Lampiran 2. Bagan Kerja Penelitian
Herba Pugun Tanoh
Dicuci
Ditiriskan lalu ditimbang
Dikeringkan hingga kering
Diserbuk
Serbuk simplisia herba pugun tanoh
Ditimbang serbuk simplisia
Diekstraksi dengan etil asetat Simplisia
Disortir
Dikarakterisasi Sortasi kering
Ekstrak Etil Asetat
Diidentifikasi secara spektrofotometri UV dan IR
Spektrum
Diisolasi dengan kromatografi kolom dan KLT
Diisolasi dengan preparatif dan KLT beberapa fase gerak
Isolat
51
Lampiran 3. Tumbuhan Herba Pugun Tanoh Segar
Gambar 1. Tanaman pugun tanoh
Lampiran 4. Simplis
G
Gamb
lisia herba pugun tanoh dan serbuk simplisia her
Gambar 3. Simplisia daun pugun tanoh
mbar 4. Serbuk simplisia herba pugun tanoh
herba pugun tanoh
Lampiran 5. Bagian m
Gambar
Keterangan:
a. Kristal kalsium oks
b. Tulang daun
c. Rambut berkelenja
d. Pembuluh angkut be
e. Stomata tipe anom
f. lStomata tipe dias
g. Sel tetangga
h. Epidermis bergari
i. Trikoma
(Sinulingga; 2015).
53
n mikroskopik dari simplisia herba pugun tanoh
ar 5. Mikroskopik simplisia herba pugun tan
oksalat bentuk prisma
njar
kut bentuk spiral
Lampiran 6. Bagan skrining fitokimia dan karakterisasi simplisia Herba pugun tanoh
Simplisia
-Pemeriksaan Mikroskopik -Pemeriksaan Makroskopik -Penetapan kadar air
-Penetapan kadar sari yang larut dalam etanol -Penetapan kadar sari yang larut dalam air -Penetapan kadar abu total
55
Dimaserasi dengan etil asetat dan dibiarkan selama 2 hari
Disaring
Dimaserasi dengan etil asetat dan dibiarkan selama 2 hari Disaring
Lampiran 7. Bagan pembuatan ekstrak etil asetat herba pugun tanoh
Dimaserasi dengan pelarut etil asetat dalam wadah gelap sampai terendam selama 2 hari sambil sesekali diaduk Disaring
Ekstrak kental etil asetat
Ampas Maserat II
Ampas Maserat I
Ampas Maserat III
Dikumpulkan
Diidentifikasi secara UV dan IR Dicuci dengan metanol
KLT beberapa fase gerak dikerok
Direndam dengan metanol 20 ml
Disaring
Lampiran 8. BaganIsolasi senyawa flavonoid dari herba pugun tanoh
Dilakukan pengujian KLT
Diamati dengan sinar UV 366 nm
Eluat yang sama digabung
Di uji KLT preparatif
Eluat (31)
E1 E7 E8 E10 E11 E12 E13 E15 E16 E17 E18
Fluoresensi
Isolat
Residu Filtrat
Isolat
Dikromatografi Kolom dengan fase gerak
n-heksana-etilasetat dan fase diam silika gel 60 H
E2 E9 E14
E22 E21 E20
57
Lampiran 9. Perhitungan hasil penetapan kadar air
Kadar air =volumeair (ml)
beratsampel (g)
x 100%
Lampiran 10. Perhitungan hasil penetapan kadar sari yang larut dalam air
Kadar sari larut dalam air = berat sari
berat simplisia
x
x
100%1. Kadar sari larut dalam air I
Berat cawan = 43,323 g
2. Kadar sari larut dalam air II
Berat cawan = 43,149 g
3. Kadar sari larut dalam air III
59
Lampiran 11. Perhitungan hasil penetapan kadar sari yang larut dalam etanol
1. Kadar sari larut dalam etanol I
Berat Cawan = 47,837 g
Berat Cawan + Berat Sari = 47,921 g
Berat Sampel = 5,001 g
Berat sari = 0,084 g
Kadar sari larut dalam etanol
=
,,
x
x
100%=8,39%
2. Kadar sari larut dalam etanol II
Berat Cawan = 45,194 g
3. Kadar sari larut dalam etanol III
Berat Cawan = 46,273 g Kadar sari larut dalam etanol
=
berat sariLampiran 12. Perhitungan hasil penetapan kadar abu total
61
Lampiran 13. Perhitungan hasil penetapan kadar abu tidak larut dalam asam
1. Sampel I Kadar abu tidak larut dalam asam
=
berat abubp
tp
Lampiran 14. Kromatogram dari ektrak etil asetat herba pogun tanoh dengan fase gerak n-heksana-etil asetat
80:20 70:30 60:40 50:50 40:60
Keterangan: Fase diam silika gel GF254, fase gerak n-heksana-etil asetat,
63
Lampiran 15. Kromatogram KLT dari hasil fraksinasi Kolom
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19
20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31
Keterangan: Fase diam silika gel GF254, fase gerak n-heksana-etilasetat (4:6), penampak bercak sinar UV 366 nm, tp = titik penotolan, bp = batas pengembangan.
tp bp
tp
Lampiran 16. Kromatogram hasil KLT Preparatif dari E20
Keterangan: Fase diam silika gel GF254, fase gerak n-heksana-etilasetat, penampak bercak sinar UV 366 nm, tp = titik penotolan, bp = batas
pengembang.
bp
65
Lampiran 17. Kromatogram KLT uji kemurnian
I II III IV
Keterangan: Fase diam silika gel GF254, fase gerak n-heksana-etilasetat, penampak bercak sinar UV 366 nm, tp=titik penotolan, bp=batas
pengembangan.
I. toluen-etil asetat (7:3) Rf : 0.38; II. Kloroform-etil asetat (5:5) Rf : 0.8; III. n-heksana-etil asetat (8:2) Rf: 0.24; IV. Metanol-etil asetat (1:9) Rf: 0.11
67
69
71
73
Lampiran 25. Gambar alat spektrofotometer yang digunakan analisis isolat murni