Analisis Kadar Protein Total dan Non Protein Nitrogen Pada Pakkat (Calamus caesius Blume.) dengan Metode Kjeldahl

(1)

43

Lampiran 1. Sampel yang digunakan

a

b

Gambar 1. a) Rotan muda segar, b) Pakkat segar

.

a

b

Gambar 2. a) Rotan muda bakar, b) Pakkat bakar

a

b

(2)

44

Lampiran 2. Tumbuhan Pakkat

(3)

(4)

(5)

47

Lampiran 5. Skema Prosedur Preparasi Sampel Pakkat Segar

Rotan Muda

Dikupas kulitnya, diambil bagian dalam yang berwarna putih

Pakkat segar yang dihaluskan

Dihaluskan dengan blender sampai homogen Ditimbang ± 100 g pakkat segar

1 g pakkat segar yang dihaluskan

(6)

48

Lampiran 6. Skema Prosedur Preparasi Sampel Pakkat Bakar

Rotan Muda

Dibakar selama ± 15 menit

Dikupas kulitnya, diambil bagian dalam yang berwarna putih

Pakkat bakar yang dihaluskan

Dihaluskan menggunakan blender sampai homogen

Ditimbang ± 100 g pakkat bakar

1 g pakkat bakar yang dihaluskan

(7)

49

Lampiran 7. Skema Prosedur Preparasi Sampel Pakkat Rebus Rotan Muda

Dikupas kulitnya

Ditimbang ± 100 g pakkat

Pakkat rebus yang dihaluskan

Direbus menggunakan air mendidih 100 °C sebanyak 500 ml (sampel terbenam) selama 15 menit

Didinginkan

Dihaluskan menggunakan blender sampai homogen

1 g pakkat rebus yang dihaluskan

(8)

50

Lampiran 8. Skema Prosedur Penetapan Kadar Air

Pakkat

(Segar, Bakar, Rebus)

Dimasukkan ke dalam cawan yang telah diketahui beratnya

Dikeringkan dalam oven pada suhu 105°C selama 3 jam

Didinginkan dalam eksikator dan ditimbang hingga bobot konstan

Kadar air Pakkat bobot konstan

(9)

51

Lampiran 9. Skema Skrining Fitokimia tanin

Pakkat Segar

Direndam dengan akuades di dalam tabung reaksi

Larutan uji

Dihaluskan menggunakan blender

Ditimbang 0,5 g pakkat

Diambil 1 ml larutan uji

Ditambahkan larutan FeCl3 secukupnya

(10)

52

Lampiran 10. Skema Skrining Fitokimia alkaloid

Pakkat Segar

Ditambahkan 1 ml HCl 2N dan 9 ml air Dihaluskan menggunakan blender Ditimbang 0,5 g pakkat

Ditambahkan 3 tetes pereaksi meyer

Tidak terdapat endapan (-) alkaloid

Dipanaskan di atas penangas air selama 2 menit Didinginkan dan disaring

Endapan _Filtrat

Tabung reaksi 1 Tabung reaksi 2 Tabung reaksi 3

Ditambahkan 3 tetes pereaksi Dragendorff Ditambahkan 3

tetes pereaksi Bouchardat

Endapan cokelat kemerahan (+) alkaloid

(11)

53

Lampiran 11. Skema Prosedur Analisis Kadar Protein Total secara Kjeldahl

1 g pakkat (segar, bakar, rebus)

Dimasukkan ke dalam tabung Kjeldahl Ditambahkan 1 g Selenium

Didestruksi hingga jernih (suhu 375°C selama 30 menit) Ditambahkan 25 ml H2SO4 pekat

Dibiarkan dingin pada suhu kamar

Diaddkan dengan aquabides, dihomogenkan

Dipipet 25 ml, dipindahkan ke dalam labu Kjeldahl Ditambahkan NaOH 40% ( 50 ml)

Didestilasi hingga volume destilat ± 150 ml, Ditampung destilat dalam erlenmeyer penampung yang berisi 25 ml H3BO3 4 % dan 3 tetes indikator

Mengsel (larutan berwarna Hijau Zamrud)

Dititrasi dengan HCl 0,0117 N hingga berwarna ungu

Volume Titrasi

(12)

54

Lampiran 12. Skema Prosedur Pengerjaan Blanko

1 g Selenium

Dimasukkan ke dalam tabung Kjeldahl Ditambahkan 25 ml H2SO4 pekat

Didestruksi hingga jernih (suhu 375°C selama 30 menit) Dibiarkan dingin pada suhu kamar

Diaddkan dengan aquabides, dihomogenkan

Didestilasi hingga volume destilat ± 150 ml,

Ditampung destilat dalam erlenmeyer penampung yang berisi 25 ml H3BO3 4 % dan 3 tetes indikator Mengsel

(larutan berwarna hijau zamrud)

Volume Blanko

Ditambahkan NaOH 40% ( 50 ml)

Dimasukkan ke dalam labu tentukur 100 ml

(13)

55

Lampiran 13. Skema Prosedur Analisis Kadar Protein Murni secara Kjeldahl

1 g pakkat (segar, bakar, rebus)

Dimasukkan kedalam gelas beker 200 ml Ditambahkan 50 ml aquades dan dibiarkan selama 30 menit

Ditambahkan 10 ml larutan ATA 10% dan dibiarkan selama 30 menit

Disaring dan dicuci endapan dengan larutan ATA sebanyak dua kali

Endapan (protein murni) Filtrat (NPN)

Dimasukkan ke dalam tabung Kjeldahl Ditambahkan 1 g Selenium

Ditambahkan 25 ml H2SO4 pekat

Didestruksi hingga jernih (suhu 375°C selama 30 menit) Dibiarkan dingin pada suhu kamar

Diaddkan dengan akuabides, dihomogenkan

Ditambahkan NaOH 40% (50 ml)

Ditampung destilat dalam erlenmeyer penampung yang berisi 25 ml H3BO3 4 % dan 3 tetes indikator Mengsel (larutan

berwarna hijau zamrud)

Didestilasi hingga volume destilat ±150 ml,

Volume Titrasi

(14)

56

Lampiran 14. Data Perhitungan Pembakuan Larutan Standar HCl 0,01 N

No. Berat Natrium Tetraborat (g)

Volume HCl (ml)

1 0,0180 8,15

2 0,0170 7,95

2 0,0150 6,75

N larutan HCl = berat Natrium tetraborat (mg) volume HCl (ml) x BE Natrium tetraborat

N1 =

18,0

8,15 x 190,6 = 0,0116 N

N2 =

17

7,95 x 190,6 = 0,0112 N

N3 =

15

6,75 x 190,6 = 0,0118 N

Normalitas rata-rata (Nr) dan persen deviasi (% d)

Nr1 =

N1 + N2

2 =

0,0116 + 0,0112

2 = 0,0114 N

% d1 = �

(N1 - Nr1)

Nr1 �

x 100% = �0,0116 - 0,0114

0,0114 � x 100% = 1,75%

Nr2 =

N1 + N3

2 =

0,0116 + 0,0118

2 = 0,0117 N

% d2 = �

(N1 - Nr2)

Nr2 �

x 100% = �0,0116 - 0,0117

0,0117 � x 100% = 0,85%

Nr3 =

N2 + N3

2 =

0,0117 + 0,0115

2 = 0,0115 N

% d3 = �

(N2 - Nr3)

Nr3 �

x 100% = �0,0117 - 0,0115

0,0115 � x 100% = 2,6%

(15)

57

Lampiran 15. ContohPerhitungan Kadar Air pada Sampel

Kadar Air (%) = W2−W3

W2−W1 X 100% Dik : W1 = Berat kosong

W2 = Berat kosong + contoh

W3 = Berat kosong dan contoh setelah dikeringkan

Contoh perhitungan kadar air pada pakkat segar 1. W1 = 40,7907

W2 = 43,1412

W3 = 41,0587

Kadar air (%) = 43,1412−41,0587

43,1412−40,7907 x 100%

= 88,65%

2. W1 = 57,5255

W2 = 59,5905

W3 = 57,7560

Kadar air (%) = 59,5905−57,7560

59,5905−57,5255 x 100%

= 88,73%

3. W1 = 58,5667

W2 = 61,6420

W3 = 58,9196

Kadar air (%) = 61,6420−58,9196

61,6420−58,5667 x 100%

= 88,65%

4. W1 = 39,5366

W2 = 41,6126

W3 = 39,7696

Kadar air (%) = 41,6126− 39,7696

41,6126−39,5366 x 100%

(16)

58

5. W1 = 38,0280

W2 = 41,0853

W3 = 38,3795

Kadar air (%) = 41,0853−38,3795

41,0853−38,0280 x 100%

= 88,44%

6. W1 = 38,0271

W2 = 40,1615

W3 = 38,2681

Kadar air (%) = 40,1615−38,2681

40,1615−38,0271 x100%

= 88,78%

Kadar air rata-rata (%) = 88,6+88,8+88,5+88,8+88,5+88,7 6

= 88,68 %

(17)

59

Lampiran 16. Hasil Penetapan Kadar Air

Sam pel Berat Cawan Kosong (gram) Berat Cawan + Sampel (gram) Berat Sampel (gram)

Berat Cawan + Sampel Setelah

Dikeringkan (gram) _Berat

Sampel Kering

Kadar Air (%)

1 2 3

W1 W2 W3

PS

38,0271 40,0615 2,0344 38,2612 38,2583 38,2581 0,2310 88,65 40,7907 42,8412 2,0505 41,0241 41,0220 41,0218 0,2311 88,73 38,0280 40,0853 2,0573 38,2641 38,2617 38,2615 0,2335 88,65 57,5255 59,5905 2,0650 57,7573 57,7562 57,7560 0,2305 88,84 58,5667 60,6420 2,0753 58,8091 58,8068 58,8066 0,2399 88,44 39,5366 41,6126 2,0760 39,7713 39,7698 39,7696 0,2330 88,78

Rata – Rata 88,68

PB

39,5370 41,5654 2,0284 39,7778 39,7753 39,7751 0,2381 88,26 48,0480 50,0863 2,0383 48,2897 48,2874 48,2872 0,2392 88,26 40,0397 42,0786 2,0389 40,2827 40,2806 40,2804 0,2407 88,19 40,8398 42,8964 2,0566 41,0919 41,0796 41,0794 0,2396 88,35 39,5382 41,5993 2,0611 39,7831 39,7809 39,7807 0,2425 88,23 39,5366 41,6126 2,0760 39,7834 39,7818 39,7816 0,2450 88,20

Rata – Rata 88,25

PR

38,7612 40,7677 2,0065 38,9509 38,9486 38,9484 0,1872 90,67 39,5370 41,5654 2,0284 39,7285 39,7263 39,7261 0,1891 90,68 38,0271 40,0615 2,0344 38,2198 38,2177 38,2175 0,1904 90,64 38,0292 40,0644 2,0352 38,2198 38,2177 38,2175 0,1883 90,75 48,0480 50,0863 2,0383 48,2426 48,2403 48,2401 0,1921 90,58 41,1198 43,1720 2,0522 41,3139 41,3116 41,3114 0,1916 90,66

Rata – Rata 90,66

(18)

60

Lampiran 17. Contoh Perhitungan Kadar N-Total pada Sampel

% (N-total) =ml HCl (sampel – blanko)

berat sampel (g) x 1000 x N HCl x 14,007 x Fp x 100% Keterangan:

N HCl = Normalitas HCl hasil pembakuan

Contoh perhitungan kadar N-total pada pakkat segar : Volume larutan HCl titrasi sampel = 14,85 ml

Volume larutan HCl titrasi blanko = 0 ml Fp (faktor pengenceran) = 4

Normalitas larutan HCl = 0,0117 N

Berat sampel = 1,0125 g

% N-total = 14,85

1,0125 x 1000 x 0,0117 x 14,007 x 4 x 100% = 0,961%

= 0,961 g/100g

(19)

61

Lampiran 18. Contoh Perhitungan Kadar N-Protein pada Sampel

% N (N-protein) = ml HCl (sampel – blanko)

berat sampel (g) x 1000 x N HCl x 14,007 x Fp x 100%

Keterangan:

Contoh perhitungan kadar N-protein pada pakkat segar : Volume larutan HCl titrasi sampel = 5,50 ml

Volume larutan HCl titrasi blanko = 0 ml

Fp (faktor pengenceran) = 4

% N-protein = 5,50

1,0017 x 1000 x 0,0117 x 14,007 x 4 x 100% = 0,360%

= 0,360 g/100g

(20)

62

Lampiran 19. Contoh Perhitungan Kadar Protein Total pada Sampel Kadar Protein Total (%) = % N-total x faktor konversi

Keterangan:

Faktor konversi pada pakkat = 6,25

Contoh perhitungan kadar protein total pada pakkat segar:

Contoh perhitungan kadar N-total pada pakkat segar : Volume larutan HCl titrasi sampel = 14,85 ml

Volume larutan HCl titrasi blanko = 0 ml Fp (faktor pengenceran) = 4

Kadar Protein Total (%) = 14,85

1,0125 x 1000 x 0,0117 x 14,007 x 4 x 6,25 x 100% = 6,01%

= 6,01 g/100g

(21)

63

Lampiran 20. Contoh Perhitungan Kadar Protein Murni pada Sampel Kadar Protein Murni (%) = % N-protein x faktor konversi

Keterangan:

Faktor konversi pada pakkat = 6,25

Contoh perhitungan kadar protein murni pada pakkat segar:

N HCl = Normalitas HCl hasil pembakuan Volume larutan HCl titrasi sampel = 5,50 ml Volume larutan HCl titrasi blanko = 0 ml

Fp (faktor pengenceran) = 4

Kadar Protein Total (%) = 5,50

1,0017 x 1000 x 0,0117 x 14,007 x 4 x 6,25 x 100% = 2,25%

= 2,25 g/100g

(22)

64

Lampiran 21. Contoh Perhitungan Kadar Protein Total terhadap Kadar “Dry Basis” Pakkat Segar

Kadar protein total terhadap kadar sampel “dry basis” (%) = a b x c

Keterangan :

a = berat sampel sebelum dikeringkan

b = berat sampel setelah dikeringkan c = kadar protein total (%)

Kadar protein total terhadap kadar “dry basis” pakkat segar

=

2,0344 g

0,231 g x 6,01g/100g = 52,93 g/100g

Perhitungan kadar protein total terhadap kadar “dry basis” pada sampel pakkat

(23)

65

Lampiran 22. Contoh Perhitungan Kadar Protein Total terhadap Kadar “Dry Basis” Pakkat Bakar

Keterangan :

Kadar protein total terhadap kadar “dry basis” pakkat bakar

=

2,0284 g

0,2381 g x 4,86 g/100g = 41,40 g/100g

Perhitungan kadar protein total terhadap kadar “dry basis” pada sampel pakkat

(24)

66

Lampiran 23. Contoh Perhitungan Kadar Protein Total terhadap Kadar “Dry Basis” Pakkat Rebus

Keterangan :

Kadar protein total terhadap kadar “dry basis” pakkat rebus

=

2,0065 g

0,1872 g x 3,07 g/100g = 32,91 g/100g

(25)

67

Lampiran 24. Contoh Perhitungan Kadar Protein Murni terhadap Kadar “Dry Basis” Pakkat Segar

Kadar protein murni terhadap kadar sampel “dry basis” (%) = a b x c

Keterangan :

a = berat sampel sebelum dikeringkan b = berat sampel setelah dikeringkan c = kadar protein murni (%)

Kadar protein murni terhadap kadar “dry basis” pakkat segar

=

2,0344 g

0,231 g x 2,25 g/100g = 19,82 g/100g

Perhitungan kadar protein murni terhadap kadar “dry basis” pada sampel pakkat

(26)

68

Lampiran 25. Contoh Perhitungan Kadar Protein Murni terhadap Kadar “Dry Basis” Pakkat Bakar

Kadar proteinmurni terhadap kadar sampel “dry basis” (%) = a b x c

Keterangan :

b = berat sampel setelah dikeringkan c = kadar protein murni (%)

Kadar protein murni terhadap kadar “dry basis” pakkat bakar

=

2,0284 g

0,2381 g

x 1,79 g/100g = 15,25 g/100g

(27)

69

Lampiran 26. Contoh Perhitungan Kadar Protein Murni terhadap Kadar “Dry Basis” Pakkat Rebus

Kadar proteinmurni terhadap kadar sampel “dry basis” (%) = a b x c

Keterangan :

b = berat sampel setelah dikeringkan c = kadar protein murni (%)

Kadar protein murni terhadap kadar “dry basis” pakkat rebus = 2,0065 g

0,1872 g x 1,08 g/100g = 11,58 g/100g

(28)

70

Lampiran 27. Hasil Penetapan Kadar N-Total pada Sampel 1. Hasil Penetapan Kadar N-Total pada Pakkat segar

No. Kode Sampel

Berat Sampel (g)

Volume Titar Sampel (ml)

Kadar N-Total (g/100g)

1 PS1 1,0125 14,85 0,961

2 PS2 1,0170 14,90 0,960

3 PS3 1,0258 15,05 0,962

4 PS4 1,0259 15,05 0,962

5 PS5 1,0356 15,15 0,959

6 PS6 1,0361 15,15 0,959

2. Hasil Penetapan Kadar N-Total pada Pakkat Bakar

No. Kode Sampel Berat Sampel (g) Volume Titar Sampel (ml) Kadar N-Total (g/100g)

1 PB1 1,0039 11,90 0,777

2 PB2 _1,0067 _11,90 0,775

3 PB3 _1,0143 _12,00 0,776

4 PB4 _1,0183 _12,00 0,772

5 PB5 _1,0203 _12,05 0,774

6 PB6 _1,0252 _12,15 0,777

3. Hasil Penetapan Kadar N-Total pada Pakkat Rebus

No. Kode Sampel Berat Sampel (g) Volume Titar Sampel (ml) Kadar N-Total (g/100g)

1 PR1 1,0022 7,50 0,491

2 PR2 _1,0126 _7,60 0,492

3 PR3 _1,0137 _7,60 0,491

4 PR4 _1,0159 _7,65 0,494

5 PR5 _1,0293 _7,70 0,490

(29)

71

Lampiran 28. Hasil Penetapan Kadar N-Protein pada Sampel 1. Hasil Penetapan Kadar N-Protein pada Pakkat Segar

No. Kode Sampel Berat Sampel (g) Volume Titar sampel (ml) Kadar N-Protein (g/100g)

1 PS1 1,0017 5,50 0,360

2 PS2 _1,0154 _5,60 _0,362

3 PS3 _1,0171 _5,60 _0,361

4 PS4 _1,0199 _5,60 _0,360

5 PS5 _1,0285 _5,65 _0,360

6 PS6 _1,0291 _5,65 _0,360

2. Hasil Penetapan Kadar N-Protein pada Pakkat Bakar

No. Kode Sampel Berat Sampel (g) Volume Titar sampel (ml) Kadar N-Protein (g/100g)

1 PB1 1,0165 4,45 0,287

2 PB2 _1,0198 _4,45 _0,286

3 PB3 _1,0239 _4,50 _0,288

4 PB4 _1,0291 _4,50 _0,287

5 PB5 _1,0346 _4,55 _0,288

6 PB6 _1,0395 _4,55 _0,287

3. Hasil Penetapan Kadar N-Protein pada Pakkat Rebus No. Kode

Sampel Berat Sampel (g) Volume Titar sampel (ml) Kadar N-Protein (g/100g)

1 PR1 1,0058 2,65 0,173

2 PR2 _1,0095 _2,65 _0,172

3 PR3 _1,0249 _2,75 _0,176

4 PR4 _1,0256 _2,75 _0,176

5 PR5 _1,0301 _2,80 _0,177

(30)

72

Lampiran 29. Hasil Penetapan Kadar Protein Total pada Sampel 1. Hasil Penetapan Kadar Protein Total pada Pakkat Segar

No. Kode Sampel Berat Sampel (g) Volume Titar Sampel (ml) Kadar Protein Total (g/100g)

Kadar Protein Total (g/100g) Terhadap “wet basis”

Terhadap “dry basis”

1 PS1 _1,0125 _14,85 _6,01 _6,01 _52,93

2 PS2 _1,0170 _14,90 _6,00 _6,00 _53,24

3 PS3 _1,0258 _15,05 _6,01 _6,01 _52,95

4 PS4 _1,0259 _15,05 _6,01 _6,01 _53,84

5 PS5 _1,0356 _15,15 _5,99 _5,99 _51,82

6 PS6 _1,0361 _15,15 _5,99 _5,99 _53,37

2. Hasil Penetapan Kadar Protein Total pada Pakkat Bakar

1 PB1 _1,0039 _11,90 _4,86 _4,86 _41,40

2 PB2 _1,0067 _11,90 _4,84 _4,84 _41,24

3 PB3 _1,0143 _12,00 _4,85 _4,85 _41,08

4 PB4 _1,0183 _12,00 _4,83 _4,83 _41,46

5 PB5 _1,0203 _12,05 _4,84 _4,84 _41,14

6 PB6 _1,0252 _12,15 _4,86 _4,86 _41,18

3. Hasil Penetapan Kadar Protein Total pada Pakkat Rebus

1 PR1 _1,0022 _7,50 _3,07 _3,07 _32,91

2 PR2 _1,0126 _7,60 _3,08 _3,08 _33,04

3 PR3 _1,0137 _7,60 _3,07 _3,07 _32,80

4 PR4 _1,0159 _7,65 _3,09 _3,09 _33,40

5 PR5 _1,0293 _7,70 _3,06 _3,06 _32,47

(31)

73

Lampiran 30. Hasil Penetapan Kadar Protein Murni pada Sampel 1. Hasil Penetapan Kadar Protein Murni pada Pakkat Segar

No. Kode Sampel Berat Sampel (g) Volume Titar Sampel (ml) Kadar Protein Murni (g/100g)

Kadar Protein Murni (g/100g) Terhadap “wet basis”

1 PS1 _1,0017 _5,50 _2,25 _2,25 _19,82

2 PS2 _1,0154 _5,60 _2,26 _2,26 _20,05

3 PS3 _1,0171 _5,60 _2,26 _2,26 _19,91

4 PS4 _1,0199 _5,60 _2,25 _2,25 _20,16

5 PS5 _1,0285 _5,65 2,25 _2,25 _19,46

6 PS6 _1,0291 _5,65 _2,25 _2,25 _20,05

2. Hasil Penetapan Kadar Protein Murni pada Pakkat Bakar

1 PB1 _1,0165 _4,45 _1,79 _1,79 _15,25

2 PB2 _1,0198 _4,45 _1,79 _1,79 _15,25

3 PB3 _1,0239 _4,50 _1,80 _1,80 _15,25

4 PB4 _1,0291 _4,50 _1,79 _1,79 _15,36

5 PB5 _1,0346 _4,55 _1,80 _1,80 _15,30

6 PB6 _1,0395 _4,55 _1,79 _1,79 _15,17

3. Hasil Penetapan Kadar Protein Murni pada Pakkat Rebus

1 PR1 _1,0058 _2,65 _1,08 _1,08 _11,58

2 PR2 _1,0095 _2,65 _1,08 _1,08 _11,58

3 PR3 _1,0249 _2,75 _1,10 _1,10 _11,75

4 PR4 _1,0256 _2,75 _1,10 _1,10 _11,89

5 PR5 _1,0301 _2,80 _1,11 _1,11 _11,78

(32)

74

Lampiran 31. Perhitungan Analisis Statistik Uji T untuk mencari Kadar N-Total Sebenarnya pada Pakkat Segar

No. Kadar N-Total (g/100g)

(Xi) � − �� (� − ��)

2

1 0,961 0 0

2 0,960 -0,001 0,000001

3 0,962 0,001 0,000001

4 0,962 0,001 0,000001

5 0,959 -0,002 0,000004

6 0,959 -0,002 0,000004

∑ �= 5,763 _�₍_{� −} _��₎₂

= 0,000011

�� = 0,961

SD =

�

∑(�−��)2 �−1

=

�

0,000011

6 - 1

= 0,0015

Uji statistik pada taraf kepercayaan 99% maka nilai α = 0,01 ; dk = n-1 = 6-1 = 5

Diperoleh ttabel= (1 – ½ α); dk

= (1 – 0,005); 5 = 0,995; 5 = 4,03

Syarat penerimaan data apabila thitung ≤ ttabel

thitung =

�

�−��

��√�

�

thitung 1 =

�

0

0,0015√6

�

= 0 (data diterima)

thitung 2 =

�

-0,001

(33)

75

thitung 3 =

�

0,001

0,0015√6

�

= 0,2722 (data diterima)

thitung4 =

�

0,001

0,0015√6

�

thitung5 =

�

-0,002

0,0015√6

�

thitung6 =

�

-0,002

0,0015√6

�

Semua data diterima, maka kadar N-total sebenarnya pada pakkat segar untuk α = 0,01; dk = n-1 = 6-1= 5 adalah:

μ = �� ± ttabel x

�� √�

= (0,961 ± 4,03 x 0,0015 √6 )

(34)

76

Lampiran 32. Perhitungan Analisis Statistik Uji T untuk mencari Kadar N-Total Sebenarnya pada Pakkat Bakar

(Xi) � − �� (� − ��)

2

1 0,777 0,002 0,000004

2 0,775 0 0

3 0,776 0,001 0,000001

4 0,772 -0,003 0,000009

5 0,774 -0,001 0,000001

6 0,777 0,002 0,000004

∑ �= 4,651 _�₍_{� −} _��₎₂

= 0,000019

�� = 0,775

SD =

�

∑(�−��)

2

�−1

=

�

0,000019

6 - 1

= 0,0019

= (1 – 0,005); 5 = 0,995; 5 = 4,03

thitung =

�

X−X� SD√n

�

thitung 1 =

�

0,002

0,0019√6

�

thitung 2 =

�

0

(35)

77

thitung 3 =

�

0,001

0,0019√6

�

thitung 4 =

�

-0,003

0,0019√6

�

thitung5=

�

-0,001

0,0019√6

�

thitung6=

�

0,002

0,0019√6

�

Semua data diterima, maka kadar N-total sebenarnya pada pakkat bakar untuk α = 0,01; dk = n-1 = 6-1= 5 adalah:

�� √�

= (0,775 ± 4,03 x 0,0019 √6 )

(36)

78

Lampiran 33. Perhitungan Analisis Statistik Uji T untuk mencari Kadar N-Total Sebenarnya pada Pakkat Rebus

(Xi) � − �� (� − ��)

2

1 0,491 0 0

2 0,492 0,001 0,000001

3 0,491 0 0

4 0,494 0,003 0,000009

5 0,490 -0,001 0,000001

6 0,490 -0,001 0,000001

∑ �= 2,948 _�₍_{� −} _��₎₂

= 0,000012

�� = 0,491

SD =

�

∑(�−��)

2

�−1

=

�

0,000012

6 - 1

= 0,0015

= (1 – 0,005); 5 = 0,995; 5 = 4,03

thitung=

�

�−��

��√�

�

thitung1=

�

0

0,0015 √6

�

= 0 (data diterima)

thitung2=

�

0,001

(37)

79

thitung3=

�

0

0,0015 √6

�

= 0 (data diterima)

thitung4=

�

0,003

0,0015 √6

�

thitung5=

�

-0,001

0,0015 √6

�

thitung6=

�

-0,001

0,0015 √6

�

Semua data diterima, maka kadar N-total sebenarnya pada pakkat rebus untuk α = 0,01; dk = n-1 = 6-1= 5 adalah:

�� √�

= (0,491 ± 4,03 x 0,0015 √6 )

(38)

80

Lampiran 34. Perhitungan Analisis Statistik Uji T untuk mencari Kadar N-Protein Sebenarnya pada Pakkat Segar

No. Kadar N-Protein (g/100g)

(Xi) � − �� (� − ��)

2

1 0,360 -0,001 0,000001

2 0,362 0,001 0,000001

3 0,361 0 0

4 0,360 -0,001 0,000001

5 0,360 -0,001 0,000001

6 0,360 -0,001 0,000001

∑ �= 2,163 _�₍_{� −} _��₎₂

= 0,000005

�� = 0,361

SD =

�

∑(�−��)

2

�−1

=

�

0,000005

6-1

= 0,001

= (1 – 0,005); 5 = 0,995; 5 = 4,03

thitung=

�

�−��

��√�

�

thitung1=

�

-0,001

0,001 √6

�

thitung2=

�

0,001

(39)

81

thitung3=

�

0

0,001 √6

�

= 0 (data diterima)

thitung4=

�

-0,001

0,001 √6

�

thitung5=

�

-0,001

0,001√6

�

thitung6=

�

-0,001

0,001 √6

�

Semua data diterima, maka kadar N-protein sebenarnya pada pakkat segar untuk α = 0,01; dk = n-1 = 6-1= 5 adalah:

�� √�

= (0,361 ± 4,03 x 0,001 √6 )

(40)

82

Lampiran 35. Perhitungan Analisis Statistik Uji T untuk mencari Kadar N-Protein Sebenarnya pada Pakkat Bakar

(Xi) � − �� (� − ��)2

1 0,287 0 0

2 0,286 -0,001 0,000001

3 0,288 0,001 0,000001

4 0,287 0 0

5 0,288 0,001 0,000001

6 0,287 0 0

∑ �= 1,723 _�₍_{� −} _��₎₂

= 0,000003

�� = 0,287

SD =

�

∑(�−��)

2

�−1

=

�

0,000003

6-1

= 0,0008

= (1 – 0,005); 5 = 0,995; 5 = 4,03

thitung=

�

�−��

��√�

�

thitung1=

�

0

0,0008 √6

�

= 0 (data diterima)

thitung2=

�

-0,001

0,0008√6

�

thitung3=

�

0,001

(41)

83

thitung4=

�

0

0,0008 √6

�

= 0 (data diterima)

thitung5=

�

0,001

0,0008 √6

�

thitung6=

�

0

0,0008 √6

�

= 0 (data diterima)

Semua data diterima, maka kadar N-protein sebenarnya pada pakkat bakar untuk α = 0,01; dk = n-1 = 6-1= 5 adalah:

�� √�

= (0,287 ± 4,03 x 0,0008 √6 )

(42)

84

Lampiran 36. Perhitungan Analisis Statistik Uji T untuk mencari Kadar N-Protein Sebenarnya pada Pakkat Rebus

(Xi) � − �� (� − ��)

2

1 0,173 -0,003 0,000009

2 0,172 -0,004 0,000016

3 0,176 0 0

4 0,176 0 0

5 0,177 0,001 0,000001

6 0,179 0,003 0,900001

∑ �= 1,053 _�₍_{� −} _��₎₂

= 0,000035

�� = 0,176

SD =

�

∑(�−��)

2

�−1

=

�

0,000035

6-1

= 0,0026

= (1 – 0,005); 5 = 0,995; 5 = 4,03

thitung=

�

�−��

��√�

�

thitung1=

�

-0,003

0,0026 √6

�

thitung2=

�

-0,004

(43)

85

thitung3=

�

0

0,0026 √6

�

= 0 (data diterima)

thitung4=

�

0

0,0026 √6

�

= 0 (data diterima)

thitung5=

�

0,001

0,0026 √6

�

thitung6=

�

0,003

0,0026 √6

�

Semua data diterima, maka kadar N-protein sebenarnya pada pakkat rebus untuk α = 0,01; dk = n-1 = 6-1= 5 adalah:

�� √�

= (0,176 ± 4,03 x 0,0026 √6 )

(44)

86

Lampiran 37. Perhitungan Kadar NPN pada Sampel

% NPN = % N-total - % N-protein

1. Pakkat Segar

% N-total = 0,961% % N-protein = 0,361%

% NPN = % N-total - % N-protein = 0,961% – 0,361% = 0,600%

2. Pakkat Bakar

% N-total = 0,775% % N-protein = 0,287%

% NPN = % N-total - % N-protein = 0,775% – 0,287%

= 0,488%

3. Pakkat Rebus

% N-total = 0,491% % N-protein = 0,176%

(45)

87

Lampiran 38. Hasil Kadar N-Total, N-Protein, dan NPN pada Sampel

No. Sampel

Kadar N-total (g/100g) Rata-rata

Kadar N-protein (g/100g) Rata-rata

Kadar NPN (%)

(46)

88

Lampiran 39. Perhitungan Analisis Statistik Uji T untuk mencari Kadar Protein Total Sebenarnya terhadap Kadar “Wet Basis” Pakkat Segar

No.

Kadar Protein Total (g/100g)

(Xi)

� − �� (� − ��)2

1 6,01 0,01 0,0001

2 6,00 0 0

3 6,01 0,01 0,0001

4 6,01 0,01 0,0001

5 5,99 -0,01 0,0001

6 5,99 -0,01 0,0001

∑ �= 36,01 _�₍_{� −} _��₎2

= 0,0005

�� = 6,00

SD =

�

∑(�−��)

2

�−1

=

�

0,0005

6-1

= 0,01

= (1 – 0,005); 5 = 0,995; 5 = 4,03

thitung=

�

�−��

��√�

�

thitung1=

�

0,01

0,01 √6

�

thitung2=

�

0

(47)

89

thitung3=

�

0,01

0,01 √6

�

thitung4=

�

0,01

0,01 √6

�

thitung5=

�

-0,01

0,01 √6

�

thitung6=

�

-0,01

0,01 √6

�

Semua data diterima, maka kadar protein total sebenarnya terhadap kadar “wet basis” pada pakkat segar untuk α = 0,01; dk = n-1 = 6-1= 5 adalah:

�� √�

= (6,00 ± 4,03 x 0,01 √6)

(48)

90

Lampiran 40. Perhitungan Analisis Statistik Uji T untuk mencari Kadar Protein Total Sebenarnya terhadap Kadar “Wet Basis” Pakkat Bakar

No. Kadar Protein Total (g/100g)

(Xi) � − �� (� − ��)

2

1 4,86 0,02 0,0004

2 4,84 0 0

3 4,85 0,01 0,0001

4 4,83 -0,01 0,0001

5 4,84 0 0

6 4,86 0,02 0,0004

∑ �= 29,08 _�₍_{� −} _��₎₂

= 0,001

�� = 4,84

SD =

�

∑(�−��)

2

�−1

=

�

0,001

6-1

= 0,0141

= (1 – 0,005); 5 = 0,995; 5 = 4,03

thitung=

�

�−��

��√�

�

thitung1=

�

0,02

0,0141 √6

�

thitung2=

�

0

(49)

91

thitung3=

�

0,01

0,0141 √6

�

thitung4=

�

-0,01

0,0141 √6

�

thitung5=

�

0

0,0141 √6

�

= 0 (data diterima)

thitung6=

�

0,02

0,0141 √6

�

Semua data diterima, maka kadar protein total sebenarnya terhadap kadar “wet basis” pada pakkat bakar untuk α = 0,01; dk = n-1 = 6-1= 5 adalah:

μ = �� ± ttabel x ��

√�

= (4,84 ± 4,03 x 0,0141 √6 )

(50)

92

Lampiran 41. Perhitungan Analisis Statistik Uji T untuk mencari Kadar Protein Total Sebenarnya terhadap Kadar “Wet Basis” Pakkat Rebus

(Xi) � − �� (� − ��)

2

1 3,07 0 0

2 3,08 0,01 0,0001

3 3,07 0 0

4 3,09 0,02 0,0004

5 3,06 -0,01 0,0001

6 3,06 -0,01 0,0001

∑ �= 18,43 _�₍_{� −} _��₎₂

= 0,0007

�� = 3,07

SD =

�

∑(��−��)

2

�−1

=

�

0,0007

6-1

= 0,0118

= (1 – 0,005); 5 = 0,995; 5 = 4,03

thitung=

�

�−��

��√�

�

thitung1=

�

0

0,0118 √6

�

= 0 (data diterima)

thitung2=

�

0,01

(51)

93

thitung3=

�

0

0,0118 √6

�

= 0 (data diterima)

thitung4=

�

0,02

0,0118 √6

�

thitung5=

�

-0,01

0,0118 √6

�

thitung6=

�

-0,01

0,0118 √6

�

Semua data diterima, maka kadar protein total sebenarnya terhadap kadar “wet basis” pada pakkat rebus untuk α = 0,01; dk = n-1 = 6-1= 5 adalah:

�� √�

= (3,07 ± 4,03 x 0,0118 √6 )

(52)

94

Lampiran 42. Perhitungan Analisis Statistik Uji T untuk mencari Kadar Protein Murni Sebenarnya terhadap Kadar “Wet Basis” Pakkat Segar

No. Kadar Protein Murni (g/100g)

(Xi) � − �� (� − ��)

2

1 2.25 0 0

2 2.26 0,01 0,0001

3 2.26 0,01 0,0001

4 2.25 0 0

5 2.25 0 0

6 2.25 0 0

∑ �= 13,52 _�₍_{� −} _��₎₂

= 0,0002

�� = 2,25

SD =

�

∑(�−��)

2

�−1

=

�

0,0002

6-1

= 0,0063

= (1 – 0,005); 5 = 0,995; 5 = 4,03

thitung=

�

�−��

��√�

�

thitung1=

�

0

0,0063√6

�

= 0 (data diterima)

thitung2=

�

0,01

(53)

95

thitung3=

�

0,01

0,0063 √6

�

thitung4=

�

0

0,0063 √6

�

= 0 (data diterima)

thitung5=

�

0

0,0063 √6

�

= 0 (data diterima)

thitung6=

�

0

0,0063√6

�

= 0 (data diterima)

Semua data diterima, maka kadar protein murni sebenarnya terhadap kadar “wet basis” pada pakkat segar untuk α = 0,01; dk = n-1 = 6-1= 5 adalah:

�� √�

= (2,25 ± 4,03 x 0,0063 √6 )

(54)

96

Lampiran 43. Perhitungan Analisis Statistik Uji T untuk mencari Kadar Protein Murni Sebenarnya terhadap Kadar “Wet Basis” Pakkat Bakar

(Xi) � − �� (� − ��)

2

1 1,79 0 0

2 1,79 0 0

3 1,80 0,01 0,0001

4 1,79 0 0

5 1,80 0,01 0,0001

6 1,79 0 0

∑ �= 10,76 _�₍_{� −} _��₎₂

= 0,0002

�� = 1,79

SD =

�

∑(�−��)

2

�−1

=

�

0,0002

6-1

= 0,0063

= (1 – 0,005); 5 = 0,995; 5 = 4,03

thitung=

�

�−��

��√�

�

thitung1=

�

0

0,0063 √6

�

= 0 (data diterima)

thitung2=

�

0

(55)

97

thitung3=

�

0,01

0,0063 √6

�

thitung4=

�

0

0,0063 √6

�

= 0 (data diterima)

thitung5

�

0,01

0,0063 √6

�

= = 0,6480 (data diterima)

thitung6=

�

0

0,0063√6

�

= 0 (data diterima)

Semua data diterima, maka kadar protein murni sebenarnya terhadap kadar “wet basis” pada pakkat bakar untuk α= 0,01; dk = n-1 = 6-1= 5 adalah:

�� √�

= (1,79 ± 4,03 x 0,0063 √6 )

(56)

98

Lampiran 44. Perhitungan Analisis Statistik Uji T untuk mencari Kadar Protein Murni Sebenarnya terhadap Kadar “Wet Basis” Pakkat Rebus

(Xi) � − �� (� − ��)

2

1 1,08 -0,02 0,0004

2 1,08 -0,02 0,0004

3 1,10 0 0

4 1,10 0 0

5 1,11 0,01 0,0001

6 1,12 0,02 0,0004

∑ �= 6,59 _�₍_{� −} _��₎₂

= 0,0013

�� = 1,10

SD =

�

∑(�−��)

2

�−1

=

�

0,0013

6-1

= 0,0161

= (1 – 0,005); 5 = 0,995; 5 = 4,03

thitung=

�

�−��

��√�

�

thitung1=

�

-0,02

0,0161 √6

�

thitung2=

�

-0,02

(57)

99

thitung3=

�

0

0,0161 √6

�

= 0 (data diterima)

thitung4=

�

0

0,0161 √6

�

= 0 (data diterima)

thitung5=

�

0,01

0,0161 √6

�

thitung6=

�

-0,02

0,0161 √6

�

Semua data diterima, maka kadar protein murni sebenarnya terhadap kadar “wet basis” pada pakkat rebus untuk α = 0,01; dk = n-1 = 6-1= 5 adalah:

�� √�

= (1,10 ± 4,03 x 0,0161 √6 )

(58)

100

Lampiran 45. Perhitungan Analisis Statistik Uji T untuk mencari Kadar Protein Total Sebenarnya terhadap Kadar “Dry Basis” Pakkat Segar

(Xi) � − �� (� − ��)

2

1 52,93 -0,1 0,01

2 53,24 0,21 0,0441

3 52,95 -0,08 0,0064

4 53,84 0,81 0,6561

5 51,82 -1,21 1,4641

6 53,37 0,34 0,1156

∑ �= 318,15 _�₍_{� −} _��₎₂

= 2,2963

�� = 53,03

SD =

�

∑(�−��)

2

�−1

=

�

2,2963

6-1

= 0,6777

Uji statistik pada taraf kepercayaan 99% maka nilai α = 0,01 ; dk = n-1 = 6-1 = 5 Diperoleh ttabel= (1 – ½ α); dk

= (1 – 0,005); 5 = 0,995; 5 = 4,03

thitung=

�

�−��

��√�

�

thitung1=

�

-0,1

0,6777√6

�

thitung2=

�

0,21

(59)

101

thitung3=

�

0,08

0,6777√6

�

thitung4=

�

0,81

0,6777√6

�

thitung5=

�

-1,21

0,6777√6

�

thitung6=

�

0,34

0,6777√6

�

Semua data diterima, maka kadar protein total sebenarnya terhadap kadar “dry basis” pakkat segar untuk α = 0,01; dk = n-1 = 6-1= 5 adalah:

�� √�

= (53,03 ± 4,03 x 0,6777 √6 )

(60)

102

Lampiran 46. Perhitungan Analisis Statistik Uji T untuk mencari Kadar Protein Total Sebenarnya terhadap Kadar “Dry Basis” Pakkat Bakar

(Xi) � − �� (� − ��)

2

1 41,40 0,15 0,0225

2 41,24 -0,01 0,0001

3 41,08 -0,17 0,0289

4 41,46 0,21 0,0441

5 41,14 -0,11 0,0121

6 41,18 -0,07 0,0049

∑ �= 247,5 _�₍_{� −} _��₎₂

= 0,1126

�� = 41,25

SD =

�

∑(�−��)

2

�−1

=

�

0,1126

6-1

= 0,1501

= (1 – 0,005); 5 = 0,995; 5 = 4,03

thitung=

�

�−��

��√�

�

thitung1=

�

0,15

0,1501√6

�

thitung2=

�

-0,01

(61)

103

thitung3=

�

-0,17

0,1501√6

�

thitung4=

�

0,21

0,1501√6

�

thitung5=

�

-0,11

0,1501√6

�

thitung6=

�

-0,07

0,1501√6

�

Semua data diterima, maka kadar protein total sebenarnya terhadap kadar “dry basis” pakkat bakar untuk α = 0,01; dk = n-1 = 6-1= 5 adalah:

�� √�

= (41,25 ± 4,03 x 0,1501 √6 )

(62)

104

Lampiran 47. Perhitungan Analisis Statistik Uji T untuk mencari Kadar Protein Total Sebenarnya terhadap Kadar “Dry Basis” Pakkat Rebus

(Xi) � − �� (� − ��)

2

1 32,91 0,01 0,0001

2 33,04 0,14 0,0196

3 32,80 -0,10 0,0100

4 33,40 0,50 0,2500

5 32,47 -0,43 0,1849

6 32,78 -0,12 0,0144

∑ �= 197,4 _�₍_{� −} _��₎₂

= 0,4790

�� = 32,9

SD =

�

∑(�−��)

2

�−1

=

�

0,4790

6-1

= 0,3095

= (1 – 0,005); 5 = 0,995; 5 = 4,03

thitung=

�

�−��

��√�

�

thitung1=

�

0,01

0,3095√6

�

thitung2=

�

0,14

(63)

105

thitung3=

�

-0,10

0,3095√6

�

thitung4=

�

0,50

0,3095√6

�

thitung5=

�

-0,43

0,3095√6

�

thitung6=

�

-0,12

0,3095√6

�

Semua data diterima, maka kadar protein total sebenarnya terhadap kadar “dry basis” pakkat rebus untuk α = 0,01; dk = n-1 = 6-1= 5 adalah:

�� √�

= (41,25 ± 4,03 x 0,3095 √6 )

(64)

106

Lampiran 48. Perhitungan Analisis Statistik Uji T untuk mencari Kadar Protein Murni Sebenarnya terhadap Kadar “Dry Basis” Pakkat Segar

(Xi) � − �� (� − ��)

2

1 19,82 -0,09 0,0081

2 20,05 0,14 0,0196

3 19,91 0 0

4 20,16 0,25 0,0625

5 19,46 -0,45 0,2025

6 20,05 0,14 0,0196

∑ �= 119,45 _�₍_{� −} _��₎₂

= 0,3123

�� = 19,91

SD =

�

∑(�−��)

2

�−1

=

�

0,3123

6-1

= 0,2499

= (1 – 0,005); 5 = 0,995; 5 = 4,03

thitung=

�

�−��

��√�

�

thitung1=

�

-0,09

0,2499√6

�

thitung2=

�

0,14

(65)

107

thitung3=

�

0

0,2499√6

�

= 0 (data diterima)

thitung4=

�

0,25

0,2499√6

�

thitung5=

�

-0,45

0,2499√6

�

thitung6=

�

0,14

0,2499√6

�

Semua data diterima, maka kadar protein murni sebenarnya terhadap kadar “dry basis” pakkat segar untuk α = 0,01; dk = n-1 = 6-1= 5 adalah:

�� √�

= (19,91 ± 4,03 x 0,2499 √6 )

(66)

108

Lampiran 49. Perhitungan Analisis Statistik Uji T untuk mencari Kadar Protein Murni Sebenarnya terhadap Kadar “Dry Basis” Pakkat Bakar

(Xi) � − �� (� − ��)

2

1 15,25 -0,01 0,0001

2 15,25 -0,01 0,0001

3 15,25 -0,01 0,0001

4 15,36 0,10 0,0100

5 15,30 0,04 0,0016

6 15,17 -0,09 0,0081

∑ �= 91,58 _�₍_{� −} _��₎₂

= 0,02

�� = 15,26

SD =

�

∑(�−��)

2

�−1

=

�

0,02

6-1

= 0,0632

= (1 – 0,005); 5 = 0,995; 5 = 4,03

thitung=

�

�−��

��√�

�

thitung1=

�

-0,01

0,0632√6

�

thitung2=

�

-0,01

(67)

109

thitung3=

�

-0,01

0,0632√6

�

thitung4=

�

0,10

0,0632√6

�

thitung5=

�

0,04

0,0632√6

�

thitung6=

�

-0,09

0,0632√6

�

Semua data diterima, maka kadar protein murni sebenarnya terhadap kadar “dry basis” pakkat bakar untuk α = 0,01; dk = n-1 = 6-1= 5 adalah:

�� √�

= (15,26 ± 4,03 x 0,0632 √6 )

(68)

110

Lampiran 50. Perhitungan Analisis Statistik Uji T untuk mencari Kadar Protein Murni Sebenarnya terhadap Kadar”Dry Basis” Pakkat Rebus

(Xi) � − �� (� − ��)

2

1 11,58 -0,18 0,0324

2 11,58 -0,18 0,0324

3 11,75 -0,01 0,0001

4 11,89 0,13 0,0169

5 11,78 -0,02 0,0004

6 11,99 0,23 0,0529

∑ �= 70,57 _�₍_{� −} _��₎₂

= 0,1351

�� = 11,76

SD =

�

∑(�−��)

2

�−1

=

�

0,1351

6-1

= 0,1644

= (1 – 0,005); 5 = 0,995; 5 = 4,03

thitung=

�

�−��

��√�

�

thitung1=

�

-0,18

0,1644√6

�

thitung2=

�

-0,18

(69)

111

thitung3=

�

-0,01

0,1644√6

�

thitung4=

�

0,13

0,1644√6

�

thitung5=

�

-0,02

0,1644√6

�

thitung6=

�

0,23

0,1644√6

�

Semua data diterima, maka kadar protein murni sebenarnya terhadap kadar “dry basis” pakkat rebus untuk α = 0,01; dk = n-1 = 6-1= 5 adalah:

�� √�

= (11,76 ± 4,03 x 0,1644 √6 )

(70)

112

Lampiran 51. Perhitungan Kadar NPN terhadap N-Total Sampel

Kadar NPN terhadap N-total (%) = % NPN

% N-total x 100% 1. Pakkat Segar

% NPN = 0,600% % N-total = 0,961%

Kadar NPN terhadap N-total = % NPN

% N-total x 100%

=0,600%

0,961% x 100%

= 62,43%

2. Pakkat Bakar

% NPN = 0,488% % N-total = 0,775%

% N-total x 100%

=0,488%

0,775% x 100%

= 62,97%

3. Pakkat Rebus

% NPN = 0,315% % N-total = 0,491%

% N-total x 100%

=0,315%

0,491% x 100%

(71)

113

Lampiran 52. Hasil Kadar Protein Total, Protein Murni, dan NPN terhadap N-Total pada Bahan Sampel

No. Sampel

Kadar Protein Total (g/100g) Rata-rata

Kadar Protein Murni (g/100g) Rata-rata

Kadar NPN dihitung terhadap

N-Total Sampel (%) 1 Pakkat Segar 6,00 ± 0,0165

a

53,03 ± 1,1156b

2,25 ± 0,0104a

19,91 ± 0,4114b 62,43 2 Pakkat Bakar 4,82 ±0,0232

a

41,25 ± 0,247b

1,79 ± 0,0104a

15,26 ± 0,2471b 62,97 3 Pakkat Rebus 3,06 ± 0,0194

a

32,9 ± 0,5095b

1,10 ± 0,0265a

11,76 ± 0,2706b 64,15

Keterangan: a: dihitung terhadap “dry basis”

b

(72)

(73)

115

Lampiran 54. Gambar Rangkaian Alat Dekstruksi dan Destilasi

Scrubber

Labu Kjeldahl

Pemanas

Gambar 5. Rangkaian alat dekstruksi

Destilat Hasil Destruksi

(74)

116

Lampiran 55. Gambar Hasil Destruksi, Destilasi dan Titrasi

Ket:

1. Pakkat Bakar 2. Pakkat Segar 3. Pakkat Rebus

[image:74.595.139.353.106.430.2]

1 2 3

Gambar 7. Sampel sebelum didestruksi

Ket:

1. Pakkat Bakar 2. Pakkat Segar 3. Pakkat Rebus

1

2

3

[image:74.595.114.413.464.718.2]

(75)

[image:75.595.145.301.79.359.2]

117

Gambar 9. Hasil Destilasi (hijau zamrud) [image:75.595.144.311.404.714.2]

(76)

40

DAFTAR PUSTAKA

Aisyah. (2008). Analisis Protein.

Almatsier, S. (2004). Prinsip Dasar Ilmu Gizi. Jakarta: Gramedia Pustaka Utama. Hal. 77-78, 96-97, 101, 104.

Budiyanto, M.A.K. (2004). Dasar-Dasar Ilmu Gizi. Edisi Revisi. Malang: UMM Press. Hal. 37-40.

Chang, S.K.C. (2003). Protein Analysis. Dalam Buku Food Analysis. Edisi III. Editor: S. Suzanne Nielsen. New York: Plenum Publisher. Hal. 135-138.

Dalilah, E. (2006). Evaluasi Nilai Gizi dan Karakteristik Protein Daging Sapi dan Hasil Olahannya. Skripsi. Bogor: Fakultas Peternakan. Institut Pertanian Bogor. Hal. 58.

Ditjen. POM. (1979). Farmakope Indonesia. Edisi III. Jakarta: Departemen Kesehatan RI. Hal. 744, 748.

Estiasih, T., Wijayanti, N., Purwantiningrum, I., Bekti, W., Nurcholis, M., Heppy, F., Maligan, J.M., dan Sarita, I. (2012). Modul Praktikum Biokimia dan Analisis Pangan. Malang: Teknologi Pertanian Universitas Brawijaya. Hal. 43.

Farnsworth, N.R. (1966). Biological and Phytochemical Screening of Plants.

Journal of Pharmaceutical Sciences. 55(3): 245-247, 264. Girindra, A. (1993). Biokimia 1. Jakarta: Gramedia. Hal. 80-82.

Harmita. (2004). Petunjuk Pelaksanaan Validasi Metode dan Cara Perhitungannya. Majalah Ilmu Kefarmasian. I (3): 122.

Harrist, E. (2014)

Harvey, D. (2000). Modern Analytical Chemistry. USA: McGraw-Hills Companies, Inc. Hal. 85.

Herbarium Medanense. (2015). Identifikasi Tumbuhan. Medan: Herbarium

(77)

41

Jasni, Krisdianto, Kalima, T., dan Abdurachman. (2012). Atlas Rotan Indonesia.

Jilid 3. Bogor: Pusat Penelitian Dan Pengembangan Keteknikan Kehutanan Dan Pengolahan Hasil Hutan. Hal. 1.

Katoch, R. (2011). Analytical Techniques in Biochemistry and Molecular Biology. New York: Springer. Hal. 332-333.

Kenkel, J. (2003). Analytical Chemistry for Technicians. Edisi III. USA: CRC Press LLC. Hal. 110.

Krohn, R.I. (2005). The Colorimetric Detection and Quantitation of Total Protein.

Dalam Buku Handbook of Food Analytical Chemistry. Editor: Ronald E. Wrolstad. New Jersey: John Wiley and Sons Inc. Hal. 77-90.

Manan, M.H.A. (2009). Membuat Reagen Kimia di Laboratorium. Jakarta: Bumi Aksara. Hal. 141.

Poedjiadi, A. (1994). Dasar-Dasar Biokimia. Jakarta: UI-Press. Hal. 81-85, 118. Pomeranz, Y., dan Meloan, C.E. (2000). Food Analysis: Theory and Practice.

USA: Aspen Publisher, Inc. Hal. 749.

Rahmawati, V.M. (2009). Penetapan Kadar Protein dan Non Protein Nitrogen (Npn) pada Ulat Kidu (Rhynchophorus Ferrugineus) dan Hasil Olahannya dengan Metode Kjeldahl. Skripsi. Medan: Fakultas Farmasi. Universitas Sumatera Utara. Hal. 38.

Rhee, K.C. (2005). Determination of Total Nitrogen. Dalam Buku Handbook of Food Analytical Chemistry. Editor: Ronald E. Wrolstad. New Jersey: John Wiley and Sons Inc. Hal. 105.

Rukmana, H.R. (2007). Aneka Olahan Kelapa. Yogyakarta: Kanisus.Hal 26.

Sediaoetama, A.D. (2008). Ilmu Gizi untuk Mahasiswa dan Profesi di Indonesia. Jilid I. Jakarta: Dian Rakyat. Hal. 53, 59, 75.

Salamah, E., Sri, P., dan Rika, K. (2012). Kandungan Mineral Remis (Corbicula javanica) Akibat Proses Pengolahan. Jurnal Akuatika. III (1): 77.

Sibagariang, E.E. (2010). Gizi dalam Kesehatan Reproduksi. Jakarta: CV. Trans Info Media. Hal. 31.

Simonian, M.H. (2005). Spectrophotometric Determination of Protein Concentration. Dalam Buku Handbook of Food Analytical Chemistry.

(78)

42

Sinambela, A. (2011). Teknologi Pengolahan dan Pemanfaatan Rotan Oleh Masyarakat Kabupaten Langkat. Skripsi. Medan: Fakultas Pertanian. Universitas Sumatera Utara. Hal. 5-9.

SNI. (1992). Cara Uji Makanan dan Minuman. Jakarta: Badan Standarisasi Nasional. Hal. 11.

Sudarmadji, S., Haryono, B., dan Suhardi. (1989). Analisa Bahan Makanan dan Pertanian. Yogyakarta: Liberty. Hal. 119, 141-147.

Sudjana. (2005). Metode Statistika. Bandung: Tarsito. Hal. 168.

Ustunol, Z. (2015). Applied Food Protein Chemistry. UK: John Wiley and Sons, Ltd. Hal. 44.

Wardlaw, G.M., Hampl, J.H., dan Disilvestro, R.D. (2004). Perspective in Nutrition. Edisi keenam. New York: McGraw Hill, Inc. Hal. 226, 234. Widodo, R. (2009). Pemberian Makanan, Suplemen, dan Obat Pada Anak.

Jakarta: Buku Kedokteran EGC. Hal. 21-25.

Womeni, H.M., Tiencheu, B., Linder, M., Nabayo, E.M.C., Tenyang. N., Mbiapo, F.T., Villeneuve, P., Fanni, J., dan Parmentier, M. (2012). Nutritional Value And Effect Of Cooking, Drying And Storage Process On Some Functional Properties Of Rhynchophorus Phoenicis. International Journal Of Life Science and Farma Research. II (3): 14.

Wulan. (2011). Dari Anyaman Hingga Ramuan.

Diakses pada tanggal 19 Juli 2015.

(79)

23

BAB III

METODE PENELITIAN

Jenis penelitian yang dilakukan adalah penelitian eksperimental dengan maksud mengetahui pengaruh/ hubungan antara variabel bebas dengan variabel

terikat. Dalam penelitian ini pakkat merupakan variabel bebas sedangkan kadar protein total dan NPN merupakan variabel terikat. Penelitian dilakukan di

Laboratorium Makanan Minuman dan Hasil Pertanian Balai Riset dan Standardisasi Industri Medan pada bulan September 2015. Identifikasi tumbuhan dilakukan di Herbarium Medanense, Laboratorium Herbarium Fakultas

Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Sumatera Utara.

3.1 Alat-alat

Alat-alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah neraca analitik (Mettler), labu Kjeldahl (FOSS), desikator, alat destruksi (scrubber dan pemanas),

alat destilasi (UDK 130 A), oven, cawan, kertas saring Whatman No. 42, buret 50 ml (pyrex), hot plate (NOUVA), magnetic stirrer (Pyrex), dan alat-alat gelas

(Pyrex) yang diperlukan dalam penelitian .

3.2 Bahan-bahan

Bahan-bahan yang digunakan dalam penelitian ini keluaran Emsure® antara lain H2SO4 pekat 98% v/v, SeO2, CuSO4, K2SO4, NaOH 40% b/v, H3BO3

(80)

24

3.3 Prosedur Penelitian

3.3.1 Pengambilan Sampel

Pengambilan sampel dilakukan secara purposif, artinya sampel dipilih hanya atas dasar pertimbangan peneliti yang menganggap unsur-unsur yang dikehendaki telah ada dalam anggota sampel yang diambil (Sudjana, 2005).

Sampel yang diambil adalah rotan muda dari hutan desa Lumbanpasir Kecamatan Tambangan Kabupaten Mandailing Natal. Panjang rotan muda yang

diambil sekitar 70 cm dan yang digunakan sebanyak 6 batang. Gambar rotan muda yang digunakan dapat dilihat pada Lampiran 1, halaman 43.

3.3.2 Preparasi Sampel 3.3.2.1 Pakkat Segar

Rotan muda yang telah dibersihkan diambil bagian dalam yang berwarna

putih kemudian diblender. Ditimbang 1 gram pakkat segar untuk digunakan dalam penentuan kadar protein total dan NPN.

3.3.2.2Pakkat Bakar

Rotan muda yang kulit luarnya berwarna hijau dibakar menggunakan kayu bakar selama ± 15 menit sampai kulit luarnya berwarna kehitaman, dinginkan,

diambil bagian dalam rotan muda yang warna putih dan diblender, ditimbang 1 gram pakkat bakar untuk digunakan dalam penentuan kadar protein total dan NPN.

3.3.2.3Pakkat Rebus

Rotan muda yang telah dibersihkan diambil bagian dalam yang berwarna

(81)

25

± 15 menit sampai berwarna putih kecoklatan dengan sekali perebusan, dinginkan dan diblender, ditimbang 1 gram pakkat rebus untuk digunakan dalam penentuan

kadar protein total dan NPN. 3.3.3 Pembuatan Pereaksi 3.3.3.1Larutan NaOH 40%

Larutan NaOH 40% b/v dibuat dengan melarutkan 40 gram pellet NaOH dalam 100 mL aquades bebas CO2 (Ditjen POM, 1979).

3.3.3.2 Larutan H3BO3 4%

Larutan H3BO3 4% b/v dibuat dengan melarutkan 40 gram asam borat

dengan air suling dalam labu ukur 1000 ml (Ditjen POM, 1979).

3.3.3.3 Larutan HCl 0,01 N

Larutan HCl 0,1 N yaitu encerkan 8,3 ml HCl P dengan air hingga 1000

ml. Larutan HCl 0,01 N yaitu pipet 100 ml larutan HCl 0,01 N, masukkan kedalam labu ukur 1000 ml lalu encerkan dengan air hingga garis tanda (Ditjen POM, 1979).

3.3.3.4 Larutan ATA 10%

Larutan ATA 10% b/v dibuat dengan cara melarutkan 100 gram ATA

dalam aquades secukupnya hingga 1000 ml (Ditjen POM, 1979). 3.3.3.5Katalisator Selenium

Katalisator selenium 2,5 gram serbuk SeO2, 20 gram CuSO4.5H2O dan 100

gram K2SO4 (SNI, 1992).

3.3.3.6Indikator Mengsel

(82)

26

3.3.4 Standarisasi Larutan HCl 0,01 N

Ditimbang 0,01 gram natrium tetraborat (Na2B4O7.H2O) BM=381,37, lalu

dimasukkan ke dalam erlenmeyer 100 ml dan ditambah aquades 10 ml. Setelah larut ditambah 2 tetes indikator metil merah dan dititrasi dengan larutan HCl 0,01 N yang akan distandarisasi sampai warna kuning pucat. Semprot dinding gelas

dengan akuades. Teruskan titrasi dengan tetesan lambat, hentikan titrasi bila timbul warna merah jambu muda (Mulyono, 2009).

Dihitung normalitas larutan dengan menggunakan rumus :

Normalitas larutan HCl = berat Natrium tetraborat (mg) BE Natrium tetraborat x volume HCl (ml)

3.3.5 Skrining Fitokimia

Skrining Fitokimia dilakukan sesuai dengan prosedur yang tercantum pada Farnsworth (1966), yaitu identifikasi tannin dan alkaloid.

3.3.5.1 Identifikasi tannin

Ditimbang 0,5 gram pakkat segar yang telah dikeringkan dan dihaluskan,

dimaserasi dengan akuades 10 ml selama 15 menit. Kemudian disaring, filtrat diencerkan dengan akuades sampai hampir tidak berwarna. Diambil larutan uji sebanyak 1 ml direaksikan dengan larutan besi (III) klorida 10%, jika terjadi

warna biru tua atau hitam kehijauan menunjukkan adanya tannin. 3.3.5.2 Identifikasi alkaloid

Ditimbang 0,5 gram pakkat segar yang telah dikeringkan dan dihaluskan, ditambahkan 1 ml asam klorida 2 N dan 9 ml air, kemudian dipanaskan di atas penangas air selama 2 menit, kemudian didinginkan dan disaring. Larutan yang

(83)

27

ketiga ditambahkan 3 tetes pereaksi Dragendorff. Terbentuknya endapan atau adanya gumpalan putih atau putih kekuningan pada tabung pertama, endapan

cokelat kemerahan sampai cokelat keh