i
ANALISIS KANDUNGAN EUGENOL DALAM SALEP
EKSTRAK ETANOL RIMPANG LENGKUAS (
Alpinia galanga
L. Willd) DENGAN METODE SPEKTROFOTOMETRI UV-VIS
Disusun Oleh:
RIZKY APRILIANY
M0613036
HALAMAN SAMPUL SKRIPSI
Diajukan untuk memenuhi sebagian persyaratan mendapatkan gelar Sarjana Farmasi
PROGRAM STUDI S1 FARMASI
FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM
UNIVERSITAS SEBELAS MARET
SURAKARTA
ii
iii
iv
ANALISIS KANDUNGAN EUGENOL DALAM SALEP EKSTRAK ETANOL RIMPANG LENGKUAS (Alpinia galanga L. Willd) DENGAN
METODE SPEKTROFOTOMETRI UV-VIS
RIZKY APRILIANY
Program Studi S1 Farmasi, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Sebelas Maret
ABSTRAK
Lengkuas (Alpinia galanga L.) merupakan salah satu tanaman yang sering dimanfaatkan oleh masyarakat sebagai pengobatan tradisional. Berbagai senyawa terkandung dalam rimpang lengkuas seperti galangin, metilsinamat, sineol, kamfer, δ-pinen, dan eugenol. Eugenol merupakan salah satu senyawa yang memiliki aktivitas antioksidan, analgetik, dan antibakteri yang penggunaannya biasanya terdapat dalam suatu sediaan. Pada pembuatan suatu sediaan, perlu dilakukan pemeriksaan kandungan senyawa aktifnya yang merupakan salah satu persyaratan dalam menjamin kualitasnya. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui kandungan eugenol dalam salep ekstrak etanol rimpang lengkuas.
Metode untuk mengekstraksi metabolit sekunder dari rimpang lengkuas menggunakan digesti dengan pelarut etanol 70%. Proses pemisahan eugenol dari salep ekstrak etanol rimpang lengkuas dilakukan dengan metode ekstraksi cair-cair menggunakan pelarut kloroform. Eugenol yang diperoleh dianalisis menggunakan Spektrofotometer UV-Vis karena eugenol memiliki kromofor berupa cincin benzena sehingga mampu menyerap sinar ultraviolet. Pada penelitian ini juga dilakukan validasi terhadap metode analisis eugenol secara Spektrofotometri UV-Vis dengan parameter validasi yang digunakan meliputi linearitas akurasi, presisi, Limit of Detection (LOD) dan Limit of Quantification (LOQ).
Hasil penelitian menunjukkan bahwa metode analisis eugenol dalam salep ekstrak etanol rimpang lengkuas memiliki validasi yang baik, dengan linearitas, akurasi dan presisi yang memenuhi persyaratan serta nilai LOD sebesar 2,388 µg/mL dan nilai LOQ sebesar 7,235 µg/mL. Pada penentuan kandungan eugenol dalam salep ekstrak etanol rimpang lengkuas diperoleh hasil sebesar 5,187 mg/gr salep.
v
ANALYSIS OF EUGENOL CONTENT IN ETHANOLIC EXTRACT OF GALANGAL RHIZOME (Alpinia galanga L. Willd) OINTMENT USING
UV-VIS SPECTROPHOTOMETRY METHOD
RIZKY APRILIANY
Pharmacy Department, Faculty of Mathematics and Natural Sciences Sebelas Maret University
ABSTRACT
Galangal (Alpinia galanga L.) is a plant often be used by people as traditional medicines. Galangal rhizome contain various compounds such as galangin, methylcinnamate, cineole, camphor, δ-pinene, and eugenol. Eugenol has analgetic, antioxidant, and antibacterial activity that is usually used in topical preparations. In manufactured of drugs, it necessary to examine active compound which is one of the requirements to ensuring its quality. This study aims to find out eugenol levels in ointment of ethanolic extract from galangal rhizome.
Method used to extracted secondary metabolite from galangal rhizome is digestion using ethanol 70%. Separation eugenol from ointment of ethanolic extract of galangal rhizome was done by liquid-liquid extraction using chloroform as solvent. The eugenol analyzed using UV-Vis Spectrophotometer because eugenol has chromofor, a benzene ring so able to absorb ultraviolet light. Parameters of validation method used in this study are linearity, accuracy, precision, Limit of Detection (LOD) and Limit of Quantification (LOQ).
The result showed that analysis method of eugenol in ointment of ethanolic extract galangal rhizome has good validation, with linearity, accuracy and precision occupied the requirements, LOD level is 2,388 µg/mL and LOQ level 7,235 µg/mL. Determination eugenol level in ointment of ethanolic extract galangal rhizome obtained result is 5,187 mg/gr sample.
vi
KATA PENGANTAR
Puji syukur penulis haturkan kepada Tuhan Yang Maha Esa karena atas rahmat dan karunia-Nya penulis dapat menyelesaikan penulisan skripsi ini. Shalawat serta salam semoga senantiasa terlimpahkan kepada Rasulullah SAW. Dalam penulisan skripsi ini, penulis tidak lepas dari bantuan dari berbagai pihak yang telah membantu dan mendukung penulis dalam menyelesaikan skripsi ini. Ucapan terima kasih secara khusus penulis sampaikan kepada:
1. Bapak Prof. Ir. Ari Handono Ramelan, M.Sc. (Hons). Ph.D selaku Dekan Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Sebelas Maret Surakarta
2. Bapak Dr.rer.nat. Saptono Hadi, S.Si., M.Si., Apt. selaku Kepala Program Studi S1 Farmasi Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Sebelas Maret Surakarta
3. Bapak Adi Yugatama, S.Farm., M.Sc., Apt. selaku pembimbing I atas bimbingannya selama penelitian dan penyusunan skripsi
4. Ibu Sholichah Rohmani, S.Farm., M.Sc., Apt. selaku pembimbing II atas bimbingannya selama penelitian dan penyusunan skripsi
5. Bapak Fea Prihapsara, S.Farm., M.Sc., Apt. selaku pembimbing akademis atas segala bimbingannya
6. Ketua Laboratorium Farmasi Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Sebelas Maret Surakarta
7. Bapak dan Ibu dosen Program Studi S1 Farmasi Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Sebelas Maret Surakarta
8. Mbak Siti dan Mbak Indah selaku laboran Laboratorium Farmasi serta Mas Anton selaku admin Prodi S1 Farmasi Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Sebelas Maret Surakarta
9. Orang tua saya yang telah memberikan kasih sayang, doa serta dukungan moral dan materi kepada saya
vii
11. Indah, Andin, Fatim, Ulfa, Trias atas bantuan dan dukungannya selama pelaksanaan skripsi
12. Angga, Bela, Erwin, Aya, Rara, Titi dan Andre atas bantuan dan diskusinya selama penelitian
13. Teman-Teman seperjuangan S1 Farmasi angkatan pertama (2013) serta berbagai pihak yang telah banyak membantu
Penulis menyadari bahwa banyak kekurangan dalam penulisan skripsi ini. Oleh karena itu, penulis mengharapkan kritik dan saran dari berbagai pihak untuk menyempurnakannya. Penulis berharap semoga skripsi ini bermanfaat bagi seluruh pihak yang telah berkenan membaca.
Surakarta, 18 September 2017
viii DAFTAR ISI
HALAMAN SAMPUL ... i
HALAMAN PENGESAHAN ... ii
PERNYATAAN ... iii
ABSTRAK ... iv
ABSTRACT ... v
KATA PENGANTAR ... vi
DAFTAR ISI ... viii
DAFTAR TABEL ... xi
DAFTAR GAMBAR ... xii
DAFTAR LAMPIRAN ... xiii
DAFTAR SINGKATAN ... xiv
BAB I PENDAHULUAN ... 1
A. Latar Belakang Masalah ... 1
B. Rumusan Masalah ... 3
C. Tujuan Penelitian... 3
D. Manfaat Penelitian... 3
BAB II LANDASAN TEORI ... 4
5. Spektrofotometri UV-Vis ... 11
ix
B. Kerangka Pemikiran ... 22
C. Hipotesis ... 23
BAB III METODOLOGI PENELITIAN... 24
A. Metode Penelitian ... 24
B. Waktu dan Tempat Penelitian ... 24
C. Alat dan Bahan ... 24
D. Prosedur Penelitian ... 25
1. Pengumpulan dan Determinasi Tanaman ... 25
2. Pembuatan Ekstrak Etanol Rimpang Lengkuas ... 25
3. Uji Kualitatif Ekstrak Etanol Rimpang Lengkuas ... 25
4. Pembuatan Salep Ekstrak Etanol Rimpang Lengkuas ... 26
5. Penentuan Panjang Gelombang Maksimum Eugenol ... 26
6. Proses Pemisahan Eugenol dari Sampel ... 27
7. Validasi Metode... 27
8. Penentuan Kadar Eugenol dalam Salep Ekstrak Etanol Rimpang Lengkuas... 29
E. Pengumpulan dan Teknik Analisis Data ... 30
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ... 31
A. Determinasi Tanaman ... 31
B. Hasil Pembuatan Ekstrak Etanol Rimpang Lengkuas ... 31
C. Analisis Kualitatif Ekstrak Etanol Rimpang Lengkuas... 33
D. Hasil Formulasi Salep Ekstrak Etanol Rimpang Lengkuas ... 35
E. Penentuan Panjang Gelombang Maksimum Eugenol ... 36
x
G. Validasi Metode Analisis ... 39
1. Linearitas dan Rentang ... 39
2. Presisi ... 40
3. Akurasi ... 41
4. LOD dan LOQ ... 42
H. Hasil Penentuan Kadar Eugenol dalam Salep Ekstrak Etanol Rimpang Lengkuas ... 43
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN ... 45
A. Kesimpulan... 45
B. Saran ... 45
DAFTAR PUSTAKA ... 46
xi
DAFTAR TABEL
Tabel 1. Kriteria penerimaan presisi (%RSD) ... 20
Tabel 2. Kriteria penerimaan rentang recovery ... 21
Tabel 3. Formula salep ekstrak etanol rimpang lengkuas 10% ... 26
Tabel 4. Hasil pemeriksaan profil KLT ekstrak etanol rimpang lengkuas ... 34
Tabel 5. Hasil uji presisi... 40
Tabel 6. Hasil uji akurasi ... 42
xii
DAFTAR GAMBAR
Gambar 1. Rimpang lengkuas ... 4
Gambar 2. Struktur kimia eugenol ... 5
Gambar 3. Spektrum elektromagnetik ... 11
Gambar 4. Spektrofotometer konvensional... 14
Gambar 5. Spektrofotometer dioda array ... 14
Gambar 6. Kromatogram ekstrak etanol rimpang lengkuas (A) dan standar pembanding (B) ... 34
Gambar 7. Spektra panjang gelombang eugenol... 36
Gambar 8. Pembentukan kalium eugenolat melalui reaksi antara eugenol dengan KOH ... 38
Gambar 9. Kurva persamaan linier ... 39
xiii
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1. Hasil Determinasi Rimpang Lengkuas (Alpinia galanga L. Willd) . 52 Lampiran 2. Certificate of Analysis Eugenol Standar ... 53 Lampiran 3. Hasil Ekstrak Etanol Rimpang Lengkuas ... 54 Lampiran 4. Hasil Salep Ekstrak Etanol Rimpang Lengkuas ... 55 Lampiran 5. Data Pengambilan Bahan dan Perhitungan Konsentrasi Larutan
Standar ... 56 Lampiran 6. Skema Proses Pemisahan Eugenol dari Salep Ekstrak Etanol
Rimpang Lengkuas ... 57 Lampiran 7. Perhitungan Regresi Linier pada Uji Linearitas ... 58 Lampiran 8. Data Hasil Uji Presisi (Repeatability dan Intermediate Precision) .. 59 Lampiran 9. Data Hasil Uji Akurasi ... 61 Lampiran 10. Hasil Perhitungan LOD dan LOQ ... 62 Lampiran 11. Perhitungan Kandungan Eugenol dalam Salep Ekstrak Etanol
xiv
DAFTAR SINGKATAN
AOAC = Association of Official Analytical Chemists CV = Coefficient Variation
ICH = International Conference on Harmonization KLT = Kromatografi Lapis Tipis
LLE = Liquid-Liquid Extraction LOD = Limit of Detection LOQ = Limit of Quantification Rf = Retardation factor
RSD = Relative Standard Deviation SD = Standard Deviation
USP = United States Pharmacopeia UV = Ultraviolet