » 1357*44 Hama lain s Vitamin B^g

L.L.D# faktor

m (Laktobaallua Laktla Domir

faktor)

Ekatrinsik faktor

(7)

12

31fat*alfat : Sarbuk, warna aarah ungu* tldak

4 #

barbau, tldak baraaat aangat groakopla

rut dalaa atanol 95%$ tldak la*

rut dalaa klorofora, a tar dan *

aaaton,

Pada tahun 1946 dari hatt dapat dllaolaal

auatu bahaa barbantuk krlstal race aaapunyai ak-

tlfltaa antiparniaioua anaala dan aanyawa inllah

yang aakarang dikanal aabagal vltaaln S^2* Vitamin aarupakan bahan alaa partaaa yang di,

kataaukan aangandung kobalt dan aarupakan

aanya-va dangan warna aarah galap* Suatu gugua alanlda

6 — «

tarlkat dangan atom logaa, karana ltu aanyawa 1*

nl dlaabut Juga sianokobalaaln (6)*

Vitamin aarupakan aalah aatu faktor

taabahan yang panting untuk panyaabuhan anaala

karana vltaaln ini aarupakan faktor yang panting dalaa proaaa paabantukan aal-aal darah aarah dan

dangan dosla hanya tlga aaapal anaa alkrograa

dah afaktlf <8, 19).

JCalarutan : larut dalaa HO baglan air# la*

1.5. MUcatlnaaida. {21}

-CO-NH2

(8)

Rumua oolakul : 0

Bobot molakul : 122,12 Nama lain : Klaalnamida

Vitamin

Vitamin P.P. (-Pallagra Pra~ vantiva)

Nlkotlnlk aald amida*

4 4

Sifat-alfat t Sarbuk, waraa putlh, tidak ba£

bau* raaa pahit*

4

Kalarutan : larut dalam 1 bagian air* da*

lam 2 bagian atanol 95$ dan da

lam 10 bagian gllsarol* aukar

larut dalam atar.

4

Nlkotlnamlda banyak tardapat pada hatl9

ginjnl dan ragi*

Kakurangan Nlkotlnamlda dapat mangaklbatkan » tlmbulnya panyakit pallagra yang gajala-gajala

nya antara lain kullt manjadi hltam dan tarla- paaf radang pada lldah yang karaktariatlk dan

•abagalnya (6» 19).

1.6. ?«at9tan»&» <21)

H0CH2 - C - CHOR * CONH - CH2 - 0H2 - C02 CH3

* 4

Kalalum 0 (+)~ dihidrokal-^ f

dina-til butiril)- ft> - alaninat.

(9)

14

Rusnia molekul : {C^ B16CQ5,2 Ca Bobot molekul s 476,53

Jfaoa lain 2 Pantholln

9 4

Slfat-alfat i Serbuk, warna putlh9 tldak bar*

4 #

-bau, raaa pahlt# agak hlgrosko*

pis.

#

Kelarutan : Larut dalaa 3 baglan air, larut dalaa gliserol, tldak larut da-

laa etanol 95$, klorofora dan etar*

Kalelun pantotenat banyak terdapat dalaa

©rgan-organ blnatang terutama pada hatl dan gl& Jal* Kullt arl darl beras juga merupakan suober

yang banyak aangandung kalslum pantotenat (le)# Kalaluzs pantotenat dlaebut Juga aebagal * chick

antldermatltla Factor * (£)•

Oejala-gejala yang tlrabul blla tubuh kekurangan

4

rltanln Ini antara lain denaatltle, kehllangan

warna pada rambut dan sobagalnya (19 )•

2. TIJJJAUAJJ TSiITAMQ 2AT LOKAL AKESTKSI.

Pada eedlaan yang berbentuk larutan obat sun*

tlk, blasanya dltaabah suatu sat yang berkaolat sebagal peraatl raaa aetempat atau leblh dlkenal dangan

(10)

Zat-»at lokal anaataai yang blaaa digunakan niaalnyai

Prokaina Hidroklorida dan Lidokaina Hidroklorida,

2.1. ErgltfiM, H tdcrtflorUi.

(21)

< W 2 * - CH2 - 0H2 - 0 - f<Z>*H2 0

. HCl

2- dlatll amino atil « p • amino banaoat

hidro-klorida*

Humua molakul 2 Cy H2q N^ 0^

Bobot molakul s 272#77 Nama lain : Novokaina

HCl

3ifat~aifat

Kalarutan

Alokaina

Ethokaina hidroklorida

s Sarbuk, warna putih, tidak ber- bau* raaa agak pahit dan tabal« t Larut dalam 1 bagian air9 larut

dalam atanol 95$§ aukar larut - dalam atar dan kloroform.

2.2. M<bKito» HiteoMLffiriia*

(11)

16

Ruaus aolekul t

Bobot nolekul x 270,82

Nana lain $ Lignokaina Hidroklori&a

Xylokalnc Hidroklorida*

Sifat-slfat s Serbuk, tldak borbau, rasa agak

pnblt dlsertal raea tebal*

Kelarufcan t Larut dalaa 0,7 baglan air,

da-laa 1,5 baglan etanol 95#* au-

kar larut dalaa klorofora, tl-dak larut dalaa otor#

Lidokaina nOalah lokal anestesl yang «e-

karong dlgunakan seeara luas sebagal penggantl prokalna (15).

3# TXHJAUAH ffECTgAEG KKOflATOSRAFI LAPI5AN TIPIS* (1,20)

Kroaatografi lap! can tipi a adalah suatu cara yang digooakan untuk aeaisahkan konponen yang akan aenberikan basil yang cukup aeaaaakan dan dlsobut se bagai suatu cara anallsa aikro yang eelektif*

Uauanya kroaatografi lap lean tipis yang binca dila-

kukan aekanisaenya adalah kroaatografi adsorpsl. Pada kroaatografi adsorpel periatiwa terjadinja pe- aisahan secara sederhana dapat dlterangkan sebagal berikut i

Bila beberapa zat yang berbeda dlteteskan pada lea*

(12)

berbeda--bada, «aka Mia kamudian dilawatkan larutan aluai

nolakul yang paling lamah diadaorpai olah sat panye-

rap akan dirtsorpai lebih dahulu olah larutan alusi dan akan bargarak ka ataa »aab»ntuk noda yang paling

tinggi* Noda ini kamudian diikuti olah noda-noda da-

ri aolakul-aolekul lainnya yang diadaorpai labih ku-

at olah cat panyarap dan akan direaorpai labih lamah olah larutan aluai* aahingga nembantuk noda-noda

yang labih renriah* J

3*1. Kromatografi lapisan titaia untuktoiuan Jcwali*

tatif,

Idantifikasl secara kroraato/rrafi lapisan tipis

sangat manguntungkan krrena dap at digunakan untuk reakai pendahuluan sakaligua raakal panata& an suatu sat* Hal tarsabut dapat ditunJukkan pa

da panentuan letak noda suatu sat* Bila

dilaku-4

kan panyanprotan raagenala, naka warna yang ta£

Jadi pada noda tarsabut digunakan untuk reaksi

# ^ pendahuluan, sadang latak noda/ Rf nya diguna

-*

kan untuk raakci panatapan* karana harga Rf tax tantu untuk satiap sat* Jadi bila sat yang

di-4

selidiki nama dangan sat pambanding, aaka harga

*

Rf nya sama*

3.2. fir,fln fttg«-flfl.lipl

8

«n tlcls uirtult tu.lutn .b r m U

-tat if.

Cora-cara yang dapat digunakan untuk analiaa

(13)

le

Cara langaung dlmana sat-sat pada laapang pa*

nyarap tldak ptrlu dllaolaal hlngga kaaungkla*

an kahllangan dapat dlhladarkan, Hal taraabut dapat dllakukan dangan cara paagukuran luas n£

da yang tapat atau dangan aaaakal alat Daaaltjt

satar yang bardaaarkan lntanaltaa warna dan 1%

aa noda. Dlantara »atoda***tada yang tldak *a- aarlukan laolaai, maka natoda pangukuran luat noda adalah aatoda yang aadarhana karana nang-

gunakan alat-alat yang aadarhana aarta audah

dldapat dan tldak namarlukan alat-alat khoaua yang Bahai dan juga satoda Ini aaapunyal kata*

lltlan yang aukup balk, yaknl dapat aaneapal -

katalitlan aaapal

+

5

£ (

4,12

)•

Cara lain adalah cara tldak laagauag yaltu da* /

ngan jalan xanglaolaal tarlablh dahulu sat yang tar dapat pada laapang panyarap dangan palarvt

yang aaaual, kaaudlan ditantukan aaeara kola* rlaatri, apaktrofatonatrl dan aabagalnya. Pada

aamua aatoda Ini harua dllakukan anallaa bl aag, ko darl daarah laplaan yang bardakataa daa da*

la» ukuran yang aaaa dangan luaa noda yang m *

nganduag *at«

3.2.1. P«n»tu«n la<ir btrdiwrlaB

(14)

1. Taori :

4

Fisher dsn kawan-kawan ( 194ft,

1949 ) talah mandapatkan sustu ears

yang cukup baik untuk ponantuan kadsr sat pada kromatograra satu dimensi yoi-

tu dangan perbandingan luas noda yang

tar jadi.

Syarat panting dari car* ini adalah luma dan ukuran noda partama baik

la-rutan peatbandlng maupun lala-rutan

pama-rikaaan harue sama.

Saoara ampiris didapatkan bahwa luas noda kromatogram dari barmacam - oaeam

konsantrasi akan berbanding lurua da-

ngan logaritma konsantrasinys.

Misalnya : 5 mikroliter larutan yang

4 * I

mangandung 1,25 i 2,5 ; 5,0 ; 10 mikro

gram dari a asm amino, pada kromatogram

ttrpisah saeara baik*

Satalah noda-nodanya didatoksi dangan

4

pereaksi yang cpesifik, tapinya

dipar-t •*

Jalas hati-hati dangan pinsil, kemudi-

(15)

20

D1 atas kartaa aemilog dlbuat kurva yang

aanyatak&n liubungan anfcara luaa noda tar

hadap konaantrasl dan akan dldapatkan -/ kurva yang 'borupa gariei Xuruo* r

Sala&Sutnyn Fisher C*9^9) maaber£

tain juga rutiua untuk xaenghltung kadar.

U&tak peaentittan ini diperlukan empat ma-

com koneentraol, utiealnya i , *2 « u^

da& u^/dimaca o1 / s2 - / u2 « k t

j'adi »£ dan xt^ adalah haail pangencoran

yang eajatt daxl dan 5 dangan daini-

kian k dapat uiaebut faktor pengancaran*

Jlka luaa noda yang dlhaallkan dari vo-lume yang same dari a^ f » u-j « a-

dalah S1 , &2 • U1 » s***® dldapat bu-

bongan sebagal beriku* i

„ ( v- ♦ u* ) - ( a, ♦ s. )

log « ---!--- S-- ---- 2--- 2— log k

a^ < tT/j •• tJjj ) + ( *■* 5

Bila tidaV diketahul, aadang gi #g ,Sg ,

TLj , diketfihui baaarnya, aaka. dapat dlhitung *

Dangan mafcoda ini dldapatkan kotolitian sampai + 5 % ( <*.,12 ).

2. Cara manghitung luaa noda* (6)

(16)

yang barbed* s&tu aama lain*

Untuk menghitung ittas bldang aecara paati,

dapat dipakai ruama-runus integraai* apa- bila peraamaon garia yang meabataei bldang

teraebut diketahui*

OPetapi dalam menghitung luaa-luaa noda kro

matogram aama aekall tidak afla peraamaan «•

percamnan £arienyaf bahkan benfcuknyapun ee lain tidak tetap.

Dalam keadaan demikian luaanya dapat dihi- tiun# dengan perhittmgan Jumlah petak*

Cara penghitungan jtwalah petak yang paling

sering digunakan untuk menghitung luas adg

lab sebagai berikut t

Noda yang terjadi diaalin dangan teliti ke

atas kertaa grafik millmeter dangan perto-

longan kertaa karbon, kcmndian dihitung *

juniah petaknya*

Untuk menghitung jumlah petak* sebaiknya di,

buat lebih dahulu eegi empat-eegi empat di

dalam salinan noda* Xm a s eegi empat terae-

but dapat dihitung dengan mengalikan pan~

Jang dan lebarnya, keandian petak * petak

aiaa dihitung dan ditamb&hkan,

(17)

2 2

perteuaa-tama dihitung^jumlah baclan-bagian petak yang sama dan yang lebih toe oar dari

setengah petak, kemudian Jumlah tersebut -

dikurangi dengan jumlah petak yang lebih

kecil dari setengah petak* Harga autlak se llfilh ini dikalikan 1/10. Kaka luas dari

sallnan noda tersebut adalah jumlah petak yang utuh dltambah aelisih Jumlah petak -

yang tidak utuh setelah dikalUcan 1/10* Semakln keoll petak-pctak yang dibuat di-

bandingkan dengan luas nodanya* naka hasll perhltungan luas akan semafcin tolltl dan

kesalahannyapun relatir aakin kecll*

jadi untuk mendnpetkan hasll yang teliti * digunakan kertas grafik ailiaeter* Ternya-

ta hasil yang diperoleh akan lebih teliti

bila nodanya nakin beoar*

Untuk aeaerikea perhltungan luas noda tersebut* dibuat eegi empat-segi empat di

lu-ar sallnan noda, keaudian petak-petak yang ada di luar solinan noda tersebut dihitung.

Uaka Junlah petak di dalam dan di luar ga-

(18)

Contoh perhitungon luaa noda t

Setftlab noda kromatograa dlsalin lea ataa ker* tas gratlk mlllmetar, make luaanya dlbltrong

dengan cara sebagal berikut t

•» 2 Lnas noda « luaa (A+B+C+D) +

£ l P

_{-iq) 0,1}

* (1at3)*(1s7)+(5at6}*Oxfc) *

<T(10-19)0f1_7 m2

- (40 + 0,9)

* 40,9 wm?~ &

tmtmk monariksa fcontoali dipakal eegi ©tapat *»

pqitB.

Luan P^HS fc&rus saaa dengan Xuais ( A*B4-C*D )

+ Z P +Z Q +21 r

( 8 x 10 ) * 40 + 10 ♦ 19 ♦ 11 80 * 40 ♦ 10 ♦ 19 ♦ 11

(19)

24

p * juttlah petak di da inn ganbar nallnan noda yang

aama dengan dan yang lebih besar dari eetengah petak*

q >i jumlnh potak dl dalam gambar ealinan noda yang lebih keoll dari setengah oetak.

r * jtcnlah petak yang utuh dl luar gf&sbar ttalinan

(20)

BAB XI

HETODB KERJA

1* PBflTBDXAAH URtfTAfl SAKPEL.

Dilakukan pereobaan terhadap sediaan larutan vitamin

B-komplekfl dangan konpoaial sebagal berikut :

Larutan 1.(22)

Tiamina hidroklorida 0,2500

*

s

Riboflarina 0,1250

4

6

Piridokaina hidroklorida 0,1250

* *

tiikotinamida 1,2500 *

Kalsium pantotenat 0,2500

•

1

Asaa aaXiailat 0,0700 «

Natrium aaliailat 1*4300 *

Air sanpai100nX

(21)

Larutan IX*

TioQine, hidroklorida

Riboflavina

Plridokoizia hidroklorida

Sianokabalcaaina Nlkotlnamlda

Kalsium pantofctnat

Frokaina hidroklorida Aoaffl aalioilat

Natrium salioilat

Air sampal

Larutan III.

‘Tiafliina hidroklorida Riboflavina

Pirldoksina hidroklorida

Sianokobalaaina Nikotinaalda

Kalslvu paAtotenat

Lidokaina hidroklorida Asaa aaliailat

ITatriua saliailat

(22)

2. PBIILJHAK LAHJTAK ELU8I*

Dilakukon krona to grafi lapisan tipis don

aonggunalcan eapot nocaia larutan oluoi ( £,18 )*

<&• Air*

to* Asan a so tat glasial s asoton : sotanol t benzen

• 58 5 * 2 0 « 7 0

o* n*butanol : bonzan i aotanol : air * 2: 1: 1: X

d* n.butanol : asam a so tat glasial : air * 40:3*55 Pcabuotan lnrutan olual* ( 2,18 )

Larutan olusi A :

~ digunakaa 300 ml air*

Larutan olusi B ;

- £10 ml benzen ditaBtbak 60 nl aotanol, IS ml ase*

ton dan 15 ml asam a so tat glasial, cnapurnn ini

dikocok homogen* Larutan olusi 0 :

- 150 ml n-butanol ditaabah 75 ml benzon, 75 el b io

tanol dan 75 nl air, kosmdian caapuran ini diko«- cok dan dibiarkan selaoa beborapo waktu oupaya

m«nisah. Lap lean larutan organik yang aeaisah di ambil dan dipakai soba^ii larutan olusi*

Larutan olusi D J

- 880 ml n-butanol ditaabah 35 al asam asotat gla- eial dan 365 ml air, oaapuran difcocok keaudian dibiarkan selaaa boborapa waktu supaya aeaisah

Lapisan larutan orgsnik yang memlmh diambil dan

(23)

On rn kor Jn «

Dalam. be Jana kronato grafi yang dinding aobolah da Ian*

nya tolah diXapiei toortaa earing, dioaaukkan largrten

nuh yaitu so tolah larutan oluai nencapai bates akhir

dari kortaa earing* Keaudian pada lonpeng kaca yang tolah dilapiei zatpenyerep das tclah diaktiflean, dite

toskan larutan eat yang akan diaolidiki dan larutan sat nurni aobacai pcabending* solanjutaye Icnpenc ter

eobut dinaouidam ko dalen beJana kronatografi.

Apabi-la Apabi-larutan oluai teApabi-lah ocneapai batae akhir yang tolah ditentukan sobolunnya, lcapong dianbil dan dibiar ton fearing pada suhu kooar. TJntuk noncotohui lotak no

danya dilihat di batrah sinar ultra violot. AKALI5A KE7AIITATIT*

3*1* Anallsa kwnlitatlf donpan raotode krona torrafi la nlsan tinla* ( 2,18 )

Dllakuknn donenn mcncnunalmn larutan oluai *

n. asaa aeotat glasial : a so ton 2 notanol ; bcn-

zon - 5 ; 5 i 20 ; 70

b. n.butanol :csan aootnt glasial tair - 40:5:55 3.2* Anallaa kwalltatlf dengan notodo roaksl wnrnn*

( 7*11.14 )

I&da larutan sanpol dilakutem dahulu pcni - oohnn don&an krooatografi lapisan tipia,

(24)

dan dllarutkan dalaa air, aalan^utnya dllaku-

kan raakal wm tarhadap larutan dalam air

toraabut*

Adapun proaadur dari raakal warna adalafc

aa-b&gfti barikut i

3*2*1# Tlaaina hidroklorida*

- Pada 3 al larutan ditaabah 2 ml la*

rutan natrium hidrokalda 2 N, 0 f 5 al

an dlkoook kuat-kuat aalaaa dua manit dan dlblaxfean maaiaah* Maka la-

plaan ataa akan barfluoroaonai ungu, yang jika diaaaakan fluorosaasixgra

akan hilang dan bUa dlbaaakan akan tiabul kaabali*

- Pada 10 tataa larutan ditaabah 1 al

larutan timbal (IX) aaatat 9»5 % b A

dan 2 al Xarutan natrium hidrokalda

6 N aaka akan tarjadi andapan aoklat hitaa.

* Bila 0,5 al larutan diaso A ditaa bah 0,5 ml larutan diaso B didi-

aakan 5 manit, lalu ditaabah 2f5 al

larutan natrium aaatat alkali (5*8 gram natrium aaatat dalam 100 al air

(25)

30

0,5 ml larutan tlamina hidroklorida

akan terjadl warna marah*

3.2«2» Riboflarlna.

- larutan aat dalam air barwama km

nlng kahljauan dan barfluoroaanai hi,1au kakun5jag-kuningan yang

da-ngan panambahan aoa» atau alkali

fluoroaenainya akan hilang.

- Pada 1 ml larutan ditambah 1 ml larutan perak nitrat 0,1 H, maka akan tarjadl warna aarah yang a a-

talah dldlamkan akan tarbantuk an dap an dangan wama yang sama*

3.2.3. Plrldokaina hidroklorida.

- Pada 1 ml larutan ditaabah 2 ta-taa larutan bast (III) klorida 0,5 II, maka akan terjadl wama ma

rah darah.

* Pada 1 ml larutan ditaabah 2 ml

larutan dlaao A, 0,5 ml larutan

dlaso B dan 2 ml larutan natrium

hldroksida 2 U maka akan tarjadi

warna jiagga marah. 3.2.4. Nlkotlnamida.

- Pada larutan dalam air ditambah

(26)

han, aaka akan terjadi aaoniak

yang dapat diparikaa dangan lak- aue*

- Pada 1 sol larutan ditiaabah 2 ta-

tao larutan para dimetil amino -

banzaldehld hidroklorida 1 % b A

aaka akan terjadl warna hijatt kuning,

3*2.5. Kalaiua pantotenat*

- Larutan dalam air dididihkan da*

ngan 5 ml larutan natrium hidrok

sida 2 IT salana aatu menit* kamu* dlan dldinginkan dan ditambah 5 al

asaa klorlda 1 V dan 2 tattc la*

rutan besi (III) klorlda 0 t 5 *

aaka akan terjadi nama kuning - tua.

* Pada 2 al larutan ditaabah 2 al

larutan natrium hidroksida 2 9 -

dan 2 fcatas larutan tambaga (IX) eulfat 1 K akan tarjadi wama bi*

ru ungu*

5*2.6. Prokaina hidroklorida*

* Pada 1 al larutan ditanbah 1 ml

aaoa klorlda 1 H, 1 al fenol dan

(27)

32

- Pada 5 ml larutan ditaabah 5 ta~

tea aeaa Florida 1 N dan z al

la-rutan natriu* nitrit 1 7$ bA* ka-

madian larutan ini ditaabah pada

10 ml larutan 2-naftol (5 gran da

lan 40 al larutan natrium hidrok-

sida 2 H dan air aampai 100 ml) t maka akan terbantuk andapan bar-

warn me rah*

- Pada larutan ditaabah 2 tatas

la-rutan para dimatil amino bansalda

hid hidroklorida 1 % bA* akan -

tarjadi warna jlngga kuning« 3*2«7* Lldokfllna hidroklorida,

- Pada 10 al larutan diba&akan

dangan larut on natrium hidrokalda -2 K maka akan tarjadi andapan, ka nudian endnpan yang torjadi dila-

rutkan dalam 1 ml atanol 95 % dan

ditaabah 0,5 ml larutan kobalt(IX)

nit rat 6,5 # b A lalu dikocok «•-

lama dua manit, maka akan tarban-

tuk andapan hijau kabiruan*

- Pada 2 totaa larutan ditamhoh a*

aam oulfat pakat dan dididihkan 9

(28)

dan 2 tataa larutan natrium ni-

trit 10

%

b/v dan dldlamkan aela-

ma satu nenlt v kamudian pada

la-rutan lnl ditambah 5 ml lala-rutan -

natrium hidrokaida 2 ft dan bila -

ditambah 5 mg 2-naftol akan tarj&

di narna coklat Jingga*

3*5* Anallaa kwalitatlf dangan matode raakal ~ krlBtal.

Oara raakal kriatal *

Babalum dilakukan raakal kriatal, tarlablh

dahulu dilakukan pamiaahan dangan kromato~

grafi lapiaan tlpla, kamudlan dangan par~

tolongan ainar ultra viol at dapat dlkata**

hui letak noda dari maaing-maalng koaponen*

Noda dari kooponan yang dapat momlaah dike

rok dan dllarutkan dalam air, Salanjutaya

dlbuat raakal kriatal dari larutan tarsa-

but dangan peraaksl Drseandorff dan juga

dangan peraakol basi-komplaks.

4. AHALX8A CTAWCITATIF.

4*1. Fambuatan larutan panarlkaaan.

Dari larutan Xv II dan III dibuat pangan*

caran dangan kadar aatangah dan aaparampat

(29)

Falakaanaannya adalah aabagai barikut x

- Dari tiap-tlap larutan di plpat 25 ml* la

lu maalng-maalng dimaaukkan ka dalam la*

bu takar 50 ml dan ditambah air aampai 50

ml9 kamudian larutan taraabut dikocok aaj|

pal homogan#

- Dari tiap-tiap larutan dl plpat 25 ml* la lu maalng-maalng dimaaukkan ka dalam labu

takar 10 0 ml dan ditambah air aampai 10 0

ml, kamudian larutan taraabut dikocok aug

pal homogtn.

P a abuat an _larnt aiL jsambandlng .

4

Dltimbang tallti barturut-turut 250 mg, 750.

mg, 1000 mg tlamlna hidroklorida, 125 mg ri

boflaTlnap 100 mg* 250 mg plrldoksina hldr&

• * 9

klorlda, 125 mg aianokobalamina, 10 0 0 mgt

20 0 0 mg nlkotlnamlda, 250 mg kalalum panto-

tanat, 10 0 0 mg prokaina hidroklorida dan

150 0 mg lldokalna hidroklorida,

Komudlan maalng-maalng dilarutkan dangan a-

Ir dan dimaaukkan ka dalam labu takar 10 0

ml, sadangkan untuk rlboflarlna dan alanok£

balamlna dimaaukkan ka dalam labu takar 50 0

ml, aatalah itu pada maalng-maalng larutan

(30)

untttk riboflavin* dan alanokobalaalna di-

taaibah air aaapal $0 0 al, kaaudlan larutan-

larutan taraabut dlkocok aaapal hoaogaa*

Dari tiap-tlap larutan taraabut kaaudlan dl-

buat panganearan dangan kadar aatangah dan

aaparaapat dari kadar larutan aaaula, sahlqg ga larutan-larutan ini aaapunyal kadar 62,5

H, 125 ag, li7»5 ag, 250 *g, 375 ag, 500 ag, 750 i|f 1000 ag tlaalaa hidroklorida, 6,?.5*g<

, - >

12.5 ■(, 25 ac rlkoflairlaa, 25 ■«, $0 ag, -_• _f _*

9

62.5 ■!* 100 H i 125 ag, 250 ag pirldekslu hidroklorida, 6 ,2 5 i|, 12,5 ag, 25 ag »l«no-kobalaai&a, 250 ag, 500 ac, lOOOag, 2000 ag

4 0 4 4

alkotinaaida, 62,5 ag, 12 5 ag, 250 ag

kalai-4 4*

ua pantatanat, 250 ag, 500 ag» 10 0 0 ag

pro-# *

kalna hidroklorida dan 375 ag, 750 ag, 1500

ag lldokaina hidroklorida*

4.3* girt torJi*

Pada laapang kaca yang talah dUaplal sat p& nyarap dan talah diaktifkan, ditataakan tlga

aaoaa kadar dari larutan vltaaln B-koaplaks

dan tlga aaoaa kadar dari larutan vltaaln

yang dlparlukan aabagal paabanding dalaa ka£ daan aural dl aana kadar dari larutan kadna

(31)

36

rutan partama# Jadi pada lamp eng taraabut

ditataakan dangan mlkropipat larutan vita-min B-komplaka dan larutan vitavita-min pambanding maaing-aaaing aabanyak 10 mikroliter -

untuk nlkotlnamlda, prokalna hidroklorida t lldokalna hidroklorida, 20 alkrolltar untuk tlamina hidroklorida, 30 mikrolitar untuk kalaium panfcotenat, 40 alkrolltar untuk riboflavina, piridokaina hidroklorida dan ai-

anokobalaaina. Kamudian lampang tarsabut di masukkan ko dalam banana kromatografi yang tolah januh dengan larutan aluai. Bila la-rutan aluai talah mancapai batas yang talah ditantukan, lampang diambil dan dlkaringkan* i)an untuk meugatahui letak nodanya dllakukan dongan aelifaat dl bawah oinar ultra vi-ol ot*# disauprot dangan larutan panyeas>rot -

(32)