Uji Aktivitas Antihiperurisemia Ekstrak Etanol Herba Anting - anting (Acalypha indica linn.) Pada Tikus Jantan

(1)

(2)

(3)

Lampiran 3.

Tanaman anting-anting

(4)

Lampiran 5.

Simplisia tanaman anting-anting

(5)

Lampiran 7.

Bagan alur Penelitian

Herba anting-anting

Simplisia

Serbuk

Karakterisasi simplisia

Skrining fitokimia

-

Pemeriksaan makroskopik

-

Pemeriksaan mikroskopik

-

Penetapan kadar air

-

Penetapan kadar sari larut

dalam air

-

Penetapan kadar sari larut

dalam etanol

-

Penetapan kadar abu total

-

Penetapan kadar abu tidak

larut dalam asam

Pemeriksaan :

-

Alkaloid

-

Flavonoida

-

Saponin

-

Tanin

-

Steroid/triterpenoid

Dicuci dari pengotor hingga bersih

Ditiriskan

Ditimbang

Dikeringkan di lemari pengering

(6)

Lampiran 7.

(Lanjutan)

Serbuk simplisia

(400 gram)

Ampas

Maserat 1

Dimaserasi dengan 75 bagian

etanol 96 %

Ekstrak etanol kental

106.8 gram

Diuapkan menggunakan rotary evaporator

Depekatkan di atas penangas air

Maserat 2

Diremaserasi dengan

etanol 96% hingga

diperoleh 100 bagian

Maserat

Karakterisasi

Penetapan:

-

Kadar air

-

Kadar sari larut dalam

air

-

Kadar sari larut dalam

etanol

-

Kadar abu total

-

Kadar abu tidak larut

dalam asam

Pengujian aktivitas

antihiperurisemia

Pengukuran

kadar asam urat

Skrining fitokimia

Pemeriksaan :

-

Alkaloida

-

Flavonoida

-

Saponin

-

Tanin

(7)

Lampiran 8.

Perhitungan Hasil Karakterisasi Herba Anting-anting

1. Perhitungan penetapan kadar air Simplis

% Kadar Air =

Volume

air

Berat

Sampel

x 100%

1. % Kadar Air =

0 ,

2

5 ,

5 x100% = 4,0 %

2. % Kadar Air =

0 ,

2

5 ,

1 x100% = 3,9 %

3. % Kadar Air =

0 ,

2

5 ,

0 x100% = 4,0 %

% Kadar Air Rata-Rata =

4 ,

0+

3 ,

9 +

4 ,

0

3 = 3,97 %

No

Berat Sampel (g)

Volume Air (ml)

1.

2.

3. 5,0

5,1

5,0

0,2

(8)

2. Perhitungan penetapan Kadar Sari larut dalam air

No

Berat Sampel (g)

Berat Sari (g)

1

2

3 5,012

5,019

5,011

0,184

0,189

0,182

%Kadar Sari larut dalam air =

1. %Kadar Sari larut air

=

= 18,36 %

2. %Kadar Sari larut air

=

= 18,82 %

3. %Kadar Sari larut air

=

= 18,16 %

%Kadar Sari larut air rata-rata = 18,36% + 18,82% + 18,16%

(9)

3. Kadar Sari larut dalam Etanol

No

Berat Sampel (g)

Berat Sari (g)

1

2

3 5,015

5,020

5,012

0,077

0,082

0,086

%Kadar Sari larut dalam air =

1. %Kadar Sari larut air

=

= 7,67 %

2. %Kadar Sari larut air

=

= 8,16 %

3. %Kadar Sari larut air

=

= 8,57 %

%Kadar Sari larut air air rata-rata = 7,67% + 8,16% + 8,57%

3

(10)

4. Perhitungan Penetapan Kadar Abu Total

No

Berat Sampel (g)

Berat Abu (g)

1

2

3 2,0004

2,0002

2,0005

0,0747

0,0745

0,0765

%Kadar Abu Total =

1. %Kadar Abu Total

=

= 3,73 %

2. %Kadar Abu Total

=

= 3,72 %

3. %Kadar Abu Total

=

= 3,82 %

% Kadar abu rata-rata = 3,73% + 3,72% + 3,82%

3 =

3,76%

(11)

5. Perhitungan Kadar Abu tidak larut dalam asam

No

Berat Sampel (g)

Berat Abu (g)

1

2

3 2,0004

2,0002

2,0005

0,0024

0,0032

0,0031

%Kadar Abu =

1. %Kadar Abu

=

= 0,12 %

2. %Kadar Abu

=

= 0,15 %

3. %Kadar Abu

=

= 0,15 %

%Kadar abu rata-rata =

0,12% + 0,15% + 0,15%

3 =

0,14%

(12)

Lampiran 9

. Contoh Perhitungan Dosis

Contoh perhitungan volume larutan suspensi Allopurinol yang diambil untuk

diberikan secara per oral (po) pada hewan uji tikus

-

Dosis Allopurinol adalah 10 mg/kg BB.

-

Konsentrasi larutan suspensi Allopurinol yang dibuat = 10 mg/10 ml

-

Berat Bahan aktif allopurinol dalam 20 tablet adalah = 20 x 100 mg

= 2000 mg

-

Bobot 20 tablet Allopurinol= 2125 mg.

-

Maka serbuk yang ditimbang =

10 mg

2000

mg

=

x

2125

mg

= 10,625 mg

-

Jadi dalam serbuk 10,625 mg mengandung 10 mg Allopurinol .

-

Dibuat suspensi dengan cara menimbang serbuk Allopurinol sebanyak 10,625

mg kemudian ditambahkan sedikit CMC Na 1% digerus sampai homogen.

Dituang kedalam labu tentukur 10 ml, ditambah CMC Na 1% sampai batas

tanda.

Berapa volume larutan Allopurinol yang akan diinduksi?

Misal : BB tikus = 200 gr

a.

Jumlah allopurinol yang diberikan = 10 mg/kg BB x BB tikus

= 10 mg/kg BB x 200 gr

=

10 mg

1000

gr

x 200 gr

= 2 mg

b.

Volume pemberian untuk tikus 200 g =

2 mg

(13)

Lampiran 9.

(lanjutan

)

Perhitungan volume pemberian ekstrak etanol herba

anting-anting dosis 100, 150 dan 200 mg/kg bb

Dosis

ekstrak etanol herba anting-anting yang digunakan dalam penelitian ini adalah

100, 150 dan 200 mg/kg bb

A. EEHA dosis 100 mg/kg bb

Berat badan tikus = 199 g

Dosis pemberian =

199�100

1000

= 19,9 mg

Konsentrasi ekstrak = 100 mg/10 ml

Volume pemberian =

19,9

100

x10 ml = 1,9 ml

B. EEHA dosis 150 mg/kg bb

Berat badan tikus = 196 g

Dosis pemberian =

196�150

1000

= 29,4 mg

Konsentrasi ekstrak = 150 mg/10 ml

Volume pemberian =

29,4

150

x10 ml = 1,96 ml

C. EEHA dosis 200 mg/kg bb

Berat badan tikus = 198,2 g

Dosis pemberian =

198,2�200

1000

= 39,64 mg

Konsentrasi ekstrak = 200 mg/10 ml

Volume pemberian =

39,64

(14)

Lampiran 9.

(Lanjutan)

Contoh perhitungan dosis Kafein yang akan diberikan pada tikus secara per

oral (p.o.)

- Dosis induksi kafein untuk tikus = 135 mg/kg bb

- Syarat volume maksimum larutan sediaan uji yang diberikan pada hewan uji tikus

(200 g) secara oral adalah 5.0 ml

- Konsetrasi larutan induksi suspensi kafein yang dibuat

= 135 mg / 10 ml

Berapa volume larutan induksi kafein yang akan diinduksikan ?

Mis : BB Tikus = 200 g

a. Jumlah obat yang diberikan

= 135 mg/kg bb x bb

=

135�200

1000

= 27 mg

b. Volume larutan yang diberi = 27 mg

135mg

x 10 ml = 2ml

(15)

Lampiran 10.

Hasil Pengukuran Kadar Asam Urat

Perlakuan

Berat

Badan

Kadar asam urat (mg/dL)

(16)

Lampiran 11.

Tabel Standart Deviasi Hasil Pengukuran Kadar Asam Urat

kafein dan

jus hati

ayam

(mg/ dL)

KAU SD setelah perlakuan (mg/ dL)

(17)

Lampiran 12.

Hasil pengukuran persen penurunan kadar asam urat

Perlakuan

Berat

Badan

Kadar asam urat (mg/dL)

(18)

Lampiran 13.

Tabel Standar Deviasi % Penurunan Kadar Asam Urat

Kelompok

Uji

KAU SD % Penurunan kadar asam urat (mg/dL)

(19)

Lampiran 14

. Gambar Alat

Easy Touch®

Keterangan :

1. Wadah penyimpanan strip

2. Strip

3. Memori strip

4. Alat

Easy Touch

1

2

(20)

Lampiran 15.

Gambar Hewan Percobaan (Tikus putih jantan)

(21)

Lampiran 16.

Paired T-Test

Paired Samples Statistics

Mean N Std. Deviation Std. Error Mean

Pair 1 sebelum diet 2.25 25 .092 .018

sesudah diet 4.90 25 .235 .047

Paired Samples Correlations

N Correlation Sig.

Pair 1 sebelum diet & sesudah diet 25 .126 .549

Paired Samples Test

Paired Differences

t df

Sig.

(2-tailed) Mean

Std.

Deviation Std.

Error

Mean

95% Confidence

Interval of the

Difference

Lower Upper

(22)

Lampiran 17.

Hasil Perhitungan KAU Dengan SPSS

Descriptives

N Mean

Std.

Deviation Std. Error

95% Confidence

Interval for Mean

(23)

(24)

Lampiran 18. ANOVA

ANOVA

Sum of Squares df Mean Square F Sig.

H_0 Between Groups .022 4 .006 .778 .553

Within Groups .144 20 .007

Total .166 24

H_6 Between Groups .012 4 .003 .049 .995

Within Groups 1.228 20 .061

Total 1.240 24

H_9 Between Groups 6068.985 4 1517.246 85.815 .000

Within Groups 353.608 20 17.680

Total 6422.593 24

H_12 Between Groups 20504.018 4 5126.004 111.680 .000

Within Groups 917.984 20 45.899

Total 21422.001 24

H_15 Between Groups 31922.811 4 7980.703 233.621 .000

Within Groups 683.218 20 34.161

(25)

Dependent

Variable

(I)

Kelompok (J) Kelompok

Mean

Difference

(I-J)

Std.

Error Sig.

95% Confidence

Interval

Allopurinol (kontrol positiv) .08000 .05367 .580 -.0806 .2406

EEHA 100 mg/kg BB .04000 .05367 .943 -.1206 .2006

EEHA 150 mg/kg BB .04000 .05367 .943 -.1206 .2006

EEHA 200 mg/kg BB .02000 .05367 .996 -.1406 .1806

EEHA 150

mg/kg BB

CMC (kontrol negativ) -.08000 .05367 .580 -.2406 .0806

Allopurinol (kontrol positiv) .00000 .05367 1.000 -.1606 .1606

EEHA 100 mg/kg BB -.04000 .05367 .943 -.2006 .1206

EEHA 200 mg/kg BB -.02000 .05367 .996 -.1806 .1406

EEHA 200

mg/kg BB

CMC (kontrol negativ) -.06000 .05367 .795 -.2206 .1006

EEHA 100 mg/kg BB -.02000 .05367 .996 -.1806 .1406

EEHA 150 mg/kg BB .02000 .05367 .996 -.1406 .1806

H_6 CMC

(kontrol

negativ)

Allopurinol (kontrol positiv) -.06000 .15672 .995 -.5290 .4090

(26)

mg/kg BB Allopurinol (kontrol positiv) -.04000 .15672 .999 -.5090 .4290

EEHA 100 mg/kg BB .00000 .15672 1.000 -.4690 .4690

EEHA 200 mg/kg BB .02000 .15672 1.000 -.4490 .4890

EEHA 200

mg/kg BB

CMC (kontrol negativ) .00000 .15672 1.000 -.4690 .4690

EEHA 100 mg/kg BB -.02000 .15672 1.000 -.4890 .4490

EEHA 150 mg/kg BB -.02000 .15672 1.000 -.4890 .4490

H_9 CMC

(kontrol

negativ)

Allopurinol (kontrol positiv) -41.16600* 2.6593 5

CMC (kontrol negativ) 41.16600* 2.6593 5

.000 33.2082 49.1238

EEHA 100 mg/kg BB 11.51600* 2.6593

5

.003 3.5582 19.4738

EEHA 150 mg/kg BB 1.60600 2.6593

5

.973 -6.3518 9.5638

EEHA 200 mg/kg BB 1.28600 2.6593

5

.988 -6.6718 9.2438

EEHA 100

mg/kg BB

.000 21.6922 37.6078

(27)

EEHA 150

mg/kg BB

.000 31.6022 47.5178

Allopurinol (kontrol positiv) -1.60600 2.6593

5

.973 -9.5638 6.3518

EEHA 100 mg/kg BB 9.91000* 2.6593

5

.000 31.9222 47.8378

5

.000 62.3842 88.0278

EEHA 100 mg/kg BB 18.02800* 4.2848

2

.004 5.2062 30.8498

EEHA 150 mg/kg BB 2.47200 4.2848

2

.977 -10.3498 15.2938

EEHA 200 mg/kg BB 1.46400 4.2848

2

.997 -11.3578 14.2858

EEHA 100

mg/kg BB

.000 44.3562 69.9998

(28)

EEHA 150 mg/kg BB -15.55600* 4.2848

.000 59.9122 85.5558

2

.977 -15.2938 10.3498

EEHA 100 mg/kg BB 15.55600* 4.2848

2

.013 2.7342 28.3778

EEHA 200 mg/kg BB -1.00800 4.2848

2

.999 -13.8298 11.8138

EEHA 200

mg/kg BB

.000 60.9202 86.5638

2

.997 -14.2858 11.3578

EEHA 100 mg/kg BB 16.56400* 4.2848

2

.008 3.7422 29.3858

EEHA 150 mg/kg BB 1.00800 4.2848

2

.999 -11.8138 13.8298

H_15 CMC

(kontrol

negativ)

.000 82.2746 104.3974

EEHA 100 mg/kg BB 13.96800* 3.6965

3

.009 2.9066 25.0294

EEHA 150 mg/kg BB 3.40400 3.6965

3

.885 -7.6574 14.4654

EEHA 200 mg/kg BB 1.93000 3.6965

3

(29)

EEHA 100

mg/kg BB

.000 68.3066 90.4294

.009 -25.0294 -2.9066

EEHA 150 mg/kg BB -10.56400 3.6965

3

.000 78.8706 100.9934

3

.885 -14.4654 7.6574

EEHA 100 mg/kg BB 10.56400 3.6965

3

.066 -.4974 21.6254

EEHA 200 mg/kg BB -1.47400 3.6965

3

.994 -12.5354 9.5874

EEHA 200

mg/kg BB

.000 80.3446 102.4674

3

.984 -12.9914 9.1314

EEHA 100 mg/kg BB 12.03800* 3.6965

3

.029 .9766 23.0994

EEHA 150 mg/kg BB 1.47400 3.6965

3

.994 -9.5874 12.5354

(30)

H_0

Tukey HSDa

Kelompok N

Subset for alpha = 0.05

1

Allopurinol (kontrol positiv) 5 2.1600

EEHA 150 mg/kg BB 5 2.1600

EEHA 200 mg/kg BB 5 2.1800

EEHA 100 mg/kg BB 5 2.2000

CMC (kontrol negativ) 5 2.2400

Sig. .580

Means for groups in homogeneous subsets are displayed.

a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 5,000.

H_6

Tukey HSDa

Kelompok N

1

CMC (kontrol negativ) 5 4.7600

EEHA 200 mg/kg BB 5 4.7600

EEHA 100 mg/kg BB 5 4.7800

EEHA 150 mg/kg BB 5 4.7800

Sig. .995

(31)

H_9

Tukey HSDa

Kelompok N

1 2 3

CMC (kontrol negativ) 5 -11.7120

EEHA 100 mg/kg BB 5 17.9380

EEHA 150 mg/kg BB 5 27.8480

EEHA 200 mg/kg BB 5 28.1680

Sig. 1.000 1.000 .973

a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 5,000.

H_12

Tukey HSDa

Kelompok N

1 2 3

EEHA 100 mg/kg BB 5 30.2940

EEHA 150 mg/kg BB 5 45.8500

EEHA 200 mg/kg BB 5 46.8580

Sig. 1.000 1.000 .977

(32)

H_15

Tukey HSDa

Kelompok N

1 2 3

EEHA 100 mg/kg BB 5 39.0540

EEHA 150 mg/kg BB 5 49.6180 49.6180

EEHA 200 mg/kg BB 5 51.0920

Sig. 1.000 .066 .885