UJI AKTIVITAS SITOTOKSIK DAN PROLIFERASI DARI KANGEN
WATER PADA SEL KANKER PAYUDARA T47D
SKRIPSI
Diajukan sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana Farmasi
RIDWAN SETIAJI 1308010119
PROGRAM STUDI FARMASI FAKULTAS FARMASI
ii
iv
v
KATA PENGANTAR
Bismillahirohmanirohim, Alhamdulillahirobbil’alamin, segala puji bagi
Allah SWT, karena dengan petunjuk dan pertolonganNya penulis dapat
menyelesaikan skripsi yang berjudul Uji Aktivitas Sitotoksik Dan Proliferasi Dari
Kangen Water Pada Sel Kanker Payudara T47D sebagai salah satu syarat
mencapai gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi Universitas
Muhammadiyah Purwokerto.
Penulis menyadari dalam penyusunan skripsi ini masih banyak kekurangan,
oleh sebab itu kritik dan saran yang membangun penulis harapkan untuk
perbaikan di masa yang akan datang. Penulis mengucapkan banyak terima kasih
atas segala bantuan, bimbingan, serta kerjasama dengan berbagai pihak yang
terkait dalam penyusunan skripsi ini, karena terselesaikannya skripsi ini tidak
terlepas dari bantuan berbagai pihak. Oleh karena itu, penulis mengucapkan
terimakasih kepada:
1) Dr. H. Syamsuhadi Irsyad, S.H., M.H., selaku Rektor Universitas
Muhammadiyah Purwokerto
2) Dr. Agus Siswanto, M.Si., Apt selaku Dekan Fakultas Farmasi
Universitas Muhammadiyah Purwokerto yang telah memimpin
keseluruhan proses mengajar ditempat penulis menuntut ilmu.
3) Wahyu Utaminingrum, M.Sc., Apt., selaku Ketua Progam Studi Sarjana
Farmasi Universitas Muhammadiyah Purwokerto.
4) Dr. Asmiyenti Djaliasrin Djalil, M.Si dan Elza Sundhani, M.Sc., Apt
selaku pembimbing yang telah memberikan arahan, bimbingan dan
inspirasi kepada penulis dalam menyelesaikan skripsi ini.
5) Dwi Hartanti, M. Farm., Apt dan Wahyu Utaminingrum, M.Si., Apt.,
selaku penguji yang telah memberi masukan dalam menyelesaikan skripsi
vi
vii
RIWAYAT HIDUP
Nama : Ridwan Setiaji
Tempat, Tanggal Lahir : Cilacap, 08 Agustus 1995
Nama Orang Tua : Satiwan (Ayah), Siti Markhamah
(Ibu)
Riwayat Pendidikan :
a. Sekolah Dasar : SD Negeri 05 Kedawung b. Sekolah Menengah Pertama : SMP Negeri 1 Kroya c. Sekolah Menengah Atas : SMA Negeri 1 Kroya
d. Perguruan Tinggi : Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Purwokerto
Riwayat Organisasi
1. Anggota Badan Eksekutif Mahasiswa BEM Fakultas Farmasi periode 2013-2014 dan 2014-2015
viii
MOTTO
“Apa yang kita tanam baik pada hari ini, maka kita akan menuai baik pula pada keesokan hari”
“Hidup berlandaskan Al-Qur’an dan As-Sunnah”
x
PERSEMBAHAN
Anugerah terindah dari Allah SWT yang tak ternilai hingga terciptalah sebuah
karya sederhana. Alhamdulillahirabbil’alamin, puji syukur kehadirat Allah SWT
yang telah memberikan kemudahan dan kelancaran kepada saya sehingga skripsi
ini dapat terselesaikan dengan baik dan benar.
Bismillahirrahmanirrahim, skripsi ini saya persembahkan untuk:
Ibu dan Ayah yang selalu memberikan doa dan segala bentuk dukungan
hingga saat ini.
Kedua kakak saya yang memberikan semangat.
Teman-teman kos (Rizko, Ronny, Prayogo, Agif, Surya, Muji, Rere, Riza)
yang selalu bersama hampir setiap hari.
Teman-teman “Tim Kultur” (Aisyah, Senja, Dyfa, Binaripan, Atika,
Yanah, Miya, Endah, Yosi, Darsini, Desi) yang selalu membantu dalam
skripsi dan saling mensupport.
Dosen pembimbing saya Ibu Asmi dan Ibu Elza, terimakasih
bimbingannya dari awal penyusunan proposal hingga skripsi selesai.
Kelompok praktikum dalam perkuliahan yang selalu bersama. Semua teman-teman yang membantu dan berjuang bersama selama 4
tahun.
xi
Uji Aktivitas Sitotoksik dan Proliferasi dari Kangen Water pada Sel Kanker
Payudara T47D
Ridwan Setiaji1, Asmiyenti Djaliasrin Djalil2, Elza Sundhani3
ABSTRAK
Kangen water adalah air yang dihasilkan dari mesin ionisasi air, dengan menggunakan proses elektrolisis, mesin kangen water sanggup merestrukturisasi air biasa dan mengubahnya menjadi air yang bersifat alkali. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui apakah kangen water memiliki aktivitas sitotoksik dan antiproliferasi terhadap sel kanker payudara T47D. Kangen water yang digunakan diperoleh dari produsen di wilayah Purwokerto. Uji sitotoksik dilakukan menggunakan metode MTT assay dengan waktu inkubasi selama 24 jam, sedangkan kinetika proliferasi sel dilakukan dengan metode doubling time. Uji sitotoksik kangen water menunjukkan potensi sitotoksisitas yang sedang pada pH 2,5 (IC50 59,439 %), pH 6 (IC50 46,986 %), pH 9 (IC50 46,611 %). Sel T47D
mengalami penurunan jumlah sel pada jam ke-24 hingga 72 pada sel yang diberi perlakuan dibanding dengan kontrol sel. Pemberian sampel kangen water dengan pH 6 konsentrasi 12,5% dapat menurunkan proliferasi sel T47D lebih baik dibandingkan dengan pH lainnya pada konsentrasi yang bervariasi.
xii
Test of Cytotoxic and Proliferative Activity of Kangen Water against T47D Breast Cancer Cells
Ridwan Setiaji1, Asmiyenti Djaliasrin Djalil2, Elza Sundhani3
ABSTRACT
Kangen Water is water produced from water ionization machine by using an electrolysis process. The machine that is used to produce Kangen Water is able to restructure ordinary water and convert it into alkaline water. This research aims to determine whether or not Kangen Water has cytotoxic and anti-proliferative activity against T47D breast cancer cells. The Kangen Water that was used in this research was from one of the producers addressed in Sumampir, Purwokerto. The cytotoxic test in this research was performed by using MTT assay method with 24 hours incubation time, while cell proliferation was performed by using doubling time method. The cytotoxic test on Kangen Water showed a potential moderate cytotoxicity at pH 9 (IC50 46.611 %). The treated T47D cells were having a cell
amount reduction during 24 to 72 hours. The sampling of Kangen Water by using pH 6 with 12.5% concentration could decrease the proliferation of cell T47D better than other pH in various concentrations.
Keywords: Kangen Water, anti-cancer, cell T47D
xiii
LEMBAR PERNYATAAN ORISINALITAS ... iv
KATA PENGANTAR ... v
RIWAYAT HIDUP ... vii
MOTTO ... viii
LEMBAR PERSETUJUAN PUBLIKASI ... ix
PERSEMBAHAN ... x
A. Latar Belakang Masalah ... 1
B. Perumusan Masalah ... 3
C. Tujuan Penelitian ... 3
D. Manfaat Penelitian ... 3
BAB II. TINJAUAN PUSTAKA ... 4
A. Penelitian Terdahulu ... 4
B. Landasan Teori ... 4
1. Kanker ... 4
xiv
BAB III. METODE PENELITIAN ... 12
A. Jenis dan Rancangan Penelitian ... 12
B. Variabel Penelitian ... 12
C. Definisi Variabel Operasional ... 12
D. Waktu dan Tempat Penelitian ... 13
E. Alat dan Bahan ... 13
F. Jalannya Penelitian ... 14
1. Preparasi Sel ... 14
2. Pembuatan Larutan Sampel... 15
3. Uji Sitotoksik Menggunakan Metode MTT ... 15
4. Pengamatan Proliferasi Sel ... 15
G. Analisis Data ... 16
1. Analisisi IC50 ... 16
2. Analisisi Proliferasi Sel ... 16
BAB IV. HASIL DAN PEMBAHASAN ... 17
A. Pengumpulan Sampel Kangen Water ... 17
B. Uji Nilai pH Sampel Kangen Water ... 17
C. Potensi Sitotoksik Kangen Water... 18
D. Uji Proliferasi dengan Doubling Time ... 24
BAB V. KESIMPULAN DAN SARAN ... 27
A. Kesimpulan ... 27
B. Saran ... 27
xv
DAFTAR PUSTAKA ... 28
xvi
DAFTAR TABEL
Halaman
Tabel 4.1 Hasil pengukuran pH sampel kangen water ... 17
Tabel 4.2 Hasil nilai IC50 dari masing-masing pH ... 24
xvii
DAFTAR GAMBAR
Halaman
Gambar 2.1 Sel Kanker ... 6
Gambar 2.2 Bagan generator elektrolisis air dan senyawa yang dihasilkan
(Huang et al., 2008) ... 9
Gambar 2.3 Kangen water (sumber pribadi: diambil di Laboratorium
Kultur Sel dan Jaringan, 2017)... 10
Gambar 4.1 Uji pengecekan nilai pH Kangen Water pada alat pH meter ... 18
Gambar 4.2 Reduksi MTT didalam sel hidup oleh enzim reduktase
didalam mitokondria menghasilkan kristal formazan (Ebada
et al, 2008) ... 19
Gambar 4.3 Morfologi sel T47D setelah diberi perlakuan selama 24 jam
dengan sampel kangen water diamati menggunakan
mikroskop ... 21
Gambar 4.4 Morfologi sel T47D sebelum dan sesudah diberi MTT (A)
kontrol sel sebelum diberi MTT terlihat sel normal dengan
bentuk bulat sampai memanjang dan berisi; (B) kontrol sel
setelah diberi MTT, MTT masuk kedalam sel; (C) pH6
konsentrasi 50% sebelum diberi MTT; (D) pH6 konsentrasi
50% setelah diberi MTT dilanjutkan dengan inkubasi selama
xviii
DAFTAR LAMPIRAN
Halaman
Lampiran 1. Uji Pengecekan Nilai pH Sampel Kangen Water ... 31
Lampiran 2. Perhitungan Seri Konsentrasi untuk Uji Sitotoksik Sel T47D ... 32
Lampiran 3. Pemetaan Uji Sitotoksik dan Proliferasi. ... 33
Lampiran 4. Hasil Uji Sitotoksik pH 2,5 ... 34
Lampiran 4. Hasil Uji Sitotoksik pH 6 ... 40
Lampiran 4. Hasil Uji Sitotoksik pH 9 ... 46
Lampiran 5. Hasil Uji Proliferasi dengan Doubling Time ... 52
