SIMPULAN DAN SARAN Simpulan
Isolat BAL yang diuji memiliki ketahanan yang baik terhadap pH rendah dan dari hasil analisis ragam diketahui terdapat perbedaan nyata dari masing -masing isolat terhadap pH rendah. Enam belas isolat mampu tumbuh pada pH 2,5 selama 90 menit dengan penurunan jumlah koloni yang bervariasi (antara 0,73-2,83 unit log/ml), sedangkan 4 isolat tidak mampu tumbuh pada pH rendah yaitu isolat FNCC 018, T2A, T3 dan TT1.
Isolat BAL yang diuji juga memiliki ketahanan yang berbeda untuk tumbuh pada lingkungan yang mengandung garam empedu 1% dan 5%. Pada konsentrasi garam empedu 1%, isolat FS1 memiliki penurunan jumlah koloni yang terkecil yaitu 0,56 unit log/ml, dimana hasil ini berbeda nyata dengan isolat-isolat lainnya. Sedangkan pada konsentrasi garam empedu 5%, isolat FS1 juga memiliki penurunan jumlah koloni yang terkecil yaitu 0,56 unit log/ml. Hasil analisis ragam menunjukkan bahwa tidak terdapat perbedaan nyata (p>0,05) antara konsentrasi garam empedu yang digunakan terhadap ketahanan dari masing-masing isolat terhadap garam empedu. Jadi penggunaan konsentrasi garam empedu 1% dan 5% tidak berpengaruh terhadap ketahanan masing -masing isolat. Tetapi terdapat perbedaan nyata (p<0,05) dari masing -masing isolat terhadap ketahanan terhadap garam empedu. Hal ini membuktikan bahwa masing-masing isolat bersifat strain dependent.
Isolat BAL yang diuji memiliki aktivitas antagonistik terhadap patogen enterik dengan derajat penghambatan yang berbeda-beda. Kisaran diameter penghambatan isolat BAL terhadap Escherichia coli adalah 4,7–6,8 mm, dan
Staphylococcus aureus adalah 3,8– 7,2 mm. Isolat FNCC 018 menunjukkan
penghambatan tertinggi terhadap kedua bakteri patogen tersebut. Diameter penghambatan terhadap Bacillus cereus adalah dan 3,5– 7,2 mm, dimana penghambatan terbesar oleh isolat SK2.
Berdasarkan pada uji ketahanan terhadap asam dan garam empedu serta aktivitas antagonis terhadap patogen enterik, maka isolat BAL yang terpilih sebagai probiotik dan diuji kemampuan penempelannya pada lempeng SS adalah WT2, WT1, SK2, SK3 dan FS. Dari uji penempelan tersebut, semua isolat mampu menempel dengan baik pada lempeng SS. Isolat yang paling menempel adalah WT1 yaitu 4,9 log sel per cm2, disusul oleh WT2 (4,8 log sel per cm2), SK3 (4,8 log sel per cm2), SK2 (4,7 log sel per cm2) dan FS1 (4,4 log sel per cm2).
Hasil uji pengaruh bakteri probiotik terhadap sekresi interleukin-8 dari alur sel HCT 116 menunjukkan bahwa terdapat kecenderungan peningkatan sekresi interleukin-8 dengan meningkatnya konsentrasi bakteri probiotik yang ditambahkan. Namun demikian, isolat SK3 dan WT1 pada konsentrasi 107 dan 108 cfu/ml dapat menurunkan sekresi interleukin-8 dari alur sel HCT 116 jika dibandingkan dengan kontrol, sebaliknya pada konsentrasi 109 mampu meningkatkan sekresi interleukin-8. Hal ini menunjukkan bahwa respon probiotik terhadap sekresi interleukin -8 selain bersifat strain dependent juga bersifat dose
dependent.
Saran
Perlu penelitian lebih lanjut untuk mengidentifikasi isolat BAL yang berpotensi sebagai probiotik yang dihasilkan dari penelitian ini dan akan lebih baik pula jika dilakukan identifikasi terhadap senyawa antimikroba yang
dihasilkan. Isolat SK3 dan WT1 mempunyai potensi untuk dikembangkan lebih lanjut sebagai imunomodulator. Untuk itu perlu penelitian lebih mendalam untuk mempelajari kemungkinan penerapan isolat tersebut untuk terapi penyakit
Inflamatory Bowel Disease (IBD). Untuk mengetahui efek isolat probiotik
terhadap respon imun seluler, maka perlu dilihat pengaruh isolat tersebut terhadap sekresi interleukin-10.
DAFTAR PUSTAKA
Bai AP, Q Ouyang, W Zhang, CH Wang dan SF Li. 2004. Probiotics inhibit TNF-á-induced interleukin-8 secretion of HT29 cells. World Journal
Gastroenterology. 10(3) : 455-457
Bender GR dan RE Marquis. 1987. Membran ATP-ase and acid tolerance of
Actinomyces viscosus and Lactobacillus casei. Applied And
Environmental Microbiology. 59(12) : 2124-2128
Bernett MF, D Brassart, JR Neeser dan AL Servin. 1993. Adhesion of human
Bifidobacteria strains to cultured human intestinal epithelial cells and
inhibition of Enteropathogen-cell interaction. Applied And Environmental
Microbiology. 59(12) : 4121-4128
Brady LJ, Gallaher DD dan Busta FF. 2000. The role of probiotic cultures in the prevention of colon cancer. Journal Nutrition. 130 : 410S-414S
Chateu N, I Castenallos dan AM Deschamps. 1993. Heterogeneity of bile salt resistance in the Lactobacilllus isolates of a comercial probiotic consortium. Journal Applied Microbiology. 84 : 759-768
Chou LS dan B Weimer. 1999. Isolation and characterization of acid and bile tolerant isolates from strains of Lactobacillus acidophilus. Journal Dairy
Science. 62 : 23-31
Corzo G, Gilliland SE. 1999. Measurement of bile salt hydrolase activity from
Lactobacillus acidophilus based on dissapearance of conjugated bile salts. Journal Dairy Science. 82 : 466-471
Davidson PM dan DG Hoover. 1993. Antimicrobial component from lactic acid bacteria. Di Dalam : Salminen S dan AV Wright. Lactic Acid Bacteria. Marcell Dekker. Inc. New York
Dewanti R. 1995. Studies on Biofilm Formation by Escherichia coli O157:H7. Disertasi. University of Wisconsin-Madison
Donglai Ma, P Forsythe dan J Bienenstock. 2004. Live Lactobacillus reuteri is essential for the inhibitory effect on tumor necrosis factor alpha-induced interleukin-8 expression. Infection and Immunity. 72(9) : 5308-5314 Drago L, MR Gismondo, A Lombardi, C de Haen, dan L Gozzini. 1997.
Inhibition of in vitro growth of Enteropathogens by New Lactobacillus isolates of human intestinal origin. FEMS Microbiology Letters. 153 : 455-463
Drouault S, G Corthier, SD Erlich dan P Renault. 1999. Survival physiology and lysis of Lactococcus lactis in the digestive tract. Applied And
Environmental Microbiology. 65 : 4881-4886
Elida M. 2002. Profil bakteri asam laktat dari dadih yang difermentasi dalam berbagai jenis bambu dan potensinya sebagai probiotik. Tesis. Institut Pertanian Bogor : Program Studi Ilmu Pangan
Erickson KL dan Hubbard NE. 2000. Probiotic imunomodulation in health and disease. Journal Nutrition. 130 : 403S-409S
Evanikastri. 2003. Isolasi dan karakterisasi bakteri asam laktat dari sampel klinis yang berpotensi sebagai probiotik. Tesis. Institut Pertanian Bogor : Program Studi Ilmu Pangan
Fardiaz, S. 1992. Mikrobiologi pangan I. PT Gramedia, Jakarta
Fuller R. 1989. Probiotic in man and animals. Journal Applied Bacteriology. 66 : 365-378
Furushiro M, Hashimoto S, Hamura M dan Yokokura T. 1993. Mechanism of the antihypertensive effect of a polysaccharide-glycopeptide complek from
Lactobacillus casei in spontaneously hypertensive rats (SHR). Bioscience Biotechnology Biochemistry. 57 : 978-981
Frazier WC dan DC Westhoff. 1988. Food Microbiology. 4th ed. Mc Graw-Hill Book Co., New York
Gallaher DD, Khil J. 1999. The effect of synbiotics on colon carcinogenesis in rats. American Society for Nutritional Sciences
Greene JD dan TR Klaenhammer. 1994. Factors involved in adherence of
Lactobacilli to human Caco-2 cells. Journal Applied and Environmental Microbiology. 60(12) : 4487-4494
Harrigan WF dan ME Mc Cance. 1976. Laboratory Methods in Food and Dairy Microbiology. Academic Press. New York
Havenar R, BT Brink dan JHJ Huis in’t Veld. 1992. Selection of strains for probiotic use. Di Dalam : Fuller R, editor. Probiotics : The Scientific Basic. Chapman & Hall. London
Hutkins RW, Nannen NL. 1993. pH homeostatis in lactic acid bacteria. Journal
Dairy Science. 76 : 2354-2365
Jacobsen CN, VR Nielsen, AE Hayford, PL Moller, KF Michaelsen, AP Erregaard, B Sandstrom, M Tvede dan M Jakobsen. 1999. Screening of
probiotic activities of forty seven strains of Lactobacillus spp. by in vitro techniques and evaluation of the colonization ability of five selected strains in human. Applied And Environmental Microbiology. 65 : 4949-4956
Jay JM. 1996. Modern Food Microbiology. Cha pman and Hall. New York, USA
Jin LZ, YW Ho, N Abdullah, MA Ali dan S Jalaludin. 1996. Antagonistic effect of intestinal Lactobacillus isolates on pathogens of chicken. Letters in
Applied Microbiology. 23 : 67-71
Kimoto H, J Kurisaki, NM Tsuji, S Ohmomo dan T Okamoto. 1999. Lactococci as probiotic strains : adhesion to human enterocyte-like Caco-2 cells and tolerance to low pH and bile. Letters in Aplied Microbiology. 29 : 313-316 Klaenhammer TR. 2000. Probiotic bacteria : Today and Tomorrow. Journal
Nutrition. 130 : 415S-416S
Kozaki M. 1998. Microorganism and their function in “Tradisional Fermented Food” in Southeast Asia. Proceeding of International Conference on Asia Network on Microbial Researches. Yogyakarta, 23th-25t h February
Kresno KB. 1996. Imunologi : diagnosis dan prosedur laboratorium. Edisi ketiga. Balai Penerbit FK-UI. Jakarta
Kuby J. 1992. Immunology. WH Freeman and Company. New York
Kusumawati N. 2002. Seleksi bakteri asam laktat indigenus sebagai galur probiotik dengan kemampuan mempertahankan keseimbangan mikroflora usus feses dan mereduksi kolesterol serum darah tikus. Tesis. Institut Pertanian Bogor : Program Studi Ilmu Pangan
Liao CC, AE Yousef, GW Chism dan ER Richter. 1994. Inhibition of S. aureus in buffer, culture media in food by lacidin A, a bacteriocin produced by
Lactobacillus acidophilus OSV 133. Journal Food Safety. 4(2)
Lin M, Savaiano Y dan Harlander S. 1991. Influence of nonfermented dairy product containing bacterial starter cultures on lactose maldigestion in huma ns. Journal Dairy Science. 74 : 87-95
Lohner K. 2001. Development of novel antimicrobial agents : emerging strategies. Horizon Scientific Press, Wymondham, UK
Mitsuoka T. 1990. Profile of intestinal bacteria : our lifelong partners. Yakult Honsa co. Ltd
Morata VI, Silvia N Gonzalez dan G Oliver. 1999. Study of adhesion of
Lactobacillus casei CRL 431 to ileal intestinal cells of mice. Journal Food Protection. 62 : 1430-1434
Morita H, Fang He, T Fuse, AC Ouwehand, H Hashimoto, M Hosoda, K Mizumachi dan J Kurisaki. 2002. Adhesion of lactic acid bacteria to Caco-2 cells and their effect on cytokine secretion. Microbiol Immunol. 46(4) : 293-297
Naidu AS dan RA Clemens. 2000. Probiotics. Di Dalam Natural Food Antimicrobial Systems. Naidu AS (Ed). CRC Press, LLC
Neish AS, AT Gewirtz, H Zeng, AN Young, ME Hobert, V Karmali, AS Rao dan JL Madara. 2000. Prokaryotic regulation of epithelial responses by inhibition of ikappa B-alpha ubiquitination. Science. 289 : 1560-1563 Ngatirah A, Harmayanti ES dan T Utami. 2000. Seleksi bakteri asam laktat
sebagai agensia probiotik yang berpotensi menurunkan kolesterol. Di Dalam : Prosiding Seminar Nasional Industri Pangan. PATPI (II) : 63-70 Nissen-Meyer J, Holo H, Havastein S, Sketten K, Nes IF. 1992. A novel
lactococcal bacteriocin whose activity depend on the complementary action of two peptides. Journal Bacteriology. 174 : 5686-5692
Ouwehand AC, PV Kirjavainen, C Shortt dan S Salminen. 1999. Probiotic : Mechanism and established effect. International Dairy Journal. 9 : 43-52 Ouwehand AC. 1998. Antimicrobial components from lactic acid bacteria. Di
Dalam : Salminen S dan AV Wright. Lactic Acid Bacteria. Marcell Dekker Inc. New York
Pelczar MC, ECS Chan dan Krieg NR. 1993. Microbiology Concept and Application. Mc Graw-Hill, Inc., New York
Purwandhani SN, ES Rahayu dan E Harmayani. 2000. Isolasi Lactobacillus yang berpotensi sebagai probiotik. Di Dalam : Prosiding Seminar Nasional Industri Pangan. PATPI (II) : 125-133
Rahayu ES. 2004. Makanan fermentasi dan probiotik. Pusat Studi Pangan dan Gizi, Universitas Gajah Mada
Rahayu ES, Djafar TF, Wibowo D dan Sudarmadji S. 1996. Lactic acid bacteria from indigenus fermented foods and their antimicrobial activity. Journal
Indonesian Food & Nutrition Progress. 3 : 21-27
Ray B. 1996. Probiotic of lactic acid bacteria. Science or Myth. Di Dalam: NATO ASI Series, editor. Lactic acid bacteria. Current advances in metabolism, genetic and application. Volume V(98). Springer-Verlag. Germany
Reid G. 1999. The Scientific basic for probiotic strains of Lactobacillus. Minireview. Applied And Environmental Microbiology. 65 : 3763-3766 Reiter B, G Harnulv. 1984. Lactoperoxidase antibacterial system : natural
occurrence, biological function and practical applications . Journal Food
Protect. 47 : 724-732
Roitt IM. 1991. Essential Immunology. Blackwell Scientific Publication. London
Rolfe RD. 2000. The role of probiotic culture in the control of gastrointestinal health. Journal Nutrition. 130 : 396S-402S
Salminen S dan Deighton M. 1992. Lactic acid bacteria in the gut in normal and disordered states. Digestive disease. 10 : 227-238
Salminen S, M Deighton, dan S Gorbach. 1993. Lactic Acid Bacteria in Health and Disease. Di Dalam : Salminen, S. dan AV Wright, editor. Lactic Acid Bacteria
Salminen S, A Ouwehand, Y Beno dan YK Lee. 1999. Probiotic : how should they be defined?. Trends in Food Science and Technology
Salminen S dan AV Wright. 1998. Lactic Acid Bacteria. Marcell Dekker Inc. New York
Sanders ME. 2000. Consideration for use of probiotic bacteria to modulate human health. Journal Nutrition. 130 : 384S-390S
Senjani D. 2002. Pembentukan biofilm oleh isolat lokal bakteri asam laktat pada permukaan stainless steel [Skripsi]. Bogor : Institut Pertanian Bogor, Fakultas Teknologi Pertanian
Siegumfeldt H, Rechninger BK, Jacobsen M. 2000. Dynamic changes of intracellular pH in individual lactic acid bacterium cells in response to a rapid drop in extracellular pH. Applied and Environmental Microbio logy. 66 : 2330-2335
Smet ID, L van Hoorde, MV Woestyne, H Christiaens dan W Verstraete. 1995. Significance of bile salt hydrolytic activities of lactobacilli. Journal
Applied Bacteriology. 79 : 292-301
Syafia R. 2002. Penempelan dan pembentukan biofilm bakteri asam laktat pada permukaan stainless steel dan pengujian sifat hidrofobisitasnya [skripsi]. Bogor : Institut Pertanian Bogor, Fakultas Teknologi Pertanian
Stites DP, Terr AL and Parslow TG. 1997. Medical Immunology. 9 th ed. Singapore. Simon & Schuster Co
Talarico TL, Dobrogosz WJ. 1989. Chemical caracterization of an antimicrobial substances produced by L. reuteri. Antimicrobial Agents Chemother. 33 : 674-679
Tannock GW. 1990. The microecology of Lactobacilli inhibiting the gastrointestinal tract. Advance Microbiology Ecology. 11 : 147
Timmerman H. 1995. Relationship between structure and inhibition of lipoxygenase activity of curcumin derivatives. Di dalam : Recent development in curcumin phamacochemistry. Proceeding of the International Symposium on Curcumin Pharmacochemistry (ISCP). Fakultas Farmasi UGM Yogyakarta
Triputro A. 2002. Penempelan dan pembentukan biofilm bakteri asam laktat pada permukaan stainless steel dan pengujian kandungan polisakarida ekstraselulernya [skripsi]. Bogor : Institut Pertanian Bogor, Fakultas Teknologi Pertanian
Todoriki M, T Mukai, S Sato dan T Toba. 2001. Inhibition of adhesion of foodborne pathogen to caco-2 cells by Lactobacillus strains. Journal
Applied Microbiology. 91 : 154-159
Tzianabos AO. 2000. Polysaccharides immunomodulatory as therapeutic agents : structural aspect and biological function. Clin Microbiol Review. 523-533 Vanderhoof JA, Whitney DB dan Antonson DL. 1999. Lactobacillus GG in
prevention of antibiotic associated diarrhea in children. Journal Pediatric. 135-143
Vesa T, Marteau H, Briet F, Pochart F and Rambaud JC. 1996. Digestion and tolerance of lactose from yogurt and different semisolid fermented dairy product containing Lactobacillus acidophilus and Bifidobacteria. Europe
Journal Clinical Nutrition. 50 : 730-733
Vuys L de, Vandamme EJ. 1994. Antimicrobial potential of lactic acid bacteria. Di dalam : De Vuys L, EJ Vandamme. Bacteriocins of lactic acid bacteria : microbiology, genetic and application. London : Blackie Academic & Profesional
Wirawati CU. 2002. Potensi bakteri asam laktat yang diisolasi dari tempoyak sebagai probiotik. Tesis. Institut Pertanian Bogor : Program Studi Ilmu Pangan
Yu B dan HY Tsen. 1993. Lactobacillus cells in the rabbit digestive tract and the factors affecting their distribution. Journal Applied Bacteriology. 75 : 269-275
Zavaglia AG, G Kociubinski, P Perez dan G De Antoni. 1998. Isolation and characterization of Bifidobacterium strains for probiotic formulation.
