KOMPONEN KIMIA FRAKSI POLAR EKSTRAK METANOL
BUAH SINYO NAKAL (Duranta repens)
SIGIT EKO JANUAR
DEPARTEMEN KIMIA
FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM INSTITUT PERTANIAN BOGOR
PERNYATAAN MENGENAI SKRIPSI DAN
SUMBER INFORMASI SERTA PELIMPAHAN HAK CIPTA
Dengan ini saya menyatakan bahwa skripsi berjudul Komponen Kimia Fraksi Polar Ekstrak Metanol Buah Sinyo Nakal (Duranta repens) adalah benar karya saya dengan arahan dari komisi pembimbing dan belum diajukan dalam bentuk apa pun kepada perguruan tinggi manapun. Sumber informasi yang berasal atau dikutip dari karya yang diterbitkan maupun tidak diterbitkan dari penulis lain telah disebutkan dalam teks dan dicantumkan dalam Daftar Pustaka di bagian akhir skripsi ini.Dengan ini saya melimpahkan hak cipta dari karya tulis saya kepada Institut Pertanian Bogor.
Bogor, September 2013
ABSTRAK
SIGIT EKO JANUAR. Komponen Kimia Fraksi Polar Ekstrak Metanol Buah Sinyo Nakal (Duranta repens). Dibimbing oleh PURWANTININGSIH SUGITA dan BUDI ARIFIN.
Beberapa penelitian telah dilakukan untuk menentukan jenis komponen bioaktif yang terkandung dalam daun dan kayu tanaman sinyo nakal (D. repens), tetapi penelitian secara khusus pada ekstrak buah belum banyak dilakukan. Hasil uji fitokimia pada ekstrak metanol bebas˗lipid buah D. repens asal Jawa Timur, Indonesia menunjukkan kandungan flavonoid, alkaloid, saponin, tanin, dan steroid. Serangkaian fraksionasi dilakukan terhadap ekstrak metanol tersebut dengan metode kromatografi cair vakum, kromatografi kolom gravitasi, dan kromatografi radial. Dua fraksi hasil pemisahan, yakni fraksi Hfg1 dan Hi dianalisis menggunakan spektrofotometer Resonans Magnet Inti (NMR). Hasil analisis NMR 1H, 13C, dan korelasi 2D menunjukkan bahwa fraksi Hfg1 merupakan senyawa asam trans-sinamat, sedangkan struktur molekul dalam fraksi Hi belum dapat ditentukan karena masih berupa campuran.
Kata kunci: asam trans-sinamat, Duranta repens,fraksionasi, sinyo nakal
ABSTRACT
SIGIT EKO JANUAR. Chemical Components in Polar Fraction of Sinyo Nakal (Duranta repens)’s Fruit Methanol Extract. Supervised by PURWANTININGSIH SUGITA and BUDI ARIFIN.
Various studies have been conducted to identify the bioactive components in leaves and bark of sinyo nakal (D. repens), but only few studies focusing on fruit extract. Phytochemical investigations on lipid-free fruit methanol extract showed the presence of flavonoid, alkaloid, saponin, tanin, and steroid. Fractionations of the methanol extract have been conducted through series of chromatographic separations including vacuum liquid chromatography, gravity column chromatography, and radial chromatography. Two fractions namely Hfg1 and Hi were analyzed with nuclear magnetic resonance (NMR) spectrophotometer. The 1H, 13C, and 2D correlation NMR analysis showed that Hfg1 fraction was trans-cinnamic acid, whereas the molecular structure in Hi fraction has not been elucidated yet because it still contained mixture of compounds.
KOMPONEN KIMIA FRAKSI POLAR EKSTRAK METANOL
BUAH SINYO NAKAL (Duranta repens)
SIGIT EKO JANUAR
Skripsi
sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana Sains
pada Departemen Kimia
DEPARTEMEN KIMIA
FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM INSTITUT PERTANIAN BOGOR
Judul Skripsi : Komponen Kimia Fraksi Polar Ekstrak Metanol Buah Sinyo Nakal (Duranta repens)
Nama : Sigit Eko Januar
NIM : G44090081
Disetujui Oleh
Diketahui oleh
Prof Dr Ir Tun Tedja Irawadi, MS Ketua Departemen
Tanggal Lulus:
Pembimbing I
Prof Dr Purwantiningsih Sugita, MS Pembimbing I
Pembimbing II
PRAKATA
Puji dan syukur penulis panjatkan kepada Allah SWT atas segala rahmat dan karunia-Nya sehingga penulis dapat menyelesaikan karya ilmiah ini yang
berjudul “Komponen Kimia Fraksi Polar Ekstrak Metanol Buah Sinyo Nakal
(Duranta repens)”. Karya ilmiah ini disusun berdasarkan penelitian yang dilaksanakan pada bulan Februari hinggal Juli 2013 di Laboratorium Kimia Organik, Departemen Kimia, Institut Pertanian Bogor. Penelitian ini didanai oleh program Penelitian Unggulan Lintas Fakultas tahun 2013 sesuai kontrak nomor 243/IT3.41.2/L2/SPK/2013.
Pada kesempatan ini penulis mengucapkan terima kasih atas bimbingan, dukungan, dan kerja sama yang telah diberikan oleh Ibu Prof Dr Purwantiningsih Sugita, MS selaku pembimbing I dan Bapak Budi Arifin, MSi selaku pembimbing II. Rasa terima kasih ini juga dihaturkan kepada Bapak M Farid, MSi, Bapak Sabur, Ibu Yenni Karmila, dan Mbak Nia atas bimbingan dan bantuannya selama penelitian. Karya sekaligus ungkapan terima kasih ini dipersembahkan kepada Ayah, Ibu, serta keluarga yang senantiasa memberikan dorongan moral dan materi demi terlaksananya penelitian ini. Ucapan terima kasih disampaikan pula kepada Kak Rizki Amilia, Kak Ami, Nisfiyah, Febrina, dan terkhususkan kepada ketiga sahabat seperjuanganku Wahyu, Ichsan, dan Selvi yang telah membantu, memberi masukan dan semangat, saran, kebersamaan, dan kenangan yang tidak tergantikan kepada penulis selama menjalankan penelitian.
Semoga karya ilmiah ini bermanfaat.
Bogor, September 2013
DAFTAR ISI
DAFTAR TABEL vii
DAFTAR GAMBAR vii
DAFTAR LAMPIRAN vii
PENDAHULUAN 1
BAHAN DAN METODE 2
Alat dan Bahan 2
Metode Penelitian 2
HASIL DAN PEMBAHASAN 3
Kadar Air dan Ekstraksi 3
Fitokimia Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol 4
Komponen Kimia dalam Ekstrak Metanol 4
Struktur Metabolit Sekunder dalam Fraksi Hfg1 Hasil Isolasi 7
SIMPULAN DAN SARAN 9
Simpulan 9
DAFTAR PUSTAKA 9
Lampiran 11
DAFTAR TABEL
1 Fitokimia ekstrak n-heksana tak-tersabunkan dan ekstrak metanol 4 2 Fraksi-fraksi KCV ekstrak metanol bebas-tanin 5 3 Hasil pemisahan KKG dari fraksi H bebas-tanin 6
DAFTAR GAMBAR
1 Profil KLT eluat 1–24 hasil KCV dengan eluen n-heksana˗etil asetat 4:6 5 2 Profil KLT fraksi-fraksi hasil kromatografi kolom fraksi H bebas-tanin 6 3 Unit alkena disubstitusi dengan kopling trans 7
4 Struktur senyawa asam trans-sinamat 8
5 Senyawa durantosida I pada D. erecta 8
DAFTAR LAMPIRAN
1 Bagan alir penelitian 11
2 Metode uji fitokimia 12
3 Hasil analisis kadar air 13
4 Profil KLT ekstrak metanol bebas-tanin D. repens. 14
5 Spektrum 1H-NMR fraksi Hi 15
6 Spektrum 13C-NMR fraksi Hfg1 16
7 Spektrum 1H-NMR fraksi Hfg1 17
8 Spektrum TOCSY fraksi Hfg1 18
9 Spektrum HSQC fraksi Hfg1 19
1
PENDAHULUAN
Duranta repens merupakan salah satu dari 35 spesies Duranta yang tersebar di daerah tropis dan subtropis di seluruh dunia (Ahmed et al. 2009). D. repens banyak dibudidayakan sebagai tanaman hias di wilayah barat India, Pakistan, tengah dan selatan Amerika. Tanaman ini umum dikenal di Indonesia sebagai sinyo nakal. Buahnya secara tradisional dimanfaatkan sebagai obat malaria dan cacingan, sedangkan daunnya digunakan sebagai obat abses, penurun panas, diuretik, dan antimalaria (Jayalakshmi et al. 2011).
Beberapa penelitian telah dilakukan untuk menentukan komponen bioaktif yang terkandung dalam D. repens. Hiradate et al. (1999) berhasil mengisolasi kumarin dan kumarinolignoid (Ahmad et al. 2009), serta feniletanoid glikosida (Ahmed et al. 2009).
Pengujian komponen aktif dalam daun dan batang D. repens menunjukkan beberapa aktivitas farmakologis. Nikkon et al. (2008b, 2009) menyatakan bahwa ekstrak batang dan buah memiliki aktivitas antijamur, antibakteri, serta bersifat larvasida terhadap larva Culex quinquefasciatus. Ekstrak air dan metanol daun memiliki aktivitas larvasida terhadap larva Culex quinquefasciatus, tetapi efek larvasida ekstrak metanol lebih besar (Serena et al. 2010). Ekstrak daun menunjukkan aktivitas antibakteri (Jayalakshmi et al. 2011), antioksidan (Adu et al. 2010), dan mengandung saponin yang berperan dalam aktivitas alelopati tanaman (Hiradate et al. 1999). Namun demikian, proses pengujian tersebut umumnya dilakukan pada ekstrak kasar daun, batang, atau ekstrak seluruh bagian tanaman D. repens.
2
BAHAN DAN METODE
Alat dan Bahan
Alat-alat yang digunakan selama penelitian ini antara lain seperangkat alat kaca, radas kromatografi cair vakum (KCV), kromatografi kolom gravitasi (KKG), kromatografi radial (KR), dan penguap putar, serta spektrofotometer resonans magnet inti (NMR) Agilent 500 MHz (1H) dan 125 MHz (13C) di Institut Teknologi Bandung (ITB). Bahan yang digunakan adalah sampel buah D. repens yang dikumpulkan dari Kabupaten Jombang, Jawa Timur, metanol, etil asetat, n -heksana, diklorometana, pereaksi Wagner, Mayer, Dragendorf, dan Liebermann-Buchard, NaOH 10%, FeCl3 1%, asam sulfat p.a, silika gel KCV Merck 60 G, silika gel KR Merck 60 PF254, silika gel Merck 60 untuk impregnasi sampel KCV, dan pelat silika gel Merck 60 Kiesel GF254 untuk kromatografi lapis tipis (KLT).
Metode Penelitian
Tahapan yang dilakukan dalam penelitian ini meliputi penyiapan sampel, ekstraksi maserasi, uji fitokimia (Harborne 1987), isolasi (Hermawati 2009), dan pencirian komponen fraksi polar. Bagan alir penelitian ditunjukkan pada Lampiran 1.
Preparasi dan Ekstraksi
Sebanyak 2.279 kg simplisia kering giling buah sinyo nakal dimaserasi menggunakan n˗heksana selama 24 jam. Filtrat hasil maserasi disabunkan dengan NaOH 0.5 N hingga terbentuk 2 lapisan. Ekstrak n˗heksana yang tidak tersabunkan dipisahkan dan dipekatkan. Residu dimaserasi kembali dalam metanol sebanyak 6 L selama 24 jam. Maserasi dilakukan 3 kali ulangan. Ekstrak metanol yang diperoleh dikumpulkan dan dipekatkan.
Penentuan Kadar Air (AOAC 950.46 (B) 2005)
Sebanyak 2 g simplisia dimasukkan dalam cawan porselen yang telah dipanaskan sebelumnya dalam oven bersuhu 105 oC selama 30 menit hingga bobotnya konstan. Cawan berisi sampel dipanaskan dalam oven bersuhu 105 oC selama 3 jam, lalu didinginkan dalam desikator dan ditimbang. Pemanasan kembali dilakukan hingga diperoleh bobot sampel yang konstan. Kadar air contoh ditentukan dengan persamaan
Keterangan : A: bobot sampel basah (g) B: bobot sampel kering (g)
Uji Fitokimia
3
Isolasi Senyawa Metabolit Sekunder
Proses isolasi terdiri atas 2 tahap, yaitu fraksionasi dan pemurnian. Tahap fraksionasi diawali dengan pemisahan komponen tanin dalam ekstrak metanol. Sejumlah tertentu ekstrak dilarutkan dalam sedikit metanol, kemudian ditambahkan 100 mL aseton. Endapan tanin yang terbentuk dipisahkan dengan cara disaring. Penambahan aseton diulangi hingga tidak terbentuk endapan tanin dalam larutan. Ekstrak metanol kemudian dipekatkan dan diperoleh ekstrak metanol bebas-tanin (BT).
Ekstrak BT difraksionasi kasar menggunakan metode KCV. Eluen KCV ditentukan dengan cara menguji pola pemisahan kromatografi lapis tipis (KLT) ekstrak BT menggunakan eluen tunggal yang meliputi n˗heksana, kloroform, etil asetat, aseton, dan metanol. Eluen yang menahan pergerakan noda dan eluen yang menggerakkan noda hingga mendekati garis batas pelarut digabungkan menjadi sistem eluen gradien untuk KCV. Ekstrak metanol BT yang telah diimpregnasi kemudian dielusi secara gradien (peningkatan kepolaran) dengan sistem eluen tersebut. Eluat hasil pemisahan dengan KCV diuji pola pemisahannya menggunakan sistem eluen terbaik, yaitu kombinasi 2 eluen KCV yang menghasilkan jumlah noda terbanyak dan pola pemisahan terbaik. Eluat dengan pola pemisahan KLT yang sama digabungkan menjadi 1 fraksi.
Fraksionasi lanjutan fraksi hasil KCV dilakukan menggunakan metode KKG. Sejumlah tertentu fraksi dipisahkan dengan sistem elusi gradien. Pemilihan sistem eluen gradien untuk KKG dan eluen terbaik untuk pengujian eluat dilakukan dengan cara yang sama seperti pada KCV. Fraksi-fraksi hasil KKG yang telah murni dapat langsung dianalisis menggunakan spektrofotometer NMR dan dielusidasi struktur kimianya. Pemurnian lebih lanjut dilakukan pada fraksi yang masih berupa campuran dengan menggunakan metode KR. Tahap ini diawali dengan penentuan eluen terbaik dari beberapa kombinasi eluen, lalu sejumlah tertentu fraksi campuran dimurnikan dengan sistem elusi isokratik memakai eluen terbaik tersebut. Fraksi akhir yang telah murni juga dielusidasi menggunakan spektrofotometer NMR.
HASIL DAN PEMBAHASAN
Kadar Air dan Ekstraksi
4
Fitokimia Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol
Uji fitokimia dilakukan pada ekstrak n-heksana yang tidak tersabunkan dan ekstrak metanol untuk mendapatkan gambaran umum mengenai golongan senyawa kimia yang terdapat dalam ekstrak. Hasil uji (Tabel 1) menunjukkan bahwa ekstrak n-heksana mengandung steroid. Senyawa steroid relatif bersifat nonpolar sehingga akan terekstraksi dalam pelarut n-heksana. Sementara ekstrak metanol mengandung beberapa jenis senyawa kimia seperti tanin, saponin, alkaloid, flavonoid, dan steroid. Hasil ini menunjukkan bahwa komponen kimia yang berhasil diekstraksi dengan metanol jauh lebih banyak dibandingkan dengan n-heksana.
Tabel 1 Fitokimia ekstrak n-heksana tak-tersabunkan dan ekstrak metanol
Kelompok Senyawa Metabolit Sekunder
Hasil Uji Kualitatif (+/-)
Ekstrak Metanol Ekstrak n˗heksana Tak-Tersabunkan
Proses isolasi komponen kimia dalam ekstrak metanol diawali dengan tahap pemisahan tanin. Sebanyak 49.0543 g ekstrak metanol kasar dilarutkan dalam 8 mL metanol, kemudian ditambahkan 100 mL aseton. Tanin yang mengendap dipisahkan dengan cara disaring. Filtrat hasil penyaringan ditambahkan 100 mL aseton kembali. Proses ini diulangi beberapa kali hingga tidak terbentuk lagi endapan tanin. Kumpulan filtrat hasil pemisahan tanin diuapkan menggunakan penguap putar dan dihasilkan ekstrak metanol bebas˗tanin (BT) sebanyak 28.1478 g atau 57.38%.
5
yang relatif sama digabungkan menjadi 1 fraksi. Secara keseluruhan, diperoleh 9 fraksi dengan bobot dan rendemen yang dapat dilihat pada Tabel 2.
Gambar 1 Profil KLT eluat 1–24 hasil KCV dengan eluen n-heksana˗etil asetat 4:6
Tabel 2 Fraksi-fraksi KCV ekstrak metanol bebas-tanin Fraksi Bobot (g) Rendemen (%) Asal Fraksi
6
Gambar 2 Profil KLT fraksi-fraksi hasil kromatografi kolom fraksi H bebas-tanin dengan eluen n˗heksana˗etil asetat 4:9
Tabel 3 Hasil pemisahan KKG pada fraksi H bebas-tanin
Fraksi Bobot Fraksi
7
Struktur Metabolit Sekunder dalam Fraksi Hfg1 Hasil Isolasi
Di antara fraksi Hfg1 dan Hi, hanya fraksi Hfg1 yang dapat ditentukan struktur molekulnya. Spektrum NMR menunjukkan bahwa fraksi Hi masih berupa campuran (Lampiran 5). Struktur senyawa metabolit sekunder dalam fraksi Hfg1 (6.3 mg) yang berbentuk kristal putih kekuningan ditentukan berdasarkan spektrum NMR 1H, 13C, koherensi kuantum tunggal heterointi (HSQC), koherensi ikatan rangkap heterointi (HMBC), dan spektroskopi korelasi total (TOCSY). Spektrum 13C-NMR (Lampiran 6) menunjukkan 7 sinyal karbon dari 9 atom
karbon. Sinyal pada δC 171.7 ppm menunjukkan gugus karbonil dari asam
karboksilat. Dua sinyal di δC 117.2 dan 146.9 ppm merupakan sinyal karbon sp2
dengan kondisi lingkungan kimia yang berbeda. Cincin aromatik benzena dibuktikan dengan munculnya 4 sinyal pada δC 128.3, 128.9, 130.7, dan 134.0
ppm. Dua sinyal di δC 128.3 dan 128.9 ppm memiliki intensitas 2 kali lebih tinggi
dibandingkan dengan 2 sinyal lainnya. Setiap sinyal tersebut dihasilkan oleh 2 atom karbon yang ekuivalen. Pola geseran kimia keempat sinyal aromatik tersebut menunjukkan struktur benzena monosubstitusi dengan substituen penarik-elektron.
Spektrum 1H-NMR (Lampiran 7) menunjukkan sinyal pada δH 6.4 ppm (1H, d) dan 7.8 ppm (1H, d). Dua sinyal tersebut menunjukkan gugus alkena yang saling trans dengan tetapan kopling 16 Hz (Gambar 3). Hal ini semakin diperkuat oleh spektrum TOCSY 1D (Lampiran 8) yang menunjukkan bahwa ketika
hidrogen pada δH 6.4 ppm diradiasi, hanya puncak serapan pada δH 7.8 ppm yang
muncul, menunjukkan korelasi langsung (berdekatan) di antara kedua proton ini. Sinyal salah satu proton (δH 7.8 ppm) lebih ke medan bawah disebabkan oleh efek resonans dari gugus asam karboksilat yang mengakibatkan proton Cβ lebih terawaperisai dan memiliki nilai geseran kimia lebih besar. Proton aromatik ditunjukkan oleh puncak serapan pada δH 7.4 ppm (3H, t) dan 7.6 ppm (2H, q). Kedua sinyal tersebut memperkuat dugaan struktur benzena monosubstitusi.
Sinyal proton dapat‒tukar dari OH asam karboksilat tidak muncul pada spektrum
1H˗
NMR, kemungkinan karena proton tersebut berikatan hidrogen dengan molekul air yang dapat masuk selama proses penyiapan sampel.
Data spektrum HSQC (Lampiran 9) menunjukkan beberapa korelasi antara proton dan karbon melalui 1 ikatan. Korelasi sinyal δC 117.2 ppm dan δH 6.4 ppm serta δC 146.9 ppm dan δH 7.8 ppm membuktikan keberadaan unit alkena yang setiap atom karbonnya tersubstitusi oleh satu gugus lain (Gambar 3). Dua proton pada δH 7.6 ppm berkorelasi dengan 2 karbon pada δC 128.3 ppm, sedangkan 2
proton pada δH 7.4 ppm terikat pada 2 karbon dengan δC 128.9 ppm, sedangkan 1
proton sisa pada δH 7.4 ppm terikat pada atom karbon dengan δC 130.7 ppm. Fakta lain yang diperoleh adalah sinyal karbon pada δC 134.0 ppm merupakan sinyal karbon kuaterner karena tidak berkorelasi dengan salah satu sinyal pada 1H-NMR.
8
Spektrum HMBC (Lampiran 10) menunjukkan korelasi antara proton dan karbon yang dihubungkan melalui 2 atau 3 ikatan. Berdasarkan spektrum tersebut, posisi substituen karboksilat dapat ditentukan terkonjugasi dengan ikatan rangkap karena terdapat korelasi sinyal karbonil (δC 171.7 ppm) dengan 2 sinyal proton pada δH 6.4 dan δH 7.8 ppm, tetapi tidak berkorelasi dengan proton aromatik. Atom karbon yang terikat langsung pada gugus asam karboksilat (C2) dapat dibedakan dengan atom C3 berdasarkan pola korelasinya. Atom C2 (δC 117.2 ppm) berkorelasi dengan sinyal proton C3 (7.8 ppm), tetapi tidak berkorelasi 3 ikatan dengan proton aromatik. Hal ini membuktikan bahwa atom C3 yang berikatan langsung dengan unit benzena. Berdasarkan serangkaian hasil analisis di atas, dapat diidentifikasi bahwa struktur senyawa yang berhasil diisolasi adalah asam trans-sinamat (Gambar 4).
Gambar 4 Struktur senyawa asam trans-sinamat
Prediksi tersebut diperkuat dengan adanya korelasi sinyal atom C3 (δC 146.9
ppm) dengan sinyal proton aromatik (δH 7.5 ppm). Analisis spektrum HMBC juga
menunjukkan bahwa sinyal pada δC 128.3, 128.9, 134.0, dan 146.9 ppm
berturut-turut merupakan sinyal atom C4 (karbon kuaterner benzena), C5 dan C9, C6 dan C8, serta C7. Sebagian bentuk korelasi pada HMBC tersebut dapat diilustrasikan pada Gambar 4
Kandungan senyawa asam trans˗sinamat dan asam trans˗p˗metoksi sinamat pada ekstrak etanol daun D. repens yang berasal dari Taiwan telah dilaporkan oleh Kuo et al. (1995). Bentuk ester dari asam sinamat diketahui merupakan unit substituen dalam senyawa golongan iridoid glukosida, durantosida I (Gambar 5) yang berhasil diisolasi dari daun tanaman D. erecta (Takeda et al. 1994).
9
SIMPULAN DAN SARAN
Simpulan
Hasil uji fitokimia ekstrak metanol buah sinyo nakal menunjukkan kandungan senyawa steroid, flavonoid, alkaloid, saponin, dan tanin. Dua fraksi polar diperoleh dari serangkaian pemisahan, yakni fraksi Hfg1 dan Hi. Komponen fraksi Hi belum dapat ditentukan struktur molekulnya karena masih berupa campuran senyawa, sedangkan fraksi Hfg1 merupakan asam trans-sinamat berdasarkan analisis NMR.
Saran
Penelitian ini sangat baik untuk dilanjutkan agar dapat diperoleh suatu kajian fitokimia yang lebih lengkap dari buah tanaman sinyo nakal asal Indonesia. Perbanyakan bobot fraksi-fraksi hasil pemisahan KKG diperlukan agar dapat dimurnikan lebih lanjut dan struktur komponen kimia di dalamnya dapat ditentukan. Telaah lanjutan terkait potensi bioaktivitas senyawa murni hasil isolasi maupun fraksi hasil pemisahan juga perlu dilakukan.
DAFTAR PUSTAKA
Abou-Setta LM, Nazif NM, Shahat AA. 2007. Phytochemical investigation and activity of Duranta repens. J Appl Sci Res. 3:1426-1433.
Adu F, Gbedema S Y, Brown P, Annan K, Boamah VE. 2011. Antibacterial and free radical scavenging activity of Duranta plumieri Linn. J Pharm Sci Res. 2:282-287.
Ahmad N, Zeb F, Ahmad I, Wang F. 2009. Repenins A–D, four new antioxidative coumarinolignoids from Duranta repens Linn. Bioorg Med Chem Lett. 19:3521-3524.
Ahmad S, Nizami TA, Nawaz HR, Malik A, Afza N. 1998. A new steroid from Duranta repens [abstrak]. Fitoterapia. 69:448-450.
Ahmed WS, Mohamed MA, El-Dib RA, Hamed MM. 2009. New triterpene saponins from Duranta repens Linn. and their cytotoxic activity. Molecules. 14:1952-1965.
Anis I, Anis E, Ahmed S, Mustafa G, Malik A, Amtul Z, Rahman A. 2001. Thrombin inhibitory constituents from Duranta repens. Helv Chim Acta. 84:649-655.
Anis I, Ahmed S, Malik A, Yasin A, Choudary MI. 2002. Enzyme inhibitory constituents from Duranta repens. Chem Pharm Bull. 50:515-518.
10
Hermawati E. 2009. Metabolit sekunder dari salah satu tumbuhan obat Indonesia: daun Desmodium triquentrum Linn. (Farbaceae) [skripsi]. Bandung (ID): Institut Teknologi Bandung.
Hiradate S, Yada H, Ishii T, Nakajima N, Kameyama MO, Sugie H, Zungsontiporn S, Fujii Y. 1999. Three plant growth inhibiting saponins from Duranta repens. Phytochemistry. 52:1223-1228.
Iqbal K, Malik A, Mukhtar N, Anis I, Khan SN, Choudhary MI. 2004. α -Glucosidase inhibitory constituents from Duranta repens. Chem Pharm Bull. 52:785-789.
Jayalakshmi B, Raveesha KA, Amruthesh KN. 2011. Phytochemical investigations and antibacterial activity of some medicinal plants againts pathogenic bacteria. J Appl Pharm Sci. 1:124-128.
Kuo YH, Chen ZS, Lin YL. 1995. Chemical components of the leaves of Duranta repens Linn. Chem Pharm Bull. 44:429-436.
Nikkon F, Hasan S, Rahman MH, Hoque MA, Mosaddik A, Haque MA . 2008a. Antishigellosis and cytotoxic potency of crude extracts and isolated constituents from Duranta repens. Mycobiology. 36:173-177.
Nikkon F, Habib, MR, KArim MR, Hossain MS, Mosaddik MA, Haque ME. 2008b. Biochemical, hematological and histiphatological effects of Duranta repens stem on rats. Asian J Biochem. 2:366-372.
Nikkon F, Saud ZA, Hossain K, Parvin MS, Haque ME. 2009. Larvicidal effects of stem and fruits of Duranta repens against the mosquito Culex quinquefasciatatus. J Pharm Tech Res. 4:1709-1713.
Serena MM, Balasubraman M, Rajan K, Gerald IAJ. 2010. Evaluation of the larvicidal activity of the leaf extracts of Duranta erecta Linn. (Verbenaceae) on the larvae of Culex quinquefascitatus (Say) (Culicidae). J Biopesticides. 3:582-585.
Shahat AA, Nazif NM, Abousetta LM, Ibrahim NA, Cos P, Miert SV, Pieter L, Vlietinck AJ. 2005. Phytochemical investigation and antioxidant activity of Duranta repens. Phytother Res. 19:1071-1073.
11
12
Lampiran 2 Metode uji fitokimia (Harborne 1987)
1. Uji alkaloid
Sebanyak 2 g ekstrak dilarutkan dalam kloroform, kemudian ditambahkan 10 mL kloroform-amonia dan disaring. Filtrat yang diperoleh ditetesi dengan H2SO4 2 M, kemudian dikocok hingga terbentuk 2 lapisan. Lapisan asam (tidak berwarna) dipipet ke dalam tabung reaksi, kemudian dibagi 3 untuk diuji dengan beberapa tetes reagen Dragendorf, Mayer, dan Wagner. Uji positif alkaloid berturut-turut ditunjukkan dengan munculnya endapan jingga, putih kekuningan, dan cokelat.
2. Uji triterpenoid dan steroid
Sebanyak 2 g ekstrak ditambah 25 mL etanol kemudian dipanaskan dan disaring. Filtrat diuapkan, lalu residu ditambah dengan dietil eter. Larutan eter dipipet dan diuji pada pelat tetes. Jika contoh berubah warna menjadi merah/ungu setelah penambahan 3 tetes pereaksi Lieberman-Buchard, maka contoh positif mengandung triterpenoid. Jika terbentuk warna hijau, maka contoh positif mengandung steroid.
3. Uji flavonoid dan fenol
Sebanyak 2 g ekstrak diekstraksi dengan beberapa mL metanol hingga terendam, lalu dipanaskan hingga mendidih dan disaring. Filtrat dibagi menjadi 2 bagian. Bagian pertama ditambahkan NaOH 10% dan bagian kedua ditambahkan H2SO4 pekat. Bila setelah penambahan NaOH 10% terbentuk warna merah, berarti terdapat senyawa fenol hidrokuinon. Sementara bila penambahan H2SO4 pekat menghasilkan warna merah muda, berarti ekstrak mengandung senyawa turunan resorsinol dan floroglusinol.
4. Uji saponin dan tanin
Sebanyak 2‒4 g ekstrak ditambahkan akuades panas kemudian dipanaskan
13
Lampiran 3 Hasil analisis kadar air (AOAC 950.46 (B) 2005)
Ulangan
Bobot awal (g)
Bobot akhir (g) Kadar air (%) Cawan Sampel
1 22.5850 2.0118 1.8079 10.14 2 19.3788 2.0003 1.7921 10.41 3 19.4953 2.0214 1.7108 15.37
Rerata 11.97 ± 2.94
Keterangan: Bobot awal = Bobot sampel kering udara
Bobot akhir = Bobot konstan sampel setelah dikeringkan
Contoh perhitungan :
Kadar air (%) = 100%
= 100%
= 10.14%
14
Lampiran 4 Profil KLT ekstrak metanol bebas-tanin D. repens
Pengujian dengan sistem eluen tunggal:
n-Heksana Kloroform Etil asetat Aseton Metanol
Keterangan: C= ekstrak kasar metanol; BT= ekstrak metanol bebas tanin
Pengujian dengan sistem 2 eluen:
Keterangan : a: n-heksana‒etil asetat 1:9 e: n-heksana‒etil asetat 5:5 b: n-heksana‒etil asetat 2:8 f: n-heksana‒etil asetat 6:4 c: n-heksana‒etil asetat 3:7 g: n-heksana‒etil asetat 7:3 d: n-heksana‒etil asetat 4:6 h: n-heksana‒etil asetat 8:2
a b c d e f g h
15
16
17
18
19
20
21
21
RIWAYAT HIDUP
Penulis dilahirkan di Mojokerto, 22 Januari 1991 dari pasangan Harianto dan Suparti. Penulis merupakan anak pertama dari 2 bersaudara. Penulis menyelesaikan pendidikannya di Sekolah Menengah Atas Negeri (SMAN) 1 Puri Mojokerto tahun 2009, kemudian penulis melanjutkan pendidikan Program Sarjana di Departemen Kimia, Institut Pertanian Bogor tahun 2009‒2013.
Selama menempuh pendidikan, penulis aktif dalam beberapa organisasi di dalam kampus maupun di luar kampus. Selama periode 2009‒2011, penulis aktif sebagai anggota Korps Sukarelawan Remaja (KSR) IPB tahun 2009‒2010, anggota KMNU IPB (Keluarga Mahasiswa Nahdlatul Ulama IPB). Selama 3 tahun, penulis dipercaya sebagai Koordinator Mata Ajaran Kimia Dasar TPB pada Bimbingan Belajar Real Education Center (REC) dan akhirnya diamanahkan menjadi Bendahara
REC pada periode 2012‒2013. Pada tahun 2011, penulis menjadi salah satu anggota
Tim Khusus yang bertugas membuat soal olimpiade kimia tingkat SMA pada acara Pesta Sains Nasional IPB dan kembali dipercaya untuk menjadi Koordinator Tim Khusus pada tahun berikutnya (2012).
