# Ko r e sp o n d e nsi: Balai Pe n elit ian d an Pe n ge m b an g an Bu d id aya Air Payau . Jl. Makmu r Dg . Sit akka No . 1 2 9 , Mar o s 9 0 51 2 , Su lawesi Se lat an , In d o n e sia. Te l. + (0 4 1 1 ) 3 7 1 5 4 4 E-m ail: mul i ani m@ yahoo.com
Tersedia online di: ht t p://ej ournal-balit bang.kkp.go.id/index.php/j ra
AKTIVITAS ANTIBAKTERI PENYEBAB VIBRIOSIS TERHADAP UDANG W INDU DARI EKSTRAK HERBAL M ANGROVE Sonneratia alba DAN Bruguiera gymnorrhiza
M uliani#, Bunga Rante Tampangallo, dan M uharijadi Atmomarsono
Balai Penelitian dan Pen gemb angan Bud idaya Air Payau
ABSTRAK
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui aktivitas antibakteri dari ekstrak herbal mangrove Sonnerat ia
alba dan Bruguiera gymnorrhiza terhadap penyebab penyakit vibriosispada udang windu. Daun mangrove
S. alba dan B. gymnorrhiza masing-masing diambil dari Kabupaten Maros dan Pangkep. Sampel daun dikering-anginkan selama dua minggu, ditepungkan, diekstraksi dengan metanol 80%, dan dievaporasi. Rendemen yang diperoleh dipartisi menggunakan dua jenis pelarut yaitu butanol dan dietileter. Uji bioassay dilakukan baik se cara kualitatif maupun kuan titatif melalu i penentuan minimum inhibit ion concent r at ion (MIC) dan minimum bact ericidal concent rat ion (MBC). Hasil penelitian menunjukkan bahwa aktivitas antibakteri ekstrak mangrove S. alba dan B. gymnorrhiza lebih tinggi terhadap V. parahemolyt icus dibanding V. har veyi. Fraksi dietileter dan ekstrak metanol S. alba, serta fraksi butanol B. gymnorrhiza memiliki antibakteri yang tergolong
kuat. Ekstrak metanol S. alba bersifat toksik terhadap benur udang windu pada konsentrasi di atas 2.000
m g/L.
KATA KUNCI: antibakteri; herbal mangrove; S. alba; B. gymnorrhiza; udang windu
ABSTRACT: Activity of anti-bacteria cause of vibriosis on tiger shrimp from mangrove herbs Sonnerat ia alba and Bruguiera gymnorrhiza extract. By: M uliani, Bunga Rante Tampangallo, and M uharijadi At momarsono
The experiment was aimed t o examine t he activity of anti-bact erial of mangrove herbs Sonneratia alba and Bruguiera gymnorrhiza ext ract on t iger shrimp. M angroves leaf of S. alba and B. gymnorrhiza were t aken from M aros and Pangkep Regency. M angrove leaves dried aired approximat ely t wo weeks, made int o flour, ext ract ed using 80% met anol, and evaporat ed. Yield were t hen part it ioned using t wo t ypes of solvent s are but anol and diet ilet er. Bioassay t est bot h qualyt at ively and quantit at ively by det erminat ion of minimum inhibit ion concentrat ion (MIC) and minimum bact ericidal concentrat ion (M BC). The result s showed t hat t he ant i-bact erial act ivit y mangrove ext ract of S. alba and B. gymnorrhiza higher in V. parahemolyticus compared against V. harveyi. Dietileter fraction and t he met anol ext ract of S. alba and but hanol fract ion of B. gymnorrhiza have st rongly as ant i-bact erial. The met hanol ext ract of S. alba will be t oxic t o black t iger shrimp fry at concent rat ions above of 2,000 mg/L.
KEYW ORDS: anti-bacterial; mngrove herbs; S. alba; B. gymnorrhiza; Penaeus monodon
PENDAHULUAN
Penyakit vibrio sis at au penyakit udang berpendar merupakan salah satu jenis penyakit udang yang banyak menimbulkan kematian baik di t ambak maupun di panti perbenihan. Vibrio sis disebabkan o leh beberapa jenis b a k t e r i vib r io s e p e r t i Vi br i o h a r veyi, Vi br i o parahaemolyt iucus, Vibrio alginolyt icus, Vibrio fischeri. Di ant ara b eberapa jenis vibrio yang paling berbahaya adalah V. har veyi (Kannapiran et al., 2009) dan sampai
s a at in i p e n yak it in i m a sih m e ru p a k an k e n d a la budidaya udang t erut ama di pant i perbenihan.
Beberapa jenis mangro ve telah dilaporkan berperan sebagai ant ibakt eri pada udang sepert i R. mucronat a dan Salichornia brachiata efekt if t erhadap Vibrio harveyi, V. vulnificus, V. alginolyt icus, V. anginllarum, dan V. lohi. Kedua jenis mangro ve t ersebut juga efekt if t erhadap p at o ge n ika n se p e rt i Baci llus subt ilis, Ser r at ia s p . Aer om on a s h yd r op h i l a, V. h ar veyi, d a n V. parahaemolyticus (Manilal et al., 2010; Babuselvam et al., 2 0 1 2 ). Se la in it u , je n is m a n g r o ve in i d a p a t d ijad ikan se b agai alt e rn at if p e n go b at an p e n yakit vibriosis pada larva lo bst er (Baskaran & Mo han, 2012). Sement ara, Lait h et al. (2011); Lait h & Najiah (2014) melapo rkan bahwa E. agallocha efektif t erhadap bakteri Flavobact erium spp penyebab penyakit bakt erial pada ikan. Selanjut nya Sap t iani et al. (20 12) melap o rkan b ah wa fraksi b u t an o l d ari d au n Acant hus ilicifolius m e n gh a m b at p e r t u m b u h a n V. har veyi le b ih b aik dibanding ekst rak et ilaset at , sedangkan Ramesh et al. (2 014) me lap o rkan b ahwa me t o d e ekst rak dengan acet o n dari daun A. ilicifolius lebih po t ensial sebagai ant i V. har veyi VSH5 dengan diamet er hambat an 16,4 mm dibanding dengan ekst rak daun Avicenia marina, A. ofcinalis, dan Rhizophora mucronat a. Lapo ran lain m en yeb u t kan bah wa daya h amb at e t il ase t at d ari A. ilicifolius t erhadap Aeromonas hydrophyla, V. har veyi, dan Escherichia coli berbeda secara signifikan dengan ekst rak et ano l dan met ano l (Sreenivasa et al., 2015). Ravikumar et al. (2010) melapo rkan bahwa met o de ekst rak dengan klo ro fo rm dari daun Exocaria agllocha mampu menghambat pert umbuhan bakt eri pat o gen p a d a ik a n d i a n t a r a n ya Aer om ona s h yd r op hyl a, V. parahaemolyt icus, dan V. har veyi.
Se la in je n is m an gro ve yan g t e lah d ise b u t kan , S. alba dan B. gymnorrhiza merupakan jenis mangro ve yan g juga t elah b anyak dikaji se b agai an t ibakt e ri. Ke du a jenis man gro ve in i d ilapo rkan men ghamb at p ert u mb u h an b akt e ri Gram po sit if yait u St aphylo-coccus aureus, Bacillus cereus, B. subt ilis, dan Sarcina lut era, dan bakt eri Gram negat if penyebab penyakit p ad a m an u sia t e rm as u k Escher ichia coli, Shi g ell a dysent eriae, Pseudomonas aeruginosa, salmonella t yphi, V. parahaemolyt icus, dan V. mimicus (Haq et al., 2011; Millo n et al., 2012). Muliani et al. (2015) melapo rkan bahwa n ilai MIC ekst rak me t an o l S. alba t erhadap V. har veyi dan V. parahaemolyt icus masing-masing adalah adalah 1 mg/L dan 0,1 mg/L. Berdasarkan hal t ersebut m aka d ilaku kan p e n e lit ian yan g b e rt u ju an u n t u k m e lih a t a k t ivit a s a n t ib a k t e r i V. h ar veyi d a n V. parahaemolyt icus, dari herbal mangro ve S. alba dan B. gymnorrhiza pada budidaya udang.
BAHAN DAN M ETODE
Pengambilan dan Pengeringan Daun M angrove
Daun S. alba dan B. gymnnorrhiza yang digunakan p ad a p e n e lit ian in i m asin g-m asin g d iko le ksi d ari Kabu pat en Maro s dan Kabupat en Pangkep Pro vinsi Sulawesi Selat an (Gambar 1). Pengambilan sampel daun dilakukan secara keseluruhan baik daun t ua maupun masih muda, selanju t nya dibersihkan dan dikering-anginkan dalam suhu ruang selama kurang lebih dua minggu.
Pem buat an Tepung (Sim plisia)
Dau n (d a u n m u d a d an d au n t u a ) S. al ba d a n B. gymnnorrhiza kering, dit epung (simplisia), disaring (ukuran 1 mm) dan diekst rak menggunakan pelarut met ano l 80%.
Ekstraksi M etanol dan Pengkisat an
Te p u ng (sim p lisia) d au n m an gro ve S. alba d an B. gymnnorrhiza sebanyak 5 g, dit ambahkan larut an met anol 80% hingga terendam. Cairan hasil penyaringan d it am p u n g s e d a n g ka n a m p a s d ir e n d am k e m b ali dengan met ano l selama 24 jam dan disaring kembali. Untuk memaksimalkan ekstrak bahan-bahan aktif maka perendaman selama 24 jam dilakukan t iga kali at au t e rgan t u n g t in gkat ke ke ru h an re n d am an . Ap ab ila re nd am an sud ah t erlihat je rn ih m aka pe re nd am an dihent ikan. Larut an simplisia hasil ekst raksi disaring ulang menggunakan kertas filter dan dikisatkan dengan menggunakan Rot at or y evaporat or.
Fraksinasi Hasil Ekstraksi
Uji Aktivitas Anti-Bakt erial Secara Kualitatif
Uji bio assay unt uk melihat akt ivit as ant i-V. har veyi d a n a n t i-V. p a r a ha em ol yt i cu s d a r i S. a l ba d a n B. g ym nnor r hi za d ilak u ka n d e n g an t e k n ik “Hi g h Throughput Screening” (Langfield et al., 2004; Ganju et al., 2008; Karuppusamy & Rajasekaran, 2009). Hasil fr ak sin as i d a n e ks t r ak m e t a n o l d ar i ke d u a je n is m a n g r o ve t e r s e b u t d it im b a n g m a s in g -m a s in g sebanyak 5 mg dan 10 mg, kemudian dilarut kan dengan 1 mL DMSO (dimet hylsulfoxide) 10% dalam tabung mikro volume 1,5 mL (Kasanah & Isnansetyo , 2013). Suspensi iso lat V. har veyi (ko de 275) dan V. parahaemolyt icus (ko de iso lat -3) masing-masing dikult ur dalam media nut rient brot h (NB) 10 mL selama 24 jam pada suhu ruang sambil digo yang. Sebanyak 1 mL hasil kult ur t ersebut selanjut nya di subkult ur selama empat jam dalam 10 mL media NB (108
CFU/mL) dan diencerkan hingga dipero leh kepadat an suspensi bakt eri V. har veyi dan V. parahaemolyt icus sebesar 105 CFU/mL (Kadriah,
2012).
Su s p e n s i V. h ar veyi d a n V. pa r ah aem ol yt i cu s d igu n akan se b agai b io in d ikat o r p ad a u ji bioassay ekst rak mangro ve S. alba dan B. gymnorrhiza melalui m et o d e mikrow ell plat e assay d en gan 96 su m uran (Kasan ah & Isn an se t yo , 2 0 1 3). Me t o d e p e n gujian dilakukan dengan mengisi 40 µL media nut rien brot h (NB) ke dalam set iap sumur plat mikro , kecuali pada sumur plat mikro unt uk ko nt ro l (100 mL). Selanjut nya set iap sumuran ditambahkan 40 µL ekstrak mangrove. Pada sumur plat mikro unt uk ko nt ro l media, ko nt ro l pelarut (DMSO), dan kont ro l ant ibio tik t idak dilakukan penambahan ekst rak mangro ve. Pada kont ro l
masing-masing digunakan 40 mL DMSO 10% (ko nt ro l pelarut ) dan ant ibio t ik rifampisin 40 mL (ko nt ro l ant ibio t ik). Selanjutnya, suspensi bakteri ditambahkan 20 µL ke dalam semua sumur plat mikro kecuali pada ko nt ro l media dan diinkubasi pada suhu ruang selama 24 jam. Pe n g u jia n d iu la n g s e b an yak t ig a ka li. In d ik a t o r pertumbuhan sel bakteri dengan menambahkan 10 µL la ru t an 3 -(4 ,5 -d im e t h ylt h iaz o l-2 -yl)-2 ,5 -d ip h e n yl-t eyl-t razo lium bro mid (MTT) 5 g/L (Wang eyl-t al., 2010).
Penentuan Nilai M inimum Inhibition Concentration (M IC)
M inimum inhibit ion concent rat ion (MIC) dari ekst rak m e t a n o l d a n h a s il fr a k s in a s i S. a l ba d a n B. gymnnor r hi za d iu jika n t e rh ad a p V. har veyi d an V. parahaemolyt icus. Uji MIC dilakukan dengan merujuk pada p ro sedur yang diperkenalkan o leh Kasanah & Isn an se t yo (2 0 1 3 ) d e n g an m e n gg u n akan m e t o d e mikrowell plat e dilut ion assay.
Ekst rak m an gro ve h asil faraksin asi yan g t e lah dilarut kan dalam pelarut DMSO 10% (5 g/mL) sebanyak 100 µL dimasukkan pada sumur plat mikro pertama dan ket ujuh, sedangkan pada sumur plat mikro yang lainnya diisi dengan 50 µL akuades. Selanjutnya sebanyak 50 µL ekstrak mangrove dari sumur plat m ik r o p e r t a m a d a n s u m u r p la t m ik r o k e t u ju h dipindahkan ke sumur plat mikro berikut nya (sumur p la t m ik r o k e d u a d a n k e d e la p a n ), k e m u d ia n d ih o m o g e n k a n d e n g a n p e m ip e t a n b e r u la n g . Pengenceran dilakukan hingga ke sumur plat mikro keenam dan dua belas. Media NB sebanyak 30 µL ke dalam masing-masin g sumu r plat mikro , b aik p ada Gambar1. Daun mangro ve S. alba (A) dan B. gymnnorrhiza (B) yang digunakan unt uk uji akt ivit as
ant ibakt eri dan ant iWSSV pada udang windu
Figure 1. M angrove leaf of S. alba (A) and B. gymnnorrhiza (B) used for ant i-bact erial and ant i-WSSV act ivit y on black t iger shrimp
ko nt ro l maupun pada sumur plat mikro yang berisi ekstrak mangrove. Suspensi bakteri sebanyak 20 µL dit ambahkan ke dalam campuran sumur plat mikro kecuali pada ko nt ro l media dan diinkubasi pada suhu ru ang selama 24 jam. Pen ambahan MTT dilakukan set et lah 24 jam masa inkubasi. Perubahan warna me-dia dari kuning menjadi ungu, menunjukkan adanya p ert u m bu han se l bakt e ri (e kst rak m an gro ve t idak memiliki akt ivit as ant ibakt eri), sedangkan jika warna media t et ap ber warna kuning (t idak berubah set elah penambahan MTT) t idak ada pert umbuhan sel bakt eri. Hal ini mengindikasikan adanya akt ivit as ant ibakt eri dari ekst rak mangro ve. Ko nsent rasi ekst rak mangro ve t erendah di mana t idak t erjadi perubahan warna (t idak ada pert umbuhan sel bakt eri) merupakan nilai MIC dari ekst rak t ersebut (Kasanah & Isnanset yo , 2013). Dat a hasil uji bioassay ekst rak mangro ve dianalisis secara dekript if unt uk menget ahui nilai MIC dari S. alba dan B. gymnorrhiza.
Penentuan Nilai M inimum Bactericidal Concentration (M BC)
Penentuan nilai MBC dilakukan set elah pengamat an MIC, yait u d e n gan cara b iakan d a lam p lat m ikro t ant ang dengan V. har veyi pada ko nsent rasi 1 mg/L, 10 mg/L, 100 mg/L, 1.000 mg/L, dan 10.000 mg/L dengan ulangan masing-masing t iga kali. Uji t ant ang ekst rak mangro ve secara in vit ro dengan V. har veyi pada 2.000
mg/L, 4.000 mg/L, 6.000 mg/L, dan 8.000 mg/L dilakukan t erhadap S. alba dengan t iga kali ulangan. Ke dalam set iap t abu ng yang berisi ekst rak mangro ve se suai konsent rasi yang telah dit entukan, dimasukkan biakan bakt eri V. har veyi yang berumur empat jam (108 CFU/ mL) sebanyak 100 µL sehingga konsentrasi V. har veyi d alam t ab u n g ad alah 1 06 CFU/m L. Ta b u n g ku lt u r B. gymnorrhiza t erhadap lar va udang windu digunakan ko nsent rasi yang sama pada uji t antang secara in vitro, 1 mg/L, 10 mg/L, 100 mg/L, 1.000 mg/L, dan 10.000 m g/L de ngan ulan gan m asin g-masin g t iga kali. Uji t o ksisit as dengan ko nsent rasi 2.000 mg/L, 4.000 mg/ L, 6.000 mg/L, dan 8.000 mg/L dilakukan t erhadap S. alba. Lar va udang yang digunakan adalalh PL-12 yang diambil dari unit perbenihan ko mersil di Kabupat en Barru, Sulawesi Selat an. Wadah kaca digunakan sebagai wadah uji, diisi air laut 2 L dengan salinit as 28 ppt d a n la r va u d a n g w in d u PL-1 2 se b a n ya k 3 0 e ko r. Mo rt alit as udang windu diamat i set elah 96 jam.
HASIL DAN BAHASAN
Hasil Uji Bioassay Secara Kualitatif
Hasil u ji akt ivit as an t ib akt e ri se cara ku alit at if ekst rak met ano l (ekst rak kasar) dan hasil fraksinasi dari S. alba dan B. gymnrrhiza t erhadap V. har veyi dan V. parahaemolyt icus menunjukkan bahwa kedua jenis mangro ve t ersebut po sit if mengandung ant i-V. har veyi dan ant i-V. parahemolyt icus (Tabel 1).
Hasil Uji M IC dan M BC
Hasil uji MIC dan MBC t erhadap hasil fraksinasi dari S. alba dan B. gymnorrhiza disajikan pada Tabel 2. Nilai MIC dan MBC dari semua fraksi t erhadap V. harveyi d an V. par ahemolyt icus d ari ke d u a je n is m angro ve t ersebut t idak berbeda. Hal ini menunjukkan bahwa ke d ua je n is m an gro ve t erse b u t p o t e n sial se bagai efekt if terhadap V. parahemolyt icus dibanding t erhadap V. har veyi. Semakin rendah nilai MIC dan MBC suat u bahan akt if maka efekt ivit as bahan t ersebut semakin t inggi, demikian pula sebaliknya. Hasil uji MIC dan MBC pada Tabel 2 menunjukkan bahwa akt ivit as ant i-V. har veyi dari S. alba t ert inggi pada fraksi air dengan nilai 50 mg/L, kemudian fraksi but ano l dan selanjut nya fraksi diet ilet er dengan nilai MIC masing-masing 500 mg/L dan 5.000 mg/L. Nilai MIC mangro ve ini t erhadapi V. parahaemolyt icus sama pada set iap fraksi yait u 0,05 mg/L. Hasil penelit ian sebelumnya menunjukkan bahwa nilai MIC ekst rak met ano l S. alba t erhadap V. har veyi adalah 1 mg/L sedang t e rhadap V. par ahaemolyt icus adalah 0,1 mg/L (Muliani et al., 2015).
Ak t ivit a s a n t i V. har veyi d a r i B. g ym n or r h i za t e rt in ggi pada fraksi bu t ano l de ngan n ilai MIC 5 0 mg/L disusul dengan fraksi diet ile t er d an fraksi air dengan nilai MIC masing-masing 500 mg/L dan 5.000 mg/L. Seme nt ara akt ivit as an t i V. par t ahaemolyt icus t ert inggi pada fraksi but ano l dengan nilai MIC 0,05 mg/L; kemudian fraksi diet ilet er dan selanjut nya fraksi air dengan nilai MIC masing-masing 50 mg/L dan 500 mg/L. Muliani et al. (2015) melaporkan bahwa nilai MIC ekst rak met an o l B. gymnorrhiza t erhadap V. har veyi dan V. parahaemolyt icus adalah 0,1 mg/L. Hasil uji MIC dan MBC pada Tabel 2 menunjukkan bahwa fraksi air S. alba po t ensial sebagai penghasil ant i-vibrio sis pada b u d id aya u d an g win d u. Sh am su d d in et al. (2 0 1 3 )
melapo rkan bahwa nilai MIC ekst rak air mangro ve S. caseol ar i s t e rh ad a p e n am je n is b akt e ri Vi br i o sp . penyebab penyakit pada udang adalah 0,1 µg/L. Sedangkan Dhayanit hi et al. (2013) melapo rkan bahwa ekst rak met ano l Avicenia marina menunjukkan adanya akt ivit as an t ib akt eri t erh ad ap V. angillar um dan V. parahemolyt icus masing-masing pada ko nsent rasi 150 µg/mL dan 175 µg/mL.
Fraksi air dan fraksi but ano l S. alba memiliki ant i-V. har veyi yang t ergo lo ng kuat (MIC 50 mg/L dan 500 mg/L), sedangkan fraksi die t ile t er t ergo lo n g le mah dengan nilai MIC sebesar 5.000 mg/L). Ant i-V. har veyi mangro ve B. gymnorrhiza fraksi but ano l dan diet ilet er t e r g o lo n g k u a t (MIC 5 0 m g /L d a n 5 0 0 m g /L), sedangkan fraksi air lemah (MIC 5.000 mg/L). Akt ivit as ant i V. parahaemolyt icus dari kedua jenis mangro ve ini t ergo lo ng kuat pada semua fraksi yang diuji dengan nilai MIC ant ara 0,05-50 mg/L. Ekst rak met ano l dari d au n d an bat an g S. alba me m iliki akt ivit as an t i-V. harveyi yang t ergo lo ng kuat dengan diamet er masing-masing 24 ± 3,78 unt uk daun dan 24 ± 3,78 unt uk bat ang (Melki et al., 2011). Avenido & Serrano (2012) melapo rkan bahwa ekst rak met ano l dari rant ing dan daun S. caseolaris memiliki daya hambat t erhadap V. har veyi lebih t inggi dibanding ekst rak air. Lebih lanjut d ikat akan b ah wa e kst rak m et an o l ran t ing S. alba m e m ilik i a k t ivit a s a n t ib a k t e r i ya n g le b ih k u a t dibanding ekst rak daun dengan daya hambat masing 10,33 ± 1,53 unt uk rant ing dan 6,00 ± 1,73 ekst rak air pada konsentrasi yang sama yaitu 1.000 µg/mL. Abed et al. (2013) menyat akan bahwa bahan antibakteri memiliki daya hamb at yang kuat jika nilai MIC-nya adalah 500 µg/mL, daya hambat sedang jika nilai MIC-nya berkisar 600-1.500 µg/mL, dan daya hambat rendah jika nilai MIC lebih besar dari 1.600 µg/mL.
Hasil Uji Tantang Secara In Vitro dengan V. harveyi
Hasil u ji t ant an g se cara in vit r o u n t u k m e lih at ko nsen t rasi amban g bawah dan amb ang at as yang mematikan V. har veyi disajikan pada Tabel 3. Pada Tabel
Tabel 2. Hasil u ji MIC d an MBC h asil fraksin asi S. alba d an B. gymnor r hiza t e rh ad ap V. har veyi d an V.
B. gymnorrhi za 5,000 50 500 500 0.05 50
M IC dan M BC (mg/L) terhadap V. parahaemolyt icus
3 t erlih at b ah wa e kst rak m e t ano l S. alba d e n gan ko nsentrasi 10.000 mg/L memat ikan bakt eri Vibrio sp. hingga 100%, sedangkan B. gymnorrhiza memat ikan Vibrio sp. sekit ar 3,4% dibanding dengan ko nt ro l. Oleh karena it u, uji in vit ro ke t ah ap b eriku t nya den gan ko nsent rasi 2.000 mg/L, 4.000 mg/L, 6.000 mg/L, dan 8.000 mg/L hanya menggunakan S. alba (Gambar 2).
Pada Gambar 2 t erlihat bahwa po pulasi V. har veyi t ert inggi set elah 24 jam kult ur t erdapat pada ko nt ro l ambang bawah dan ambang atas yang mematikan udang windu disajikan pada Tabel 4. Pada Tabel 4 t erlihat bahwa baik ekst rak met ano l S. alba maupun ekst rak met ano l B. gymnorrhiza dengan ko nsent rasi 10.000 Tabel 3. Po pulasi V. har veyi (lo g CFU/mL) set elah 24 uji t ant ang secara in vit ro
dengan ekst rak met ano l S. alba dan B. gymnorrhiza
Table 3. V. harveyi populat ion (log CFU/mL) aft er 24 hours in vit ro challenge wit h
Konsent rasi Vibrio sp. (Vibrio sp. Concentr ation) (log CFU/m L)
Gambar 2. Po pulasi V. har veyi (lo g CFU/mL) set elah 24 jam uji t ant ang dengan ekst rak met ano l S. alba
mg/L memat ikan udang 100%. Pada ko nsent rasi 1.000 mg/L ekst rak metano l S. alba memat ikan udang windu hingga 31,11% sedangkan B. gymnorrhiza 95,56%. Oleh karena it u, uji t o ksisit as ke t ahap berikut nya dengan ko nsent rasi 2.000 mg/L, 4.000 mg/L, 6.000 mg/L, dan 8.000 mg/L hanya menggunakan S. alba (Tabel 5).
Pada Tabel 5 t erlihat bahwa pada ko nsent rasi 4.000 mg/L, 6.00 0 mg/L, dan 8.00 0 mg/L e kst rak S. alba sudah bersifat t o ksik t erhadap benur udang windu. Ha s il p e n e lit ia n s e b e lu m n ya d ila p o r k a n b a h w a mo rt alit as u dang windu p ada p enggu naan ekst rak me t ano l S. alba pada ko n se n t rasi 1.0 00 m g/L dan 10.000 mg/L masing-masing sebesar 26,67% dan 100% (Muliani et al., 20 15). Hal in i m enu nju kkan bah wa ekst rak metano l dari daun mangro ve ini sudah bersifat t o ksik di at as ko nsent rasi 1.000 mg/mL. Uji t ant ang secara in vivo dalam wadah pemeliharaan udang windu menunjukkan bahwa po pulasi bakt eri Vibrio sp. pada pemberian ekst rak met ano l S. alba pada ko nsent rasi 1.000 mg/L adalah 5,68 x 105 CFU/mL (Muliani et al.,
Tabel 4. Hasil uji t o ksisit as ekst rak met ano l S. alba dan B. gymnorrhiza t erhadap lar va udang windu pada ko nsent rasi yang berbeda
Table 4. Toxicit y t est result of met hanol ext ract ed of S. alba and B. gymnorrhiza on t iger shrimp post larvae at different concent rat ions
Sum ber (Source): Muliani et al. (2015)
S. alba B. gymnor r ihza
1 mg /L 1 2 .2 2 13 .3 3
1 0 m g /L 1 2 .2 2 5 .5 5
1 0 0 m g/L 1 7 .7 8 18 .8 9
1 ,00 0 mg /L 3 1 .1 1 95 .5 6
1 0 ,0 0 0 m g/L 10 0 1 0 0
Ko n tr o l (tan p a ekstr ak man gr o ve)
Control (without mangrove extract) 1 7 .7 8 17 .7 8
Konsent rasi Concetrations
Mort ali t as (%) larva udang windu set elah 96 j am Tiger shr imp post lar vae m or tality (%) after 9 6 hour s
Tabel 5. Hasil uji To ksisit as e kst rak m et ano l d aun S. alba t erhadap benur u dang windu (P. monodon) set elah 96 jam
Table 5. Toxisit y t est of met hanol ext ract of S. alba leaf on t iger shrimp post lar vae (P. monodon) aft er 96 hours
2 01 6). Lapo ran lain m en ye bu t kan b ah wa p o p ulasi bakteri Vibrio sp. dalam air pemeliharaan udang windu set elah 96 jam perendaman dengan ekst rak met ano l S. alba 1.000 mg/L adalah 1,78 x 103 CFU/mL (Nurbaya
et al., 2016).
KESIM PULAN
Akt ivit as an t ib akt e ri e kst rak h e rb al m an gro ve S. a l ba t e r t in g g i p a d a fr a k s i a ir s e d a n g k a n B. gymnorrhiza pada fraksi but ano l. Ant ibakt eri dari kedua jenis mangro ve t ersebut t ergo lo ng kuat dan memiliki akt ivit as ant i-V. parahemolyt icus lebih t inggi d ib an din g an t i-V. har veyi. Ekst rak m et an o l S. alba b ersifat t o ksik t e rh ad ap be nu r ud an g win du p ad a ko nsent rasi di at as 2.000 mg/L.
UCAPAN TERIM A KASIH
Te rim a kas ih ke p ad a re kan -re kan p e n e lit i d an t eknisi Labo rat o rium Kesehat an Ikan dan Lingkungan yang penuh dedikasi dan t anggung jawab membant u Perl akuan
Treatments
Ti ngkat kem at ian l arva udang wi ndu M or tality of tiger shr imp post lar vae (%)
0 mg /L (ko n tr o l/cont rol) 3 6 .6 7
2 ,00 0 m g/L 7 6 .6 7
4 ,00 0 m g/L 1 00
6 ,00 0 m g/L 1 00
t erlaksananya penelit ian ini. Penelitian ini didanai o leh
mangro ve (Sonnerat ia caseolaris) o n ant imicro bial, imm uno st imu lat o r y, and hist o lo gical respo nses plant exract against fish and shrimp pat o gens. In-t ernaIn-t ional Journal of Applied M iocrobiology Science, 1(3), 20-25.
Baskaran, R., & Mo han, P.M. (2012). In vit ro ant ibact e-rial activit y o f leaf extract s o f Rhizophora mucronat a L. against mult i drug resist en Vibrio spp. iso lat ed fro m marine wat e r lo bst e r ’s lar vae hat che ries. Indian Journal of Geo-M arine Science, 41(3), 218-222. Dhayanit hi, N.B., Kumar, T.T.A., Balasubramanian, T., & Tissera, K. (2013). A st udy o n t he effect o f us-ing mangro ve leaf ext ract s as a feed addit ive in t he pro gress o f bact erial infect io ns in marine o r-nament al fish. Journal of Coast al Life M edicine, 1(3), 217-224.
Ganju, K.P.M.L., Sairam, M., Banerjee, P.K., & Sawhney, R.C. (2008). A review o f high t hro ughput t echno l-o gy fl-o r t he screening l-o f nat ural prl-o ducts. Bil-omedi- Biomedi-cine and Pharmacot herapy, 62(2), 94-98.
Haq , M., Sani, W., Ho ssain , A.B.M.S., Taha, R.M., & Mo nneruzzaman, K.M. (2011). To t al pheno lic co n-t enn-t s, ann-t io xidann-t and ann-t imo cro bial acn-t ivin-t ies o f bruguiera gymno rrhiza. Journal of M edicinal Plant s Research, 5(17), 4112-4118.
Kadriah, I.A.K. (2012). Pengembangan met o de det eksi ce p a t vib r io b e r p e n d ar p ad a u d an g p e n a e id . Disertasi. Inst itut Pertanian Bo go r. Bogo r, 126 hlm. Kann ap iran , E., Ravin d ran , J., Ch an d rase kar, R., & Kalalarasi, A. (2009). St udies o n lumino us, Vibrio har veyi asso ciat ed wit h sh rim p cu lt u re syst e m
Kasanah, N., & Isnanset yo , A. (2013). High t hroughput screening dan bioassay dalam penemuan senyawa bio akt if dari alam. M at eri workshop dan Pelat ihan M. (2011). In vit ro antimicrobial activity o f Exoecaria agallocha against Flavobacterium spp. UMTAS, p. 43-47.
Lait h, A.A., & Najiah, M. (2014). Ant imo cro bial act ivi-t ies o f blinding ivi-t ree, Excoecaria agallocha againsivi-t select ed bact erial pat ho gens. Jounal of M icrobiol-ogy and Ant imocrobial, 6(2), 29-36.
Langfield, R.D., Scarano , F.J., Heit zman, M.E., Ko no do , M., Hammo nd, G.B., & Net o , C.C. (2004). Use o f mo dified micro plat e bio assay met ho d t o invest i-gat e ant ibcat erial ac t ivit y in t he Peruvian medici-n a l p la medici-n t Peper om i a g al i oi des. Jour n a l of pencegahan penyakit vibrio sis pada udang windu. M aspari Journal, 02, 39-47.
Millo n , M.A., Mu h it , M.A., Go sh wami, D., Masu d , M.M., & Begum, B. (2012). Ant io xidant , cyt o t o xic and ant imicro bial act ivit y o f Sonnerat ia alba bark. IJPSR, 3(7), 2233-2237.
Muliani, Nurhidayah, & Kurniayawan, K. (2015). Herbal mangrove sebagai sumber anti bakteri Vibrio harveyi p en yeb ab p en yakit pad a u dan g win d u Penaeus mondon. J. Ris. Akuakult ur, 10(3), 405-414.
Muliani, Nurhidayah, & Nurbaya. (2016). To t al Vibrio, re sp o n s im u n , d an sint asan p ascalar va u d an g windu pada penggunaan ekst rak mangro ve dengan t e k n ik p e m b e r ia n b e r b e d a . M a ka l a h t el a h diseminarkan pada Seminar Nasional Tahunan XIII UGM pada t anggal 13 Agust us 2016. Jo gjakart a, 15 hlm.
parahaemolyt icus o n t iger shrimp Penaeus monodon. Chem. Pharm. Res., 3(5), 501-513.
Raje swari, P.R., Velmu ru gan, S., Bab u, M.M., Dhas, S., & Kesavan, K. (2012). A st udy o n t he influence o f select ed Indian herbal act ive principles o n en-h an cin g t en-he im mu n e syst e m in Fenner openaeus indicus against Vibrio harveyi infect io n. Aquacult ure Int ernat ional, 20, 1009-1020.
Ramesh, K., Nat arajan, M., & Sridhar, H. (2014). Ant i-vib r io a ct ivit y o f m a n g r o ve a n d m a n g r o ve asso siat e s o n shrim p p at h o ge n , Vibr io har veyi VSH5. Global Vet erinaria, 12(2), 270-276.
Ra vik u m a r, S., Mu t h u raja, M., Siva p e r u m a l, P., & Gnanadesigan, M. (2010). Ant ibact erial act ivit y o f t he mangro ve leaves Exocaria agalloca against se-lect ed fish pat ho gens. Asian Journal of M edical sci-ences, 2(5), 211-213.
Sapt iani, G., Prayit no , S.B., & Anggo ro , S. (2012). The effect iveness o f Acant hus ilicifolius in pro t ect ing t iger prawn (Penaeus monodon F.) fro m Vibrio harveyi infect io n. Journal of Coast al Develpopment, 15(2), 217-224.
Sham su d d in , A.A., Najiah , M., Suvik, A., Azariyah , M.N., Kamaruzzaman, B.Y., Effendy, A.W., & Jo hn, B.A. (2013). Ant ibact erial pro pert ies o f select ed mangro ve plant s against Vibrio species and it s cy-t o cy-t oxicicy-t y againscy-t Arcy-t emia salina. World Applied Sci-ences Journal, 25(2), 333-340.
Sreenivasa, R.M., Teja, G., Sirisha, I.R., & Yeduko ndala, R.P. (2015). Screening o f ant imicro bial act ivit y o f mangro ve plant Acant hus ilicifolius o n shrimp and fish pat ho gens. Asian Journal of Plant Science and Research, 5(5), 1-3.
Velmurugan, S., & Cit arasu, T. (2010). Effect o f herbal ant ibact erial ext ract s o n t he gut flo ral changes in Indian whit e shrimp Fenneropenaeus indicus. Roma-nian Biot echnological Let t ers, 15(6), 5709-5717. Wang, H., Cheng, H., Wang, F., Wei, D., & Wang, X.
