ABSTRAK
Manggis (Garcinia mangostana L.) merupakan salah satu tanaman obat Indonesia yang dimanfaatkan untuk mengobati berbagai macam penyakit. Sifat antikanker, induksi apoptosis, dan antiproliferasi dari xanton yang dimiliki oleh manggis telah banyak diteliti. Manggis memiliki sejumlah zat gizi yang dapat memenuhi kebutuhan nutrisi bagi ibu hamil. Namun belum ada penelitian lebih lanjut mengenai keamanan mengonsumsi manggis saat hamil. Tingginya kandungan α-mangostin dan vitamin A dalam kulit manggis tidak menutup kemungkinan dapat memengaruhi perkembangan embrio khususnya pada saat palatogenesis.
Metode penelitian yang digunakan adalah eksperimental laboratorium sungguhan dengan rancangan acak lengkap (RAL). Penelitian ini menggunakan 4 ekor mencit jantan dan 4 ekor mencit betina yang dikawinkan sampai dipastikan hamil. Mencit betina yang telah hamil diberikan ekstrak kulit manggis (Garcinia mangostana L.) per oral dengan dosis bertingkat pada usia kehamilan hari ke-12 yaitu 4 mg/0,5 mL, 8 mg/0,5 mL, dan 12 mg/0,5 mL sedangkan kontrol negatif diberikan CMC 0,5 mL per oral. Pembedahan dilakukan pada hari ke-20 untuk mengeluarkan janin mencit kemudian janin mencit diukur panjangnya dan dibuat preparat jaringan palatumnya yang kemudian akan diamati di bawah mikroskop dengan perbesaran 1000x.
Pada penelitian ini tidak ditemukan adanya celah palatum sekunder yang terbentuk pada semua kelompok. Namun pada dosis 12 mg/0,5 mL seluruh janin mencit mati sehingga dosis tersebut dapat dikatakan toksik. Pada penelitian ini juga ternyata ditemukan perbedaan ukuran panjang badan tiap kelompok terlihat secara signifikan seiring dengan ditingkatkannya dosis pemberian ekstrak kulit manggis.
Berdasarkan hal tersebut di atas dapat disimpulkan bahwa ekstrak kulit manggis tidak menyebabkan celah palatum jika dikonsumsi pada saat kehamilan, namun dapat menyebabkan pemendekan panjang janin mencit dan pada dosis 12 mg/0,5 mL dapat menyebabkan kematian janin.
ABSTRACT
Mangosteen (Garcinia mangostana L.) is one of Indonesian medicinal plants that used to cure various kinds of diseases. Anti-cancer, induction of apoptotic, and anti-proliferative properties from mangosteen xanthones were examined largely. Mangosteen has numerous nutrients that can supply the maternal nutrient. However, there was no furthermore safety research for mangosteen intake during pregnancy.
The method used in this study is laboratory experimental study with Completely Randomized Design. This study used 4 male mice and 4 female mice that copulated until female mice pregnant. The pregnant female mice was given with mangosteen pericarp extract (Garcinia mangostana L.) orally with gradual dosage that is 4 mg/0,5 mL, 8 mg/0,5 mL, and 12 mg/0,5 mL in 12th day pregnancy while the control was given with CMC 0,5 mL orally. The surgery carried in 20th day for giving the fetus birth then the fetus lengths was measured and the palate tissue preparation was made, later to be observed under microscope with 1000x magnification.
Cleft in secondary palate in all groups was not found in this study. However at 12 mg/0,5 mL dosage, all the fetus were die so that dosage termed toxic. In this study were also found body length differences were significantly visible in all groups simultaneously with increasing the mangosteen pericarp extract dosage. From the study above, we can conclude that mangosteen pericarp extract were not causing cleft palate if taken during pregnancy but can shorten the mice body length and at 12 mg/0,5 mL dosage can lead to the fetus death.
DAFTAR ISI
Halaman
JUDUL ... i
LEMBAR PERSETUJUAN ... ii
SURAT PERNYATAAN ... iii
ABSTRAK ... iv
ABSTRACT ... v
KATA PENGANTAR ... vi
DAFTAR ISI ... viii
DAFTAR TABEL ... xii
DAFTAR DIAGRAM ... xiii
DAFTAR GAMBAR ... xiv
DAFTAR LAMPIRAN ... xv
BAB I PENDAHULUAN 1.1 Latar Belakang ... 1
1.2 Identifikasi Masalah ... 4
1.3 Maksud Penelitian ... 4
1.4 Tujuan Penelitian ... 4
1.5 Manfaat Penelitian ... 5
1.5.1 Manfaat Akademik ... 5
1.6Kerangka Pemikiran dan Hipotesis ... 5
1.6.1 Kerangka Pemikiran ... 5
1.6.2 Hipotesis Penelitian ... 8
1.7Metode Penelitian ... 8
1.8Lokasi dan Waktu Penelitian ... 8
BAB II TINJAUAN PUSTAKA 2.1 Perkembangan Wajah ... 9
2.2 Palatogenesis Manusia ... 11
2.2.1 Palatum Primer ... 11
2.2.2 Palatum Sekunder ... 12
2.2.2.1Pertumbuhan Lempeng Palatum ... 13
2.2.2.2Elevasi Lempeng Palatum ... 14
2.2.2.3Fusi Lempeng Palatum ... 16
2.2.2.4Hilangnya Lipatan Epitel Midline ... 17
2.2.3 Celah Palatum ... 18
2.2.3.1Etiologi Celah Palatum ... 19
2.2.3.1.1 Faktor Herediter ... 19
2.2.3.1.2 Faktor Ligkungan ... 20
2.2.3.2Klasifikasi Celah Palatum ... 20
2.3 Faktor yang Memengaruhi Pertumbuhan Janin ... 24
2.3.1 Faktor Genetik ... 25
2.3.2.1Infeksi Maternal ... 25
2.3.2.2Teratogen Kimia ... 26
2.3.3 Faktor Fisik ... 27
2.3.4 Faktor Maternal ... 28
2.3.5 Faktor Mekanis ... 28
2.4 Manggis (Garcinia mangostana L.) ... 28
2.4.1 Taksonomi Buah Manggis ... 30
2.4.2 Kandungan dan Komposisi Buah Manggis ... 30
2.5 α-Mangostin ... 34
2.6Vitamin A ... 36
2.6.1 Absorbsi, Transpor, dan Penyimpanan Vitamin A ... 37
2.6.2 Fungsi Vitamin A ... 39
BAB III METODOLOGI PENELITIAN 3.1 Alat dan Bahan ... 41
3.1.1 Alat ... 41
3.1.2 Bahan ... 42
3.2 Subjek Penelitian ... 42
3.3 Metode Penelitian ... 43
3.3.1 Desain Penelitian ... 43
3.3.2 Perhitungan Besar Sampel ... 43
3.3.3 Variabel Penelitian ... 44
3.4Prosedur Kerja ... 45
3.4.1 Pengumpulan Bahan ... 45
3.4.2 Persiapan Bahan Uji ... 45
3.4.3 Persiapan Hewan Coba ... 45
3.4.4 Alur Penelitian ... 46
3.5Aspek Etik Penelitian ... 50
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN 4.1 Hasil Penelitian ... 51
4.1.1 Lebar Celah Palatum ... 51
4.1.2 Gambaran Histopatologis ... 53
4.2Pembahasan ... 54
4.3Pengujian Hipotesis Penelitian ... 57
BAB V SIMPULAN DAN SARAN 5.1 Simpulan ... 59
5.1.1 Simpulan Tambahan ... 59
5.2 Saran ... 59
DAFTAR PUSTAKA ... 60
LAMPIRAN ... 64
DAFTAR TABEL
No Teks Halaman
Tabel 2.1 Zat Gizi untuk 100 g Buah Manggis ... 31 Tabel 2.2 Asupan Energi, Zat Gizi, Mineral, dan Komponen Spesifik
DAFTAR DIAGRAM
No Teks Halaman
DAFTAR GAMBAR
No Teks Halaman
Gambar 2.1 Perkembangan Wajah Pada Minggu ke-4 dan ke-5 ... 9
Gambar 2.2 Perkembangan Wajah Pada Minggu ke-5 ½ dan ke-6 ... 10
Gambar 2.3 Perkembangan Wajah Pada Minggu ke-7 dan ke-8 ... 11
Gambar 2.4 Grafik Perubahan Jumlah Glikosaminoglikan (GAG) Selama Perkembangan Palatum Keras dan Lunak ... 15
Gambar 2.5 Fusi Lempeng Palatum ... 17
Gambar 2.6 Fusi Lempeng Palatum dan Hilangnya Lipatan Epitel Di Daerah Fusi ... 18
Gambar 2.7 Berbagai Tipe Celah Bibir dan Palatum ... 22
Gambar 2.8 Klasifikasi Veau ... 23
Gambar 2.9 Klasifikasi Simbolik Kernahan dan Stark ... 24
Gambar 2.10 Pohon Manggis ... 29
Gambar 2.11 Buah Manggis ... 30
Gambar 2.12 Inti Xanton ... 33
Gambar 2.13 Struktur Kimia Xanton yang Paling Sering Dipelajari ... 33
Gambar 2.14 Struktur Kimia dan Konversi Vitamin A Dalam Tubuh ... 37
Gambar 2.15 Digersti, Absorbsi, dan Transpor Retinol dan Karotenoid ... 39
Gambar 4.1 Potongan Koronal Palatum Kelompok Kontrol Negatif ... 53
Gambar 4.2 Potongan Koronal Palatum Kelompok EKM 1 ... 54
DAFTAR LAMPIRAN
No Teks Halaman
Lampiran 1 Surat Keputusan Komisi Etik Penelitian ... 64
Lampiran 2 Surat Ijin Penelitian ... 65
Lampiran 3 Surat Ijin Penelitian ... 66
Lampiran 4 Perhitungan Dosis Ekstrak Kulit Manggis ... 67
Lampiran 5 Pembuatan Ekstrak Kulit Manggis ... 68
Lampiran 6 Pelarutan Ekstrak Kulit Manggis ... 69
Lampiran 7 Dokumentasi Penelitian ... 70
Lampiran 8 Pembuatan Preparat Jaringan ... 75
Lampiran 9 Pengujian Statistik ... 78
BAB I
PENDAHULUAN
1.1Latar Belakang
Sudah banyak pemanfaatan tanaman obat Indonesia untuk menanggulangi berbagai macam penyakit di Indonesia. Seiring dengan adanya slogan “back to nature”, obat tradisional tetap menjadi alternatif pengobatan disamping obat
modern. Banyak tanaman obat Indonesia yang telah dipasarkan antara lain sebagai pencegahan maupun pengobatan suatu penyakit. Tanaman yang bisa dimanfaatkan untuk tujuan tersebut adalah buah manggis (Garcinia mangostana L.), terutama pemanfaatan kulit buahnya. 1
Jus dan produk lain yang mengandung buah eksotis yang dikenal sebagai superfruits tersebut dipasarkan secara agresif untuk keperluan kesehatan tidak hanya di Indonesia. Penjualan agresif manggis dengan tujuan kesehatan terlihat dari penjualan produk manggis yang melebihi 200 juta USD di Amerika Serikat pada tahun 2008. 2
2
cacat jantung, bibir sumbing, kelainan tulang belakang, dan berbagai macam jenis kelainan lainnya. 3
Ketertarikan pada buah manggis dan xantonnya meningkat dengan sangat pesat beberapa tahun ini sebagaimana dilaporkan oleh beberapa laporan penelitian sains. Pencarian literatur mengenai manggis dan xanton melalui PubMed, Science Direct, Google Scholar, dan Scirus, menghasilkan 158 laporan dalam periode 1980-2008. Sebaliknya, sekarang sudah 454 artikel yang dipublikasikan dari 2008 hingga Maret 2013. 2
Sifat antikanker dari ekstrak kulit manggis dipelajari lebih lanjut secara in vitro dan beberapa efek antikanker terlihat secara in vivo. Matsumoto dkk. (2003) mempelajari efek dari 6 xanton yang diisolasi dari kulit buah manggis terhadap inhibisi pertumbuhan sel pada human leukemia cell line HL60. Semua xanton memperlihatkan efek inhibisi yang signifikan terhadap pertumbuhan sel HL60. Selanjutnya peneliti menemukan bahwa xanton menginduksi apoptosis pada sel HL60 melalui peranan mitokondria pada fase awal. 4,5
Faktor lingkungan memperlihatkan kontribusi saat perkembangan embrio ketika penyatuan/fusi bibir dan palatum. Defisiensi nutrisi, radiasi, obat-obatan, hipoksia, virus, dan kelebihan atau kekurangan vitamin dapat menyebabkan celah orofasial. 6
3
dikenal. Bentuk vitamin A yang aktif dalam tubuh adalah retinol, retinal atau retinaldehid, dan asam retinoat. Secara kolektif, senyawa ini dikenal sebagai retinoid. Makanan yang berasal dari sumber hewani mengandung senyawa (retinil ester) yang dengan mudahnya diubah menjadi retinol di saluran pencernaan. Makanan yang berasal dari sumber nabati mengandung karotenoid yang memiliki aktivitas vitamin A (alfa-karoten, beta-karoten, beta-kriptoxantin). 7,8
Malformasi saat palatogenesis dapat menyebabkan terjadinya celah pada palatum. Celah palatum merupakan salah satu abnormalitas kongenital yang paling umum (1 : 2500 kelahiran hidup). Tanaka dkk. (2012) mengumpulkan data kelahiran hidup dengan celah bibir atau anomali kongenital dari organisasi nasional dan internasional periode 2002 hingga 2006. Data yang didapat memperlihatkan rata-rata terjadinya celah bibir dengan atau tanpa celah palatum adalah 7,75 per 10.000 kelahiran hidup di Amerika Serikat dan 7,94 per 10.000 kelahiran hidup di seluruh dunia. Rerata prevalensi terjadinya celah palatum di Amerika serikat adalah 5,03 per 10.000 kelahiran hidup dan 4,50 per 10.000 kelahiran hidup di seluruh dunia. 9,10,11
4
Penelitian Dicha (2012) memperlihatkan tingginya kandungan beta-karoten pada minyak buah merah menyebabkan celah palatum pada mencit. 9,12,13
Efek antikanker, antiproliferatif, induksi apoptosis, dan inhibisi pertumbuhan sel yang dimiliki oleh xanton dan vitamin A tinggi yang terdapat pada ekstrak kulit manggis tidak menutup kemungkinan dapat memengaruhi perkembangan embrio. Maka dari itu peneliti ingin melihat apakah tingginya kandungan vitamin A dan xanton pada kulit manggis dapat menghambat perkembangan palatum pada janin.
1.2Identifikasi Masalah
Apakah pemberian ekstrak etanol kulit manggis dapat memengaruhi perkembangan palatum pada janin mencit galur Swiss Webster?
1.3Maksud Penelitian
Maksud penelitian ini adalah untuk mengetahui pengaruh pemberian ekstrak etanol kulit manggis terhadap perkembangan palatum pada janin mencit galur Swiss webster.
1.4Tujuan Penelitian
5
1.5Manfaat Penelitian
1.5.1 Manfaat Akademik
Menambah ilmu pengetahuan mengenai pengaruh pemberian ekstrak kulit manggis terhadap perkembangan palatum janin mencit dan sebagai landasan untuk penelitian selanjutnya.
1.5.2 Manfaat Praktis
Memberikan informasi kepada dokter, praktisi medis, dan khususnya masyarakat mengenai keamanan mengonsumsi ekstrak etanol kulit manggis selama masakehamilan khususnya pada saat perkembangan palatum.
1.6Kerangka Pemikiran dan Hipotesis
1.6.1 Kerangka Pemikiran
Manggis merupakan buah dari pepohonan daerah tropis Asia Tenggara seperti Indonesia, Malaysia, Sri Lanka, Filipina, India, dan Thailand. Kulit manggis sudah digunakan sejak dulu kala untuk mengobati luka, infeksi kulit, diare, dan inflamasi. Saat ini konsumsi produk manggis meningkat sebagai suplemen diet di Amerika Serikat karena sifat antioksidannya. Manggis juga digunakan sebagai bahan dasar pada beberapa produk komersial seperti suplemen diet, kosmetik herbal, dan produk obat-obatan. 4,14,15,16
6
seperti analgesik, antioksidan, antiinflamasi, antikanker, antialergi, antibakteri, antituberkulosis, antifungal, kardioprotektif, neuroprotektif, dan imunomodulasi. 4,16
Xanton diklasifikasikan dalam lima kelompok: (a) xanton teroksigenasi sederhana, (b) xanton glikosida, (c) prenylated xanthones, (d) xantonoglinoid, dan
(e) miscellaneous xanthones. Kulit manggis mengandung bermacam-macam
metabolit sekunder seperti prenylated dan oxygenated xanthones (Peres et al., 2000). Kelompok prenyl diperkirakan mengimplikasi dalam internalisasi sel, yang menuntun pada interaksi dengan molekul transduksi sinyal dan protein yang terlibat dalam transisi permeabilitas mitokondria. 14,17
Empat prenylated xanthone yang memiliki kemiripan struktur [α-mangostin (αM), β-mangostin (βM), γ-mangostin (γM), dan methoxy-β-mangostin (βM-ME)], kecuali methoxy-β-mangostin, memperlihatkan efek inhibisi pertumbuhan. 17
7
Selain itu, mekanisme apoptosis oleh kulit manggis dapat melalui jalur penghambatan mitogen-activated protein kinases (MAPKs) dan Akt kinase yang merupakan kunci regulasi protein sel. 17
Vitamin merupakan substansi kimia organik yang dibutuhkan untuk pertumbuhan, perkembangan, dan metabolisme normal pada setiap tahap kehidupan. Kondo dkk. (2008) pada penelitiannya menggunakan salah satu produk yang terbuat dari kulit manggis, vitamin A yang terkandung dalam 59 mL jus tersebut adalah 5000 IU. Rekomendasi diet harian menurut US Food and Nutrition Board adalah 700 µg/hari untuk wanita dan 900 µg/hari untuk pria, sedangkan untuk wanita hamil adalah 770 µg/hari. 18,19
Manggis yang kaya akan vitamin A khususnya dalam bentuk beta karoten dapat meregulasi proliferasi, diferensiasi, dan apoptosis selama morfogenesis struktur embrionik. Kelebihan vitamin A dapat menghambat proliferasi mesenkim dengan mengganggu siklus sel pada fase G1.12,15
Malformasi saat palatogenesis mengakibatkan terjadinya celah pada palatum. Celah palatum dapat terjadi akibat terganggunya proses yang berlangsung ketika palatogenesis (terhambat atau gagalnya elevasi lempeng palatum, terganggunya fusi pada lempeng palatum, atau gagalnya penggabungan dan/atau diferensiasi mesenkim). Kelebihan asupan vitamin A (retinoid) berhubungan dengan terjadinya celah palatum. 9
8
1.6.2 Hipotesis Penelitian
Ekstrak etanol kulit manggis dapat memengaruhi perkembangan palatum pada janin mencit galur Swiss webster.
1.7Metode Penelitian
Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental laboratorium sungguhan dengan metode rancangan acak lengkap (RAL). Data yang diperoleh akan dianalisis dengan uji statistik one way ANOVA dan dilanjutkan dengan uji LSD.
1.8Lokasi dan Waktu Penelitian
BAB V
SIMPULAN DAN SARAN
5.1 Simpulan
Berdasarkan hasil penelitian yang didapat maka disimpulkan bahwa ekstrak
kulit manggis tidak memengaruhi perkembangan palatum pada mencit galur Swiss webster.
5.1.1 Simpulan Tambahan
1. Ekstrak kulit manggis pada dosis 12 mg/0,5 mL dapat menyebabkan
kematian janin.
2. Ekstrak kulit manggis pada seluruh dosis dapat menyebabkan pemendekan
panjang badan pada janin.
5.2 Saran
1. Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut mengenai keamanan mengonsumsi ekstrak kulit manggis selama kehamilan dengan menggunakan hewan
coba yang lain dan penelitian mengenai pengaruh ekstrak kulit manggis terhadap perkembangan janin.
2. Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut mengenai keamanan mengonsumsi
RIWAYAT HIDUP
Nama : ZAHRAH ALMIRA CITA UTAMI
NRP : 1190006
Tempat & Tanggal Lahir : Palembang, 8 Oktober 1993
Alamat : Jl. Cijerokaso, Komplek PRV A-41, Bandung
Riwayat Pendidikan :
TK Tunas Harapan 2 Balikpapan 1997-1999
SD Patra Dharma 3 Balikpapan 1999-2005
SD Negeri Kebon Baru IV Cirebon 2005
SMP Negeri 1 Cirebon 2005-2008
SMA Negeri 1 Cirebon 2008-2009
SMA Negeri 5 Bandung 2009-2011
DAFTAR PUSTAKA
1. Agung EN. Manggis (Garcinia mangostana L.): dari kulit buah yang terbuang
hingga menjadi kandidat suatu obat. MOT. 2007; 12(42).
2. Orozco FG, Failla ML. Biological activities and bioavailability of mangosteen
xanthones: a critical review of the current evidence. J Nut. 2013 Aug 13; 5(8):
p. 3163-5.
3. Hasna N. Manfaat buah manggis untuk kesehatan. [Online].; 2013 [cited 2014
Dec 14]. Available from:
http://manfaat-manggis-herbal.blogspot.com/2013/12/manfaat-manggis-untuk-ibu-hamil.html .
4. Aisha AF, Abu-Salah KM, Ismail Z, Majid AS. In vitro and in vivo anti-colon
cancer effects of Garcinia mangostana xanthones extract. BMC
Complementary and Alternative Medicine. 2012 Jul 20; 12(104).
5. Matsumoto K, Akao Y, Yi H, et al. Preferential target is mitochondria in α
-mangostin-induced apoptosis in human leukemia HL60 cells. J bmc. 2004 Sep
16; 12: p. 5799-801.
6. Whitney E, Rolfes SR. Understanding nutrition. USA: Thomson Wadsworth;
2005.
7. Peterson, Ellis, Hupp, Tucker. Contemporary oral and maxillofacial surgery.
4th ed. New Delhi: Mosby; 2007.
8. WHO. Guidline: vitamin A suplementation in pregnant woman. Geneva:
61
9. Berkovitz BK, Holland GR, Moxham BJ. Oral anatomy, histology, and
embryology. 4th ed.: Elsevier Ltd; 2009.
10.Tanaka SA, Mahabir RC, Jupiter DC, Menezes JM. Updating the
epidemiology of cleft lip with or without cleft palate. Plast Reconstr Surg.
2012; 129: p. 511-8.
11.Tanaka SA, Mahabir RC, Jupiter DC, Menezes JM. Updating the
epidemiology of isolated cleft palate. Plast Reconstr Surg. 2013; 131: p.
650-2.
12.Dicha YR. Efek pemberian minyak buah merah (Pandanus conoideus Lam.)
terhadap perkembangan palatum pada mencit galur Swiss webster Bandung;
2013.
13.Ackermans MM, Zhou H, Carels CE, Wagener F, Hoff JW. Vitamin A and
clefting: putative biological mechanism. Nutrition Reviews. 2011; 69(10): p.
613-20.
14.Chaverri JP, Rodriguez NC, Ibarra MO, Rojas JM. Medicinal properties of
mangosteen (Garcinia mangostana). J fct. 2008 Jun 24; 46: p. 3227-39.
15.Kondo M, Zhang L, Ji H, Kou Y, Ou B. Bioavailability and antioxidant
effects of xanthone-rich mangosteen (Garcinia mangostana) product in
humans. J Agric Food Chem. 2009 Feb 9; 57(19): p. 8788-92.
16.Chitra S, Krithika MV, Pavithra S. Induction of apoptosis by xanthones from
Garcinia mangostana in human breast and laryngeal carcinoma cell lines. Int J
62
17.Akao Y, Nakagawa Y, Linuma M, Nozawa Y. Anti-cancer effects of
xanthones from pericarps of mangosten. Int J Mol Sci. 2008; 9: p. 355-70.
18.Hark L, Morrison G. Medical nutrition & disease: a case-based approach. 4th
ed. Singapore: Wiley-Blackwell; 2009.
19.Food and Nutrition Board of The Institute of Medicine. Dietary reference
intakes for vitamin A, vitamin K, arsenic, boron, chromium, copper, iodine,
iron, manganese, molybdenum, nickel, silicon, vanadium, and zinc.
Washington DC: National Academy Press; 2011.
20.Sadler TW. Langman's medical embryology. 10th ed. USA: Lippincott
Williams & Wilkins; 2006.
21.Moore KL, Persaud TV. The developing human: clinically oriented
embryology. 8th ed. Philadelphia: Saunders; 2008.
22.Carlson BM. Human embryology and developmental biology. 4th ed.
Philadelphia: Churchill Livingstone; 2009.
23.Moore KL. Before we are born. 7th ed.: Saunders; 2008.
24.Swapan KP. Essentials of oral pathology. 3rd ed. New Delhi: Jaypee; 2011.
25.Schoenwolf GC, Bleyl SB, Brauer PR, Francis-West PH. Larsen's human
embryology. 4th ed. Philadelphia: Churchill Livingstone; 2009.
26.Cawson RA, Odell EW. Cawson's essentials of oral pathology and oral
medicine. 7th ed.: Churchill Livingstone; 2002.
27.Tewfik T, Kaanan M. Medscape. [Online].; 2013 [cited 2015 January].
http://emedicine.medscape.com/article/837347-63
overview#aw2aab6b4.
28.Brunner BR, Morales-Payan JP. EOLSS. [Online]. [cited 2015 Feb 2].
Available from: www.eolss.net/sample-chapters/c10/e1-05a-52-00.pdf.
29.Shibata M, Linuma M, Morimoto J, Kurose A, Akamatsu K, dkk. α
-Mangostin extracted from the pericarp of the mangosteen (Garcinia
mangostana Linn) reduces tumor growth and lymph node metastasis in an
immunocompetent xenograft model of metastatic mammary cancer carrying a
p53 mutation. BMC Medicine. 2011; 9(69): p. 1-18.
30.dr. Noel Sturm. Vitamin A and vision. [Online]. [cited 2015 Feb 2]. Available
from:
http://chemistry.gravitywaves.com/CHE452/16_Vitamin%20A%20and%20Vi
sion.htm.
31.Mahan LK, Stump SE. Krause's food, nutrition, & diet therapy. 11th ed.
Philadelphia: Saunders; 2004.
32.Shafer, Hine, Levy. Shafer's textbook of oral pathology. 6th ed. Noida:
