BAB IV. HASIL DAN PEMBAHASAN
F. Uji Kesesuaian Sistem
Uji kesesuaian sistem dilakukan dengan tujuan mengetahui kemampuan sistem KCKT fase terbalik tersebut dalam memberikan hasil yang sama atau mendekati pada tiap injeksi yang diberikan (Bose, 2014). Uji kesesuaian sistem ini memberikan hasil berupa 6 kali repetisi injeksi baku rutin beserta parameter yang diperlukan (waktu retensi, AUC, resolusi, tailing factor, dan theoretical plate). Uji kesesuaian sistem ini dikatakan berhasil apabila parameter-parameter tersebut memenuhi kriteria yang ada, yaitu CV pada waktu retensi dan AUC < 1 % (untuk jumlah injeksi > 5), resolusi > 2, tailing factor < 2, dan theoretical plate (N) > 2000 (Snyder dkk., 2010). Hasil uji kesesuaian sistem disajikan dalam tabel berikut
Tabel III. Hasil uji kesesuaian sistem
Rerata 9,4617 41489,6667 7,753 1,3058 4315,0068
SD 0,0240 411,8309 0,1319 0,0212 65,5452
CV 0,25 0,99 1,70 1,63 1,52
Berdasarkan hasil di atas, maka semua parameter yang ada memenuhi kriteria, yaitu nilai CV pada waktu retensi dan AUC < 1 %, resolusi lebih dari 2, nilai tailing factor kurang dari 2 dan nilai N lebih dari 2000. Selain itu, jika dilihat dari CV yang dihasilkan semua parameter, maka semua parameter mememenuhi kriteria dari USP pada tahun 2020, yaitu < 2 %. Parameter yang sudah memenuhi kriteria menunjukkan bahwa sistem KCKT fase terbalik ini bisa memberikan hasil yang sama atau mendekati.
BAB V KESIMPULAN
A. KESIMPULAN
Penelitian ini melakukan optimasi terhadap panjang gelombang maksimum serta komposisi dan laju alir fase gerak. Panjang gelombang maksimum yang didapatkan sebesar 272 nm, sementara fase gerak yang memenuhi kriteria penerimaan adalah metanol : asetonitril : akuabides dengan perbandingan 30 : 10 : 60 dengan laju alir 0,7 mL/menit dengan waktu retensi pada sampel 9,978 menit, resolusi 1,676 dan tailing factor 1,076. Selain itu, dilakukan uji kesesuaian sistem untuk memastikan kemampuan sistem memberikan hasil yang sama. Hasil dari uji kesesuaian sistem yaitu CV <2 % pada parameter resolusi, waktu retensi, tailing factor, theoretical plate, dan AUC.
B. SARAN
Jika penelitian ini dilakukan kembali, maka saran yang dapat diberikan yaitu perlu dilakukan validasi terhadap metode analisis yang dilakukan. Validasi diperlukan untuk memastikan kembali bahwa sistem KCKT mampu memberikan hasil yang akurat, reprodusibel, dan selektif.
DAFTAR PUSTAKA
Arifin, H., Wijaya, R.J., Rizal, Z. 2014. Pengaruh Ekstrak Etanol Daun Binahong (Anredera cordifolia (Ten.) Steenis) terhadap pH dan Tukak Lambung pada Tikus Putih Betina. Jurnal Farmasi Higea, Vol 6 (1), 33.
Bose, A. 2014. HPLC Calibration Process Parameters in Terms of System Suitability Test. Austin Chromatography, Vol 1 (2), 2.
Cabi, 2021. Anredera cordifolia, diakses pada 20 Juli 2021.
Chen, et al. 2020. Effects of Rutin on Wound Healing in Hyperglycemic Rats. MDPI Antioxidants, Vol 9 (1122), 6-10.
Ciric, A., Stankov, M.J., Cvijovic, M., Djudjevic, P. 2017. Statistical Optimization of An RP-HPLC Method for the Determination of Selected Flavonoids in Berry Juices and Evaluation of Their Antioxidant Activities. Biomed Chromatogr.
2017 Apr, 2-3.
Depkes. 2017. Farmakope Herbal Indonesia Edisi 2. Kementerian Kesehatan RI, Jakarta.
Dwitiyanti, Harahap, Y., Elna, B., Bahtiar, A. 2019. Impact of Solvent of the Characteristics of Standarized Binahong Leaf (Anredera cordifolia (Ten.) Steenis). Pharmacognosy Journal Vol 11 (6), 1463-1465.
Farsi, E., et al. 2017. Standarized Extract of Ficus deltoidea Stimulates Insulin Secretion and Blocks Hepatic Glucose Production by Regulating the Expression of Glucose-Metabolic Genes in Streptozitocin-Induced Diabetic Rats. BMC Complementary and Alternative Medicine Vol 14 (20), 10.
Gandjar, I. G., Rohman, A. 2015. Kimia Farmasi Analisis. Pustaka Pelajar, Yogyakarta, p. 378-416, 460.
Ghorbani, A. 2017. Mechanisms of Antidiabetic Effects of Flavonoid Rutin. Biomed Pharmacother. 2017 Dec, 306-309.
Indriani, L., Zunnaita, O., Khairi, M.R. 2019. Optimasi Efek Analgesik Daun Binahong dengan Penambahan Jahe dan Kunyit secara In-Vivo. Fitofarmaka Jurnal Ilmiah Farmasi Vol 9 (2), 146.
Jang, D. et al. 2019. Developing and Validating A Method for Separating Flavonoid Isomers in Common Buckwheat Sprouts Using HPLC-PDA. Foods Vol (8), 6-7.
Kintoko, et al. 2017. Pengaruh Kondisi Diabetes pada Pemberian Topikal Fraksi Daun Binahong (Anredera cordifolia (Ten.) Steenis) dalam Proses Penyembuhan Luka. Traditional Medicine Journal Vol 22 (2), 104.
Klitou, P., Rosbottom, I., Simone, E. 2019. Synthonic Modellinfg of Quercetin and Its Hydrates : Explaining Crystallization Behavior in Terms of Molecular Confomation and Crystal Packing. Cryst Growth Des Vol 19, 4780.
Leliqia, N. P. E., Sukandar, E.Y., Fidrianny, I. 2017, Antibacterial Activities of Anredera cordifolia (Ten.) V. Steenis Leaves Extracts and Fractions. Asian Journal of Pharmaceutial and Clinical Research Vol 10 (2), 175.
Lindon, J.C., Tranter, G.E. Koppenaal, D.W. 2017. Encyclopedia of Spectroscopy and Spectrometry Third Edition. Elsevier, London.
Merck. 2013. The Merck Index. Royal Society of Chemistry, UK.
Meurs, J. 2016. Flow Rates in Liquid Chromatography, Gas Chromatography and Supercritical Fluid Chromatography : A Tool for Optimization. Journal of Open Research Software Vol 4 (32), 1-3.
Mulia, K., Muhammad, F., Kristanti, E. 2018. Extraction of Vitexin from Binahong (Anredera cordifolia (Ten.) Steenis) Leaves using Betaine-1,4 Butanediol Natural Deep Eutectic Solvent (NADES). AIP Conference Proceedings, 1.
Naveen, P., Lingaraju, H.B., Anitha, Prasad, K.S. 2017. Simultaneous Determination of Rutin, Isoquercetin, and Quercetin Flavonoids in Nelumbo nucifera by High Performance Liquid Chromatography Method. International Journal of Pharmaceutical Investigation Vol 7 (2), 95.
Pavia, D. L., Lampman, G. M., Kriz, G. S., Vyvyan, J. R. 2017. Introduction to Spectroscopy. Brooks/Cole Cengage Learning, USA, p. 386-400, 406.
Perkeni, 2011, Konsensus Pengelolaan dan Pencegahan Diabetes Melitus Tipe 2 di Indonesia. Perkeni, Jakarta, p. 11.
Pubchem. 2021. Acetonitrile, www.pubchem.ncbi.nlm.nih.gov, diakses pada tanggal 17 Mei 2021.
Pubchem. 2021. Methanol, www.pubchem.ncbi.nlm.nih.gov, diakses pada tanggal 17 Mei 2021.
Pubchem. 2021. Rutin, www.pubchem.ncbi.nlm.nih.gov, diakses pada tanggal 25 April 2021.
Pubchem. 2021. Rutin Hydrate, www.pubchem.ncbi.nlm.nih.gov,diakses pada tanggal 17 Mei 2021.
Purba, N.B.R., Rohman, A., Martono, S. 2019. Validation and Application of Reversed-Phase High-Performance Liquid Chromatography for Quantitative Analysis of Acid Orange 7 and Sudan II in Blusher Products. Journal of Applied Pharmaceutical Science Vol 9(07), 11.
Ramawat, K.G., Merillon, J.M. 2013. Natural Products : Phytochemistry, Botany and Metabolism of Alkaloids, Phenolics, and Terpenes. Springer, p. 2115-2117.
Rana, A. C., Gulliya, B. 2018. Chemistry and Pharmacology of Flavonoids-A Review.
Indian Journal of Pharmaceutical Education and Research Vol 53 (1), 8, 10, 13.
Reuhs, B. L., Rounds, M. A. 2010. High-Performance Liquid Chromatography. Food Analysis Springer Science, 488-489.
Santosa, O. B., Gani, M. R., Yuliani, S H. 2020. Chemometric Assisted Quantitative Determination of Vitexin in Ethanolic Extract of Binahong (Anredera cordifolia (Ten.) Steenis) Leaves. International Journal of Applied Pharmaceutics Vol 12 (6), 69-70.
Seal, T. 2016. Quantitative HPLC Analysis of Phenolic Acids, Flavonoids and Ascorbic Acid in Four Different Solvent Extracts of Two Wild Edible Leaves,
Sonchus arvensis and Oenanthe linearis of North Eastern Region in India.
Journal of Applied Pharmaceutical Science Vol 6 (2), 159-160.
Shah, B., Seth, A.K. 2010. Textbook of Pharmacognosy & Phytochemistry. Elsevier, USA, p. 410.
Sigma Aldrich. 2021. Ethanol. www.sigmaladrich.com, diakses pada tanggal 25 Mei 2021.
Sigma Aldrich. 2021. N-Hexane. www.sigmaladrich.com, diakses pada tanggal 25 Mei 2021.
Sigma Aldrich. 2016. Rutin Hydrate (Certificate of Analysis). Sigma Aldrich, USA.
Snyder, L.R., Kirkland, J.J., Dolan, J. W. 2010. Introduction to Modern Liquid Chromatography. John Wiley & Sons Publications, p. 19-41, 542-543.
Taraba, A., Szymczyk, K. 2019. Quercetin and Rutin Mixtures with Alcohols : Spectroscopic Conductometric Studies. Journal of Molecular Structure, 4-7.
USP. 2020. Excerpted USP-NF and FCC Standards : A COVID-19 Resource. USP, USA.
Utami, H.F., Hastuti, R.B., Hastuti, E.D. 2015. Kualitas Binahong (Anredera cordifolia) pada Suhu Pengeringan Berbeda. Jurnal Biologi Vol 4 (2), 2.
Wang, C. H., Wang, Y. X., Liu, H.J., 2011. Validation and Application by HPLC for Simultaneous Determination of Glucoside, Vitexin-2”-O-Rhamnoside, Rutin, Vitexin, and Hyperoside. Journal of Pharmaceutical Analysis Vol 1 (4), 293-295.
Wosch, L., Santos, K.C., Imig, D.C., Santos, C.A.M. 2017. Comparative Study of Passiflora taxa Leaves : II. A Chromatographic Profile. Revista Brasiliera de Farmacognosia Vol 27, 40-41.
Yang, L. et al. 2013. High Performance Liquid Chromatographic Determination of Phenolic Compounds in Propolis. Tropical Journal of Pharmaceutical Research Vol 12 (5), 772-775.
LAMPIRAN Lampiran 1. Hasil Determinasi Binahong
Lampiran 2. Certificate of Analysis Baku Rutin Hidrat
Lampiran 3. Absorbansi Rutin 0,5 ppm
Lampiran 4. Absorbansi Rutin 1 ppm
Lampiran 5. Absorbansi Rutin 1,5 ppm
Lampiran 6. Kromatogram Baku Fase Gerak Metanol : ACN : Akuabides 20 : 20 : 60, flow rate 0,6 mL/menit
Lampiran 7. Kromatogram Sampel Fase Gerak Metanol : ACN : Akuabides 20 : 20 : 60, flow rate 0,6 mL/menit
Lampiran 8. Kromatogram Baku Fase Gerak Metanol : ACN : Akuabides 20 : 20 : 60, flow rate 0,7 mL/menit
Lampiran 9. Kromatogram Sampel Fase Gerak Metanol : ACN : Akuabides 20 : 20 : 60, flow rate 0,7 mL/menit
Lampiran 10. Kromatogram Baku Fase Gerak Metanol : ACN : Akuabides 20 : 20 : 60, flow rate 0,8 mL/menit
Lampiran 11. Kromatogram Sampel Fase Gerak Metanol : ACN : Akuabides 20 : 20 : 60, flow rate 0,8 mL/menit
Lampiran 12. Kromatogram Baku Fase Gerak Metanol : ACN : Akuabides 30 : 10 : 60, flow rate 0,6 mL/menit
Lampiran 13. Kromatogram Sampel Fase Gerak Metanol : ACN : Akuabides 30 : 10 : 60, flow rate 0,6 mL/menit
Lampiran 14. Kromatogram metanol fase gerak metanol : ACN : akuabides 30 : 10 : 60, flow rate 0,7 mL/menit
Lampiran 15. Kromatogram Baku Fase Gerak Metanol : ACN : Akuabides 30 : 10 : 60, flow rate 0,7 mL/menit
Lampiran 16. Kromatogram Sampel Fase Gerak Metanol : ACN : Akuabides 30 : 10 : 60, flow rate 0,7 mL/menit
Lampiran 17. Kromatogram Baku Fase Gerak Metanol : ACN : Akuabides 30 : 10 : 60, flow rate 0,8 mL/menit
Lampiran 18. Kromatogram Sampel Fase Gerak Metanol : ACN : Akuabides 30 : 10 : 60, flow rate 0,8 mL/menit
Lampiran 19. Kromatogram Uji Kesesuaian Sistem 1
Lampiran 20. Kromatogram Uji Kesesuaian Sistem 2
Lampiran 21. Kromatogram Uji Kesesuaian Sistem 3
Lampiran 22. Kromatogram Uji Kesesuaian Sistem 4
Lampiran 23. Kromatogram Uji Kesesuaian Sistem 5
Lampiran 24. Kromatogram Uji Kesesuaian Sistem 6
BIOGRAFI PENULIS
Penulis skripsi berjudul “Optimasi Metode KCKT untuk Analisis Kadar Rutin dalam Ekstrak Etanol Daun Binahong (Anredera cordifolia (Ten.) Steenis)” memiliki nama lengkap Chelsia Devina Maryanto. Penulis lahir di Surakarta, 20 Juni 1999 sebagai anak pertama dari dua bersaudara dari pasangan Budi Maryanto Honggowijaya dan Evianty Dharmawan Saputra. Penulis menempuh pendidikan di SD Pangudi Luhur Santo Timotius Surakarta (2005-2011), SMP Pangudi Luhur Bintang Laut Surakarta (2011-2014), dan SMA Regina Pacis Surakarta (2014-2017). Penulis melanjutkan kuliah di Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma pada tahun 2017. Selama menjalani masa kuliah, penulis aktif terlibat di organisasi dan kepanitiaan. Penulis pernah menjadi Koordinator Divisi Kaderisasi dan Kajian Strategis (KKS) Badan Eksekutif Mahasiswa Fakultas (BEMF) Farmasi pada tahun 2017-2018 dan 2018-2019, Bendahara Patient Counseling Club pada tahun 2019, anggota Divisi Acara Pharmalympic 2017, anggota Divisi Acara FACTION #2-#4 (2017-2019), Sekretaris TITRASI (2018-2019), dan Steering Committee LK BEMF Fakultas Farmasi pada tahun 2018. Penulis juga terlibat aktif dalam mewakili fakultas di bidang akademik dan non akademik. Penulis pernah mengikuti LKMMF II Ikatan Seluruh Mahasiswa Farmasi Indonesia (ISMAFARSI) Joglosepur pada tahun 2018, Musyarwarah Wilayah (Muswil) ISMAFARSI Joglosepur pada tahun 2018, dan Rapat Koordinasi Wilayah (Rakorwil) ISMAFARSI Joglosepur pada tahun 2019, dan mendapatkan juara 2 Patient Counseling Event (PCE) Eurycoma pada tahun 2020 serta juara 3 PCE Gemfar pada tahun yang sama. Penulis juga terlibat dalam kegiatan asistensi dengan menjadi asisten dosen pada praktikum Kimia Analisis (2019-2020), praktikum Analisis Farmasi (2021), dan praktikum Pharmaceutical Care Saraf Renal (2021).