LAPORAN PRAKTIKUM MIKROBIOLOGI
(PENGUKURAN SEL BAKTERI)
Disusun untuk memenuhi tugas Matakuliah Praktikum Mikrobiologi yang dibina oleh Prof. Dr. Utami Sri Hastuti, M.Pd dan Dr. Endang Suarsini, M. Kes
Oleh Kelompok 2 Agung Pambudiono 140341807121 Mardiana 140341807227 Mia Asnimulia 140341807913 Ummul Hasanah 140341807556 Wasiatus Sa’diyah 140341807533 PROGRAM PASCASARJANA UNIVERSITAS NEGERI MALANG
A. Topik
Pengukuran Sel Bakteri
B. Tujuan
1. Untuk memperoleh keterampilan menera harga skala mikrometer okuler. 2. Untuk mengukur sel bakteri.
C. Waktu Pelaksanaan Jumat, 12 September 2014
D. Dasar Teori
Mikrobiologi berasal dari kata mikro (kecil atau renik), bio (hidup) dan logos (ilmu). Jadi mikrobiologi merupakan bidang ilmu yang mengkaji tentang mikrobia seperti virus, archeae, bakteri, fungi, algae, dan protozoa. Mikrobia bukan nama dari suatu kelompok organisme seperti hewan dan tumbuhan. Istilah mikrobia (mikroorganisme) digunakan untuk menyatakan suatu organisme yang mempunyai ukuran yang sangat kecil, sehingga tidak dapat dilihat dengan mata telanjang tanpa menggunakan mikroskop (Ali, 2005).
Pengetahuan mengenai morfologi dan struktur halus bakteri diperoleh dalam dua kurun waktu yang berbeda. Pengamatan-pengamatan yang dibuat oleh Leeuwenhoek dengan mikroskopnya yang sederhana menampakkan penampilan kasar mikroorganisme, termasuk bakteri. Gambar-gambarnya yang telah dibuatnya dengan hati-hati mengenai apa yang kini kita kenal sebagai bakteri menampakkan bentuk-bentuk sel yang bundar, seperti batang atau spiral. Perbaikan-perbaikan selanjutnya dalam mikroskopi cahaya, termasuk teknik-teknik pewarnaan telah memungkinkan untuk mengamati dengan lebih tepat bentuk khas sel-sel ini, ukurannya, sebagian dari struktur luarnya serta pola penataannya. Ukuran, bentuk, serta penataan merupakan ciri morfologi kasar sel suatu spesies bakteri (Pelczar dan Chan, 2008).
Ukuran dan bentuk banyak sekali dipergunakan di dalam identifikasi dan klasifikasi sel-sel mikroorganisme. Dimensi sel pada umumnya
dinyatakan dalam satuan mikrometer (µm), yaitu suatu satuan pengukuran yang besarnya 1/1000 mm. Berbagai jenis mikroorganisme mempunyai ukuran yang beragam, dari mulai kurang dari 1 µm sampai dengan beberapa µm. Pengukuran yang tepat sel mikroorganisme dapat dilakukan dengan cara menyisipkan suatu mikrometer okular pada lensa okular mikroskop yang digunakan untuk mengamati sel tersebut. Mikrometer okular pada umumnya merupakan suatu piringan kaca bundar yang pada salah satu permukaannya terukir skala pengukuran. Sebelum digunakan untuk mengukur sel, mikrometer okular ini terlebih dahulu harus ditera terhadap mikrometer pentas yang sudah memiliki skala yang pasti (Hadioetomo, 1985).
Kebanyakan bakteria merupakan jasad yang transparan (tembus cahaya) dengan indeks bias yang sama dengan indeks bias cairan suspensi di mana bakteri tersebut hidup. Berdasarkan pengamatan dengan menggunakan mikroskop, morfologi bakteria dapat dibedakan menjadi bakteri yang berbentuk bulat (kokus), bakteri yang berbentuk batang (basil), dan bakteri yang berbentuk spiril (Tarigan, 1988). Pada umumnya bakteri itu kecil sekali, sehingga kita memerlukan mikroskop untuk dapat mengamatinya. Kokus ada yang berdiameter 0.5 µ, ada pula yang diameternya sampai 2.5 µ. Basil ada yang lebarnya antara 0.2 sampai 2.0 µ, sedang panjangnya ada yang 1 sampai 15 µ (Dwidjoseputro, 1989).
E. Alat dan Bahan 1. Alat:
a. Mikroskop
b. Mikrometer okuler (ocular micrometer) c. Mikrometer meja (stage micrometer) 2. Bahan:
a. Sediaan bakteri yang telah diwarnai secara gram b. Kertas penghisap
c. Kertas lensa d. Alkohol 70% e. Lisol
f. Sabun cuci g. Lap kain
F. Prosedur Kerja
1. Peneraan Mikrometer Okuler
Memasangkan mikrometer okuler pada bagian mikroskop yang biasanya dipakai sebagai tempat lensa okuler
Memasangkan mikrometer meja pada meja benda pada mikroskop
Mengatur posisi garis skala mikrometer okuler dan mikrometer meja sehingga titik nol kedua mikrometer ini
berada pada satu garis lurus
Mengamati garis skala ke berapakah dari mikrometer okuler yang berada pada satu garis lurus dengan garis skala
mikrometer meja (selain titik nol)
Menghitung harga 1 skala mikrometer okuler pada pembesaran lensa yang digunakan saat peneraan
2. Pengukuran Sel Bakteri
Melepas mikrometer meja dari meja benda mikroskop, kemudian pasanglah sediaan bakteri yang telah diwarnai
secara gram pada tempat tersebut
Mengatur posisi sel-sel bakteri sehingga berada pada bidang skala mikrometer okuler (dapat dilakukan dengan
memutar mikrometer okuler)
Mengatur posisi sel bakteri hingga berada pada bidang skala mikrometer okuler
Melakukan pengukuran dan menentukan panjang & diameter sel bakteri dalam satuan skala
Mengubah hasil harga skala yang ditemukan ke dalam satuan milimeter berdasar harga tiap skala mikrometer
G. Hasil Pengamatan
Gambar 1. Koloni 1
Tabel 1. Data hasil pengukuran sel bakteri
No. Koloni
Lokasi No. Sel Bentuk Diameter Panjang
1 Kanopi Biologi 1 Streptococcus 1 skala - 2 Streptococcus 1 skala - 3 Streptococcus 1 skala - 2 Kanopi FMIPA
1 Streptobacillus 6 skala ½ skala
2 Streptobacillus 6 skala ½ skala
3 Streptobacillus 3 skala ½ skala
H. Analisis Data
1. Peneraan Mikrometer Okuler
Peneraan dilakukan pada mikroskop cahaya nomor 10 dan mikrometer okuler nomor 2. Perbesaran yang digunakan adalah perbesaran 10 x 40 dan 10 x 100. Pada perbesaran 10 x 40 didapatkan jumlah garis pada mikrometer okuler yang sejajar jumlah garis mikrometer meja/objektif adalah 41 skala mikrometer okuler berbanding 10 skala mikrometer objektif.. Pada perbesaran 10 x 100 didapatkan jumlah garis pada mikrometer okuler yang sejajar jumlah garis mikrometer meja/objektif adalah 10 skala mikrometer okuler berbanding 1 skala mikrometer objektif. Untuk mencari harga 1 skala mikrometer okuler dapat dilakukan sebagai berikut:
a. Perbesaran 10 x 40
41 skala mikrometer okuler = 10 skala mikrometer objektif = 10 x 0.01 mm
= 0.1 mm
1 skala mikrometer okuler = = 0.0024 mm = 2.4 µm b. Perbesaran 10 x 100
10 skala mikrometer okuler = 1 skala mikrometer objektif = 1 x 0.01 mm
= 0.01 mm
1 skala mikrometer okuler = = 0.001 mm = 1 µm 2. Pengukuran Sel Bakteri
a. Koloni 1 (Kanopi Biologi) Ø1 = 1 skala x 1 µm = 1 µm
Ø2 = 1 skala x 1 µm = 1 µm
Ø3 = 1 skala x 1 µm = 1 µm
b. Koloni 2 (Kanopi FMIPA)
Ø1 = ½ skala x 1 µm = 0.5 µm P1 = 6 skala x 1 µm = 6 µm
Ø2 = ½ skala x 1 µm = 0.5 µm P2 = 6 skala x 1 µm = 6 µm
Ø3 = ½ skala x 1 µm = 0.5 µm P3 = 3 skala x 1 µm = 3 µm
I. Pembahasan
1. Peneraan Mikrometer Okuler
Peneraan mikrometer okuler dilakukan pada mikroskop cahaya bernomor 10 dan mikrometer okuler bernomor 2. Berdasarkan hasil pengamatan, perbedaan pembesaran memberikan harga skala yang berbeda pula. Pada perbesaran 10 x 40 diperoleh 1 skala mikrometer okuler sama dengan 2.4 µm. Sedangkan pada perbesaran 10 x 100 diperoleh bahwa 1 skala mikrometer okuler sama dengan 1 µm.
Pengukuran yang tepat sel mikroorganisme dapat dilakukan dengan cara menyisipkan suatu mikrometer okular pada lensa okular mikroskop yang digunakan untuk mengamati sel tersebut. Mikrometer okular pada umumnya merupakan suatu piringan kaca bundar yang pada salah satu permukaannya terukir skala pengukuran. Sebelum digunakan untuk mengukur sel, mikrometer okular ini terlebih dahulu harus ditera terhadap mikrometer pentas yang sudah memiliki skala yang pasti (Hadioetomo, 1985).
2. Pengukuran Sel Bakteri
Hasil pengamatan menunjukkan bahwa bakteri tangkapan yang diperoleh dari kedua lokasi berbeda juga memiliki struktur yang berbeda. Pada lokasi I yaitu pada kanopi Biologi diperoleh koloni bakteri yang berbentuk streptococcus. Sedangkan pada lokasi II pada kanopi FMIPA diperoleh koloni bakteri berbentuk streptobacillus.
Pengukuran sel bakteri dari kedua jenis koloni memperlihatkan ukuran yang berbeda. Koloni I berupa streptococcus (bulat berantai) memperlihatkan ukuran dari 1 dimensi saja yaitu diameter. Hal ini dikarenakan bentuk dasarnya berupa bulat. Data pengukuran menunjukkan bahwa ketiga sel yang diamati dari koloni I semuanya berdiameter 1 µm. Menurut Dwidjoseputro (1989), kokus ada yang berdiameter 0.5 µ, ada pula yang diameternya sampai 2.5 µ. Adapun koloni II berupa streptobacillus (basil/batang berantai) memperlihatkan ukuran dari 2 dimensi, yaitu diameter dan panjang. Data pengukuran menunjukkan ketiga sel memiliki diameter yang sama, sedangkan dari segi ukuran panjang berbeda. Kedua sel pertama yang diukur memiliki panjang 6 µm dan sel ketiga berukuran 3 µm. Menurut Dwidjoseputro (1989), basil ada yang lebarnya antara 0.2 sampai 2.0 µ, sedang panjangnya ada yang 1 sampai 15 µ
J. Diskusi
1. Mengapa perlu dilakukan peneraan harga skala mikrometer okuler, baik pada perbesaran 40x maupun 100x?
Peneraan harga skala mikrometer okuler perlu dilakukan agar dapat diketahui harga skala mikrometer pada mikroskop yang digunakan. Hal ini disebabkan setiap mikroskop memiliki harga skala yang berbeda. Begitu pula dengan perbesaran yang digunakan. Jika perbesarannya berbeda maka harga skalanya juga akan berbeda. Jadi perlu diketahui masing-masing harga skalanya, sebab kedua jenis perbesaran ini yang digunakan dalam pengukuran.
2. Mengapa dapat terjadi variasi ukuran sel bakteri pada spesies bakteri yang berbeda?
Adanya variasi dikarenakan perbedaan nutrisi dan metabolisme dari masing-masing bakteri. Selain itu hal ini dikarenakan adanya fungsi yang berbeda dari bakteri tersebut.
K. Kesimpulan
1. Peneraan harga 1 skala mikrometer pada perbesaran 10 x 40 sama dengan 2.4 µm dan pada perbesaran 10 x 100 sama dengan 1 µm.
2. Kedua koloni yang diukur menunjukkan bentuk yang berbeda. Pada koloni I menunjukkan bentuk streptococcus jadi hanya memiliki dimensi diameter dalam pengukurannya. Sedangkan pada koloni II memiliki dua dimensi pengukuran berupa diameter dan panjang.
DAFTAR PUSTAKA
Ali, Alimuddin. 2005. Mikrobiologi Dasar Jilid I. Makassar: State University of Makassar Press.
Dwidjoseputro, D. 1989. Dasar-dasar Mikrobiologi. Jakarta: Penerbit Djambatan
Hadioetomo, Ratna Siri. 2005. Mikrobiologi Dasar dalam Praktek: Teknik dan Prosedur Dasar Laboratorium. Jakarta: Gramedia
Hastuti, Utami Sri. 2012. Penuntun Praktikum Mikrobiologi untuk Program S2 Biologi. Malang: Penerbitan Universitas Muhammadiyah Malang
Pelczar, Michael J. dan E.C.S. Chan, 2008. Dasar-dasar Mikrobiologi. Jakarta: UI-Press
Tarigan, Jeneng. 1988. Pengantar Mikrobiologi. Jakarta: Departemen Pendidikan dan Kebudayaan
