Tuberkulosis: Vaksinasi BCG dan Dampaknya pada Kesehatan Anak

(1)

Bahasa Indonesia:

Mochammad Hatta b,1

Bahasa Indonesia:

Muh. Nasrum Massi Rahma Ayu Larasati (Laras)

Firdaus Hamid

Bahasa Indonesia:

Rahmini Shabariyah Rosdiana Natzir

Bahasa Indonesia:

Prihantono Farsida a,1

Andi Dwi Bahagia

Bahasa Indonesia:

Andi Asadul Islam

Bahasa Indonesia:

Ilhamjaya Patellongi

A,* B B

B B

A

B

B B

1

Infeksi ini menimbulkan respons imunologi yang kompleks, di mana interaksi antara patogen dan inang bersifat unik, sehingga sulit untuk mengobati dan mengendalikan penyakit ini. Orang-orang dengan latar belakang ekonomi rendah sering tertular penyakit ini, sehingga memperburuk kondisi sosial dan ekonomi.

Meskipun TB merupakan penyakit menular yang dapat diobati, penyakit ini tetap memiliki dampak yang tinggi terhadap kematian. TB bertanggung jawab atas satu dari empat kematian pada abad ke-19 karena sifat penularannya yang kronis dan progresif serta pengobatan yang berkepanjangan. Selain itu, munculnya TB yang

resistan terhadap banyak obat dan epidemi TB - memberikan beban yang signifikan bagi masyarakat.

1. Pendahuluan

Vaksin Bacillus Calmette-Gu´erin (BCG) masih menjadi satu-satunya vaksin yang digunakan untuk mencegah Tuberkulosis (TB). Penggunaan BCG

TB, dan 233.000 anak meninggal karena TB pada tahun 2017. Namun, beban TB yang sebenarnya pada anak-anak kemungkinan lebih tinggi, mengingat tantangan dalam mendiagnosis TB pada anak-anak. Meskipun overdiagnosis memang terjadi di beberapa tempat, underdiagnosis adalah aturan di sebagian besar daerah endemis TB, di mana anak-anak kecil hanya dapat mengakses perawatan TB melalui rumah sakit rujukan. Hanya 23% dari sekitar 1,3 juta anak di bawah lima tahun yang memenuhi syarat menerima terapi pencegahan di rumah tangga TB pada tahun 2017. Mengakhiri epidemi TB adalah target di bawah Tujuan Pembangunan Berkelanjutan yang memerlukan penerapan campuran target biomedis, kesehatan masyarakat, intervensi sosial ekonomi, dan penelitian serta inovasi [1]. Memahami sejarah alami TB sangat penting untuk menghargai

kerentanan yang bervariasi, dan spektrum penyakit yang beragam yang diamati pada anak-anak.

Tuberkulosis adalah penyakit yang disebabkan oleh Mycobacterium Tuberculosis (Mtb). Selama ribuan tahun, manusia telah terinfeksi oleh Mtb.

beranda jurnal: www.elsevier.com/locate/jctube Daftar isi tersedia di ScienceDirect

(http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/).

https://doi.org/10.1016/j.jctube.2020.100202

Menurut WHO, diperkirakan 1 juta anak terjangkit penyakit ini

Korelasi gen Foxp3+ dan sel T regulator dengan pembentukan jaringan parut BCG pada anak penderita Tuberkulosis

Penyakit Mikobakteri Jurnal Tuberkulosis Klinis dan Lainnya

* Penulis yang bersangkutan.

Alamat email: [email protected] (RA Larasati (Laras)).

Para penulis ini memberikan kontribusi yang sama terhadap karya ini.

Tersedia online 16 November 2020

Namun, efek langsung dari bekas luka BCG masih belum diketahui. Kami memeriksa 76 kasus dalam penelitian ini. Semua Subjek didiagnosis dengan Tuberkulosis. Bekas luka BCG diperiksa secara langsung saat pemeriksaan fisik di tempat vaksinasi BCG dilakukan. Uji Kulit Tuberkulin dilakukan dengan 0,1 ml larutan derivatif protein murni (PPD) (5TU PPD/0,1 ml) yang disuntikkan secara intradermal. Kami memeriksa gen FOXP3 dengan PCR real-time dan tingkat Treg dengan ELISA. Perbandingan ekspresi gen Treg rata-rata dan kandungan protein Treg lebih tinggi pada kelompok bekas luka positif daripada pada kelompok bekas luka negatif.

Ini menunjukkan bahwa Treg berperan dalam Tuberkulosis selama perkembangan fase aktifnya. Kadar protein Treg lebih tinggi dalam kombinasi TST positif dan bekas luka.

Hal ini menunjukkan bahwa jaringan parut BCG merupakan penanda penting dari sistem kekebalan tubuh yang berfungsi dengan baik. Inisiatif yang murah dan mudah seperti vaksinasi BCG dini, pemantauan jaringan parut BCG, dan vaksinasi ulang pada anak-anak yang tidak memiliki jaringan parut dapat memberikan dampak langsung yang sangat besar pada kelangsungan hidup anak-anak di seluruh dunia.

Infeksi tuberkulosis menyebabkan respons imunologi yang kompleks, di mana interaksi antara patogen dan inang bersifat unik, sehingga sulit untuk mengobati dan mengendalikan penyakit ini. Menurut WHO, diperkirakan 1 juta anak terjangkit TB, dan 233.000 anak meninggal karena TB pada tahun 2017. Vaksin Bacillus Calmette-Gu´erin (BCG) masih menjadi satu-satunya vaksin untuk mencegah Tuberkulosis (TB). Studi yang menunjukkan hubungan bekas luka BCG dengan penurunan angka kematian anak di negara berkembang telah menghidupkan kembali minat terhadap bekas luka BCG.

Tuberkulosis

Fakultas Kedokteran Universitas Hasanuddin Makassar, Indonesia Fakultas Kedokteran Universitas Muhammadiyah Jakarta, Indonesia

Bekas Luka BCG

FOXP3

TEGANG

INFORMASI ARTIKEL ABSTRAK

B A

(2)

dalam program vaksinasi rutin bayi (cakupan diperkirakan 90%) diperkirakan secara global mencegah 117.132 kematian TB per kelompok kelahiran dalam 15 tahun pertama kehidupan [1]. Namun, BCG memberikan efikasi yang bervariasi terhadap TB paru. Ada banyak perdebatan mengenai keuntungan dan kerugian BCG sejak pertama kali diperkenalkan. Elemen kunci dari perdebatan seputar efektivitas BCG mencakup keamanan, hilangnya sensitivitas tuberkulin sebagai alat diagnostik, dan, khususnya, rentang luas efektivitas BCG terhadap TB. Studi yang menunjukkan hubungan bekas luka BCG dengan penurunan angka kematian anak di negara-negara berkembang telah menghidupkan kembali minat terhadap bekas luka BCG. Namun, efek langsung dari bekas luka BCG masih belum diketahui [2–4].

ada atau tidaknya bekas luka BCG dan hasil uji tuberkulin. Sel T regulator melindungi inang selama infeksi dengan mencegah kerusakan kolateral pada jaringan inang akibat peradangan berlebihan yang disebabkan oleh respons imun terhadap patogen. Peran sel T reg dalam menekan kekebalan terhadap Mtb, yang merupakan patogen bakteri terpenting yang menyebabkan infeksi persisten pada manusia dalam hal morbiditas dan mortalitas, hanyalah tahap awal dari sebuah penyelidikan.

3.2. Korelasi bekas luka BCG dengan tuberkulosis

Pembacaan bekas luka BCG telah digunakan sebagai indikator status vaksin dan menjadi praktik standar untuk menilai efek perlindungan BCG dalam studi retrospektif.

Keberadaan bekas luka BCG telah menjadi indikasi perlindungan terhadap TB. Meskipun demikian, lebih dari lima puluh persen populasi studi dengan bekas luka BCG terinfeksi TB dalam kasus ini.

(ÿ ) TST(ÿ ) (204,275 ± 17,912) dengan nilai p 0,000 Gambar 4.

Gizi buruk 44 orang (54,8%). Pasien dengan riwayat kontak dengan penderita TB dewasa sebanyak 39 orang (51,3%). Sebagian besar hasil pemeriksaan TST positif (>10 mm) sebanyak 40 orang (62,6%). Sebagian besar bekas luka positif sebanyak 47 orang (61,8%). Tabel 1.

2.3. Ekspresi gen FOXP3 dan kadar Treg berdasarkan hasil TST

Perbandingan rata-rata gen Foxp3 dan tingkat Treg adalah

Berdasarkan subjek penelitian, sebagian besar penduduk berjenis kelamin laki-laki

sebanyak 40 orang (52,6%). Sebagian besar penduduk berusia 0–5 tahun sebanyak 41 orang (53,9%).

lebih tinggi pada kelompok TST positif Gambar 2 dan 3.

Hasil uji perbandingan menunjukkan terdapat perbedaan bermakna rerata kadar protein ekspresi Foxp3 antara kelompok Scar (+) TST (+) (12,570 ± 1,508), Scar (+) TST (ÿ ) (10,580 ± 1,158), dan Scar (ÿ ) TST (+) (8,936 ± 1,326). dan Scar – mantox – (6,860

± 1,098) dengan nilai signifikansi p 0,000.

Berdasarkan temuan sebelumnya, kemampuan BCG untuk menimbulkan jaringan parut dapat bervariasi menurut jenis kelamin, tetapi efek langsung dari jenis kelamin masih belum diketahui [11]. Tidak ada perbedaan signifikan antara kelompok usia.

Tuberkulosis sebagian besar menyerang orang dewasa pada tahun-tahun paling produktif mereka. Namun, semua kelompok usia berisiko. Lebih dari 95% kasus dan kematian terjadi di negara-negara berkembang. Efek yang diamati dari usia, jenis kelamin, dan asal mungkin mencerminkan kombinasi efek dari berbagai faktor host dan mikroba yang tidak termasuk dalam penelitian ini. Semua kelompok memiliki risiko yang sama. Usia 0–5 tahun memiliki waktu lebih lama untuk dihubungi oleh orang tua mereka karena mereka menghabiskan aktivitas di rumah. Kami mengetahui bahwa tingkat penularan karena kontak langsung dengan keluarga relatif tinggi. Sehubungan dengan temuan baru-baru ini, intervensi kontak berbasis rumah tangga yang mencakup pengobatan infeksi laten dapat mencegah perkembangan penyakit pada kontak muda pasien indeks di lingkungan dengan beban tuberkulosis yang tinggi [12–14].

2.1. Karakteristik umum populasi penelitian

Dalam penelitian ini, tidak adanya jaringan parut pada mereka yang menerima vaksinasi mungkin telah memengaruhi efektivitasnya. Hal ini karena anak-anak yang divaksinasi yang tidak mengalami jaringan parut (jika, misalnya, vaksin tidak lagi mengandung BCG hidup karena penyimpanan yang tidak memadai) mungkin dianggap tidak divaksinasi, sehingga menghasilkan kesalahan klasifikasi non-diferensial, yang dapat meminimalkan efek perlindungan vaksin.

Beberapa penjelasan telah diajukan terkait variabilitas tersebut, termasuk

penanganan dan pemberian vaksin yang tidak tepat, paparan mikobakteri non-tuberkulosis (NTM) di wilayah per ekuator, imunogenisitas vaksin yang rendah, malnutrisi yang terjadi bersamaan, dan penyakit menular lainnya serta respons imun rendah terhadap vaksin yang ditentukan secara genetik [8–10].

2. Hasil

Hasil uji kadar protein Treg rata-rata menunjukkan adanya perbedaan bermakna antara Scar (+) TST(+) (291.885 ± 20.780), Scar (+) TST (ÿ ) (261.277 ± 17.807), Scar (ÿ ) TST (+) (231.632 ± 23.359) dan Scar (+) TST (+).

Semua subjek telah didiagnosis menderita Tuberkulosis dan dikonfirmasi dengan skoring dan Rontgen toraks. Sebagian besar subjek (N: 41) didiagnosis menderita Tuberkulosis pada usia 0–5 tahun. Empat puluh tujuh subjek memiliki bekas luka BCG di daerah deltoid dari salah satu lengan mereka. Tiga puluh sembilan subjek memiliki riwayat TB dalam keluarga mereka. Empat puluh empat dari populasi studi memiliki status gizi kurang gizi.

Namun, bekas luka mungkin ada atau tidak ada setelah vaksin BCG. Bekas luka mungkin tidak ada karena pemberian dosis vaksin yang lebih rendah pada masa kanak- kanak, kesulitan menyuntikkan seluruh jumlah vaksin dan respons imun lokal yang relatif lemah pada anak kecil, atau kemungkinan bekas luka tersebut dapat menghilang seiring berjalannya waktu [5–7].

2.2. Kadar Gen FOXP3 dan Serum Treg Berdasarkan Pembentukan Parut

Kami melakukan penelitian terhadap 76 subjek yang terdiri dari 40 laki-laki dan 36 perempuan. Semua subjek menerima vaksin BCG pada usia dua bulan.

Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui korelasi antara sel T regulator (T reg) pada anak penderita Tuberkulosis. Kami mencari hubungan antara sel T regulator (T reg) dengan sel T regulator (T reg).

Perbandingan rata-rata ekspresi Foxp3 dan kandungan protein Treg lebih tinggi pada kelompok bekas luka positif dibandingkan pada kelompok bekas luka negatif Tabel 2, Gambar 1

3. Diskusi

3.1. Karakteristik populasi penelitian Tabel 2

Tingkat gen FOXP3 dan serum Treg berdasarkan pembentukan jaringan parut.

Tabel 1

Karakteristik umum subjek.

Jurnal Tuberkulosis Klinik dan Penyakit Mikobakteri Lainnya 21 (2020) 100202

11

48

10.804 orang

40

Bekas luka – 29 7.790 Farsida dkk.

36 40 N

41 24

Ekspresi

9.191

+

Normal Status gizi

TST

Bekas luka – 29 216.539 24.443 178.428 270.407

Ciri

Kelompok Usia

Parameter menit

Pria

37

1.582 orang

+

48,7%

51,3%

47,4%

52,6%

63,2%

36,8%

42,1%

28

%

44

47 11.681 14.815

36

12–18

N Berarti Maksimal

Tidak Ada Kontak

Bekas luka

Malnutrisi

kurang dari 10

>10 + Seks

0–5 6–12

Gen FoxP3+ 5.330 orang

Bekas luka 47 278.209 24.681 234.189 326.607

47,4%

52,6%

53,9%

31,6%

14,5%

57,9%

39

1.679 tahun

tingkat Treg

Kontak Positif Riwayat Kontak

– Perempuan

32

Bekas luka

SD

Machine Translated by Google

(3)

Gambar 1. A. Perbandingan ekspresi FOXP3 B. Perbandingan tingkat T Reg berdasarkan pembentukan Scar.

Namun, mungkin ada sedikit Treg yang diinduksi sebelumnya yang tersedia untuk stimulasi oleh vaksinasi BCG ketika tidak ada mikobakteri lingkungan. Pada tikus yang diimunisasi BCG dan dilemahkan Treg, yang kemudian terinfeksi M. tuberculosis, beban paru-paru mikobakteri secara signifikan [6,11,15].

Untuk mengevaluasi dampak Treg dalam perlindungan terhadap M. Tuberculosis, kami mengevaluasi ekspresi Treg dan foxp3 pada anak-anak dengan Tuberkulosis.

proses yang mengarah pada penurunan modulasi kemanjuran vaksin BCG.

Faktor genetik dan lingkungan juga memengaruhi perbedaan bentuk dan ukuran bekas luka. Hal ini dibuktikan dalam hasil penelitian Lalor et al. pada dua populasi yang memiliki perbedaan genetik dan lingkungan mikroba antara Malawi dan Inggris. Dalam penelitian ini, ukuran bekas luka yang muncul setelah tiga bulan pasca vaksinasi BCG pada populasi Malawi lebih kecil daripada ukuran bekas luka rata-rata pada populasi Inggris [9].

3.3. Tingkat korelasi Treg dan FOXP3 dengan jaringan parut BCG

Laporan menunjukkan bahwa Treg dapat mengganggu perlindungan yang dimediasi BCG terhadap TB. Treg diketahui diinduksi oleh mikobakteri lingkungan, BCG, dan infeksi M. tuberculosis. Pra-paparan host terhadap mikobakteri lingkungan dapat menginduksi Treg terhadap antigen, yang khas untuk mikobakteri lingkungan, BCG, dan M.

tuberculosis. Treg yang peka tersebut selanjutnya dapat dirangsang oleh vaksinasi berikutnya dengan BCG dan oleh infeksi M. tuberculosis. Dengan demikian, Treg yang diinduksi terlebih dahulu oleh mikobakteri lingkungan dapat memulai

Terdapat perbedaan yang signifikan antara kedua kelompok. Kelompok dengan jaringan parut positif memiliki jumlah yang lebih besar dalam treg dan foxp3. Keberadaan jaringan parut setelah vaksinasi BCG telah digunakan sebagai indikator keberhasilan vaksinasi dan dalam memperkirakan cakupan vaksin. Memang, keberadaan jaringan parut tidak selalu berkorelasi dengan perlindungan terhadap TB; namun, hal itu dapat mencerminkan kemanjuran BCG terhadap TB. Di antara individu yang divaksinasi BCG, memiliki jaringan parut dikaitkan dengan penurunan mortalitas lebih lanjut karena TB. Subjek dengan jaringan parut BCG memiliki jumlah gen Treg dan FOXP3 yang lebih tinggi. Hal ini menunjukkan bahwa Treg berperan dalam perkembangan Tuberkulosis dalam fase aktifnya.

(4)

Kami menggunakan >10 mm sebagai hasil positif untuk penelitian ini. Ada jumlah pasti antara hasil positif dan negatif [18]. Dua puluh satu (50%) subjek memiliki hasil positif. Jadi, ini berarti 50% subjek memiliki hasil negatif palsu. Tes Mantoux tidak mengukur kekebalan terhadap TB, tetapi tingkat hipersensitivitas terhadap tuberkulin.

Tidak ada korelasi antara ukuran indurasi dan kemungkinan penyakit TB aktif saat ini, tetapi ukuran reaksi berkorelasi dengan risiko masa depan untuk mengembangkan penyakit TB. Tes ini memiliki nilai prediktif positif yang rendah untuk penyakit aktif saat ini [19,20].

Penelitian Cross-Sectional ini dilakukan di Rumah Sakit Bhakti Medicare, Cicurug Jawa Barat, Indonesia, setelah memperoleh izin dari Komite Etik Institusional. Subjek kami adalah bayi yang direkrut untuk penelitian dari Juli hingga Desember 2019. Analisis ekspresi Treg dan mRNA dilakukan di Laboratorium Molekuler dan Biologi Universitas Hasanuddin, Makassar Sulawesi Selatan, Indonesia. Hanya anak-anak yang orang tuanya setuju untuk berpartisipasi dalam penelitian yang direkrut. Sebanyak 76 kasus diikutsertakan dengan metode purposive sampling. Semua Subjek didiagnosis dengan Tuberkulosis melalui anamnesis, pemeriksaan fisik, uji kulit tuberkulin, dan Rontgen toraks. 2 ml darah lengkap diambil dari setiap subjek. Darah diambil sebelum penggunaan obat apa pun.

4.1 Pemilihan populasi penelitian Selain menunjukkan organisme yang hidup dalam jaringan dan cairan tubuh, uji kulit

tuberkulin adalah satu-satunya metode untuk mendeteksi infeksi M. tuberculosis pada seseorang. Uji ini digunakan dalam diagnosis Tuberkulosis pada pasien individu dan dalam pengaturan epidemiologi untuk mengukur prevalensi infeksi tuberkulosis pada populasi [16,17].

4. Bahan dan metode

berkontribusi pada pembentukan infeksi aktif. Namun, peran sel Treg dan Th1/Th2/Th17 pada TB laten belum dijelaskan [21].

3.4. Tingkat korelasi Treg dan FOXP3 dengan tuberkulin SkinTest

Bekas luka BCG diperiksa secara langsung saat pemeriksaan fisik di Dalam penelitian ini, kami tidak meneliti dampak langsung sel T regulator terhadap

TB. Dalam penelitian ini, kami melihat perbedaan signifikan dalam tingkat T reg antara setiap kelompok Mantoux. Ada tingkat yang lebih tinggi dalam kelompok dengan hasil TST yang lebih signifikan dalam diameter. TB aktif ditandai dengan peningkatan respons Treg dan penurunan respons Th1, yang

Gambar 2. Ekspresi gen FOXP3 dan Tingkat Treg berdasarkan Hasil TST.

Farsida dkk.

Machine Translated by Google

(5)

Gambar 4. Perbandingan Ekspresi FOXP3 Berdasarkan Pembentukan Bekas Luka dan Hasil TST.

Gambar 3. Perbandingan Kadar T Reg Berdasarkan Pembentukan Parut dan Hasil TST.

Kami mengikuti pedoman nasional untuk diagnosis kasus TB aktif.

Uji kulit tuberkulin dibaca setelah 48–72 jam dengan teknik bolpoin.

Lokasi vaksinasi BCG dilakukan. Uji kulit tuberkulin dilakukan dengan 0,1 ml larutan turunan protein murni (PPD) (5TU PPD/0,1 ml, SPAN diagnostic limited) yang disuntikkan secara intradermal dengan jarum berukuran 26 pada aspek fleksor lengan bawah kiri 2–3 inci di bawah siku.

spesimen klinis, atau dengan adanya gejala, tanda, dan/atau gambaran radiologi yang sesuai dengan TB (bila radiografi dada diragukan, dilakukan computed tomography toraks), dan/atau

Kasus TB dianggap sebagai anak dengan M. tuberculosis yang diisolasi dari

(6)

survei uji kulit tuberkulin di negara-negara dengan prevalensi tinggi. Tuber Lung Dis 1996;77: 1–19.

[20] Zahrani Kheder AL, Jahdali Hamdan AL, Menzies Dick. Apakah ukuran penting? Kegunaan ukuran reaksi tuberkulin untuk diagnosis penyakit mikobakteri. Am J Respir Crit Care Med 2000;162(4):1419–22.

[8] PEM halus. Variasi perlindungan oleh BCG: implikasi dari dan untuk heterolog [3] Shann F. Efek nonspesifik vaksin dan pengurangan kematian pada anak.

Farsida dkk.

2012;3(1):2. https://doi.org/10.4103/2229-5178.93479.

[7] Roth A, Garly ML, Jensen H, Nielsen J, Aaby P. Vaksinasi Bacillus calmette-gu´erin dan kematian bayi. Expert Rev Vaccines 2006;5(2):277–93.

[11] Storgaard L, Rodrigues A, Martins C, Nielsen BU, Ravn H, Benn CS, Aaby P,

[15] Jaron B, Maranghi E, Leclerc C, Majlessi L. Efek Atenuasi Treg selama Imunisasi BCG terhadap Respons Anti- Mikobakteri Th1 dan Perlindungan terhadap Mycobacterium tuberculosis. Unutmaz D, editor. PLoS ONE. 30 Juli 2008;3(7): e2833.

[2] Van-Dunem JCVD, Rodrigues LC, Alencar LCA, Milit˜ ao-Albuquerque MdFP,

[19] Nayak S, Acharjya B. Tes Mantoux dan interpretasinya. Jurnal Dermatol Online India [18] Kiwanuka JP. Interpretasi hasil tes kulit tuberkulin dalam diagnosis Tuberkulosis pada anak. Afr

Health Sci 2005;5(2):152–6.

[10] Poyntz HC, Stylianou E, Griffiths KL, Marsay L, Checkley AM, McShane H. Mikobakteri non-tuberkulosis memiliki efek beragam pada kemanjuran BCG terhadap Mycobacterium tuberculosis.

Tuberkulosis 2014;94(3):226–37.

[1] WHO. TB Anak dan Remaja. https://www.who.int/tb/areas-of work/chi ldren/en/. Tahun 2018

tuberkulosis di kalangan remaja dan dewasa muda: perkiraan global. Eur Respir J 2018;51(2):1702352.

[14] Snow KJ, Sismanidis C, Denholm J, Sawyer S, Graham SM. Insidensi

[17] Altet-Gomez N, De Souza-Galvao M, Latorre I, Mila C, Jimenez MA, Solsona J, Cantos A, Zamora JJ, Ruiz-Manzano J, Ausina V, Dominguez J. Mendiagnosis infeksi TB pada anak: analisis ketidaksesuaian menggunakan tes in vitro dan tes kulit tuberkulin . Euro Respir J 2011;37(5):1166–74.

[16] Arnadottir T, Rieder HL, Tr´ebucq A, Waaler HT. Pedoman pelaksanaan

Newport M, Branson K, McGrath N, Crampin A, Fine PM, Dockrell H. Perbedaan populasi dalam respons imun terhadap vaksinasi bacille calmette-gu´erin pada masa bayi.

[6] Dhanawade SaraS, Kumbhar SuhasG, Gore AlkaD, Patil VijayN. Pembentukan jaringan parut dan konversi tuberkulin setelah vaksinasi BCG pada bayi: studi kohort prospektif. J Family Med Prim Care 2015;4(3):384.

https://doi.org/10.4103/2249-4863.161327 .

[13] Zelner JL, Murray MB, Becerra MC, Galea J, Lecca L, Calderon R, dkk. Risiko Infeksi Tuberkulosis Berdasarkan Usia dari Paparan di Rumah Tangga dan Komunitas serta Peluang Intervensi di Lingkungan dengan Beban Berat. American Journal of Epidemiology. 15 Oktober 2014;180(8):853–

61.

Pengaruh Jenis Kelamin, Usia, dan Ras terhadap Presentasi Klinis Tuberkulosis: Studi Berbasis Populasi Selama 15 Tahun. Jurnal Kedokteran Tropis dan Higiene Amerika.

[5] Amaruddin AI, Wahyuni S, Hamid F, Chalid MT, Yazdanbakhsh M, Sartono E. Bekas luka BCG, status sosial ekonomi dan gizi: studi pada bayi baru lahir di perkotaan Makassar, Indonesia. Trop Med Int Kesehatan 2019;24(6):736–46.

[9] Lalor M, Ben-Smith A, Gorak-Stolinska P, Weir R, Floyd S, Blitz R, Mvula H,

2011 Agustus 1;85(2):285–90.

[12] Thomsen VØ, Andersen AB, Zhang X, Marrs CF, Yang Z, Kamper-Jørgensen Z, dkk.

[4] Tavares Cruz C, Almeida B, Troster E, Oliveira C. Tinjauan Sistematis tentang Efek Non-Spesifik Vaksin Bacillus Calmette-Gu´erin terhadap Kematian Anak. J Infec Dis Treat [Internet]. 2017 [dikutip 3 Oktober 2020];03(02). Tersedia dari: http://infectious-diseases-and-treatment.imedpub.com/systematic- review-of-the-nonspecific-effects-of-bacillus-calmettegurin-vaccine-on-child-mortality.php?

aid=21616.

Klinik Ther 2013;35(2):109–14.

5,5ÿ - Tetrame-

4.4. Analisis statistik

Deklarasi Kepentingan yang Bersaing

5. Kesimpulan

Pernyataan kontribusi kepenulisan CRediT

Firdaus Hamid: Analisis formal, Validasi. Andi Dwi Bahagia: Analisis formal, Validasi.

Ximenes RAdA. Efektivitas dosis pertama BCG terhadap tuberkulosis di antara anak-anak yang terinfeksi HIV dan sebagian besar mengalami defisiensi imun. Biomed Res Int 2015; 2015:1–10.

Tahap pertama adalah menambahkan 100 µL assay diluent yang mengandung buffer protein ke dalam setiap well. Selanjutnya, 100 µL cairan standar yang mengandung protein rekombinan manusia Treg dari KIT yang ditentukan atau sampel yang diencerkan dari serum pasien ditambahkan ke dalam setiap well. Selanjutnya, inkubasi dilakukan selama 2 jam pada suhu kamar. Siram cairan di setiap well dan cuci dengan Phosphate Buffered Saline (PBS) steril. Proses pencucian ini dilakukan empat kali berturut-turut. Kemudian 200 µL cairan “konjugat” yang mengandung “horseradish peroxidase” (HRP) streptavidin (HRP) ditambahkan ke setiap well dan ditutup dengan penutup plastik dan diinkubasi selama 2 jam pada suhu kamar. Cairan tersebut dihisap kemudian dicuci lagi sebanyak empat kali menggunakan cairan PBS steril. Proses selanjutnya adalah menambahkan 200 µL larutan substrat yang mengandung 3,3ÿ

Jurnal Infect Dis 2009;199(6):795–800.

Ilhamjaya Patellongi: Kurasi Data, Metodologi. Prihantono: Supervisi. Rahmini Shabariyah: Sumber Daya, Administrasi Proyek.

Kriteria eksklusi penelitian ini adalah HIV-positif atau memiliki riwayat orang tua HIV, kontak baru-baru ini dengan kasus tuberkulosis aktif, anak-anak dengan TB lama yang telah sembuh, sedang menjalani pengobatan agen imunosupresif, dan pasien yang menjalani terapi kortikosteroid sistemik jangka panjang (>dari enam minggu).

Para penulis menyatakan bahwa mereka tidak memiliki konflik kepentingan finansial atau hubungan pribadi yang diketahui dapat memengaruhi pekerjaan yang dilaporkan dalam makalah ini.

Bahasa Indonesia:

Ekspresi mRNA gen Treg lebih tinggi pada kombinasi bekas luka positif Mantoux positif dibandingkan dengan kombinasi lainnya. Kadar protein Treg lebih tinggi pada kombinasi bekas luka Mantoux positif.

Proses pemeriksaan primer gen spesifik oligonukleotida untuk GAPDH sebagai primer:

F: 5ÿ -GAA GGT GAA GGT CGG AGT-3ÿ dan R: 5ÿ -GAA GAT GGT GAT GGG ATT TC-3ÿ sebagai 'housekeeping gene' (kontrol internal). Gen mRNA Treg menggunakan primer spesifik forward F: 5ÿ -GGC ACT CCT CCA GGA CAG-3ÿ dan R: 5ÿ -GCT GAT CAT GGC TGG GCT CT-

4.3. Pemeriksaan Treg dengan ELISA

4.2. Pemeriksaan gen FOXp3 dengan Real-time PCR

Fisker AB. Perkembangan jaringan parut BCG dan morbiditas serta mortalitas berikutnya di pedesaan Guinea-Bissau. Clin Infect Dis 2015;61(6):950–9.

Analisis statistik menggunakan uji Chi-square untuk menentukan hubungan antara bekas luka BCG dan uji kulit tuberkulin serta hubungan antara bekas luka BCG dan berbagai faktor. Hasil pengujian statistik, nilai P kurang dari 0,05, dianggap signifikan secara statistik dalam hubungan antara kedua variabel. Analisis statistik dilakukan menggunakan Microsoft Excel dan Perangkat Lunak Statistik SPSS.

Rahma Ayu Larasati: Administrasi proyek, Penulisan - review & editing. Andi Asadul Islam: Analisis formal, Validasi. Rosdiana Natzir: Analisis formal, Validasi. Muh. Nasrum:

Analisis formal, Validasi.

thylbenzidine (TMB) ke setiap sumur, dan diinkubasi selama 20 menit pada suhu kamar.

Mikroplat disimpan di tempat gelap untuk menghindari cahaya. Setelah inkubasi, reaksi dihentikan dengan menambahkan 50 µL larutan penghenti yang mengandung H2SO4 ke dalam setiap sumur dan membacanya menggunakan ELISA Reader 270 (Biomerieux, Prancis) dengan panjang gelombang 450 nm dalam 30 menit. Selanjutnya, baca konsentrasi CD25 dalam satuan pg/ml.

Referensi

draft. Mochammad Hatta: Konseptualisasi, Penulisan - draft asli.

Bekas luka BCG merupakan penanda penting dari sistem kekebalan tubuh yang berfungsi dengan baik. Inisiatif yang murah dan mudah seperti vaksinasi BCG dini, pemantauan bekas luka BCG, dan vaksinasi ulang pada anak-anak yang tidak memiliki bekas luka dapat memberikan dampak langsung yang sangat besar pada kelangsungan hidup anak- anak di seluruh dunia.

Farsida: Konseptualisasi, Akuisisi pendanaan, Penulisan - asli

TST positif (sebagaimana didefinisikan sebelumnya), dan yang merespons secara klinis terhadap kemoterapi antituberkulosis. Kontak dekat dengan kasus TB basiler digunakan sebagai penunjang diagnostik.

kekebalan. Lancet 1995;346(8986):1339–45.

3ÿ . Kondisi reaksi dirancang sebagai berikut: 30 detik pada suhu 95ÿC, dan 40 siklus denaturasi pada suhu 95ÿC selama 10 detik diikuti dengan pemanasan pada suhu 60ÿC selama 15 detik dan selama 40 detik. Proses PCR-reverse transcription-PCR (QRT-PCR) waktu nyata menggunakan kit campuran induk Green QRT-PCR satu langkah. Data dianalisis dengan hasil PCR menggunakan perangkat lunak Bio-Rad CFX Manager 3.1 (Biorad, AS) [22–25].

Machine Translated by Google

(7)

memodulasi respons Th17 pada pasien dengan hasil tes kulit tuberkulin positif.

Jurnal Infect Dis 2010;201(1):20–31.

[22] G Peng, S Li, W Wu, Z Sun, Y Chen, Z Chen. Sel T regulator CD4+CD25+ yang bersirkulasi berkorelasi dengan infeksi hepatitis B kronis. Imunologi 2008;123:57–65. https://doi.org/10.1111/

j.1365-2567.2007.02691.x.

[24] RH Sirait, M Hatta, M Ramli, AA Islam, SK Arief. Lidokain sistemik menghambat ekspresi asam ribonukleat pembawa pesan grup kotak 1 mobilitas tinggi dan protein pada tikus BALB/c setelah cedera muskuloskeletal fraktur tertutup. Saudi J Anaesth 2018:395–8.

[25] JW Jacobus, S Rauf, M Hatta, R Natsir, MN Massi, MH Cangara, dkk. Analisis Ekspresi Gen YinYang 1 (YY1) dan P53 pada Kanker Serviks dan Hubungannya dengan Stadium Kanker. Biomed Pharmacol J 2020:1095–101. https://doi.org/ 10.13005/bpj/1977.

[21] Babu S, Bhat S, Kumar NP, Kumaraswami V, Nutman T. Sel T regulator

[23] M Hatta, EE Surachmanto, AA Islam, S Wahid. Ekspresi mRNA IL-17F dan sIL-17F pada pasien asma atopik. BMC Res Notes 2017;10:202. https://doi.org/ 10.1186/s13104-017-2517-9.