IHK APLIKASI DX.PA

(1)

IMMUNOHISTOKIMIA

SEBAGAI

PENYEMPURNA

(2)

PENDAHULUAN

 Definisi Imunohistokimia ( IHK )Definisi Imunohistokimia ( IHK )

Sistem pengecatan jaringan yang didahului dengan reaksi Sistem pengecatan jaringan yang didahului dengan reaksi antigen antibodi

antigen antibodi

 Pengecatan jaringan PAPengecatan jaringan PA

(3)

DASAR PEMIKIRAN

Didalam/pada sel terdapat berbagai macam

struktur protein yang spesifik baik tingkat selular

maupun tingkat molekuler.



Contoh protein spesifik selular :



Contoh protein spesifik molekuler : RE, RP ,

Her 2 , p53,dll

(4)

DASAR PEMIKIRAN



Kalau dapat diperoleh antigen spesifik yang

murni maka akan didapat antibodi(Ab)

spesifik terhadap antigen tersebut (selanjutnya

Ab akan diproduk oleh pabrik)



Apabila Antibodi(Ab primer) tersebut dapat

dilabel atau sudah berlabel ..maka pengecatan

terhadap label tersebut dapat dilakukan.



Apabila pengecatan tersebut terjadi maka

(5)

PRINSIP PENGECATAN

IMUNOHISTOKIMIA

 Bila Ag.spesifik diikat oleh Ab spesifik yang berlabelBila Ag.spesifik diikat oleh Ab spesifik yang berlabel

Label tsb kemudian di cat dg cat chromogren Label tsb kemudian di cat dg cat chromogren

 Bila Ag spesifik diikat oleh Ab.spesifik yang tak berlabelBila Ag spesifik diikat oleh Ab.spesifik yang tak berlabel

Ikatan tsb diikat oleh antibodi non spesifik yang dapat Ikatan tsb diikat oleh antibodi non spesifik yang dapat dilabel

dilabel

 Label ada 2 macam : - fluorescent Label ada 2 macam : - fluorescent

- enzym / peroksidase - enzym / peroksidase  Label fluorescent tak perlu dicat lagiLabel fluorescent tak perlu dicat lagi

(6)

PRINSIP PENGECATAN

IMUNOHISTOKIMIA





(7)

BEDA Im.Fl dan Im.Enz

 IMUNOFLORESENSIMUNOFLORESENS

 Proses : FSProses : FS

 Bahan hrs segarBahan hrs segar  Label : FITCLabel : FITC

 Mikroskop medan gelap Mikroskop medan gelap  Slide tak tahan lamaSlide tak tahan lama

 Harus segera difotoHarus segera difoto  Jaringan tak jelasJaringan tak jelas

 Terutama utk kulit & ginjalTerutama utk kulit & ginjal

 IMUNOENZIMIMUNOENZIM

 Proses : EmbedingProses : Embeding  Bahan tak harus segarBahan tak harus segar  Label : peroksidase Label : peroksidase

alkalin fosfatasealkalin fosfatase

 Mikroskop cahaya Mikroskop cahaya

 Slide tahan disimpan lama Slide tahan disimpan lama  Tak harus segera difotoTak harus segera difoto

 Jaringan tampak jelasJaringan tampak jelas

(8)

SYARAT BAHAN UTK IHK



Prosesing jaringan harus standard



Fiksasi buffer formalin / Bouin



Panas tak boleh lebih dari 65

° C



Titik lebur ( TL ) parafin < 60° C



Objek glass yang dipakai tak boleh diberi

(9)

MANFAAT IHK



Sel marker mis.pada kasus tumor anaplastik



Penyempurnaan dx. mis. pada LMNH



Penentuan metastasis kecil



Tumor marker mis. PSA , Thyroglob.



Membedakan hiperplasi dg neoplasma…

mis. Hiperplasia folikular vs LMNH

(10)

KAPAN DAPAT MEMANFAATKAN IHK

 Kalau tahu jenis protein yg mau dideteksiKalau tahu jenis protein yg mau dideteksi

 Kalau tahu protein tersebut lokasinya dimanaKalau tahu protein tersebut lokasinya dimana

 Kalau pabrik sudah membuat Ab primernyaKalau pabrik sudah membuat Ab primernya

 Kalau lab.PA punya kemampuan pem.IHKKalau lab.PA punya kemampuan pem.IHK

(11)

SEL B ( CD 20 ) + & SEL T ( CD 3 ) +

PADA KELENJAR LIMFE NORMAL

(12)

LMNH DG Bcl 2 POSITIP

(13)

(14)

(15)

CA.MAMMA DG HER 2 POSITIP

(16)

CONTOH APLIKASI

 Didiagnosis tumor Didiagnosis tumor ganas anaplastik /

ganas anaplastik /

undifferentited.

 Maka perlu dilakukan Maka perlu dilakukan pem.IHK dengan

Tumor ganas epitelialTumor ganas epitelial

(17)

CONTOH APLIKASI

 Didiagnosis suatu kasus Didiagnosis suatu kasus dengan LMNH

dengan LMNH

 Untuk klasifikasi Untuk klasifikasi

(18)

CONTOH APLIKASI

 Dalam mendiagnosis Dalam mendiagnosis

limfadenopati sukar

 Tentukan terlebih dulu sel T Tentukan terlebih dulu sel T

atau sel B

BODI Hiper-plasiaHiper-plasia LMNHLMNH

Kappa

Kappa ++ +/-

+/-Lambda

Lambda ++ - /+- /+

(19)

CONTOH APLIKASI

 Didiagnosis Karsinoma Didiagnosis Karsinoma

(20)

CONTOH APLIKASI

CK

CK EMAEMA VIMVIM LCALCA S100S100 HMB45HMB45

Carcinoma

Carcinoma ++ ++ -- -- -/+-/+ -

-Melanoma

Melanoma -- -- ++ -- ++ ++

Lymfoma

Lymfoma -- -/+-/+ ++ ++ -- -

-Anaplastic round cell tumor in adult

(21)

CONTOH APLIKASI

LCA

LCA VIMVIM CKCK DESDES MSAMSA NFNF S100S100 NSENSE Leu7Leu7

(22)

GUIDE TO CHOICE OF ANTIBODY PANEL

FOR DIFFICULT CASES

Carcinoma vs Lymphoma

Carcinoma vs Lymphoma EMA,CK,CEA vs LCA EMA,CK,CEA vs LCA

Carcinoma vs Melanoma EMA,CK,CEA vs S100

Lymphoma vs Oat cell ca. LCA vs NSE

Metastatic Ca. vs Astrocytoma EMA,Keratin,CEA vs GFAP

Prostat vs Bladder Ca. PAP,PSA

Carcinoma vs Mesotelioma CEA

Carcinoma vs Sarcoma EMA,CK,CEA vs vimentin

(23)

(24)

Tempat deposisi imun pd peny.kulit

 Dlm epidermisDlm epidermis : Pemphigus : Pemphigus

 Pd dermo-epidermal : Bullous phempigoid ,Pd dermo-epidermal : Bullous phempigoid ,

junction Herpes Gestationisjunction Herpes Gestationis

Epidermolysis Bullosa AcquisitaEpidermolysis Bullosa Acquisita

Linear IgA DermatosesLinear IgA Dermatoses

Dermatitis HerpetiformisDermatitis Herpetiformis

Lichenoid rx , lupus eryth.Lichenoid rx , lupus eryth.

Lichen phempigoidLichen phempigoid

(25)