IDENTIFIKASI CACING PARASITIK DAN BAKTERI PADA INSANG DAN SALURAN PENCERNAAN IKAN NILA HITAM (Oreochromis niloticus) HAFIZ FURQONUL AZIZ

IDENTIFIKASI CACING PARASITIK DAN BAKTERI PADA

INSANG DAN SALURAN PENCERNAAN IKAN NILA HITAM

(Oreochromis niloticus)

HAFIZ FURQONUL AZIZ

FAKULTAS KEDOKTERAN HEWAN

INSTITUT PERTANIAN BOGOR

BOGOR

2012

PERNYATAAN MENGENAI SKRIPSI DAN

SUMBER INFORMASI

Dengan ini saya menyatakan bahwa skripsi dengan judul Identifikasi Cacing Parasitik dan Bakteri pada Insang dan Saluran Pencernaan Ikan Nila Hitam (Oreochromis niloticus) adalah karya saya dengan arahan dari pembimbing dan belum diajukan dalam bentuk apapun kepada perguruan tinggi manapun. Sumber informasi yang berasal atau dikutip dari karya yang diterbitkan maupun tidak diterbitkan dari penulis lain telah disebutkan dalam teks dan dicantumkan dalam Daftar Pustaka di bagian akhir skripsi ini.

Bogor, September 2012

Hafiz Furqonul Aziz

ABSTRACT

HAFIZ FURQONUL AZIZ. Identification of Parasitic Worms and Bacteria in Gills and Digestive Tract of Nile Tilapia (Oreochromis niloticus). Under direction of RISA TIURIA and USAMAH AFIFF.

The objectives of this research were to identify parasitic worms and bacteria in gills and digestive tract of nile tilapia (Oreochromis niloticus). A group of 10 fishes of nile tilapia were used, each gills and digestive tract was collected. The parasitic worms were colored with KOH and clove oil for semi-permanent staining, and Semichon’s Acetocarmine for permanent staining. The isolated bacteria were identified using Gram staining, Triple Sugar Iron Agar, citrate agar, urea agar, indole, and cabohydrate fermentations. The result showed that there were three kind of parasitic worms in gills of nile tilapia, Dactylogyridae, Dactylogyrus sp., and Pseudodactylogyrus sp. The total amount of Dactylogyridae is 8 worms, Dactylogyrus sp. is 72 worms, and Pseudodactylogyrus is 24 worms. The bacteria were identified and the result showed that Aeromonas sp., Bacillus sp., Escherichia coli, Edwardsiella tarda, Klbesiella pneumoniae, Pasteurella sp., Staphylococcus epidermidis, and Vibrio parahaemolyticus were come from gills. Aeromonas sp., Bacillus sp., Escherichia coli, Enterobacter aerogenes, Klebsiella pneumoniae, Staphylococcus aerus, Staphylococcus epidermidis, Streptococcus sp., and Vibrio parahaemolyticus were come from digestive tract. The relation between the parasitic worms and the bacteria did not significanty obvious. The parasitic worms might predispose the secondary infection caused by bacteria or might be the opposite.

RINGKASAN

HAFIZ FURQONUL AZIZ. Identifikasi Cacing Parasitik dan Bakteri pada

Insang dan Saluran Pencernaan Ikan Nila Hitam (Oreochromis niloticus)

Dibimbing oleh RISA TIURIA dan USAMAH AFIFF.

Ikan nila adalah ikan yang hidup di air tawar, berasal dari sungai nil dan danau-danau di sekitarnya, dan mulai didatangkan ke Bogor pada tahun 1969. Ikan nila merupakan ikan konsumsi air tawar yang diminati oleh konsumen selain ikan mas dan gurami karena ikan nila memiliki rasa daging yang enak, gurih, dan tidak memiliki banyak duri. Keunggulan dari ikan nila dibandingkan ikan konsumsi lain adalah ikan nila mampu tumbuh cepat hanya dengan pakan yang rendah protein, memijah sepanjang tahun, bersifat omnivora, berdaging tebal, dan rasa dagingnya mirip dengan kakap merah (Suyanto 2009).

Pembudidayaan ikan nila hitam hampir dilaksanakan di seluruh provinsi di Indonesia sehingga produksi ikan nila di Indonesia cukup tinggi. Proses produksi dan budidaya ikan nila memiliki beberapa kendala, salah satunya serangan hama dan penyakit. Agen penyakit yang menyebabkan infeksi diantaranya, virus, bakteri, cendawan, dan parasit. Penyakit parasitik dan bakteri merupakan salah satu penyakit yang dapat menginfeksi hewan, termasuk ikan nila hitam. Kerugian yang ditimbulkan akibat infestasi dari cacing pada ikan tidak sebesar apabila ikan terinfeksi oleh virus atau bakteri, tetapi infestasi cacing dapat menjadi faktor predisposisi terjadinya infeksi oleh agen infeksius yang lainnya, seperti bakteri. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui adanya serta mengidentifikasi jenis cacing parasitik dan bakteri yang terdapat pada insang dan saluran pencernaan ikan nila (Oreochromis niloticus).

Ikan nila hitam dimatikan dengan cara menusuk bagian medial kepala tepat di otak. Insang ikan dan saluran pencernaan (usus dan lambung) kemudian dikeluarkan. Insang dan saluran pencernaan diletakkan ke dalam cawan petri yang telah diisi NaCl fisiologis dan disimpan di dalam refrigerator selama 10 jam. Insang dan saluran pencernaan kemudian diamati di bawah mikroskop stereo untuk mengoleksi cacing. Cacing yang ditemukan difiksasi dalam etanol 70% sebelum diwarnai. Pewarnaan permanen digunakan untuk mengindentifikasi cacing pipih trematoda. Pewarnaan semi permanen menggunakan KOH dan minyak cengkeh diaplikasikan untuk pewarnaan nematoda

Metode isolasi bakteri dilakukan dengan penggerusan insang dan digesta saluran pencernaan setelah ikan dimatikan. Hasil gerusan ditanam pada media agar Mac-Conkey dan agar darah. Selanjutnya media diinkubasi dan dilakukan pewarnaan Gram serta uji-uji biokimiawi untuk mengidentifikasi bakteri.

Hasil menunjukkan bahwa cacing yang dapat diisolasi dari ikan nila hitam adalah

Dactylogyrus sp., Dactylogyridae, dan Pseudodactylogyrus. Hasil juga menunjukkan bahwa terdapat sepuluh genus bakteri yang diisolasi dan diidentifikasi dari insang dan saluran pencernaan ikan nila hitam. Beberapa bakteri dapat menginfeksi manusia akibat kontak langsung dengan ikan atau mengkonsumsi ikan yang terinfeksi, diantaranya Escherichia coli, Edwardsiella tarda, Klebsiella pneumoniae, Staphylococcus aureus, dan Vibrio parahaemolyticus. Infestasi cacing pada ikan nila hitam dapat menjadi faktor predisposisi infeksi bakteri atau pun sebaliknya.

© Hak Cipta milik IPB, tahun 2012

Hak Cipta dilindungi Undang-Undang

Dilarang mengutip sebagian atau seluruh karya tulis ini tanpa mencantumkan atau menyebutkan sumbernya. Pengutipan hanya untuk kepentingan pendidikan, penelitian, penulisan karya ilmiah, penyusunan laporan, penulisan kritik, atau tinjauan suatu masalah; dan pengutipan tersebut tidak merugikan kepentingan yang wajar IPB

Dilarang mengumumkan dan memperbanyak sebagian atau seluruh karya tulis dalam bentuk apa pun tanpa izin IPB

IDENTIFIKASI CACING PARASITIK DAN BAKTERI PADA

INSANG DAN SALURAN PENCERNAAN IKAN NILA HITAM

(Oreochromis niloticus)

HAFIZ FURQONUL AZIZ

Skripsi

sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana Kedokteran Hewan pada

Fakultas Kedokteran Hewan

FAKULTAS KEDOKTERAN HEWAN

INSTITUT PERTANIAN BOGOR

BOGOR

2012

Judul Tugas akhir : Identifikasi Bakteri dan Cacing Parasitik pada Insang dan Saluran Pencernaan Ikan Nila Hitam

(Oreochromis niloticus)

Bentuk Tugas Akhir : Penelitian

Nama Mahasiswa : Hafiz Furqonul Aziz

NIM : B04080073 Disetujui, Pembimbing I Dr. drh. Risa Tiuria, MS. NIP. 19630430 198703 2 001 Pembimbing II drh. Usamah Afiff, M.Sc. NIP. 19600624 198703 1 001 Diketahui, Wakil Dekan

Fakultas Kedokteran Hewan - IPB

drh. Agus Setiyono, MS, Ph.D, APVet NIP. 19630810 198803 1 004

KATA PENGANTAR

Segala puji dan syukur sebesar-besarnya penulis panjatkan kepada Allah SWT atas segala rahmat dan hidayah-Nya yang senantiasa dilimpahkan berupa kekuatan lahir batin sehingga karya ilmiah ini dapat diselesaikan. Judul penelitian yang diambil adalah Identifikasi Cacing Parasitik dan Bakteri pada Insang dan

Saluran Pencernaan Ikan Nila Hitam (Oreochromis niloticus). Agen penyakit

merupakan salah satu hambatan yang merugikan dalam usaha pembudidayaan ikan juga kepentingannya dalam masalah zoonosis. Agen penyakit yang dapat menyebabkan infeksi diantaranya cacing parasit dan bakteri. Oleh karena itu, penelitian mengenai hal tersebut sangat menarik untuk dilakukan. Skripsi ini juga ditulis sebagai salah satu persyaratan untuk meraih gelar Sarjana Kedokteran Hewan pada Fakultas Kedokteran Hewan Institut Pertanian Bogor.

Penulis ingin mengucapkan terima kasih kepada pihak-pihak yang telah membantu penulis dalam penyelesaian skripsi ini:

1. Orang tua penulis, Abdul Aziz, MB. dan Arti Mukminah atas cinta kasih,

doa, dan dukungan yang diberikan kepada penulis selama ini, khususnya selama proses penulisan skripsi ini. Terima kasih juga penulis ucapakan kepada adik tersayang, Cattleya Septariani Aziz, atas dukungan moril dan materilnya yang senantiasa diberikan.

2. Dr. drh. Risa Tiuria, MS. dan drh. Usamah Afiff, M.Sc. selaku dosen

pembimbing skripsi, atas bimbingan, arahan, ilmu yang diberikan kepada penulis serta selalu menyediakan waktu bagi penulis selama proses penulisan skripsi ini.

3. Dr. drh. Vetnizah Juniantito dan drh. Kusdiantoro Muhammad, M.Si. selaku

dosen penguji yang telah memberikan kritik, masukan, dan ilmu untuk menyempurnakan penulisan skripsi ini.

4. Bapak Eman dan Alm. Bapak Rofiq yang telah senantiasa membantu

penelitian ini.

5. Teman-teman satu penelitian, Nurhayati Suwartiani, S.KH., Ismi

Wahyuniati, dan Rahmanitia Puhanda, S.KH., atas kebersamaannya selama berjuang dalam penelitian dan menulis skripsi.

6. Sahabat-sahabat terbaik selama ini, Kristian Edo Zulfamy, Dinie Dianita Bakri, Fahrul Irianto, dan Shanty Nathalia M, SE. atas semangat, persahabatan, tawa, canda, dan air mata yang selama ini diberikan kepada penulis.

7. Teman-teman Keluara Cemara, Inessya Feronica, S.Pt., Susi

Handayani, S.Kom., Mudita Natania, Misran, S.TP., Virza M, S.TP., Ivan Taufik, Ivan Daniel, Ryanda Rahmat, dan Anggi Maniur Hutasoit, S.Si. atas semangat yang terus-menerus diberikan kepada penulis.

8. Sahabat-sahabat Paguyuban Avenzoar 45, Awan Subangkit, Jami

Ramadhan, Rizal Dwi, Aji Agung Cahyaji, Dian Permana Putra, Ridwan, Mutia Rahim, Intan Junita, Cupu Nara Sumita, Farah Nurul Maulida, Widya Siska, Bagus Seta Chandra, Fatma Dewi, Susi Susilawati, dan Friska Vida, atas doa, semangat, dan dukungan yang diberikan kepada penulis selama proses penelitian dan penulisan skripsi ini, serta atas persahabatan, cerita, suka, dan duka selama berada di FKH 45.

9. Dara Restu Maharani, SE., dan Citra Ayu Oktavia, S.TP. atas

kebersamaannya sejak sekolah menengah atas sampai sekarang.

10. Teman-teman Avenzoar 45 atas kebersamaannya selama berada di FKH 45.

11. Setiap pihak yang turut membantu penulis dalam proses penulisan skripsi

dan selama masa perkuliahan di Fakultas Kedokteran Hewan Institut Pertanian Bogor.

Bogor, September 2012 Hafiz Furqonul Aziz

RIWAYAT HIDUP

Penulis dilahirkan di Bogor, Jawa Barat pada tanggal 25 Januari 1990 dari ayah Abdul Aziz dan ibu Arti Mukminah. Penulis merupakan putra pertama dari dua bersaudara.

Pendidikan formal penulis dimulai dari SDN Pengadilan 5 Kota Bogor dan lulus pada tahun 2002, yang kemudian dilanjutkan ke SMP Negeri 5 Kota Bogor dan lulus pada tahun 2005. Pendidikan SMA penulis diselesaikan di SMA Negeri 1 Kota Bogor dan lulus pada tahun 2008, kemudian melanjutkan ke Institut Pertanian Bogor pada tahun yang sama melalui jalur Undangan Seleksi Masuk Institut Pertanian Bogor. Mayor yang dipilih penulis adalah kedokteran hewan di Fakultas Kedokteran Hewan Institut Pertanian Bogor

Selama menjadi mahasiswa, penulis aktif di Unit Kegiatan Mahasiswa Karate IPB dan Himpunan Minat dan Profesi Ruminansia FKH IPB.

DAFTAR ISI

Halaman

DAFTAR TABEL ………...………... xiii

DAFTAR GAMBAR ... xiv

DAFTAR LAMPIRAN... xv PENDAHULUAN ………... 1 Latar Belakang ………...………... 1 Tujuan ………...…………... 3 Manfaat ………... 3 TINJAUAN PUSTAKA ………... 4

Ikan Nila Hitam ... 4

Trematoda ... 6 Monogenea ... 7 Dactylogyrus sp. ... 10 Gyrodactylus sp. ... 10 Nematoda ... 11 Cestoda ... 14 Bakteri ... 15 Streptococcus agalactiae ... 16 Aeromonas hydrophila ... 17 Edwardsiella tarda ... 18

BAHAN DAN METODE ………...……... 19

Waktu dan Tempat Penelitian ………... 19

Metode Penelitian ... 19

Teknik Pengambilan Sampel ... 19

Teknik Parasitologi ... 20

Teknik Bakteriologi ………... 22

HASIL DAN PEMBAHASAN ………...…... 28

Identifikasi Cacing Parasitik pada Ikan Nila Hitam ... 29

Cacing Monogenea ... 32

Identifikasi Bakteri pada Ikan Nila Hitam ... 34

Aeromonas sp. ... 34 Bacillus sp. ... 36 Escherichia coli ... 37 Edwardsiella tarda ... 38 Enterobacter aerogenes ... 40 Klebsiella pneumoniae ... 41 Pasteurella sp. ... 43 Staphylococcus aureus ... 44 Staphylococcus epidermidis ... 45 Streptococcus sp. ... 46 Vibrio parahaemolyticus ... 47

SIMPULAN DAN SARAN ………...……... 49

Simpulan ... 49

Saran ... 49

DAFTAR PUSTAKA ... 50

DAFTAR TABEL

Halaman

1 Hasil Identifikasi Cacing Parasitik dan Bakteri pada Ikan Nila Hitam

... 28

2 Hasil Uji Biokimiawi Bakteri pada Ikan Nila

DAFTAR GAMBAR

Halaman

1 Ikan Nila Hitam (Oreochromis Niloticus) ... 4

2 Struktur Umum Cacing Monogenea ... 8

3 Siklus Hidup Cacing Monogenea ... 9

4 Cacing Gyrodactylus sp. (1) Cacing Dactylogyrus sp. (2) ... 10

5 Struktur Umum Cacing Nematoda ... 11

6 Siklus Hidup Tidak Langsung Cacing Nematoda dengan Ikan sebagai Inang Definitif ... 13

7 Siklus Hidup Langsung Cacing Nematoda pada Ikan ... 13

8 Siklus Hidup Tidak Langsung Nematoda dengan Ikan sebagai Inang Antara ... 13

9 Bentuk Umum Cacing Cestoda ... 15

10 Jenis-Jenis Metacestoda ... 15

11 Streptococcus agalactiae ... 16

12 Aeromonas hydrophila ... 17

13 Edwardsiella tarda ... 18

14 Diagram Alir Identifikasi Bakteri ... 22

15 Dactylogyrus sp. ... 29

16 Dactylogyrus sp. ... 30

17 Bagian Anterior Dactylogyrus sp. ... 30

18 Gyrodactylidae dan Dactylogiridae ... 31

19 Pseudodactylogyrus sp. ... 31

20 Dactylogiridae ... 32

22 Infestasi Dactylogyridae pada Insang Ikan Patin ... 33

23 Pembusukan pada Sirip ... 35

24 Aeromonas sp. ... 36

25 Bacillus sp. ... 37

26 Escherichia coli ... 38

27 Infeksi Edwardsiella tarda. Hemoragi pada Kulit dan Fistula di bawah Sirip Dada ... 39

28 Edwarsiella tarda ... 40

29 Enterobacter aerogenes ... 41

30 Klebsiella pneumoniae ... 43

31 Pasteurella sp. ... 44

32 Staphylococcus sp. ... 45

33 Streptococcosis pada Ikan Nila dengan Gejala Tetany-Like Akibat Kontraksi Otot ... 47

34 Streptococcosis pada Ikan Atlantic Menhaden dengan Hemoragi Operkulum ... 47

35 Streptococcus sp. ... 47

PENDAHULUAN

Latar Belakang

Indonesia merupakan negara kepulauan yang terdiri dari sepertiga daratan dan dua pertiga lautan. Hal ini yang menjadikan Indonesia kaya akan keanekaragaman hayati, khususnya ikan. Ikan yang menjadi komoditi utama produksi tidak hanya ikan laut, tetapi juga ikan air tawar. Ikan air tawar yang menjadi komoditas unggulan diantaranya adalah ikan gurami, ikan nila, dan ikan mas.

Ikan nila adalah ikan yang hidup di air tawar dan berasal dari Sungai Nil dan danau-danau sekitarnya. Ikan nila mulai didatangkan ke Bogor pada tahun 1969. Ikan nila merupakan ikan konsumsi air tawar yang diminati oleh konsumen selain ikan mas dan gurami, karena ikan nila memiliki rasa daging yang enak, gurih, dan tidak memiliki banyak duri. Tingginya konsumsi ikan nila menyebabkan budidaya ikan nila mulai dikembangkan. Keunggulan dari ikan nila dibandingkan ikan konsumsi lain adalah ikan nila mampu tumbuh cepat hanya dengan pakan yang rendah protein, memijah sepanjang tahun, bersifat omnivora, berdaging tebal, dan rasa dagingnya mirip dengan kakap merah (Suyanto 2009).

Habitat ikan nila adalah air tawar, seperti sungai, danau, waduk dan rawa-rawa, tetapi karena toleransinya yang luas terhadap salinitas (euryhaline) sehingga dapat pula hidup dengan baik di air payau dan laut (K Kordi 2010). Kemampuan hidup dalam berbagai jenis air membuat ikan nila semakin mudah untuk dibudidayakan. Pembudidayaan ikan nila hampir dilaksanakan di seluruh provinsi di Indonesia sehingga produksi ikan nila di Indonesia cukup tinggi. Produksi ikan nila pada tahun 2010 mencapai 464.191 ton, meningkat dibandingkan pada tahun 2009 (KKP 2011).

Proses produksi dan budidaya ikan nila memiliki beberapa kendala diantaranya, kurangnya kesediaan benih unggul dengan pertumbuhan cepat yang

menguntungkan usaha budidaya nila (Gustiano et al. 2008), tingkat pertumbuhan

yang menurun ketika mencapai matang gonad (Maulana 2011), pemijahan yang tidak terkontrol serta serangan hama dan penyakit.

Agen penyakit yang menyebabkan infeksi diantaranya, virus, bakteri, cendawan, dan parasit. Penyakit parasitik dan bakteri merupakan salah satu penyakit yang dapat menginfeksi hewan, termasuk ikan nila. Parasit adalah organisme yang hidupnya dapat menyesuaikan diri dengan inangnya namun merugikan bagi organisme yang ditempatinya (Noble ER dan Noble GA 1989). Parasit yang dikenal terdapat dua jenis, yaitu endoparasit dan ektoparasit. Endoparasit adalah parasit yang menyerang pada bagian dalam tubuh inangnya

(Kismiyati et al. 2010), sedangkan ektoparasit adalah parasit yang hidupnya

menumpang di bagian luar dari tempatnya bergantung atau pada permukaan tubuh inangnya (Hadi 2010). Cacing dan protozoa termasuk ke dalam anggota dari endoparasit, karena sebagian siklus hidupnya berada di dalam tubuh inang. Insekta, arachnida, chilpoda, dan diplopoda termasuk ke dalam anggota dari ektoparasit.

Cacing yang bersifat parasit terbagi ke dalam beberapa klasifikasi. Tiga kelas besar dalam klasifikasi cacing adalah nematoda, trematoda, dan cestoda. Cacing dalam kenyataannya tidak selalu bersifat endoparasit, sub kelas monogenea yang berada dalam kelas trematoda bersifat ektoparasit pada ikan. Monogenea merupakan parasit yang sebagian besar menyerang bagian luar tubuh ikan, jarang menyerang bagian dalam tubuh ikan dan biasanya menyerang kulit dan insang (Kabata 1985).

Kerugian yang ditimbulkan akibat infestasi dari cacing pada ikan tidak sebesar apabila ikan terinfeksi oleh virus atau bakteri, tetapi infestasi cacing dapat menjadi faktor predisposisi terjadinya infeksi oleh agen infeksius lainnya. Bakteri merupakan salah satu agen infeksius dengan jumlah spesies terbanyak. Bakteri dapat bersifat patogen dan non patogen, tetapi dalam kasus yang terjadi bakteri non patogen dapat berubah menjadi patogen akibat dari beberapa faktor. Kerugian yang ditimbulkan oleh penyakit infeksi bakteri cukup besar, terlebih jika bakteri tersebut memiliki virulensi yang cukup tinggi.

Tahun 1980 pernah tercatat di Indonesia terjadi kematian sebanyak 125.000 ekor ikan mas dan di daerah budidaya di Jawa Barat terjadi kematian sebanyak 30% dari induk ikan mas yang keduanya diakibatkan oleh bakteri,

kesehatan, karena secara langsung ikan mengalami penurunan kualitas dan bahkan kematian yang menyebabkan penurunan produksi. Bakteri penyebab penyakit yang bersifat zoonotik dapat ditularkan kepada manusia dan menyebabkan gangguan kesehatan.

Tujuan Penelitian

Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui adanya serta mengidentifikasi jenis cacing parasitik dan bakteri yang terdapat pada insang dan saluran

pencernaan ikan nila hitam (Oreochromis niloticus)

Manfaat Penelitian

Hasil penelitian ini diharapkan dapat memberikan informasi terkait adanya cacing parasitik dan bakteri pada insang dan saluran pencernaan ikan nila. Selain itu, penelitian ini diharapkan dapat memberikan gambaran tentang infeksi sekunder oleh bakteri akibat infestasi cacing parasitik, atau pun sebaliknya. Penelitian ini juga diharapkan sebagai acuan program pencegahan dan pengendalian kasus penyakit yang disebabkan oleh cacing parasitik maupun bakteri, baik yang bersifat zoonotik maupun tidak.

TINJAUAN PUSTAKA

Ikan Nila Hitam (Oreochromis niloticus)

Ikan nila merupakan salah satu ikan yang sudah banyak dibudidayakan. Di Indonesia, ikan nila cukup populer karena cara budidayanya yang mudah, rasa daging yang disukai, harga yang relatif terjangkau, dan memiliki toleransi yang luas terhadap lingkungan. Ikan nila yang biasa dikonsumsi oleh masyarakat Indonesia adalah ikan nila hitam dan ikan nila merah.

Menurut Fishbase (2012), ikan nila hitam digolongkan dalam kingdom Animalia, filum Chordata, kelas Actinopterygii, dan ordo Perciformes. Ikan nila hitam termasuk ke dalam famili Cichlidae, sub famili Pseudocrenilabrinae, genus

Oreochromis, dan spesiesnya adalah Oreochromis niloticus.

Gambar 1 Ikan Nila Hitam (Oreochromis Niloticus)

Sumber: Fishbase (2012)

Ikan nila hitam awalnya memiliki nama latin Tilapia niloticus, berasal dari

genus Tilapia yang memiliki perilaku khas yaitu tidak mengerami telur dan larva

berada di dalam mulut induknya. Genus Tilapia dipecah menjadi tiga genus, yakni

genus Tilapia, Sarotherodon, dan Oreochromis. Ikan dalam genus Tilapia

memijah dan menaruh telur pada suatu tempat. Induk jantan dan betina secara

bersama-sama menjaga telur dan anak-anaknya. Ikan dalam genus Sarotherodon

memiliki ciri khas induk jantan mengerami telur dan mengasuh anaknya,

rongga mulut dan mengasuh sendiri anak-anaknya (Trewavas 1982 dalam Suyanto 2010).

Ikan nila hitam berasal dari Sungal Nil dan danau-danau sekitarnya. Sekarang ikan ini telah tersebar ke negara-negara di lima benua yang beriklim tropis dan subtropis, sedangkan di wilayah yang beriklim dingin, ikan nila hitam tidak dapat hidup baik (Menegristek 2000). Ikan nila pertama kali dibawa dari Taiwan ke Bogor pada tahun 1969. Nila berwarna hitam selanjutnya banyak didatangkan dari Thailand pada tahun 1989 dengan strain Chitralada, dari Filipina pada tahun 1994 dan 1997 dengan strain Genetic Improvement of Farmed Tilapia (GIFT), sedangkan untuk nila berwarna merah didatangkan dari Thailand pada tahun 1989 dengan strain National Inland Fish Institute (NIFI) (Gustiano & Arifin 2010).

Ikan nila hitam masih bersaudara dengan ikan mujair

(Oreochromis massambiccus) yang sudah tersebar luas di Indonesia sebelum adanya ikan nila hitam. Ikan mujair kurang digemari baik oleh pembudidaya maupun petani karena pertumbuhannya yang lambat, rakus tetapi tidak gemuk, cepat beranak pinak sehingga mengganggu ikan lain dalam satu kolam (Suyanto 2010). Ikan nila hitam selanjutnya didatangkan untuk mengatasi hal ini karena mempunyai nilai efisiensi yang lebih tinggi.

Amri dan Kahiruman (2003) menjelaskan bentuk tubuh ikan nila hitam, berbentuk panjang dan ramping dengan sisik yang berukuran besar. Matanya

besar, menonjol, dan bagian tepinya berwarna putih. Gurat sisi atau linea literalis

terputus di bagian tengah badan dan berlanjut kembali tetapi letaknya lebih ke bawah daripada letak garis yang memanjang di atas sirip dada. Sirip punggung, sirip perut, dan sirip dubur mempunyai jari lemah tetapi keras dan tajam seperti duri. Sirip punggung berwarna hitam dan sirip dada juga tampak berwarna hitam, sedangkan bagian pinggir sirip punggung berwarna abu abu (Gambar 1).

Perbedaan antara ikan nila hitam dengan ikan mujair terletak pada pola garis vertikal berwarna gelap yang terlihat sangat jelas di sirip ekor dan sirip punggung. Jumlah garis pada ikan nila hitam berjumlah enam buah di sirip ekor dan delapan buah di sirip punggung. Garis dengan pola yang sama juga terdapat di kedua sisi tubuh ikan nila dengan jumlah delapan buah (Suyanto 2010). Perbedaan lain juga

terdapat pada perbandingan ukuran tubuh, ikan nila hitam memiliki perbandingan panjang dan tinggi 3:1, sedangkan ikan mujair 2:1 (Amri & Kahiruman 2003).

Habitat ikan nila adalah air tawar, seperti sungai, danau, waduk dan rawa-rawa, tetapi karena toleransinya yang luas terhadap salinitas (euryhaline) sehingga dapat pula hidup dengan baik di air payau dan laut. Salinitas yang cocok untuk nila adalah 0-35 ppt, namun salinitas yang memungkinkan nila tumbuh optimal adalah 0-30 ppt. Ikan nila masih dapat hidup pada salinitas 31–35 ppt, tetapi pertumbuhannya lambat (Ghufran & Kordi 2010).

Trematoda

Trematoda atau cacing pipih merupakan kelas dari filum Platyhelminthes. Cacing trematoda umumnya memiliki bentuk pipih seperti daun dan disebut

cacing daun, kecuali Schistosoma sp yang merupakan trematoda darah

(Natadisastra & Agoes 2009). Trematoda secara umum berbentuk pipih, tidak bersegmen, bentuk memanjang seperti daun, berbentuk telur, kerucut, silindris, dan mempunyai batil isap kepala dan perut. Trematoda bersifat hermafrodit kecuali pada genus Schistosoma (Muslim 2009). Kelas trematoda terbagi menjadi dua sub kelas utama, yaitu Monogenea dan Digenea. Sub kelas Monogenea memiliki siklus hidup langsung dan tidak membutuhkan inang perantara, sedangkan sub kelas Digenea membutuhkan inang antara dalam siklus hidupnya (Urquhart et al. 1996).

Menurut Natadisastra dan Agoes (2009), tubuh cacing trematoda diliputi integumen mesenkimatus, aseluler halus, dan sering kali ditumbuhi oleh semacam sisik atau duri yang tampak jelas pada bagian anterior tubuh. Dua batil hisap atau

sucker ditemukan pada cacing trematoda. Batil hisap anterior atau oral sucker

berfungsi sebagai kanal untuk makanan dan batil hisap posterior atau ventral sucker berfungsi sebagai alat untuk melekatkan diri pada tubuh inang (Muller 2001). Bagian dalam tubuh trematoda terdapat otot dengan tiga arah serabut, yaitu longitudinal, oblik, dan sirkuler. Otot ini berguna untuk mengubah bentuk badan cacing agar dapat bergerak. Cacing trematoda tidak memiliki rongga badan dan juga sistem sirkulasi (Natadisastra & Agoes 2009).

Sistem pencernaan trematoda sangat sederhana, dimulai dari mulut yang kemudian mengarah ke faring, esofagus, dan bercabang menjadi dua bagian sekum yang berakhir buntu. Makanan yang tidak dicerna diregurgitasi kembali ke

mulut (Urquhart et al. 1996). Cacing trematoda bersifat hermafrodit, kecuali pada

genus Schistosoma. Alat kelamin jantan dimulai dari testis yang biasanya berjumlah dua dan letaknya berurutan tergantung spesies, berbentuk oval dengan permukaan rata, berlobus atau bercabang. Ovarium berbentuk bulat atau oval dengan permukaan rata, berlobus, atau bercabang. Umumnya ovarium terletak di

anterior dari testis. Kedua alat kelamin bermuara pada antrum genitale dan keluar

melalui lubang porus genitalis yang berdekatan dengan batil hisap posterior (Natadisastra & Agoes 2009).

Monogenea

Monogenea adalah sub kelas dari Trematoda. Cacing Monogenea adalah cacing yang tidak membutuhkan inang antara dalam siklus hidupnya dan umumnya ditemukan sebagai parasit di ikan (Urquhart 1996). Kabata (1985) menjelaskan bahwa cacing Monogenea adalah salah satu parasit yang sebagian besar menyerang bagian luar tubuh ikan, terutama kulit dan insang, jarang menyerang bagian dalam tubuh ikan.

Cacing Monogenea memiliki ukuran yang kecil (mikroskopik) sampai yang berukuran sedang. Bentuk tubuh larva cacing dengan cacing dewasa tidak terlalu berbeda jauh. Organ utama untuk menempel pada tubuh inang dan juga sebagai identitas dari Monogenea adalah haptor (Gambar 2). Organ ini terletak pada bagian posterior dan dilengkapi dengan kait kecil yang berjumlah 12 sampai 16 buah dan kadang terdapat kait yang lebih besar dengan jumlah 2 sampai 4 buah (Hoffman 1967). Cacing Monogenea menempel dan melekat pada tubuh inang dengan mencari lapisan mukosa dan mengelupasnya, kemudian bagian posterior ditancapkan ke jaringan. Bagian anterior atau bagian dimana terdapat mulut diletakan dan didekatan kepada jaringan dari inang, terkadang cacing Monogenea

melingkarkan badannya di sekeliling insang (Dawes 1946). Oral sucker pada

cacing Monogena tergolong lemah atau terkadang tidak ada sama sekali (Puranik & Bhate 2007).

Gambar 2 Struktur Umum Cacing Monogenea

Sumber: Smith & Halton (1967)

Bagian tubuh cacing monogenea terbagi atas bagian anterior dan posterior. Pada tiap bagian terdapat alat pelekat. Prohaptor adalah bagian pelekat pada anterior yang berfungsi melekatkan bagian anterior ke jaringan saat sedang makan. Prohaptor dapat menjadi alat pelekat sementara ketika bagian haptor posterior mencari jaringan baru untuk menempel. Haptor bagian anterior dan posterior dapat bekerja sama sebagai alat gerak dimana cacing akan membentuk

loop dan bergerak seperti seekor ulat, tetapi cacing monogenea jarang berpindah saat sudah menetap. Opisthaptor adalah bagian pelekat pada posterior cacing monogenea yang berbentuk seperti cakram. Opisthaptor biasanya dilengkapi dengan kait besar dan kecil yang berfungsi seperti jangkar pada kapal dan alat untuk melukai jaringan inang (Dawes 1946).

Dawes (1946) juga menjelaskan bahwa tidak semua cacing monogenea

memiliki buccal sucker. Sebagian cacing monogenea yang tidak memiliki buccal

sucker, mereka menggunakan faring sebagai sucker. Saluran digesti cacing monogenea terdiri dari tiga bagian, yaitu faring, esofagus, dan usus. Faring dan esofagus berbentuk dan berukuran sama yang selanjutnya bercabang dua menjadi usus yang sederhana dan berakhir buntu (Gambar 2).

Siklus hidup dari monogenea adalah siklus langsung yang tidak membutuhkan inang antara. Cacing dewasa bertipe ovipar mengeluarkan telur ke air kemudian telur menetas dan mencari inang baru. Cacing dewasa bertipe vivipar bertelur dan telur tetap berada di dalam tubuh cacing dewasa hingga menetas. Larva selanjutnya keluar dari tubuh cacing dewasa dan terbawa air untuk

mencari inang yang baru (Gambar 3) (Reed et al. 2012). Cacing monogenea tidak

dapat hidup sebagai parasit pada lebih dari satu spesies ikan, oleh karena itu cacing monogenea memiliki spesifisitas inang yang sangat tinggi (Williams 1961).

Gambar 3 Siklus Hidup Cacing Monogenea

Sumber: Reed et al. (2012)

Spesies dari kelas monogenea yang paling sering muncul pada ikan air tawar adalah Dactylogyrus sp. dan Gyrodactylus sp.

Dactylogyrus sp.

Dactylogyrus merupakan genus dari famili Dactylogyridae dengan sub famili Dactylogyrinae. Cacing dalam genus ini memiliki ciri khas, yaitu memiliki empat titik mata, sepasang kait besar, dan 16 kait kecil, usus bercabang menjadi dua, testes dan ovarium berbentuk bulat, ovari terletak diatas testes, terdapat

vagina, dan bersifat ovovipar (Hoffman 1967). Dactylogyrus hidup sebagai parasit

dengan menghisap darah dan dapat menyebabkan kerusakan pada insang jika

jumlahnya terlalu banyak. Gejala klinis dari manifestasi Dactylogyrus sering

keliru dengan gejala defisiensi oksigen atau infeksi insang lainnya (Robert & Piper 2010).

Gyrodactylus sp.

Gyrodactylus merupakan genus dari famili Gyrodactyridae dengan sub

famili Gyrodactyrinae. Cacing genus Gyrodactylus tidak memiliki prohaptor,

opisthaptor berbentuk lebar dan dilengkapi dengan satu pasang kait besar dan 16 kait kecil, usus bercabang dua, lubang genital berada di tengah, tidak terdapat vagina, tidak terdapat titik mata, ovarium berbentuk V atau berlobus dan terletak di belakang testes, serta bersifat vivipara (Dawes 1946). Parasit ini sangat umum

dan sering ditemukan pada hampir semua ikan. Jumlah Gyrodactylus yang terlalu

banyak dapat menyebabkan iritasi dan lesio (Robert & Piper 2010).

Gambar 4 Cacing Gyrodactylus sp. (1) Cacing Dactylogyrus sp. (2)

Nematoda

Filum Nemathelminthes terbagi ke dalam enam kelas, tetapi hanya kelas nematoda yang bersifat sebagai parasit. Nematoda disebut sebagai cacing gilig atau round worm karena bentuknya yang bulat jika dipotong secara melintang. Nematoda berbentuk bulat panjang, tidak bersegmen, meruncing di kedua ujungnya, dan tubuhnya dilapisi oleh kutikula. Kutikula diproduksi oleh bagian hipodermis yang pada bagian tersebut tedapat saluran ekskresi dan saraf (Urquhart 1996). Gambar 5 menjelaskan bahwa cacing nematoda memiliki kepala, ekor, dinding dan rongga badan yang disebut pseudoselom, saluran pencernaan, sistem saraf, sistem ekskresi, dan sistem reproduksi terpisah, tetapi tidak memiliki sistem sirkulasi (Natadisastra & Agoes 2009). Muslim (2009) menjelaskan ukuran cacing jantan lebih kecil dari cacing betina dan ujung posterior melengkung ke depan. Spikulum serta bursa kopulasi dimiliki oleh beberapa spesies dari cacing nematoda.

Gambar 5 Struktur Umum Cacing Nematoda

Sumber: Sharonapbio-taxonomy (2012)

Sistem digesti dari cacing nematoda berbentuk tubular. Mulut, umumnya dikelilingi oleh tiga bibir, langsung terhubung oleh esofagus. Beberapa genus

seperti Strongyloides, esofagus berukuran besar dan terbuka menjadi kapsul bukal

bergigi. Saat sedang makan, cacing akan menembus mukosa menggunakan kapsul bukal untuk menghisap darah. Esofagus menyalurkan makanan ke usus dan memiliki bentuk yang bervariasi dan berguna untuk identifikasi karakter setiap

spesies. Usus berbentuk tabung yang dindingnya dilapisi oleh lapisan tipis

syncytium. Lumen ususnya memiliki mikro villi yang meningkatkan kapasitas absorpsi dari sel (Urquhart 1996).

Urquhart (1996) juga menjelaskan bahwa organ reproduksi betina berjumlah sepasang dan terdiri dari ovarium, oviduct, uterus, vagina,dan berakhir pada vulva. Ovejector adalah penghubung antara uterus dan vagina yang berupa otot-otot yang berfungsi dalam penetasan telur. Organ reproduksi jantan terdiri dari satu buah testis berlanjut menjadi vas deferens dan berakhir pada saluran ejakulatori di kloaka. Organ tambahan berupa spikulum yang berfungsi sebagai alat kopulasi dan gubernakulum yang berfungsi mengarahkan spikulum terdapat pada beberapa spesies cacing nematoda.

Siklus hidup nematoda terdiri dari tiga stadium, yaitu stadium telur, larva, dan dewasa. Cacing betina dewasa dapat bertelur antara 20-200.000 butir telur per hari (Natadisastra & Agoes 2009). Dalam perkembangan hidupnya, beberapa spesies nematoda menggunakan ikan sebagai inang definitif maupun sebagai inang antara dari siklus hidup nematoda. Siklus hidup nematoda dibagi menjadi dua, yaitu siklus hidup langsung dan siklus hidup tidak langsung. Siklus hidup langsung tidak membutuhkan inang antara dan infeksi dapat terjadi ketika ikan menelan telur atau larva cacing (Yanong 2012).

Yanong (2012) juga menjelaskan bahwa siklus hidup tidak langsung terbagi menjadi dua, yaitu siklus hidup saat ikan menjadi inang definitif dan siklus hidup saat ikan menjadi inang antara. Ikan sebagai inang definitif yang terinfeksi cacing nematoda mengeluarkan feses bersama telur yang kemudian tertelan oleh cepopoda atau hewan invertebrata lainnya. Telur berkembang dan menjadi larva yang siap menginfeksi ikan dewasa lainnya ketika cepopoda dimakan oleh ikan. Larva akan berkembang menjadi cacing dewasa dan siklus akan terulang. Nematoda yang memiliki inang definitif mamalia atau burung pemakan ikan menggunakan ikan sebagai inang antara (Gambar 6).

Gambar 6 Siklus Hidup Tidak Langsung Cacing Nematoda dengan Ikan sebagai Inang Definitif

Sumber: Yanong (2012)

Gambar 7 Siklus Hidup Langsung Cacing Nematoda pada Ikan

Sumber: Yanong (2012)

Gambar 8 Siklus Hidup Tidak Langsung Nematoda dengan Ikan sebagai Inang Antara

Cestoda

Cestoda adalah kelas dari filum Platyhelminthes. Perbedaan antara cacing kelas Cestoda dengan Trematoda adalah cacing Cestoda memiliki bentuk tubuh yang pipih dan memanjang seperti pita tanpa saluran pencernaan. Bagian tubuhnya bersegmen dan setiap segmen memiliki satu atau lebih sepasang organ

reproduksi (Urquhart et al. 1996). Cacing Cestoda dapat digolongkan berdasarkan

tempat hidupnya menjadi dua golongan, yaitu Cestoda usus dan Cestoda jaringan.

Seluruh Cestoda mempunya inang antara kecuali spesies Hymenolepis nana

(Muslim 2009).

Gambar 9 menunjukkan Cestoda dewasa memiliki kepala atau scolex

sebagai organ pelekat, leher yang tidak bersegmen, dan untaian segmen yang

membentuk pita. Setiap segmen disebut proglotid dan rantai penghubung

proglotid disebut strobila. Organ pelekat terdiri dari empat sucker di bagian tepi dan biasanya terdapat kait. Setiap proglotid bersifat hermafrodit dan ketika

proglotid menjadi dewasa dan terbuahi bagian internal hilang dan diisi oleh telur-telur Castoda atau gravid. Proglotid garvid akan terlepas dan keluar bersama feses (Urquhart et al. 1996).

Siklus hidup Castoda bersifat tidak langsung dengan satu inang antara. Cestoda dewasa berada pada usus halus inang definitif dan menghasilkan telur yang dikeluarkan bersama feses. Telur termakan oleh inang antara dan

embryophore berubah menjadi oncosphere ketika berkontak dengan enzim-enzim

pencernaan. Kait pada oncosphere melukai mukosa usus dan masuk ke dalam

pembuluh darah atau pembuluh limfe menuju tempat yang sesuai untuk berkembang menjadi stadium larva atau metacestoda. Bentuk metacestoda berbeda-beda tergantung spesies Cestoda tersebut. Jenis-jenis metacestoda diantaranya Cysticercus, Coenurus, Strobilocercus, Hydatid, Cysticercoid, dan

Tetrahyridium (Gambar 10). Ketika metacestoda termakan oleh inang definitif,

scolex-nya akan menempel pada mukosa usus dan untaian proglotid akan mulai tumbuh dari basis scolex (Urquhart et al. 1996).

Gambar 9 Bentuk Umum Cacing Cestoda

Sumber: Urquhart et al. (1996)

Gambar 10 Jenis-Jenis Metacestoda

Sumber: Urquhart et al. (1996)

Bakteri

Bakteri adalah organisme bersel tunggal yang hidup bebas dan mampu bereproduksi sendiri, tetapi sebagian besar menggunakan hewan sebagai pejamu untuk mendapatkan makanan. Bakteri tergolong ke dalam prokariot yang tidak

memiliki membran inti. Bakteri terdiri atas sitoplasma yang dikelilingi oleh dinding sel terbuat dari peptidoglikan. Materi genetik, baik DNA maupun RNA, terdapat dalam inti yang diperlukan untuk metabolisme. Bakteri bereproduksi dengan cara aseksual melalui replikasi DNA dan pembelahan sel sederhana. Sebagian besar bakteri membentuk kapsul yang mengelilingi dinding sel sehingga bakteri lebih tahan terhadap kondisi luar (Corwin 2008). Bakteri secara umum terbagi atas bakteri Gram positif dan bakteri Gram negatif.

Bakteri yang sering menginfeksi ikan diantaranya Streptococcus agalactiae,

Aeromonas hydrophila, dan Edwardsiella tarda.

Streptococcus agalctiae

Bakteri Streptococcus agalactiae adalah bakteri Gram positif yang

berbentuk kokus, berantai pendek, serta secara morfologi mirip dengan

S. pyogenes (Parija 2009). Bakteri ini termasuk ke dalam anggota antigen grup B

dan memiliki antigen kapsular polisakarida. Kapsul dari S. agalactiae terdiri dari

asam sialik yang menyebabkan streptokokus golongan B tahan terhadap opsonofagositosis oleh mekanisme pertahanan tubuh (Shimeld & Rodgers 1998).

S. agalactiae termasuk ke dalam kingdom Bacteria, filum Firmicutes, kelas

Bacilli, famili Streptococcaceae, genus Streptococcus, dan spesies

Streptococcus agalactiae.

Gambar 11 Streptococcus agalactiae

Sumber: Vetbact (2011)

Shimeld dan Rodgers (1998) menjelaskan bahwa S. agalactiae memiliki

bentuk koloni yang lebih besar dibanding S. pyogenes dan juga memproduksi

lebih sedikit β-hemolisis. S. agalactiae memproduksi ekstraselular protein yang disebut CAMP. Protein tersebut berkerja secara sinergis bersama β-lisin dan

menyebabkan hemolisis. CAMP adalah kependekan dari Christie, Atkins, dan Munch-Petersen, penemu protein tersebut (Shimeld & Rodgers 1998).

Aeromonas hydrophila

Aeromonas hydrophila adalah bakteri anaerob fakultatif yang termasuk ke

dalam kelompok bakteri Gram negatif. Menurut Corry et al. (1995) Aeromonas

hydrophila memiliki flagel pada ujung tubuhnya sehingga bakteri ini bersifat

motil. A. hydrophila memiliki kapsul dan mampu memfermentasi glukosa baik

secara jalur respirasi maupun secara fermentasi. A. hydrophila hidup bebas di air

dan dapat diisolasi dari air asin dan air tawar (Shimeld & Rodgers 1999).

A. hydrophila digolongkan ke dalam kingdom Bacteria, filum Proteobacteria.

kelas Gammaproteobacteria, dan ordo Aeromonadales. A. hydrophila termasuk

ke dalam famili Aeromonadaceae, genus Aeromonas, dan spesies Aeromonas

hydrophila.

Gambar 12 Aeromonas hydrophila

Sumber: Wikipedia (2012)

A. hydrophila menjadi bakteri penyebab ulcer disease atau red sore disease

pada ikan. Gejala pada ikan yang terinfeksi adalah timbulnya edema (dropsy), yaitu gejala yang ditandai dengan perut ikan tampak mengembung sebagai akibat

adanya pelepasan aerolysin cytotoxic enterotoxyn (ACE-gene) yang dapat

menyebabkan terjadinya kerusakan jaringan (Austin B dan Austin DA 2007).

Aeromonas menyebabkan gastroenteritis yang parah pada manusia dan hewan jika tertelan dan jika kontak dengan kulit menyebabkan infeksi di luka yang terbuka (Burlage 2012)

Edwardsiella tarda

Edwardsiella tarda merupakan bakteri golongan Gram negatif dan bersifat motil karena memiliki flagela (Austin B dan Austin DA 2007). Kapsul tidak

ditemukan pada anggota Edwardsiella, tetapi beberap strain memproduksi

substansi berupa lendir. E. tarda diklasifikasikan ke dalam kingdom Bacteria, filum Proteobacteria, kelas Gammaproteobacteria, ordo Enterobacteriales, famili Enterobacteriaceae, genus Edwardsiella, dan spesies Edwardsiella tarda.

Gambar 13 Edwardsiella tarda

Sumber: Kushawa et al. (2010)

Koloni Edwardsiella tumbuh lebih lambat dan berukuran lebih kecil

dibanding anggota yang lain di dalam famili Enterobacteriaceae

(Sakazaki et al. 2005). Austin B dan Austin DA (1999) juga menjelaskan gejala

yang ditunjukkan pada infeksi Edwardsiella adalah lesi kecil pada kulit berukuran

sekitar 3-5 mm dan terletak di postero-lateral tubuh ikan. Seiring berkembangnya

BAHAN DAN METODE PENELITIAN

Waktu dan Tempat Penelitian

Penelitian ini dilaksanakan pada bulan Juli 2011 hingga bulan Maret 2012 bertempat di Laboratorium Helmintologi Bagian Parasitologi dan Entomologi Kesehatan dan Laboratorium Bakteriologi Bagian Mikrobiologi Medis, Departemen Ilmu Penyakit Hewan dan Kesehatan Masyarakat Veteriner, Fakultas Kedokteran Hewan, Institut Pertanian Bogor.

Bahan dan Alat Penelitian

Bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah sampel ikan nila hitam, NaCl fisiologis, alkohol bertingkat (70%, 85%, 95%, 100%), alkohol absolut,

alkohol 70%, kalium hidroksida 10%, minyak cengkeh, pewarna Semichon’s

Acetocarmine, entelan, xylol, aquades, agar darah (Blood Agar), agar Mac Conkey

Agar (MCA), Nutrient Agar, pewarna Gram, agar miring, glukosa, sukrosa,

maltosa, laktosa, manitol, indol, TSIA, sitrat, KOH 10% dan KOH 4%.

Alat yang digunakan pada penelitian ini adalah seperangkat alat bedah, timbangan, cawan petri, pinset, kait, pipet tetes, gunting, botol kaca, spidol, label nama, gelas objek dan kaca penutup, mikroskop cahaya, mikroskop stereo, video mikroskop, bunsen, ose, needle, tabung reaksi dan rak tabung reaksi.

Metode Penelitian

Teknik Pengambilan Sampel

Sampel ikan diambil dari kolam petani ikan nila hitam di daerah Parung Kabupaten Bogor sebanyak 10 ekor dengan berat rata-rata 300 gram. Ikan nila

hitam yang masih hidup dimatikan dengan cara menusuk bagian medial kepala

tepat di otak. Insang ikan dikeluarkan kemudian diletakkan ke dalam cawan petri yang telah diisi dengan NaCl fisiologis. Rongga perut ikan dibuka kemudian saluran pencernaan (usus dan lambung) dikeluarkan diletakkan ke dalam cawan petri yang telah diisi NaCl fisiologis.

Teknik Parasitologi

Insang dan saluran pencernaan yang sudah dipreparir selanjutnya disimpan

dalam refrigerator selama 10 jam untuk merelaksaskikan cacing yang ada.

Kemudian insang disisir di bawah mikroskop stereo untuk mengoleksi cacing. Saluran pencernaan dibuka lumennya kemudian diamati di bawah mikroskop stereo untuk mengoleksi cacingnya. Cacing yang ditemukan kemudian difiksasi di dalam alkohol 70% sebelum diwarnai.

Pewarnaan Cacing

Pada penelitian ini digunakan dua jenis teknik pewarnaan, yaitu pewarnaan permanen untuk trematoda dan pewarnaan semi permanen untuk nematoda.

Pewarnaan permanen atau dikenal juga dengan pewarnaan

Semichon’s-Acetocarmine biasa digunakan untuk mengindentifikasi cacing pipih (golongan trematoda). Tahap pertama dalam pewarnaan ini adalah dengan

merendam spesimen dalam larutan Semichon’s-Acetocarmine selama 15-20 menit

(sampai warna terserap dan spesimen berubah warna menjadi merah cerah). Setelah itu spesimen dibilas dengan menggunakan alkohol 70% kemudian direndam di dalam larutan asam alkohol (99 bagian alkohol 70%, dicampur dengan 1 bagian HCl). Kemudian dilakukan dehidrasi pada spesimen dengan menggunakan alkohol bertingkat (70%, 85%, 95%, 100%) dengan cara merendamnya selama 5 menit pada setiap konsentrasi alkohol. Setelah itu

spesimen direndam di dalam xylol sampai spesimen terlihat tembus pandang.

Langkah terakhir adalah spesimen di-mounting dengan entelan sebagai media

fiksasi (Soulbsy 1982).

Teknik pewarnaan semi permanen menggunakan KOH dan minyak cengkeh yang diaplikasikan untuk pewarnaan nematoda. Menurut Khairunnisa (2007)

tahapan pewarnaannya ialah penipisan dan penghilangan lapisan kutikula cacing

yang dilakukan dengan cara merendam spesimen dalam KOH 10% selama 1-3 menit sampai lapisan kutikula terlihat tembus pandang. Setelah itu spesimen dipindahkan ke dalam minyak cengkeh selama kurang lebih 30 detik sampai 1 menit sampai organ-organ tubuh terlihat jelas. Kemudian cacing didehidrasi dengan dimasukkan ke dalam alkohol bertingkat (70%, 85%, 95%)

masing-masing selama 15 sampai 30 detik. Spesimen yang telah didehidrasi di-mounting

Teknik Bakteriologi

Gambar 14 Diagram Alir Identifikasi Bakteri

Sumber: Lay (1994)

Ikan

 Penimbangan

 Pengambilan sampel (insang & digesta)  Penggerusan Pewarnaan Gram Isolat Murni Agar Nutrien Pewarnaan Gram Agar Mc Conkey Agar Darah Koloni Koloni Uji Oksidase Staphylococcus aureus Staphylococcus epidermidis Micrococcus Streptococcaceae w Bacillus sp.  Mycobacterium  Corynebacterium  Propionobacterium  Lactobacillus Uji Katalase

Coccus Batang Berspora Batang Tidak Berspora TSIA Indol MRVP Sitrat Urea Fermentasi Karbohidrat Enterobacteriaceae _{Non-Enterobacteriaceae} (-) (+) (+) (-) (+) (-) Micrococcaceae Uji Mikroaerofilik Staphylococcus MSA (-) (+) (-) (+)

Persiapan Bahan

Contoh berupa insang dan organ saluran pencernaan (lambung dan usus) yang berasal dari ikan nila hitam diambil dan diberi perlakuan. Insang diletakan dalam cawan petri steril, dipotong kecil-kecil dan digerus dalam mortar untuk membebaskan bakteri dari tenunan insang. Digesta dari saluran pencernaan dimasukkan ke dalam mortar dan digerus. Aquades steril ditambahkan pada gerusan.

Isolasi Bakteri

Suspensi hasil gerusan ditanam di atas media agar darah dan agar

Mac-Conkey untuk menumbuhkan koloni dengan teknik goresan T. Pengerjaan dilakukan secara steril. Media yang telah digores diinkubasi pada inkubator

bersuhu 37o C selama kurang lebih 24 jam. Koloni yang tumbuh pada agar darah

dan agar Mac-Conkey diambil dan dilakukan karakterisasi berdasarkan persamaan

morfologis, yaitu ukuran, warna, bentuk, tepi permukaan, dan transparansi. Koloni terpisah selanjutnya ditanam kembali pada agar nutrient dan diinkubasi

selama 24 jam pada suhu 37o C. Selanjutnya dari koloni yang tumbuh dilakukan

pewarnaan Gram. Teknik pewarnaan Gram yaitu spesimen yang telah difiksasi ditetesi kristal violet dan didiamkan selama 1 menit kemudian dibilas dengan aquades. Spesimen selanjutnya dibilas dengan larutan pemucat (alkohol) selama 10-20 detik. Tahap terakhir ialah spesimen ditetesi safranin dan didiamkan selama 1 menit kemudian dibilas dengan aquades serta dikeringkan dengan kertas pengering. Koloni tersebut juga dipindahkan ke agar nutrien, kemudian diinkubasi

pada inkubator bersuhu 37o C selama 24 jam.

Identifikasi Bakteri

Koloni dengan hasil Gram positif yang berbentuk coccus selanjutnya diuji

dengan uji katalase. Katalase adalah enzim yang mengkatalisiskan (H2O2) menjadi

air dan oksigen. Penentuan adanya katalase diuji dengan penambahan 3% H2O2

pada koloni terpisah. Uji ini dilakukan untuk membedakan antara kelompok

Staphylococcus dan Streptococcus (Lay 1994). Kelompok Streptococcus bersifat

bersifat katalase positif akan terlihat pembentukan gelembung udara di sekitar koloni. Reaksi kimiawai yang dikatalisasikan oleh enzim katalase terlihat berikut ini:

Bakteri dengan sifat katalase positif selanjutnya dilakukan uji Manitol Salt

Agar (MSA) yang mengandung kadar NaCl tinggi, sehingga akan menghambat

pertumbuhan bakteri lain namun Staphylococcus tidak dihambat pertumbuhannya.

Media ini terutama digunakan untuk membedakan kelompok Staphylococcus yang

berifat patogen dan non-patogen. S. aureus pada umumnya bersifat patogen dan

menghasilkan warna kuning pada agar. S. epidermidis bersifat tidak patogen dan

membentuk zona merah pada agar. Warna kuning disebabkan oleh fermentasi manitol disertai pembentukan asam, sedangkan warna merah disebabkan manitol yang tidak difermentasikan. Bakteri yang bersifat Gram positif dengan bentuk batang terbagi menjadi dua, yaitu batang besar memiliki spora dapat diidentifikasi

sebagai Bacillus sp., sedangkan batang yang tidak memiliki spora dapat termasuk

bakteri Mycobacterium, Corynebacterium, Propionobacterium, dan Lactobacillus.

Uji Oksidase berfungsi untuk menentukan adanya oksidase sitokrom pada mikroorganisme. Uji ini berguna dalam identifikasi mikroorganisme patogen

seperti Neisseria gonorrhoea dan Pseudomonas aeruginosa yang menunjukkan

hasil positif terhadap uji oksidase. Reagen uji oksidase terdiri dari 1:1 (vol/vol) laruran 1% alpha-naphtol dan 1% dimetil-p-fenillendiamin oksalat. Tahapan dalam uji oksidase ialah dengan pencampuran koloni terpisah dengan reagen. Hasil oksidase positif ditunjukkan dengan warna koloni yang berubah menjadi berwarna hitam setelah 30 menit. Hal ini disebabkan oksidase sitokrom mengoksidasikan larutan reagen (Lay 1994). Hasil positif uji oksidase dapat

dilanjutkan dengan proses identifikasi menggunakan media Triple Sugar Iron

Agar (TSIA), indol, Methyl Red-Voges proskauer (MRVP), sitrat, urea, uji

fermentasi karbohidrat. Uji oksidase yang menunjukkan hasil negatif

mengindikasikan jenis bakteri Pseudomonas dan Bordetella.

Uji TSIA dilakukan dengan menggunakan Triple Sugar Iron Agar . Media

juga mengandung indikator merah fenol dan FeSO4 untuk memperlihatkan

pembentukan H2S yang ditunjukkan dengan adanya endapan hitam. Konsentrasi

glukosa adalah 1/10 dari konsentrasi laktosa atau sukrosa agar fermentasi glukosa saja dapat terlihat. Media TSIA terdiri dari dua bagian yaitu butt (bawah) dan

slant (atas). Tahapan uji TSIA yaitu koloni bakteri diambil dengan menggunakan

needle, kemudian ditusukkan pada bagian tengah butt dan langsung dilanjutkan

dengan penggoresan di bagian slant. Setelah itu media diinkubasi pada suhu 37o C

selama 24-48 jam (Lay 1994).

Reaksi yang dapat terlihat pada media TSIA adalah jika bagian butt bersifat

asam dan berwarna kuning dan bagian slant bersifat basa dan berwarna merah,. hal ini menunjukkan adanya fermentasi glukosa. Jika pada keseluruhan media terjadi pembentukan asam sehingga seluruh media berwarna kuning, hal ini menunjukkan terjadi fermentasi laktosa atau sukrosa atau keduanya. Jika terbentuk gas, seperti H2 dan CO2, pada bagian butt media akan terpecah. Jika

seluruh media berwarna merah hal ini berarti ketiga jenis gula tidak difermentasi. Jika terjadi pembentukan H2S, akan terlihat adanya endapan hitam pada butt

(Lay 1994).

Uji indol dilakukan dengan menggunakan media indol yang kaya akan

triptofan. Isolat bakteri yang telah diambil dengan menggunakan needle

ditusukkan ke bagian tengah media kemudian diinkubasi pada suhu 37o C selama

24-48 jam. Untuk melihat reaksi uji indol dilakukan dengan penambahan reagen

Erlich-Bohme sebanyak 2-3 tetes dan ditunggu selama 2-3 menit. Hasil uji positif terlihat dengan terbentuknya warna merah pada permukaan media. Media indol berbentuk semi padat sehingga dapat digunakan untuk mengetahui pergerakan bakteri. Bakteri yang bersifat motil terlihat pertumbuhan koloni di sekitar tusukan dan dipermukaan media (Lay 1994).

Uji Methyl Red digunakan untuk menentukan adanya fermentasi asam campuran. Fermentasi asam campuran ditentukan dengan cara menumbuhkan mikroorganisme dalam kaldu yang mengandung glukosa dan menambahkan

reagens methyl red ke dalam kaldu setelah masa inkubasi pada suhu 37° C selama

24 jam. Hasil positif ditunjukkan dengan kaldu biakan yang berubah menjadi kuning atau jingga jika tidak terjadi fermentasi asam campuran. Uji ini sangat

berguna dalam mengidentifikasi kelompok bakteri yang menempati saluran pencernaan.

Uji Voges Proskauer digunakan untuk mengidentifikasi mikroorgnisme yang memfermentasi 2,3-butanadiol yang mengakibatkan penumpukan bahan dalam pertumbuhan. Penambahan 10 tetes 40% KOH dan 15 tetes 5% larutan

alphanapthol dalam etanol dapat menentukan adanya asetoin (asetilmetilkarbinol), yaitu suatu senyawa pemuka dalam sintesis 2,3-butanadiol. Keberadaan asetoin ditunjukan oleh perubahan warna kaldu menjadi merah muda. Hasil reaksi dapat terlihat paling lambat setelah 30 menit. Perubahan warna kaldu biakan akan lebih jelas pada bagian yang berhubungan dengan udara karena sebagian 2,3-butanadiol dioksidasikan kembali menjadi asetoin sehingga memperjelas hasil reaksi.

Uji sitrat dilakukan dengan menggunakan media Simmon’s citrate yang

berbentuk padat dan berwarna hijau. Media merupakan medium sintetik dengan

Na sitrat sebagai satu-satunya sumber karbon, NH4+ sebagai sumber N dan brom

thymol blue sebagai indikator pH. Koloni bakteri yang telah diambil dengan menggunakan ose kemudian digoreskan pada permukaan media dan diinkubasi

pada suhu 37o C selama 24-48 jam. Hasil uji positif diperlihatkan dengan

perubahan warna media dari warna hijau menjadi biru. Hal ini menunjukan kemampuan dari bakteri yang diuji dalam menggunakan sitrat dari media sebagai satu-satunya sumber karbon (Lay 1994).

Uji urea dilakukan dengan menggunakan media urea yang berbentuk padat dan berwarna merah-jingga. Isolat bakteri yang telah diambil dengan menggunakan ose digoreskan pada permukaan media dan diinkubasi pada suhu

37o C selama 24-48 jam. Hasil uji positif terlihat dengan perubahan warna media

dari merah-jingga menjadi merah-ungu. Hal ini terjadi karena terjadinya proses hidrolisis urea (Lay 1994).

Uji fermentasi karbohidarat dilakukan dengan menggunakan media kaldu karbohidrat yaitu glukosa, sukrosa, laktosa, maltosa dan manitol yang mengandung indikator brom cresol purple (BCP) dan di dalam tabung terdapat tabung Durham sebagai indikator pembentukan gas. Isolat bakteri yang telah diambil dengan menggunakan ose diinokulasi ke dalam media, kemudian

diinkubasi pada suhu 37o C selama 24-48 jam. Hasil positif uji fermentasi karbohidrat diperlihatkan perubahan pH (warna kuning). dan pembentukan gas yang terlihat dengan adanya gelembung gas pada tabung Durham (Lay 1994).

HASIL DAN PEMBAHASAN

Identifikasi cacing parasitik didasarkan pada Bychowsky (1961) dan Hoffman (1967) dan identifikasi bakteri didasarkan pada Jang, Biberstein, dan Hirsh (1976). Cacing parasitik yang berhasil dikoleksi hanya berasal dari insang dan tidak ditemukan pada saluran pencernaan. Hasil identifikasi cacing parasitik dan bakteri pada ikan nila hitam dapat dilihat pada Tabel 1 berikut:

Tabel 1 Hasil Identifikasi Cacing Parasitik dan Bakteri pada Ikan Nila Hitam

Ikan Cacing (Jumlah) Bakteri

Insang Saluran

Pencernaan

Insang Saluran Pencernaan

1 Dactylogyrus sp (12) Dactylogyridae (1) - Escherichia coli Vibrio parahaemolyticus Enterobacter aerogenes Escherichia coli 2 - - Escherichia coli Klebsiella pneumonia Escherichia coli 3 - - Staphylococcus epidermidis Bacillus sp. Staphylococcus aureus Staphylococcus epidermidis 4 Pseudodactylogyrus sp. (9) - Escherichia coli Aeromonas sp. Escherichia coli 5 Dactylogyrus sp. (24) Pseudodactylogyrus sp. (7) Dactylogyridae (1)

- Edwardsiella tarda Escherichia coli

6 - - Escherichia coli Edwardsiella tarda Escherichia coli Aeromonas sp. 7 - - Escherichia coli Edwardsiella tarda Escherichia coli 8 Dactylogyrus sp. (9) Pseudodactylogyrus sp. (4) - Sterptococcus sp. Edwardsiella tarda Vibrio parahaemolyticus Bacillus sp. 9 Dactylogyrus sp. (15) Pseudodactylogyrus sp. (4) - Edwardsiella tarda Streptococcus sp. Pasteurella sp. Escherichia coli 10 Dactylogyrus sp. (12) - Vibrio parahaemolyticus Pasteurella sp. Bacillus sp. Edwardsiella tarda Bacillus sp. Edwardsiella tarda

Identifikasi Cacing Parasitik pada Ikan Nila (Oreochromis niloticus)

Hasil identifikasi didapatkan jenis cacing parasitik pada insang ikan nila

hitam adalah cacing kelas Monogenea, yaitu dari genus Dactylogyrus sp.,

Pseudodactylogyrus sp., dan famili Dactylogyridae. Infestasi terbanyak

sedangkan Pseudodactylogyrus sp. berjumlah 24 cacing, dan Dactylogyridae berjumlah 8 cacing.

Cacing parasitik pada insang diidentifikasi sebagai Dactylogyrus sp. karena

memiliki ukuran sekitar 0,1 mm, memiliki 14 kait pinggir, dan dua pasang kait utama. Genus Dactylogyrus sp. juga memiliki kitin yang berada di antara kait

utama dan memiliki dua pasang spot mata. Bagian anterior Dactylogyrus sp.

berlekuk-lekuk sebanyak 1-3 pasang lekukan dengan head organs di dalamnya

(Gambar 12, Gambar 13, dan Gambar 14).

Gambar 15 Dactylogyrus sp.

Gambar 16 Dactylogyrus sp.

Keterangan: p=0,66 mm; l=0,13 mm; k=kait utama

Gambar 17 Bagian Anterior Dactylogyrus sp.

Gambar 18 Gyrodactylidae dan Dactylogiridae

Sumber: Noga (2010)

Cacing parasitik lain yang dapat teridentifikasi adalah cacing Monogenea

dari genus Pseudodactylogyrus sp. Ciri dari cacing genus Pseudodactylogyrus sp.

Gambar 19 Pseudodactylogyrus sp. Keterangan: p=0,57 mm; l=0,08 mm.

Cacing parasitik lain yang teridentifikasi adalah cacing Monogenea dari famili Dactylogyridae. Identifikasi tidak dapat spesifik hingga genus karena secara mikroskopis cacing tersebut hanya memiliki satu pasang spot mata tetapi ciri-ciri lain pada famili Dactylogyridae dapat ditemukan. Famili Dactylogyridae memiliki dua pasang spot mata, terkadang satu pasang, dan sangat jarang tidak

memiliki spot mata (Bychowsky 1961)

Gambar 20 Dactylogiridae

Keterangan: p=0,66 mm; l=0,12 mm; k=kait utama

Cacing Monogenea

Cacing kelas Monogenea terdiri dari ordo Monopisthocotylean dan Polyopisthocotylean. Anggota dari ordo Monopisthocotylean adalah famili

Dactylogyridae dan Gyrodactyridae, yang sering menyerang ikan, baik ikan air tawar maupun ikan air laut. Dactylogyridae dan Gyrodactyridae umumnya menyerang bagian superfisial kulit dan insang dan mengambil nutrisi dengan melakukan penetrasi ke dalam mukosa.

Kait pinggir, kait utama, dan sucker dari Monogenea berkontak dengan jaringan inang dan menyebabkan kerusakan secara langsung (Woo et al. 2002). Proses pengambilan nutrisi dari cacing Dactylogyridae dan Gyrodactyridae menyebabkan iritasi yang berakibat timbulnya bercak-bercak, fokus kemerahan akibat dari produksi mukus berlebih, hiperplasi epitel, dan hemoragi. Infestasi cacing yang sedikit juga mampu menyebabkan produksi mukus berlebih dan pruritus. Beberapa spesies tertentu dapat menyebabkan luka yang dalam (Noga 2010).

Gambar 21 Bercak Kulit pada Ikan Akibat Produksi Mukus Berlebih

Sumber: Noga (2010)

Infestasi cacing sebenarnya tidak mematikan, bersifat kronis, akan tetapi dalam kondisi dengan jumlah banyak dapat menimbulkan kematian, khususnya pada ikan kecil. Cacing Monogenea dapat mentransmisikan bakteri atau patogen lainnya walau jarang terjadi (Noga 2010). Beberapa penulis menyebutkan bahwa Monogenea dapat berperan sebagai vektor agen patogen, seperti bakteri dan virus (Woo et al. 2002).

Gambar 22 Infestasi Dactylogyridae pada Insang Ikan Patin

Sumber: Noga (2010)

Identifikasi Bakteri pada Ikan Nila (Oreochromis niloticus)

Hasil identifikasi bakteri dari sampel pada insang dan saluran pencernaan diperoleh sepuluh genus bakteri. Identifikasi dilakukan berdasarkan Jang, Biberstein, dan Hirsh (1976). Hasil uji biokimia bakteri dapat dilihat pada Tabel 2 berikut:

Tabel 2. Hasil Uji Biokimiawi Bakteri pada Ikan Nila

Bakteri TSIA Indol Urea Sitrat G Mi Ma L S

Slant Butt Gas

Aeromonas sp. K K + + - + + + + + + Escherichia coli M K - + - - + - + - + Enterobacter aerogenes M K - - + + + + + + + Edwardsiella tarda M K + + - + + + + + + Klebsiella pneumoniae K K + - + + + + + + + Pasteurella sp. K K - - - - + + + + +

Vibrio parahaemolyt icus

M K - + - + + + + + +

M = Merah Mi = Manitol S = Sukrosa K = Kuning Ma = Maltosa

G = Glukosa L = Laktosa

Aeromonas sp.

Hasil uji identifikasi didapatkan bakteri ini merubah agar TSIA menjadi kuning pada daerah slant dan butt serta memproduksi gas. Hasil uji urease menunjukkan bakteri tidak mampu mendegradasi urea tetapi mampu menggunakan sitrat sebagai sumber karbon pada uji sitrat. Uji indol menunjukkan hasil yang positif. Hasil uji fermentasi gula-gula didapatkan hasil bahwa bakteri ini mampu memfermentasikan glukosa, manitol, laktosa, sukrosa, dan maltosa.

Menurut Woo dan Bruno (2011), Aeromonas sp. mampu memfermentasi fruktosa,

galaktosa, maltosa, trehalosa, manitol, sukrosa, glukosa, dextrin dan glikogen, memberikan hasil uji positif pada uji indol, memproduksi gas dari glukosa.

Aeromonas sp adalah bakteri Gram negatif, motil, berbentuk batang, dan

menyebabkan penyakit pada ikan. Motile aeromonas septicemia (MAS) atau

motile aeromonas infection (MAI) adalah penyakit pada ikan yang disebabkan oleh bakteri Aeromonas sp. (Camus et al. 1998). MAS sering disebabkan oleh

A. hydrophila, tetapi jarang disebabkan oleh A. sobria dan A. caviae (Woo et al.

2002).

Aeromonas sp. banyak ditemukan di perairan air tawar, sedikit ditemukan di air payau, dan jarang ditemukan pada air dengan silinitas di atas 15 ppt.

Aeromonas sp. hidup pada perairan yang kaya akan zat organik seperti kolam dan sistem pembudidayaan lainnya. Selain hidup secara bebas, Aeromonas sp. dapat diisolasi dari kulit dan saluran pencernaan ikan sehat. Aeromonas sp. dianggap sebagai patogen oportunis karena hanya menyebabkan penyakit pada saat kondisi ikan stres atau menderita penyakit lain (Camus et al. 1998).

Gejala dari infeksi Aeromonas tidak spesifik dan dapat dikelirukan dengan

penyakit lainnya. Ikan yang terinfeksi Aeromonas akan kehilangan nafsu makan,

lemah, dan berenang dekat permukaan. Aeromonas sp. pada ikan nila

menyebabkan hemoragi pada kulit, ulcer, penurunan bobot badan, luka pada